SE460472B - TEST ISSUE AND SET TO CHARACTERIZE BIOLOGICAL MATERIALS - Google Patents
TEST ISSUE AND SET TO CHARACTERIZE BIOLOGICAL MATERIALSInfo
- Publication number
- SE460472B SE460472B SE8601511A SE8601511A SE460472B SE 460472 B SE460472 B SE 460472B SE 8601511 A SE8601511 A SE 8601511A SE 8601511 A SE8601511 A SE 8601511A SE 460472 B SE460472 B SE 460472B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- reagent
- zone
- recess
- zones
- biological material
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/5302—Apparatus specially adapted for immunological test procedures
- G01N33/5304—Reaction vessels, e.g. agglutination plates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/18—Testing for antimicrobial activity of a material
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
J4f§óßr4r(2lfi§tjfÉ1gkfitl f ii; ' Ä Formen pa teethrickan.kan vara-fvrkantig, rund eller §"""¶ -oval, och urtagningarna i teetbrickan kan föreligga i olika ÉÜ i mönster. ,Föreliggande uppfinning är ej begränsad till någon Q eärekild form pa teetbrickan eller nagra särskilda mönster, i 5 enligt vilka_urtagningarna är gjorda i teetbrickan. I fig. 1 - visae nagra utföringeformer av teetbrickan enligt uppfinningen 'beteende av.ejölva teetbriekan A, en reagenezon B och en av- läeningezon C i¿varÄe¿urtagning.W I ,Formen'pafurtagningarna kan variera inom ramen för före- '10A liggande.uppfinning, ooh enligt en utföringeform är urtagnin- garna nvckelhaleformade, varvid den oirkelformade delen utgör reagenezon och den langetrackta delen utgör avläeningeron. I l_ en annan utföringeformiutgöree varje urtagning av en lang- É , sträckt del omfattande de bada ronerna, varvid det föreligger t 15 begräneningeklaokar mellan zonerna. I denna utföringeform kan ändarna av urtagningarna vara avrundade eller raka. I en annan utföringeform av uppfinningen utgöres varje urtagning av en fyrkantig reagenezon och en fyrkantig avläeningezon, vilka zo- ner är olika stora. I fig. 2 vieas nagra olika utföringeformer 20 av urtagningar enligt uppfinningen, och däri betecknas rea- genezonen med B, avläeningezonen med C och begräneningeklac- karna med D. Även andra former pa urtagningar kan användas en- ligt föreliggande uppfinning, och det som är av vikt är att bäraren för den aktiva eubatansen kvarhallee i reagenezonen. 25 Man kan exempelvis även ha zoner som är avemalnande. J4f§óßr4r(2lfi§tjfÉ1gkfitl f ii; ' Ä The shape of the tea tray.can be-square, round or §"""¶ -oval, and the recesses in the tea tray can be in different ÉÜ i patterns. ,The present invention is not limited to any Q eerkild shape of the tea tray or any particular patterns, in 5 according to which the_recesses are made in the tea tray. In fig. 1 - show some embodiments of the tea tray according to the invention 'behavior of.the tea tray A, a reagent zone B and a discharge zone C in each recess.W I 'The shape'of the recesses can vary within the scope of the present '10A lying.invention, ooh according to one embodiment the recesses are keyhole-shaped, whereby the circular-shaped part constitutes the reagent zone and the elongated part constitutes In another embodiment, each recess consists of a long, elongated part comprising both zones, with 15 limiting grooves between the zones. In this embodiment, the ends of the recesses may be rounded or straight. In another embodiment of the invention, each recess consists of a square reagent zone and a square limiting groove, which zones are of different sizes. In Fig. 2, some different embodiments of recesses according to the invention are shown, and therein the reagent zone is designated by B, the limiting groove by C and the limiting grooves by D. Other shapes of recesses may also be used according to the present invention, and what is important is that the carrier for the active substance remains in the reagent zone. For example, zones which are limiting may also be provided.
Saeom vieae i fig. 3 kan urtagningarna vara utformade ea att reagenezon.och_avläeningezon ligger över varandra, d.v.e, i teetbrickane vertikalplan, eller efter varandra, d.v.e. i íï- teetbrickane horiaontalplan. Beteokningarna i figuren har ti- f 30 digare angiven betydeleef iAv'fig, 4.framgàr att avläaningezo- [Å inen kan vara täckt ovanifran. I denna figur har det omrade där ;É kommunikation mellan de bada zonerna föreligger erhållit be- N _teokningen E. , i A b :li V. , 'å _. '_Teethrickan är_lämpligen av nagot inert material,~eaeom 335Li nagon plaet eller glae, ooh den kan vara i ett etycke eller f,V¿göraa medfurtagningar, varefter eventuella begräneningsklaokar i if':seraçiekgivipvvagwyeian',vvlav: en. nyçngeinaieformad ' wn I ¶iiiJï> mezon"Broendenëavläeningezon C. Ii 10- 15 20 25 ' bada zonerna, a; \-: ; - W~~ w, . - .-.f..,,« H ..,-- f" ,, --V,..w',.~~w.... _, ._ Wwlw, á._Raí gág 46Üt472 freagenszonen B är anbringad en bärare F, som är impregnerad tïmed den substans vars minsta hömmandefkoncentrstion skall be- Vstämmasl En uppslamning G av mikroorganismer i substrat är 'jämnt fördelad över de bada ronerna B och C, och är saledes h-ovanpa.bäraren F.¿I fig. 6 visas resultatet efter inkubation, »varvid växt av mikroorganismen finnes vid H i avläsningszonen, fonder det att en_hämning av växten föreligger vid K. A, B och VC.har angiven betyde1se¿ De i figuren atergivna siffrorna är märkning av börarna; 1 detta fall anges antibiotikamängden pa frespektive bärare. Ds börare som är märkta med plus- respekti- ve minustecken utgör positiv respektive negativ kontroll.As shown in Fig. 3, the recesses can be designed so that the reaction zone and the discharge zone are located one above the other, i.e. in the vertical plane of the tray, or one behind the other, i.e. in the horizontal plane of the tray. The designations in the figure have previously been given the meaning in Fig. 4, so that the discharge zone can be covered from above. In this figure, the area where communication between the two zones exists has been given the designation E. , in A b :li V. , 'å _. The teething ring is preferably made of an inert material, such as a plate or glass, and may be in a piece or with grooves, after which any restrictions in the material are given. newly formed ' wn I ¶iiiJï> mezon"Broendenëavläeningezon C. Ii 10- 15 20 25 ' both zones, a; \-: ; - W~~ w, . - .-.f..,,« H ..,-- f" ,, --V,..w',.~~w.... _, ._ Wwlw, á._Raí gág 46Üt472 freagenszone B is applied a carrier F, which is impregnated with the substance whose minimum concentration is to be determined. A slurry G of microorganisms in substrate is 'evenly distributed over both zones B and C, and is thus h-above the carrier F.¿In fig. 6 shows the result after incubation, "whereby growth of the microorganism is found at H in the reading zone, whereas inhibition of growth is present at K. A, B and VC have the indicated meaning". The numbers given in the figure are the markings of the carriers; in this case the amount of antibiotic is indicated on the respective carriers. The carriers marked with plus and minus signs constitute positive and negative controls respectively.
A V Föreliggande uppfinning avser även sätt att karakterise- .ra biologiska materia1.medelst mikrobiologiska, immnnologiska och/eller biokemiska analyser, enligt vilket karakterisering- men genomföres i tva med varandra kommunicerande zoner, av vil- ka den ena är en reagenszon och den andra en avläsningszon, ett reagene pa en bärare anbringas i reagenszonen, och det biologiska material som skall karakteriseras fördelas över de varefter det hela blandas, fordras, och eventuell reaktion avläsas i avlösningazonen. I reagenszonentinföres reagenset pa en lämplig bärare, saeom en poröe eller icke-porös lapp, en pärla överdragen med erforder- lig mängd reagens, eller sa kan det tillföras i form av en inkuberas om sa er- tablett som innehaller erforderlig mängd reagens. Därefter pa- föres varje urtagning av det biologiska material som skall karakteriseras. Det biologiska materialet är i eller bringas till vätskeform och paföres lämpligen med pipett, varvid mank tillser att exakta mängder av material tillföras varje urtag- gning, Därefter roteras eller skakas tastbrickan försiktigt för att uonna Jämn blandning av reagene och biologiskt material i :khg¿¿ qrtagningen. Alltefter typ av karakterisering roteras, "{itskakas;Åoentrifogeraskooh/ellertinkuberss det hela under del öavwellergnnder hela reaktionenljvarefter resultatet i de olika urtašfikëššfinafavlösesj \ïfi>P""" ..,,.,f~t¶.w.,.,. 10, 15 20 25 _. « 1 .