SU1362478A1 - Method of obtaining blood preparation - Google Patents

Method of obtaining blood preparation Download PDF

Info

Publication number
SU1362478A1
SU1362478A1 SU864042326A SU4042326A SU1362478A1 SU 1362478 A1 SU1362478 A1 SU 1362478A1 SU 864042326 A SU864042326 A SU 864042326A SU 4042326 A SU4042326 A SU 4042326A SU 1362478 A1 SU1362478 A1 SU 1362478A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
precipitate
ethanol
hydrogen peroxide
albumin
production
Prior art date
Application number
SU864042326A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Андрей Германович Лютов
Светлана Ахметовна Еникеева
Владимир Андрианович Алешкин
Фаина Зайнулловна Хакимова
Original Assignee
Уфимский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им.И.И.Мечникова
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Уфимский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им.И.И.Мечникова filed Critical Уфимский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им.И.И.Мечникова
Priority to SU864042326A priority Critical patent/SU1362478A1/en
Application granted granted Critical
Publication of SU1362478A1 publication Critical patent/SU1362478A1/en

Links

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

Изобретение относитс  к медицине , точнее к производству препаратов из крови человека, содержащих альбу-т мин, иуЗ-глобулины. Цель изобретени  - сокр ащение времени проведени  процесса путем сокращени  количества технологических операций. Дл  этого используют в качестве исходного сырь  балластньй осадок, образующийс  при получении альбумина из гемолизирован- ной плазмы или сьторотки, обрабатывают 15-20%-ным этанолом рН 4,5-5,5 суспендированный осадок после разрушени  гемпигментов перекисью водорода , удал ют осадок центрифугированием , осаждают целевой продукт этанолом в концентрации 30-40%, рН 3,8-4,5. Инактивируют препарат, подвергают осветл ющей и стерилизующей фильтрации и разливают по флаконам. Процесс сокращен на 3 стадии, составл ет 1,5- 2 дн  против 5-7 дней. СЛThe invention relates to medicine, more specifically to the production of drugs from human blood containing albumin, ius-globulins. The purpose of the invention is to shorten the time of the process by reducing the number of technological operations. To do this, a ballast precipitate is used as a raw material, which is formed during the production of albumin from hemolyzed plasma or scatter, is treated with 15-20% ethanol, pH 4.5-5.5. Suspended precipitate after destruction of hempigments by hydrogen peroxide, the precipitate is removed The precipitated target product is ethanol at a concentration of 30-40%, pH 3.8-4.5. The drug is inactivated, subjected to clarifying and sterilizing filtration, and poured into vials. The process is shortened to 3 stages, 1.5-2 days against 5-7 days. SL

Description

Изобретение относитс  к медицине конкретно к производству препаратов из крови человека, содержащих альбумин , «t- и 4/)-глобулины,The invention relates to medicine specifically to the production of drugs from human blood containing albumin, "t-and 4 /) -globulins,

Целью изобретени   вл етс  сокращение времени проведени  процесса за счет сокращени  количества технологических операций.The aim of the invention is to reduce the time of the process by reducing the number of technological operations.

Цель осуществл етс  за счет ис-г пользовани  в качестве исходного сырь  балластного осадка, образующегос  при получении альбумина из гемо- лизированной плазмы или сыворотки крови, обработки 15-25%-ным этанолом при рН 4,5-5,5 суспендированного осадка после разрушени  гемпигментов перекисью водорода, удалени  осадка центрифугированием и осаждением целевого продукта зтанолом в концентра ции 30-40% и рН 3,8-4,5.The goal is achieved by using ballast sludge as the starting material, which is formed when albumin is obtained from hemolyzed plasma or blood serum, and treated with 15-25% ethanol at pH 4.5-5.5 suspended sediment after destruction gempigments with hydrogen peroxide, removing the precipitate by centrifuging and precipitating the target product with ethanol at a concentration of 30-40% and a pH of 3.8-4.5.

На чертеже представлена схема про цесса получени  протеина и препарата крови.The drawing shows a diagram of the process of obtaining protein and blood product.

