SE467874B - PREPARATION OF THE WINE BLAST AND THE WINE CRYSTAL - Google Patents

PREPARATION OF THE WINE BLAST AND THE WINE CRYSTAL

Info

Publication number
SE467874B
SE467874B SE8800170A SE8800170A SE467874B SE 467874 B SE467874 B SE 467874B SE 8800170 A SE8800170 A SE 8800170A SE 8800170 A SE8800170 A SE 8800170A SE 467874 B SE467874 B SE 467874B
Authority
SE
Sweden
Prior art keywords
formula
alkyl
alk
product
aryl
Prior art date
Application number
SE8800170A
Other languages
Swedish (sv)
Other versions
SE8800170D0 (en
SE8800170L (en
Inventor
J P Kutney
Original Assignee
Univ British Columbia
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ British Columbia filed Critical Univ British Columbia
Publication of SE8800170D0 publication Critical patent/SE8800170D0/en
Publication of SE8800170L publication Critical patent/SE8800170L/en
Publication of SE467874B publication Critical patent/SE467874B/en

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • C07D519/04Dimeric indole alkaloids, e.g. vincaleucoblastine
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Description

467 874 2 Betingelserna för kopplingsreaktionen som beskrives enligt föreliggande uppfinning hänför sig till en betydelse- full modifiering av metoden utvecklad i dessa laboratorier (den amerikanska patentskriften 4 279 817; Helv. Chim. Acta. 59, 2858 (1976) (schema 1)). Föreliggande modifikation medger speciellt framställningen och isoleringen av den höggradigt instabila dihydropyridiniummellanprodukten VI (R = COOCH3) som bildas under kopplingen av katarantin-N-oxiden (formeln IIa> med vindolin (formeln III). The conditions of the coupling reaction described in the present invention relate to a significant modification of the method developed in these laboratories (U.S. Patent 4,279,817; Helv. Chim. Acta. 59, 2858 (1976) (Scheme 1)). . In particular, the present modification allows the preparation and isolation of the highly unstable dihydropyridinium intermediate VI (R = COOCH3) formed during the coupling of the catarantine N-oxide (formula IIa> with vindoline (formula III).

I allmänhet uppnås Nb-oxidderivatet av indolenheten (formeln Ila) eller besläktade analoger (formeln IV, vari R1 = R2 = R3 = R4 = H eller R2 = R3 = R4 = H och R1 = alkyl med strukturen (CH2)nCH3, vari n = 0-10) framställda med en persyra, såsom m-kloroperbensoesyra eller p-nitrobensoesyra i ett inert organiskt lösningsmedel, såsom metylenklorid eller andra organiska polyhalogenlösningsmedel vid olika temperatu- rer, exempelvis -77°C, 0°C, rumstemperatur och högre. Den sålunda bildade N-oxidmellanprodukten användes i nästa steg utan isolering. Fragmenteringsreaktionen, som uppdelar C5-C18- -bindningen i indol-Nb-oxidmellanprodukten i fragment genomfö- res i närvaro av ett reagens, såsom trifihmroättüæyraæfiwdrid. För maximering av den efterföljande kopplingsreaktionen som främ- jar bildningen av en naturlig dimer bunden vid C18 (indolen- het) och C15 (dihydroindolenhet) kan dihydroindolenheten sättas till reaktionsblandningen före fragmenteringsreaktion- en. Såsom alternativa reagens för trifluoroättiksyraanhydridkompm- nenten_som användes,vid fragmentering och koppling kan triklo- roättiksyraanhydrid, ättiksyraanfiyürid, acetylhalogenider-och tosylan- hydrid användas. Dessa reagens medför en Polonovski-typfrag- mentering av C5-C13-bindningen i föreningarna visade med formlerna IIa och IV. (hl SCHEMA I '_f 1 17 1. vinaolin \ f 3 2 I 3 2, NaBH4 R COOCH 467 874 OJ U1 Reaktionstemperaturen, tiden och tryckbetingelser ar i allmänhet likartade sàdana som användes i Polonovski-reaktion- en som enligt sin ursprungliga tillämpning innefattade dealky- lering av tertiära och heteroçykliska aminer genom acylering av motsvarande bt-oxider med äLLjksyraanhydríd eller acetylklorid (jämför Merck Index, 8:e upplagan, 1968, sid 1203).In general, the Nb oxide derivative is obtained by the indole moiety (formula IIa) or related analogs (formula IV, wherein R 1 = R 2 = R 3 = R 4 = H or R 2 = R 3 = R 4 = H and R 1 = alkyl having the structure (CH 2) n CH 3, wherein n = 0-10) prepared with a peracid, such as m-chloroperbenzoic acid or p-nitrobenzoic acid in an inert organic solvent, such as methylene chloride or other organic polyhalogen solvents at different temperatures, for example -77 ° C, 0 ° C, room temperature and higher. The N-oxide intermediate thus formed was used in the next step without isolation. The fragmentation reaction which divides the C5-C18 bond into the indole-Nb oxide intermediate into fragments is carried out in the presence of a reagent such as trihydrochloride. To maximize the subsequent coupling reaction that promotes the formation of a natural dimer bound at C18 (indole unit) and C15 (dihydroindole unit), the dihydroindole unit can be added to the reaction mixture prior to the fragmentation reaction. As alternative reagents for the trifluoroacetic anhydride component used, in fragmentation and coupling, trichloroacetic anhydride, acetic acid fiuride, acetyl halides and tosyl anhydride can be used. These reagents cause a Polonovski type fragmentation of the C5-C13 bond in the compounds shown by formulas IIa and IV. (hl SCHEME I '_f 1 17 1. vinaolin \ f 3 2 I 3 2, NaBH4 R COOCH 467 874 OJ U1 The reaction temperature, time and pressure conditions are generally similar to those used in the Polonovski reaction which, according to its original application, included dealkylation of tertiary and heterocyclic amines by acylation of the corresponding bt oxides with nitric anhydride or acetyl chloride (compare Merck Index, 8th Edition, 1968, page 1203).

Temperatu- ren för fragmenteringen och kopplingsreaktionen kan variera fràn -70°C till 40°C och vallet. företrädesvis i làgtemperaturinter- De delar av reaktionen som hänför Sig till bildningen av N-oxidföreningen kan genomföras i öppen atmosfär eller under en atmosfär av inert gas, såsom argon eller nagon annan inert gas tillhörande gruppen noll i det periodiska systemet, såsom helium, kväve, neon, etc. atmosfär användes vid fragmenterings- av reaktionen och under en positiv temperaturreglering, Samma betingelser av inert och kopplingspartierna trädesvis i intervallet ~4Û°C till -60°C. före- 9 "i N I H "f" A Vlfldolifi.The temperature of the fragmentation and coupling reaction can vary from -70 ° C to 40 ° C and the whey. The parts of the reaction which relate to the formation of the N-oxide compound can be carried out in an open atmosphere or under an atmosphere of inert gas, such as argon or any other inert gas belonging to the group zero in the periodic table, such as helium, nitrogen, neon, etc. atmosphere is used in fragmentation of the reaction and under a positive temperature control. The same conditions of the inert and the coupling portions are generally in the range 44Û ° C to -60 ° C. pre- 9 "i N I H" f "A Vl fl doli fi.

VI ~ v-mxotz..VI ~ v-mxotz ..

VII oínåolín VIII f) G1 40 467 874 Pa grund av den laga temperaturen som krävs för reak- tionerna i de senare stadierna kan reaktionstiden variera fràr flera timmar till flera dagar.VII oínåolín VIII f) G1 40 467 874 Due to the low temperature required for the reactions in the later stages, the reaction time may vary from several hours to several days.

Den först bildade indol-dihydroindoldimermellanproduk- ten uppvisar efter den (stereospecifika) kopplingsreaktionen en funktionell iminiumsaltgrupp vid Nb-atomen i indolgruppen såsom anges i formel V eller VI. Reduktion av denna iminium- mellanprodukt genom reaktion med alkalimetallborohydrid (NaBH4, KBH4, LiBH4) ger de(n) dimera alkaloiderna(en) sàsom beskrives i den amerikanska patentskriften 4 279 817.The first formed indole-dihydroindole dimer intermediate, after the (stereospecific) coupling reaction, exhibits a functional iminium salt group at the Nb atom of the indole group as set forth in formula V or VI. Reduction of this iminium intermediate by reaction with alkali metal borohydride (NaBH 4, KBH 4, LiBH 4) yields the dimeric alkaloids (s) as described in U.S. Patent No. 4,279,817.

Enligt föreliggande uppfinning kan iminiummellanproduk- ten (formeln V eller VI) isoleras såsom sàdan genom noggrann manipulation. Efter det att kopplingsreaktionen är fullbordad anbringas reaktionsblandningen direkt pà ett lämpligt kromato- grafiskt system, sàsom kolonn-, tunnskikts- eller högkvali- tetsvätskekromatografi, företrädesvis omvänd-fas- och/eller storleks-uteslutningsseparationsmetoder. Temperaturen vid driften kan variera fràn 4°C till rumstemperatur. Alternativt kan flyktiga reagens och lösningsmedel, som finns närvarande tillsammans med iminiummellanprodukten i reaktionsblandningen avlägsnas under reducerat tryck och temperatur, företrädesvis vid lägre än -10°C. Erhàllen fast substans (formeln V eller VI) löses därefter i olika organiska lösningsmedel, såsom halogenerade kolväten, etrar, alkoholer, acetonitril, etc. och/eller olika vattenhaltiga buffertsystem. För bufferten kan pH variera fràn 2 till 10. Lösningen av iminiummellanprodukten (formeln V eller VI) kan därefter renas medelst kromatografis- ka metoder beskrivna ovan före ytterligare karakterisering.According to the present invention, the iminium intermediate (formula V or VI) can be isolated as such by careful manipulation. After the coupling reaction is completed, the reaction mixture is applied directly to a suitable chromatographic system, such as column, thin layer or high quality liquid chromatography, preferably reverse phase and / or size exclusion separation methods. The operating temperature can vary from 4 ° C to room temperature. Alternatively, volatile reagents and solvents present together with the iminium intermediate in the reaction mixture can be removed under reduced pressure and temperature, preferably at less than -10 ° C. The obtained solid (formula V or VI) is then dissolved in various organic solvents, such as halogenated hydrocarbons, ethers, alcohols, acetonitrile, etc. and / or various aqueous buffer systems. For the buffer, the pH can vary from 2 to 10. The solution of the iminium intermediate (formula V or VI) can then be purified by chromatographic methods described above before further characterization.

Alternativt kan iminiummellanproduktlösningen användas direkt i efterföljande reaktioner. Användningen av betingelser av inert atmosfär kan eventuellt vara nödvändig.Alternatively, the iminium intermediate solution can be used directly in subsequent reactions. The use of inert atmosphere conditions may be necessary.

När utgàngsindolenheten uppvisar en C3-C4-dubbelbindning (exempelvis katarantin lanprodukt en ü,ß-omättao funktionell iminiumgrupp såsom visas i formel VI. Reduktion av VI med alkalimetallborohydrid (NaBH4, KBH4, LiBH4) ger 3',4'-dehydrovinblastinföreningar (formel VII). Föreliggande förfarande utnyttjar ett nytt reduktionsförfarande vari överföringen av iminiummellanproduk- ten (formel VI) till enaminen (formel VIII) kan uppnås. Rea- gens som användes för denna reduktion innefattar 1,4-dihydro- 467 874 UI pyridinföreningar (de sa kallade NADH-modellerna) sàsom repre- senteras genom formel IX, vari RI, R2, R3, R4, R5 och R5 kan utgöras av vilken som helst ur gruppen bestående av H, alkyl, substituerad alkyl, aryl eller substituerad aryl. Tvà serier av sådana föreningar finns lättillgängliga (Chem. Rev. 82, 232 (1982); Chem. Rev. 72, 1 (1972)). Den första är känd sàsom Hantzch-estrar, vari R3 och.When the starting indole moiety exhibits a C3-C4 double bond (e.g. catarantine lan product a β, β-unsaturated functional iminium group as shown in formula VI. Reduction of VI with alkali metal borohydride (NaBH4, KBH4, LiBH4) gives 3 ', 4'-dehydrovinblastine compounds The present process utilizes a novel reduction process in which the conversion of the iminium intermediate (formula VI) to the enamine (formula VIII) can be accomplished Reagents used for this reduction include 1,4-dihydro-467,874 UI pyridine compounds (the so-called The NADH models) as represented by formula IX, wherein R 1, R 2, R 3, R 4, R 5 and R 5 may be any of the group consisting of H, alkyl, substituted alkyl, aryl or substituted aryl. compounds are readily available (Chem. Rev. 82, 232 (1982); Chem. Rev. 72, 1 (1972)). The first is known as Hantzch esters, wherein R 3 and.

R5 i formel IX utgöres av karboxiestrar, exempelvis karboetoxi (COOCZHS). Den andra serien utgöres av N-substituerad 1,4-di- hydronikotinamider (formel IX), vari R1 är substituerad alkyl eller substituerad aryl såsom funktionell grupp, exempelvis bensyl, och R3 är CONR7R8, vari R7 och R8 kan utgöras av vilken som helst av följande: väte, alkyl, substituerad alkyl, aryl eller substituerad aryl.R5 in formula IX consists of carboxy esters, for example carboethoxy (COOCZHS). The second series consists of N-substituted 1,4-dihydronicotinamides (formula IX), wherein R 1 is substituted alkyl or substituted aryl as the functional group, for example benzyl, and R 3 is CONR 7 R 8, wherein R 7 and R 8 may be any of the following: hydrogen, alkyl, substituted alkyl, aryl or substituted aryl.

Ovanstående reduktanter kan användas för sig eller i kombination. När 1,4-dihydropyridiner användes för reduktion av iminium VI, användes organiska lösningsmedel, såsom alkoho- ler, acetonitril eller högre medlemmar ur denna grupp, dime- tylsulfoxid, dimetylformamid, olika etrar, sàsom dioxan, tetrahydrofuran, etc., klorerade kolväten, etc., normalt utan nagon vattenhaltig buffert såsom samverkande lösningsmedel.The above reductants can be used alone or in combination. When 1,4-dihydropyridines are used to reduce iminium VI, organic solvents such as alcohols, acetonitrile or higher members of this group, dimethyl sulfoxide, dimethylformamide, various ethers such as dioxane, tetrahydrofuran, etc., chlorinated hydrocarbons are used. etc., normally without any aqueous buffer such as co-solvent.

Reduktionens framskridande övervakas genom direkt analys av reaktionsblandningen pá ett lämpligt kromatografiskt system, företrädesvis högkvalitetsvätskekromatografi i omvänd fas.The progress of the reduction is monitored by direct analysis of the reaction mixture on a suitable chromatographic system, preferably high quality reverse phase liquid chromatography.

Denna metod användes för optimering av reaktionstemperaturen, tiden, trycket och koncentrationen av reaktanter. Reaktions~ temperaturen kan variera fràn -60°C till 60°C och företrädes- vis fran 4°C till rumstemperatur. Reaktionstiden kan variera fràn flera minuter till flera dagar beroende pà andra paramet- rar. Reduktionen genomföres under övertäckning och under inerta betingelser, såsom argon eller en inert gas ur gruppen noll i det periodiska systemet (kväve, helium, neon, etc.>. 40 v 467 874 Enaminen (formeln VIII) som bildas i ovanstàende reduk- tion kan användas direkt för efterföljande reaktion eller kan isoleras genom noggrann manipulering. Reaktionsblandningen anbringas direkt pà ett lämpligt kromatografiskt system, sàson kolonn-, tunnskikts- eller högkvalitetsvätskekromatografi, företrädesvis enligt metoden med omvänd fas och/eller gelper- meationsseparation. Temperaturen vid genomförandet kan variera fràn 4°C till rumstemperatur. Alternativt avlägsnas flyktiga reagens och lösningsmedel närvarande i reaktionsblandningen under reducerat tryck och temperatur, företrädesvis vid lägre än -10°C. Erhállen återstod kan renas med ovan beskrivna kromatografiska metoder före ytterligare karakterisering eller transformation.This method was used to optimize the reaction temperature, time, pressure and concentration of reactants. The reaction temperature can vary from -60 ° C to 60 ° C and preferably from 4 ° C to room temperature. The reaction time can vary from several minutes to several days depending on other parameters. The reduction is carried out under cover and under inert conditions, such as argon or an inert gas from the group zero in the periodic table (nitrogen, helium, neon, etc.>. 40 v 467 874 The enamine (formula VIII) formed in the above reduction can be can be used directly for subsequent reaction or can be isolated by careful manipulation.The reaction mixture is applied directly to a suitable chromatographic system, such as column, thin-layer or high quality liquid chromatography, preferably by the reverse phase and / or gel permeation separation method. Alternatively, volatile reagents and solvents present in the reaction mixture are removed under reduced pressure and temperature, preferably at less than -10 ° C. The residue obtained can be purified by the above-described chromatographic methods before further characterization or transformation.

Behandling av enaminen VIII med alkalimetallborohydrid (NaBH4, KBH4, LiBH4) ger 4'-deoxovinblastinföreningarna (for- mel X, R = COOCH3) och 4'-deoxo-4'-epi-vinblastinföreningarna (formel XI, R = COOCH3). Däremot kan enminen VIII transforme- ras under oxidationsbetingelser till vinblastin/vinkristinse- rien via iminiummellanprodukten (formeln XVI).Treatment of the enamine VIII with alkali metal borohydride (NaBH4, KBH4, LiBH4) gives the 4'-deoxovine blastine compounds (formula X, R = COOCH3) and the 4'-deoxo-4'-epi-vinblastine compounds (formula XI, R = COOCH3). However, the enmin VIII can be transformed under oxidation conditions into the vinblastine / vincristine series via the iminium intermediate (formula XVI).

