SU1663023A1 - Питательна среда дл культивировани свет щихс бактерий РнотовастеRIUм LеIоGNатнI - продуцента люцифреразы - Google Patents
Питательна среда дл культивировани свет щихс бактерий РнотовастеRIUм LеIоGNатнI - продуцента люцифреразы Download PDFInfo
- Publication number
- SU1663023A1 SU1663023A1 SU894664888A SU4664888A SU1663023A1 SU 1663023 A1 SU1663023 A1 SU 1663023A1 SU 894664888 A SU894664888 A SU 894664888A SU 4664888 A SU4664888 A SU 4664888A SU 1663023 A1 SU1663023 A1 SU 1663023A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- luciferase
- hydrolyzate
- bacteria
- nutrient medium
- producer
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к микробиологии и может быть использовано в микробиологической промышленности дл выращивани свет щихс бактерий продуцентов фермента люциферазы. Цель изобретени - удешевление среды, увеличение выхода биомассы бактерий и удельной активности люциферазы. Активность увеличиваетс в 3 раза. Питательную среду дл культивировани PHOTOBACTERIUM LEIOGPATHI - продуцента люциферазы готов т на основе 0,25 - 2,5 %-ного кислотно-ферментативного гидролизата из отходов переработки биомассы свет щихс бактерий PHOTOBACTERIUM LEIOGNATHI после выделени фермента люциферазы. Дл приготовлени гидролизата остатки клеток свет щихс бактерий после удалени из них люциферазы обрабатывают 0,5 н. раствором сол ной кислоты, а затем провод т ферментативный гидролиз панкреатином. 3 ил.
Description
Изобретение относитс к микробиологии и может быть использовано в микробиологической промышленности дл выращивани свет щихс бактерий - продуцентов фермента люциферазы.
Цель изобретени - удешевление среды , увеличение выхода биомассы и удельной активности люциферазы.
На фиг. 1 показано изменение оптической плотности культуры свет щихс бактерий Photobacterium leiognathi штамм 213 при различной концентрации гидролизата,
где К - контрольна питательна среда с 5 г/л пептона; 1-5 - питательна среда с заменой пептона гидролизатом в разной концентрации; 1 - 0,25%; 2 - 0,5%; 3 - 1 %; 4 -2,5%; 5 -5%; на фиг. 2 - изменение удельной интенсивности люминесценции свет щихс бактерий Photobacterium leiognathi штамм 213 при различной концентрации гидролизата, где К - контрольна питательна среда с 5 г/л пептона; 1-5 - питательные среды с заменой пептона гидролизатом в разной концентрации; 1 - 0,25%; 2 -0,5%;
о о со о ю со
3- 1%;4-2,5%,5-5%; на фиг. 3 - изменение оптической плотности и удельной интенсивности люминесценции культуры свет щихс бактерий Photobacterium leiognathi штамм 208 на контрольной среде (1, 2) и среде с содержанием гидролизата 1%(1,2).
Изобретение осуществл ют следующим образом.
Готов т питательную среду, содержащую , г: глицерин-2,8-3,2; Na2HP04 -12Н20 5,0-7,0; КН2Р04 0,9-1,1; (NN4)2 НР04 0,45- 0,55; MgS04 7Н20 0,09-0,11. В качестве источника азота и стимулирующих веществ используют 0,25-2,5%-ный гидролизат из отходов переработки биомассы свет щихс бактерий после выделени люциферазы, Гидролизат добавл ют в среду до 1 л.
Дл приготовлени гидролизата готов т 5%-ную (по сухому весу) суспензию из остатков клеток свет щихс бактерий после извлечени из них люциферазы в 0,5 н. растворе сол ной кислоты и выдерживают ее 2/3 ч на кип щей вод ной бане. После охлаждени суспензии довод т значение рН до 7,8-8,0 30%-ным раствором гидроокиси натри и добавл ют панкреатин в количестве 5% от сухого веса биомассы. Суспензию термостатируют в течение 2 сут. при 45°С в присутствии хлороформа (1 %) при периодическом перемешивании. Непрогидролизо- ванный остаток биомассы отдел ют центрифугированием, гидролизат нейтрализуют , отстаивают и используют в качестве компонента питательной среды.
