SE448344B - ANTIBODY FOR TREATMENT OF REUMATOID ARTHRIT AND SETTING TO MAKE IT - Google Patents
ANTIBODY FOR TREATMENT OF REUMATOID ARTHRIT AND SETTING TO MAKE ITInfo
- Publication number
- SE448344B SE448344B SE7900798A SE7900798A SE448344B SE 448344 B SE448344 B SE 448344B SE 7900798 A SE7900798 A SE 7900798A SE 7900798 A SE7900798 A SE 7900798A SE 448344 B SE448344 B SE 448344B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- milk
- antibody
- bacteria
- immune
- bacterial
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/425—Thiazoles
- A61K31/429—Thiazoles condensed with heterocyclic ring systems
- A61K31/43—Compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula, e.g. penicillins, penems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/65—Tetracyclines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
- A61K39/0258—Escherichia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
- A61K39/0266—Klebsiella
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
- A61K39/0275—Salmonella
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
- A61K39/0283—Shigella
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/05—Actinobacteria, e.g. Actinomyces, Streptomyces, Nocardia, Bifidobacterium, Gardnerella, Corynebacterium; Propionibacterium
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/085—Staphylococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
- A61K39/092—Streptococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/102—Pasteurellales, e.g. Actinobacillus, Pasteurella; Haemophilus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/104—Pseudomonadales, e.g. Pseudomonas
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
- A61K2039/521—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
j44s 344 2 hetsmekanism har kunnat fastslås (Sikes et al, 1955). j44s 344 2 mechanism has been established (Sikes et al, 1955).
Vid studier av reumatoid artrit förbryllas dock forskarna fortfa- rande av vissa återkommande motiv, som tyder på samband mellan infektioner och ledsjukdomar. Sålunda kan t.ex. gonorré inte en- bart frambringa typisk gonorial artrit utan ibland också kronisk artrit, som kan övergå i reumatoid artrit. Det finns inga statis- tiska uppgifter över denna förekomst, varför man ej vet hur stor vikt kan man lägga vid sambandet. Tonsillit eller faryngit kan åt- följas av en polyartrit, som först uppträder som reumatisk feber men som utvecklas till reumatoid artrit. Akuta virusinfektioner, särskilt röda hund hos unga kvinnor, kan åtföljas av långvariga= polyartritider omfattande såväl små som stora leder. Dessa artri- tider uppträder vanligen under flera månader och ger därvid ledbe- svär som påminner om reumatoid artrit, varefter sjukdomen succes- sivt återgår. Även om kronisk infektion av ett okänt ämne fortfarande är en van- lig beskrivning för etiologin hos reumatoid artrit finns inga pub- licerade data som ger stöd för detta antagande, En del forskare som studerat sjukdomen misstänker, att om infektion utgör en fak- tor, kan det ej röra sig om infektion av någon specifik typ av mik- roorganism utan snarare infektion av ett stort antal banala mikro- organismer med en förändrad responsdel hos värdorganismen alstrad av infektionerna som är ansvariga för sjukdomen. Föreliggande upp- finning baserar sig på denna terori beträffande anledningen till reumatoid artrit. Även om en infektiös etiologi aldrig kunnat fast- slås, förefaller flera sentida rön att ge stöd för denna teori.In studies of rheumatoid arthritis, however, researchers are still puzzled by certain recurring motifs, which indicate a connection between infections and joint diseases. Thus, e.g. Gonorrhea not only produces typical gonorial arthritis but sometimes also chronic arthritis, which can turn into rheumatoid arthritis. There are no statistics on this occurrence, so it is not known how much importance can be attached to the relationship. Tonsillitis or pharyngitis can be accompanied by a polyarthritis, which first appears as rheumatic fever but which develops into rheumatoid arthritis. Acute viral infections, especially rubella in young women, can be accompanied by prolonged = polyarthritis times involving both small and large joints. These arthritis usually occurs for several months, causing joint problems reminiscent of rheumatoid arthritis, after which the disease gradually returns. Although chronic infection with an unknown substance is still a common description for the etiology of rheumatoid arthritis, there are no published data to support this assumption. Some researchers who have studied the disease suspect that if infection is a factor, it can not be an infection of any specific type of microorganism but rather an infection of a large number of banal microorganisms with an altered response part of the host organism generated by the infections responsible for the disease. The present invention is based on this theory regarding the cause of rheumatoid arthritis. Although an infectious etiology has never been established, several recent findings seem to support this theory.
Några av dessa är.följande: 1. Patienter med reumatoid artrit.har lägre halt än normalt av IgA, dvs den klass av immunglobulin som återfinns i sekret från det gastrointestinala området. 2. Immunglobulin A alstrat till följd av immunicering via saliv-, slemhinnorna återfinns i serum colustrum och mjölk liksom 1 sali- ven. Man antar att IgA överföras till dessa olika kroppsvätskor via det gastrointestinala-området och lymfsystemet (Michelok et al, 1975). i ' i V f 448 344 3 i 3. Efter en bypass-tarmoperation till följd av obisitas utveck- las hos vissa patienter symptom; som faktiskt är identiska med »de hos reumatoid artrit. Utvecklandet av artrit åtföljs av att det i blodserum üppträder cirkulerande kryoproteiner sammansatta av IgG,_IgM, IgA, komplementkomponenter G3, G4, C5 och IgG~anti- kroppar mot E. coli och B. Fragilis; Om man avlägsnar bypass-tarm-' ledningen, försvinner_symptomen fullständigt iwoods et al, 1976). __4: Én typ av'Diplosgreptococcus agalaotiae tillhörande streptokock- gruppen B har angivits som etiologiskt ämne i reumatoid artrit (Svartz; 1§72), Denna streptokock förekommer i större delen mark- iíiaaysffsra paetöšiseàfàd injöik men ej i iifimunmjölk.Some of these are: 1. Patients with rheumatoid arthritis have lower than normal levels of IgA, ie the class of immunoglobulin found in secretions from the gastrointestinal tract. Immunoglobulin A generated as a result of immunization via saliva, mucous membranes is found in serum colustrum and milk as well as 1 saliva. It is believed that IgA is transmitted to these various body fluids via the gastrointestinal tract and lymphatic system (Michelok et al, 1975). i 'i V f 448 344 3 i 3. After a bypass bowel operation due to obesity, symptoms develop in some patients; which are in fact identical to those of rheumatoid arthritis. The development of arthritis is accompanied by the appearance of circulating cryoproteins composed of IgG, IgM, IgA, complement components G3, G4, C5 and IgG antibodies to E. coli and B. Fragilis in blood serum; If one bypasses the bypass-intestinal tract, the symptoms disappear completely (Woods et al, 1976). __4: One type of Diplosgreptococcus agalaotiae belonging to the streptococcal group B has been reported as an etiologic substance in rheumatoid arthritis (Svartz; 1§72). This streptococcus occurs for the most part mark- iíiaaysffsra paetöšiseàfàd injöik but not in ii.
