SU1085040A1 - Способ получени растворимого холерного @ -антигена дл иммунизации продуцентов холерных агглютинирующих сывороток - Google Patents

Способ получени растворимого холерного @ -антигена дл иммунизации продуцентов холерных агглютинирующих сывороток Download PDF

Info

Publication number
SU1085040A1
SU1085040A1 SU823408421A SU3408421A SU1085040A1 SU 1085040 A1 SU1085040 A1 SU 1085040A1 SU 823408421 A SU823408421 A SU 823408421A SU 3408421 A SU3408421 A SU 3408421A SU 1085040 A1 SU1085040 A1 SU 1085040A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
antigen
choleraic
cholera
per
producers
Prior art date
Application number
SU823408421A
Other languages
English (en)
Inventor
С.Н. Тюменцев
Н.М. Андреевская
Т.Д. Казаренко
М.В. Безносов
Original Assignee
Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока filed Critical Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока
Priority to SU823408421A priority Critical patent/SU1085040A1/ru
Application granted granted Critical
Publication of SU1085040A1 publication Critical patent/SU1085040A1/ru

Links

Classifications

    • Y02A50/472

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

СПОСОБ РАСТВОРИМОГО ХОЛЕРНОГО 0-АНТИГЕНА ДЛЯ ИММУНИЗАЦИИ ПРОДУЦЕНТОВ ХОЛЕРНЫХ АГГЛЮТИНИРУЮЩИХ СЫВОРОТОК, включающий выращивание холерных вибрионов на питательном агаре, приготовление микробной взвеси, экстрагирование, центрифугирование, диализ и лиофйльную сушку, отличающийс  TBMj что, с целью повьшени  активности и СП1ЕЦИФИЧНОСТИ 0-антигена, микробную взвесь готов т в концентрации 100 МЛРД. м.кл. в 1 мл дистиллированной воды, перед центрифугированием взвесь инактивируют формалином из расчета 0,75-0,85 мл на 100мн и повторно экстрагируют в течение суток, затем сорбируют насадочную (Л жидкость активированным углем в количестве 4,5-5,5 г на 100 мл, концентрируют растворимый антиген вьмораживанием , а после диализа провод т § стерилизующую фильтрацию. 00 СП

