SU1738169A1

SU1738169A1 - Method of plant reproduction in vitro

Info

Publication number: SU1738169A1
Application number: SU904783519A
Authority: SU
Inventors: Валерий Александрович Высоцкий; Ирина Антоновна Шершень
Original assignee: Научно-исследовательский зональный институт садоводства Нечерноземной полосы
Priority date: 1990-01-18
Filing date: 1990-01-18
Publication date: 1992-06-07

Abstract

Использование: сельское хоз йство биотехнологи дл ускоренного размножени посадочного материала. Сущность изобретени : размножение растений в культуре ткани осуществл ют путем культивировани эксплантов на агармаованной питательной среде до образовани конгломератов почек и побегов, после чего от них отдел ют листь , помещают их в культивационный сосуд с жидкой питательной средой и культивируют до получени адвентивных почек при посто нном перемешивании среды. 2 табл.Use: agricultural biotechnology for accelerated propagation of planting material. SUMMARY OF THE INVENTION: The propagation of plants in tissue culture is carried out by cultivating explants on an agarmed nutrient medium to form a conglomerate of buds and shoots, after which the leaves are separated, placed in a culture vessel with a liquid nutrient medium, and cultured to obtain adventive buds at constant mixing medium. 2 tab.

Description

Изобретение относитс к области сельского хоз йства, а именно к области культуры изолированных тканей и органов, и может быть использовано дл ускоренного размножени посадочного материала.The invention relates to the field of agriculture, namely to the field of culture of isolated tissues and organs, and can be used to accelerate the reproduction of planting material.

Известны способы размножени растений в жидкой питательной среде в состо нии вращени на аппаратах роллерного типа. При этом, в качестве вторичных эксплантов используют развившиес из пазушных меристем побеги или почки.Methods are known for propagating plants in a liquid nutrient medium in a state of rotation on roller-type apparatuses. At the same time, shoots or buds developed from axillary meristem are used as secondary explants.

Однако данные способы не позвол ют увеличить коэффициент размножени растений до требуемых величин.However, these methods do not allow the plant multiplication factor to be increased to the desired values.

Наиболее близким к предлагаемому вл етс способ размножени плодовых и годных культур, согласно которому провод т поверхностную стерилизацию исходного материала, изол цию эксплантов, культивирование их на периодически обновл емых искусственных питательных средах до образовани конгломератов почек и побегов , разделение последних на субъединицы, последующее субкультивирование и укоренение и адаптаци к нестерильным услови м . Однако, в .качестве вторичных зксплантов в этом способе используют только развившиес побеги и почки. Многочисленные крупные листь при пересадках отсекают и выбрасывают, что приводит к непроизводительным потер м посадочного материала.The closest to the proposed method is the propagation of fruit and suitable crops, according to which surface sterilization of the source material is carried out, isolation of explants, their cultivation on periodically updated artificial nutrient media before the formation of conglomerates of buds and shoots, separation of the latter into subunits, subsequent subculturing and rooting and adaptation to non-sterile conditions. However, as secondary explants in this method, only developed shoots and buds are used. Numerous large leaves are cut and discarded during transplants, which leads to unproductive losses of planting material.

Целью изобретени вл етс увеличение коэффициента размножени растений.The aim of the invention is to increase the multiplication factor of plants.

Предлагаемый способ позвол ет увеличить коэффициент размножени в 6-7 раз.The proposed method allows to increase the multiplication factor by 6-7 times.

V| СО 00V | CO 00

дd

Os ЮOs Yu

Предлагаемый способ отличаетс от известного тем, что после развити конгломератов почек и побегов, производ т отсечение развившихс листьев, которые помещают в культивационные сосуды с непрерывно перемещающейс жидкой питательной средой и культивируют до образовани адвентивных почек или побегов. Последние могут быть использованы дл дальнейшего культивировани или непосредственного укоренени .The proposed method differs from the well-known fact that after the development of conglomerates of buds and shoots, the developed leaves are cut off, which are placed in cultivation vessels with a continuously moving liquid nutrient medium and cultured until adventive buds or shoots are formed. The latter can be used for further cultivation or direct rooting.

Изобретение осуществл етс следующим образом.The invention is as follows.

