SU1565502A1

SU1565502A1 - Adsorbent based on disperse graphite

Info

Publication number: SU1565502A1
Application number: SU884469458A
Authority: SU
Inventors: Эдуард Аполлинарьевич Бакай; Александр Маркович Грищенко; Михаил Михайлович Конопля; Константин Николаевич Хоменко; Алексей Алексеевич Чуйко; Владимир Карпович Пикалов
Original assignee: Институт Химии Поверхности Ан Усср
Priority date: 1988-07-29
Filing date: 1988-07-29
Publication date: 1990-05-23

Abstract

Изобретение относитс к материалам, использующимс в медицине, биотехнологии, и позвол ет повысить эффективность сорбции глобул рных белков из плазмы крови. Сущность изобретени заключаетс в том, что к 10 мг окисленного дисперсного графита, содержащего сульфогруппы (-HSO₃), добавл ли 1 мл раствора, содержащего 40 мг/мл меченного ¹⁴C - муравьиным альдегидом человеческого сывороточного альбумина. Пробу инкубировали 2 ч при 4°С при периодическом перемешивании, центрифугировали в течение 15 мин. Осадок отмывали трижды в фосфатном буфере. Насыщение сорбента по альбумину составило 110 мг/г. 1 табл.The invention relates to materials used in medicine, biotechnology, and allows for increasing the efficiency of sorption of globular proteins from blood plasma. The essence of the invention is that to 10 mg of oxidized dispersed graphite containing sulfo groups (-HSO ₃ ), 1 ml of a solution containing 40 mg / ml of ¹⁴ C-labeled human alumina formic aldehyde was added. The sample was incubated for 2 h at 4 ° C with occasional stirring, centrifuged for 15 min. The precipitate was washed three times in phosphate buffer. Albumin sorbent saturation was 110 mg / g. 1 tab.

Description

Изобретение относитс к материалам , использующимс в медицине, биотехнологии , микробиологии дл разделени и адсорбции различных молекул, а именно белков, пептидов и т.п., и касаетс адсорбентов на основе углеродных материалов, в частности графита .The invention relates to materials used in medicine, biotechnology, microbiology for the separation and adsorption of various molecules, namely proteins, peptides, etc., and relates to adsorbents based on carbon materials, in particular graphite.

Цель изобретени - повышение эффективности сорбции глобул рных белков из плазмы крови.The purpose of the invention is to increase the efficiency of sorption of globular proteins from blood plasma.

Окисление графита заключаетс в обработке его смесью концентрированной серной кислоты (95-96 мас.%) с окислителем (концентрированна азотна кислота, концентрированна перекись водорода, персульфат натри The oxidation of graphite consists in treating it with a mixture of concentrated sulfuric acid (95-96 wt.%) With an oxidizing agent (concentrated nitric acid, concentrated hydrogen peroxide, sodium persulfate

и т.п.,). Ь вес.ч концентрированной 95%-ной серной кислоты смешивают с 1 весовой частью персульфата натри . Полученной смесью обрабатывают 1 вес.ч. дисперсного графита (марка С-00, Завальевского месторождени с удельной поверхностью ,500 м /г) в течение часа. Затем постепенно добавл ют хрлодную дистиллированную воду (1-5°С) в трехкратном объеме, отфильтровывают графит, промывают до нейтральной реакции и высушивают на воздухе при 70°С. Полученный в результате окисленный дисперсный графит содержит на поверхности группы - HSCy и имеет слоистую структуру. По внешetc.,). L weight.h of concentrated 95% sulfuric acid is mixed with 1 weight part of sodium persulfate. The resulting mixture is treated with 1 weight.h. dispersed graphite (grade С-00, Zavalievsky field with a specific surface, 500 m / g) for one hour. Then chrydloid distilled water (1-5 ° C) is gradually added in a three-fold volume, graphite is filtered off, washed until neutral, and dried in air at 70 ° C. The resulting oxidized dispersed graphite contains on the surface of the group - HSCy and has a layered structure. According to external

нему виду это порошок черного цвета с размерами частиц около микрона.His appearance is a black powder with a particle size of about a micron.

Сравнительное из1 : чче его адсорбционных характеристик по отношению к биомолекулам, а именно к альбумину, гамма-глобулину и фибриногену проке- дено в сравнении с известными адсорбентами на основе углеродных материалов , например СУА-1-49 Результаты даны в трехкратном повторении и представлены в таблице.Comparative of 1: the number of its adsorption characteristics with respect to biomolecules, namely, albumin, gamma globulin and fibrinogen, is compared with known adsorbents based on carbon materials, for example, SUA-1-49. The results are given in triplicate and are presented in the table .