Гидролизат, полученный таким образом , имеет следующий состав, г/л:
Азот общий4,2
Азот аминный1,1
Углеводы общие2,7
Нуклеиновые компоненты5,6
Аминокислоты
Лизин1,10
Гистидин0,41
Аргинин0,90
Аспаргинова кислота1,60
Треонин0,78
Серии0,57
Глютаминова кислота2,20
Пролин0,50
Глицин0,80
Алании.,1,03
Цистин0,12
Валин1,01
Метионин0,47
Изолейцин0,86
Лейцин1,20
Тирозин0,58
Фенилаланин0,71
ементы
0,69 0,04 0,08 0,05 0,30
Получают гидролизат с концентрацией отходов из биомассы свет щихс бактерий 5% по сухому весу.
0 Дл получени питательной среды с меньшими концентраци ми гидролизата берут исходный 5%-ный гидролизати развод т в определенном соотношении со средой , содержащей все остальные
5 компоненты. Получают питательные среды, содержащие гидролизат из отходов переработки свет щихс бактерий с концентрацией 0,25; 0,5; 1,0; 2,5: 5,0%.
П р и м е р 1. В стерильную колбу объе0 мом 500 мл заливают 142,5 мл стерильной питательной среды, содержащей, г/л: NaCI 30-0; №2НРСм 12Н20 6,0; КН2Р04 1,0; (NH4)2HP04 0,5; MgSCM -7H20 0,1; глицерин 3,0 и 7,5 мл, 5% гидролизата из свет щихс
5 бактерий. Таким образом получают питательную среду с содержанием гидролизата по сухому весу 0,25%. Затем ввод т 1 мл стерильного инокул та свет щихс бактерий Photobacterium leiognathi 213, в процес0 се инкубации наблюдают рост и люминесценцию бактерий. Как видно из результатов , представленных на фиг. 1 и 2 (кривые 1), концентраци биомассы, выращенной на среде с гидролизатом, измерен5 на по оптической плотности, а также интенсивность люминесценции через 3 ч от начала культивировани ниже контрольной (среда с пептоном) на 6 и 4% соответственно .
0Пример 2. В стерильную колбу объемом 500 мл заливают 135 мл стерильной питательной среды, содержащей, г/л: NaCI 28,0; Na2HP04- 12H20; KH2P04 0,9; (МН4)2НРСмО,45; MgSCM -7Н20 0,09; глице5 рин2,8и 15 мл 5% гидролизата из свет щихс бактерий. Таким образом получают питательную среду с содержанием гидролизата по сухому весугО,5%. Затем ввод т 1 мл стерильного инокул та свет щихс бакте0 рий Photobacterium leiognathi 213 и наблюдают рост и люминесценцию бактерий. Как видно из результатов, представленных на фиг. 1 и 2 (кривые 2), концентраци биомассы , выращенной на среде с гидролизатом,
5 измеренна по оптической плотности, а также интенсивность люминесценции через 4 ч от начала культивировани выше контрольных на 25 и 12% соответственно.
Пример 3. В стерильную колбу объемом 500 мл заливают 120 мл стерильной питательной среды, содержащий, г/л: NaCI 32,0; Na2HPCM -12Н20 7,0; КН2РС-4 1,1; ()2HP04 0,55; МдЗСм -7Н20 0,1; глицерин 3,2 и 30 мл 5% гидролизата из свет щихс бактерий. Таким образом получают питательную среду с содержанием гидролизата по сухому весу 1%. Затем ввод т 1 мл инокул та свет щихс бактерий Photobacterlum leiognathl 213 и наблюдают рост и люминесценцию. Как видно из результатов , представленных на фиг. 1 и 2 (кривые 3), концентраци биомассы, выращенной на среде с гидролизатом, измеренна по оптической плотности, а также интенсивность люминесценции через 4 ч от начала культивировани выше контрольных на 120 и 48% соответственно.