- - 040 Itt A Qcc eq- ,°_ Misamtldesin{ektionsmede1; antiseptikum och konserveringsmedel,' ;sasom kwäßrioker enligt föreliggande uppfinning kan således an- vändas vid karakterisering av biologiska material, sasom vid mikrobiologiska, immunologiska och biokemiska analyser, exem- pelvis koncentrationsbestämningar av ämnen vilka är aktiva mot mikroorganismer eller andra biologiska celler. Biologiskt Å material kan förutom mikroorganismer exempelvis vara andra biologiska celler, antikroppar, antigener eller enzymer, blod, serum eller annat biolooiskt material i vätskeform. Reagsnset utoöres av biologiskt eller kemiskt aktiva substanser, såsom antimikrobislla substanser, mikrobiologiskt aktiva substanser, substanser med inhiberande, letal, toxisk, mutagen eller växt- befrämjande effekt pä celler." ußrickor, vars urtaoningar ej är märkta, kan användas för olika-slags reagens i olika koncentrationer. De senare paföree med tillhjälp av lämpliga bärare, på vilka reagenset i önskad _koncentration finns anbringat. Bärare med reagene finns för- packade i separata enheter, och typ av reagens samt mängd an- ges lämpligen medelst märkning pa själva bäraren. Alternativt kan brickan (invid urtagningarna) förses med lämplig märkning för olika typer av analyser.The present invention also relates to a method of characterizing biological materials by means of microbiological, immunological and/or biochemical analyses, according to which the characterization is carried out in two communicating zones, one of which is a reagent zone and the other a reading zone, a reagent on a carrier is applied to the reagent zone, and the biological material to be characterized is distributed over them, after which the whole is mixed, required, and any reaction is read in the release zone. In the reagent zone, the reagent is introduced on a suitable carrier, such as a porous or non-porous patch, a bead coated with the required amount of reagent, or it can be supplied in the form of a tablet containing the required amount of reagent. Then, each recess of the biological material to be characterized is incubated if so required. The biological material is in or is brought to liquid form and is conveniently applied with a pipette, whereby one ensures that exact amounts of material are added to each well. The plate is then rotated or shaken gently to ensure even mixing of the reagents and biological material in the well. Depending on the type of characterization, the whole is rotated, shaken, centrifuged, or incubated for part of the reaction, after which the results in the various wells are separated. 10, 15 20 25 _. « 1 .- - 040 Itt A Qcc eq- ,°_ Misamtldesinektionsmede1; antiseptic and preservative,' ;such as kwäßrioker according to the present invention can thus be used in the characterization of biological materials, such as in microbiological, immunological and biochemical analyses, for example concentration determinations of substances which are active against microorganisms or other biological cells. Biological material can, in addition to microorganisms, for example be other biological cells, antibodies, antigens or enzymes, blood, serum or other biological material in liquid form. The reagent is expressed by biologically or chemically active substances, such as antimicrobial substances, microbiologically active substances, substances with inhibitory, lethal, toxic, mutagenic or growth-promoting effects on cells. The trays, the recesses of which are not marked, can be used for different types of reagents in different concentrations. The latter are applied with the help of suitable carriers, on which the reagent in the desired concentration is applied. Carriers with the reagents are packaged in separate units, and the type of reagent and quantity are conveniently indicated by marking on the carrier itself. Alternatively, the tray (near the recesses) can be provided with suitable marking for different types of analyses.
Ned uttrycket "mikroorganism" avses bakterier, sasom en- terobacteriaceae, stafylokocker, streptokocker, hemofilus, neisseriaceae, bscteroides och clostridia, mykobakterier, samt svampar, såsom actinomyces, mycoplasma, nocardia, virus, mögelsvamp, Jästsvamp och candida.The term "microorganism" refers to bacteria, such as enterobacteriaceae, staphylococci, streptococci, hemophilus, neisseriaceae, bscteroides and clostridia, mycobacteria, and fungi, such as actinomyces, mycoplasma, nocardia, viruses, molds, yeasts and candida.
Uttrycket "biologiska celler" omfattar cancerceller, vanliga humanceller, animaliska celler, insektceller och växt- _cel1er av "stamcelltyp".The term "biological cells" includes cancer cells, normal human cells, animal cells, insect cells, and "stem cell" type plant cells.
Antimikrobiella substanser är antibiotika, exempelvis aminoqlykosider,yß-laktamantibiotika, makrolidantibiotika, polymykiner, polypeptider och andra ksmoterapeutika, sasom V,sul§onamiaer}Üantimykotika, t§sx.n5f§luorcytosin, amfotericin, ¿antivirala medel, såsom aoeninarabinosid (§ra4A>, trifluorty- ä'fiti#tas9ixu1ö¿Å~m§dè1j sas§m"i¿oaíg;¿s ash cvkisssrin, »=;1f@S":h«=-¿¶i¶ ?1i,,1f#é s@=fl°1iÅ},¿=°h b°ofëflëpill=°fliumkla°=id i afcellerïäriantiçancermeoel,qexempelvis antracyk- gn§ssmÄginfihafisaisitašisxfifištai, toxisk eller muta- Hc no ropenaYm taoena ämnen, såsom dimetyl- 10 15 20 ^.nitroeamin, herbicider,;eåeom paráquat och pesticider Åsamtaineekticider,¿såsomidikofan (BDT) och klorokin.g 9 rm; , ror, vitaminer, kolhydrater och andra näringsämnen, olika -över natt) avläees resultatet, d.v.s. huruvida växt av mikro- _med att den antimikrobiella substansen föreligger i olika kon- Q_ scentrationer på märkta bärare i de olika urtagningarna är det :J jlätt att direkt fas ställa den minsta hämmsnde-koncentrationen ' "fälld ' "m "WP '" HW* " " ~v=~ww , _ . .vi -vrwn-ïfl-ïïíw