Oxidationsbetingelser som användes för överföring av enamin (formeln VIII) till en iminiummellanprodukt (formel XVI) innefattar: (1) reglerad luftning/syresättning; (2) tillsats av flavincoenzymer Eriboflavin, formel XII R = H; flavinmononukleotid (FMN), formel XII, R = PO32'- l I flavinadenindinukleotid (FAD), formeln XII, R = (PO3)22'-ade- nosin] följt av reglerad luftning/syresättning; 467 874 UI *on " ^f° Ur., O XII (3) tillsats av den reducerade formen av flavinkoenzymer Idihydroriboflavin, formel XIII, R = H; dihydroflavinmononuk- leotid (FMNH2). Formel XIII, R = PO32"; dihydroflavinadenindi- nukleotid (FADH2); formel XIII, R = reglerad luftning/syresättning; XIII (4) tillsats av flavinkoenzymanaloger uppvisande isoal- loxazinstrukturen representerad genom formeln XIV, vari RI, R2 och R3 kan utgöras av alkyl, substituerad alkyl, aryl eller substituerad aryl, följt av reglerad luftning/syresättning; XIV E; (II 40 467 874 (5) tillsats av den reducerade formen (1,5-dihydro) av ovannämnda flavinkoenzymanaloger representerade med formel XV, vari Rl, R2 och R3 kan utgöras av alkyl, substituerad alkyl, arvl eller substituerad aryl, följt av reglerad luftning/syre- sättning; R I' H RI NI Yo NH XV få ä 0 (6) tillsats av väteperoxid och/eller hydroperoxider representerade genom formel R-OOH, vari R kan vara alkyl, substituerad alkyl, aryl eller substituerad aryl; (7) tillsats av persyror representerade av formel R-CO3H, vari R kan vara alkyl, substituerad alkyl, aryl eller substituerad aryl; (B) tillsats av superoxider; (9) tillsats av en fri hydroxiradikal (ÖH) alstrad pà ett flertal sätt, exempelvis genom användningen av väteperoxid i närvaro av järn(II)jon. (10) tillsats av en metalljon som är en god elektron- acceptor, exempelvis järn(III)jon (Fe+3); koppar(II)jon ; k°ppar<1>j°n , kvicksi1verj°n och si1ver(I)jon (Ag*3) följt av reglerad luftning/syresättning.Oxidation conditions used to convert enamine (Formula VIII) to an iminium intermediate (Formula XVI) include: (1) controlled aeration / oxygenation; (2) addition of flavin coenzymes Eriboflavin, formula XII R = H; flavin mononucleotide (FMN), formula XII, R = PO32'- I flavin adenine dinucleotide (FAD), formula XII, R = (PO3) 22 'adenosine] followed by regulated aeration / oxygenation; 467 874 UI * on "^ f ° Ur., O XII (3) addition of the reduced form of flavin coenzymes Idihydroriboflavin, formula XIII, R = H; dihydroflavin mononucleotide (FMNH2). Formula XIII, R = PO32"; dihydroflavinadenine dinucleotide (FADH2); formula XIII, R = regulated aeration / oxygenation; XIII (4) addition of flavin coenzyme analogs having the isoalloxazine structure represented by the formula XIV, wherein R 1, R 2 and R 3 may be alkyl, substituted alkyl, aryl or substituted aryl, followed by controlled aeration / oxygenation; XIV E; (II) addition of the reduced form (1,5-dihydro) of the above flavin coenzyme analogues represented by formula XV, wherein R 1, R 2 and R 3 may be alkyl, substituted alkyl, aryl or substituted aryl, followed by controlled aeration / oxygenation; R 1 'H RI NI Yo NH XV may be added (0) addition of hydrogen peroxide and / or hydroperoxides represented by formula R-OOH, wherein R may be alkyl, substituted alkyl, aryl or substituted aryl; ) addition of peracids represented by formula R-CO 3 H, wherein R may be alkyl, substituted alkyl, aryl or substituted aryl; (B) addition of superoxides; (9) addition of a free hydroxy radical (OH) generated in a variety of ways, e.g. by the use of hydrogen peroxide in the presence of iron (II) ion. (10) addition of a metal ion which is a good electron acceptor, for example iron (III) ion (Fe + 3); copper (II) ion; 1> iron, mercury and silver (I) ion (Ag * 3) followed by regulated aeration / oxygenation.

Oxidationsförloppen som inbegriper reglerad luftning/sy- resättning (betingelse (1)), flavinkoenzymanaloger (betingel- ser (4), se (7)), (5)), peroxider (betingelse (6)), persyror (betingel- superoxider (betingelse (8)), fri hydroxiradikal (ÖH) (betingelse (9)) och metalljoner, som kan ge upphov till elektronöverföring (betingelse (10)) kan genom- föras i organiska lösningsmedel, sásom alkoholer, acetonitril eller högre medlemmar i denna serie, dimetylsulfoxid, dimetyl- formamid, olika etrar, såsom dioxan, tetrahydrofuran, aroma- tiska kolväten, såsom bensen, toluen, etc.Oxidation processes involving regulated aeration / oxygenation (condition (1)), flavin coenzyme analogues (condition (4), see (7)), (5)), peroxides (condition (6)), peracids (condition superoxides ( condition (8)), free hydroxy radical (OH) (condition (9)) and metal ions, which can give rise to electron transfer (condition (10)) can be carried out in organic solvents, such as alcohols, acetonitrile or higher members of this series , dimethyl sulfoxide, dimethylformamide, various ethers such as dioxane, tetrahydrofuran, aromatic hydrocarbons such as benzene, toluene, etc.

Oxidationsförloppen, som inbegriper flavinkoenzymer (betingelser (2), (3)), fordrar en vattenhaltig buffert (exem- pelvis fosfat, tris-HCl, MES-buffert) vid pH 5-9, men företrä- desvis i intervallet 6-8 sasom lösningsmedel. Ett organiskt samverkande lösningsmedel, exempelvis alkoholer, acetontril '467 874 10 eller högre medlemmar ur denna grupp, dioxan, tetrahydrofuran, dimetylsulfoxid, dimetylformamid, kan användas.The oxidation processes, which include flavin coenzymes (conditions (2), (3)), require an aqueous buffer (e.g. phosphate, tris-HCl, MES buffer) at pH 5-9, but preferably in the range 6-8 as solvent. An organically cooperating solvent, for example alcohols, acetonitrile or higher members of this group, dioxane, tetrahydrofuran, dimethyl sulfoxide, dimethylformamide, may be used.

Oxidationsförloppets fortskridande övervakas genom direkt analys av reaktionsblandningen pà ett lämpligt kromato- grafiskt system, företrädesvis högkvalitetsvätskekromatografi i omvänd fas. Denna metod användes för optimering av reak- tionstemperaturen, tiden, trycket och koncentrationen av reaktanter. Reaktionstemperaturen kan variera fràn -60°C till 60°C och företrädesvis frán 4°C till rumstemperatur. Reak- tionstiden kan variera fràn flera minuter till flera dagar beroende pà andra parametrar. Reaktionen genomföres vid atmos- färstryck. Överföringen av mellanprodukt (formel XVI) till vinblas-i tin (formel I) kan uppnås genom reaktion av XVI med alkalime- tallborohydrid (NaBH4, KBH4, LiBH4) i lämpliga lösningsmedel (organiska eller vattenhaltiga) sàsom användes i oxidations- förloppet (betingelser (1)-(10)).The progress of the oxidation process is monitored by direct analysis of the reaction mixture on a suitable chromatographic system, preferably high quality reverse phase liquid chromatography. This method was used to optimize the reaction temperature, time, pressure and concentration of reactants. The reaction temperature may vary from -60 ° C to 60 ° C and preferably from 4 ° C to room temperature. The reaction time can vary from several minutes to several days depending on other parameters. The reaction is carried out at atmospheric pressure. The conversion of intermediate (formula XVI) to vinblastin (formula I) can be achieved by reacting XVI with alkali metal borohydride (NaBH4, KBH4, LiBH4) in suitable solvents (organic or aqueous) as used in the oxidation process (conditions ( 1) - (10)).

