SU1102812A1 - Culture medium for accounting for spore anaerobic microorganisms harmful for milk production processes - Google Patents

Culture medium for accounting for spore anaerobic microorganisms harmful for milk production processes Download PDF

Info

Publication number
SU1102812A1
SU1102812A1 SU823512070A SU3512070A SU1102812A1 SU 1102812 A1 SU1102812 A1 SU 1102812A1 SU 823512070 A SU823512070 A SU 823512070A SU 3512070 A SU3512070 A SU 3512070A SU 1102812 A1 SU1102812 A1 SU 1102812A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
hydrolyzate
water
dry
milk
skim milk
Prior art date
Application number
SU823512070A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Наталья Михайловна Гостищева
Софья Натановна Карликанова
Надежда Васильевна Мартынова
Анатолий Васильевич Гудков
Геннадий Дмитриевич Перфильев
Калуст Акопович Калунянц
Тамара Алексеевна Смирнова
Original Assignee
Северо-Кавказский Филиал Всесоюзного Научно-Исследовательского Института Маслодельной Промышленности
Московский ордена Трудового Красного Знамени технологический институт пищевой промышленности
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Северо-Кавказский Филиал Всесоюзного Научно-Исследовательского Института Маслодельной Промышленности, Московский ордена Трудового Красного Знамени технологический институт пищевой промышленности filed Critical Северо-Кавказский Филиал Всесоюзного Научно-Исследовательского Института Маслодельной Промышленности
Priority to SU823512070A priority Critical patent/SU1102812A1/en
Application granted granted Critical
Publication of SU1102812A1 publication Critical patent/SU1102812A1/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ УЧЕТА СПОРОВЫХ АНАЭРОБНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ ВРЕДИТЕЛЕЙ МОЛОЧНОГО ПРОИЗВОДСТВА, содержаща  ферментативный гидролизат обезжиренного молока, уксуснокислый натрий, крахмал водорастворимый, цистеин и воду, отличающа с  тем, что, с целью ускорени  роста микроорганизмов, она дополнительно содержит фосфорнокислый однозамещенный калий, бромкрезоловый пурпурный и фуксин кислый, а в качестве ферментативного гидролизата молока - . сухой1амилоризиновый гидролизат обезжиренного молока при следующем количественном соотношении компонентов, г/л: Сухой амилоризиновый гидролизат обезжирен30- ного молока Крахмал водораствори0 ,8-1,0 мый . . 5,0-5,5 Уксуснокислый натрий . Фосфорнокислый одно2 ,7-3,0 замещенный калий Бромкрезоловый 0,03-0,04 пурпурный 0,045-0,050 Фуксин кислый 0,5-0,6 Цистин,. До 1 л Вода О ND 00 ISNUTRITIONAL SOURCE acidic, and as an enzymatic milk hydrolyzate -. dry 1 amilorizine hydrolyzed skim milk with the following proportion of components, g / l: Dry amylorizine hydrolyzed skim milk 30% water soluble starch. . 5.0-5.5 Sodium acetate. Phosphate one2, 7-3.0 substituted potassium Bromcresolum 0.03-0.04 purple 0.045-0.050 Fuchsin acid 0.5-0.6 Cystine ,. Up to 1 L Water About ND 00 IS

Description

Изобретение относитс  к микробиологической промышленности, в частности к молочной промышленности, и касаетс  питательной среды дл  вы влени  анаэробов - вредителей молочного производства. Известна питательна  среда дл  учета спосрбных анаэробных микроорганизмов - вредителей молочного про изводства, содержаща  ферментативны гидролизат обезжиренного молока, ук суснокислый натрий, крахмал водорас воримый, цистеин, агар-агар и воду Однако известна  среда не обеспе чивает быстрого роста микроорганизмое . Цель изобретени  - ускорение рос микроорганизмов. Поставленна  цель достигаетс  тем, что питательна  среда дл  учет споровых анаэробных микроорганизмов вредителей молочного производства, содержаща  ферментативный гидролиза обезжиренного молока, уксуснокислый натрий, крахмал водорастворимый, цистеин и воду, дополнительно содер фосфорнокислый однозамещенный калий бромкрезоловый пурпурный и фуксин кислый, а в качестве ферментативног гидролизата молока - сухой амилоризиновый гидролизат обезжиренного молока при следующем количественном соотношении компонентов, г/л: Сухой аминолоризиновьм гидролизат обезжиренного молока30,0-35,0 Крахмал водорастворимый0 ,8-1,0 Уксуснокислый натрий 5,0-5,5 Фосфорнокислый одно2 ,7-3,0 замещенный калий Бромкрезоловый 0,03-0,04 пурпурный 0,045-0,05 Фуксин кислый 0,5-0,6 Цистин До 1 л Питательную среду готов т следующим образом. Обезжиренное молоко подвергают ферментативной обработке амилорезином П 10 X (25-30 ед/г)- при рН 8,0-9,0 в течение 6-8 ч до содержани  аминного азота 140-160 мг%. Затем в небольшое количество освет-пен ного гидролизата при рН 10,0-10,5 добавл ют 0,5-0,6 г/л среды цистина и объедин ют с гидролизатом. В высу шенный гидролизат ввод т калий фос-форнокислый од озам чцсиный, бромкрезо .човый пурпурный, фуксии кислый. Цвпт среды фиол(тово-нп1имевый. Пример 1 . fk:pyT 100 п обезжиренного молока с титруемой кислотностью не больик; 20 Т, подогревают до 45 С и устанавлинают рН 9,0. В 1 л подогретой смеси развод т 0,2 кг амилоризина актиипостыо 25 ед/г и перенос т в общую массу. Смесь вторично псрсмсм;1 1вают, гидролиз зедут при 32 + 2 С.. . т хлороформ в количестве 0,5 л. Ферментер герметически закрывают, через каждый час гидролизат п€рег-1ешивак)т. Внешним ггризнаком получени  ГотоБого гидролизата и л етс  отделение кремового 11лотн(пч) осадка и отстаннание светло-коричневой прозрачной Жидкости . В зто врем  след т за нарастанием аминного азота. При содержагши аминного азота 140 мг процесс прекращают автоклавиронанием при 121 С в течение 15 мин. Одновременно 1идролизат освобождают от белкового осадка. Прод(;лжите:1ьность гид эолиза 6-8 ч, конечный рИ 7,6. В 0,5 л осветленного гидролизата раствор ют 0,5 кг цистина при рН 10,5 и перенос т в остальной объем. 1 идролизат упаривают при , до содержани  сухих вещест 50%.. Сгущенный гидролизат высуошвают распылительным способом до содержани  сухих веществ 96%, Упаковка сухой питательной среды, предназначенной дл  приготовлени  1 л рабочего субстрата, содержит, г сухой амилоризиновый гидролизат 30; крахмал водорастворимый 0,8; натрий уксуснокислый 5 калий фосфорнокислый однозамещенный 2,7; бромкрезоловый пурпурный 0,030; фуксин кислый 0,045. Суха  питательна  среда содержит- аминного азота мг%. Среды упаковывают в пакеты из черной полимерной пленки и хран т в течение 18 мес при комнатной температуре и относительной влажности 75%. Дл  приготовлени  рабочего субстрата в производственных услови х содержимое упаковки перенос т в колбу и довод т дистиллированной водой до 1 л. нагревают до растворени  порошка , разливают в пропибрки с поплавками и стерилизуют при в течение 15 мин (рН рабочего субстрата 7,2). Биологический контроль среды провод т в сравнении с известной средой. В качестве посевного материала используют штаммы споровых анаэробных микроорганизмов Cf.butyricum b- ; Clf. betyrium Cf. tyrobutyricum 1754, Ci/, tyrobuturicum 1755, молоко сырое, молоко, насто нное на сило се, образцы сыров. Термостатируют посевы при в течение 3 сут. Наличие спор учитывают по разрыву стол бика агара в пробирках с общеприн тыми средами, образованию пузырьков газа в поплавках и изменению цвета среды, приготовленной по предлагаемому способу, до желто-розового. Результаты исследований при определении споровых анаэробных микроорганизмов на индикаторной среде можно получить через 48 ч, а на общеприн тых питательных субстратах через 72 На индикаторной среде по вление газа в пузырьках совпадает с изменением ее цвета. Исследуема  среда более чувствительна  к небольшому обсеменению продукта споровыми анаэробными микроорганизмами и вы вл ет их количества на пор док выше, Пример 2. Отвешивают 30,0 сухого амилорезинового гидролизата обезжиренного молока (с растворенным в нем цистином из расчета 0,5 г на 1 гидролизата), добавл ют крахмал воде растворимый в количестве 0,8 г, натрий уксуснокислый 5,0 г, калий фосфо нокислый однозамещенный 2,7 г, а так же индикаторр :: бромкрезоловый пурпур ный 0,03 г и фуксин кислый 0,045, Су хие компоненты хорошо перемешивают, перенос т в колбу и довод т дистилли рованной водой объем до 1 л. Содержа ние колбы нагревают до растворени  порошка, разливают в пробирки с поплавками и стерилизуют при в течение 15 мин (рИ рабочего субстрат 6,0). Пример 3. Отвешивают 32,5 г сухого амилорезинового гидролизата обезжиренного молока (с растворенным в нем цистином из расчета 0,55 г на 1 л гидролизата), добавл ют крахмал Вычисление титра споровых анаэро Споровые анаэробные микроорганиз водорастворимый в количестве 0,9 г, натрий уксуснокислый 5,26 г, калий фосфорнокислый однозамещенный 2,85 г, а также индикаторы: бромкрезолодый пурпурный 0,035 и фуксин кислый 0,0475 г. Сухие компоненты хорошо перемешивают, перенос т в колбу и довод т дистиллированной водой объем до 1 л. Содержимое колбы Н1 1гревают до растворени  порошка, разливают в пробирки с поплавками и стерилизуют при 121°С в течение 15 мин (рН рабочего субстрата 7,1). Пример 4. Отвешивают 35 г сухого амилорезинового гидролизата обезжиренного молока (с растворенным в нем цистином из расчета г на 1 л гидролизата), добавл ют крахмал водорастворимый в количестве 1,0, натрий уксуснокислый 5,5 г, калий фосфорнокислый однозамещенный 3,0 г, а также индикаторы: бромкрезоловый пурпурный 0,04 г и фуксин кислый 0,05 г. Сухие компоненты хорошо перемешивают, перенос т в колбу и довод т дистиллированной водой объем до 1 л. Содержимое колбы нагревают до растворени  порошка, разливают в пропибрки с поплавками и стерилизуют при 121°С в течение 15 мин (рН рабочего субстрата 7,2). Дл  определени  наиболее веро тного количества клеток в единице объема , веса исследуемого образца используют таблицу Мак-Креди. Вычисление титра споровых анаэробных бактерий провод т по табл. 1. Результаты анализа приведены в табл, 2. Использование питательной среды позвол ет ускорить рост микроорганизмов (с 72 до 48 ч), что, в свою очередь, ускор ет способ индикации анаэробов - вредителей молочного производства. Исключение из состава среды агар-агара и уменьшение расхода цистеина (последний заменен цистином) позвол ет удешевить среду. Таблица 1 бактерий ---«- бнаруженные в объеме, млThe invention relates to the microbiological industry, in particular to the dairy industry, and relates to a nutrient medium for the detection of anaerobic pests of the dairy industry. A well-known nutrient medium for recording spontaneous anaerobic microorganisms — pests of the dairy industry — contains enzymatic skim milk hydrolyzate, sodium hydrochloric acid, water-soluble starch, cysteine, agar-agar, and water, however, the known medium does not provide for the rapid growth of microorganism. The purpose of the invention is the acceleration of the growth of microorganisms. This aim is achieved in that the nutrient medium for keeping spore anaerobic microorganisms pests milk production, comprising enzymatic hydrolysis of skim milk, sodium acetate, starch, soluble, cysteine and water additionally contains phosphate monobasic potassium bromocresol purple and magenta acidic, and as fermentativnog hydrolyzate of milk - dry amylorizine hydrolyzed skim milk with the following proportion of components, g / l: Dry aminoloriz low-fat hydrolyzate milk30,0-35,0 Water-soluble starch, 8-1.0 Sodium acetate 5,0-5,5 Phosphate one 2, 7-3,0 substituted potassium Bromcresol 0.03-0.04 purple 0.045-0, 05 Fuchsin acid 0.5-0.6 Cystine Up to 1 l Nutrient medium is prepared as follows. Skimmed milk is subjected to enzymatic treatment with amilosine P 10 X (25-30 U / g) - at pH 8.0-9.0 for 6-8 hours until the content of amino nitrogen is 140-160 mg%. Then, 0.5-0.6 g / l of cystine medium is added to a small amount of light-pen hydrolyzate at pH 10.0-10.5 and combined with the hydrolyzate. Potassium phosphate phosphate is added to the dried hydrolyzate, ozam chromium, bromcrezo pure purple, and fuchsia sour. Color of medium fiol (combo-np1imic. Example 1. fk: pyT 100 p skim milk with titrated acidity is not large; 20 T, heated to 45 ° C and adjusted to pH 9.0. 0.2 kg of amilorizine is diluted in 1 l of heated mixture 25 u / g and transferred to the total mass. The mixture is repeated PSRsms; 1 1, hydrolysis will go at 32 + 2 C. .. t chloroform in an amount of 0.5 l. The fermenter is sealed, Shiv (t) The external sign of the production of GotoBogo hydrolyzate is the separation of the creamy 11L (sedimentary) sediment and the separation of the light brown transparent Liquid. At this time, the growth of amino nitrogen is monitored. When the content of amino nitrogen is 140 mg, the process is stopped by autoclaving at 121 ° C for 15 minutes. At the same time 1 hydrolyzed free from protein precipitate. Prod (; lie: 1) hydrolysis of 6-8 hours, final pH of 7.6. 