ß ,. , ^ m - , _ , 1 A ß i* n4eß l72 lvfflikrobiologiekt aktiva substanser är, förutom angivna antimikrobiella ämnen, bakteriociner, t.ex. koliciner, enzy- mer; t.ex. peroxidaser, olika tillväxtfaktorer; såsom aminosy- kroppevätskor och komponenter-därav, såsom serum, blod och_ specifika komoonenter~i-serum; exempelvis 8-lysin. lßiologiebt abtivaisdbstanser är interferoner, såsom humaninterferonf'HuIFN-B,VIF4N-Bl enzymer, såsom B-laktamaser, proteaser och ureaeer, enzymepecifika eubstrat, såsom nitra- ter, ko1hydrater_och proteiner, B-laktamantibiotika, aminogly- koeideriochfkloramfenikol, antigen, såsom immunoglobuliner, «f polysackarider och toxiner från mikroorganismer. // Medelst sättet enligt föreliggande uopfinning kan man \ exempelvis bestämma minsta hämmande koncentration av en anti- mikrobiell substans. Bestämningen genomföras i två med varand- ra kommunicerande zoner, varvid den ena är en reagenszon och den andra en avläsningszon. I reagenszonen införas den anti- mikrobiella substansen på en lämplig bärare, såsom någon av de angivna. t.ex. en porös lapp. Därefter införes i varje urtag- ning en uppslamning av den mikroorganism. hetsbeetämmas. Uppslamningen är i ett lämpligt odlingsmedium.Antimicrobial substances are antibiotics, for example aminoglycosides, γ-lactam antibiotics, macrolide antibiotics, polymyxins, polypeptides and other chemotherapeutics, such as V,sulphonamides}Üantimycotics, t§sx.n5§fluorcytosine, amphotericin, ¿antiviral agents, such as aoeninarabinoside (§ra4A>, trifluoro- ä'fiti#tas9ixu1ö¿Å~m§dè1j sas§m"i¿oaíg;¿s ash cvkisssrin, »=;1f@S":h«=-¿¶i¶ ?1i,,1f#é s@=fl°1iÅ},¿=°h b°ofëflëpill=°fliumcla°=id in afcellerïäriantiçancermeoel,qemplvis anthracycline- gn§ssmÄginfihafisaisitašisxfifištai, toxic or muta- Hc no ropenaYm taoena substances, such as dimethyl- 10 15 20 ^.nitroeamine, herbicides,;eåeom paraquat and pesticides Åsamtaineicides,¿såsomidicofan (BDT) and chloroquine.g 9 rm; , ror, vitamins, carbohydrates and other nutrients, different -overnight) the result is read, i.e. whether growth of micro- _with the antimicrobial substance being present in different concentrations on marked carriers in the different recesses it is :J jeasy to directly phase set the minimum inhibitory concentration ' "precipitated ' "m "WP '" HW* " " ~v=~ww , _ . .vi -vrwn-ïfl-ïïíw ß ,. , ^ m - , _ , 1 A ß i* n4eß l72 lvfflibrobiologically active substances are, in addition to the specified antimicrobial substances, bacteriocins, e.g. colicins, enzymes; e.g. peroxidases, various growth factors; such as amino acids; body fluids and components thereof, such as serum, blood and_ specific components~i-serum; e.g. 8-lysine. lßiologiebt abtivaisdbstans are interferons, such as human interferonf'HuIFN-B,VIF4N-Bl enzymes, such as B-lactamases, proteases and ureas, enzyme-specific substrates, such as nitrates, carbohydrates_and proteins, B-lactam antibiotics, aminoglycoides and chloramphenicol, antigens, such as immunoglobulins, «f polysaccharides and toxins from microorganisms. // By means of the method according to the present invention, one can determine, for example, the minimum inhibitory concentration of an antimicrobial substance. The determination is carried out in two zones communicating with each other, one of which is a reagent zone and the other a reading zone. In the reagent zone, the antimicrobial substance is introduced onto a suitable carrier, such as one of the above. e.g. a porous patch. Then, a slurry of the microorganism to be determined is introduced into each recess. The slurry is in a suitable culture medium.
Denna paföres lämpligen med pipett, varvid man tillser att varje som skall känslig- exakta mängder av mikroorganiem i substrat tillföres urtagning; Därefter vickae testbrickan försiktigt för att upp- nå jämn blandning av substansen och suepensionen av mikroorga- nismer i hela urtagningen¿ Efter inkubering organiemen föreligger eller-ej i de olika urtagningarna. I och '¿MningfenïÅ9ämPV§§ Ran men fortsätta med _" Ä ggugelífigsiggïiijçqšgicençgatviqnf msc) .' " Tlbaíeättfëfinligtiettbav dessa ter men Iialjëomfflinnsgi¿dekelika4avläsningezoner- Dessa orover7§moae'på färskt od-_ _10 v15 20 25 ,meiibl§š¿,§B11§p§9§,l » t, »räv t,»4¿íÛ ¿4;ï2iAA,e.: * fibdf bfi~lingsmedium som finnes i urtagningar i en annan testbrieka ,§eller*strykas ut pa agarplattor¿*Efter inkubering avläees var! eventuell växt föreligger, och den minsta baktericida koncen- Vvcratisnen zußcá bestämmas, ett anna: Bartlet: bestämma mac ar n s , g att man efter MICfbestämningen.enligt ovan avlägsnar bäraren tmedfantimikrobiell substans från reagenszonen. Till nrtagning- engsöttes sedan ett Ämne som är inaktiverande för den antimik- 'robiella_substans som använts vid NIC-bestämningen, t.ex. ett "enzvm,,sasom ett ßëlaktamas i de fall ett 3-laktamantibiotikum fanväntsL Det inaktiverande ämnet tillföras lämpligen pa en bä- . rare, saeom~nagon av de angivna, till reagenszonen. Efter in- Vvkubering avläsas om växt föreligger eller ej och MBC bestäm- mes.A _ eVidare kan man medelst sättet enligt föreliggande upp- finning även identifiera mikroorganismer genom att bestämma deras biokemiska mönster medelst fermentation, oxidation eller