SU1274621A3 - Способ получени производных простагландина - Google Patents

Abstract

Изобретение касаетс  . гландинрв, в частности производных простациклина общей формулы I СН2 СНг Сн/ cfii бн ж-СН. ,S%$H2CH2 ™« ™ где R - фармакологически приемлемый катион, которые как обладающие антиагрегирующим действием на тромбоциты могут быть использованы в медицине . Дл  вы влени  фармакологической активности у соединений указанноСО го класса получены новые соединени  I. Процесс ведут путем дегидродегалоидировани  соответствующего производного 5 -йод-9-деокси-6, 9о1-эпоксипростагландина F. основанием, с последующим при необходимости гидрого лизом сложноэфирного производного в присутствии основани .Соединени  I i4 обладают сильным противоагрегирукпцим действием в отношении тромбоцитов, а Oi ю также  вл ютс  сосудорасшир ющим веществом .

Description

см Р зобретение относитс  к способу получени  новых производр{ых класса простациклина, именно к производным простагландина RlOOC где RJ - фармакологически приемлемый катион, обладаюпщх р дом ценных фармакологических свойств, Цель изобретени  - получение новых производных класса простациклина обладающих преимуществами в фармакологическом отношении перед природными простагландинами. II р и, м е р 1 . Перемешанный раствор PGF о сложнбго метилового эфира (50 мг) в простом эфире (1 мл) обрабатывают 115,0 мг (10 мл. экв.) бикарбоната -натри  и 1 мл воды, затем по капл м в течение 2 ч ввод т в вод ный раствор трехйодистого кали  (0,7 мол рный, 0,261 мл). После перемешив ни  в течение 8 ч реакционную смесь встр хивают с простым эфиром и водным раствором тиосульфата натри ; эфирную фазу отдел ют, промывают водоЙ8 сушат над сульфатом магни  и упаривают с получением желтого остат ка метилового сложного эфира 5 -йод -9-деокси-6, 9 о(-эпоксипростагланди на F, . Раствор .метилового сложного эфира 5 -йод-9-деокси-6f, 9«-эпоксипростагландина F (100 мг) в метанольном метилате натри , приготовленном из 46 мг натри  и 0,70 мл сухого метилового спирта, оставл ют в атмосфе ре сухого азота на 5 ч и затем вы- , дел ют из растворител  в высоком вакууме . Полученное аморфное твердое вещес во промывают в бензоле,выдерживают на воздухе 8 ч.и перемешивают с нормальным водным раствором гидроокиси натри  (0,5 мл) с получением суспензии бесцвет ных мелких кристаллов игольчатой формы Кристаллы собирают , промывают несколькими капл ми нормальной водной гидроокиси натри , сушат на воздухе с получением натриевой соли 9-деокиси-6 ,,9 ci -эпокси- Л5-простагландина F, « Были сопоставлены подавление 21 агрегации тромбоцитов человека, обусловленной арахидоновой кислотой, при концентрации 0,2 нг/мл этой соли и ее нестабильность в воде в кислой среде, а также другие данные с соответствующими свойствами натриевой соли (5г)-5,6-дидегидро-9-деокси-6 ,91А-эпоксипростагландина F . 13с ЯМР спектр с высоким разрешением раствора кристаллов в диметилсульфоксиде-ёр показал наличие ожидаемых 20 резонансньгх полос, причем эти химические полосы полностью согласуютс  с химической структурой, установленной дл  простациклина.Никаких примесей не обнаружено. И р и м е р 2, Метиловьш сложный эфир 5 -йод-9-деокси-6, 9 о(-эпоксипростагландин F (500 мг) перемешивают с метилатом натри , полученным из 0,23 г (10 мол.экв.) натри  и 3,5 мл метилового спирта,,в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 8 ч. К желтому реакционному раствору добавл ют однонормальный раствор гидроокиси натри  (2,5 мл), тем сам1з1М вызыва  гидролиз, эфирной части, и спуст  2 ч в вакууме испар ют при комнатной температуре метиловый спирт. Из оставшегос  водного раствора спонтанно вьщел етс  масса бесцветных тонких игольчатых кристаллов требуемой соли натри  (формулы 1 : R На). Ее охлаждают , собирают, про1 штают умеренно однонормальной водной гидроокисью натри , сушат на воздухе и хран т в пробирке, закрытой пробкой. Полученна  соль (.38: мг) имеет i)f(KBr диск) 1692 см () и двадцать 13с Р зонансных полос наблюдают (при 182,7 (С-1), 158,2 (С-6), 140,0 и 134,3 (С-13), 14, 100,7 С-5, 87,5 (С-15) 80,6 и 75,5 (С-9), 11 8,0 (С-12), 49,0, 45,8, 42,4, 41,9, 37,5, 35,8 (С-18), -31,6, 29,9, 29,3, 26,7 (С-19) и 18,4 (С-20) частей на миллион из TMS в димeтшIcyльфlOкcидe-dg. Продукт натрий (52)-5,6-дидегидро-9-деокси-6 ,9сА -эпоксипростагландин F (синтетический натрийпростациклин) полностью подавл ет агрегацию тромбоцитов , вызываемую арахидоновой кислотой (в человеческой плазме, обогащенной тромбоцитами) при 1 нг/мл, и его профиль биологической активности на аорте кролика, брюшной аорте кролика , полоске желудка крысы и толстой кишке крысы совпадает с тем, который отвечает натрийпростациклину, полученному биосинтезом. После сушки на воздухе получают соль, покрытую карбонатом натри  (примерно 3,5 вес.