SI9500249B - Monoklonska protitelesa proti topnima TNF-alfa receptorjema p55 in p75 ter TNF-alfa in njegovim analogom - Google Patents

Abstract

Predlozeni izum spada v podrocje farmacevtske industrije in se nanasa na novamonoklonska protitelesa in njihove fragmente, ki se vezejo na dostopno povrsino humanega rekombinantnega TNF-Alfa, TNF-Alfa analogov in TNF-Alfa topnih receptorjev. Izum se nanasa se na stabilne celicne linije hibridomov, ki so sposobne taka monoklonska protitelesa proizvajati, postopek za njihovo pripravo in farmacevtske pripravke, ki jih vsebujejo. Nadalje se izum nanasa tudi na metodo za kvantitativno dolocanje humanega TNF-Alfa, prostega in kompleksnega s topnima TNF-Alfa receptorjema p55 in p75 ter kit, ki se pri tem uporablja. Z do sedaj poznanimi monokonskimi protitelesi in iz njih razvitimi reagenti ni bilo mozno istocasno dolocati tako prostih makromolekul TNF-Alfa in njihovih topnih receptorjev kot tudi njihovih kompleksov. Predmet tega izuma je tudi TNF-Alfa analog TNF-Alfa His107/108, Cys95/148, ki ga v kompleksu s TNF-Alfa receptorjema uporabljamo kot antigen za imunizacijo misi.

Claims (2)

1. Λ PATENTNI ZAHTEVKI
2. 4, Monoklonska protitelesa in njihovi fragmenti, ki so zmožni vezati dostopno površino humanega TNF-α ali TNF-α analogov ali prostih topnih TNF-α receptorjev p55 ali p75 ter njihovih kompleksov, označeni s tem, da jih pridobimo z gojenjem stabilne celične linije hibridomov ECACC 95071217. Z. Monokion8ka protitelesa in njihovi fragmenti, ki so zmožni vezati se ali na dostopno površino humanega TNF-α ali TNF-α analogov ali prostih topnih TNF-α receptoijev p55 ali p75 ter njihovih kompleksov, označeni s tem, da jih pridobimo z gojenjem stabilne celične linije hibridomov ECACC 95071218. 3 Stabilna celična linija hibridomov ECACC 95071217. L). Stabilna celična linija hibridomov ECACC 95071218. 5\ Postopek za pripravo stabilne celične linije hibridomov po zahtevkih 6 do V označen s tem, da obsega: - imunizacijo miši z zmesjo kompleksa TNF-α analoga Cys95His107His108Cys148 in topnih nativnih ali rekombinantnih TNF-a receptorjev p55 in/aii p75, - fuzijo izolirani mišjih vraničnih celic s celično linijo mielomskih celic, in - kloniranje hibridomov, ki proizvajajo monoklonska protitelesa. G, Postopek po zahtevku ξ, označen s tem, da se za imunizacijo uporabi kompleks TNF-α analoga Cys95His107His108Cys148 in topnega nativnega ali rekombinantnega TNF-α receptorja p55. 'f. Postopek po zahtevku £T, označen s tem, da se za imunizacijo uporabi kompleks TNF-α analoga Cys95His107His108Cys148 in topnega nativnega ali rekombinantnega TNF-α receptorja p75. $ \ Postopek po zahtevku 5, označen s tem, da se za imunizacijo uporabi kompleks TNF-α analoga Cys95His107His108Cys148 in obeh topnih nativnih ali rekombinahtnih receptoijev p55 In p75. 9 Metoda za kvantitativno določanje TNF-α receptorja p55, prostega in kompleksiranega s TNF-α, v bioloških vzorcih z uporabo monoklonskih protiteles in njihovih fragmentov po zahtevku /I * 40 Metoda za kvantitativno določanje TNF-α receptorjev p75, prostih ali kompleksiranih s TNF-α, v bioloških vzorcih z uporabo monoklonskih protiteles po zahtevku %.# 4/j.Kit za določanje topnega TNF-α receptorja p55, prostega ali kompleksiranega z TNF-α v bioloških vzorcih, označen s tem, da vsebuje monoklonska protitelesa in njihove fragmente po zahtevki) A· /£,Kit za določanje topnega TNF-α receptorja p75, prostega ali kompleksiranega z TNF-α v bioloških vzorcih, označen s tem, da vsebuje monoklonska protitelesa in njihove fragmente po zahtevku /3-TNF-a analog Cys95His107His108Cys148. .Postopek za pripravo TNF-α analogov po zahtevku označen s tem, da obsega: - ekspresijo v rekombinantnem sevu E. coli in - enostopenjsko čiščenje s keiatno kromatografijo. 4$, Uporaba TNF-α analogov po zahtevku /3 za izolacijo TNF-α topnih receptoijev p55 in p75 iz humanega urina.