SU1585332A1 - Способ получени трет-бутилоксикарбонил-лейцин-энкефалина - Google Patents
Способ получени трет-бутилоксикарбонил-лейцин-энкефалина Download PDFInfo
- Publication number
- SU1585332A1 SU1585332A1 SU884449327A SU4449327A SU1585332A1 SU 1585332 A1 SU1585332 A1 SU 1585332A1 SU 884449327 A SU884449327 A SU 884449327A SU 4449327 A SU4449327 A SU 4449327A SU 1585332 A1 SU1585332 A1 SU 1585332A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- butyloxycarbonyl
- leucine
- patterns
- papain
- tert
- Prior art date
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к биоорганической химии, а именно к ферментативному синтезу пептидов, и может быть использовано дл получени пептидов заданной последовательности. Цель изобретени - ускорение и упрощение получени целевого продукта. Способ получени трет-бутилоксикарбонил-лейцин-энкефалина заключаетс в синтезе этого пептида из гликолилглицилового эфира трет-бутилоксикарбонилтирозилглицина (N-защищенный аминокомпонент) и глицилфенилаланиллейцина (аминокомпонент) путем пропускани водной смеси этих соединений через колонку с иммобилизованным на кремнеземе папаином с последующим выделением из раствора полученного пентапептида. Способ позвол ет ускорить процесс (в 140 раз) и упростить его. 1 табл.
Description
Изобретение относитс к биоорганической химии, а именно к ферментативному синтезу пептидов, и может быть использовано в практике синтеза пептидов заданной последовательности или конденсации пептидных фрагментов, в том числе дл получени биологически активных пептидов.
Цель изобретени - ускорение и упрощение процесса получени целевого продукта.
Способ заключаетс в использовании дл синтеза лейцин-энкефалина гликолилглицинового эфира трет-бу- тштоксикарбонилтирозилглицина (Вое Туг Gly OCHiCOGljfOH) в качестве
N-защищенного карбоксильного компонента и глицилфенилаланиллейцина .(HGlyPhe Leu ОН) в качестве аминного компонента. Оба компонента раствор ют в водном буферном растворе, а затем пропускают через колонку с им- мобилизованньм на кремнеземе папаине. При пропускании раствора двух пептидных компонентов через иммебилизован- шлй папаин между ними образуетс пептидна св зь и конечный продукт выдел етс обычными способами из пропущенного через колонку раствора. Использование гликолипглицкновых эфиров позвол ет проводить.реакцию в водных растворах, а также ускорить процесс.
jOi
&) ел
:
го
Ускорение и упрощение процесса достигаетс также за счет применени :иммо билизованного папаина, через крторый пропускаетс в проточном режиме смес исходных компонентов.
Применение предлагаемого способа позвол ет значительно ускорить процесс (5-10 мин вместо.24 ч). Упрощение процесса достигаетс заменой водно-органических растворов на водные , понижением температуры до ком- натноЙ5 а также возникновением возможности многократного использовани иммобилизованного фермента и простотой отделени этого катализатора от реакционной смеси.
. Пример 1. Используетс проточный реактор объемом 1,2 см, содержащий 400 мг иммобилизованного на органокремнеземе папаина. Исходные компоненты раствор ют в 1 М Na-кар- бонатном буфере (рН 9,5). Проточный реактор с иммобилизованным папаином промьшают буфером, после чего через колонку пропускают раствор, содержащий исходные компоненты синтеза (ВосТуг GlyOCH CO GlyOH, Phe Leu OH). Объем пропускаемого раствора 5 мл, содержание компонентов по 0,5 ммоль. Скорость прокачивани растворенньк субстратов выбираетс так, что карбоксильный компонент полностью гидролизуетс иммобилизованны ферментом за врем протекани раствора через проточный реактор, составл ет 1 мл/мин. Раствор, содержащий конечные продукты, собирают на выходе проточного реактора и выдел ют синтезированный пентапептид следующим образом. К собранному на выходе раствору добавл ют 1 0%-ньш водный раст вод KHSO. и экстрагируют пентапепт щ в этилацетат. Орган ическийслой отдел ют от водного и упаривают. Очистку конечного продукта осуществл ют на колонке.с силикагелем в системе толуол - диоксан - гексан - трифтор- этанол - уксусна кислота, 50:40;:15: t5:l(A)o Полученный продукт вьщержи- вают несколько часов в вакууме над КОН. Чистоту продукта провер ют с использованием тонкослойной хроматографии в системе (А),, сравнива с химически синтезированным Boc-Leu- -знкифалином. На хроматограммах побочные п тна отсутствуют, подвижность пентапептида в системе (А) составл ет Rf 0,13. Аминокислотный
o
5
0
5
0
5
0
5
0
5
анализ конечного продукта показал идентичность аминокислотного состава Leu-энкефалину. Выход Boc-Leu- -знкефалином составл ет 53%, врем синтеза 5-10 мин, температура .
Пример 2. Синтез провод т .в тех же услови х, что и в примере 1 , с тем лишь отличием, что содержание компонентов, ммоль карбоксильный 0,5, аминокомпонент 1,5. Скорость прокачивани раствора компонента 0,85 мл/мин. Выход конечного продукта 72%.
Использование избытка одного из компонентов ведет к увеличению выхода . Увеличение скорости прокачивани карбоксильного и аминокомпо- нентов через проточный реактор ведет к значительному количеству непрореагировавшего карбоксильного компонента. Уменьшение скорости прокачивани ведет к уменьшению выхо- ,да конечного продукта. Конкретные значени концентраций: компонентов и скорость пропускани через колонку не имеют существенного значени потому, что при любых реально возможных концентраци х исходных компонентов достигаетс положительный эффект, а скорость пропускани раствора через колонку зависит от гео метрических размеров колонки и массы иммобилизованного фермента.
