SU368308A1 - Способ определения биологической активности химических препаратов - Google Patents

Description

1

Предлагаемое изобретение относитс  к способам испытани  химических препаратов на их биологическую активность. Кроме того, способ может быть применен дл  определени  токсичности, антимитотической и антипролиферационной активности химических препаратов дл  растительных клеток.

Известен способ определени  биологического действи   дохимикатов на растение. Недостатком этого способа  вл етс  то, что об активности химического препарата суд т не непосредственно по изменению состо ни  и скорости роста растени , а по изменению количества микроорганизмов корневой микрофлоры .

С целью быстрого и точного определени  абсолютной и относительной биологической активности химических препаратов предлагаетс  использовать суспензионные культуры клеток табака или сои. Дл  оценки токсичности , антимитотической и антипролиферационной активности препаратов предлагаетс  вводить в питательную среду ауксин (а- нафтилуксусную или 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоты), необходимый дл  нормального размножени  клеток.

По предлагаемому способу активность препарата определ етс  непосредственно по его действию ;на растительные клетки. Дл  определени  требуетс  5-7 дней, одновременно

может быть испытано от трех до восьми препаратов в п ти, шести концентраци х каждый. Это позвол ет дать сравнительную оценку активности различных препаратов путем нахождени  концентраций, необходимых дл  получени  одинакового эффекта. Расход препарата на одно испытание не превышает 0,2- 0,5 мг. Средн   квадратична  ошибка одного определени  из п ти повторностей не превышает5% .

Дл  осуш,ествлени  предлагаемого способа в пробирки размером 16X150 мм внос т по 0,5 .ил водных растворов испытуемых препаратов в нескольких концентраци х и по 3,5 мл

суспензии клеток табака или сои, разбавленной свежей средой Мурашигеи Скуга в 10 раз. Пробирки закрывают ватными пробками и помешают в наклонный врашаюшийс  со скоростью 60 об/мин барабан и затем культивируют 5-7 дней при 26° в темноте. По окончании срока культивации содержимое каждой пробирки перенос т на стекл нный фильтр, среду отсасывают, а ткань взвешивают. При использовании ткани табака помимо определени  веса необходим подсчет количества клеток , при работе с тканью сои этого не требуетс . Если требуетс  оценить токсичность, антимитотическую или антипролиферативную активность, то одновременно с испытываемыми

веш;ествами в пробирки добавл етс  а-«афтилуксусна  кислота 2 .иг/л .или 2,4 -дихлорфеноксиуксусна  кислота 0,05 лгг/л. Дл  определени  аптимитотической активности ткань в процессе выращивани  используетс  дл  подсчета митотического индекса стандартными цитологическими методами.

На основа,нии полученных результатов строитс  график, иа оси абсцисс которого откладываетс  логарифм концентрации препарата, а на оси ординат вес ткани (со ) или количество клеток (табак). С помощью интерпол ции наход т концентрацию, обеспечивающую половину максимального эффекта, котора  и служит мерой биологической активности. Дл  работы необходимо сохранение стерильности суспензии. Поэтому все растворы автоклавируютс  или стерилизуютс  фильтрованием, операции по закладке опыта провод тс  в стерильном боксе.

Предмет изобретени 

Claims (2)

1. Способ определени  биологической активности химических препаратов с использованием суспензионной культуры клеток растительного происхождени  в качестве биологическг го теста, отличающийс  тем, что, с целью повыщени  скорости и точности определени , в качестве суспензионной культуры клеток растительного происхождени  берут культуру клеток ткани таба-ка или сои.

2. Способ по п. 1, отличающийс  тем, что, с целью оценки токсичности, антимитотической и антипролиферационной активности химических препаратов, в суспензионную культуру клеток табака или сои в самом начале их культивировани  добавл ют вещества типа ауксинов, например а-нафтилуксусную и/или 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоты.