SE512633C2 - Användning av hyaluronidas för reduktion av inflammatoriska cellinfiltrat - Google Patents

Description

512 633 673); eller en myokardinflammation av viralt ursprung Waldenström et al, Eur J Clin Invest 1993; 23: 277-282).

Hyaluronan är en förening med en uttalad vattenbindande förmåga (Mason RM, Progr Clin Biol 1981; Res 54: 87-112). En förhöjd lokal produktion och ackumulation av hyaluronan i bindväven hos ett organ leder därför till en lokal ackumulation av vätska, med risk för skadligt interstitiellt Vävnads- ödem, som i sin tur kan leda till en försämring av organets funktion.

Det är uppenbart att denna ackumulation av hyaluronan i till exempel ett organ i ett tillstånd av inflammation kan leda till mycket allvarliga konse- kvenser. När det gäller en organtransplantation kan den också leda till irre- versibilitet av en avstötning av organet, och i vissa fall slutligen till ett livs- hotande tillstånd. Det föreligger därför ett stort behov av en metod för att lindra detta risktillstånd. Ändamålet med föreliggande uppfinning är att till- handahålla ett sätt att uppnå detta.

Hyaluronidas har tidigare, under sjuttiotalet, använts för att minska effek- terna av hjärtinfarkt (Maroko PR et al, Circulation 1972; 46(3): 430-7; Mac- lean D, et al, Science 1976; 194 (4261): 199-200). Man förstod dock inte verkningssättet. I en in vitro-djurmodell förbättades hjärtverksarnheten efter ischemisk skada vid administration av hyaluronidas (Rovetto MJ, Circ-Res 1977; 41(3): 373-9; Fischer JH et al, Transplantation 1994; 58(6): 748-53).

Trots det faktum att det redan under en viss tid har varit känt att interstiti- ellt ödem vid transplantatavstötning kan vara resultatet av en interstitiell ackumulation av hyaluronan har aldrig användningen av hyaluronidas för att komma över de allvarliga kliniska problemen med avstötning av allogent transplantat beroende på inflammation föreslagits.

De facto existerar flera skäl som medfört att fackmän på området inte trott att detta skulle vara en användbar lösning på problemet.

(Il 512 633 Först ansågs det som helt osannolikt att enzymet skulle nå den inflammera- de vävnaden.

För det andra, även om enzymet nådde den inflammerade vävnaden ansågs det som osannolikt att det skulle vara funktionellt eftersom pH-optirnum för hyaluronidas är tämligen surt medan pH i vävnaden år neutralt.

Slutligen ansåg man att om enzymet trots detta skulle vara aktivt kunde detta leda till en nedbrytning av hyaluronan i hela kroppen och inte väsent- ligen endast i den inflammerade vävnaden. Även om hyaluronidas har använts i laboratorietest på cellkulturer och labo- ratoriedjur har det funnit en allmän fördom bland fackmän mot dess an- vändning på människor.

De flesta vetenskapsmän tror för närvarande att de inflammatoriska cellerna ansamlas i organen på grund av att de har en särskild uppgift för organet.

Till vår stora överraskning minskade inte endast transplantatödem genom hyaluronidasbehandling utan den inflammatoriska cellinfiltrationen reduce- rades även. Detta innebär att hyaluronan fungerar som en magnet för an- samling av inflammatoriska celler. Detta kan förklaras genom det faktum att lymfocyter bär receptorer för hyaluronan. Funktionen hos dessa receptorer har tidigare inte förståtts.

ALLMÄN BESKRIVNING AV UPPFINNINGEN Föreliggande uppfinnare har kunnat visa att profylaktisk behandling med hyaluronidas fördröjer avstötning av ett icke-immunsupprimerat allogent transplantat och reducerar inflammatoriska cellinfiltrat. Dessa resultat in- nebår helt oväntat att hyaluronan agerar som en magnet för inflammatoris- ka celler. Denna mekanism skulle kunna användas universellt för att redu- cera pågående inflammation genom att reducera ansamlingen av inflamma- toriska celler. Dessa för en fackman på området mycket överraskande re- sultat medförde att föreliggande uppfinnare har utvecklat ett farmaceutikum 512 633 baserat på hyaluronidas för behandling av tillstånd av inflammation associe- rad med en ökad lokal syntes av hyaluronan. Ändamålet med föreliggande uppfinningen är således användningen av hya- luronidas för framställning av ett läkemedel för behandling av tillstånd av inflammation associerade med en ökad lokal syntes av hyaluronan.

