SU1682931A1 - Способ определени наличи спермы в судебно-медицинском исследовании п тна - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к области медицины , а именно к способам обнаружени  спермы в составе п тен при судебно-медицинском исследовании и других област х медицины. Цель изобретени  - повышение чувствительности и сокращение времени анализа, упрощение способа. Материал с п тном спермы измельчают, экстрагируют при 45-50°С в течение 30-40 мин, затем к экстракту добавл ют формальдегид до конечной концентрации 1-1,5% и провод т встречный иммуноэлектрофорез с моноспецифической антисывороткой к простатическому бета-глобулину и при по влении линии преципитации вы вл ют в п тне сперму. В сравнении с прототипом сокращаетс  врем  анализа в 15 раз, чувствительность анализа - в 10 раз. При этом происходит упрощение способа за счет исключени  этапа центрифугировани .

Description

со

С

Изобретение относитс  к области медицины , а именно к биохимии и может быть использовано в частности дл  обнаружени  спермы в составе п тен при судебно-медицинском исследовании, в акушерско-гине- кологических исследовани х, в андрологии.

Целью изобретени   вл етс  сокращение времени, повышение чувствительности анализа и упрощение способа.

Способ осуществл ют следующим образом .

Экстракцию п тен провод т 30- 40 мин при 40-45°С, далее ал,иквоту экстракта смешивают с равным объемом 2-3%-ного раствора формальдегида на ве- ронал-мединаловом буфере и исследуют во встречном иммуноэлектрофорезе с моноспецифической антисывороткой к простатическому бета-глобулину (ПБГ) и при

положительной реакции суд т о наличии спермы.

Пример. Кусочек марли с п тном белесого цвета размером не более 0,5 см2 измельчают нохницами и помещают в пробирку , содержащую 0,9% раствора хлористого натри . Экстракцию провод т на вод ной бане при 45 С в течение 40 мин. Затем отбирают из этой пробирки 10 мкг экстракта и в титровальной доске смешивают с Юмкг 2%-ного раствора формальдегида на веронал-мединаловом буфере. Далее на стекл нной пластине размером 5,0 х 20.0 см, залитой 1 %-ным агаром на веронал-мединаловом буфере пробивают два р да лунок диаметром 2,0 мм на рассто нии одного р да от другого в 4,0 мм. Анодный р д заполн ют моноспецифической антисывороткой к простатическому бета-глобулину, а катод

О 00

ю ю со

ный р д - последовательными разведени ми исследуемых образцов. Каждый образец берут в четырех разведени х (1/2; 1/16; 1/64; 1 /256), в каждую лунку внос т по 5 мкл. Как минимум в двух разведени х став т в каждом опыте стандартный препарат ПБГ.

Оценку результатов провод т через 30- 40 мин после завершени  электрофореза. Исследуемый образец дает линию преципитации с антисывороткой в разведении 1/64 и 1/128. Делаетс  заключение о наличии спермы в составе п тна.

Предлагаемый способ дает возможность установить наличие спермы в самых разных смес х и п тнах. При этом врем  исследовани  сокращаетс  от 30-40 до 2i- 3 ч, так как иммунодиффузионное определе- ние простатического бета-глобулина замен етс  встречным иммуноэлектрофо- резом, а экстракци  проводитс  при новы- шенной температуре. Эти изменени  стали возможны после изучени  физико-химических свойств ПБГ. Нар ду с сокращением сроков исследовани  способ уменьшает набор необходимого оборудовани , так как не

проводитс  центрифугирование. Используетс  встречный .иммуноэлектрофорез, что повышает чувствительность способа в 10 раз (по известному способу удаетс  обнаружить сперму по концентрации ПБГ равной 5 мкг/мл. а по предлагаемому способу - 0,5 мкг/мл).

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ определени  наличи  спермы в судебно-медицинском исследовании п тна путем измельчени  материала с п тном, экстракции , иммуноанализа и при наличии полос преципитации с разведени ми сыворотки к простатическому бета-глобулину определ ют наличие спермы в п тне, о т- личающийс  тем. что, с целью повышени  чувствительности и сокращени  сроков анализа, упрощени  способа, экстракцию п тен провод т при 45-50°С в течение 30- 40 мин, затем к экстракту добавл ют формальдегид до конечной концентрации 1-1,5%. а иммуноанализ осуществл ют с помощью встречного иммуноэлектрофореза.