SU1251908A1 - Способ определени скорости реакции агглютинации - Google Patents
Способ определени скорости реакции агглютинации Download PDFInfo
- Publication number
- SU1251908A1 SU1251908A1 SU833679327A SU3679327A SU1251908A1 SU 1251908 A1 SU1251908 A1 SU 1251908A1 SU 833679327 A SU833679327 A SU 833679327A SU 3679327 A SU3679327 A SU 3679327A SU 1251908 A1 SU1251908 A1 SU 1251908A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- reaction
- agglutination
- suspension
- incubation
- determining
- Prior art date
Links
Description
1
И.«)б|Н u-iini огиоситс к мелнцине, а ичччик) к .;1()гии, и может быть ис- III 1,11, iDHinio iipii опреде-тении i-pyiiiioHOH и lui.ioHoii припал,к жносги крови, а также дл шчмедоваии антшччюв поверхности мпкро- оргаии (Moii.
Це 11) и (Обретени повышение точио- eiM способа с |)ди()в|)еме11Н1 1м сокращением времени ,, 1И ia.
1.)и способе О111)елелени скорости реакции к.иточиой aiчмютииации, включающем добавление к суспенчии клеток агглютинина , инкубацию смеси с измерением оптической плотности суспенчии до и носле инкубации, онтическук) плотность измер ют иослеловате, и)НО нри двух значени х длины ио,ти1)1 света в интервале 450 1100 нм, а скорость )еакннн а1 1МК)гина11ИИ он)едел - н и по 1|)ормуле
v зсо. Г- 1ц(1),/1).)/1к(
4 1 1- 19
г
(Di /Dn/lR(A2/.i
где 1)| и I)j оптическа плотность сусиеп- зии, измер ема при значени х длины волны соответственно А и Л2 до инкубации; I); и 1) ;,опгическа плотность сусненЗИН , измер ема при указан- HI.IX значени х длины вол1п 1 нос le инкубации; .BjH MH инкубации ,
,1. 1М систем пени мептированных клеток и iii iiKiKni cinn.ix днснерсионных сред нитер- Г..1, iiiiii iui,iH )г равиым 450 ti Jii ip. i. ,1 1,1 э|)н 1-роцитов 790 1100 нм. ),п1 v4i T пзменепи коуффи- lutvuia, рас14 ии сшта и радиуса частиц при ai: ,110: инаиии ос шествл етси но вс личи
,.,),
- I
(2.)
/Ч
K iropavi завис г o s )азмера и пока;(аге, 1 пре, ,1еии частиц, по пе зависит от их коп- неп грации, 11)И увеличепии ра;)мера частиц оптическа п,1()ТН()сгь к, 1еточных cyciien;uni становитс ве,1Т1чиной, относите.чьио слабее завис ше oi д,1ины волны СЕК та, Поэтому 11 ;1 01К ссе arr,-iK)THHaiuiH к,:|еток 1араметр 11 меиыпаетс .
( iioc()6 осу1цес 1вл етс с,тедук)1цим обра iONi ,
К рас1ВО()у агг,тк)ТИ11Ина в 0,15 Л раство- pi .l добавл ют такое количество кониенгрировапн()11 (N пор дка И) см ) к,1егочп()11 B;iBeui, что начальное ; Иачение оп () n,;ioTH()CTH получеиной суспеп- зии к, ПС превышает 0,7 во всем диапазоне длин во,1н. Культура клеток иредвари- те, 1ьно (пмывают физиологлшеским раствором , а эритроциты обрабатывают трипсином. Оигичеекую плотность и; мер к)т через каждые 5 10 мин в течение времени инку- багги. с(1с ; ав, 1ЯЮ1цег() 20 60 мин. Пе)ед и;(
мерением суспензии к,четок 1е)емен1ивак)т в лечение Л(} НО с встр хиваиием кюветЬ) е клеточно1 в:(весью либо с исиоль:и)ванием магнитной меп1а,;:ки. Измерени провод г на спектрофотометрах и,т и ко,:|ори метрах; ФЭК , ФЭК ()0, (Ф 2f) и т, и. При ис- поль;1овации спектрофотометров (,Ф 4, (Ф 2В целесообразио неред фотоЬ1лемен- том помещать круглую диафрагму с отверстием диаметром 2 3 мм д:1И снижени :)(1фекта ма.1оуглово1 о рассе ни евета. Опыты провод т в стандартньгх кк;1ветах толщи- пой :5, 5, К), ,40 и 50 мм, которыми комплектуютс указанные нриборы, /1л контрол провод т измерени суснензий, 11о,11ученных при тех же услови х в 0,10 М Na(J бе i ai- г, 1Н)гинина,
По результатам измс рений оигической 1г:|о 1ности на iTanax пикубации опррсдел ют
параметр
f/i
12 1ц(1). :1 1;Ьд(;1, Л/1 U/ 1 -- 100 i i / -Д )
2 |a(Dr:ПЛ: lt(Л- Л, J
V
прс дставл ющии со()ои до, 1К) ai pei aTOB клеток , об()а;(;вавп1ихс к данному момецгу в)е- меии, от об1цего числа частиц в елинице обьема к,теточ}1ой взвес и до начала тинации. Интерна. в) 1, .ib;iye- мь1Й в фо)муле (1), и соответс вуюпше ему значение Р и - онределикп по )езу, 1ьга- там оцепки ; ависимос гн Р от в()емени инкубации 1 и выбирак)Т )авным максима,)11 величине временного иите|)вала, в котором параметр Р практически iiponopn uina, ieH нременп инкубации.