*S2 En disposition för reumatiska sjukdomar tycks kunna ärvas via =histokompabilitetsantigenerna=(HL-A). Dessa antigener bestämmer sannolikt värdorganismens reaktion på infektionsämnen. .f aMot bakgrund av dessa fakta kan man fastslå att renmatoid.artrit har ett infektiöst ursprung, varvid infektionen_sker i inälvor, 4, att ett stort antal bakteriestammar är involverade i infektionen, att infektionen sannolikt beror av ett sammanbrott i värdorganis- ,,mens immunförsvar och att det effektivaste sättet_att behandla sjukdomen är att återställa immunskyddet mot det infektiösa ämnet oi.inälv0nna,.* S2 A predisposition for rheumatic diseases seems to be inherited via the = histocompatibility antigens = (HL-A). These antigens are likely to determine the response of the host organism to infectious agents. In view of these facts, it can be stated that renmatoid arthritis has an infectious origin, the infection occurring in the intestines, 4, that a large number of bacterial strains are involved in the infection, that the infection is probably due to a breakdown in the host organism's immune system. and that the most effective way to treat the disease is to restore immune protection against the infectious agent in the intestines.
'~Behandlinq av infektionen ,_Det fiinns i huvudsak två metoder som kan användas för infektione- _behandling, nämligen immunbehandling som innebär antingen aktiv .eller passiv immunicering mot de infektiösa patogenerna och använd- ningen av antibiotika såsom penjnillin, tetraoyklin, ampicillin och liknande. Antibiotika har ingen specifik verkan och de dödar ett brett spektrum av såväl nyttiga som skadliga bakterier. Å and- ra sidan år-immünbehandlingen mycket specifik. Mot en specifik -stam av bakterier frambringáde, baktericida antikroppar reagerar endast med denna stam och har ingen skadlig inverkan på andra ty- per av bakterier. Dessutom är antikroppar till skillnad från anti- biotíka naturliga kroppsprodukter och har inga kända bieffekter.Treatment of the infection There are essentially two methods which can be used for the treatment of infection, namely immunotherapy which involves either active or passive immunization against the infectious pathogens and the use of antibiotics such as penicillin, tetraycline, ampicillin and the like. Antibiotics have no specific effect and they kill a wide range of both beneficial and harmful bacteria. On the other hand, the year-immune treatment is very specific. Against a specific strain of bacteria produced, bactericidal antibodies react only with this strain and have no detrimental effect on other types of bacteria. In addition, unlike antibiotics, antibodies are natural body products and have no known side effects.
Eftersom syftet med upnfinningen är att behandla infektioner av un " specifik grupp av bakterier utan att inverka.menligt på nyttiga '-bakterier i inälvornay väljs immünbehandlingstekniken. si44ses44 l l 4 Aktiv och passiv immunicering ¶ Det finns två olika metoder att uppnå immunskydd. Aktiv immunicee ring är det förfarande, där värdorganismen aktivt immuniceras med ett vaccin; som stimulerar immunsystemet ett producera skyd- dande antikroppar mot faktorer som ingår i vaccinet. Aktiv immu~ nicering sker under naturlige betingelser när värdorgenismen ute ¶ sätts för infektiösa patogener. Passiv immunicering är ett förfá~ Irende, varvid antikroppar erhållna från en individ som immuniee~ rate aktivt ges till en annan individ. vid denna teknik överföres de skyddande antikropparna från den immuna värdorganismen till mottagarens Passivt immnnskydd är temporärt och varar endast så länge som de passivt utvunna antikropperne.överlever i mottagarens system. Exempelvis kan antikroppar från hästar immunieerade mot l tetenustexin ges till människor infekterade med tetanus försett man skall uppnå temnorärt immunskydd mot det av tetanusbekterier eelstrade toxinet. ï den amerikanska petentskriften 3.626.057 befl skrives ett förfarande för framställning av tetenustoxin i mjölk.Since the object of the invention is to treat infections of a "specific group of bacteria without affecting" beneficial "bacteria in the intestines, the immunotherapy treatment technique is chosen. Active and passive immunization ¶ There are two different methods of achieving immune protection. Active immunization is the process in which the host organism is actively immunized with a vaccine; which stimulates the immune system to produce protective antibodies against factors contained in the vaccine. Active immunization takes place under natural conditions when the host organism is exposed to infectious pathogens. Passive immunization is a precaution. In this technique, the protective antibodies are transferred from the immune host organism to the recipient. Passive immune protection is temporary and lasts only as long as the passively recovered antibodies survive in the host. recipient systems, for example, antibodies from horses Immunosuppressed against tetanus toxin is given to people infected with tetanus provided that temporal protection against the toxin produced by tetanus bacteria must be achieved. U.S. Patent No. 3,626,057 discloses a process for the production of tetanus toxin in milk.
