SK500042020A3 - Betaglukán na použitie na zvýšenie protinádorovej imunity v remisii - Google Patents

Abstract

Vynález opisuje použitie betaglukánu na zvýšenie protinádorovej imunity v remisii po liečbe solídnych tumorov, kedy sa po dlhodobom perorálnom užívaní zvyšuje koncentrácia CD8+ lymfocytov, CD19+ lymfocytov, narastá hladina IgG3, IgA, CD16+56+. Klinická štúdia ukázala efektivitu preventívneho liečenia pri imunosenzitívnych nádorových ochoreniach, ako je karcinóm prsníka. Betaglukán je vo výhodnom usporiadaní fungálny β-(1,3/1,6)-glukán pripravený z hlivy ustricovej. Pri sekvenčnom užívaní sa počas prvej fázy užíva vysoká dávka betaglukánu a v druhej fáze sa užíva nízka dávka betaglukánu, pričom vysoká dávka betaglukánu je aspoň dvojnásobne vyššia ako nízka dávka betaglukánu. Podávanie je dlhodobé a kontinuálne bez sekvencií, pri ktorých by sa dávkovanie úplne vynechalo. Vysoká dávka betaglukánu môže byť denne v rozsahu 600 mg až 800 mg, výhodne 700 mg a nízka dávka betaglukánu môže byť denne v rozsahu 50 mg až 300 mg, výhodne 100 alebo 200 mg.

Description

SK 50004-2020 A3

Oblasť techniky

Vynález sa týka použitia betaglukánov, najmä fungálneho β (1,3/1,6) glukánu, v remisii po primárnej onkologickej liečbe, najmä po liečbe imunosenzitívnych nádorových ochorení ako sú kolorektálný karcinóm a karcinóm pŕs. Zvýšenie protinádorovej bunkovej imunity sa spoľahlivo zaznamenalo pri perorálnom dlhodobom užívam fungálneho β (1,3/1,6) glukánu, výhodne pri sekvenčnom dávkovaní.

Doterajší stav techniky

Protinádorová bunková imunita je založená na aktivácii T lymfocytov a následnom rozpoznávam nádorových antigénov. Nádorovo transformované bunky vznikajú v tkanivách a sú eleminované T lymfocytmi. Prítomnosť CD 8+ cytotoxických lymfocytov v nádorovom mikroprostredí sa hodnotí ako významný pozitívny prognostický faktor u pacientov s lokálne pokročilým kolorektálnym karcinómom. (Galón, Pages, et. al 2018).

Spis US2015064199 Al ozrejmuje spôsob použitia neutrálneho rozpustného glukánu a monoklonálnych protilátok na protinádorovú terapiu. Neutrálne rozpustný beta (1,3; 1,6) glukán zvyšuje tumoricídnu aktivitu vrodeného imunitného systému väzbou na proteínový receptor CR3 komplementu C3.

Zverejnenie US2001043914 Al rieši prevenciu a liečenie nádorov použitím mikročastíc s pomalým uvoľňovaním obsahujúcich IL-12, ktoré sú priamo vstreknuté do nádoru.

Spis EP1651676 BI opisuje spôsob zavádzania látok do buniek pomocou orálne podávaného betaglukánu.

Zverejnenie US 2010/0166751 Al opisuje použitie betaglukánu na potláčame a elimináciu nádorových buniek pri primárnej liečbe. Betaglukán podľa tohto zverejnenia je izolovaný z bunkových stien kvasiniek. Použitie betaglukánu v primárnej liečbe zatiaľ nemá presvedčivé a overené výsledky.

Je žiadané zvýšenie protinádorovej bunkovej imunity vo fáze remisie po primárnej liečbe, pričom prostriedok na zvyšovanie protinádorovej imunity nesmie ani pri dlhodobom užívam spôsobovať zhoršenie orgánových funkcií, najmä funkcií pečene, obličiek a podobne.

