SU1210383A1 - Способ выделени несимбиотических азотфиксирующих микроорганизмов - Google Patents

Description

Изобретение относитс  к почвенной микробиологии, в частности к способам вьщелени  несимбиотических азот- фиксирующих микроорганизмов.

Цель изобретени  - разработка спо соба выделени  несимбиотических азот фиксирующих -микроорганизмов, позво- л кицего выделить азотфиксирующие мик роорганизмы, относ щиес  не только к группе Spirillum lipoferuin, но и к другим группам, и, что самое главное , вьщел ть только наиболее активные микроорганизмы-азотфиксаторы путем подавлени  роста неактивных и малоактивных микроорганизмов.

Пример осуществлени  способа.

Различные представители злаков (овс ница, кострец, райгррас, м тлик ценхрус, рис и др.) выращивают в услови х стерильного лабораторного опыта при нормальном освещении. Растени  высаживают проросшими просте- рилизованными семенами (30%-на  перекись водорода в течение 20 мин) в большие пробирки с вермикулитом и средой Красильникова-Корен ко сле- дукнцего состава (Микробиологи , 1940 9, 1.27), г/л:

1,0 1,0

0,2

Следы

Вода дистиллированна До 1 л . рН6,2-6,4 с добавлением микроэлементов по Федорову, Через сутки растени  заражают разведени ми (1 г-ЮО) почв с различной степенью биологической активности. Через 20-22 дн  корни растений отмывают в стерильной воде растирают стерильно в ступке и гомо генаты корней добавл ют в жидкую модифицированную среду Доберейнер ,

5

0

5

0

ti

следующего состава (Barber Z, b et al. Appl. ап(4 Environ, Microbiology 1976, 32, 1.108), г/л:

0,4 0,1 7H 0

2

KjHPO MgSO, NaCl CaCl,

Яблочна  кислота

0,2 0,1

-20,02

FeClj0,01

NaMoO . 2H 00,002

3,6 0,013

0,1%-ный спиртовой раствор бромтимол- блау5 мл

Вода дистиллированна  До 1 л рН6,5-6,6 После 4-суточной инкубации при 26 С определ ют видовой состав микро- Флоры высевом на твердую модифицированную среду Доберейнер (идентична указанной жидкой среде, но содержит также 2% агара). При рассеве гомоге- ната корней на твердую модицифиро- ванную среду Доберейнер вырастают колонии 4-12 видов микроорганизмов, а не 200-300, как при обычных способах, причем все выделенные микроорганизмы - активные азотфиксаторы.

Предлагаемым способом с корней растений выдел ют активные азотфиксирующие микроорганизмы, относ щиес  не только к семейству Spirillaceae (род 5 Aguaspirillum, род Azospirillum), но и коринеформные бактерии (род Arthrobacter, род Corynebacterium), представители семейства Enterobacte- riaceae (род Erwinia) и другие, еще 0 неидентифицированные бактерии. Вьще- ленные микроорганизмы про вл ют азот- фиксирующую способность как в чистых культурах, так и в ассоциаци х с растени ми (см. таблицу).

31210383

Азотфиксирующа  активность корневых микроорганизмов

Agrobacteriura sp Erwinia sp Arthrobacter sp Corynebacterium sp Azospirillum sp Aquaspirillum sp Azospirillum sp

Составитель Л.Чибисова Редактор И.Тимонина Техред л.Олейник

Заказ 7925/1 Тираж 430

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушска  наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предпри тие, г. Ужгород, ул. Проектна , 4

22,30

20,23

56,67

15,86

7,93

6,95

28,93

Корректор Е.Рошко

Подписное

Claims (1)

1. СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ НЕСИМБИОТИЧЕСКИХ АЗОТФИКСИРУЮЩИХ МИКРООРГАНИЗМОВ путем выращивания растений, отделения корней, промывания, измель чения и внесения их в элективную питательную среду, инкубирования с последующим выделением:азотфйксирующих микроорганизмов из среды, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности способа, выращивание растений осуществляют путем проращивания в течение суток семян, обработанных перекисью водорода на среде Красильникова-Кореняко с вермикулитом с последующим добавлением в эту среду разведений почв и выращиванием растений 20-22 дня, а в качестве питательной среды для инкубирования измельченных корней используют среду Доберейнер.

   GO