assimilation av olika ämnen. I reagenszonen införas ett* _testämns med eller utan tillsats av andra reagens för pà- visande av reaktion, t.ex. en pH-färgindikator på en lämplig bärare, såsom en pärla överdragen med erforderlig mängd därav.This is conveniently applied with a pipette, ensuring that each recess is supplied with precise amounts of microorganisms in the substrate; Then gently shake the test tray to achieve even mixing of the substance and the suspension of microorganisms throughout the recess. After incubation, the organisms are present or not in the various recesses. In and '¿MningfenïÅ9ämPV§§ Ran but continue with _" Ä ggugelífigsiggïiijçqšgicençgatviqnf msc) .' " The results of these tests are similar to those of the reading zones. These are applied to fresh culture media that are in wells in another test plate or are spread out on agar plates. After incubation, any growth is read and the minimum bactericidal concentration is determined, as follows: Bartlet: determine the microbiological concentration by removing the carrier with antimicrobial substance from the reagent zone after the MIC determination as above. To the reaction mixture is then added a substance that is inactivating for the antimicrobial substance used in the NIC determination, e.g. an "enzyme", such as a β-lactamase in cases where a β-lactam antibiotic is used. The inactivating substance is suitably added on a carrier, such as one of those specified, to the reagent zone. After incubation, it is read whether or not growth is present and the MBC is determined. Furthermore, the method according to the present invention can also identify microorganisms by determining their biochemical pattern by means of fermentation, oxidation or assimilation of various substances. A test substance is introduced into the reagent zone with or without the addition of other reagents for detecting reaction, e.g. a pH color indicator on a suitable carrier, such as a bead coated with the required amount thereof.
Därefter paföres varje_urtagning en uppslamning av den mikro- organism, vars biokemiska mönster skall bestämmas. Uppslam- ningen är i ett lämpligt odlingsmedium. Denna paföres exemr pelvis med pipett, varvid man tillser att exakta mängder av i odlingsmedium uppelammade mikroorganismer tillföras varje urtagning. För att uppnå en jämn blandning av ämnet och uppslamningen av mikroorganismer i hela urtagningen roteras eller skakas testbrickan försiktigt. Efter inkubering avläsas resultatet na olika sätt alltefter använd biokemisk reaktion.l _vAssimilationsmönster fastställes t.ex. genom förekomst eller frånvaro av.växt, medan fermsntations- eller oxidationsmönstsr kan indikeras med färgemslag hos en pHfindikator¿, VA>lmö5¥5WPel]pa ämnen'vid bestämning av assimilationsmöneter fg1yc¿šs1,f;y1¿t§i§§çn'giakonaç.'oçßßali '""íça:5¿í§çert¿§a§m fenalröct, *Wiflbïèé 1§ë=åP1ii 9¿ a nPl r°m§vm9i ëàflfl;f$ÉêåEi§59¥å§§?§ï7§ë¥ fáÉ®§à¿¿#i°še' OC? °Xidfl~'¶ ,i ~"r<^*-" ß - os. oo _ eo 3:e oc. ef; sole UI _ _ 10 15 20 25 h) O 7 lg 4eo'472 Sättet enligt föreliggande uppfinning kan även användas för att karakterisera biologiska materials enzymmönster zymograml genom att.bestämma enzym/substratreaktionar, vari bestümningsn genomföras i de tva med varandra kommunicerande zonerna. I reagenszonen införes ett kromogent substrat, t.ex. ett naftalenderivat, pa en lämplig bärare, exempelvis i form av tablett som innehåller den erforderliga mängden kromogent subetrat. Därefter paföres varje urtagning en uppslamning av det biologiska material, vars zymogram skall bestämmas. Denna paföres lämpligen med pipett, varvid man tillser att exakta mängder av biologiskt material tillföras varje urtagning. Där- efter roteras testbrickan försiktigt sa att en jämn blandning av kromogent substrat och uppslamningen av det biologiska ma- terialet uppnås över hela urtagningen. Det hela inkuberas och därefter avläsas resultatet, d.v.s. huruvida färgomelag från enzym/substratreaktion föreligger eller ej i de olika urtag- ningarna. V Kromogena substrat som kan användas vid zymogramstudier är t.ex. kromogena naftalenderivat, såsom naftylfosfat för pa- visande av fosfataser, naftylbutyrat för pavisande av ester- assr, naftylmyristat för pavisande av lipaser, naftylamider för påvisands av arylamidaser och trypsin, naftylgalaktopyra- nosider för pavisande av galaktoeidaser, naftylglukopyranosi- der för pavisande av glukosidaeer, nitrocefin för pàvisande av B-laktamaser o.s.v.Then, a suspension of the microorganism whose biochemical pattern is to be determined is applied to each well. The suspension is in a suitable culture medium. This is applied, for example, with a pipette, ensuring that exact amounts of microorganisms suspended in the culture medium are added to each well. In order to achieve an even mixture of the substance and the suspension of microorganisms throughout the well, the test tray is rotated or shaken gently. After incubation, the result is read in different ways depending on the biochemical reaction used. The assimilation pattern is determined, for example, by by the presence or absence of.plant, while fermentation or oxidation patterns can be indicated by the color change of a pH indicator¿, VA>lmö5¥5WPel]pa substances'in determining assimilation rates fg1yc¿šs1,f;y1¿t§i§§çn'giakonaç.'oçßßali '""íça:5¿í§çert¿§a§m fenalröct, *Wiflbïèé 1§ë=åP1ii 9¿ a nPl r°m§vm9i ëàflfl;f$ÉêåEi§59¥å§§?