SU1310427A1 - Штамм @ @ ВКМ В-1458-продуцент лизин-2-монооксигеназы - Google Patents
Штамм @ @ ВКМ В-1458-продуцент лизин-2-монооксигеназы Download PDFInfo
- Publication number
- SU1310427A1 SU1310427A1 SU843806960A SU3806960A SU1310427A1 SU 1310427 A1 SU1310427 A1 SU 1310427A1 SU 843806960 A SU843806960 A SU 843806960A SU 3806960 A SU3806960 A SU 3806960A SU 1310427 A1 SU1310427 A1 SU 1310427A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- lysine
- strain
- monooxygenase
- producer
- pseudomonas putida
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к микробиологической промышленности. Цель изобретени - вы вление нового штамма бактерий Pseudomonas putida, обладающего повышенной активностью лизин-2-монооксигенаэы, и удешевление целевого продукта. Штамм отобран при сканировании микроорганизмов рода Pseudomonas, хран щихс в ВКМ. Штамм про вл ет максимальную активность при культивировании на жидкой питательной среде, содержащей 3-4 г/д лизина или технического лизина, в течение 45 ч, равную 30,1 Е/г биомассы . Посевным материалом служит культура продуцента возрастом 60 ч. 4 ND
Description
113
Изобретение относитс к микробиологической промьшшенности, а именно к получению ферментов микробного происхождени и представл ет собой штамм бактерий - продуцент фермента лизин- -2-монооксигеназы /КФ 1,13.12.2/ /ЛКС/ который может быть использован в микробиологической и медицинской промьш - ленности, а также в медицине.
Цель изобретени - вы вление нового штамма бактерий Pseudomonas pu- tida, обладающего повышенной активностью лизин-2-монооксигеназы и удешевление целевого продукта.
Штамм отобран при сканировании микроорганизмов рода Pseudomonas, хран щихс в ВКМ и во ВНИИ сельскохоз йственных микроорганизмов г. Ленинграда :
Pseudomonas
fluorescens ВКМ Б-1470/В-28/ ВКМ Б-1471/В-22/ ВКМ В-1472/В-23/ ВКМ В-1473/В-25/
Pseudomonas
putida ВКМ В-1458/В-20/ ВКМ В-1459/В-21/ ВКМ В-1460/В-34/ ВКМ В-146 /В-39/
Pseudomonas
fluorescens70/314
71/405
Лизин-2-монооксигеназна активность обнаружена при культивировании на жидкой синтетической среде, содержащей- L-лизин в качестве единственного источника углерода и азота в количестве 3-4 г/л в услови х аэрации в штаммах:
Pseudomonas
fluorescens ВКМ В-1470/В-28/
Pseudomonas
putidaВКМ B-I458-/В-20/
ВКМ В-1450/В-34/
Pseudomonas
fluorescens70/314
Наибольшей активностью обладает штамм PS. putida ВКМ В-1458/В-20/, имеющий- следующие культурально-морфо логические и физиолого-биохимические свойства: врем генерации в МПБ 60- 70 мин; клетки грамотрицательные, палочкообразные, размером 1-3 мкм, подвижные, двигаютс с помощью пол рных жгутиков, бесцветные, при ферментации выдел ют в культуральную жидкость пигмент зеленого цвета - пио- вердин. На МПА после 24 ч инкубации
72
при 25°С образуютс округлые колонии диаметром 2-3 мм беловато-серые, непрозрачные , гладкие, блест щие с правильными кра ми. В центре колонии образуетс небольша выпуклость. При хранении колонии станов тс мукоидны- ми. Хорошо растет на МПА и в МПБ рН 7f2-7,5, На агаризованной синтетической лизинсодержащей среде после 48 ч
инкубации размер колоний достигает 1-2 мм. Форма и цвет аналогичны. При культивировании в жидкой синтетической лизинсодержащей среде выделение пиовердина происходит нерегул рно и
зависит видимо от качества дистиллированной воды. Показано, что присутствие ионов железа стимулирует образование пиовердина. Температура вьщ|е 30 С подавл ет рост культуры на синтетической среде.
Культура поддерживаетс на МПА. Оптимальна температура роста 24- . При культивировании МПБ лизин- -2-монооксигеназной активности не наблюдаетс . Она про вл етс только при культивировании микроорганизма на синтетической лизин-содержащей среде.