%) который защищает винилэфирную часть от гидролиза, катализируемого углекислым газом. ПримерЗ. В течение нескольких часов при комнатной температуре метиловый сложный эфир 5Г-йод-9-деокси-6 , 9с -эпоксипростагландина F. обрабатывают 1,5-диазабицикло-5-ноне ном (ДБН). ДБН и йодистый водород удал ют адсорбцией на колонке SiO, приготовленной из суспензии SiOj в Et OAc/EtjN 50:1, и виниловый простой эфир элюируют такой же раствор кицей системой. ИК спектроскопией на тонкой пленке установлено: тах 1738 () и 1696 см(). Н ЯМРв Cgflg-EtjN 19:1;4,22 триплет триплетов 12, g 6,9 и 1, G Гц (С-5 виниловый протон) и С ЯМРв Cgflg-EtjN 19:1 характерньм признаком  вл етс  резонанс при 159,8 С-1, 155,8 (С-6), 137,2 и 130,6 (C-13,i4), 95,3 (С-5, 84,1 (С-15), 77,3 и 72,2 (С-9, 11) и 51,1 (метиловый сложный эфир) частей на миллион из ТМС. Метиловый сложный эфир винилового простого эфира (5Z)-5,6-дидeгидро-9-дёокси-6 , 9с1-эпоксипростагландина гидролизуют водным раствором гидроокиси натри  с получением натрийпростациклина (формулы I с R-натрием ) . Было установлено, что микросомы, получаемые из различных тканей млекопитающих , катализируют ферментативное превращение простагландинэндо перекисей в производное простагланди на (в дальнейшем именуемое простацик лином), которое не вызьшает сжати  аорты кролика, вызывает расслабление полосок брюшной, брыжечной и коронар ной артерий, обладает сильным протиВоагрегирукщим действием в отношении .тромбоцитов,  вл етс  сильным сосудо расшир ющим препаратом в отношении всех животных. Микросомы, приготовленные из кровеносных сосудов кролика или свиньи (вен и артерий) и из дна желудочкакрысы , вызьшают примерно 80-90%-ное превращение простагландинэндоперекисей . Ми {росомы, приготовленные из легочной ткани кролика и пиролисной ткани крысы, вызывают 25%-ное превращение простагландинэндоперекнсеи. в то врем  как микросомы, полученные из почкц, мозга, селезенки, печени, сердца, и семенных пузырьков крысы, вызывают 5%-ное превращение или даже более низкую степень превращени простагландинэндоперекисей . Простациклин в водной среде при комнатной температуре нестабилен, имеет период полупревращени ,равный примерно lO мин.. Однако противоагрегирующа  активность простациклина может сохран тьс  в течение нескольких дней при его. растворении в водно щелочи или сухом ацетоне и хранении раствора при -20°С. Антиагрегирующа  активность простациклина в 10-40 раз выше, чем активность PGE , и в 5- 20 раз вьше, чем у PGDj, который сам по себе  вл етс  сильным ингибитором агрегации тромбоцитов. Простациклин может быть получен биосинтетически инкубированием PGGj или PGHj с микросомами аорТы в под .ход щем буферном растворе, например, трис-буффере, примерно в течение 2 мин при температуре примерно 22°С. Превращение простагландинэндоперёксией составл ет 85%. Экстракци  простациклина достигаетс  добавлением к инкубированной смеси холодного () сухого серного эфира. При добавлении холодного эфира ферментативна  реакци  прекращаетс  и Простациклин переходит в эфирную . фазу. Последн   может быть отделена от водной фазы. Выпариванием простого эфира, осуществл емым стандартными методами, например, пробулькиванием азота через раствор, может быть получен Простациклин в виде остатка, который в дальнейшем может быть суспендирован в водном растворе дл  дополнительной проверки или растворен в безводном ацетоне и сохранен при -20°С дл  последующего использовани . Микросомы аорты, примен емые в смеси , котора  подвергаетс  инкубированию , может быть экстрагированы из аорты свиньи или кролика. Аорты могут быть заморожены в жидком азоте и затем .измельчены до порошкообразного состо ни . Полученный порошок суспендируют в подход щем буферном растворе и затем гомогенизируют. Гомогенат затем подвергают центрифугированию с целью выделени  микросомной фракции, которую могут суспендировать в деионезированной воде и лиофилизовать . Путем регулировани  агрегации тромбоцитов человеческой ( крови в агрегометре Борна (см. чертеж ) . бьшо показано, что инкубированйа  смесь оказывает пр мое противоагрегирующее действие.