Description

Изобретение относитс  к медицине, а именно,к получению диагностических препаратов, и может быть использовано в сывороточном производстве, в частности, дл  иммунизации кроликовпродуцентов холерной агглютинирующей 0-сыворотки. Известен способ получени  растворимого холерного антигена путем экст рагировани  и фракционировани . Од ,нако этот способ трудоемок и позвол ет получить 0-антиген с низкой специфичностью. Известен также способ получени  растворимого холерного 0-антигена дл  иммунизации продуцентов холерных агглютинирующих сывороток, включающий вьфащивание холерньк вибрионов на питательном агаре, приготовление микробной взвеси, экстрагирование, .центрифугирование, диализ и лиофиль ую сушку. Однако этот способ также недостаточно производителен, а получаемый антиген имеет недостаточно высокую активность и специфичность. Целью изобретени ,  вл етс  повыш ние активности и специфичности 0-ан тигена. Указанна  цель достигаетс  тем, что вырав5ивают холерные вибрионы на питательном агаре, приготавливают взвесь, экстрагируют, центрифугирую диализуют и лиофильно высушивают. Отличительной особенностью  вл етс  то, что микробную взвесь готов т в концентрации 1ПО мпрд.м.кл. в 1 МП дистиллированной воды, перед центрифугированием микробрую взвесь (Инактивируют формалином из расчета 0,75-0,85 мл на 100 мп и повторно экстрагируют в течение суток, затем сорбируют насадочную жидкость активированным углем в количестве 4,5 5 ,5 г на 100 мл, концентрируют раст воримый антиген вымораживанием, а после диализа провод т стерилизующую фильтрацию. Способ вьтолн етс  следующим образом . Холерные вибрионы, вьфащенные на агаре Мартена или Хоттингера, смывают дистиллированной водой. №1кробную взвесь довод т до концентрации 100 млрд. м.кл. в 1 мл дистиллирован ной воды, перед центрифугированием . инактивирутот формалином из расчета 0,75-0,85 мл на 100 мл взвеси и экст рагируют в течение суток. Формалин инактивирует вибрионы и денатурирует белки, которые удал ют центрифугированием . Оставишес  в надосадочной жидкости белки сорбируют активированным углем в количестве 4,5-5,5 г на 100 мл. Затем растворимый антиген концентрируют вымораживанием, диализуют против проточной воды, затем провод т стерилизующую фильтрацию . Пример. Культуру холерных вибрионов серотипов Инаба и Огава, выращенную в течение 3 ч на 1%-ной пептонной воде (рН 7f6), перес.евают в четверти с агаром Мартена или Хоттингера (рН 7,6) и инкубируют при 37°С в течение 18 ч. Культуру с.мывают дистиллированной водой (рН 7,2), концентрацию довод т до 100 млрд.м.кл. в .1 мл и помещают на 4 ч в термостат при 37°С, перемешивают каждые 30 мин. Добавл ют на 100 мл взвеси, 0,8 мл формалина и выдерживают в бытовом холодильнике еще 20 ч. Затем взвесь центрифугируют при 8000G в течение 30 мин. В надосадочнун жидкость внос т активированный уголь - 5 г на 100 мл, посто нно перемешива , вы (держивают при З7с в течение 1 ч, досле чего фильтруют через бумажные фильтры. Содержащийс  в жидкости растворимый антиген концентрируют путем вымораживани  воды. Сконцентрированньм растворимый 0-антиген Йеротипа Инаба и Огава соедин ют в равных объемах и диализируют против проточной воды 3 сут. Затем раствор антигена фильтруют через стерилизирующие пластины и подвергают лиофильной сушке. Выход сухого вещества составл ет 1 1 ,2 мг /мл. Полученное вещество  вл етс  растворимым холерным антигеном, который содержит, %: белка 8,7, полисахаридов 38, НК 1,7, липидов 24,1. Преимуществом указанного способа .  вл етс  то, что по разработанной технологии в любой лаборатории может быть приготовлено необходимое количество растворимого холерного 0- антигена и дл  получени  растворимого антигена не требуетс  сложного дорогосто щего оборудовани . Препарат высокоспецифичен, при постановке РП по Оухтерлони он образует одну линию преципитации с- холерным гаммаглобулином и нативными О- и ОН-холерными сыворотками, в то врем  как корпуск л рный холерный О-антиген, рекомендованный дл  производства технической документацией, и цельный раство римый холерный антиген, полученный по известному способу, образуют с холерным гамма-глобулином четыре линии , а с нативными холерными О- и ОН-сыворотками две - три линии. Растворимый и корпускул рный холерные антигены обладают неодинаковой антигенной активностью при одинаковых способах их введ)р,ни  кроликами .. Растворимый холерный антиген высо коактивен при введении кроликам внут ривенно, в лимфоузлы и подушечки лапок; холерный корпускул рный 0-антиген пpo вл et антигенные свойства только при внутривенном введении. Сы воротки, полученные от кроликов, иммунизированных растворимым антигеном в подушечки лапок, в 2-2,5 раза активнее и специфичнее сывороток кроли ков, иммунизированных корпускул рным 0-антигеном (р 0,05). Сухой растворимый антиген, приготовл .енный по предложенному способу, может хранитьс  длительное врем  (2 г - срок наблюдени ), удобен в работе. Исследовани  биологических свойств показали, что препарат, полученный по предлагаемому способу, обладает большей антигенной активностью. При однократном введении кроликам на дес тый День титры агглютининов достигали 1:3200, а при иммунизации кроликов известным препаратом титры агглютининов быпи в пределах 1:320. Титры вибриоцидных антител в крови кроликов, иммунизированных предложеннь1м препаратом, быпи также вьпае. Средн   иммунизирующа  доза (ЕДс,. ) предлагаемого препарата была равна 0,14 мкг, а известного препарата 14,6 мкг, т.е. иммуногенность предлагаемого препарата превосходит в дес тки раз. Следовательно, по данным иммунохимических и биологических исследоваНИИ растворимый специфический холерный антиген, полученный по предлагаемому способу, соответствует по специфичности полисахаридам, полученным Э.А. Яговкиным (1980), а по антигенным и иммуногенным свойствам превосходит их. Кроме того, способ получени  предложенного препарата проще по технологии, менее трудоемок и более производителен,так как на технологический цикл затрачиваетс  в 2,5 раза меньше времени по сравнению с известным способом.