Внутриклеточна ЛМО про вл ет максимальную активность к 45-55 ч роста культуры на жидкой синтетической среде на поступательной качалке (100 качаний в минуту).
Лизин-2-монооксигеназную активность определ ют амперометрически по убыли концентрации кислорода в чейке с перемешиванием объемом 5 ил. Реакционна смесь содержит 0,05 М калий-фосфатный буфер рН 8,0 и 0,02 М
лизин. Реакци инициируетс добавлением 0,07 мл бесклеточного экстракта.
Пример 1. Культивирование продуцента лизин-2-монооксигеназы штамма Pseudomonas putida ВКМ В-1458 /Б-20/ провод т на поступательной качалке (100 качаний в минуту) при 25°С в конических колбах объемом в 1 л, содержащих по 200 мл синтетической среды следующего состава, %:
L-лизин 0,3; КзИРО -ЗН О 0,15; 0,05; MgSO -7,20 0,02 (в дальнейшем синтетическа лизинсодержаща среда). Посевным материалом служит культура
микроорганизмов, выращенных на поверхности скошенного м сопептонного агара, в течение 36 ч. Одной пробиркой со скошенным агаром засевают одну ферментационную колбу. Длительность
1310427
культивировани 55 ч. В процессе культивировани рН не поддерживают. После 55 ч роста культуральную жидкость центрифугируют, клетки промывают 0,05 М калий-фосфатным буфером рН 8,0 вновь ресуспендируют в том же буфере, разрушают с помощью ультразвукового дезинтегратора УДЗН-1 и центрифугируют . В термостатируемую чейку объемом 5 мл, содержащую 20 мМ раствор L-лизииа в калий-фосфатном буфере рН 8,0 ввод т 70 мкл грубого клеточного экстракта и измер ют скорость потреблени кислорода мембранным кислородным электродом в течение 1 мин, после чего рассчитывают активность фермента. За единицу активности ЛМО принимают то ее количество, которое расходует 1 микромоль кислорода в минуту . Полученна таким образом активкость составл ет 29,8 Е/г биомассы.
Пример 2. Культивирование продуцента провод т так же, как в примере 1,. но посевным материалом служит культура возрастом 60 ч, выращенна на синтетической агаризованной лизинсодержащей среде.
Длительность культивировани 45 ч после чего клетки обрабатываютс так же, как в примере 1. Полученна при
Редактор И.Сегл ник
Составитель И.Привалова
Техред М.Ходанич Корректор С.Шекмар
Заказ 1868/26Тираж 500Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР
по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушска наб., д. 4/5
Производственно-полиграфическое предпри тие, г. Ужгород, ул. Проектна , 4
этом активность ЛМО 30,1 Е/г биомассы .
Пример 3. Услови культивировани продуцента повтор ют услови примера 2, но дл удешевлени среды используют в качестве источника углерода и азота в синтетической среде технический лизин с содержанием основного вещества 86%. Активность ЛМО 30,1 Е/г биомассы.
Таким образом, предлагаемый штамм Pseudomonas putida В-1458 /В-20/ обепечивает повышение активности целевого продукта с 19,8 до 30,1 Е/г биомассы по сравнению с известным. В процентном отношении это означает увеличение активности на 51%. Использование технического лизина позвол ет существенно удешевить стоимость ростовой среды, а следовательно и (фермента.