0.5 kg of clarified hydrolyzate is dissolved in 0.5 l of cystine at pH 10.5 and transferred to the remaining volume. 1 and the hydrolyzate is evaporated at dry matter content 50%. Condensed hydrolyzate is spray dried to dry matter content 96%. Packing dry nutrient medium for preparing 1 liter of working substrate contains, g dry amyl rhizine hydrolyzate 30; water-soluble starch 0.8; sodium hydroxide 5 potassium phosphate monosubstituted 2.7; bromocresol purp urn 0.030; acid fuchsin 0.045. Dry nutrient medium contains amine nitrogen mg%. The medium is packaged in black polymer film bags and stored for 18 months at room temperature and 75% relative humidity. For the preparation of the working substrate under the production conditions The packages are transferred to a flask and brought to 1 liter with distilled water, heated to dissolve the powder, poured into propibrks with floats and sterilized for 15 minutes (pH of the working substrate is 7.2). The biological control of the medium is carried out in comparison with the known medium. The inoculum used is Cf.butyricum b- spore anaerobic microorganism strains; Clf. betyrium Cf. tyrobutyricum 1754, Ci /, tyrobuturicum 1755, raw milk, milk, true strength, cheese samples. Thermostatic crops for 3 days. The presence of spores is taken into account by breaking the table of bikar agar in test tubes with conventional media, the formation of gas bubbles in the floats and the change in color of the medium prepared by the proposed method to yellow-pink. The results of studies in determining spore anaerobic microorganisms on the indicator medium can be obtained after 48 hours, and on standard nutrient substrates after 72 On the indicator medium, the appearance of gas in the bubbles coincides with the change in its color. The test medium is more sensitive to a small seeding of the product with spore anaerobic microorganisms and reveals their quantity by an order of magnitude above, Example 2. 30.0 dry amilosine hydrolyzed milk skim milk is weighed out (with cystine dissolved in it at the rate of 0.5 g per 1 hydrolyzate) , starch is added to water soluble in the amount of 0.8 g, sodium acetate with 5.0 g, potassium phosphate mono-substituted 2.7 g, as well as indicator: bromocresol purple 0.03 g and fuchsin acid 0.045, Dry components mix well, carry to a flask and bring the volume to 1 l with distilled water. The contents of the flask are heated to dissolve the powder, poured into tubes with floats, and sterilized for 15 minutes (pI working substrate 6.0). Example 3. 32.5 g of dry amillosin hydrolyzate of skimmed milk (with cystine dissolved in it at the rate of 0.55 g per 1 liter of hydrolyzate) are weighed out. Starch is added. Calculation of anaero spore titer Soluble anaerobic microorganisms soluble in the amount of 0.9 g, sodium acetic acid, 5.26 g, monosubstituted potassium phosphate, 2.85 g, and indicators: bromine-free purple and 0.035 and acid fuchsin 0.0475 g. The dry components are mixed well, transferred to a flask and brought to 1 liter with distilled water. The contents of the flask H1 1 are heated to dissolve the powder, poured into tubes with floats, and sterilized at 121 ° C for 15 minutes (pH of the working substrate is 7.1). Example 4. 35 g of dry amiloresin hydrolyzate of skimmed milk (with cystine dissolved in it at the rate of g per 1 liter of hydrolyzate) are weighed out; water-soluble starch in the amount of 1.0, sodium acetate 5.5 g, and potassium phosphate mono-substituted 3.0 g are added and also indicators: bromocresol purple 0.04 g and fuchsin acid 0.05 g. The dry components are mixed well, transferred to a flask and brought to 1 liter with distilled water. The contents of the flask are heated to dissolve the powder, poured into propibrki with floats and sterilized at 121 ° C for 15 minutes (pH of the working substrate is 7.2). To determine the most probable number of cells per unit volume, the weight of the test sample is using the McCredy table. The calculation of the titer of spore anaerobic bacteria is given in Table. 1. The results of the analysis are given in Table 2. The use of the nutrient medium allows the growth of microorganisms to be accelerated (from 72 to 48 hours), which, in turn, accelerates the method of indicating anaerobes - pests of dairy production. Excluding agar-agar from the medium and reducing the consumption of cysteine (the latter is replaced by cystine) makes the medium cheaper. Table 1 bacteria --- "- found in volume, ml