Enligt petentskriften'immunieeras en ko aktivt mot tetenustoxin och de av kon mot toxinet bildade entikropparna ken erhålles Erån kons mjölk och dessa antikroppar kan användas för behandling av djur infekterade med tetanusbakterier på se sätt att antikroppar- ne neutreliserer toxinet. Det utsågs att de passivt edministrerede antikrepperna nentraliserer det livsnetade torinet alstret av bak» terierne, varigenom man uppnår temporär immunitet mot toxinet§ Passiv immunicering skiljer sig från aktiv immunicering genom ett immunskyddet är temporärt den endast varar så länge som de skyd=e dande antikropparna finns närvarande. Äktiv immunicering är mere permanent, eftersom värderganismens-immunsystem fortsätter att producera skyddande antikroppar i närvaro av den stimulerande en» tigenen.* _ d d s d d Färska stndier inom termimmunologiområdet har visat förekomsten d ev en lekal immunmekenism i tarmsystemet. Dette immunsystem pree ducerar en speeiell typ av entikropp, som motverkar bekterieske= degörelse i tarmsystemets lumen. Antikreppen som benämns sekrete= riskt immunoelobulin eller IqA, frambringas av antigenen till följd av lokal aktiv immunicering av termslemninnen. Det sekretoriske immunsystemetz vid tarmsystemet fungerar så satt de skyddar inflytt= ningen och tillväxten av skadliga bekteriestemmar i denna miljö. 443 544- i Man antar att ett sammanbrott i det lokala immunsystemet i tarmen wágör det möjligt för främmande skadliga bakterier att etablera sig och att dessa bakterier förorsakar reumatoid artrit. Enligt denna teori härrör reumatoid artrit från ett sammanbrott i tarm- systemets lokala immunsystem, som skall producera och avsöndra skyddande antikroppar;mot skadliga bakterier. Oförmâgan hos värd- organismen att reagera på aktiv immunicering utesluter möjligheten att använda denna metod för att behandla reumatoid artrit.According to the patent, a cow is actively immunized against the tetanus toxin and the antibodies formed by the cow against the toxin are obtained from the cow's milk and these antibodies can be used to treat animals infected with tetanus bacteria in such a way that the antibodies neutralize the toxin. It was determined that the passively administered antibodies neutralize the life-grafted torin generated by the bacteria, thereby achieving temporary immunity to the toxin. Passive immunization differs from active immunization by an immune protection is temporary it only lasts as long as the protective antibodies are present. present. Active immunization is more permanent, as the host organism's immune system continues to produce protective antibodies in the presence of the stimulating antigen. * _ D d s d d Recent studies in the field of thermal immunology have shown the presence of a laconic immune mechanism in the intestinal system. This immune system pree produces a special type of antibody, which counteracts bacterial degeneration in the lumen of the intestinal system. The antibodies, termed secretory immunoelobulin or IqA, are produced by the antigen as a result of local active immunization of the term mucosa. The secretory immune system of the intestinal system works to protect the influx and growth of harmful bacterial strains in this environment. 443 544- i It is believed that a breakdown in the local immune system in the gut makes it possible for foreign harmful bacteria to establish themselves and that these bacteria cause rheumatoid arthritis. According to this theory, rheumatoid arthritis results from a breakdown in the intestinal system's local immune system, which is supposed to produce and secrete protective antibodies against harmful bacteria. The inability of the host organism to respond to active immunization precludes the possibility of using this method to treat rheumatoid arthritis.
Uppfinningen tillhandahåller en antikropp för att behandla reuma- toid artrit förorsakad av ett blandat spektrum av infektiösa bak- terier, som uppehåller sig mag-tarmområdet och med de kännetecken som framgår av kravet 1. Administrering av antigenen ger ett tem- fporärt immunskydd som är mycket specifikt för de bakteriestammar som används för att alstra antikropparna och inverkar ej menligt på de normala nyttiga bakterierna som förekommer i tarmsystemet.The invention provides an antibody for treating rheumatoid arthritis caused by a mixed spectrum of infectious bacteria, which resides in the gastrointestinal tract and has the characteristics of claim 1. Administration of the antigen provides a temporal immune protection which is very specifically for the bacterial strains used to generate the antibodies and do not adversely affect the normal beneficial bacteria present in the intestinal tract.
'Komjölk utgör den föredragna källan för antikropprodukten enligti *uppfinningen. Den är mycket specifik genom att den definierar en unik population av antikroppar i mjölk (IgG-typ), som reagerar med ett känt spektrum av bakterier och denna reaktion nyttiggörs för behandling och förhindrande av reumatoid artrit.Cow's milk is the preferred source of the antibody product of the invention. It is very specific in that it defines a unique population of antibodies in milk (IgG type), which react with a known spectrum of bacteria and this reaction is utilized for the treatment and prevention of rheumatoid arthritis.
Typen av immunglobulin är av vikt i samband med uppfinningen, ef- tersom det finns fem kända_klasser av immunglobuliner betecknade IgG, IgM, IgA, IgD och IgE (Nisonoff et al, 1971). Dessa typer av immunglobulin skiljer sig strukturellt från varandra (Waldman et al, 1970+.och har olika biologisk funktion i kroppen (Waldman et ¿al, 1971, och Franklin, 1964),-Dessutom finns det betydande varia- tioner i lokaliseringen av immunglobuliner i kroppen. Sålunda fö- ” religger tydliga fördelningsskillnader mellan immunglobulinklasser- na IgA och IgG; Det mest framträdande draget hos IgA är den höga koncentrationen i kroppsvätskor såsom mag-tarmvätska. Det har klart kunnat visas att det immunsystem, som bidrar med IgA till mag-tarm- vätskan, är ett annat system än det, som producerar IgG.The type of immunoglobulin is important in the context of the invention, as there are five known classes of immunoglobulins termed IgG, IgM, IgA, IgD and IgE (Nisonoff et al, 1971). These types of immunoglobulins differ structurally from each other (Waldman et al, 1970 + and have different biological functions in the body (Waldman et al., 1971, and Franklin, 1964). In addition, there are significant variations in the localization of immunoglobulins. Thus, there are clear distributional differences between the immunoglobulin classes IgA and IgG; The most prominent feature of IgA is the high concentration in body fluids such as gastrointestinal fluid. It has been clearly shown that the immune system, which contributes IgA to the stomach -intestinal- fluid, is a different system than the one that produces IgG.
Hos människan förekommer IgG i första hand i vaskulära och intra- 'cellulâra områden i kroppen (Waldman et al, 1970) och mycket liten mängd IgG hamnar i mag-tarmvätskorna. En annan viktig skillnad mel- lan klasserna av immunglobuliner berör deras metaboliska tillväxt. _Nedbrytningen av varje klass av immunglobulin tycks, oavsett loka- 448 344 t 6 liseringen i kroppen, ske under separat kontroll. Den funktionella kataboliska tillväxten varierar från så lågt värde som 6,5% för IgG till så högt värde som 90% för IgE medan andra immunglobulinklas- ser hamnar däremellan (Waldman et al, 1970). De_olika immunglobu-4 linklasserna skiljer sig också i sin benägenhet att bindas till an- tigener och i sin förmåga att kombinera med komplement, som är ett av rekvisiten för avdödning av levande bakterieceller (Heremans, 1960). Det är viktigt att understryka dessa skillnader hos typer- 'na av antikroppar, eftersom immuneffekter kan variera beroende på vilken typ av antikropp man har att göra med.In humans, IgG occurs primarily in vascular and intracellular areas of the body (Waldman et al, 1970) and a very small amount of IgG ends up in the gastrointestinal fluids. Another important difference between the classes of immunoglobulins concerns their metabolic growth. The breakdown of each class of immunoglobulin, regardless of its location in the body, appears to occur under separate control. Functional catabolic growth ranges from as low as 6.5% for IgG to as high as 90% for IgE while other immunoglobulin classes fall in between (Waldman et al, 1970). The different immunoglobulin-4 classes also differ in their propensity to bind to antigens and in their ability to combine with complement, which is one of the props for killing live bacterial cells (Heremans, 1960). It is important to emphasize these differences in the types of antibodies, as immune effects may vary depending on the type of antibody involved.
Den vanligen mest hävdade teorin är att de olika klasserna av im- munglobulin har_utvecklats för att fungera i olika miljöer i krop- pen. Det är exempelvis känt att ett speciellt immunsystem existe- rar med uppgift att producera antikroppar, vilka är aktiva i tarm- systemet. Vidare anser man allmänt att immunfunktionerna i tarm- systemet regleras specifikt av IgA-antikroppar och ej IgG. Under normala betingelser är IgA därför den klass av immunglobuliner som reglerar immunkontrollen över bakterieinfektioner, som förekommer i mag-tarmområdet hos människan. Éftersom IgG, IgM, IgD och IgE nor- malt_ej förekommer i tarmsàft, är det inte logiskt att förvänta sig att någon av dessa typer av antikroppar skulle vara effektiva för behandling av infektioner i mag-tarmområdet. I Det huvudsakliga immunglobulinet i komjölk är IgG och ej IgA (Sul-' livan et al, 1969). Därför är komjölk ingen närliggande källa för antikroppar för behandling av bakterieinfektioner i tarmsystemet hos människan på grund av dess höga koncentrationer av IgG och lå-4 ga koncentrationer av IgA. " I I -Immuniceringsmetoden är en annan viktig parameter vid beaktande av de olika klasserna av immnnglobülin. Det är väl känt för fack- mannen att olika immuniceringsmetoder resulterar i prefererad pro- duktion av olika typer av antikroppar. Exempelvis stimulerar en genom exponering av sekretorisk vävnad för antigener uppnådd lokal immunicering en prefererad produktion och utsöndring av immunglo- buliner av.IgA-typ. Tekniken med intramammoperfusion såsom beskri- ves i den amerikanska patentskriften 3.376.198 är ett exempel på lokal immunicering. Denna metod stimulerar produktionen och utsönd- ringen av IgA-antikroppar och är ej någon effektiv metod för pro- lb 448 544 _duktionfav_IgGÅ Uppfinningen avser även ett sätt att framställa antikroppar, vil- ket sätt närmare framgår av kravet 3.The most commonly claimed theory is that the different classes of immunoglobulin have been developed to function in different environments in the body. It is known, for example, that a special immune system exists with the task of producing antibodies, which are active in the intestinal system. Furthermore, it is generally believed that the immune functions in the intestinal system are specifically regulated by IgA antibodies and not IgG. Under normal conditions, therefore, IgA is the class of immunoglobulins that regulate the immune control of bacterial infections, which occur in the gastrointestinal tract of humans. Since IgG, IgM, IgD and IgE do not normally occur in intestinal juice, it is not logical to expect any of these types of antibodies to be effective in treating gastrointestinal infections. In The main immunoglobulin in cow's milk is IgG and not IgA (Sul- 'livan et al, 1969). Therefore, cow's milk is not a close source of antibodies for the treatment of bacterial infections in the human intestinal tract due to its high concentrations of IgG and low concentrations of IgA. "The immunization method is another important parameter when considering the different classes of immunoglobulin. It is well known to those skilled in the art that different immunization methods result in preferred production of different types of antibodies. For example, a by exposing secretory tissue to antigens achieved local immunization a preferred production and secretion of IgA-type immunoglobulins The technique of intramammoperfusion as described in U.S. Pat. No. 3,376,198 is an example of local immunization. This method stimulates the production and secretion of IgA. The invention also relates to a method for producing antibodies, which method is further stated in claim 3.
Enligt uppfinningen användes intramuskulär injektion för att pro- ducera en produkt användbar enligt uppfinningen, eftersom IgG är det huvudsakliga immunglobulinet i komjölk och ej IgA och eftersom hos kor systemimmunicering är den föredragna metoden att frambrin- ga antikroppar av IgG-typ i mjölk. Denna skillnad mellan immunglo- bulin av IgG-typ och IgA-typ är-viktig, eftersom man därav kan lä- ra att systemimmunicering och ej lokal immunicering är den föredrag- na metoden för att erhålla mjölkantikroppar med hög titer. Av den- na distinktion kan man också lära att immunprodukterna alstrade genom mammoperfusion av ett vaccin klart skiljer sig från immun- produkten bildad genom intramuskulär injektion av samma vaccin.According to the invention, intramuscular injection is used to produce a product useful in the invention, since IgG is the major immunoglobulin in cow's milk and not IgA and since in cow system immunization the preferred method is to produce IgG-type antibodies in milk. This difference between IgG-type and IgA-type immunoglobulin is important, since it can be learned from this that system immunization and non-local immunization are the preferred method for obtaining high titer milk antibodies. From this distinction one can also learn that the immune products generated by mammary infusion of a vaccine are clearly different from the immune product formed by intramuscular injection of the same vaccine.
Den enligt uppfinningen framställda produkten (IgG-antikroppar)- skiljer sig sålunda klart från produkten framställd enligt den ame- rikanska patentskriften 3.376.198. ' Immunprodukten framställd enligt föreliggande uppfinning innebär en förbättring i förhållande till.produkten framställd enligt den , amerikanska patentskriften 3.376.198 genom att koncentrationen av antikroppar av IgG-typ är avsevärt högre än koncentrationen av an- tikroppar av IgA-typ; Det finns inget stöd i litteraturen för upp- fattningen att IgG-antikroppar kan bildas genom intramammoperfu- sion av antigener. Eftersom vidare mängden IgG-immunglobuliner i komjölk är antingen noll eller extremt låg, har nämnda patentskrift ingenting att göra med föreliggande uppfinning. Tvärtom leder in- nehâllet i nämnda patentskrift bort från föreliggande uppfinning, eftersom det i patentskriften hävdas att IgA är en biologiskt ak- tiv faktor i komjölk, som har potentiell terapeutisk applikation.The product prepared according to the invention (IgG antibodies) - thus clearly differs from the product prepared according to U.S. Pat. No. 3,376,198. The immune product prepared according to the present invention is an improvement over the product prepared according to U.S. Pat. No. 3,376,198 in that the concentration of IgG-type antibodies is considerably higher than the concentration of IgA-type antibodies; There is no support in the literature for the notion that IgG antibodies can be formed by intramammary administration of antigens. Furthermore, since the amount of IgG immunoglobulins in cow's milk is either zero or extremely low, said patent has nothing to do with the present invention. On the contrary, the contents of said patent lead away from the present invention, since the patent claims that IgA is a biologically active factor in cow's milk, which has potential therapeutic application.