П р и м е р 1. Балластный осадок белков, образующихс  в процессе производства альбумина спиртово-капри- латным методом, в количестве 1 кг заливают 6 л дистиллированной воды, гомогенизируют. К полученной суспензии добавл ют 2н. раствор NaOH до рН 7,210,1, при этом раствор приобретает темно-красньй цвет. Его равномерно нагревают до 60 С и небольшими порци ми внос т 10%-ную перекись водорода до  нтарного цвета раствора, анало.гично стадии 3 известного устройства . Раствор вьщерживают при в течение 2 ч, охлаждают до и снижают рН до 5,5 1н. раствором НС1. При непрерывном перемешивании ввод т 2,5 л 96%-ного этанола (до концентрации 25%) . Температуру смеси снижают до и выстаивают в этих услови х 3-4 ч. Смесь центрифугируют осадок удал ют. Супернатант в количестве 9,5 л помещают в реактор, охлаждают до -2°С и при перемешивании ввод т охлажденньй этиловый спирт в количестве 2,4 л до концентрации 40% а рН раствора снижают до 4,5. Через 3-4 ч выстаивани  раствор центрифугируют при температуре не въте . Осадок в количестве 0,21 кг (целевой продукт) собирают, подвергают субли- нации дл  удалени  остаточного спирта , раствор ют в дистиллированной воде до концентрации белка 4,3-4,8%, устанавливают-рН 7,,5, инактивиI CPRI me R 1. The ballast sediment of proteins formed during the production of albumin by the alcohol-caprilate method, in an amount of 1 kg, is poured over 6 liters of distilled water, homogenized. To the resulting suspension was added 2n. NaOH solution to pH 7.210.1, while the solution becomes dark red color. It is uniformly heated to 60 ° C and in small portions 10% hydrogen peroxide is added to an amber-colored solution, analogous to stage 3 of a known device. The solution is kept under for 2 h, cooled to and reduced to pH 5.5 1N. HCl solution. With continuous stirring, 2.5 L of 96% ethanol (to a concentration of 25%) is introduced. The temperature of the mixture is reduced to and set at these conditions for 3-4 hours. The mixture is centrifuged and the precipitate is removed. The supernatant in the amount of 9.5 l is placed in the reactor, cooled to -2 ° C and with stirring the cold ethanol is introduced in the amount of 2.4 l to a concentration of 40% and the pH of the solution is reduced to 4.5. After 3-4 hours of standing, the solution is centrifuged at a temperature not injected. The precipitate in the amount of 0.21 kg (target product) is collected, subjected to sublimation to remove residual alcohol, dissolved in distilled water to a protein concentration of 4.3–4.8%, adjusted to pH 7,, 5, inactiviC

5five

00

30thirty

45 50 55 45 50 55

руют вирус гепатита, подвергают осветл ющей , стерилизирующей фильтрации и разливают по флаконам.Hepatitis virus is subjected to clarifying, sterilizing filtration and poured into vials.

П р и м е р 2. Балластный осадо к белков в количестве 1 кг зaливaюt 5 л дистиллированной воды, гомогенизируют и устанавливают рН 7,,1. Суспензию равномерно нагревают до , путем добавлени  перекиси водорода осветл ют раствор и через 2 ч понижают температуру до . Устанавливают рН 4,5 1н. раствором НС1 и медленно ввод т этанол до концентрации 15% (всего 1,15 л). Температура смеси к концу осаждени  достигает -З с. Коррегируют рН до 4,5 и -выстаивают смесь 3-4 ч. Образующийс  осадок удал ют центрифугированием. Супернатант 7,2 л перенос т в реактор, охлаждают до -2°С к при перемешивании довод т концентрацию этанола до 30% (1,3 л), рН раствора должен быть 3,8. После выстаивани  целевой продукт 25 (0,16 кг) получают центрифугирова-: нием.PRI mme R 2. Ballast precipitate to proteins in an amount of 1 kg was filled with 5 liters of distilled water, homogenized and adjusted to pH 7, 1. The suspension is uniformly heated until, by the addition of hydrogen peroxide, the solution is clarified and, after 2 hours, the temperature is reduced to. Set the pH to 4.5 1N. HCl solution and ethanol are slowly added to a concentration of 15% (1.15 l total). The temperature of the mixture at the end of the precipitation reaches -3 s. The pH is corrected to 4.5 and the mixture is allowed to stand for 3-4 hours. The resulting precipitate is removed by centrifugation. The supernatant of 7.2 l is transferred to the reactor, cooled to -2 ° C, the concentration of ethanol is adjusted to 30% (1.3 l) with stirring, the pH of the solution should be 3.8. After maturing, the desired product 25 (0.16 kg) is obtained by centrifugation.