В таблице приведена сравнительна характеристика условий синтеза и выхода соединений, полученных по предлагаемому и известному способам.
Таким образом, из данных таблицы видно, что способ обеспечивает ускорение и упрощение процесса. Несмотр на то, что выход конечного продукта приблизительно одинаков, предлагаемой способ выгодно отличаетс от известного: существенно сокращаетс врем синтеза (в 140 раз), реакци протекает при комнатной температуре в водной среде. Использование иммобилизованного фермента дает возможность работать с ним многократно и в непрерывном режиме.
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ получени трет-бутилокси- карбонил-лейцин-энкафалина, включающий растворение N-защищенного карбоксильного и аминного пептидных компонентов в растворителе, инкубацию сме5Jси в присутствии папаина дл обра- зовани пепфидной св зи и последующее вьщеление целевого продукта, отличающийс тем, что, с целью ускорени и упрощени процес са получени целевого продукта, в качестве N-защищенного карбоксильного компонента используют гликолил5853326глициновый эфир трет-бутилоксикарбо- нилтирозилглицина, в качестве амин- ного компонента - глицилфенилаланил- g лейцин, растворение ведут в водном буферном растворе, а инкубацию с па- паином провод т путем пропускани смеси через колонку с иммобилизованным на кремнеземе папаином.ПредлагаемыйBocTyrGlyGlyPheLeu ОМ 5-10 минИзвестныйВосТ7г(Вг1)С1у PheLeuотав0 минч20 Водный Иммоби- До 70 раствор лизо- ванный папаин37 Водно- Раство- 66 органи- римый ческа фермент смесь
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU884449327A SU1585332A1 (ru) | 1988-06-27 | 1988-06-27 | Способ получени трет-бутилоксикарбонил-лейцин-энкефалина |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU884449327A SU1585332A1 (ru) | 1988-06-27 | 1988-06-27 | Способ получени трет-бутилоксикарбонил-лейцин-энкефалина |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1585332A1 true SU1585332A1 (ru) | 1990-08-15 |
Family
ID=21385034
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU884449327A SU1585332A1 (ru) | 1988-06-27 | 1988-06-27 | Способ получени трет-бутилоксикарбонил-лейцин-энкефалина |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1585332A1 (ru) |
-
1988
- 1988-06-27 SU SU884449327A patent/SU1585332A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Khmelnitsky Yu. L. ef al. Optimization of enryme catalyzed peptido synthesis in a Water-water inmiseible organic solvent bypha- sic system. - Tetrahedron. 1984, vol. 40, № 21, p. 4425-4432. Chi - Hueg Wong et al. Enzyme synthesis of opioid peptides. - Bio- chem. et Boiphys. Acta. 1979, vol. 576, № I, p. 247-249. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Brückner et al. | HPLC separation of DL-amino acids derivatized with N 2-(5-fluoro-2, 4-dinitrophenyl)-L-amino acid amides | |
| US4606854A (en) | Method of preparing α-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester and its hydrochloride | |
| US3846399A (en) | Process for controlled stepwise synthesis of polypeptides | |
| EP0000063B1 (en) | Dipeptide derivatives of 7-(n-alpha-substituted or non-substituted x-arginyl)-amino-4-methyl-coumarin | |
| CN107936090B (zh) | 一种低成本合成ARK-Cu的方法 | |
| JPS61267600A (ja) | Ｎ−保護−α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステルの製造法 | |
| SU1585332A1 (ru) | Способ получени трет-бутилоксикарбонил-лейцин-энкефалина | |
| YOSHIDA et al. | PROBESTIN, A NEW INHIBITOR OF AMINOPEPTIDASE M, PRODUCED BY STREPTOMYCES AZUREUS MH663-2F6 II. STRUCTURE DETERMINATION OF PROBESTIN | |
| IL25974A (en) | Processes for the controlled synthesis of polypeptides | |
| CN112898172B (zh) | 可被羧肽酶酶解的双亲和功能团化合物的合成方法 | |
| US3846398A (en) | Method for controlled stepwise synthesis of polypeptides utilizing n-thiocarboxy anhydrides of amino acids as reagents | |
| US4426325A (en) | Process for the preparation of compounds containing carboxylic acid amide groups, in particular or peptides | |
| Kuhl et al. | On the use of carboxamidomethyl esters in the protease-catalyzed peptide synthesis | |
| Chen et al. | Papain-catalyzed synthesis of aspartame precursor in biphasic system | |
| CN113995849A (zh) | 荷载自噬抑制剂及化疗药物的凝胶因子前体、凝胶材料及制法和应用 | |
| JPH0768163B2 (ja) | シクロペンテノン誘導体の製法 | |
| US3247178A (en) | Synthesis of peptides containing alpha, omega-diamino acids protected by phthalyl and t-butyloxycarbonyl groups | |
| US4806641A (en) | Salts of 3-hydroxy-4-oxo-3,4-dihydro-1,2,3-benzotriazine and amino compounds | |
| EP0287523B1 (en) | Process for producing (-) n-acetylaminocarnitine and (+) n-acetylaminocarnitine | |
| Miyazawa et al. | Isolation of a new peptide, L-citrulliny-L-arginine, from a red alga Grateloupia turuturu | |
| US4668397A (en) | Novel cyclic octapeptide, method for production of said octapeptide, and ion extracting/separating agent using said octapeptide as principal component | |
| EP0517345A1 (en) | Intermediates of the mureidomycin group, their preparation, and their use | |
| RU2083588C1 (ru) | Способ получения мурамилпептидов | |
| JP2565034B2 (ja) | 新規なドーパ誘導体及びその製造法 | |
| JPS63254994A (ja) | Ｎ置換ロイシンエンケフアリンアミドの製造方法 |