§ï7§ë¥ fáÉ®§à¿¿#i°še' OC? °Xidfl~'¶ ,i ~"r<^*-" ß - os. oo _ eo 3:e oc. ef; sole UI _ _ 10 15 20 25 h) O 7 lg 4eo'472 The method according to the present invention can also be used to characterize the enzyme pattern zymogram of biological materials by determining enzyme/substrate reactions, wherein the determination is carried out in the two mutually communicating zones. In the reagent zone, a chromogenic substrate, e.g. a naphthalene derivative, is introduced onto a suitable carrier, e.g. in the form of a tablet containing the required amount of chromogenic substrate. Then, a slurry of the biological material, the zymogram of which is to be determined, is applied to each well. This is conveniently applied with a pipette, ensuring that exact amounts of biological material are applied to each well. The test tray is then rotated carefully so that an even mixture of chromogenic substrate and the slurry of the biological material is achieved over the entire well. The whole is incubated and then the result is read, i.e. whether or not color mixture from enzyme/substrate reaction is present in the various wells. V Chromogenic substrates that can be used in zymogram studies are, for example, chromogenic naphthalene derivatives, such as naphthyl phosphate for the detection of phosphatases, naphthyl butyrate for the detection of esterases, naphthyl myristate for the detection of lipases, naphthylamides for the detection of arylamidases and trypsin, naphthylgalactopyranosides for the detection of galactoidases, naphthylglucopyranosides for the detection of glucosidases, nitrocefin for the detection of B-lactamases, etc.
Sättet enligt föreliggande uppfinning kan vidare använ- das för att karakterisera och kvantifiera olika biologiskt ak- tiva ämnen baserade på dess immunologiska egenskaper. Ett spe- cifikt antikroppa-latexkonjugat anbringas i reagenszonen och en uppslamning av det-biologiska material, vara serologiska mönster skall bestämmas, fördelas jämnt över de bada zonerna.The method of the present invention can further be used to characterize and quantify various biologically active substances based on their immunological properties. A specific antibody-latex conjugate is applied to the reagent zone and a slurry of the biological material, whose serological pattern is to be determined, is distributed evenly over both zones.
Därefter roteras brickan för att uppna en jamn blandning av reageneet och provet. En antigen-antikroppsrsaktion som resul- terar i aggkutïåation, dvs. klumpning kommer'att ske om provet 'innehåller antigen som är specifika för antikroppar som finns i¿} reagenset. Genom att använda en uppsättning av olika speci- fika antikropps-latexkonjugater kan t.ex. en bakteriestam serotypas, och exempel pa bakteriespecies som kan klassifice- ;_ras med serologiskt mönster är salmonella, ehigella, strepto- 10 15 20 25 30 35, i,,kooker.fPá motsvarande sätt som det här beskrivna kan man be-r "stämman mängden 'antikfoppttr- i ett biologisktfmaterial genom att använda ett antigen-latexkonjugat. 4 I _Pa motsvarande sätt kan man bestämma den mängd av ett aktivt ämne som kan hämma en immunologisk reaktion. Bestämning av antibiotika i serum kan utföras med denna teknik..En be- stämd men varierande mängd av en antibiotikum-antikroppssnhet anbringas i reagenszonerna pa en lämplig bärare. Serumprovet eller en epädning därav, vars motsvarande antibiotikumkoncen- tration skall bestämmas, fördelas jämnt i de bada zonerna me- delst rotation av brickan. En bestämd mängd av det specifika antibiotiknm-proteinkonjugatet bundát till latsxpartiklar (antigenenhet) anbringas sedan till reagenszonerna, och för antigen-antikroppsreaktionen roteras brickan ytterligare.The tray is then rotated to achieve a uniform mixture of the reagent and the sample. An antigen-antibody reaction resulting in agglutination, i.e. clumping, will occur if the sample contains antigens specific for antibodies present in the reagent. By using a set of different specific antibody-latex conjugates, e.g. a bacterial strain is serotyped, and examples of bacterial species that can be classified by serological pattern are salmonella, echigella, streptococci, etc. In a similar manner to that described here, the amount of antibody in a biological material can be determined by using an antigen-latex conjugate. In a similar manner, the amount of an active substance that can inhibit an immunological reaction can be determined. Determination of antibiotics in serum can be carried out with this technique. A fixed but varying amount of an antibiotic-antibody unit is applied to the reagent zones of a suitable carrier. The serum sample or a preparation thereof, the corresponding antibiotic concentration of which is to be determined, is distributed evenly in both zones by rotation of the tray. A fixed amount of the specific antibiotic-protein conjugate bound to latex particles (antigen unit) is then applied to the reagent zones, and for the antigen-antibody reaction the tray is further rotated.