ПримерЗ. 5кг осадка заливают 30 л дистиллированной воды и гомогенизируют 30 мин. Не прекраща  перемешивани , повьш1ают рН до 7,2 iO,l введением 2н. NaOH. Суспензи  приобретает вид темно-красного опа- лесцирующего раствора. Его равномерно нагревают до 60 С и после дости- 35 жени  заданной температуры порци м добавл ют 10%-ную перекись водорода до достижени   нтарного цвета. После 2 ч прогрева раствор охлаждают до 1 С, снижают рН до 4,7 i0,1 добавлено нием 1н. НС1. Медленно при перемешивании ввод т 9,5 л охлажденного этанола до конечной концентрации 20%,Example 5 kg of sediment is poured over 30 liters of distilled water and homogenized for 30 minutes. Without stopping stirring, increase the pH to 7.2 iO, l by the introduction of 2N. NaOH. The suspension takes on the appearance of a dark red opa- ging solution. It is uniformly heated to 60 ° C and, after reaching the desired temperature, 10% hydrogen peroxide is added in portions until it is amber. After 2 h of warming up, the solution is cooled to 1 ° C, the pH is lowered to 4.7 by the addition of 1N. HC1. 9.5 liters of chilled ethanol are introduced slowly with stirring to a final concentration of 20%,

температуру к концу осаждени  снижают до рН поддерживают 4,7. Раствор перемешивают 1 ч и после 2-3 ч, выстаивани  удал ют осадок центрифугированием . Далее супернатант (42 л) охлаждают до , снижают рН до 4,1 0,1 и медленно ввод т 7,4 л охлажденного этанола до концентрации 35. К концу осаждени  температуру снижают до . Провер ют и при . обходимости Коррегируют рН. Раствор перемешивают 2-3 ч. Возможно отстаивание смеси 10-12 ч при температуре -3°С. Вьтавшнй осадок собирают центрифугированием . Остаточньй спирт удал ют сублимацией, сухую массу раствор ют в воде до содержани  белкаthe temperature by the end of the precipitation is reduced to support the pH of 4.7. The solution is stirred for 1 hour and after 2–3 hours, the sediment is removed by centrifugation. Next, the supernatant (42 L) is cooled to, the pH is reduced to 4.1 0.1 and 7.4 liters of cooled ethanol are slowly introduced to a concentration of 35. By the end of the precipitation, the temperature is reduced to. Checked at. Correct pH. The solution is stirred for 2-3 hours. It is possible for the mixture to settle for 10-12 hours at a temperature of -3 ° C. The precipitate is collected by centrifugation. The residual alcohol is removed by sublimation, the dry mass is dissolved in water to a protein content.

4,3-4,8%, инактивнруют вирус гепатита прогреванием, раствор подвергаютос- ветл нщёй и стерилизирующей фильтрации, разливают по флаконам и используют. ,4.3–4.8% inactivate the hepatitis B virus by heating, the solution is subjected to sterilizing filtration, poured into vials and used. ,

Согласно предлагаемому способу получают препарат крови, близкий по своим свойствам к протеину, при злек- трофорезе и иммунофорезе распределение белковых зон и линий преципитаций чо ратурах в кислых услови х, о т л и аналогично , как у протеина. Препарат крови не содержит НВ -антигена, бактериальной примеси и пирогенных веществ ,, конечньш продукт содержит не менее 75% альбумина. При использова- 15 НИИ запредельных концентраций спирта показателей рН конечньй продукт содержит альбумина менее 75%.According to the proposed method, a blood product is obtained, which is close in its properties to protein, during electrophoresis and immunophoresis, the distribution of protein zones and precipitation lines in acidic conditions is about 100% and similar to that of protein. The blood product does not contain HB antigen, bacterial impurities and pyrogenic substances, the final product contains at least 75% albumin. When using 15 scientific research institutes of extreme concentrations of alcohol, pH indicators, the final product contains albumin less than 75%.

В результате предлагаемой технологической схемы процесс сокращен на 20 три стадии, вместо ше сти центрифугирований по известному способу необходимо проводить только два центрифугировани , общие затраты времени наAs a result of the proposed technological scheme, the process is reduced to 20 three stages; instead of six centrifugations using a known method, only two centrifugations are necessary; the total time spent on

чающийс  тем, что, с целью сокращени  времени проведени  процесса за счет сокращени  количества технологических операций, в качестве источ ника сырь  используют отходы производства - балластньй осадок белков , образующийс  в процессе получени  альбумина из гемолизированной плазмы или сыворотки крови, при этом обработку этанолом провод т в концентрации этанола 15-25% при рН 4,5-5,5 после суспендировани  осадка в дистиллированной воде и разрушени  пигментов перекисью водорода, осадокdue to the fact that, in order to reduce the time of the process by reducing the number of technological operations, production waste is used as a source of raw material — balluminous sediment of proteins formed during the production of albumin from hemolyzed plasma or serum, while processing with ethanol is carried out the concentration of ethanol is 15–25% at a pH of 4.5–5.5 after the precipitate is suspended in distilled water and the pigments are destroyed by hydrogen peroxide;