Пример , Адсорбент отмывают в 0,01 М фосфатном буфере (рН 7,4), содержащем 0,14 М хлористого натри и 0,015 цитрата натри . К 10 мг подготовленного таким образом адсорбента - окисленного дисперсного графита - добавл ли 1 мл растзора, содержащего 40 мг/мл меченного 4С-мура - вьиным альдегидом человеческого сыво t точного альбумина. Пробу инкубировали 2 ч при 4 С при периодическом перемешивании, центрифугировали в течение 15 мин при 2000 об/м. Осадок отмывали трижды в фосфатном буфере и определ ли радиоактивность осадка на счетчике.Example: The adsorbent is washed in 0.01 M phosphate buffer (pH 7.4) containing 0.14 M sodium chloride and 0.015 sodium citrate. To 10 mg of the thus prepared adsorbent — oxidized dispersed graphite — was added 1 ml of a solution containing 40 mg / ml of human 4C-labeled aldehyde human syringe t of exact albumin. The sample was incubated for 2 hours at 4 ° C with occasional stirring, centrifuged for 15 minutes at 2000 rpm. The precipitate was washed three times in phosphate buffer and the radioactivity of the precipitate was determined on a counter.

П р и м е р 2, Адсорбент отмывали в 0,01 М фосфатном буфере (рН 7,4), содержащем 0,14 М хлористого натри и 0,015 цитрата натри , К 10 мг подготовленного таким образом адсорбента - окисленного дисперсного графита - добавл ли 1 мл раствора, содержащего 4 мг/мл фибриногена человека. Пробу инкубировали 2 ч при 4даС при периодическом перемешивании, центрифугировали в течение 15 мин при 2000 об/м. Осадок отмывали триждыExample 2: The adsorbent was washed in 0.01 M phosphate buffer (pH 7.4) containing 0.14 M sodium chloride and 0.015 sodium citrate, K 10 mg of the adsorbent thus prepared — oxidized dispersed graphite — was added 1 ml of a solution containing 4 mg / ml of human fibrinogen. The sample was incubated for 2 hours at 4 ° C with occasional stirring, centrifuged for 15 minutes at 2000 rpm. The precipitate was washed three times.

10ten

1515

2020

35 65502435 655024

в фосфатном буфере и определ ли радиоактивность осадка на счетчике.in phosphate buffer and the radioactivity of the precipitate at the meter was determined.

Пример 3. Адсорбент отмывают в 0,01 М фосфатном буфере (рН 7,4), содержащем 0,14 М хлористого натри и 0,015 цитрата натри . К 10 мг подготовленного таким образом адсорбента - окисленного дисперсного графита - добавл ли 1 мл раствора, содержащего 10 гамма-глобулина Пробу инкубировали 2 ч при 4°С при периодическом перемешивании, центрифугировали в течение 15 мин при 2000 об/м. Осадок отмывали трижды и в фосфатном буфере и определ ли радиоактивность осадка на счетчике.Example 3. The adsorbent is washed in 0.01 M phosphate buffer (pH 7.4) containing 0.14 M sodium chloride and 0.015 sodium citrate. 1 ml of a solution containing 10 gamma globulin was added to 10 mg of the adsorbent thus prepared - oxidized dispersed graphite. The sample was incubated for 2 h at 4 ° C with occasional stirring, centrifuged for 15 min at 2000 v / m. The precipitate was washed three times in phosphate buffer and the radioactivity of the precipitate was measured on a counter.

П р и м е р 4Ф Известный адсорбент - активированный уголь марки СУА-А-1-49 - использовали дл абсорбции .альбумина, глобулина и фибриногена по описанной методике. Количество адсорбированного при этом биологического адсорбента подсчитано и представлено в таблице.PRI me R 4F A known adsorbent — activated carbon, grade АUА-А-1-49 - was used for the absorption of albumin, globulin and fibrinogen by the described method. The amount of adsorbed biological adsorbent is calculated and presented in the table.

Технико-экономическа эффективность изобретени заключаетс в том, что окисленный графит имеет насыщение по альбумину 110-152 кг/т, что в 6-8 раз выше, чем у активированные углей, и практически не сорбируют гамма-глобулин.The technical and economic efficiency of the invention lies in the fact that oxidized graphite has an albumin saturation of 110-152 kg / t, which is 6-8 times higher than that of activated carbons, and practically does not absorb gamma globulin.

30thirty

Claims

Invention Formula

The use of oxidized dispersed graphite containing on the surface of a sulfo group - HSO, as an adsorbent for the extraction of albumin from biological fluids.