Claims (1)

  1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РАСТВОРИ- : МОГО ХОЛЕРНОГО 0-АНТИГЕНА ДЛЯ ИММУ-
    НИЗАЦИИ ПРОДУЦЕНТОВ ХОЛЕРНЫХ АГГЛЮТИНИРУЮЩИХ СЫВОРОТОК, включающий выращивание холерных вибрионов на питательном агаре, приготовление микробной взвеси, экстрагирование, центрифугирование, диализ и лиофильную сушку, отличающийся тем; что, с целью повышения активности и специфичности 0-антигена, микробную взвесь готовят в концентрации 100 млрд. м.кл. в 1 мл дистиллированной воды, теред центрифугированием взвесь инактивируют формалином из расчета 0,75-0,85 мп на 100мя и повторно экстрагируют в течение g суток, затем сорбируют насадочную жидкость активированным углем в количестве 4,5-5,5 г на 100 мп, концентрируют растворимый антиген вымораживанием, а после диализа проводят стерилизующую фильтрацию.
    SU ,,1085040
SU823408421A 1982-03-10 1982-03-10 Способ получени растворимого холерного @ -антигена дл иммунизации продуцентов холерных агглютинирующих сывороток SU1085040A1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU823408421A SU1085040A1 (ru) 1982-03-10 1982-03-10 Способ получени растворимого холерного @ -антигена дл иммунизации продуцентов холерных агглютинирующих сывороток

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU823408421A SU1085040A1 (ru) 1982-03-10 1982-03-10 Способ получени растворимого холерного @ -антигена дл иммунизации продуцентов холерных агглютинирующих сывороток

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1085040A1 true SU1085040A1 (ru) 1986-12-07

Family

ID=21001507

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU823408421A SU1085040A1 (ru) 1982-03-10 1982-03-10 Способ получени растворимого холерного @ -антигена дл иммунизации продуцентов холерных агглютинирующих сывороток

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU1085040A1 (ru)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Авторское свидетельство СССР № 380326, кл. А 61. К 23/00, 1975. Яговкин Э.А. Методические рекомендации по получению и применению очищенных соматических антигенив холерного вибриона эльтор в иммунохимических, иммунологических и микробиологических исследовани х. Ростов.на-Дону, 1980. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4197290A (en) Vaccine
US4482483A (en) Composition of intravenous immune globulin
KR840001512B1 (ko) 백일해 톡소이드의 제조방법
US4816253A (en) Novel mutant strain of Listeria monocytogenes and its use in production of IgM antibodies and as an immunotherapeutic agent
US3984539A (en) Bovine immunoglobulin isolation process
US4207414A (en) Polysaccharide antigens
US4324887A (en) Type II group B Streptococci polysaccharide
US4567041A (en) Mutant strain of Listeria monocytogenes and its use in production of IgM antibodies and as an immunotherapeutic agent
JP2538224B2 (ja) 百日咳抗原の精製
US3105012A (en) Antigen products and means for producing the same
CN101024079A (zh) 肺炎链球菌多糖-外膜蛋白结合疫苗及制备方法
US4367222A (en) Immune globulin specific to Group B streptococci
Dishon et al. Cell sensitizing products of streptococci
US4367223A (en) Vaccine against Group B streptococci
US4356263A (en) Method of making a polysaccharide vaccine
SU1085040A1 (ru) Способ получени растворимого холерного @ -антигена дл иммунизации продуцентов холерных агглютинирующих сывороток
US4367221A (en) Immunization against Group B streptococci
US4009257A (en) Preparation of immunosuppressive materials
US4001080A (en) Production of immunological materials
Dole A Dialyzable Medium for Cultivation of Group A Hemolytic Streptococci.
RU2311197C1 (ru) Способ получения протективной белоксодержащей фракции бактерий
Baer et al. The immunology and chemistry of tuberculin: I. The isolation of dialyzable and nondialyzable tuberculin-active components from unheated BCG culture filtrates
RU2704452C1 (ru) Способ получения вакцины гемофильной тип b конъюгированной
Hunter et al. Response of mice to rabbit Fab′ 2 and Fab′: Thymus independence of IgM response and thymus dependence of IgG response
SU1692580A1 (ru) Способ получени тул ремийного антигена