SU377326A1

SU377326A1 - Nutritional medium for obtaining epigidrocortisone

Info

Publication number: SU377326A1
Application number: SU1328071A
Authority: SU
Inventors: Г. К. Скр бин вители М. Б. Куплетска В. В. Туровцева
Priority date: 1969-05-08
Filing date: 1969-05-08
Publication date: 1973-04-17

Description

Известна питательна среда дл получени эпигидрокортизона, содержаща 1 % кукурузного экстракта и 2,5% сухого вещества и глюкозы .A known nutrient medium for producing epihydrocortisone, containing 1% corn extract and 2.5% dry matter and glucose.

Недостатком известной ореды вл етс наличие кукурузного экстракта, имеющего сложный и непосто нный состав, что приводит к образованию дополнительных побочных продуктов и затрудн ет выделение конечного продукта .A drawback of the known product is the presence of corn extract having a complex and non-constant composition, which leads to the formation of additional by-products and makes it difficult to isolate the final product.

Качество целевого продукта повышаетс за счет того, что питательна среда содержит, глюкозу 28,5-30,0, мочевину 1,0-1,1, фосфат кали однозамещенный 0,35-0,50, фосфат кали -двузамещенный 0,30-0,40, сульфат магни 0,13-0,15, сульфат железа 0,015-0,02.The quality of the target product is improved due to the fact that the nutrient medium contains glucose 28.5-30.0, urea 1.0-1.1, potassium phosphate, one-substituted 0.35-0.50, potassium phosphate-two-substituted 0.30- 0.40, magnesium sulfate 0.13-0.15, iron sulfate 0.015-0.02.

Пример. Дл подготовки посевного материала гриб Tieghemella hyolospora выращивают в пробирках на скощенном сусловом агаре в течение двух недель. Затем культуру смывают водой и используют дл засева посевной среды из следующего расчета: смыв с одной пробирки на 500 мл посевной среды.Example. To prepare the seed, the Tieghemella hyolospora mushroom is grown in test tubes on speed wort agar for two weeks. Then the culture is washed off with water and used for inoculation of the inoculum medium from the following calculation: washout from one tube per 500 ml of the inoculum.

Посевна среда имеет следующий состав, г/л:Sown medium has the following composition, g / l:

Мочевина1,0 (стерилизаци отдельно ) Глюкоза28,5-30,0Urea1.0 (sterilization separately) Glucose28.5-30.0

0,40 0,35 0,15 0,020.40 0.35 0.15 0.02

Кукурузный экстракт 0,5 (на сухое вещество ), водопроводна вода, рН довод т после стерилизации 10%-ным раствором NaOH до 7,5-7,6.Corn extract 0.5 (on dry substance), tap water, the pH is adjusted after sterilization with 10% NaOH solution to 7.5-7.6.

Посевной материал выращивают на качалке в колбах емкостью 750 мл со 100 мл среды в течение 30 час. Полученным посевным материалом засевают синтетическую среду в количестве 3% по объему.The seed is grown on a rocking chair in 750 ml flasks with 100 ml of medium for 30 hours. The inoculum is seeded with synthetic medium in an amount of 3% by volume.

Синтетическа среда, на которой выращнвают культуру дл проведени трансформации стероидов, имеет тот же состав, что посевна среда, но без кукурузного экстракта. Выращивание ведут также на качалке в колбах емкостью 750 мл со 100 мл синтетической среды.The synthetic medium on which the culture is grown to carry out the transformation of steroids has the same composition as the seed medium, but without the corn extract. Growing up also lead to a rocking chair in 750 ml flasks with 100 ml of synthetic medium.

Снуст 30-36 час культуру развод т водой в два раза, после чего разливают по 50 мл в колбы емкостью 750 мл. На 50 мл жидкости внос т по 20 мг 21-ацетата вещества «S Рейхщтейна в 1,5 мл этанола. Колбы помещают на качалку. Через 18 час жидкость экстрагируют п ть раз равными объемами хлороформа и провод т хроматографическое разделение с последующим количественным он3 ределением стероидов на спектрофотометре. Наход т эпигидрокортизон с выходом 74% и гидрокортизон с выходом 8% (выход в расчете на количество внесенного ацетата вещества «S Рейхштейна). Выращивание гриба и трансформацию стероидов ведут при 28-30°С, используют качалку с 190-200 об/мин. Предмет изобретени Ю 1. Питательна среда дл получени эпигидрокортизона , содержаща источники азота и углерода, отличающа с тем, что, с целью 4 повышени качества целевого продукта, она содержит глюкозу, мочевину, фосфат кали , сульфаты магни и железа, 2. Питательна среда по п. 1, отличающа с тем, что компоненты среды содержатс в следующих количествах, г/л: Мочевина 1,0-1,1 Глюкоза 28,5--30,0 Фосфат кали однозамещенный 0,35-0,50 Фосфат кали двузамещенный 0,30-0,40 Сульфат магни 0,13-0,15 Сульфат лселеза 0,015-0,02After 30–36 h, the culture was diluted twice with water, after which it was poured into 50 ml flasks with a capacity of 750 ml. To 50 ml of liquid, 20 mg of 21-acetate of the substance S Reichstein are added to 1.5 ml of ethanol. Flasks are placed on the rocking chair. After 18 hours, the liquid is extracted five times with equal volumes of chloroform and chromatographic separation is carried out followed by a quantitative determination of steroids on a spectrophotometer. Epigidrocortisone is found with a yield of 74% and hydrocortisone with a yield of 8% (yield based on the amount of acetate added to the substance “S Reichstein”). The cultivation of the fungus and the transformation of steroids are carried out at 28-30 ° C, using a rocking chair from 190-200 rpm. The subject matter of the invention is Yu. 1. A nutrient medium for producing epihydrocortisone, containing sources of nitrogen and carbon, characterized in that, in order to improve the quality of the target product 4, it contains glucose, urea, potassium phosphate, magnesium and iron sulfates, 2. Nutrient medium according to Claim 1, characterized in that the medium components are contained in the following amounts, g / l: Urea 1.0-1.1 Glucose 28.5--30.0 Potassium phosphate monosubstituted 0.35-0.50 Potassium phosphate disubstituted 0.30-0.40 Magnesium sulfate 0.13-0.15 Sulfate sulfate 0.015-0.02