SU1587450A1 - Способ разделени гликозилированной и негликозилированной форм пролактина биологического материала - Google Patents
Способ разделени гликозилированной и негликозилированной форм пролактина биологического материала Download PDFInfo
- Publication number
- SU1587450A1 SU1587450A1 SU884420941A SU4420941A SU1587450A1 SU 1587450 A1 SU1587450 A1 SU 1587450A1 SU 884420941 A SU884420941 A SU 884420941A SU 4420941 A SU4420941 A SU 4420941A SU 1587450 A1 SU1587450 A1 SU 1587450A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- glycosylated
- prolactin
- separating
- biological material
- forms
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к медицине и решает задачу разделени гликозилированной и негликозилированной форм пролактина при подготовке пробы биологического материала дл иммунохимического определени гликозилированного пролактина. Целью изобретени вл етс упрощение способа. Способ заключаетс в инкубировании биологической жидкости с раствором конканавалина А и отделении полученного комплекса гликозилированной формы с конканавалином А от негликозилированной формы путем добавлени раствора полиэтиленгликол и центрифугировани . 1 ил.
Description
Изобретение относитс к области медицины, а именно к способам разделени гликозилированной и неглико- зилированной форм пролактина при подготовке пробы биологического материала дл иммунохимического определени гликозилированного пролактина . . .
Целью изобретени вл етс упрощение способа за счет сокращени стадий . ,
На чертеже представлен график коррел хщонной зависимости результатов , полученных по предлагаемом (ось У) и известному (ось X) спосо- ам.
Согласно способу инкубировани биологической жидкости с раствором Конканавалина А и отделение полученного комплекса гликозилированной формы с конканавалином А от негликозилированной .формы пролактина провод т путем добавлени .раствора поли- этиленгликол и центрифугировани .
Пример 1. Разделение гликозилированной и негликозилированной форм пролактина в проб.е сыворотки крови человека. .
В аналитические -пробирки внос т по 0,1 МП сыворотки К.РОВИ, добавл ют по 0,15 мл раствора к-онканавалина А (2,,5 мг/мп) в 0,5 М трис-НС буфере (рН 7,0), содержащем 0,2 М NaCl и Са 1.Тп2(по .О ,001 Ю и инку- .бируют 90 мин при комнатной температуре . Во все пробирки прибавл ют по 0,25 мл 25%-ного полиэтиленгликол (мол. масса 4000-6000) в воде. Пробирки встр хивают, выдерживают 10 мин при комнатной, температуре, центрифугируют 10 мин при .2000 g и суперна- тант отбрасывают.
fsoA
СП
ча
« ел
3
П р и м е р 2, Разделение гликоз лированной и негликозилнрованной форм пролактина в экстрактах гипофизов человека.
Ацетонированньп порошок (2 г) гипофизов человека экстрагируют 100 м 1 н, NaOH -при в течение 20 мин После нейтраштзации экстракта аликв ту (0,1 мл) используют дл разделен форм пролактина, как описано в примере 1 .
П р и м е р 3. Сравнение полноты разделени глцкозилированной и не- гликозилированной форм пролактинаг предлагаемым способом и известным,
if обоих случа х концентрацию гли козилированного пролактина определ радиоиммуноанализом с помощью стандартного набора HPRJ.K-PR (CIS - International ) . Перед радиоиммуноанализом осадок, содержащий гликозилир ванн ьй пролактин раствор ют прибавлением в пробирку 0,1 мл 0,05 М трис-НС1-буфера (рН 7,0), содержа- щего 0,2 М NaCl и, 0,05 твин-20.
Радиоиммунологическое определени концентра1щей гликозилированного прлактина в нескольких (п - 5) гипо1Ъи зарных экстрактах, обработанных по предпагаемому и известному способам не вы вило достоверных различий (р .0,05), обусловленных способом обработки.
Результаты сравнени двух способов фракционировани пролактина в применении к сыворотке крови человека отражены на коррел ционном графике (в нг/мл). Выполненные расчеты показывают, что имеет место высока степень коррел ции (г 0,97) результатов радиоиммуноанализа фракци гликозилированного пролактина, выделенной предлагаемым и известным ссобами из одних и тех же проб сыворотки крови.
Анализ экспериментальных данных показывает, что предлагаем1лй способ
10
15
0
5
0
5
0
5
известньй одинаково эффективны в отношении разделени гликозилированной и негликозилированной форм пролакти-| на} предлагаемый способ более прост, так как не требует хроматографии каждой анализируемой пробы; более производителен, так как позвол ет одному квалифицированному лаборанту в стандартных лабораторных услови х в течение первого дл обработать большее число проб сыворотки. Кроме того, в отличие от известного предлагаемый способ согласуетс с процессом иммунохимического микроанализа (РИА, ИРМА, ИФА и др.), так как состоит только из общих с микроанализом стадий пипетировани реагентов и разделени фаз. Вследствие этого предварительна обработка проб по предлагаемому способу и микроанализ могут проводитьс в,одну аналитическую линию или выполн тьс в едином автоматизированном режиме.
