SU1357427A1 - Способ приготовлени питательной среды дл культивировани термофильных молочнокислых бактерий LастовасILLUS DеLвRIIскII - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к пищевой промышленности и микробиологическо- му синтезу, а конкретнее - к способам приготовлени  питательной среды дл  культивировани  термофильных молочнокислых бактерий (МКБ) вида Lactobacillus delbriickii, примен емых .в хлебопекарной промьшшенности о Способ заключаетс  в том, что традиционный субстрат -  чменный солод - замен ют более доступным и дешевым - кой злаковых или технических культур , которую гидролизуют композицией ферментных препаратов, состо щей из . протосубтилина ГЮх, целловиридина ГЗх, глюкоамилазы Г20х, Кроме того, с целью повьшени  качества среды, выхода биомассы, удлинени  сроков хранени , упрощени  процесса и удешевлени  среды ее обогащают карбокси- метилцеллюлозой, молочной сывороткой, растительным маслом и микроэлементами . Способ позвол ет повысить титр , клеток МКБ с 0,770 до 0,859 млрдо клеток/мл и удлинить срок хранени  культуры с 14 до 29 су т о 2 з-оПо ф-лы, 2 табл. с € (Л со ел

Description

11

Изобретение относитс  к области пищевой промьшшенности и микробиоло тического синтеза, в частности к способам приготовлени  питат(альной среды дл  культивировани  термофильных молочнокислых бактерий Lactoba cillus delbriickii, примен емых в производстве жидких дрожжей.

Целью изобретени   вл етс  повьше ние качества среды за счет выхода- биомассы, удлинение сроков хранени  упрощение процесса и удешевление среды

Предлагаемый.способ предусматривает гидролиз растительного сьфь  - муки злаковых и технических культур которьй провод т композицией ферментных препаратов - протосубтнлином ГЮх, целловиридином ГЗх, глюкоами- Лазой Г20х, очищенной при заданном соотношении, введение за 20-30 мин до конца гидролиза карбоксиметилцел- люлозы (КМЦ), а в готовый гидролизат эмульсии, состо щей из молочной сыворотки , растительного масла, трипо- лифосфата натри  и микроэлементов о

Только комплексное применение композиции ферментных препаратов, кар- боксиметилцеллюлозы, эмульсий, состо щей из молочной сыворотки, растительного масла, триполифо.сфата натри  в заданных соотношени х и параметрах дает возможность получить высокий выход биомассы бактерий, повысить их устойчивость при хранении и транспортировании, сократить продолжительность процесса приготовлени  питательной среды и сэкономить солод о

Использование композиции ферментных препаратов обусловлено тем, что при их внесении в гидролизуемую смесь за 1-1,5 ч гидролиза накапливаетс  2,0-4,0 мг% свободных аминокислот , 0,4-0,9% гексоз и пентоз в результате расщеплени  полипептидов, гемицеллюлозы, целлобиозы глюканов и ксиланов,

Карбоксиметилцеллюлозу внос т дл  улучшени  осмотических свойств среды в качестве стабилизирующего и консервирующего компонента . Введение КМЦ за 20-30 мин до окончани  гидролиза муки обусловлено необходимостью предварительного набу. хани  данного соединени  и активаци его наиболее реагентных центров

Введение эмульсии из молочной сыворотки растительного масла, три- полифосфата натри  и микроудобрений приводит к обогащению гидролизата азо- TijCTbiMH веществами (0,184 мг%) в состав которых вход т незаменимь е аминокислоты: аргинин, гистидин, метионин, лейцин; углеводами, представленными молочным сахаром - лактозой и продуктами ее гидролиза - глюкозой и галактозой, а также минеральными компонентамиJ калием (0,09-0,19%), магнием (0,09-0,20%), кальцием 5 (0,04-0,21%), натрием (0,03-0,05%) фосфором (0,04-0,10%), микроэлементами , водо- и жирорастворимыми витаминами молока, мг%: А 0,02; В , 0,03, Б 0,13, РР 0,1, С 1,0,

Использование, растительного масла , представл ющего собой смесь три- глицеридов ненасыщенных жирных кислат в качестве одного к:з компонентов среды . Св зано с необходимостью включени  в нее ИСТОЧНИКЕ линолевой и ли- ноленовой кислот, участвующих в регул ции углеводного и белкового обмена бактериальных клеток

0

5

Триполифосфат натри  - , ввод т в качестве эмульгирующего соединени , а также; в качестве источника фосфора.