Podstata vynálezu

Skôr uvedené nedostatky podstatným spôsobom odstraňuje polysacharidový imunomodulátor na báze betaglukánu, ktorý sa použije na zvýšenie protinádorovej bunkovej imunity v remisii po primárnej liečbe solidných tumorov. Primárna liečba môže zahrňovať chirurgickú liečbu a/alebo rádioterapiu a/alebo chemoterapiu a/alebo hormonálnu liečbu a/alebo cielenú biologickú liečbu. Efektívne použitie betaglukánu v remisii sa ukazuje bez ohľadu na typ použitej primárnej onkologickej liečby, pričom signifikantné výsledky sa zaznamenali pri imunosenzitívnych nádorových ochoreniach ako je kolorektálný karcinóm a karcinóm prsníka. Pri týchto veľmi rozšírených onkologických diagnózach sú všeobecne akceptované dôkazy o význame a interpretácií tumor infiltrujúcich lymfocytov. Jedná sa pritom o malígne ochorenia, kde možno očakávať celkovo pozitívny prínos imunomodulácie v zmysle stimulácie bunkovej imunitnej odpovede.

Z klinickej štúdie vyplynuli podstatné preventívne a liečebné efekty pri kontinuálnom dlhodobom užívaní betaglukánu v remisii po liečbe solidných tumorov, najmä po liečbe karcinómu pŕs, kedy sa zvýšila koncentrácia CD8+ lymfocitov pri súčasnom zvýšení koncentrácie CD 19+ lymfocytov.

Pojem zvýšenie protinádorovej imunity v tomto spise vyjadruje akúkoľvek úpravu fyziologických pomerov buniek, ktoré vedú k zvýšeniu spôsobilosti eliminovať nádorovo transformované bunky. Toto zvýšenie protinádorovej imunity je zvyčajne sprevádzané nárastom koncentrácie CD8+ lymfocytov, CD19+ lymfocytov, nárastom IgG3, IgA, CD16+56+, pričom nie je podstatné stanovenie hranice, kedy je proces preventívny a kedy liečebný.

Na rozdiel od postupov z doterajšieho stavuje betaglukán podľa tohto vynálezu užívaný dlhodobo a perorálne, čo sa dá zabezpečiť jednoduchým spôsobom pri spolupráci pacienta. Klinická štúdia preukázala preventívny protirakovinový účinok pri dlhodobom používam bez nežiaducich vedľajších účinkov pri súčasnom znížení incidencie bežných infekcií.

Prvé signifikantné zmeny sa zaznamenali už po 3 mesiacoch v humorálnej zložke imunitného systému, tieto zmeny sa prejavili ako signifikantné zvýšenie B lymfocytov a imunoglobulinu. K signifikantným zmenám v bunečnej imunite (NK bunky a CD8+ lymfocyty) došlo až po dlhšej dobe užívania betaglukánu. Imunomodulácia prostredníctvom betaglukánu sa teda v zmysle tohto vynálezu odporučuje v adjuvantnom režime. K imunitnej odpovedi dochádza s dlhším odstupom po zahájení terapie, signifikantné zlepšenie imunologických parametrov nastalo 12 až 15 mesiacov od začiatku užívania, preto je betaglukán vhodný k dlhodobému podávaniu.

SK 50004-2020 A3

Výsledkom vynálezu je jasný dopad perorálne užívaného prostriedku na podporu imunitného systému stavu jedinca v dobe tzv. kompletnej remisie. Významné úpravy lýziologických pomerov bunečnej protinádorovej imunity pri kontinuálnom podávam betaglukánu slúžia k reštaurovaniu imunitného systému a zmierneniu sekundárneho imunodeficitu u onkologických pacientov, napr. u pacientok s hormonálne dependentným karcinónom pŕs.

Betaglukán ako prípravok podľa tohto vynálezu je vo výhodnom nastavení fungálny β (1,3/1,6) glukán. Takýto betaglukán môže byť pripravený z hlivy ustricovej (Pleurotus ostreatus), kedy býva tiež pomenovaný ako pleuran.