Пример . Исс,:|едуК)Г реакцию агг, 1К)Гинации микробных к,теток Azospirilliitri hrasi- leiise sp. 7 под действием лект ина пшеницы, 1 качестве iipeiiajiaT a .пектина ncno,ib.ui)T :( MVM Koii iipoBoii nniennm, ( аратов- ска -52, но, 1уч1Чцц.1Й экстра ирова11ием муки С1)еднсто помола 0,05 NHCJ, ко)|цептраци
белка 0,5 мг/мл. К pacTBcjpy ,1ект 11на в ра:1вед(Ч{ни 1;32 добав, 1ЯН)т концент |1ирован- ную ( 10 см ) взвесь к,н ток в количестве , достаточном л,1 но, 1уче11и значений оптическ()11 плотности суспепзии не 6(),ice 0,7 во в(.-ем выбранном диапазопе д, 1ип
вoлtl, Измерени провод т на спектро|})ото- меграх (-Ф 4, или С.Ф 2 в кюветах t рассто нием межлу стенками 10 мм, помеща перед ())отоэлеме1ггом диа(рагму с круг ,тым отверстием диаметром , 5 мм. Дл иск,1К)- чеии : ф1}и кта 1 едим(Ч1тации клеточных aifie- гатов кюветч с микроорганизмами вст 1Яхи- неред и;шерени ми в течение , с. ()итическ ю inoniocTb и;5мер к)т на д,1И- нах 1и.)лн 450 и 620 нм. По ре;1ул1/татам измерений и оценки .зависимости F от временн инкубации ()преде,т ют иите)1и1,т в|)е- мени t 20 мин и рассчитьшают скорость )еакции ai г.тютзшации , i9-±; 0,3 мин по фо|)му,Т1 ( I I.
В таблице приведена зависимость овти- ческих и структурных параметров суспензий Ax.uspirillum brasilense sp. 7 от времени инкубации с экстрактом пшеницы, содержащим лектин.
Способ дает информацию о ранних специфичных стади х реакции агглютинации, когда эффект седиментации еще не наблюдаетс . Врем считывани результатов реакции сокращаетс до 20-40 мин.
Повышение точности способа иллюстрируетс следующим образом.
Изучена лектинова активность сортов пшеницы к эритроцитам кролика. Скорость
Р У реакции агглютинации
I, М и hi
t 20 .мин) дл сортов пщеницы СаратовО
,860,390,217О
1,820,400,22430
60
84
ска -52, Саратовска -29 и (арат()вска -41 равна соответственно 4,7; 1,8 и 0,3.
Одновременное определе}1ие скорости реакции агглютинации при однолучевой фотометрии но времени снижени оптической плотности на 50% от первоначаьпой ве.ш- чины (t 150 мин) дало значение 0,00,3 дл всех трех сортов ншеницы, т.е. точность метода однолучевой фотометрии не нозво- л ет вы вить различи в содержании лекти- на.
Таким образом, использование предлагаемого способа определени скорости реакции клеточной агглютинации иозвол ет с высокой точностью количественно охарактеризовать наиболее ранние и снецифичные с;а- дии реакции агглютинации и сократить в 3-5 раз врем анализа.
