SU1182051A1

SU1182051A1 - Политрипептиды,обладающие энантовой селективностью в реакци х гидролиза @ -нитрофениловых эфиров карбобензокси - @ - и @ -аланина

Info

Publication number: SU1182051A1
Application number: SU843734282A
Authority: SU
Inventors: Ширинбек Халикович Халиков; Мехри Ишановна Бердыева; Рахматулло Валиевич Валиев; Мардон Мавлонович Собиров; Сергей Дмитриевич Варфоломеев
Original assignee: Таджикский государственный университет им.В.И.Ленина; МГУ им.М.В.Ломоносова
Priority date: 1984-04-28
Filing date: 1984-04-28
Publication date: 1985-09-30

Abstract

Политрипептиды общей формулы Н-(А-В-С)„ -ОН, тн A.- NH-CH--CO-I -NH-CH-CH-CO:нг ; СНз f-f fl tlH x CH B- - IH-CH-CO- или -HH- CH-COCH CWCHj-CeH OH C-IIH-CH-CO (СИЛ COOH. , c мол1м. 6500-10000, обладающие энантовой селективностью, в реакци хгидролиза ц -нитрофениловых эфиров карбобензокси- О и L -аланина.:

Description

Изобретение относитс к химии полимеров, а именно к политрипептидам , обладающим энантовой селективностью в реакци х гидролиза п -нитрофениловых эфиров карбобензокси-Dи I, -аланина и используемых в качест ве катализаторов дл разделени рацемических аминокислот на оптичес кие антиподы. Целью Изобретени вл етс повышение энантовой селективности полипептидов . Изобретение иллюстрируетс примерами , в которых использованы следующие сокращени : t-Boc - третбутилоксикарбонил/ 0-NPS - ортонитрофеннпсульфенил ОТср - 2,4,5-трихлорфениловьш эфир, Bzl - бензил{ D1-IF - диметйпформамид; DCC - дициклогексилкарбодиимид; EtjN - триэтиламин; P-NFA - паранитрофенилацетат{ EtoAC - этилацетат Z -1сарбобензоксИ} Ala-L - аламин Ser-L - серии , His-L - гистидин; Tyr-L - тирозин; GIn-L - глута,минова кислота; ONP - паранитрофениловый .эфир; С - концентраци ; S - концентраци субстрата; Е - концентраци политрипептида Tfa - трифторуксусна кислота; К - константа первого пор дка скорости расщеплени субстрата; Кл - условна константа второго пор дка скорости расщеплени субстр та. Пример. Boc-Tyr(OBzI)-GIu(JBrI)OTcp (I К охлажденному до раствору 2,5 г t-Boc-Tyr(OBzI)-OH и 3,6 г DCC в 20 мл тетрагидрофурана при перемешивании добавл ют 3 г HCI GIu(BrL)-OTcp и 0,66 мл EtjN. При этой температуре смесь перемети вают 2 ч, затем оставл ют на 16 ч при комнатной температуре, выпавший осадок отфильтровывают, фильтрат упаривают в вакууме досуха. .Остаток раствор ют в EtoAC и промывают5%-нь1 раствором лимонной кислоты, водой, 0,5%-ным раствором соды,водой. Сушат над Naj SO .Фильтрат упа)иваю 1 2 в вакууме досуха. Получают 4,36 г сырого продукта (I) с выходом 95%, + 6,94 (С 4 ЭА) RrA 0,96, 0,76. Пример 2. Tb.H.-Ty((y8ze -oTcp (и) к раствору 4,3 г продукта (I) в 15 мл добавл ют 2 мл ( 1,5 экв) Tfa, энергично перемешивают в течение 40 мин при 20°С. Растворитель упаривают досуха под вакуумом. Избыток Tfa удал ют обработкой бензолом. Остаток обрабатывают абсолютным эфиром. Получают 4,8 г сырого продукта (II) с выходом 80%, (С 4, ЭА) RjA 0,64; R В 0,9. Пример 3. t-Boc-AEa-Tyr(oB7ie,-Qeuiy6ze -OTcpIII) Синтезируют аналогично продукту (I), исход из 1 г t-Boc-AIa4)H, 1,8 г DCC, 4,1 г продукта (II), 0,673 мл EtjN. Получают 4,07 г продукта (III) -с выходом 90%. Мр - 11,1 (С 2,5 3A),RfA 0,95, 0,67. П р и м е р 4. Tfa.H-Aec«-Tyr(08ze)-G,eu(yBze)-OTcpiv) Продукт (IV) получают аналогично продукт (II), исход из г продукта (III), растворенного в смеси (2:1) хлористого метилена и Tfa при перемешивании в течение 4 ч. После соответствующей обработки получают 2,4 г продукта (IV) с выходом 78%. R.A 0,56, 0,51. П р и м е р 5. poBi) Н -Аба -Tijr(oBzE)-Geu (у Bze)n-OH (V) 1,7 г продукта (IV) раствор ют в 1,7 г DMF, добавл ют 1 г экв . Хорошо перемешива , смесь оставл ют при 20 С на 8 сут. Продукт вьщел ют обработкой смесью метанол-эфир (1:3). Вьщеленный продукт очищают диализом против смеси вода - диоксан (1:1) и лиофильно высушивают. Получают 0,89 г полимера (V) с мол.