SU1127525A3

SU1127525A3 - Method of isolating albumin

Info

Publication number: SU1127525A3
Application number: SU772507261A
Authority: SU
Inventors: Мурата Ерихико; Цуцуи Эйзо
Original assignee: Дзе Грин Кросс Корпорейшн (Фирма)
Priority date: 1977-04-12
Filing date: 1977-07-29
Publication date: 1984-11-30
Also published as: DE2733923A1; FR2387240B1; AT365074B; YU40170B; DE2733923C3; ATA549977A; FR2387240A1; YU186077A; DE2733923B2; JPS53127808A; HU174149B; BG31214A3; JPS572689B2

Abstract

СПОСОБчВВДЕЛЕНИЯ АЛЬБУМИНА путем обработки крови человека водным раствором полиэтиленгликол , отделени надосадочной жидкости, извлечени альбумина, отличающийс тем, что, с целью повы- . шени выхода и степени очистки целевого продукта, обрабатьгаают водный раствор белка концентрации 5-40 г/л, содержащий 50-80% альбумина и группоспецифические вещества крови, полиэтиленгликолем с ММ от 2000 до 10000 при рН 6,6-9,6 до концентрации полиэ тилен гликол 13-30%. VThe method of administration of albumin by treating a person's blood with an aqueous solution of polyethylene glycol, separating the supernatant, and extracting albumin, characterized in that, in order to increase. yield and purification of the target product, process an aqueous solution of protein concentration of 5-40 g / l, containing 50-80% albumin and group-specific blood substances, polyethylene glycol with MM from 2000 to 10,000 at pH 6.6-9.6 to polyethylene concentration Tylen glycol 13-30%. V

Description

Изобретение относится к медицине (биотехнологии), в частности к способам получения альбумина из крови человека .The invention relates to medicine (biotechnology), in particular to methods for producing albumin from human blood.

Известен способ получения альбуми- 5 на из крови человека путем низкотемпературного фракционирования крови этанолом по Кону [ij .A known method of producing albumin-5 from human blood by low-temperature fractionation of blood with ethanol according to Cohn [ij.

Известен также способ вьщеления альбумина из крови человека путем 10 обработки водным раствором полиэтиленгликоля, отделения надосадочной жидкости и извлечения альбумина (Ϋ)'.There is also known a method of injecting albumin from human blood by 10 treatment with an aqueous solution of polyethylene glycol, separating the supernatant and extracting albumin (Ϋ) '.

Однако получение альбумина по известным способам не обеспечивает дос- )5 таточно высокий выход целевого продукта и достаточную степень его очистки.However, the production of albumin by known methods does not provide a sufficiently high yield of the target product and a sufficient degree of purification thereof.

Целью изобретения является повышение выхода и степени очистки целево- 20 го продукта.The aim of the invention is to increase the yield and degree of purification of the target product 20.

Эта цель достигается тем, что согласно способу вьщеления альбумина путем обработки крови человека водньм раствором полиэтиленгликоля от- ⁴ 25 деления надосадочной жидкости, извлечения альбумина, водный раствор белка концентрации 5-40 г/л, содержащий 60-80% альбумина и группоспецифические вещества крови, обрабатывают по- 3Q лиэтиленгликолем с ММ от 2000 до 10000 при pH 6,6-9,6 до концентрации полиэтиленгликоля 13-30%.This object is achieved in that according to the method vscheleniya albumin by treating human blood The relative vodnm solution of polyethylene glycol ²⁵ April dividing supernatant albumin extraction, the aqueous protein solution concentration of 5-40 g / l, containing 60-80% albumin and blood group-specific substances, treated with 3Q polyethylene glycol with MM from 2000 to 10000 at a pH of 6.6-9.6 to a concentration of polyethylene glycol of 13-30%.