технологический процесс по известно-- 25 удал ют центрифугированием, а целевой му способу составл ют 5-7 дней, а по продукт осаждают этанолом в концент- предлагаемому - 1,5-2 дн .рации 30-40% и рН 3,8-4,5.the process is known - 25 is removed by centrifugation, and the target method is 5-7 days, and the product is precipitated with ethanol in a concentrated offered - 1.5-2 times 30-40% and a pH of 3.8 4.5.

Claims (1)

Формула изобретени Invention Formula Способ получени  препарата крови путем обработки этанолом при низких температурах разрушени  гемпигментов перекисью водорода в присутствии кап- рилата натри , осаждением целевого продукта этанолом при низких темпечающийс  тем, что, с целью сокращени  времени проведени  процесса за счет сокращени  количества технологических операций, в качестве источ ника сырь  используют отходы производства - балластньй осадок белков , образующийс  в процессе получени  альбумина из гемолизированной плазмы или сыворотки крови, при этом обработку этанолом провод т в концентрации этанола 15-25% при рН 4,5-5,5 после суспендировани  осадка в дистиллированной воде и разрушени  пигментов перекисью водорода, осадокThe method of obtaining a blood product by treating with ethanol at low temperatures the destruction of gempigments with hydrogen peroxide in the presence of sodium caprylate, precipitating the target product with ethanol at low temperatures, in order to reduce the time of the process by reducing the number of technological operations as a source of raw materials production wastes are used - ballast precipitate of proteins formed during the production of albumin from hemolyzed plasma or serum, while processing this nolom carried out in an ethanol concentration of 15-25% at pH 4.5-5.5 after suspending the precipitate in distilled water and hydrogen peroxide degradation pigments, precipitate
SU864042326A 1986-03-24 1986-03-24 Method of obtaining blood preparation SU1362478A1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU864042326A SU1362478A1 (en) 1986-03-24 1986-03-24 Method of obtaining blood preparation

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU864042326A SU1362478A1 (en) 1986-03-24 1986-03-24 Method of obtaining blood preparation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1362478A1 true SU1362478A1 (en) 1987-12-30

Family

ID=21228375

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU864042326A SU1362478A1 (en) 1986-03-24 1986-03-24 Method of obtaining blood preparation

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU1362478A1 (en)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Фром А.А., Киселев А.Е., Русанов В.М., Никитенко А.А. Типовой регламент производства протеина. Препараты крови, М.: 1976, с.253-271. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SU591126A3 (en) Method of preparing albumin
FI60400B (en) FOERFARANDE FOER UTVINNING AV ALBUMIN UR BLODPLASMA
US5099003A (en) Method of preparing a sterile plasma-protein solution containing fibrinogen and factor xiii
EP0249483B1 (en) Method of producing substantially pure albumin
KR890006251A (en) Process for the preparation of high-purity, virus-activated biologically active transferrin preparations
SU1362478A1 (en) Method of obtaining blood preparation
JPS6078999A (en) Purification of hbs antigen
SU1138410A1 (en) Method for isolating thermostable placentar alkaline phosphatase
RU2162338C1 (en) Method of ceruloplasmin preparing
SU944580A1 (en) Method of obtaining surface b-hepatitis antigen
RU2089204C1 (en) Method of preparing peptides recovering the prostate gland function
RU1417244C (en) Method of preparing of substance recovering prostate gland function
SU712089A1 (en) Method of extracting albumen
US3627642A (en) Lysozyme salts
JPS61101560A (en) Method for recovering red cabbage pigment
RU2192279C2 (en) Method of immunoglobulin preparation preparing
SU1127525A3 (en) Method of isolating albumin
SU706088A1 (en) Method of obtaining hog liver hydrolisate
RU2140287C1 (en) Method of albumin preparing
RU2054943C1 (en) Method of hyaluronidase preparing
RU2139067C1 (en) Method of preparing albumin from human placentas
SU467536A1 (en) The method of obtaining serum albumin
RU2225725C2 (en) Method for obtaining ceruloplasmin
RU2084229C1 (en) Method of preparing immunoglobulin preparation for prophylaxis and therapy of bacterial and viral diseases
RU2125888C1 (en) Method of preparing monomeric albumin