Продолжение табл. 1Continued table. one

Количество спор анаэробных микроорганизмов, вы вленных на индикаторной и известной средах, вычисленный титрThe number of spores of anaerobic microorganisms found on indicator and known media, calculated titer

Claims (1)

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ УЧЕТА СПОРОВЫХ АНАЭРОБНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ ВРЕДИТЕЛЕЙ МОЛОЧНОГО ПРОИЗВОДСТВА, содержащая ферментативный гидролизат обезжиренного молока, уксуснокислый натрий, крахмал водорастворимый, цис теин и воду, отличающаяся тем, что, с целью ускорения роста микроорганизмов, она дополнительно содержит фосфорнокислый однозамещенный калий, бромкрезоловый пурпурный и фуксин кислый, а в качестве ферментативного гидролизата молока - . сухойιамилоризиновый гидролизат обезжиренного молока при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:NUTRITIONAL MEDIUM FOR TAKING INTO ACCOUNT SPORING ANAEROBIC MICROORGANISMS OF DESTRUCTIVE PEST PRODUCTS, containing enzymatic hydrolyzate of skim milk, sodium acetate, water-soluble starch, cysteine and water, which contains microfluid, but also contains sour, and as an enzymatic milk hydrolyzate -. dry ами amilorizine hydrolyzate of skim milk in the following quantitative ratio of components, g / l: Сухой амилоризиновый гидролизат обезжиренного молокаDry skim milk amylorizin hydrolyzate Крахмал водорастворимыйWater soluble starch Уксуснокислый натрий · Фосфорнокислый одно30-?'Sodium acetic acid · Phosphate one 30-? ' 0,8-1,0 .5,0-5,50.8-1.0 .5.0-5.5 замещенный калий substituted potassium 2,7-3,0 2.7-3.0 Бромкрезоловый Bromocresol пурпурный purple 0,03-0,04 0.03-0.04 Фуксин кислый Fuchsin Sour 0,045-0,050 0,045-0,050 Цистин Cystine 0,5-0,6 0.5-0.6 Вода Water До 1 л Up to 1 liter
SU „1102812SU „1102812
SU823512070A 1982-11-17 1982-11-17 Culture medium for accounting for spore anaerobic microorganisms harmful for milk production processes SU1102812A1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU823512070A SU1102812A1 (en) 1982-11-17 1982-11-17 Culture medium for accounting for spore anaerobic microorganisms harmful for milk production processes