м. 8280. П р и м е р 6. Boc-Hi5(im8zel-5er-Gieu(j-e2e)-OTcp (VI) Синтезируют аналогично гфодукт (I), исход из 1,5 г t-Boc-rHis (im BzI)-Ser, 0,94 г DCC, 2,5 г 3 HCI GIu(jBzI)-OTcp и 0,64 мл EtjN Получают 2,58 г продукта (VI) с выходом 89,2%. RjA 0,36, R,B .0,72. Пример. Hce-Hi5{im82e)-5er-qeu(yBze)-oTcp(vii) к раствору4 г продукта (VI) в 20 мл абсолютного EtoAC добавл ют 3,33 мл 3 н. HCI/EtoAC. Через 1 ч продукт осаждают сухим эфиром. Осадок неоднократно промьшают эфиром. и высушивают под вакуумом. Получают 2,5 г продукта (VII) с выходом 6i4,1%, т.пл. 150°C, 0,13 Пример 8. poeuH-Hi5(m Bze -5er-Qeu(ijBaeVOH(VII Синтезируют аналогично продукту .(V), исход из 2 г HCI-His(imBzI)Ser-G u (jBzI)-OTcp, 2 мл Ш1, 0,36 мл EtjN. Получают 1,7 г полиме ра.. П р и м е .р 9. роВиН-(Аеа-Т1)Г-Аеи)„-6н (IX) 0,5 г продукта (V) раст-вор ют в 12 мл смеси диоксан-метанол-концентрированна НСК (1:1:0,25) и гидрируют над Pd чернью в течение i2 сут при 20±2 С. После вьщелени продукт (IX) диализуют против воды в течение 4 ч и лиофилизуют. Получают 0,28 г продукта. Этот продукт далее очищают гель- -фильтрацией на колонке (,0 см), заполненной сефадаксом G 25, элюант вода.Фрак ционирование провод т с помощью коллектора фракции LKB со скорост 12 мл/ч. Дл определени мол. веса продукт пропускают через откалибро ;ванную маркерными белками колонку (,0 см) с сефадексом G-50, со скоростью элюиции 12 мл/ч . Мол.м. равна 10000. Пример 10. Соединение (X) получают аналогично продукту (IX), исход из 0,6 г продукта N Ш/Ь смеси метанол - DNF (1:10) в течение 0514 |3 сут. Выход диализованного продукта против воды в течение 4 ч составл ет 0,25 г. Мол.м. определенна гель-фильтрацией на сефадексе G-50, равна 6500. Пример 11. Кислотный гидролиз соединений (IX) и (X). По 2 мг очищенных политрипептидов раствор ют в разных ампулах со стократным избытком 6 н. НОВ. Запа нные в токе азота ампулы вьщерживают при 105 С в течение 18 ч. Затем ампулы вскрывают, содержимое сушат в вакуум-эксикаторе. Остатки раствор ют в дистиллированной воде и хроматографируют на бумаге в присутствии соответствующих свидетелей . Получают следующие результаты: RjAIa - 0,31, Туг - 0,41, GIu - 0,27, RjHis - 0,08, Ser 0 ,18, GIu - 0,26. Б качестве свидетел дл сравнени величин R/ на полоске хроматографической бумаги р дом с гидролизатом нанос т соответствующие стандартные аминокислоты , в результате получены следующие величины RJ.: Ala - 0,30, Туг - 0,41, GIu - 0,26, His 0,09, Ser - 0,18. Пример 12.В кювету р объемом 0,6 мл вчос т 0,36 мл 0,1 М фосфатного буфера, рН 8,0, 0,2 мл водного раствора политрипептида с концентрацией 0,1 М (на мономерную единицу) и по 0,04 мл раствора субстратов с концентраци ми 510-з, 1-10-2 , 2. lOj, .о-2. 6«10-2, 8-10-2, 10.10-2 М. Кювету внос т в спектрофотометр и измер ют изменение оптической плотности раствора как функцию времени. При холостом опыте раствор политрипептида не внос т. Полученные значени констант приведены в табл. 1 ( рН 8,0, t 30°С). 1 В табл.2 приведена зависимость энантовой селективности от мол.м. политрипептидов. Таким образом, изобретение позвол ет повысить энантову селектийность политрипептидов.

Claims

Политрипептиды общей формулы Н-(А-В-С)_И -ОН,

А —Ш-СН-СО- ' V

СН_г

Н^н

N МН сн

В—МН— СН— СО— или⁴

I

СН_г0Н

-NH-CH-C0СН₂-С₆ЩОН

С--NH-CH-CO (сил соон с мол.м. 6500—10000, обладающие энантовой селективностью, в реакциях гидролиза η -нитрофениловых эфиров ' ' S карбобензокси- D и L -аланина.;