Пример 4. В стерильную колбу объемом 500 мл загружают 75 мл стерильной питательной среды, содержащей, г/л: NaCI 30,0; Na2HP04 -12Н20 6,0; КН2Р04 1,0; (NH4)2HP04 0,5; MgSCM 7Н20 0,1; глицерин 3,0 и 75 мл 5% гидролизата из свет щихс бактерий. Таким образом получают питательную среду с содержанием гидролизата свет щихс бактерий по сухому весу 2,5%. Затем ввод т 1 мл инокул та свет щихс бактерий Photobacterium lefognathi 213 и наблюдают рост и люминесценцию. Как видно из результатов, представленных на фиг. 1 и 2 (кривые 4), концентраци биомассы , выращенной на среде с гидролизо- том, измеренна по оптической плотности, а также интенсивность люминесценции через 5 ч от начала культивировани выше контрольных на 40 и 20% соответственно.
Пример 5. В стерильную колбу объемом 500 мл заливают 150 мл стерильного 5%-ного гидролизата, содержащего, г/л: Na2HP04-12H20 6,0; КН2Р04 1,0; (NKUfcHPO 0,5; MgS04 7Н20 0,1; NaCI 30,0 глицерин 3,0. Затем ввод т 1 мл инокул та свет щихс бактерий Photobacterium lelognathi штамм 213 и наблюдают рост и люминесценцию. Как видно из результатов, представленных на фиг. 1 и 2 (кривые 5), концентраци биомассы, выращенной на оптической плотности, а также интенсивность люминесценции в течение всего времени культивировани остаютс существенно ниже контрольных значений.
Примерб. В стерильную колбу объемом 500 мл заливают 120 мл стерильной питательной среды, содержащей, г/л: NaCI 30,0; №2НРСм -12Н20 6,0; КН2Р04 1,0;
(NH4)2HP04 0,5; MgSCM 7Н20 0,1: глицерин 3,0 и 30 мл гидролизата из свет щихс бактерий. Таким образом получают питательную среду с содержанием гидролизата
5 свет щихс бактерий по сухому весу 1 %.
Затем ввод т 1 мл инокул та свет щихс бактерий Photobacterium leiognathi штамм 208 и наблюдают рост и люминесценцию . Как видно из результатов, пред0 ставленных на фиг. 3, концентраци биомассы, выращенной на среде с гидрозатвором , измеренна по оптической плотности (кривые 1), а также интенсивность люминесценции (крива 2) через 4 ч от нача5 ла культивировани были выше контрольных на 95 и 70% соответственно.
Как видно из представленных данных, использование в качестве стимул тора роста бактерий гидролизата из отходов свет 0 щихс бактерий, получаемых после выделени люциферазы, в концентраци х от 0,5 до 2,5% по сухому весу позвол ет повышать выход фермента люциферазы за счет увеличени выхода биомассы и повы5 шени максимальной удельной интенсивности люминесценции в 3 раза по сравнению с известной.
Claims (1)
- Формула изобретени0Питательна среда дл культивировани свет щихс бактерий Photobacterium lelognathi - продуцента люциферазы, содержаща глицерин в качестве источника углерода, источника азота и стимулирую5 щих веществ, хлористый натрий, двузаме- щенный фосфорнокислый натрий, однозамещенный фосфорнокислый калий, двузамещенный фосфорнокислый аммоний и сернокислый магний, отличающа с0 тем, что, с целью удешевлени среды, увеличени выхода биомассы бактерий и удельной активности люциферазы, среда содержит в качестве источника азота и стимулирующих веществ 0,25-2,5%-ный кис5 лотно-ферментативный гидролизат из отходов переработки биомассы продуцента после выделени люциферазы при следующем соотношении компонентов, г/л: хлористый натрий 28,0-30,0; двузамещенный0 фосфорнокислый натрий 5,0-7,0; однозамещенный фосфорнокислый калий 0,9-1,1; двузамещенный фосфорнокислый аммоний 0,45-0,55; сернокислый магний 0,09-0,11; глицерин 2,8-3,2; 0,25-2,5%-ный кислотно5 ферментативный гидролизат из отходов переработки биомассы продуцента после выделени люциферазы до 1 л.J}отн.ед.J/Я D Г0тн.е&.7 f,VJ/JJ U отн. опт. eff.200