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU823512070A SU1102812A1 (en) 1982-11-17 1982-11-17 Culture medium for accounting for spore anaerobic microorganisms harmful for milk production processes

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1102812A1 true SU1102812A1 (en) 1984-07-15

Family

ID=21035906

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU823512070A SU1102812A1 (en) 1982-11-17 1982-11-17 Culture medium for accounting for spore anaerobic microorganisms harmful for milk production processes

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU1102812A1 (en)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
1. Среды питательные сухие дл микробиологического контрол молока и молочных продуктов, ТУ-49-513-78. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP3717932B2 (en) Culture media and products for detection and measurement of enterobacteria
JP4057052B2 (en) Conditioned culture medium for rapid growth and microbial detection
AU609794B2 (en) A test set and a process for the determination of antibiotics in milk and a novel streptococcus thermophilus strain to be used therein
FI67725B (en) FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV ENHETER AVSEDDA FOER BESTAEMNING AV ANTIBIOTIKA- OCH SULFARESTER I BIOLOGISKA VAETSKOR OCH FRAMSTAELLDA ENHETER
CA2176895C (en) Test kit and method for the quantitative determination of coliform bacteria and e. coli
KR890014749A (en) Microbial Detection Device and Device
EP0803577A2 (en) Method for detecting and/or determining ATP from microorganism cells in a sample
US4675289A (en) Method of measuring the number of eumycete cells
JPH0367599A (en) Separating medium for identifying salmonella
GB2059990A (en) Enhancement of the sensitivity of viable microbial cell count by bioluminescent assay of ATP and its use for identification of microbes by means of a short incubation in nutrient media
Leinhos Effects of pH and glucose on auxin production of phosphate-solubilizing rhizobacteria in vitro
US4298689A (en) Gonorrhea diagnostic test
SU1102812A1 (en) Culture medium for accounting for spore anaerobic microorganisms harmful for milk production processes
DE60114459T2 (en) COMPOSITIONS AND METHODS FOR DETECTING MICROORGANISMS IN A SAMPLE
US4072572A (en) E. coli detection broth for clinical use with automated microbial analyzer
EP0173944B1 (en) Enhanced inhibition of yeast cell growth
CN113430246B (en) Air microorganism rapid detection method for oyster sauce filling space
NO302664B1 (en) Enzymatic process for the determination of <beta> -lactam antibiotics
SU1700468A1 (en) Method for detecting presence of enterobacteria in water
CN105651715B (en) A kind of high-throughput method and its kit for detecting lipase enzymatic activity in liquid diary product
US20040241786A1 (en) Single tube screen
GB2132633A (en) Enhancement of the sensitivity of viable microbial cell count by bioluminescent assay of ATP and its use for identification of microbes by means of a short incubation in nutrient media
JPH0121960B2 (en)
RU2036239C1 (en) Method of determination of microorganism quantity in deionized water
SU1638164A1 (en) Method for determination of pesticide effects on bacteria