SU1308623A1 - Аппарат дл культивировани клеток или вирусов на микроносител х - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к биологии и может быть использовано в медицине ветеринарии и вирусологии,Целью изобретени   вл етс  повышение выхода клеток или вирусов. Аппарат содержит цилиндрическую емкость 1 с термоизол ционной рубашкой 2 и крьпп- кой 3, выполненной из стекла. Емкость 1 снабжена патрубком дл  подачи в нее через мембранный фильтр газовой смеси и патрубком дл  отбора пробы. Емкость 1 снабжена также патрубками 2Q (Л

Description

дл  заполнени  7 и слива 8 культу-- ральной жидкости. Аппарат содержит устройство дл  перемешивани  культу- ральной жидкости с микроносител ми, вьтолненное в виде перфорированного барабана 9 с крьппкой 10 и полым днищем 11. Барабан 9 снабжен сеткой 12, установленной на его внутренней поверхности и зафиксированной пружинным элементом. Емкость 1 установлена на ос х 14 и 15 в опорах 16 и 17с возможностью свободного враще

1

Изобретение относитс  к микробиологии и может быть использовано в медицине, ветеринарии и вирусологии

Цель изобретени  - повышение выхода клеток или вирусов.

На фиг. 1 схематично изображен аппарат дл  культивировани  клеток или вирусов на микроносител х,продоный разрез; на фиг. 2 - разрез А-А на фиг. 1.,

Аппарат содержит цилиндрическую емкость 1 с термоизол ционной рубащ кой 2 и крьщ1кой 3, выполненной из стекла.

Емкость 1 снабжена патрубком 4 дл  подачи в нее через мембранный фильтр-азратор 5 газовой смеси,патрубком 6 дл  отбора пробы и патрубками 7 и S дл  заполнени  и слива культуральной жидкости.

Аппарат содержит устройство дл  перемешивани  культуральной жидкости с микроносител ми, выполненное в виде перфорированного барабана 9 с крышкой 10 и полым днищем 11.Ба- ,рабан 9 снабжен сеткой 12, установленной на его внутренней поверхности и .фиксируемой пружинным элементом 13. Емкость 1 установлена на ос х 14 и 15 в опорах 16 и 17 с возможностью свободного вращени . Пола  ось 15 соединена с патрубком 18 дл  загрузки микроносителей в барабан и уплотнена в отверстии крь ки 3 посредством сальника 19. На стенке емкости 1 размещен съемный привод, состо щий из электродвигате л  20 и редуктора 21, а также магни

ни  . Пола  ось 15 соединена с патрубком 18 дл  загрузки микроносителей и имеет уплотнение 19. На стенке емкости 1 размещен съемный привод, состо щий из электродвигател  20 редуктора 21 и магнитных полумуфт 22 и 23. Аппарат посредством цапф установлен на кронштейнах 25 и с помощью черв чной пары переводитс  из горизонтального в вертикальное положение или любое промежуточное, з.п. ф-лы, 2 ил.

ных поЛумуфт 22 и 23. Емкость 1 посредством цапф 24 установлена на кронштейнах 25 и может быть снабжена механизмом поворота ее и барабана на 90, содержащим черв чную пару 26, с помощью которой можно переводить из горизонтального положени  в вертикальное или любое промежуточное .

Аппарат работает следующим образом .

В перфорированный барабан 9 вставл ют сетку 12 и закрепл ют ее пружинным злементом 13, затем устанавливают крышку 10 и закрепл ют ее винтами. Барабан 9 помещают в емкость 1 таким образом, чтобы ось

14входила в опору 16. В отверстие крышки 3 устанавливают полую ось

15с патрубком 18 и уплотн ют ее посредством сальника 19. Крышку 3 монтируют на емкости 1 так, чтобы пола  ось 15 вошла в опору 17 и через резиновую прокладку винтами закрепл ют ее на емкости 1. Патрубок 4 соедин ют силиконовой трубкой с мембранным фильтром 5.На патрубки 6 - 8 и 18 надевают силиконовые трубки с пружинными зажимами. Затем аппарат помещают в автоклав и стерилизуют 2 ч при 130°Сс После охлаждени  аппарата к нему подсоедин ют привод и устанавливают посредством цапф на кронштейны 25 в вертикальном положении, а в рубашку 2 подают воду от термостата с температурой

37 t 0,50с.