Б качестве препарата-носител 

микроэлементов используют микродобрение дп;  сельскохоз йственных растерши, содержащ ;е медь, цинк, молибден, йод, кобгшьт, марганец, которые необходимы дл  нормального

функционировани  ферментных систем молочнокислых бактерий о

Параметры приготовлени  предлагаемой среды и соотношени  компонентов . определ лись методом полного факторного эксперимента (ПФЭ-2 ) и методом крутого восхождени , В процессе проведени  оптимизации установено , что любое выход щее за предлагаемые пределы, изменение параметров и состава среды, а также режимов ее приготовлени  неблагопри тно отражаетс , на развитии молочнокислых бактерий, щ)и этом наблюдаетс  или снижение роста до титра 0,5-0,6 мпрд

клеток на грамм, или чрезмерное за- кисание культуральной жидкости (до 18-19 град)р оказывающее ингибирую- щее действие на бактериальные клетки в процессе хранени 

10

15

20

25

Пример 1 о Муку злаковых (пшеничную второго сорта, ржаную обойную или обдирную) или техничес- ких (кукурузную, соевую) культур в количестве 50 г (5% к массе среды) смешивают с четырехкратным количеством воды, довод т температуру смеси до 85 С, охлаждают до 50 С, внос т композицию ферментных препаратов, состо щую из протосубтилина Г10х, целловиридина ГЗх и очищенной глю- коамилазы Г20х в количестве 0,0001, 0,004 и 0,0025 г соответственно (тое, в соотношении 1:40:25 и при дозировке 0,0001; 0,008 и 0,005% к муке) в виде водных растворов, выдерживают при 50°С, в течение 40 мин, В поученный гидролизат ввод т 20 г (40% к массе муки) карбоксиметил- целлюлозЫо Смесь выдерживают 20 мин при 50 С, затем добавл ют эмульсию, состо щую из 600 мл молочной сыворотки- , 0;03 г растительного масла, 4,8 г триполифосфата натри  и 0,01 г микроэлементов. Объем среды довод т о 1 л водой и стерилизуют

При этом титр клеток термофильных молочнокислых бактерий составл ет 0,79 вместо 0,77 г нтрд/мл по извест- д ному способу Срок хранени  чистых культур увеличиваетс  до 28 вместо 14 сут по известному способу, продолжительность приготовлени  среды сокращаетс  на 2,5 ч, снижение стоимости среды достигаетс  за счет экономии  чменного солода

Пример 2о Муку злаковых (пшеничную второго сорта, ржаную обойную и обдирную) или технических (кукурузную, соевую) культур в количестве 50 г (5% к массе среды) смешивают с четырехкратным количеством довод т температуру смеси до охлаждают до , внос т композицию ферментных препаратов, состо щую из протосубтилина ГЮх, цел- ловирИ|Дина ГЗх и очищенной глюко амилазы Г20х в количестве 0, .0,006 и 0,0035 г соответственно (тое в соотношении 1:60:35 и при дозировке 0,00015, 0,012 и 0,007% к муке) в виде водных растворов, выдерживают при 50 С в течение 35 мин В полученный гидролизат ввод т 22,5 г (45% к массе муки) карбоксиметилцеллюлозы Смесь выдерживают 25 мин при , затем добавл ют эмульсию, состо щую

из 610 мл молочной сыворотки, 0,04 г

35

40

воды, 85°С,

45

50

55

0

5

0

5

д

5

0

5

0

5

температу- 85°С, охлаждают до 55 С,

растительного масла, 5,4 г Триполи- фосфата натри  и 0,02 г микроэлементов . Объем среды довод т до 1 л водой и стерилизуют.

Использование среды, приготовленной согласно примеру 2, позвол ет повысить выход биомассы молочнокис- . лых бактерий до титра 0,80 млрд, клеток/мл вместо 0,77 млрд. клеток/мл, по известному способу, продлить срок хранени  до 29 сут (вместо 14 сут по известному способу), сократить продолжительность приготовлени  среды до 1,0 ч, снизить стоимость среды за счет экономии  чменного солода.