Reaktionen mellan antigen och antikroppaenheter resulterar i 1 detta fail ett apati- agglutination. Tillsate av de ämnen, fikt antibiotikum, vars koncentration skall bestämmas och vil- ka har samma eller högre affinitet för antikroppsenheten, hindrar eller hämmar reaktionen mellan det latexbundna antige- net och antikroppsenheterna genom att binda till antikroppsen- heterna, vilket-resulterar i utebliven agglutination. Beroende pa mängden antibiotikum i provet hämmas agglutinationen i de olika urtagningarna upp till den maximala koncentrationen av antikroppsenheter som antibiotikaprovet totalt kan binda till.The reaction between antigen and antibody units results in apathy in this case. Addition of the substances, such as antibiotic, the concentration of which is to be determined and which have the same or higher affinity for the antibody unit, prevents or inhibits the reaction between the latex-bound antigen and the antibody units by binding to the antibody units, resulting in the absence of agglutination. Depending on the amount of antibiotic in the sample, the agglutination in the different wells is inhibited up to the maximum concentration of antibody units to which the antibiotic sample can bind in total.
När denna koncentration av antikroppsenheter överskrids, rea- gerar de nu överblivna fria antikroppeenheterna med antigenen- heterna och resulterar i agglutination. Vid avläsning av pro- vet jämflöres resultatet därav med t.ek. en standardkurva, som erhållits genom att den lägsta mängden av antibiotikum som hämmar olika koncentrationer av antikroppsenheter bestäms i förväg med etandardlösningar av detta antibiotikum.When this concentration of antibody units is exceeded, the now remaining free antibody units react with the antigen units and result in agglutination. When reading the sample, the result is compared with, for example, a standard curve, which has been obtained by determining in advance with standard solutions of this antibiotic the lowest amount of antibiotic that inhibits different concentrations of antibody units.
Aktiva ämnen i biologiska vätskor som kan kvantifieras med en immunologisk teknik är antimikrobiella substanser, an- ütikroppar,'antigensr sasom toxiner och polysackarider fràn j mikroorgsniemer.hActive substances in biological fluids that can be quantified by an immunological technique are antimicrobial substances, antibodies, antigens such as toxins and polysaccharides from microorganisms.
Claims (12)
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE8601511A SE460472B (en) | 1986-04-04 | 1986-04-04 | TEST ISSUE AND SET TO CHARACTERIZE BIOLOGICAL MATERIALS |
| FI892489A FI892489A0 (en) | 1986-04-04 | 1987-09-28 | TESTANORDNING. |
| JP62506083A JPH02501349A (en) | 1986-04-04 | 1987-09-28 | tester |
| PCT/SE1987/000439 WO1989002927A1 (en) | 1986-04-04 | 1987-09-28 | Test device and method of characterizing biological material |
| EP87906634A EP0335866A1 (en) | 1986-04-04 | 1987-09-28 | Test device and method of characterizing biological material |
| AU80371/87A AU8037187A (en) | 1986-04-04 | 1987-09-28 | Test device and method of characterizing biological material |
| NO89891892A NO891892L (en) | 1986-04-04 | 1989-05-09 | TESTING DEVICE AND PROCEDURE FOR CHARACTERIZING BIOLOGICAL MATERIAL. |
| DK252489A DK252489A (en) | 1986-04-04 | 1989-05-24 | SAMPLE PLATE AND PROCEDURE FOR CHARACTERIZING BIOLOGICAL MATERIAL |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE8601511A SE460472B (en) | 1986-04-04 | 1986-04-04 | TEST ISSUE AND SET TO CHARACTERIZE BIOLOGICAL MATERIALS |
| PCT/SE1987/000439 WO1989002927A1 (en) | 1986-04-04 | 1987-09-28 | Test device and method of characterizing biological material |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE8601511D0 SE8601511D0 (en) | 1986-04-04 |
| SE8601511L SE8601511L (en) | 1987-10-05 |
| SE460472B true SE460472B (en) | 1989-10-16 |
Family
ID=26659316
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE8601511A SE460472B (en) | 1986-04-04 | 1986-04-04 | TEST ISSUE AND SET TO CHARACTERIZE BIOLOGICAL MATERIALS |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0335866A1 (en) |
| JP (1) | JPH02501349A (en) |
| AU (1) | AU8037187A (en) |
| DK (1) | DK252489A (en) |
| FI (1) | FI892489A0 (en) |
| NO (1) | NO891892L (en) |
| SE (1) | SE460472B (en) |
| WO (1) | WO1989002927A1 (en) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8915938D0 (en) * | 1989-07-12 | 1989-08-31 | Proteus Biotech Ltd | Apparatus for microbiological testing |
| JPH0832922A (en) * | 1994-07-14 | 1996-02-02 | Hitachi Ltd | Magnetic recording / reproducing device |