Claims (1)

1. Простациклин может быть получен существенно аналогичным способом при использовании других тканей, идентичных указанным вьше. По-видимому,полу чаемый в такой инкубационной смеси Простациклин отличаетс  от -других -. продуктов простаглаИдинэндоперекисей описанных ранее. По своему биологическому эффекту, оказываемом: на вы деленные ткани, нестабильности и по сильной противоагрегирующей активнос ти Простациклин отличаетс  от PGE или PGFj, . Описано присутствие в гомогенатах некоторых тканей простагландин-Dj-иэомеразы . Поскольку простациклин  вл етс  нестабильным соединением и обладает более сильной противоагрегирующей -активностью, чем это Соединение не может быть PGDj. Более того, простагланднн-Ва-изомераза нуждаетс  в глютационе как в совместно действующем факторе, и инкубирование провод т в отсутстви совместно действующих факторов, PGEj PGF2o и FGDj не  вл ютс  субстрата ми микросом аорты и,, следовательно, 15-кето-простагландины и другие продукты простагландинового катаболизма не могут рассматриватьс  как простациклин . Простациклин и его соли также ока зывают сосудорасшир ющее ; действие на кровеносные сосуды и, следователь но, могут использоватьс  в качестве противогипертонических препаратов дл  млекопитающих, в том числе и человека . Тромбоциты могут быть ассимилированы сосудистым эндотелием или внедрены в эндотелиальные клетки. Биохимическое взаимодействие тромбоцитов и сосудистого эндотели  при синтезе простациклина способствует восстановлению сосудистого эндотели , следовательно, Простациклин и его соли могут также использоватьс  в качестве препаратов, ускор ющих за живление ран у млекопитающих, в част ности у человека. Простациклин и его соли могут примен тьс  вс кий раз, когда необхо димо подавить агрегацию тромбоцитов, снизить адгезионный характер тромбоцитов , а также дл  лечени  и дл  предотвращени  .образовани  тромбов у млекопитающих, в том числе у людей. Например, они могут примен тьс  при лечении и профилактике инфарктов миокарда , при лечении заболевани  периферических сосудов, дл  лечени  и профилактики послеоперационных тромбозов , дл  стимулировани  раскрытого осто ни  сосудистых трансплантатов хирургии и дл  лечени  осложнений артериосклероза и состо ний, таких как атеросклероз, нарушений кровесвертьшани , вызванньк липемией, и ДРУг клинических состо ний, в которых основна  этиологи  ассоциируетс  с липидным разбалансом или гиперлипидемией . Эти соединени  также могут примен тьс  в качестве добавок к крови, к продуктам крови, кровезаменител м и другим жидкост м,которые используютс  при искусственной циркул ции вне организма и кровеснабжении изолированных частей тела, например, конечностей и органов, независимо от того, соединены ли они с донорньи организмом, отделены и хран тс , приготовлены дл  трансплантации или прикреплены к реципиенту. При указанных циркул ци х и кровеснабжении агрегатированные тромбоциты стрем тс  закупорить кровеносные сосуды и части циркул ционной аппаратуры. Такой закупорки можно избежать в присутствии простациклина. Дл  указанных целей Простациклин или его соли могут добавл тьс  постепенно или однократно или несколькими отдельными порци ми в циркулирующую кровь, в кровь донорного животного, в отделенную часть тела, св занную или несв занную с реципиентом, или во все перечисленные органы при суммарной посто нной дозе 0,001-10 мг на литр циркулирукщей жидкости. Особенно целесообразно примен ть Простациклин в лабораторной практике на кошках, собаках , обезь нах, кроликах и крысах при отработке новьв: методов и техники трансплантации органов и конечностей . Дл  достижени  терапевтического эффекта примен емые количества простациклина или его солей (в дальнейшем именуемых активными компонентами ) мен ютс  в зависимости от схемы лечени . Обычно дл  млекопитающих приемлемые дозы лежат в пределах 0,01-200 мг на 1 кг веса, желательно в пределах 0,01-10 мг/кг. Хот  активный компонент может вводитьс  неочищенным, желательно использовать его в виде фармацевтических составов. Предпочтение отдаетс  неводным и негидроксильным составам , но возможно применение щелочных водных растворов. Разова  доза состава содержит от 0,5 мг до 1,5 г активного компонента. Формула изобретени  Способ получени  производных простагландина общей формулы I iH где Rj - фармакологически приемлемый катион. от един где Кз-С 20 где кил ;вани вых личающийс  тем, что соение общей формулы II н он X - йод; У - группа OR.J , где -Сц- алкил или фармакологически приемлемый катион, подвергают дегидродегалоидированию основанием, к полученное соединение, У - группа OR , где ,,-anгидролизуют в присутствии осно  с последующим выделением целепродуктов .