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ разделени гликозилированной и негликозилированной форм пролактина биологического материала путем контактировани пробы биологического материала с конканавалином А и отделени полученного комплекса гликозилированной формы пролактина с конканавалином А от негликозилированной формы, отличающийс тем, что, с целью упрощени способа за счет сокращени стадий, контактирование провод т путем инкубации пробы в течение 90 мин с раствором конкана- валина А в трис-НС1 буфере, содержащем ионы натри , магни , кальци и марганца, затем пробу обрабатывают раствором полиэтиленгликол с мол. мае. 4000-6000, а отделение образовавшегос комплекса провод т центрифугированием .100100 300 500 700 9ОО
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU884420941A SU1587450A1 (ru) | 1988-05-04 | 1988-05-04 | Способ разделени гликозилированной и негликозилированной форм пролактина биологического материала |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU884420941A SU1587450A1 (ru) | 1988-05-04 | 1988-05-04 | Способ разделени гликозилированной и негликозилированной форм пролактина биологического материала |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1587450A1 true SU1587450A1 (ru) | 1990-08-23 |
Family
ID=21373140
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU884420941A SU1587450A1 (ru) | 1988-05-04 | 1988-05-04 | Способ разделени гликозилированной и негликозилированной форм пролактина биологического материала |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1587450A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2463345C2 (ru) * | 2006-07-13 | 2012-10-10 | Вайет | Получение гликопротеинов |
-
1988
- 1988-05-04 SU SU884420941A patent/SU1587450A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Агп. J. Obstet Gynecol., 1983. V. 147, № 5, p. 482-487. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2463345C2 (ru) * | 2006-07-13 | 2012-10-10 | Вайет | Получение гликопротеинов |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Edelman et al. | Immunological studies of human γ-globulin: Relation of the precipitin lines of whole γ-globulin to those of the fragments produced by papain | |
| Sheetz et al. | Relations of the spectrin complex of human erythrocyte membranes to the actomyosins of muscle cell | |
| Manni et al. | The eighth component of human complement (C8): isolation, characterization, and hemolytic efficiency | |
| EP0384130A3 (en) | Myocardial infarction immunoassay | |
| Hardie et al. | Isolation of specific antibody under conditions of low ionic strength | |
| JPS61500987A (ja) | Ｈｔｌｖ−３の蛋白質の分離、エイズおよび前エイズ条件を持つ患者の血清中ｈｔｌｖ−３に対する抗体の血清学的検出、およびｈｔｌｖ−３およびその蛋白質を使用した免疫分析によるｈｔｌｖ−３感染の検出 | |
| JPH0350222B2 (ru) | ||
| US3952091A (en) | Simultaneous multiple radioimmunoassay | |
| JPH08145998A (ja) | インスリン様成長因子の免疫学的測定方法ならびにインスリン様成長因子測定用キット | |
| Silvestrini et al. | Changes in concanavalin A-reactive proteins in inflammatory disorders. | |
| US5047509A (en) | Abnormally glycosylated variants of a2 macroglobulin | |
| Gold et al. | A rapid colorimetric assay for the estimation of microgram quantities of DNA | |
| SU1587450A1 (ru) | Способ разделени гликозилированной и негликозилированной форм пролактина биологического материала | |
| US5030578A (en) | Process for the purification of C1-inhibitor | |
| KO et al. | Direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay for sulfamethazine | |
| CA2032751A1 (en) | Agent for improving the recovery of annexins | |
| DE69128238T2 (de) | Nachweis von thrombopenies | |
| CN114593979A (zh) | 一种基于质谱检测体液样本里中低丰度蛋白的方法 | |
| Parsons et al. | Detection of a human serum DNA-binding protein associated with malignant disease | |
| EP1046038A1 (en) | Use of mass fingerprinting for identification of protein affinity ligands | |
| US4493898A (en) | Method for detecting and monitoring cancer | |
| US7229638B2 (en) | Biopolymer marker indicative of disease state having a molecular weight of 1525 Daltons | |
| US7498140B2 (en) | Direct detection of biomolecules in a gel | |
| US4937201A (en) | Latex reagent for detection of the toxin of clostridium difficile | |
| EP0904295B1 (en) | Process for separating and analyzing hydrophobic proteins using thin layer chromatography |