Enligt föreliggande uppfinning beredes en unik kombination av bak- 'fterier till ett vaccin, som administreras på friska mjölkkor. De IgG-antikroppar, som erhålls från mjölken av immunicerade kor, ut- gör den enligt uppfinningen framtagna produkten. Metoden enligt uppfinningen innebär en passiv immunicering av patenten genom oral _injektion av IgG-immunglobulin, som immunicerar passivt mot ett blandat spektrum av infektiösa bakterier, som uppträder i mag~tarm- 14484344 8 området. Denna behandling eliminerar betingelser i mag-tarm-om- rådet. som är ansvariga för reumatoid artrit.According to the present invention, a unique combination of bacteria is prepared into a vaccine which is administered to healthy dairy cows. The IgG antibodies obtained from the milk of immunized cows constitute the product produced according to the invention. The method of the invention involves a passive immunization of the patents by oral injection of IgG immunoglobulin, which passively immunizes against a mixed spectrum of infectious bacteria occurring in the gastrointestinal tract. This treatment eliminates conditions in the gastrointestinal tract. who are responsible for rheumatoid arthritis.
Fig} 1 visar ett exempel på ett frågeformulär, till vilket hänvi- sas i efterföljande beskrivning. Fig. 1a är en fortsättning på frågeformuläret i fig. 1. Fig. 2 anger grafiskt resultaten av för- sök utförda under en 12-månaders period med 6 månader på immunmjölk och 6 månader på ett kontrollprov, varvid RF-titern är uppförd som funktion av tiden angiven i månader.Fig. 1 shows an example of a questionnaire, to which reference is made in the following description. Fig. 1a is a continuation of the questionnaire in Fig. 1. Fig. 2 graphically shows the results of experiments performed during a 12-month period of 6 months on immune milk and 6 months on a control sample, the RF titer being listed as a function of the time specified in months.
Den enligt uppfinningen framställda produkten är en torrmjölk med låg fetthalt som innehåller en population av naturliga antikroppar av3IgG-typ, som reagerar med de i nedanstående tabell 1 angivna bakterierna.The product prepared according to the invention is a low fat dry milk containing a population of natural IgG-type antibodies which react with the bacteria listed in Table 1 below.
TabeIl~1 §ateriel1a.antigener Qäeafriåfß 1 3 *èfllëggflr- i Staphylococcus aureus '3 7 I 7 11631 Staphylococcus epidermidis _ 7 155 Streptococcus pyogenes, A, typ 1 I 8671 1 " 1 " 3 _3 10339 " 23 _ _".5 2 2 12347 '* V1 2 " s 12349 " 2 1 " 12 1 11434 P' " 14 12972 'f - 2 1 _ *' 18 1 ._ 12357 F' 1 3 1 " 22 of 10403 Aerobacter aerogenes - ' 884 Escherichia coli 3 " 3 26 Salmonella enteritidis *,*'p 7 7 3 13076 Pseudomonas aeruginosa 7 7 7700 Klebsiella pneumoniae 2 3 d 9590 Salmonella typhimurium ' 1 3 13311 Haemophilus influenzae 3 _f 9333 Streptococcus viridansp I de 1 6249 Proteus vulgaris 3 3 13315 Shigella dysenteriae * W 3 11635 Streptococcus,_grupp B_ 1 448 544 *Tabell 1, forts.TabeIl ~ 1 §ateriel1a.antigener Qäeafriåfß 1 3 * è fl lëgg fl r- i Staphylococcus aureus' 3 7 I 7 11631 Staphylococcus epidermidis _ 7 155 Streptococcus pyogenes, A, typ 1 I 8671 1 "1" 3 _3 10339 "23 _ _ _. 2 2 12347 '* V1 2 "s 12349" 2 1 "12 1 11434 P'" 14 12972 'f - 2 1 _ *' 18 1 ._ 12357 F '1 3 1 "22 of 10403 Aerobacter aerogenes -' 884 Escherichia coli 3 "3 26 Salmonella enteritidis *, * 'p 7 7 3 13076 Pseudomonas aeruginosa 7 7 7700 Klebsiella pneumoniae 2 3 d 9590 Salmonella typhimurium' 1 3 13311 Haemophilus influenzae 3 _f 9333 Streptococcus viridansp I de 1 6249 3 Proteus vulte dysenteriae * W 3 11635 Streptococcus, _group B_ 1 448 544 * Table 1, cont.
Diplococcus pneumoniae D Streptococcus mutans eCorvnebacterium, Acne) typ 1&2 *American Type Cultnre Collection 12301 Parklawn Dr.; R0ckVille,'Md. 20852 Den antibakteriella mjölken innehåller samtliga substanser som normalt återfinns i torrmjölk med låg fetthalt. De huvudsakliga beståndsdelar som återfinns i antibakteriell mjölk är angivna i _nedanstående tabell 2.Diplococcus pneumoniae D Streptococcus mutans eCorvnebacterium, Acne) type 1 & 2 * American Type Cultnre Collection 12301 Parklawn Dr .; R0ckVille, 'Md. 20852 The antibacterial milk contains all the substances that are normally found in low-fat dry milk. The main constituents found in antibacterial milk are listed in Table 2 below.
Tabell 2 Kvantitativ ooh kvalitativ analys av antibakteriell mjölk Proteinerr _ ' k k ' . V' 35,6% Fett ¿ -D - 1,o% Kolhydrater D I _ 4 52% Mineralämnen " 7 J 7 Ü 7,8%- Fukt ~ , ' ' i - 3,54% Varje i vätskeform återföra liter av 85-113 g fettfri torrmjölk innehåller ca . 1200 mg kalcium ' _ e * l 157% 935 mg fosfor V I - 125% 0,3 mg tiamin 7 32% 1,78 mg riboflavin ~.- _ 140% _1,04 mg niacin " _ 10% 324 kalorier Antibekterieli mjölk och normal xemjölk innehåller ungefär sem- ma viktprocent koncentrationer av ingredienser. Dessutom är kon- çentrationen av immunglobulin av typen IgG i antibakteriell mjölk och normal mjölk densamma. Det är därför endast när det gäller eden speoifika sammansättningen av antikroppar som den antibakte- riella mjölken skiljer sig från normal mjölk. Med specifik samman- sättning menas här det spektrum av bakteriearter som_antikroppar~ na reagerar med, D d44sís44id Äntibakteriell mjölk innehåller inga tillsatser av mediciner el- ler andra komponenter, som ej utgör naturliga produkter från kon.Table 2 Quantitative and qualitative analysis of antibacterial milk Proteinerr _ 'k k'. V '35.6% Fat ¿-D - 1, o% Carbohydrates DI _ 4 52% Minerals "7 J 7 Ü 7,8% - Moisture ~,' 'i - 3,54% Each in liquid form return liters of 85 -113 g fat-free dry milk contains about 1200 mg calcium '_ e * l 157% 935 mg phosphorus VI - 125% 0.3 mg thiamine 7 32% 1.78 mg riboflavin ~ .- _ 140% _1.04 mg niacin " _ 10% 324 calories Antibacterial milk and normal xem milk contain approximately the same percentage by weight of concentrations of ingredients. In addition, the concentration of IgG immunoglobulin in antibacterial milk and normal milk is the same. It is therefore only in the case of the specific composition of antibodies that the antibacterial milk differs from normal milk. By specific composition is meant here the spectrum of bacterial species with which the antibodies react, D d44sís44id Antibacterial milk does not contain additives of medicines or other components, which do not constitute natural products from the cow.