Uppfinningen kommer nu att beskrivas mera detaljerat nedan och definieras i de bifogade patentkraven.

DETALJERAD BESKRIVNING AV UPPFINNINGEN En föredragen utföringsform av uppfinningen hänför sig till användningen av hyaluronidas för framställning av ett läkemedel för behandling av tillstånd av inflammation hos ett däggdjur av djur- eller mänskligt ursprung. Denna behandling kan vara av preventiv eller botande karaktär.

Enligt en särskilt föredragen utföringsform användes hyaluronidas för fram- ställning av ett läkemedel för behandling av ett tillstånd av inflammation as- socierat med organtransplantation. Organet kan t.ex. vara en lever, en njure eller ett hjärta från ett däggdjur såsom ett djur eller en människa.

Enligt uppfinningen användes hyaluronidas för framställning av ett läkeme- del som skall administreras systemiskt eller lokalt.

Hyaluronidas skall införlivas i läkemedlet i en sådan mängd att det ger en dagsdos av från l IU till 20000 IU per kg kroppsvikt, mera föredraget från 100 IU till 15000 lU per kg kroppsvikt eller från 500 IU till 10000 IU per kg kroppsvikt, vid systemisk eller lokal administration av läkemedlet.

Läkemedlet enligt uppfinningen framställes på ett sätt som är konventionellt känt för en fackman. Det lokalt påförda läkemedlet kan förutom hyaluroni- das innehålla beståndsdelar av konventionella organbevarande lösninga:r såsom dextran, anjoner, katjoner och osmotiska molekyler. Dess systemiska användníngsform kan innehålla stabiliseringsmedel och saltlösning. 512 633 Uppfinningen har hittills testats i en råttmodell av Wistar-råttor av hankön med en vikt av ungefär 180 g. Råttorna transplanterades heterotopiskt med ett vaskulariserat hjärttransplantat. 20 transplantat genomfördes. 10 djur ñck dagliga injektioner av hyaluronidas 20000 IU/ kg kroppsvikt/ dag iv. Den behandlade transplantatgruppen (bestämd genom daglig palpering av slag av transplantatet) överlevde under 9,7 +/- 0,5 dagar och kontrollgruppen (obe- handlad) av djur överlevde endast 8,3 +/- 0,3 dagar (skillnaden är signifi- kant p<0,01). Dag 6 undersöktes ytterligare 21 transplantat med avseende på halten inflammatoriska celler. Dessa rankades i tur och ordning med av- seende på halten inflammatoriska celler. Rankningssiffran för normalitet var signifikant bättre hos de behandlade djuren (behandlade med hyaluronidas enligt ovan). Försöket visar därigenom att cellinfiltraten är mindre när hya- luronidas givits. Det förefaller som om hyaluronan åtminstone är partiellt ansvarigt för ansamlingen av inflammatoriska celler som i sin tur medför transplantationsavstötning. 512 633 seende på halten inflammatoriska celler. Rankningssiffran för normalitet var signiñkant bättre hos de behandlade djuren (behandlade med hyaluronidas enligt ovan). Försöket visar därigenom att cellinfiltraten är mindre när hya- luronídas givits. Det förefaller som om hyaluronan åtminstone är partiellt ansvarigt för ansamlingen av inflammatoriska celler som i sin tur medför transplantationsavstötning.

Claims (5)

512 633 10 P.ans. 9702657-9 PATENTKRAV

1. Användning av hyaluronidas för framställning av ett läkemedel för reduk- tion av inflammatoriska cellinfiltrat associerad med en ökad lokal syntes av hyaluronan.

2. Användningen enligt patentkravet 1 av hyaluronidas vid frarnställning av ett läkemedel för reduktion av inflammatoriska cellinfiltrat i samband med organtransplantation.

3. Användningen enligt något av föregående patentkrav för framställning av ett läkemedel som innefattar hyaluronidas i en mängd som ger en dagsdos av från 1 till 80000 IU/ kg kroppsvikt given lokalt eller systemiskt till ett däggdjur.

4. Användningen enligt patentkravet 3 för framställning av ett läkemedel in- nefattande hyaluronidas i en mängd som ger en dagsdos av från 100 till 20000 IU/ kg kroppsvikt.

5. Användningen enligt något av föregående patentkrav för framställning av ett läkemedel som skall ges i preventivt eller botande syfte.