60
84
Claims (1)
- СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СКОРОСТИ РЕАКЦИИ АГГЛЮТИНАЦИИ, включащий добавление к суспензии клеток агглютинина, инкубацию смеси с измерением оптической плотности суспензии до и после инкубации, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, оптическую плотность измеряют последовательно при двух значениях длины волны света в интервале 450—1100 нм и по отношению этих величин времени инкубации определяют скорость агглютинации.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU833679327A SU1251908A1 (ru) | 1983-12-27 | 1983-12-27 | Способ определени скорости реакции агглютинации |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU833679327A SU1251908A1 (ru) | 1983-12-27 | 1983-12-27 | Способ определени скорости реакции агглютинации |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1251908A1 true SU1251908A1 (ru) | 1986-08-23 |
Family
ID=21095423
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU833679327A SU1251908A1 (ru) | 1983-12-27 | 1983-12-27 | Способ определени скорости реакции агглютинации |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU1251908A1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0269526A2 (en) * | 1986-11-28 | 1988-06-01 | Shimadzu Corporation | Method of quantitative determination of antigens and antibodies |
-
1983
- 1983-12-27 SU SU833679327A patent/SU1251908A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Никитин Ь. М. Справочник методов иммунологии.Кишинев, 1982. с. 180. fhamhi-Dorai D. et al. BiO(hem. Biophus, Res. Comm . 1982, 104, № 11, p. 141. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0269526A2 (en) * | 1986-11-28 | 1988-06-01 | Shimadzu Corporation | Method of quantitative determination of antigens and antibodies |
EP0269526A3 (en) * | 1986-11-28 | 1990-07-04 | Shimadzu Corporation | Method of quantitative determination of antigens and antibodies |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Darzynkiewicz et al. | Cell heterogeneity during the cell cycle | |
US4584277A (en) | Fluorescent multiparameter particle analysis | |
US3990851A (en) | Process and device for measuring antigen-antibody reactions | |
US3971952A (en) | Method of detecting abnormal behavior of mammalian cells | |
Zidovetzki et al. | Microaggregation of hormone‐occupied epidermal growth factor receptors on plasma membrane preparations. | |
Shen et al. | HECTD1 controls the protein level of IQGAP1 to regulate the dynamics of adhesive structures | |
Harris et al. | The conformational basis of energy transduction in membrane systems: V. Measurement of configurational changes by light scattering | |
SU1251908A1 (ru) | Способ определени скорости реакции агглютинации | |
US4503149A (en) | Method of microbial assay | |
EP0075379A1 (en) | Competitive protein binding assay on a surface | |
Chu et al. | The role of intracellular pH and its variance in low pH sensitization of killing by hyperthermia | |
CA1223197A (en) | Immunoassay | |
Karstens et al. | Expression and serum levels of the neural cell adhesion molecule L1-like protein (CHL1) in gastrointestinal stroma tumors (GIST) and its prognostic power | |
NZ234556A (en) | Optical measurement of cell concentration during fermentation process | |
FR3024237A1 (fr) | Methode de determination du profil de structure d'un caillot de fibrine, refletant sa stabilite, pour predire le risque de saignement, de thrombose ou de re-thrombose | |
Schapendonk et al. | Salt-induced absorbance changes of P-515 in broken chloroplasts | |
US4687336A (en) | Measurement of optical density via nephenometry | |
Inbar et al. | A method for the quantitative detection of human acute lymphatic leukemia | |
CA1305024C (en) | Method for measuring polarized fluorescence emissions | |
Tomov | Pyronin G as fluorescent probe for quantitative determination of the membrane potential of mitochondria | |
Nithipatikom et al. | Homogeneous immunochemical technique for determination of human lactoferrin using excitation transfer and phase-resolved fluorometry | |
Verkman et al. | Hormonal regulation of Cl transport in polar airway epithelia measured by a fluorescent indicator | |
Higuchi et al. | Novel blood typing method by discrimination of hemagglutination and rouleaux using an erythrocyte aggregometer | |
CN110672499B (zh) | 一种Annexin V凋亡检测的阳性质控液及其制备方法 | |
Baier Jr | An analysis of photoelectric instruments for measurement of turbidity with reference to serology |