Immunmjölken framställd enligt uppfinningen kan också användas för att bekämpa autoimmuna sjukdomar; t.ex. lupus erythematosus och liknande, som förorsakas av eller försvåras av bakteriella angrepp i mag-tarmområdet.The immune milk prepared according to the invention can also be used to fight autoimmune diseases; for example lupus erythematosus and the like, which are caused by or aggravated by bacterial infestations in the gastrointestinal tract.
' Den polyvalenta antigen, som användes för induktionen av antibak- terieu mjölk, »framställes eniigceföijande.The polyvalent antigen used for the induction of antibacterial milk is prepared as follows.
Framställning av vaccin_ De i ovanstående tabell 1 angivna bakteriestammarna erhölls från' the American Type Culture Collection, vilket garanterar autentis- ka bakteriestammar och högsta kvalitet beträffande renhet. Efter mottagandet fick varje enskild bakteriestam tillväxa på blodagar- plattor för att fästa kulturens livskraft och bestämma om till- växtmönstret var tvpiskt eller icke typiskt för bakterien ifråga.¿ En enda koloni togs för var och en av de testade kulturerna för histologisk undersökning för att ytterligare konstatera att kultu- ren var autentisk och ren. En enda koloni av varje kultur användes _ för att ympa 500 ml av ett standardiserat odlingssubstrat. Av- the American Type Culture Collection rekommenderade substrat använ- des för odling av var och en av de i tabell 1 angivna specifika bakterierna. ' Samtliga organismer inkuberades som statiska kulturer med undantag av 12, 13, 14 och 60, vilka inkuberades i en skakapparat för omrö-d A ring. Identifieringen av bakteriestammarna och katalognumren en- ligt the American Type Culture Collection är angivna i tabell 1.Preparation of vaccine The bacterial strains listed in Table 1 above were obtained from the American Type Culture Collection, which guarantees authentic bacterial strains and the highest quality of purity. Upon receipt, each bacterial strain was allowed to grow on blood agar plates to determine the viability of the culture and to determine whether the growth pattern was ambiguous or not typical of the bacterium in question.¿ A single colony was taken for each of the tested cultures for histological examination to further state that the culture was authentic and pure. A single colony of each culture was used to inoculate 500 ml of a standardized culture medium. The substrates recommended by the American Type Culture Collection were used for culturing each of the specific bacteria listed in Table 1. All organisms were incubated as static cultures with the exception of 12, 13, 14 and 60, which were incubated in a shaker for agitation. The identification of the bacterial strains and the catalog numbers according to the American Type Culture Collection are given in Table 1.
Varje kultur odlades under.48 timmar vid 37°C. Efter inkubation avdödades kulturerna genom upphettning vid_60°C under tvâ timmar.Each culture was grown for 48 hours at 37 ° C. After incubation, the cultures were killed by heating at -60 ° C for two hours.
Prover av de avdödade bakterierna användes för att ympa färskt od- lingssubstrat, som därefter inkuberades under 24 timmar vid 37°C för att avgöra om avdödningsprocessen varit effektiv och fullstän- dig. Endast kulturer som visade sig vara sterila vid denna under- sökning användes i det fortsatta arbetet. Sterila kulturer tvätta- des sedan fem gånger i destillerat vatten och cellerna utvanns ge- nom centrifugering. Cellerna frystes ned genom nedsänkning i fly- tande kväve och frystorkades genom lyofilisering. De lyofiliserade cellerna förvarades på sterila flaskor tills de användes för pro- f: Q. aKorna injicerades med 5 ml.polyvalent antigen innehållande 20 x 10 p 448 544 11 fduktion"av det'polyvalenta vaccinet- Det polyvalenta vaccinet framställes genom att'väga upp 1 g av var och en av bakteriestam- marna. De torra cellerna blandades samman och denna blandning” suspenderades i steril fysiologisk koksaltlösning (20 g bakterier 'per 500 ml koksaltiösning).Samples of the killed bacteria were used to inoculate fresh culture medium, which was then incubated for 24 hours at 37 ° C to determine if the killing process was efficient and complete. Only cultures that were found to be sterile in this study were used in the further work. Sterile cultures were then washed five times in distilled water and the cells were recovered by centrifugation. The cells were frozen by immersion in liquid nitrogen and lyophilized by lyophilization. The lyophilized cells were stored in sterile vials until used for testing. The cells were injected with 5 ml of polyvalent antigen containing 20 x 10 4 444 544 11 11 "production of the polyvalent vaccine. The polyvalent vaccine is prepared by weighing 1 g of each of the bacterial strains, the dry cells were mixed together and this mixture was suspended in sterile physiological saline (20 g of bacteria per 500 ml of saline).