För praktiska ändamål fordras ej isolering av mellanpro- dukter (formel V, VI, VIII, XVI) och hela förfarandet fràn indolenheten (formel II) och dihydroindolenheten (formel III) till slutprodukten vinblastin (formel I) kan företrädesvis genomföras såsom en ensatsoperation. 40 (Pl 40 11 467 874 Sammanfattningsvis är föreliggande förfarande tillämp- bart för framställning av dimera produkter av katarantin och dihydrokatarantin med vindolin såsom utgàngsmaterial och fenyl-, alkyl- och amidderivat som omfattas av följande formler: XXII R" XXIII 332 Formel XXI utgöres av den visade formeln och i denna formel representerar alk lágalkyl som utgöres av C1-C5 och företrädesvis C1-C3; aryl är monoaryl, sàsom bensyl, styryl och xylyl; RI utgöres av väte, alk, CHO eller COR5 vari R5 är alkyl eller aryl; R2 och R3 utgöres av väte eller -CO-alk; R4 utgöres av COO-alk, CONH-NH2, CONH2, CONHR5 eller CON(R5)2, vari R5 är alkyl; Z är -CH2-CH2- eller -CH=CH- och R utgöres av en medlem ur indolgruppen representerad av formeln XXII, vari R7 utgöres av väte eller C00-alk; R5 utgöres av väte, OH, O-alk, OCO-alk eller alkyl; RQ utgöres av väte, OH, O-alk, OCO-alk eller alk; R10 utgöres av väte, OH, O-alk, OCO-alk 467 40 12 874 eller formel XXIII, vari Ríi är väte eller COO-alk; R12 är alkyl.For practical purposes, isolation of intermediates (formula V, VI, VIII, XVI) is not required and the whole process from the indole unit (formula II) and the dihydroindole unit (formula III) to the final product vinblastine (formula I) can preferably be carried out as a single operation. In summary, the present process is applicable to the preparation of dimeric products of catarantine and dihydrocatarantine with vindoline as starting materials and phenyl, alkyl and amide derivatives of the following formulas: XXII R "XXIII 332 Formula XXI consists of the formula shown and in this formula represents alk lower alkyl which is C1-C5 and preferably C1-C3; aryl is monoaryl such as benzyl, styryl and xylyl; R1 is hydrogen, alk, CHO or COR5 wherein R5 is alkyl or aryl; R 2 and R 3 are hydrogen or -CO-alk; R 4 is COO-alk, CONH-NH 2, CONH 2, CONHR 5 or CON (R 5) 2, wherein R 5 is alkyl; Z is -CH 2 -CH 2 - or -CH = CH and R is a member of the indole group represented by the formula XXII, wherein R 7 is hydrogen or C 0-4 alk; R 5 is hydrogen, OH, O-alk, OCO-alk or alkyl; R 5 is hydrogen, OH, O- alk, OCO-alk or alk; R 10 is hydrogen, OH, O-alk, OCO-alk or formula XXIII, wherein R 11 is hydrogen or COO-alk; R12 is alkyl.

Föreliggande uppfinning skiljer sig fràn tidigare känd teknik Eden amerikanska patentskriften 4 279 817] i flera betydelsefulla stadier, speciellt dä isolering och karakteri- seringen av instabila mellanprodukten V, VI, VIII och XVI, och efterföljande överföring därav till de kliniska läkemedlen vinblastin och vinkristin. Enligt teknikens ståndpunkt beskri- ves ett förfarande för framställning av dimera alkaloider, som utgör analoger av de kliniska läkemedlen, exempelvis 3',4'-de- hydrovinblastin med formel VII.The present invention differs from the prior art Eden U.S. Patent 4,279,817] in several important stages, especially when isolating and characterizing unstable intermediates V, VI, VIII and XVI, and subsequently transferring them to the clinical drugs vinblastine and vincristine. The prior art describes a process for the preparation of dimeric alkaloids which constitute analogues of the clinical drugs, for example 3 ', 4'-dehydrovinblastine of formula VII.

Mellanprodukter V och VI framställes genom att vindolin eller ett vindolinderivat (formel XXI vari R är H) bringas i kontakt med ett indolderivat representerat av en förening med formel XXIV, vari R13 utgöres av väte eller COO-alk eller av en förening med formel XXV, vari R14 utgöres av H eller COO- -alk och R15 utgöres av väte eller alkyl.Intermediates V and VI are prepared by contacting vindoline or a vindoline derivative (formula XXI wherein R is H) with an indole derivative represented by a compound of formula XXIV, wherein R13 is hydrogen or COO-alk or a compound of formula XXV, wherein R 14 is H or COO- alk and R 15 is hydrogen or alkyl.

XXIV Förutom katarantin kan vilken som helst indolenhet med formeln XXVI användas. I formel XXVI är R, R1, R2 och R3 väte, OH, O-alk, OCO-alk, alkyl eller aryl. I formel XXVI är sasom angivits tidigare alk làgalkyl C1-C5 och företrädesvis Cl-C3, och aryl är monoaryl, såsom bensyl, xylyl, etc.XXIV In addition to catarantine, any indole moiety of formula XXVI may be used. In formula XXVI, R 1, R 1, R 2 and R 3 are hydrogen, OH, O-alk, OCO-alk, alkyl or aryl. In formula XXVI, as previously stated, lower alkyl is C1-C5 and preferably C1-C3, and aryl is monoaryl, such as benzyl, xylyl, etc.

R N N I; N R; H k XXVI I formlerna XXI-XXVI och helt allmänt i den ansökan och f i U! 13 467 874 patentkrav avses med alk och alkyl lågalkyl såsom definierats för formel XXI och med aryl avses monoaryl pà liknande sätt såsom angivits för formel XXI.R N N I; N R; H k XXVI In formulas XXI-XXVI and in general in that application and f in U! 13,467,874 claims refer to by alk and alkyl lower alkyl as defined for formula XXI and by aryl means monoaryl in a similar manner as given for formula XXI.

Mellanprodukten VI som erhållits sålunda utnyttjas i ett höggradigt specifikt och nytt förfarande inbegripande 1,4-re- duktion vilket ger den betydelsefulla mellanprodukten VIII.The intermediate VI thus obtained is used in a highly specific and novel process including 1,4-reduction to give the significant intermediate VIII.

Mellanprodukten VIII omvandlas ytterligare med ett nytt förfa- rande till den nya mellanprodukten XVI och sistnämnda utnytt- jas i ett annat nytt reduktionsförfarande för erhållande av föreningar med den allmänna formeln XXI, när R ar en förening med formeln XXII.Intermediate VIII is further converted by a new process to the new intermediate XVI and the latter is used in another new reduction process to obtain compounds of general formula XXI, when R is a compound of formula XXII.

I en likartad serie reaktioner leder mellanprodukten V till föreningar med den allmänna strukturen XXI, när R är en förening med formeln XXIII.In a similar series of reactions, intermediate V leads to compounds of general structure XXI, when R is a compound of formula XXIII.

Ytterligare ett höggradigt signifikant nytt kännetecken för uppfinningen är att isoleringen av mellanprodukter VI, VIII och XVI ej är väsentlig och att hela förfarandet som övervakas noggrant med avseende på VI, VIII och XVI medelst HPLC, kan genomföras till de dimera produkterna med formeln XXI från utgångsindolenheterna (formlerna II, XXII och XXIII) och dihydroindolenheterna (formel XXI, R=H) 1 en "en-kärls" operation.Another highly significant new feature of the invention is that the isolation of intermediates VI, VIII and XVI is not essential and that the whole process, which is closely monitored for VI, VIII and XVI by HPLC, can be carried out on the dimeric products of formula XXI from the starting indole units. (formulas II, XXII and XXIII) and the dihydroindole units (formula XXI, R = H) in a "one-vessel" operation.

Framställninq av iminiummellanprodukten (formel VI) via modifierad Polonovski-reaktion Reaktionen genomfördes under vattenfria betingelser.Preparation of the iminium intermediate (Formula VI) via modified Polonovski reaction The reaction was carried out under anhydrous conditions.

Allt glasmaterial torkades i ugn vid 120°C. Lösningsmedlet, metylenklorid, och kopplingsreagenset, triflhmroäüjksyramïwdrid destillerades från PZO5 före användning.All glass material was oven dried at 120 ° C. The solvent, methylene chloride, and the coupling reagent, tri-hydrofluoric acid amide hydride were distilled from PZO5 before use.

Till en lösning av katarantin (II, 200 mg, 0,6 mmol) i torr metylenklorid <2 ml) vid -20°C unde en positiv atmosfär av argon sattes m-kloroperbensoesyra (132 mg, 0,8 mmol) och blandningen omrördes under 5 minuter. Till katarantin-N-oxid (IIa>, som bildades sålunda sattes en lösning av vindolin (III, 270 mg, 0,6 mmol) i metylenklorid (1 ml, 1,5 mmol) och blandningen kyldes till 60°C. Triflhmräflflksyramfiwdrid(0,2 ml, 1,5 mmol> sattes till den omrörda reaktionsblandningen som hölls vid -60°C under 2 h. Efter denna tidpunkt avlägsnades lösningsmedlet och överskottsreagens i vakuum vid -20°C så att en rödaktigt brun återstod innehållande iminiummellanprodukt 467 UI 14 874 kvarlämnades. Sistnämnda karakteriserades genom hög kvalitets- vätskekromatografi (HPLC) i omvänd fas (Waters Radial-Pak C18- eller CN-patron, metanol-H20-Et3N sàsom lösningsmedelssystem).To a solution of catarantine (II, 200 mg, 0.6 mmol) in dry methylene chloride <2 mL) at -20 ° C under a positive atmosphere of argon was added m-chloroperbenzoic acid (132 mg, 0.8 mmol) and the mixture was stirred for 5 minutes. To catarantine N-oxide (IIa>, which was thus formed, was added a solution of vindoline (III, 270 mg, 0.6 mmol) in methylene chloride (1 mL, 1.5 mmol) and the mixture was cooled to 60 ° C. Tri-hydrochloric acid fi-hydride ( 0.2 ml, 1.5 mmol> was added to the stirred reaction mixture which was kept at -60 ° C for 2 hours. After this time the solvent and excess reagent were removed in vacuo at -20 ° C to leave a reddish brown 14,874. The latter was characterized by high performance liquid chromatography (HPLC) in reverse phase (Waters Radial-Pak C18 or CN cartridge, methanol-H 2 O-Et 3 N as solvent system).