Пример. Примерно 600 кг тонко нарезанной плаценты смеши- ₃₅вают с 700 лЧ%-ного водного солево- го раствора. Смесь' перемешивают при температуре ниже 12°С в течение 45 мин для экстракции компонентов крови. Экстракт центрифугируют для _4Qудаления остатков плаценты. К 1 л экстракта добавляют 285 г сульфата аммония и образовавшийся осадок, содержащий гамма-глубулин, отделяют.Example. Approximately 600 kg of finely chopped placenta mixing ₃₅ vayut 700 UCL% aqueous solution of solevo-. The mixture is stirred at a temperature below 12 ° C for 45 minutes to extract blood components. The extract is centrifuged to remove placental residues _4Q . To 1 liter of extract is added 285 g of ammonium sulfate and the precipitate formed, containing gamma-depthin, is separated.

К надосадочной жидкости добавляют 45 сульфат аммония в количестве 200 г/лTo the supernatant add 45 ammonium sulfate in an amount of 200 g / l

-и доводят pH раствора до 6-7. Выпавший Ί осадок растворяют в деионизированной дистиллированной воде в соотношения 7 л на 1 кг осадка. Полученный раствор смешивает с миндальной кислотой до конечной концентрации кислоты 4%. Поддерживая pH раствора на уровне 4,9-5,0,&го прогревают при 58-60°С в течение 1 ч для осаждения термолабильных белков.-and adjust the pH of the solution to 6-7. Precipitated Ί precipitate is dissolved in deionized distilled water in the ratio of 7 l per 1 kg of precipitate. The resulting solution is mixed with mandelic acid to a final acid concentration of 4%. Maintaining the pH of the solution at 4.9-5.0, it is heated at 58-60 ° C for 1 h to precipitate thermolabile proteins.

Полученный белковый раствор содержит 1,5% альбумина. Для извлечения группоспецифических и гипотонических веществ раствор доводят до концентрации белка 5-40 г/л и концентрации хлорида натрия 5% или менее. Затем в нем растворяют 220 г твердого полиэтиленгликоля с молекулярным весом 600 в расчете на 1000 мл раствора и доводят pH среда до 8,0 для осаждения части белка. Осадок отделяют и получают раствор, содержащий в основном альбумин. С целью осаждения альбумина из раствора pH последнего снижают до 4>5-5,6. Выпавший в осадок альбумин отделяют путем дегидратации и получают плазменный белок, содержащий альбумин, очищенный от группоспецифических и гипетонических веществ.The resulting protein solution contains 1.5% albumin. To extract group-specific and hypotonic substances, the solution is adjusted to a protein concentration of 5-40 g / l and a concentration of sodium chloride of 5% or less. Then, 220 g of solid polyethylene glycol with a molecular weight of 600 per 1000 ml of solution was dissolved in it and the pH was adjusted to 8.0 to precipitate a portion of the protein. The precipitate was separated and a solution containing mainly albumin was obtained. In order to precipitate albumin from a solution, the pH of the latter is reduced to 4> 5-5.6. The precipitated albumin is separated by dehydration and get a plasma protein containing albumin, purified from group-specific and hypertonic substances.

Полученный осадок растворяют в деионизированной дистиллированной воде и анализируют электрофоретическим методом.The resulting precipitate was dissolved in deionized distilled water and analyzed by electrophoretic method.

Полученный белок содержит 95-98% альбумина, 2-5% альфа-глобулина и бета-глобулина.The resulting protein contains 95-98% albumin, 2-5% alpha globulin and beta globulin.

Выход альбумина составляет 2,3г на плаценту.The output of albumin is 2.3 g per placenta.

Предлагаемый способ позволяет повысить выход и степень очистки целевого продукта и получить препарат альбумина человека, не подвергающийся денатурированию, нетоксичный и очищенный от группоспецифических и гипотенических веществ.The proposed method allows to increase the yield and degree of purification of the target product and to obtain a human albumin preparation that is not subject to denaturation, non-toxic and purified from group-specific and hypotenic substances.

Claims

METHOD FOR ADMINISTRATION OF ALBUMIN by treating human blood with an aqueous solution of polyethylene glycol, separating the supernatant, extracting albumin, characterized in that, in order to increase the yield and purification of the target product, an aqueous protein solution of a concentration of 5-40 g / l containing 50-80% albumin is treated and group-specific blood substances, polyethylene glycol with MM from 2000 to 10000 at a pH of 6.6-9.6 to a concentration of polyethylene glycol of 13-30%.