Ett prov av den koncentrerade lösningen späddes i serie med kok- saltlösning för att bestämma den utspädning som var en koncentra- 'tion av 4 x 108 celler per cm3. Det förvarade, koncentrerade poly- valenta vaccinet dispergerades i multipla behållare och förvarades fruset, Koncentrerad antigen ingick i varje enskild behållare i en~ mängd tillräcklig för att immunicera 50 kor. Den slutliga utspäd- ningen av koncentratet gjordes strax före-immuniceringen. Ett fö- redraget tillvägagângssätt.bestod i att ta ut ett tillräckligt an- '_tal'flaskor tillräckliga för att immunicera antalet kor som skulle behandlas. Exempelvis togs flaskorna ut 24 timmar före den planera- 'de immuniceringen och ett prov av koncentratet späddes sedan i en steril_behå1lare till en slutlig koncentration av 4 x 108 celler per ml. Den maximala reaktionen hos kor uppnåddes genom injicering av 20 x¿108 bakterieceller eller 5 cm3 av det sterila preparatet, som höll 4 x 108 celler per ml enligt nedan beskrivna injicerings- metod; Föredragen metod för immunicering av kor Den slutliga antikropprodukten framställdes genom att immunicera kor med den polyvalenta antigenen framställd på ovan beskrivet sätš.. bakterieceller. Injektionen gjordes intramuskulärt i glutealmusku- laturen i bakbenet. Denna procedur upprepades med en veckas inter- vall under fyra på varandra följande veckor med början 2-3 veckor före en förväntad kalvning. Efter den primära immuniceringen gavs ' var 14:e dag buffertinjektioner med användning av samma koncentra- 'tion av antigen. Denna immuniceringsmetod gav den maximala anti- kroppstiternl Uppsamling, hantering och vidarebearbetning av mjölk I Mjölkcniuppsamlades från immunicernde kor j ett modernt mjölkrum.A sample of the concentrated solution was diluted in series with saline to determine the dilution which was a concentration of 4 x 108 cells per cm 3. The stored concentrated polyvalent vaccine was dispersed in multiple containers and stored frozen. Concentrated antigen was contained in each individual container in an amount sufficient to immunize 50 cows. The final dilution of the concentrate was made just before immunization. A preferred approach was to take out a sufficient number of bottles to immunize the number of cows to be treated. For example, the vials were withdrawn 24 hours before the scheduled immunization and a sample of the concentrate was then diluted in a sterile container to a final concentration of 4 x 10 8 cells per ml. The maximum response of cows was achieved by injecting 20 x 10 108 bacterial cells or 5 cm 3 of the sterile preparation, which held 4 x 10 8 cells per ml according to the injection method described below; Preferred Method for Immunizing Cows The final antibody product was prepared by immunizing cows with the polyvalent antigen prepared on the bacterial cells described above. The injection was made intramuscularly into the gluteal musculature of the hind leg. This procedure was repeated at one-week intervals for four consecutive weeks beginning 2-3 weeks before an expected calving. After the primary immunization, buffer injections were given every 14 days using the same concentration of antigen. This method of immunization gave the maximum antibody titer. Collection, handling and further processing of milk In milk, a modern milk chamber was collected from immunizing cows.
Ett helt automatiserat mjölkningssystem samlade upp och förvarade -mjölken under helt sanitära förhållanden. Mjölkningssystemet bestod av automatmaskiner direkt anslutna till under kylning satta förva- i 12 ringsbehâllare genom ett slutet rörsystem. Detkompletta systemet renades och steriliserades efter varje mjölkning för att säker- ställa maximala sanitära betingelser. Det är viktigt att Vidtà al- ._la försiktighetsåtgärder för att förhindra tillväxten av bakteri- er i immunmjölk under upparbetningen, eftersom sådana bakterier kan sänka titern av antikroppar i mjölken.A fully automated milking system collected and stored the milk under completely sanitary conditions. The milking system consisted of automatic machines directly connected to storage containers placed during cooling through a closed pipe system. The complete system was cleaned and sterilized after each milking to ensure maximum sanitary conditions. It is important to take precautionary measures to prevent the growth of bacteria in immune milk during processing, as such bacteria may lower the titer of antibodies in the milk.
Mjölken transporterades varje dag från de nedkylda förvaringsbehål- larna till en mjölkhanteringsanläggning med hjälp av särskilda' mjölktransportbilar. I mjölkhanteringsanläggningen utsattes den antibakteriella mjölken för kortvarig högtemperaturbehandling för* pastöriseringl Med hjälp av speciella mejerimaskiner företogs upp- rhettning under kontinuerlig strömning av mjölk till 68°C under en Aperiod av högst 15 sekunder. Temperaturen och tiden var kritisk, eftersom antikroppar bryts ned i värme. Antikropparna i mjölken förstörs vid temperaturer över 73°C, om de hålls vid denna tempera- tur under längre period än 1 minut. Efter pastöriseringen kyldes all mjölk omedelbart och fettet avlägsnades genom centrifugering- ooh den sålunda erhållna antibakteriella skummjölken överfördes i pulverform genom spraytorkning. Spraytorkningen ägde rum i en stor torkkammare, i vilken varm luft (177°C) blåstes in med hög hastig- het. Skummjölken atomiserades i kammaren, där de finfördelade mjölk- partiklarna under det att de föll mot botten av behållaren torka- des. Torrmjölken togs ut automatiskt med hjälp av mekaniska anord- ningar och mjölkpulvret förpackades under saniñära betingelserlxw Före atomiseringen kondenserades skummjölken genom kokning i en kammare under vakuum (38-43oC). I varje steg var det viktigt att hälla bakterier borta från mjölken, eftersom dessa kunde minska antikroppstitern. i Testmetoderu ,g Immunmjölken framställdes med användning av kor av Holstein-ras..The milk was transported every day from the refrigerated storage containers to a milk handling plant with the help of special 'milk transport vehicles'. In the milk handling plant, the antibacterial milk was subjected to short-term high-temperature treatment for * pasteurization. Using special dairy machines, heating was carried out during continuous flow of milk to 68 ° C for a maximum period of 15 seconds. The temperature and time were critical, as antibodies are broken down in heat. The antibodies in the milk are destroyed at temperatures above 73 ° C, if they are kept at this temperature for a longer period than 1 minute. After pasteurization, all milk was cooled immediately and the fat was removed by centrifugation, and the antibacterial skim milk thus obtained was transferred in powder form by spray drying. The spray drying took place in a large drying chamber, in which hot air (177 ° C) was blown in at high speed. The skimmed milk was atomized in the chamber, where the comminuted milk particles as they fell to the bottom of the container were dried. The dry milk was extracted automatically by means of mechanical devices and the milk powder was packaged under sanitary conditions lxw Before atomization, the skimmed milk was condensed by boiling in a chamber under vacuum (38-43oC). In each step, it was important to pour bacteria away from the milk, as these could reduce the antibody titer. In Test Methods, the immune milk was prepared using cows of the Holstein breed.
Korna immunioerades genom_intramuskulär injektion av en blandning av bakterieantigenerna angivna i ovanstående tabell 1. vaccinet framställdes på ovan beskrivet sätt. Den'immunologiska reaktionen hos korna r förstärktes genom injektioner två gånger i veckan av vaccinet. Mjölken från dessa kor uppsamlades, fettet avlägsna- des och den fettfria mjölken pastöriserades vid 71°C under 16 se- kunder, varefter företogs spraytorkning, under vilken mjölkens tem- peratur ej överskred 2900. Mjölken förpackades därefter i ca 1 Ii- du .p 448 344 1st ters förpackningar av polyeten. Kontrollmjölkprover utfördes av 'fettfri torrmjölk inköpt från en lokal producent.The cows were immunized by intramuscular injection of a mixture of the bacterial antigens listed in Table 1 above. The vaccine was prepared as described above. The immunological response of the cows was enhanced by injections twice a week of the vaccine. The milk from these cows was collected, the fat was removed and the fat-free milk was pasteurized at 71 ° C for 16 seconds, after which spray drying was carried out, during which the temperature of the milk did not exceed 2900. The milk was then packaged for about 1 hour. 448 344 1 ters packages of polyethylene. Control milk samples were performed on 'fat-free dry milk purchased from a local producer.