Det visade sig att utbytet av VI enligt denna reaktion över- steg 80 % genom reduktion av VI (NaBH4, metanol, O°C) till den kända 3',4'-dehydrovinblastin (formel VII).It was found that the yield of VI according to this reaction exceeded 80% by reduction of VI (NaBH 4, methanol, 0 ° C) to the known 3 ', 4'-dehydrovinblastine (formula VII).

Reduktion av iminiummellangrodukten (formel VI) med 1-bensvl-1.4-dihvdronikotinamid (formel IX. R1 = bensvl. 32 = R4 = R5 = VIII) R5 = H; Ra = CONH2);4§yntes av enamin (formel (förfarande A) Till en omrörd lösning av iminiummellanprodukt (VI, 100 mg) i avgasad acetonitril (5 ml) sattes 1-bensyl-1,4-dihydro- nikotinamid (135 mg, 0,63 mmol, 6 ekvivalenter) under en positiv argonatmosfär vid rumstemperatur (20°C) under en period av 5 timmar. Efter denna tidpunkt indikerade reaktions- blandningen som övervakades genom HPLC fas (Waters Radial-Pak C18- eller CN-patron, metanol/H2O/Et3N-lösningssystem), full- ständig överföring av VI till en blandning av enamin VIII och 3',4'-dehydrovinblastin (VII) i ett förhållande av 1:1 (75 % utbyte).Reduction of the iminium intermediate (formula VI) with 1-benzyl-1,4-dihydronicotinamide (formula IX. R1 = benzyl. 32 = R4 = R5 = VIII) R5 = H; Ra = CONH2); 4 Synthesis of enamine (formula (Method A) To a stirred solution of iminium intermediate (VI, 100 mg) in degassed acetonitrile (5 ml) was added 1-benzyl-1,4-dihydronicotinamide (135 mg , 0.63 mmol, 6 equivalents) under a positive argon atmosphere at room temperature (20 ° C) for a period of 5 hours After this time, the reaction mixture monitored by HPLC indicated phase (Waters Radial-Pak C18 or CN cartridge , methanol / H 2 O / Et 3 N solution system), complete transfer of VI to a mixture of enamine VIII and 3 ', 4'-dehydrovinblastine (VII) in a ratio of 1: 1 (75% yield).

Alternativt sattes till en omrörd lösning av iminiummel- lanprodukt (VI, 100 mg) i metanol (5 ml) som hölls initiellt vid O°C under 0,5 h droppvis eller portionsvis en lösning av 1-bensyl-1,4-dihydronikotinamid (56 mg, 0,26 mmol, 2,5 ekviva- lenter) i metanol (2 ml) under en positiv atmosfär av argon under en period av 5 timmar. Under denna tid tilläts lösningen varmas upp till rumstemperatur. HPLC-övervakning enligt ovan indikerade fullständig överföring av VI till en blandning av enaminen VIII och 3',4'-dehydrovinblastin (VII) i ett förhål- lande av 1:1 (75 % utbyte).Alternatively, to a stirred solution of iminium intermediate (VI, 100 mg) in methanol (5 ml) was initially kept at 0 ° C for 0.5 h dropwise or portionwise a solution of 1-benzyl-1,4-dihydronicotinamide ( 56 mg, 0.26 mmol, 2.5 equivalents) in methanol (2 mL) under a positive atmosphere of argon for a period of 5 hours. During this time, the solution was allowed to warm to room temperature. HPLC monitoring as above indicated complete conversion of VI to a mixture of the enamine VIII and 3 ', 4'-dehydrovinblastine (VII) in a ratio of 1: 1 (75% yield).

I ett experiment behandlades blandningen av enamin (VIII) och 3',4'-dehydrovinblastin (VII) som erhållits som beskrivits ovan med överskott av natriumborohydrid (500 mg) vid 0°C. Reaktionsblandningen gjordes därefter basisk med NH4OH och extraherades med etylacetat (3 x 200 ml). Den kombi- nerade organiska fasen torkades över magnesiumsulfat. Erhàllen produkt utsattes efter avlägsnande av organiskt lösningsmedel för preparativ tunnskiktskromatografi pà kiselgel (metanol/- etylacetat såsom elueringssystem). Produkten visades vara en WH ll 40 467 874 blandning av icke reagerad 3',4'-dehydrovinblastin (VII) och de kända föreningarna 4'-deoxovinblastin (X, R = COOCH3) och 4'-deoxo-4'-epivinblastin (XI, R = COOCH3). Närvaron av de sisnämnda föreningarna tillhandahöll ett otvivelaktigt bevis för enaminstrukturen VIII.In one experiment, the mixture of enamine (VIII) and 3 ', 4'-dehydrovinblastine (VII) obtained as described above was treated with excess sodium borohydride (500 mg) at 0 ° C. The reaction mixture was then basified with NH 4 OH and extracted with ethyl acetate (3 x 200 mL). The combined organic phase was dried over magnesium sulphate. The product obtained after removal of organic solvent was subjected to preparative thin layer chromatography on silica gel (methanol / ethyl acetate as elution system). The product was shown to be a WH 11 mixture of unreacted 3 ', 4'-dehydrovinblastine (VII) and the known compounds 4'-deoxovine blastine (X, R = COOCH3) and 4'-deoxo-4'-epivine blastine (XI , R = COOCH3). The presence of the latter compounds provided unquestionable evidence for the enamine structure VIII.

Reduktion av iminiummellanprodukt (formel VI) med 3.5-dietoxikarbonvl-2.6-dimetyl-4-fenvl-1.4-dihvdropvridin (Hantzch esteranaloq. formel IX. R1 = H; R3 = R5_¿_QQQQg2Q§3¿ 32 = RQ = CHQ; R4 = fenvl): alternativ enaminsvntes (formel VIII) (förfarande B) Till en omrörd lösning av iminiummellanprodukt (VI, 100 mg) i avgasad acetonitril (3 ml) sattes 3,5-dietoxikarbonyl- 2,6-dimetyl-4-fenyl-1,4-dihydropyridin (284 mg, 8 ekvivalen- ter) i etanol (12 ml) under en positiv argonatmosfär. Reak- tionsblandningen àterloppskokades under 3 h. Efter denna tidpunkt indikerade HPLC-analys i omvänd fas (såsom beskrivits ovan) bland andra produkter också bildning av enamin VIII och 3',4'-dehydrovinblastin (VII) i ett förhållande av 1:1 (60 % utbyte). šyntes av vinblastin (formel I) genom oxidation av enamin (formel VIII) till iminiummellanprodukt (formel XVI) med flavinmononkleotid (FMN). formel XII. R = PO32'). förfarande 1 Till en omrörd reaktionsblandning innehållande enaminen (VIII) erhállen såsom beskrivas ovan (förfarande A) fràn imi- nium VI (100 mg) sattes FMN (80 mg, 1 ekvivalent) löst i tris-HCl buffert (2 ml) under en positiv argonatmosfär. Lös- ningen hölls i mörker vid rumstemperatur (20°C) under 16 timmar. Efter denna tid ersattes den inerta atmosfären av argon med luft och reaktionsblandningen omrördes under ytter- ligare 2,5 h. HPLC-analyser i omvänd fas indikerade transfor- mation av enamin VIII till iminium mellanprodukten XVI saväl som till andra produkter (se i det följande). Natriumborhydrid (500 mg) tillsattes vid 0°C och reaktionsblandningen gjordes basisk med NH4OH och extraherades med etylacetat (3 x 200 ml).Reduction of iminium intermediate (formula VI) with 3,5-diethoxycarbonyl-2,6-dimethyl-4-phenyl-1,4-dihydropyridine (Hantzch ester analogue of formula IX. R1 = H; R3 = R5_¿_QQQQg2Q§3¿ 32 = RQ = CHQ; R4 = phenyl): alternative enamine synthesis (formula VIII) (Process B) To a stirred solution of iminium intermediate (VI, 100 mg) in degassed acetonitrile (3 ml) was added 3,5-diethoxycarbonyl-2,6-dimethyl-4-phenyl-1 , 4-dihydropyridine (284 mg, 8 equivalents) in ethanol (12 ml) under a positive argon atmosphere. The reaction mixture was refluxed for 3 hours. After this time, reverse phase HPLC analysis (as described above) among other products also indicated formation of enamine VIII and 3 ', 4'-dehydrovinblastine (VII) in a ratio of 1: 1 ( 60% yield). Synthesis of vinblastine (formula I) by oxidation of enamine (formula VIII) to iminium intermediate (formula XVI) with flavin mononucleotide (FMN). formula XII. R = PO32 '). To a stirred reaction mixture containing the enamine (VIII) obtained as described above (Method A) from iminum VI (100 mg) was added FMN (80 mg, 1 equivalent) dissolved in tris-HCl buffer (2 ml) under a positive argon atmosphere. The solution was kept in the dark at room temperature (20 ° C) for 16 hours. After this time, the inert atmosphere of argon was replaced with air and the reaction mixture was stirred for an additional 2.5 hours. Reverse phase HPLC analyzes indicated transformation of enamine VIII to iminium intermediate XVI as well as to other products (see below). ). Sodium borohydride (500 mg) was added at 0 ° C and the reaction mixture was basified with NH 4 OH and extracted with ethyl acetate (3 x 200 mL).