Claims (1)
- Формула изобретениШтамм Pseudomonas putida ВКМ В-1458 (Всесоюзна Коллекци микроорганизмов ИВФМ АН СССР, коллекционный номер ВКМ В-1458 Д) - продуцент лизин-2-монооксигеназы.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU843806960A SU1310427A1 (ru) | 1984-10-30 | 1984-10-30 | Штамм @ @ ВКМ В-1458-продуцент лизин-2-монооксигеназы |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU843806960A SU1310427A1 (ru) | 1984-10-30 | 1984-10-30 | Штамм @ @ ВКМ В-1458-продуцент лизин-2-монооксигеназы |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1310427A1 true SU1310427A1 (ru) | 1987-05-15 |
Family
ID=21144702
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU843806960A SU1310427A1 (ru) | 1984-10-30 | 1984-10-30 | Штамм @ @ ВКМ В-1458-продуцент лизин-2-монооксигеназы |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1310427A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2376622B1 (en) * | 2008-12-12 | 2017-06-07 | CJ Research Center LLC | Green process and compositions for producing poly(5hv) and 5 carbon chemicals |
-
1984
- 1984-10-30 SU SU843806960A patent/SU1310427A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Takeda Н., Hayaishi 0. - I.Biol. Chem., 1966, v. 241, p. 2733. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2376622B1 (en) * | 2008-12-12 | 2017-06-07 | CJ Research Center LLC | Green process and compositions for producing poly(5hv) and 5 carbon chemicals |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8592198B2 (en) | Method for culturing microorganisms on a growth substrate comprising biomass obtained from methanotrophic bacteria | |
| RU2520870C1 (ru) | Штамм бактерий rhodococcus aetherivorans bkm ac-2610d - продуцент нитрилгидратазы, способ его культивирования и способ получения акриламида | |
| FI86889B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av l-karnitin pao mikrobiologiskt saett. | |
| CS224624B2 (en) | Method for producing 2,5-diketo-d-gluconic acid or its salts | |
| JPS60244295A (ja) | （十）‐トランス‐シクロプロパンカルボン酸の製造方法 | |
| SU1310427A1 (ru) | Штамм @ @ ВКМ В-1458-продуцент лизин-2-монооксигеназы | |
| RU2731289C2 (ru) | Способ конструирования на основе бактерий рода Rhodococcus штамма-биокатализатора, обладающего нитрилазной активностью и повышенной операционной стабильностью, рекомбинантный штамм бактерий Rhodococcus rhodochrous, полученный таким способом, способ синтеза акриловой кислоты с использованием этого штамма в качестве биокатализатора | |
| Igarashi et al. | Excretion of L-tryptophan by analogue-resistant mutants of Pseudomonas hydrogenothermophila TH-1 in autotrophic cultures | |
| SU1687608A1 (ru) | Консорциум штаммов бактерий РSеNDомоNаS Sp. и МетнYLовасILLUS метнаNоLоVоRUS, разлагающий метилацетат | |
| RU2177034C1 (ru) | Штамм бактерий alcaligenes denitrificans-продуцент нитрилазы | |
| KR0146493B1 (ko) | 발효법에 의한 l-알라닌의 제조 방법 | |
| JP3882961B2 (ja) | 蔗糖脂肪酸エステル合成酵素を産生する微生物 | |
| RU2069691C1 (ru) | Штамм бактерий pseudomonas putida - деструктор неионогенных поверхностно-активных веществ | |
| SU1254005A1 (ru) | Штамм @ @ @ 9-тест-культура дл определени @ -фенилаланина | |
| SU1206306A1 (ru) | Штамм @ @ м 35-продуцент @ -триптофана на этаноле | |
| SU644833A1 (ru) | Штамм 85-продуцент -аспарагиновой кислоты | |
| SU1678834A1 (ru) | Штамм бактерий РнотовастеRIUм рноSрноRеUм - продуцент L - аргининдекарбоксилазы | |
| SU1184852A1 (ru) | "шtamm _г_ш-2" | |
| Plháčková et al. | Enzymic synthesis of L-Lysine from DL-α-Amino-ε-caprolactam by new microbial strains | |
| SU1161551A1 (ru) | Штамм @ @ 2-82-продуцент пектат-лиазы | |
| RU2096451C1 (ru) | Штамм бактерий pseudomonas species, способный специфически окислять l-пролин | |
| Duménil et al. | Production of vitamin B12 by gram-variable methanol-utilizing bacteria | |
| RU2157841C1 (ru) | Штамм бактерий aсetobacter pasterianus абз-2 гкм визр n 102 для окисления углеводородов нефти и нефтепродуктов | |
| RU2081909C1 (ru) | Штамм микроорганизмов acinetobacter species 28, обладающий способностью утилизировать углеводороды | |
| SU966116A1 (ru) | Штамм бактерий рSеUDомоNаS aeRUGINoSa в-2197,используемый дл очистки промышленных сточных вод коксохимических производств от роданидов |