Predmetom ochrany je aj kompozícia, ktorá zahrňuje betaglukán podľa tohto opisu, pričom je prispôsobená na orálne užívame, napríklad vo forme kapsúl. Kompozícia môže okrem betaglukánu obsahovať vitamín C, prípadne aj bakteriálne kultúry, oligosacharidy, pomocné a upravujúce látky ako konzervačné látky a podobne.

Betaglukán sa výhodne podáva pacientom, ktorý sú v remisii aspoň 6 mesiacov, teda sa podáva najskôr po 6 mesiacoch od skončenia primárnej onkologickej liečby, výhodne najskôr po 12 mesiacoch od skončenia primárnej onkologickej liečby.

Predmetom ochrany je aj samotný režim dávkovania betaglukánu, ktoiý preukázateľne vedie k efektívnym výsledkom. Podstatou sekvenčného režimu dávkovania je striedanie opakujúcich sa fáz. Betaglukán sa užíva kontinuálne, bez etapy s nulovým dávkovaním, v dvoch po sebe idúcich a následne sa opakujúcich fázach, kedy počas prvej fázy sa užíva vysoká dávka betaglukánu a v drahej fáze sa užíva nízka dávka betaglukánu. Tieto dve fázy sa opakovane za sebou striedajú, preto označenie prvá a druhá má len vzájomne rozlišujúci charakter. Vysoká dávka betaglukánu je pritom aspoň dvojnásobne vyššia ako nízka dávka betaglukánu. Vysoká dávka betaglukánu môže byť v rozsahu 600 mg až 800 mg, výhodne 700 mg a nízka dávka betaglukánu môže byť v rozsahu 50 mg až 300 mg, výhodne 100 až 200 mg.

Podľa výsledkov z klinickej štúdie je vhodné, ak vysoká dávka má počas užívania konštantnú úroveň a nízka dávka sa pravidelne strieda medzi hodnotami 100 a 200 mg. Prvá fáza a drahá fáza pritom môžu trvať rovnaký časový úsek, a to 2 až 4 mesiace, výhodne tri mesiace.

Betaglukán (polysacharidový imunomodulátor na báze betaglukánu) priniesol pri dlhodobom užívam signifikantné zlepšenie všetkých dôležitých onkomarkerov, prejavuje sa ako významný preventívny prípravok, pričom žiaden pacient zo skúmanej skupiny neupadol do relapsu. Výhodou betaglukánu je absencia nežiaducich vedľajších účinkov. Naopak, podávanie betaglukánu vedie k pozitívnym vedľajším účinkom v imunologickom obraze pacientov.

Prehľad obrázkov na výkresoch

Výsledky a účinky vynálezu sú bližšie vysvetlené pomocou obrázkov 1 až 6.

Na grafe Ts-lymfo na obrázku 1 je zachytený signifikantný nárast koncentrácie absolútneho počtu CD 8+ (cytotoxických T lymfocytov) po 12 mesiacoch od začiatku klinickej skúšky pri režime sekvenčného dávkovania s opakujúcim sa fázami 700 mg - 100 mg - 700 mg - 200mg/deň v skupine pacientok užívajúcich β (1,3/1,6) glukán (p = 0,0147). Hodnota pre 12. mesiac zodpovedá koncu dávkovania 700 mg - 100 mg - 700 mg - 200 mg/deň.

Graf CD 16+56+ na obrázku 2 ukazuje signifikantné zvýšenie percentuálneho zastúpenia CD 16+56+ (NK buniek) po 15 mesiacoch od začiatku klinickej štúdie pri režime sekvenčného dávkovania s opakujúcim sa fázami 700 mg - 100 mg - 700 mg - 200 mg/deň v skupine pacientok užívajúcich β (1,3/1,6) glukán (p = 0,0313). Hodnota pre 15. mesiac predstavuje stav na konci dávky 700 mg/deň.

Na grafe CD 19+ na obrázku 3 je znázornené porovnanie percentuálneho zastúpenia B lymfocitov na začiatku užívania (0 mesiacov) a po 3 mesiacov pri dávke 700 mg/deň. K signifikantnému nárastu percentuálneho podielu CD19+ došlo po 3 mesiacoch užívania dennej dávky 700 mg/deň (p = 0,0246). Hodnota zobrazená pre 3. mesiac zodpovedá koncu dávky 700 mg/deň.