Det kombinerade organiska extraktet torkades över magnesium- sulfat och lösningsmedlet avlägsnades i vakuum vilket gav en raprodukt (85 mg).The combined organic extract was dried over magnesium sulfate and the solvent was removed in vacuo to give a crude product (85 mg).

Rening av sistnämnda genom kromatografi pà tjockt skikt (silikagel, metanolzetylacetat 1:5) medgav separationen av 16 467 874 40 följande dimera produkter, vinblastin (formel I, 22 mg, 23 %); 3',4'-dehydrovinblastin (formel VII, 16 mg, 1? %); leurosin (formel XVII, 8 mg, 9 %), katarin (formel XVIII, 7 mg, 7,5 %), vinamidin (formel XIX, 5 mg, 5,6 %) och reduktionsprodukten av vinamidin (formel XX, 19 mg, 20 %). q, Svntes av vinblastin (formel I) genom oxidation av enaminen (formel VIII) med väteperoxid till iminiummellanpro- dukten (formel XVI). förfarande 2 Till en lösning innehållande enaminen (VIII) erhàllen fràn iminiummellanprodukten VI (100 mg, förfarande A) sattes väteperoxid (30 %, 1,2 ml, 95 ekvivalenter) under en inert atmosfär av argon. Reaktionsblandningen omrördes vid rumstem- peratur under 5,5 timmar när HPLC-analys i omvänd fas indike- rade fullständig överföring av enamin VIII. Natriumborohydrid (500 mg) tillsattes vid 0°C och extraherades met etylacetat (3 x 200 ml). Det kombinerade organiska extraktet torkades över magnesiumsulfat och avlägsnades i vakuum. Erhàllen produkt- blandning separerades medelst kromatografi i tjockt skikt (silikagel, metanol/etylacetat) vilket gav följande dimera alkaloider: vinblastin (I, 4 mg, 4 %), 3',4'-dehydrovinblastin (VII, 5 mg, 4,8 %), leurosin (XVII, 13 mg, 12,5 %), katarin (XVIII, 5 mg, 4,8 %) och den reducerade formen av vinamidin (XX, 30 mg, 27,6 %).Purification of the latter by thick layer chromatography (silica gel, methanol / ethyl acetate 1: 5) allowed the separation of the following dimeric products, vinblastine (formula I, 22 mg, 23%); 3 ', 4'-dehydrovinblastine (formula VII, 16 mg, 1%); leurosine (formula XVII, 8 mg, 9%), catarin (formula XVIII, 7 mg, 7.5%), vinamidine (formula XIX, 5 mg, 5.6%) and the reduction product of vinamidine (formula XX, 19 mg, 20%). q, Synthesis of vinblastine (formula I) by oxidation of the enamine (formula VIII) with hydrogen peroxide to the iminium intermediate (formula XVI). Process 2 To a solution containing the enamine (VIII) obtained from the iminium intermediate VI (100 mg, process A) was added hydrogen peroxide (30%, 1.2 ml, 95 equivalents) under an inert atmosphere of argon. The reaction mixture was stirred at room temperature for 5.5 hours when reverse phase HPLC analysis indicated complete transfer of enamine VIII. Sodium borohydride (500 mg) was added at 0 ° C and extracted with ethyl acetate (3 x 200 ml). The combined organic extract was dried over magnesium sulfate and removed in vacuo. The resulting product mixture was separated by thick layer chromatography (silica gel, methanol / ethyl acetate) to give the following dimeric alkaloids: vinblastine (I, 4 mg, 4%), 3 ', 4'-dehydrovinblastine (VII, 5 mg, 4.8 %), leurosine (XVII, 13 mg, 12.5%), catarin (XVIII, 5 mg, 4.8%) and the reduced form of vinamidine (XX, 30 mg, 27.6%).

Svntes av vinblastin (I) genom oxidation av enaminen (VIII) med luft till iminiumimgllanprodukten (formel XVI); förfarande 3 I En lösning innehållande enamin (VIII) erhallen fràn iminiummellanprodukten (VI, 100 mg) med förfarande A omrördes 1 en mot luft öppen behållare vid rumstemperatur under 3 h.Synthesis of vinblastine (I) by oxidation of the enamine (VIII) with air to the iminium glulane product (formula XVI); Process 3 I A solution containing enamine (VIII) obtained from the iminium intermediate (VI, 100 mg) by Method A was stirred in a container open to air at room temperature for 3 hours.

Efter denna tidpunkt sattes natriumborohydrid (500 mg) till vid 0°C och reaktionsblandningen gjordes basisk med NH4OH och extraherades med etylacetat (3 x 200 ml). Det kombinerade organiska extraktet torkades över MQSO4 och avlägsnades i vakuum. Erhállen ra produkt separerades genom preparativ kromatografi i tjock skikt (silikagel, metanol/etylacetat) vilket gav vinblastin (I, 4 mg, 4 %).After this time, sodium borohydride (500 mg) was added at 0 ° C and the reaction mixture was basified with NH 4 OH and extracted with ethyl acetate (3 x 200 mL). The combined organic extract was dried over MQSO 4 and removed in vacuo. The obtained product was separated by preparative thick layer chromatography (silica gel, methanol / ethyl acetate) to give vinblastine (I, 4 mg, 4%).

Syntes av vinblastin ((1) genom oxidation av enamin (formel VIII) med luft i närvaro av íärn(III)klorid till förfarande 4 iminiummellanprodukten (XVI): Till en omrörd lösning innehållande enaminen (VIII) 17 467 874 erhàllen fràn iminiummellanprodukten (VI, 100 mg, förfarande A) sattes järn(III)klorid (1 ekvivalent) och luft bubblades genom lösningen vid 0°C under en period av 0,5 h. Natriumboro- hydrid (500 mg) tillsattes vid 0°C och reaktionsblandningen ggordes basisk med NH4OH före extraktion med etylacetat (3 x 100 ml). Det kombinerade organiska extraktet torkades över Na2SO4 och lösningsmedlet avlägsnades i vakuum. Ráprodukten renades genom kromatografi i tjockt skikt (silikagel, meta- nol/etylacetat> vilket gav vinblastin (1,37 mg). Baserad pá en amin (50 mg) närvarande blandningen var utbytet i detta steg 70.%.Synthesis of vinblastine ((1) by oxidation of enamine (Formula VIII) with air in the presence of ferric chloride to process 4 the intermediate of the intermediate (XVI): To a stirred solution containing the enamine (VIII) obtained from the intermediate of the intermediate (VI , 100 mg, Method A) Iron (III) chloride (1 equivalent) was added and air was bubbled through the solution at 0 ° C for a period of 0.5 h. Sodium borohydride (500 mg) was added at 0 ° C and the reaction mixture was stirred. basic with NH 4 OH before extraction with ethyl acetate (3 x 100 ml) The combined organic extract was dried over Na 2 SO 4 and the solvent removed in vacuo The crude product was purified by chromatography on Based on an amine (50 mg) mixture present, the yield in this step was 70%.