Пример 3, Муку злаковых (пшеничную, ржаную) и технических культур в количестве 50 г (5% к массе среды) смешивают с четырехкратным количеством воды, довод т ру смеси, до внос т композицию ферментных препаратов , состо щую из протосубтилина ГЮх, целловиридина ГЗх и очищенной глюкоамилазы в количестве 0,0001, 0,008 г и 0,005 г соответственно (т.ео в соотношении 1:80:50 и при дозировке 0,0002; 0,016 и 0,01% к , муке) в виде 1%-ных водных растворов, выдерживают при 55 С в течение 30 мин, в полученный гидролизат ввод т 25 г (50% к массе муки) карбоксиметил- целлюлозу, смесь вьщерживают 30 мин

при 55 С, затем добавл ют эмульсию,

СОСТОЯШУЙ из 620 МП молочной CblBQpOTки , 0,05 г растительного масла, 6,2 г триполифосфата натри  и 0,03 г микроэлементов. Объем среды довод т до 1 л водой и стерилизуют,

В результате использовани  питательной среды, приготовленной по примеру 3, удаетс  повысить титр клеток МКБ до 0,859 млрд/мл, продлить срок хранени  чистых культур в музейных услови х до 30 сут и снизить себестоимость средыо

Преимущество предлагаемого cnoco-i ба приготовлеьш  питательной среды дл  термофильных молочнокислых бактерий подтверждаетс  приведенными в табл о 1 данными,

Данные табл свидетельствуют о том, что применение предлагаемого способа по сравнению с известным позвол ет увеличить выход биомассы fc 0,770 до 0,859 млрд клеток/г), повысить биологическую активность и

жизнеспособность культуры, удлинить срок хранени  культуры в музейных услови хо

Установлено, что заквашенные заварки и жидкие дрожжи, приготовленные с применением культуры Lactoba- cillus delbriickii,вьфащенной по предлагаемому способу, превосход т по своим характеристикам жидкие дрожжи, приготовленные на культуре выращенн.ой по известному способу.

Качественные показатели заквашенных заварок и готовых жидких дрожжей- приведены.в табл„2,

Claims (1)

1. Способ приготовлени  питательг ной среды дл  культивировани  термофильных молочнокислых бактерий Lactobacillus delbriickii,предусматривающий смешивание крахмал содержащего растительного сырь  с водой, подогрев смеси, гидролиз .ее и стерилизацию , отличающийс  тем, что, с целью повьш1ени  качества среды за счет выхода биомассы, удлинени  сроков хранени , упрощени  процесса и удешевлени  среды, гидролиз сырь  провод т смесью водных растворов ферментных препаратов протосуб-пилина ГЮх, целловиридина ГЗх и глюкоамилазы Г20х в количестве 0,0001-0,0002, 0,008-0,016 и 0,005- 0,01 мас,% растительного сьфь  соответственно при температуре от 55 до в течение от 1 до 1,5 ч, при этом за 20-30 мин до окончани  гидролиза в полученную смесь ввод т

карбоксиметилцеллюпозу в количест- ве от 40 до 50 масо% растительного сырь , а перед стерилизацией в готовый гидролизат внос т эмульсию, приготовленную из молочной сыворотки,

растительного масла, триполифосфа- та натри  и микроэлементов, растворимых в воде, в количестве от 60 до 65 обо%в

2о Способ по По, о т л и ч а ющ и Ji с   тем, что дл  приготовлени  эмульсии растительное масло, триполифосфат натри  и микроэлементы внос т в количестве соответственно от 0,005 до 0,015 мас.%, от 0,008

до 0,01 масо% и от 0,002 до 0,002- 0,003 масо% к молочной сыворотке

Зв Способ по По 1, о т л и ч а ю - щ-и и с   тем, что в качестве микроэлементов используют микроудобрение дл  сельскохоз йственных растений , содержащее смесь меди, йода, цинка, молибдена, кобальта и марган- дао

Таблица 1

Кислотность заквашенной заварки, град

Титр клеток МКБ в заквшенной заварке, млрд клеток/г

Кислотность жидких дрожжей , град

Титр дрожжевых клеток в жидких дрожжах, млрд клеток/г

Подъемна  сила жидких дрожжей, мин

Редактор Н„Егорова

Составитель И.Привалова Техред М.Двдык

Заказ 5969/23Тираж 500,Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушска  наб. До4/5

Производственно-полиграфическое предпри тие, г, Ужгород, ул.Проектна ,4

Таблица 2

13,0

1,

10,0

0,384

20

10,0

1,6

9,0

0,450

15

14,0

0,75 9,0

0,220 25

Корректор С.Черни