| KR101711105B1 (en) * | 2016-04-21 | 2017-03-06 | 주식회사 퀀타매트릭스 | Cell culture device in multi-well format for rapid antibiotic susceptibility test |
| JP7076203B2 (en) | 2017-12-13 | 2022-05-27 | 株式会社日立ハイテク | Antibacterial agent introduction plate for bacterial test and transparent plate |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK97670C (en) * | 1959-03-13 | 1964-01-06 | Warner Lambert Pharmaceutical | Indicator for quantitative determination of the amount of a biochemical substance in a body fluid. |
| FR1356317A (en) * | 1963-02-06 | 1964-03-27 | Device and method for identifying isolated bacteria | |
| GB1006774A (en) * | 1963-10-07 | 1965-10-06 | Promoveo | Improvements in devices for the study of the fermentative characteristics of living cells |
| FR2029138A5 (en) * | 1969-01-14 | 1970-10-16 | Colobert Louis | Chemical reaction indication for biochemical - reactions |
| SE343950B (en) * | 1970-07-22 | 1972-03-20 | S Johansson | |
| GB1390766A (en) * | 1971-04-26 | 1975-04-16 | Beecham Group Ltd | Bacteriological test method |
| FI57128C (en) * | 1978-11-21 | 1980-06-10 | Orion Yhtymae Oy | SAETT ATT IDENTIFIED MICROORGANISM |
-
1986
- 1986-04-04 SE SE8601511A patent/SE460472B/en not_active IP Right Cessation
-
1987
- 1987-09-28 AU AU80371/87A patent/AU8037187A/en not_active Abandoned
- 1987-09-28 EP EP87906634A patent/EP0335866A1/en not_active Withdrawn
- 1987-09-28 JP JP62506083A patent/JPH02501349A/en active Pending
- 1987-09-28 WO PCT/SE1987/000439 patent/WO1989002927A1/en not_active Ceased
- 1987-09-28 FI FI892489A patent/FI892489A0/en not_active IP Right Cessation
-
1989
- 1989-05-09 NO NO89891892A patent/NO891892L/en unknown
- 1989-05-24 DK DK252489A patent/DK252489A/en not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO891892D0 (en) | 1989-05-09 |
| EP0335866A1 (en) | 1989-10-11 |
| WO1989002927A1 (en) | 1989-04-06 |
| NO891892L (en) | 1989-05-09 |
| SE8601511L (en) | 1987-10-05 |
| JPH02501349A (en) | 1990-05-17 |
| DK252489D0 (en) | 1989-05-24 |
| AU8037187A (en) | 1989-04-18 |
| FI892489L (en) | 1989-05-23 |
| FI892489A7 (en) | 1989-05-23 |
| DK252489A (en) | 1989-05-24 |
| FI892489A0 (en) | 1989-05-23 |
| SE8601511D0 (en) | 1986-04-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP1044070B1 (en) | Device for determination of an analyte in a solution | |
| O'broin et al. | Microbiological assay on microtitre plates of folate in serum and red cells. | |
| Daniel et al. | The pure culture of Physarum polycephalum on a partially defined soluble medium | |
| AU751388B2 (en) | Antibiotic sensitivity testing | |
| FI67725B (en) | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV ENHETER AVSEDDA FOER BESTAEMNING AV ANTIBIOTIKA- OCH SULFARESTER I BIOLOGISKA VAETSKOR OCH FRAMSTAELLDA ENHETER | |
| US4673638A (en) | Method for detection and isolation of a microorganism | |
| WO2003102578B1 (en) | High throughput cellular response assay using microarrays | |
| US5837482A (en) | Culture medium and methods for detecting staphylococci | |
| US5028529A (en) | Method and device for producing varying concentration patterns of chemically or biologically active substances | |
| SE462166B (en) | TOXICITY TEST WITH LUMINESCENTA BACTERIA | |
| EP0037932B1 (en) | Determination of antibacterial agents | |
| JPH0564735B2 (en) | ||
| NZ268405A (en) | Atp-adp chemiluminescent testing for microorganisms including a source of a magnesium ion | |
| CA1268115A (en) | Method and composition for detecting analyte moieties | |
| SE460472B (en) | TEST ISSUE AND SET TO CHARACTERIZE BIOLOGICAL MATERIALS | |
| US7122338B2 (en) | Method for quantification of biological material in a sample | |
| EP0108303B1 (en) | Method for detection and isolation of a microorganism | |
| US4532206A (en) | β-Streptococcus selective medium | |
| US20130224773A1 (en) | Method for Rapid Growth, Detection and Identification of Live Microorganisms Immobilized on Permeable Membranes by Antibodies | |
| US5846745A (en) | Method and apparatus for the on-location field detection of unidentified antigenic substances | |
| Bayer et al. | [23] Colorimetric enzyme assays for avidin and biotin | |
| Christie et al. | The cultivation of a single strain of Actinomyces israelii in a simplified and chemically defined medium | |
| SU1582993A3 (en) | Method of determining the content of creatinine, creatine and sarcosine in biological fluid | |
| Lee et al. | Iodometric spot test for detection of beta-lactamase in Haemophilus influenzae | |
| Fletcher | Filter paper dot-immunobinding assay for detection of Spiroplasma citri |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 8601511-2 Effective date: 19921108 Format of ref document f/p: F |