31308

При выращивании клеток емкость 1 через патрубок 7 заполн ют на 70- 80% объема культуральной жидкостью. В барабан 9 через патрубок 18 аагру- жают микроноситель. Дл  прикреплени  клеток к микроносител м аппарат находитс  в таком положении 8-16 ч, затем он с помощью черв чной пары 26 переводитс  в горизонтальное положение . При этом микроноситель с прик-/0 возможностью вращени  и снабженного

15

расположенной на его внутре верхности сеткой, а также м повороту емкости и барабана ет увеличить выход клеток и сов с единицы объема, исклю ническое разрушение микроно а также клеток и вирусов, и вать аппарат совместно с уп мым ферментом дл  промышлен

репленнымй на нем клетками опускаетс  на сетку и удерживаетс  внутри барабана 9. При вращении барабана 9, которое осуществл етс  электродвигателем 20 и редуктором 21 при помощи магнитных полумуфт 22 и 23, микроноситель переходит во взвешенное состо ние , перемешиваетс  и удерживаетс  во взвеси при частоте вращени  6- 10 об/мин. Частота вращени  регулиру-20 работки клеток или вирусов, етс  тиристорным регул тором. Контроль за процессом культивировани  осуществл етс  путем отбора проб через патрубок 6. Аэрирование провод т через фильтр 5. Культуру выращи- вают до получени  необходимой плотности клеток.

При выращивании вируса полученную культуру клеток заражают вирусом без смены среды.

Дл  этого через патрубок 18 внос т необходимое количество вирусосо- держащего материала и культивируют при посто нном вращении.

Клетки, разрушенные в результате репродукции в них вируса, отслаиваютс  с поверхности.микроносител  и переход т в культуральную жидкость. Сбор вирусосодержащего материала производитс  через патрубок 8.

Дл  извлечени  микроносителей из барабана 9 емкость 1 на 1/2 объема заполн ют физиологическим раствором и при помощи черв чной пары 26 перевод т в-положение крышкой вниз.Мик30

35

40

Claims (2)

1. Аппарат дл  культивир клеток или вирусов на микро содержащий герметичную цили кую емкость, снабженную аэр и устройство дл  перемешива туральной жидкости с микрон ми,- отличающийс  с целью повьшени  выхода кл или вирусов, устройство дл  вани  культуральной жидкост роносител ми вьщолнено в вид рированного барабана, устан с возможностью вращени  и сн го расположенной на его вну поверхности сеткой,при эхом сители размещены внутри бар

2. Аппарат по п. 1, отл ющийс  тем, что, с цел шени  прикреплени  клеток к сител м, аппарат снабжен мех 45 поворота емкости и барабана

роносители опускаютс  на конусную проточку крышки 10 и через ползто ось 15 и патрубок 18 удал ютс  вместе с раствором из барабана 9.

Наличие в аппарате дл  культивировани  клеток или вирусов на микроносител х устройства дл  перемешивани , выполненного в виде перфорированного барабана, установленного с

расположенной на его внутренней поверхности сеткой, а также механизма повороту емкости и барабана позвол ет увеличить выход клеток или вирусов с единицы объема, исключив механическое разрушение микроносителей, а также клеток и вирусов, использовать аппарат совместно с управл емым ферментом дл  промышленной наработки клеток или вирусов,

работки клеток или вирусов,

Формула изобретени 

1. Аппарат дл  культивировани  клеток или вирусов на микроносител х, содержащий герметичную цилиндрическую емкость, снабженную аэратором, и устройство дл  перемешивани  культуральной жидкости с микроносител ми ,- отличающийс  тем,что, с целью повьшени  выхода клеток или вирусов, устройство дл  перемешивани  культуральной жидкости с микроносител ми вьщолнено в виде перфорированного барабана, установленного с возможностью вращени  и снабженного расположенной на его внутренней поверхности сеткой,при эхом микроносители размещены внутри барабана.

2. Аппарат по п. 1, отличающийс  тем, что, с целью улучшени  прикреплени  клеток к микроносител м , аппарат снабжен механизмом поворота емкости и барабана на 90.

фиг.г

Редактор А.Козориз

Составитель Л.Смирнова Техред Л.Сердюкова Корректор С.Черни

Заказ 1774/21 Тираж 500Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 1130.35, Москва, Ж-35, Раушска  наб., д. 4/5

.Производственно-полиграфическое предпри тие, г . Ужг ород, ул. Проектна , 4