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU894664888A SU1663023A1 (ru) | 1989-03-21 | 1989-03-21 | Питательна среда дл культивировани свет щихс бактерий РнотовастеRIUм LеIоGNатнI - продуцента люцифреразы |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU894664888A SU1663023A1 (ru) | 1989-03-21 | 1989-03-21 | Питательна среда дл культивировани свет щихс бактерий РнотовастеRIUм LеIоGNатнI - продуцента люцифреразы |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1663023A1 true SU1663023A1 (ru) | 1991-07-15 |
Family
ID=21435303
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU894664888A SU1663023A1 (ru) | 1989-03-21 | 1989-03-21 | Питательна среда дл культивировани свет щихс бактерий РнотовастеRIUм LеIоGNатнI - продуцента люцифреразы |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1663023A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MD2341C2 (ru) * | 2001-07-24 | 2004-06-30 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Питательная среда для культивирования флюоресцирующих псевдомонад |
-
1989
- 1989-03-21 SU SU894664888A patent/SU1663023A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Авторское свидетельство СССР № 1070913, кл. С 12 N 9/04, 1983. Nealson K.H., Hastings J.W. Zow Okygen is optimal for Zuciferase synthesis in some bacteria. Arch. Microbiol. 1977, v. 112, p, 9- 16. Yitelson J.J., Rodicheva E.K., Fisch A.M. et al. Continious culture as the means of luminescent reaction Enzyme-Zuciferase obtaining. Contin. Cultiv. Microorganism Proc. 7-th Symposium, Prague 1978, publiched : Prague 1980, p. 807-814. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MD2341C2 (ru) * | 2001-07-24 | 2004-06-30 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Питательная среда для культивирования флюоресцирующих псевдомонад |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2077307C (en) | Process for producing l-threonine | |
| US5827717A (en) | Microorganisms their use and method of producing L-α-amino acids | |
| US5250423A (en) | Method for the production of L-lysine employing thermophilic corynebacterium thermoaminogenes | |
| FI70924B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av enzymen kolesteras | |
| KR850004267A (ko) | 폴리-d-(-)-3-하이드록시부티르산의 제조방법 | |
| US4492756A (en) | Microorganisms of the genus Hyphomicrobium and process for degrading compounds wich contain methyl groups in aqueous solutions | |
| US4490471A (en) | Microorganisms of the genus Pseudomonas and process for degrading compounds which contain methyl groups in aqueous solutions | |
| SU1663023A1 (ru) | Питательна среда дл культивировани свет щихс бактерий РнотовастеRIUм LеIоGNатнI - продуцента люцифреразы | |
| DE3929570A1 (de) | Mikrobiologisch hergestellte n-acyl-l-prolin-acylase, verfahren zu ihrer gewinnung und ihre verwendung | |
| JP2005523021A (ja) | 生産物 | |
| FI86557C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av alfaamylas medelst en mikroorganism av arten bacillus subtilis. | |
| EP0343330A2 (en) | Biotransformation of L-tyrosine and L-phenylalanine to 2,5-dihydroxyphenylacetic acid | |
| US5041375A (en) | Method of producing carnitine | |
| US4011135A (en) | Production of L(+)-tartaric acid | |
| EP0187525B1 (en) | Process for producing l-serine | |
| JP3006907B2 (ja) | 発酵法によるｌ−アラニンの製造法 | |
| US3322646A (en) | Method for preparing l-glutamic acid | |
| KR20000002408A (ko) | 글루탐산을 생산하는 미생물 및 이를 이용한 글루탐산의 제조방법 | |
| US3310475A (en) | Method for producing l-aspartic acid | |
| US3196084A (en) | Process for preparing cephalosporin c | |
| KR100205797B1 (ko) | 글루탐산을 생산하는 미생물 및 이를 이용한 글루탐산의 제조방법 | |
| KR880001680B1 (ko) | 발효에 의한 시소마이신의 제조방법 | |
| US3623951A (en) | Method for producing l-glutamic acid | |
| SU1565888A1 (ru) | Способ получени кератиназы | |
| US5478733A (en) | Process for producing L-alanine by fermentation with arthrobacter |