Obrázok 4 znázorňuje sekvenčný režim dávkovania. Skratka „V“ pomenováva vyšetrenie pacienta, skratka „O“ označuje odber vzoriek.

Na grafe IgG3 na obrázku 5 je porovnanie koncentrácie IgG3 na začiatku užívania (0 mesiacov) s koncentráciou IgG3 po 3 mesiacoch užívania β (1,3/1,6) glukánu s dávkou 700 mg/deň. Z grafu vyplýva signifikantné zvýšenie koncentráciev IgG3 po 3 mesiacoch užívania (p = 0,0010). Hodnota zobrazená pre 3. mesiac zodpovedá koncu dávky 700 mg/deň.

Graf IgA na obrázku 6 porovnáva koncentráciu IgA po skončení sekvencie s vysokou dávkou 700 mg/deň v 9. mesiaci a následne po troch ďalších mesiacov užívania s nízkou dávkou β (1,3/1,6) glukánu 200 mg/deň. Graf ukazuje signifikantné zvýšenie koncentrácie IgA po 3 mesiacoch užívania, celkovo po 12 mesiacoch od začiatku štúdie (p = 0,0255). Hodnota pre 12. mesiac zodpovedá koncu dávky 200 mg/deň.

SK 50004-2020 A3

Príklady uskutočnenia vynálezu

V klinickej štúdií s výsledkami podľa obrázkov 1 až 6 bolo cieľom zistiť, ako reaguje imunitný systém pacientok s hormonálne dependentným karcinómom pŕs pri kontinuálnom užívam β (1,3/1,6) glukánu v klinickej a zobrazovacej remisii.

V klinickej štúdií bolo zahrnutých 60 pacientok, ktoré podstúpili štandardnú onkologickú liečbu pre indikáciu lokálne pokročilého hormonálne dependentného karcinómu pŕs I-II klinického štádia. Primárna liečba karcinómu zahrňovala v skupine pacientok rôzne postupy - chirurgickú liečbu, rádioterapiu, chemoterapiu, hormonálnu liečbu podľa individuálnej indikácie. Pred zaradením do klinickej štúdie boli pacientky vyšetrené klinickým imunológom pre vylúčenie imunopatológie a chorôb alergického či autoimunitného podkladu. Protinádorová bunková imunita (CD4+, CD8+, B bunky) bola vyšetrovaná metódou prietokovej cytometrie. TGF beta a VEGF boli merané metódou ELISA.

Pacientky perorálne užívali β (1,3/1,6) glukán v sekvenčnom režime, kedy sa striedali fázy s vysokou dávkou a fázy s nízkou dávkou, pričom užívame bolo kontinuálne, bez fáz s nulovou dávkou. Betaglukán (s názvom Imunoglukán, čo je ochranná známka prihlasovateľa vynálezu) mal formu kapsuly, ktorá zahrňovala tiež L-askorban vápenatý, stearan horečnatý a kyselinu benzoovú.

K podstatnému percentuálnemu zvýšeniu B lymfocytov (CD 19+) došlo po troch mesiacoch užívania β (1,3/1,6) glukánu s dávkovaním 700 mg/deň (p = 0,0246). Po troch mesiacoch užívania bolo zaznamenané aj signifikantné zvýšenie hladiny IgG3 (p = 0,0387).

K signifikantnému zvýšeniu hladiny IgA došlo po 12 mesiacoch od začiatku štúdie (p = 0,0255).

K signifikantnému zvýšeniu hladiny CD 16+56+ došlo po troch mesiacoch po opätovnom zvýšení dávky z 200 mg/deň na 700 mg/deň (po 15 mesiacoch od začiatku štúdie) (p = 0,0469).