Claims (6)

1. (II 10 15 25 Jane 1. 18 Patentkrav Förfarande för framställning av föreningar med föl- formler: 111) vari 1 formel XXI alkyl R1 F? Rs RQ H10 Ru 912 vilket förfarande är avsett för syntes av en dimer avledd frán II XXI XXII N N n" xxnï R CH3 eller (CH2)nCH3 vari n = 1-5; CH3 eller CHO; H eller CO-alk; H; COO-alk eller CONR13R14, vari R13 och alkyl, R14 utgöres av väte, substituerad alkyl, aryl eller substi- tuerad aryl; -CH=CH- eller -CH2-CH2-; formel XXI! eller XXIII; H eller C00-alk; H, OH, O-alk, OCO-alk eller alkyl; H, OH, O-alk, OCO-alk eller alkyl; H, OH, O-alk, OCO-alk; H eller C00-alk; H eller alkyl; en indolenhet fràn den naturliga Iboga-alkaloid-familjen innehållande en aza-bicyklo-oktandel och en dihydroindolenhet fràn de naturliga Aspidosperma- och Vinca-alkaloid-familjerna, varvid stereokemin för kol-kol-bindningen mellan dessa tva enheter är identisk med den för vinblastin, och k ä n n e - t e c k n a s ESV 10 20 b) Û w (d) f\ (D »I (f) 19 467 874 bildning av en N-oxidmellanprodukt i kyla vid en tempe- ratur av -700 till +40°C av namnda indolenhet genom oxidation av bryggkvävet och utan isolering av nämnda mellanprodukt; behandling av B-oxidindolmellanprodukten i närvaro av ättiksyraanhydrid, halogenerad ättiksyraarihydrid eller acetylklo- rid for astadkommande av en fragmenteringsreaktion av Polonovski~typ; utan foregaende isolering av produkten fran steg (b) koppling av nämnda reaktionsprodukt med en dihydroindol- enhet. 1 narvamwa av-ättiksyraanhydrid, halogenerad ättiksyraanhyd rid och acetylklorid vid en lag temperatur av ca -70°C till +40°C under inerta betingelser; isolering av produkten fràn steg (c) genom lösningsme- delavdrivning, företrädesvis vid lag temperatur i ett intervall av -20°C till 0°C; reduktion av produkten fràn steg (d) genom 1,4-dihydro- pyridinföreningar representerade av formeln IX H R4 / Rs \/ Rs \\ I | fx \\ /f~\ H6 N Rz vari R3 och R5 i formeln IX utgöres av karboxiestrar (COO-alk) och R1, R2, R4 och R5 utgöres av H, alkyl, aryl (Hantzch-esterserie) eller N-substituerad 1,4-di- hydronikotinamider, vari RI är substituerad alkyl eller substituerad aryl, exempelvis bensyl och R3 är COHR7R8, vari R7 och RB utgöres av väte, alkyl eller aryl; varvid reduktionen genomföres under en inert atmosfär vid -60°C till +60°C och företrädesvis i temperaturintervallet 4°C till 20°C och med användning av lösningsmedel som utgo- res av làgalkylalkanoler, acetonitril, dimetylsulfoxid, dimetylformamid, dioxan, tetrahydrofuran eller klorera- de lägre kolväten; produkten fran steg (e), namlligen en enamin med formeln VIII, isoleras genom lösningsmedelsavdrivning, företrä- 467 UI 10 15 20 25 30 35 40 874 20 desvis vid lag temperatur i intervallet -20°C till 0°C; (g) enaminen erhàllen i steg (f) användes för framställning av en iminiummellanprodukt, formel XVI, med ett oxida- tionsförfarande innefattande; (1) reglerad luftning/syresättning i en behållare öppen mot luft; (2) reglerad luftning/syresattning plus en metalljon; (3) reglerad luftning/syresättning plus ett flavincoen- zym; (4) reglerad luftning/syresattning plus ett behandlingsmedel som utgöres av väteperoxid eller hydroperoxider; med användning av ett brett intervall av organiska lösningsmedel vid pH 5-9 och en reaktionstemperatur av -60°C till +60°C; (h) produkten, en iminiummellanprodukt, erhàllen i steg (g) isoleras genom lösningsmedelsavdrivning, företrädesvis vid lag temperatur i ett intervall av -20°C till 0°C; och (1) produkten erhàllen 1 steg (h) överföras till màlföre~ ningen med formeln XXI, varpà vinblastin och vinkristin utgor exempel, genom reduktion med alkalimetallbor~ hydrid.1. (II 10 15 25 Jane 1. 18 Claims process for the preparation of compounds of the following formulas: 111) wherein 1 of formula XXI alkyl R1 F? Rs RQ H10 Ru 912 which process is intended for the synthesis of a dimer derived from II XXI XXII NN n "xxnï R CH3 or (CH2) nCH3 wherein n = 1-5; CH3 or CHO; H or CO-alk; H; COO -alk or CONR 13 R 14, wherein R 13 and alkyl, R 14 are hydrogen, substituted alkyl, aryl or substituted aryl; -CH = CH- or -CH 2 -CH 2 -; formula XXI 1 or XXIII; H or C , OH, O-alk, OCO-alk or alkyl; H, OH, O-alk, OCO-alk or alkyl; H, OH, O-alk, OCO-alk; H or CO-alk; H or alkyl; en indole unit from the natural Iboga alkaloid family containing an aza-bicyclooctane moiety and a dihydroindole unit from the natural Aspidosperma and Vinca alkaloid families, the stereochemistry of the carbon-carbon bond between these two units being identical to that of vinblastine, and is known as ESV 10 20 b) Û w (d) f \ (D »I (f) 19 467 874 formation of an N-oxide intermediate in cold at a temperature of -700 to + 40 ° C of said indole unit by oxidation of the bridge nitrogen and without isolation of n said intermediate; treating the B-oxide indole intermediate in the presence of acetic anhydride, halogenated acetic anhydride or acetyl chloride to effect a Polonovski-type fragmentation reaction; without prior isolation of the product from step (b) coupling said reaction product with a dihydroindole moiety. 1 narvamwa of acetic anhydride, halogenated acetic anhydride and acetyl chloride at a low temperature of about -70 ° C to + 40 ° C under inert conditions; isolating the product from step (c) by solvent evaporation, preferably at low temperature in a range of -20 ° C to 0 ° C; reduction of the product from step (d) by 1,4-dihydropyridine compounds represented by the formula IX H R4 / Rs \ / Rs \\ I | wherein R 3 and R 5 in formula IX are carboxy esters (COO-alk) and R 1, R 2, R 4 and R 5 are H, alkyl, aryl (Hantzch ester series) or N-substituted 1 , 4-dihydronicotinamides, wherein R 1 is substituted alkyl or substituted aryl, for example benzyl and R 3 is COHR 7 R 8, wherein R 7 and R 8 are hydrogen, alkyl or aryl; the reduction being carried out under an inert atmosphere at -60 ° C to + 60 ° C and preferably in the temperature range 4 ° C to 20 ° C and using solvents consisting of lower alkyl alkanols, acetonitrile, dimethylsulfoxide, dimethylformamide, dioxane, tetrahydrofuran or chlorinated lower hydrocarbons; the product of step (e), namely an enamine of formula VIII, is isolated by solvent evaporation, preferably at a low temperature in the range of -20 ° C to 0 ° C; (g) the enamine obtained in step (f) is used to prepare an iminium intermediate, formula XVI, having an oxidation process comprising; (1) regulated aeration / oxygenation in a container open to air; (2) regulated aeration / oxygenation plus a metal ion; (3) regulated aeration / oxygenation plus a flavin coenzyme; (4) controlled aeration / oxygenation plus a treatment agent consisting of hydrogen peroxide or hydroperoxides; using a wide range of organic solvents at pH 5-9 and a reaction temperature of -60 ° C to + 60 ° C; (h) the product, an iminium intermediate, obtained in step (g) is isolated by solvent evaporation, preferably at low temperature in a range of -20 ° C to 0 ° C; and (1) the product obtained in step (h) is converted into the target compound of formula XXI, of which vinblastine and vincristine are examples, by reduction with alkali metal borohydride. 2. Förfarande enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t därav, att förfarandet som innefattar slutprodukten med formel XXI genomföres såsom enkärlsoperation.Process according to Claim 1, characterized in that the process comprising the final product of formula XXI is carried out as a single-vessel operation. 3. Förfarande enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t darav, att en N-oxidindolmellanprodukt kopplas med en dihydro-7 indolenhet och reduceras med 1,4-dihydropyridinföreningar representerade av formel IX IX vari R3 och R5 1 formel IX utgöres av karboxiestrar (COO~alk) och R1, R2, R4 och R5 utgöres av H, alkyl, aryl (Hantzch-es- terserie) eller N-substituerad 1,4-dihydronikotinamider, vari R1 är substituerad alkyl eller substituerad aryl, sàsom bensyl och R3 ar CONR7R8, vari R7 och R8 utgöres av väte, alkyl eller aryl, vilken reduktion genomföres under en inert atmosfar vid 41/ (Fl ID 20 h) G1 21 467 874 -600 till +60°C och företrädesvis i temperaturintervallet 4°C till 20°C och med anvandning av losningsmedel som utgöres av làgalkylalkanoler, acetonitril, dimetylsulfoxid, dimetylforma- mid, dioxan, tetrahydrofuran eller klorerade lagre kolväten; och vari produkten fràn steg (e) en enamin med formel VIII, isoleras genom lösningsmedelsavdrivning, företrädesvis vid làg temperatur i intervaller ~20°C till 0°C.3. A process according to claim 1, characterized in that an N-oxide indole intermediate is coupled with a dihydro-7 indole moiety and reduced with 1,4-dihydropyridine compounds represented by formula IX IX wherein R 3 and R 5 in formula IX are carboxy esters (COO alk) and R 1, R 2, R 4 and R 5 are H, alkyl, aryl (Hantzch ester series) or N-substituted 1,4-dihydronicotinamides, wherein R 1 is substituted alkyl or substituted aryl, such as benzyl and R 3 is CONR 7 R 8, wherein R 7 and R 8 are hydrogen, alkyl or aryl, which reduction is carried out under an inert atmosphere at 41 / (Fl ID 20 h) G + 21 467 874 -600 to + 60 ° C and preferably in the temperature range 4 ° C to 20 ° C and using solvents consisting of lower alkyl alkanols, acetonitrile, dimethyl sulfoxide, dimethylformamide, dioxane, tetrahydrofuran or chlorinated lower hydrocarbons; and wherein the product of step (e) an enamine of formula VIII, is isolated by solvent evaporation, preferably at low temperature in ranges of ~ 20 ° C to 0 ° C. 4. Forfarande enligt krav 1, k a n n e t e c k n a t därav, att steget som innefattar isolering av en enamin och oxidation av enaminen till en iminiummellanprodukt med formeln XVI medelst ett oxidationsförfarande innefattar (1) reglerad luftning/syresättning i en behållare oppen mot luft; (2) reglerad luftning/syresättning plus en metalljon; (3) reglerad luftning/syresättning plus ett flavincoen- zym.A process according to claim 1, characterized in that the step comprising isolating an enamine and oxidizing the enamine to an iminium intermediate of formula XVI by an oxidation process comprises (1) controlled aeration / oxygenation in a container open to air; (2) regulated aeration / oxygenation plus a metal ion; (3) regulated aeration / oxygenation plus a flavin coenzyme. 5. Forfarande enligt krav 4, k a n n e t e c k n a t därav, att i oxidationsförloppets steg (1) tillsättes ett behandlingsmedel som utgöres av vateperoxid eller hydro- peroxider.Process according to Claim 4, characterized in that a treatment agent consisting of hydrogen peroxide or hydroperoxides is added in step (1) of the oxidation process. 6. Forfarande enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t därav, att iminiummellanprodukten som isolerats genom lös- ningsmedelsavdrivning vid en làg temperatur 1 intervallet -20°C till Ü°C reduceras till en Vinca-alkaloid som utgores av vinblastin eller vinkristin genom reduktion med alkalimetall- borohydrid.Process according to Claim 1, characterized in that the iminium intermediate isolated by solvent evaporation at a low temperature in the range -20 ° C to Ü ° C is reduced to a Vinca alkaloid consisting of vinblastine or vincristine by reduction with alkali metal. - borohydride.
SE8800170A 1987-01-22 1988-01-20 PREPARATION OF THE WINE BLAST AND THE WINE CRYSTAL SE467874B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CA000527897A CA1341261C (en) 1987-01-22 1987-01-22 Process for the synthesis of 3',4'-anhydrovinblastine, vinblastine and vincristine