Пример 1. Развившиес в процессе клонального микроразмножени листь нарцисса отсекают и помещают в культу- ральные сосуды с жидкой питательной средой . В качестве питательной среды используют среду, предназначенную дл размножени нарцисса следующего состава , мг/л: NH4N03 1650. КЫОз 1900, CaCfc 2Н20 440; MgSCU 7НаО 370, Kl-fePCb 170, НзВОз 6.2, MnSCM 4H20 22,3, ZnSCM 7H20 8,6. Kl 0,83. NaMoCM 2H200,25,CuS04 5HaO 0,025, CoCIa 6H20 0,025, тиамин 0,5. пири- доксин 0,5, никотинова кислота 0,5, аскорбинова кислота 1,0, сахароза 30000, б-бензиламинопурин 10,0, а-нафтилуксус- на кислота 1,0; FeSCM 55,6, ЕДТА Na2 74,6. Поскольку питательна среда использовалась в жидком виде, концентрацию хелата железа дл предотвращени развити хлороза увеличивали в два раза. Сосуды с экс- плантами, дл обеспечени непрерывного омывани листьев питательной средой, устанавливали на аппарат роллерного типа, где культивировали 1,5-2 мес ца. Результаты по индукции адвентивных образований на листь х нарцисса приведены в табл. 1.Example 1. Narcissus leaves, developed in the process of clonal micropropagation, are cut off and placed in culture vessels with a liquid nutrient medium. As a nutrient medium, use is made of a medium intended for the reproduction of narcissus of the following composition, mg / l: NH4N03 1650. KYOz 1900, CaCfc 2H20 440; MgSCU 7НаО 370, Kl-fePCb 170, НЗВОЗ 6.2, MnSCM 4H20 22.3, ZnSCM 7H20 8.6. Kl 0.83. NaMoCM 2H200.25, CuS04 5HaO 0.025, CoCIa 6H20 0.025, thiamine 0.5. pyridoxin 0.5, nicotinic acid 0.5, ascorbic acid 1.0, sucrose 30,000, b-benzylaminopurine 10.0, a-naphthyl acetic acid 1.0; FeSCM 55.6, EDTA Na2 74.6. Since the nutrient medium was used in liquid form, the iron chelate concentration to prevent the development of chlorosis was doubled. The vessels with extracts, to ensure continuous washing of leaves with nutrient medium, were placed on a roller-type apparatus, where they were cultivated for 1.5-2 months. The results on the induction of adventitious formations on narcissus leaves are given in Table. one.

Сравнение между агаризованной питательной средой, жидкой средой и услови ми культивировани (стационарные и обеспечивающие непрерывное смывание листьев) показывает статистически достоверную разницу в частоте индукции адвентивных образований, причем наибольший процентA comparison between the agar nutrient medium, the liquid medium and the cultivation conditions (stationary and providing continuous washing of the leaves) shows a statistically significant difference in the frequency of induction of adventitious formations, with the highest percentage

регенерируетс при использовании жидкой питательной среды в состо нии вращени . Пример 2. Развившиес в процессе размножени In vitro листь земл ники (фаза пролиферации) отрезают и помещают на питательные среды разных видов (жидка и агаризованна ). По вление адвентивных образований фиксировали спуст мес ц после культивировани , которое осуществл ли как в стационарных услови х, так и на аппарате роллерного типа. В качестве питательной среды использовали среду, предназначенную дл размножени земл ники следующего состава, мг/л: NhNNOs 1650,regenerated by using a liquid nutrient medium in a state of rotation. Example 2. Earth leaves developed during the in vitro reproduction process (proliferation phase) are cut off and placed on nutrient media of various types (liquid and agarized). The appearance of adventitious formations was recorded after a month after cultivation, which was carried out both in stationary conditions and on a roller-type apparatus. As a nutrient medium, the medium was used for propagation of earthlings of the following composition, mg / l: NhNNOs 1650,

КМОз 1900, CaCfc 2HaO 440, MgSC-4 7H20 370, КН2Р04 170. НзВОз 6,2, MnS04 4H20 22,3. ZnSC-4 7H20 8,6, Kl 0,83. NaMoC-4 2H20 0,25, FeSC-4 27,8. ЕДТА Na2 37,3. тиамин 0.5, пиридоксин 0,5, никотинова кислота 0,5,KMOz 1900, CaCfc 2HaO 440, MgSC-4 7H20 370, KH2P04 170. HBOZ 6.2, MnS04 4H20 22.3. ZnSC-4 7H20 8.6, Kl 0.83. NaMoC-4 2H20 0.25, FeSC-4 27.8. EDTA Na2 37.3. thiamine 0.5, pyridoxine 0.5, nicotinic acid 0.5,

аскорбинова кислота 1,0, сахароза 30000, б-бензиламинопурин 1,0.ascorbic acid 1.0, sucrose 30,000, b-benzylaminopurin 1.0.

Результаты по индукций адвентивных почек на листь х земл ники приведены в табл. 2. Как видно из полученных результатов.The results of the induction of adventitious buds on the leaves of the earthen are given in Table. 2. As can be seen from the results.

оптимальным дл образовани адвентивных почек вл етс вариант с использованием жидкой питательной среды в состо нии вращени . Коэффициент размножени в этом варианте, по сравнению с прототипом,Optimal for the formation of adventitious buds is a variant with the use of a liquid nutrient medium in a state of rotation. The multiplication factor in this variant, in comparison with the prototype,

увеличивалс у нарцисса в 7,2 раза, у земл ники в 6,8 раз.increased from the narcissus 7.2 times, from the earthquake 6.8 times.

Claims

Claims of Invention The method of propagating plants in vitro, including isolating explants, cultivating them on an agar nutrient medium prior to the formation of conglomerates of buds and shoots, dividing them into individual subunits, and then cultivating them on a nutrient medium to

formation of regenerated plants, characterized in that, in order to increase the multiplication factor, after the formation of a conglomerate of buds and shoots, leaves are separated from them and placed in a cultivation vessel with a continuously mixed liquid nutrient medium and cultured until adventive buds are formed.

Table

Table 2