Po 15 mesiacoch od začiatku štúdie došlo k signifikantnému zvýšeniu koncentrácie CD8+ (cytotoxické T lymfocytov) pri režime dávkovania 700 mg - 100 mg - 700 mg - 200 mg/deň (p = 0,0490).

Behom dlhodobého podávania β (1,3/1,6) glukánu nedošlo k žiadnym zmenám v pečeňových testoch, renálnych funkciách a autoimunitných parametroch. Klinicky bol Imunoglukán pacientkami veľmi dobre tolerovaný a došlo k zníženiu incidencie infekcií (HCD, uroinfekcie, gynekologické infekcie, opary).

Žiadna pacientka zo sledovanej skupiny v remisii sa nedostala do relapsu. Z výsledkov klinickej štúdie podľa obrázkov 1 až 6 vyplynulo tiež zvýšenie účinkov pri sekvenčnom dávkovaní pri zachovalú kontinuálneho užívania.

Priemyselná využiteľnosť

Priemyselná využiteľnosť vynálezu je zjavná. Podľa tohto vynálezu je možné priemyselne a opakovane vyrábať prípravok, resp. kompozíciu na zvýšenie protinádorovej imunity v remisii po primárnej liečbe solidných tumorov.

Claims (13)

1. SK 50004-2020 A3

   PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Betaglukán na použitie na zvýšenie protinádorovej imunity v remisii po liečbe solidných tumorov.
2. 2. Betaglukán podľa nároku 1, na použitie na zvýšenie koncentrácie CD8+ lymfocitov pri súčasnom zvýšení koncentrácie CD19+ lymfocytov v remisii po liečbe solidných tumorov.
3. 3. Betaglukán podľa nároku 1 alebo 2 na použitie v remisii po liečbe karcinómu pŕs.
4. 4. Betaglukán podľa nároku 1 alebo 2, na použitie v remisii po liečbe kolorektálneho karcinómu.
5. 5. Betaglukán podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, vyznačujúci sa tým, že je fungálny β (1,3/1,6) glukán.
6. 6. Betaglukán podľa nároku 5, vyznačujúci sa tým, že je pripravený z hlivy ustricovej.
7. 7. Kompozícia obsahujúca betaglukán podľa ktoréhokoľvek nároku 1 až 6, vo forme prispôsobenej na orálne podávame.
8. 8. Použitie betaglukánu podľa ktoréhokoľvek nároku 1 až 7, v remisii najskôr po 6 mesiacoch od skončenia primárnej onkologickej liečby, výhodne najskôr po 12 mesiacoch od skončenia primárnej onkologickej liečby.
9. 9. Režim dávkovania betaglukánu podľa ktoréhokoľvek z nárokov laž7, vyznačujúci sa tým, že sa užíva kontinuálne v dvoch po sebe idúcich a následne sa opakujúcich fázach, kde počas prvej fázy sa užíva vysoká dávka betaglukánu a v druhej fáze sa užíva nízka dávka betaglukánu, pričom vysoká dávka betaglukánu je aspoň dvojnásobne vyššia ako nízka dávka betaglukánu a nízka dávka je nenulová.
10. 10. Režim dávkovania betaglukánu podľa nároku 9, vyznačujúci sa tým, že vysoká dávka betaglukánu je denne v rozsahu 600 mg až 800 mg, výhodne 700 mg a nízka dávka betaglukánu je denne v rozsahu 50 mg až 300 mg, výhodne 100 až 200 mg.
11. 11. Režim dávkovania betaglukánu podľa nároku 9 alebo 10, vyznačujúci sa tým, že vysoká dávka má počas užívania konštantnú úroveň a nízka dávka sa pravidelne strieda medzi hodnotami 100 a 200 mg.
12. 12. Režim dávkovania betaglukánu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 9ažll, vyznačujúci sa tým, že prvá fáza a druhá fáza trvajú 2 až 4 mesiace, výhodne tri mesiace.
13. 13. Režim dávkovania betaglukánu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 9ažl2, vyznačujúci sa tým, že prvá fáza a druhá fáza majú rovnakú časovú dĺžku.

    3 výkresy