Publications (3)

Publication Number Publication Date
SE8800170D0 SE8800170D0 (en) 1988-01-20
SE8800170L SE8800170L (en) 1988-07-23
SE467874B true SE467874B (en) 1992-09-28

Family

ID=4134803

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SE8800170A SE467874B (en) 1987-01-22 1988-01-20 PREPARATION OF THE WINE BLAST AND THE WINE CRYSTAL

Country Status (11)

Country Link
JP (1) JPH0613531B2 (en)
CA (1) CA1341261C (en)
CH (1) CH675724A5 (en)
DE (1) DE3801450C2 (en)
FR (1) FR2611202A1 (en)
GB (1) GB2204036B (en)
IL (1) IL85154A (en)
IT (1) IT1215751B (en)
NL (1) NL8800134A (en)
SE (1) SE467874B (en)
ZA (1) ZA88408B (en)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5047528A (en) * 1987-01-22 1991-09-10 University Of Bristish Columbia Process of synthesis of vinblastine and vincristine
CA1341262C (en) * 1987-08-06 2001-06-26 Camille A. Boulet A new process of the synthesis of 3',4'-anhydrovinblastine, vinblastine and vincristine
USRE37449E1 (en) 1987-02-06 2001-11-13 University Of British Columbia Process of synthesis of 3′,4′-anhydrovinblastine, vinblastine and vincristine
US5037977A (en) * 1988-08-11 1991-08-06 Mitsui Petrochemical Industries Ltd. Method for production of dimeric alkaloids
US5432279A (en) * 1989-03-04 1995-07-11 Mitsui Petrochemical Industries, Inc. Process for the preparation of binary indole alkaloids
HU209687B (en) * 1989-03-04 1994-10-28 Mitsui Petrochemical Ind Process for producing bisz-indole-alkaloids
FR2779146B1 (en) * 1998-06-02 2002-01-18 Roowin NOVEL VINCA-ALKALOIDE DERIVATIVES AND PREPARATION METHODS
CN103936769B (en) * 2014-04-30 2016-10-05 淮海工学院 A kind of method preparing high optical voidness F 81097

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2296418B1 (en) * 1974-12-30 1978-07-21 Anvar
US4279817A (en) * 1975-05-30 1981-07-21 The United States Of America As Represented By The Department Of Health & Human Services Method for producing dimer alkaloids
GB1551054A (en) * 1976-03-04 1979-08-22 Atta Ur Rahman Syntheses of vinblastine vincristine and vinrosidine
FR2358412A1 (en) * 1976-07-13 1978-02-10 Parcor PROCESS FOR THE PREPARATION OF VINCAMINE AND RELATED ALKALOIDS

Also Published As

Publication number Publication date
IL85154A (en) 1992-08-18
GB8801296D0 (en) 1988-02-17
GB2204036A (en) 1988-11-02
DE3801450A1 (en) 1988-08-18
SE8800170D0 (en) 1988-01-20
CA1341261C (en) 2001-06-26
JPH0613531B2 (en) 1994-02-23
FR2611202B1 (en) 1994-08-19
ZA88408B (en) 1989-04-26
FR2611202A1 (en) 1988-08-26
JPH01131187A (en) 1989-05-24
IT1215751B (en) 1990-02-22
IL85154A0 (en) 1988-06-30
GB2204036B (en) 1991-03-27
SE8800170L (en) 1988-07-23
DE3801450C2 (en) 1999-02-25
IT8819156A0 (en) 1988-01-21
CH675724A5 (en) 1990-10-31
NL8800134A (en) 1988-08-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Jossang et al. Horsfiline, an oxindole alkaloid from Horsfieldia superba
Kernan et al. Regioselective oxidation of 3-alkylfurans to 3-alkyl-4-hydroxybutenolides
US4144237A (en) Synthetic vinblastine and vincristine derivatives
CA1057750A (en) Anhydro-vinca derivatives
SE467874B (en) PREPARATION OF THE WINE BLAST AND THE WINE CRYSTAL
AU636076B2 (en) 4-desoxy-4-epipodophyllotoxin derivative or pharmaceutically acceptable salt thereof
NO140671B (en) ANALOGICAL PROCEDURE FOR PREPARATION OF THERAPEUTICALLY ACTIVE DIAZEPINES
Chavignon et al. Reactions of (Vinylimino) phosphoranes and Related Compounds: Access to the Azacarbolines and Aplysinopsines
US5047528A (en) Process of synthesis of vinblastine and vincristine
US4990232A (en) Process for the preparation of carbodiimides
Bobbitt et al. Synthesis of Isoquinolines. I. 1 Copyrine and Isoquinoline Systems Derived from 3-Cyano-4-methylpyridine2, 3
Wuonola et al. Imidazole alkaloids of Macrorungia longistrobus: revised structures and total syntheses
USRE37449E1 (en) Process of synthesis of 3′,4′-anhydrovinblastine, vinblastine and vincristine
Lamberton et al. Alkaloids of Peripentadenia mearsii. I. Isolation, Structural Determination, and Synthesis of Peripentadenine
KR880001284B1 (en) Method for the preparation azino rifamycins
SE467875B (en) PROCEDURES FOR THE PREPARATION OF THE VINBLASTIN AND THE VINE CRYSTAL.
US3894028A (en) Process for the preparation of optical antipode of vincamine and new indole derivatives
HINO et al. Pyranoindole and Thiopyranoindole. Oxidative Cyclization of 3-Indolepropanol and 3-Indolepropanethiol with N-Bromosuccinimide, N-Chlorosuccinimide, and Singlet Oxygen
Cvak et al. 8α-hydroxy-α-ergokryptine, an ergot alkaloid
HU191682B (en) Process for preparing 1-benzyl-azetidin-3-ol derivatives
Manna et al. Synthesis of the alkaloid nauclefidin
Ohta et al. Photocyclization of Styrylpyrazines
Furstoss et al. Cage azapolycyclics. An investigation of the cyclization orientation to twisted-or nontwisted-tricyclic azabridged molecules. Synthesis and structure determination by 250-MHz nuclear magnetic resonance spectroscopy
IE44449B1 (en) 11-methylene-6-piperazinyl-morphanthridine derivatives
JPH069642A (en) 4-desoxy-4-epipodophyllotoxin derivative and its salt

Legal Events

Date Code Title Description
NAL Patent in force

Ref document number: 8800170-6

Format of ref document f/p: F

NUG Patent has lapsed

Ref document number: 8800170-6

Format of ref document f/p: F