Erytrocytsedimentaticnshastigheten bestämdes på nytagna blodprover medelst Westergrens metod och korrigerades för hematokrit enligt metoden beskriven av Wintrode & Langsberg (1935). Reumatoidfaktor- titrar bestämdes enligt Singer-Flotz (1966) makroskopiska metod med provrör.The rate of erythrocyte sedimentation rate was determined on fresh blood samples by Westergren's method and corrected for hematocrit according to the method described by Wintrode & Langsberg (1935). Rheumatoid factor titers were determined according to Singer-Flotz (1966) macroscopic method with test tubes.
Patienter togs emot för studier på basis av en förhöjd erytrocytsef dimentationshastighet och en positiv reumatoid faktortiter. Nio- patienter studerades under 12 månader och 11 patienter studerades under 18 månader. Patientgruppen var sammansatt av 13 kaukasiska kvinnor_i åldrar mellan 32 och 69 år med en medelålder av 50,4 åræ och 7 kaukasiska män i'en ålder mellan 43 och 70 år med en medel* ålder av 58,1 år. Den genomsnittliga tid som patienterna lidit av artrit var 10,8 år för kvinnorna och 11.0 år för männen. Patien- ter placerades godtyckligt i grupper för behandling med immunmjölk eller icke immunmjölk (en kommersiell produkt inköpt i Dayton~distf riktet och fungerande som kontrollvätska). Båda mjölkprodukterna var förpackade i likadana förpackningar och identififerades som im- munmjölk eller kontrollprov med en blå eller röd, tryckkänslig etikett; som fästs på varje förpackning vid påfyllningstillfället.“ Etiketterna avlägsnades strax innan patienterna fick dricka av mjöl- ken. Inte vid något tillfälle kunde sålunda patienterna veta om de drack immunmjölk eller kontrollmjölk. Patienter valdes godtyckligt ut (genom att kasta mynt) för att dricka av antingen immunmjölkAel~ ler av kontrollmjölken under den första sexmånadersperiodenl Efter_ aenna~t1a fick de, som tidigare fått immunmjöik, kontrølimjöik och. de; som tidigare erhållit kontrollmjölk, fick nu immunmjölk under I den andra sexmånadersperioden. 7Vid slutet av den andra sexmånadersperioden stannade 11 patienter frivilligt kvar för studier under ytterligare en sexmånadersperiod.Patients were admitted for studies based on an elevated erythrocyte sedimentation rate and a positive rheumatoid factor titer. Nine patients were studied for 12 months and 11 patients were studied for 18 months. The patient group consisted of 13 Caucasian women_year aged between 32 and 69 years with a mean age of 50.4 years and 7 Caucasian men aged between 43 and 70 years with a mean * age of 58.1 years. The mean time that patients suffered from arthritis was 10.8 years for women and 11.0 years for men. Patients were arbitrarily placed in groups for treatment with immune milk or non-immune milk (a commercial product purchased in the Dayton district and acting as a control fluid). Both dairy products were packaged in the same packaging and were identified as immune milk or control samples with a blue or red, pressure-sensitive label; which is affixed to each package at the time of refilling. ”The labels were removed just before patients were allowed to drink the milk. Thus, at no time could the patients know whether they were drinking immune milk or control milk. Patients were arbitrarily selected (by tossing coins) to drink either immune milk or control milk during the first six-month period. After one week, those who had previously received immune milk received control milk and. the; who had previously received control milk, now received immune milk during the second six-month period. 7At the end of the second six-month period, 11 patients voluntarily remained for study for another six-month period.
Typen av mjölk (immun: eller kontrollmjölk) ändrades återigen vid y detta tillfälle och observationerna fortsatte. Studiet omfattade sålunda tre sexmånadersperioder, varvid 11 av patienterna deltog under tre perioder och nio deltog under två perioder. I Patienterna fick komma en gång i månaden, varvid torrmjölk som . gvärden i förhållande till "Aspirin 'ta med nämnda "Aspirin 448 544 14 skulle räcka en månad aaiaaes ut och ett frågaformaiar fylldes 1 samt blodprover uppsamlades för bestämning av reumatoid faktor- titer, erytfimndsedimentationshastighet och hematokrit.The type of milk (immune: or control milk) was changed again at this time and the observations continued. The study thus included three six-month periods, with 11 of the patients participating for three periods and nine participating for two periods. In Patients were allowed to come once a month, leaving powdered milk as. values in relation to "Aspirin 'include the said" Aspirin 448 544 14 would suffice one month aaiaaes out and a questionnaire was filled out 1 and blood samples were collected for determination of rheumatoid factor titer, erythema sedimentation rate and hematocrit.
Patienterna instrnerades att inta en kvantitet torrmjölk ekviva- lent med T,1 l färdigmjölk två gånger dagligen. Torrmjölken löstes upp i färskt tillstånd i 0,55 l kallt kranvatten omedelbart före intaget och kort efter uppvaknandet på morgonen och strax före säng- gâendet på kvällen; De ombads att besöka sin läkare som vanligt och att följa av honom föreslagna behandlingsföreskrifter. Medicinej ringen skulle tas ad libitum eller såsom föreskrivits av deras van- liga läkare. Enda kravet var att de-rapporterade den mängd medicin som de intog.Patients were instructed to consume a quantity of dry milk equivalent to T, 1 l of whole milk twice daily. The dry milk was dissolved in a fresh state in 0.55 l of cold tap water immediately before ingestion and shortly after waking up in the morning and just before bedtime in the evening; They were asked to visit their doctor as usual and to follow the treatment instructions proposed by him. The medication should be taken ad libitum or as prescribed by their regular doctor. The only requirement was that they de-report the amount of medication they were taking.
Ett frågeformulär ifylldes av¿varje patient varje månad. Det var uppdelat i sex avdelningar och berörde följande frågor: 1) Morgonstelhetens varaktighet, l_ 2) bedömning av värken iakttagen i var och en av åtta ledpartier, 3) typ och kvantitet av medicin med korttidsverkan som intagits, 4) typ och kvantitet av medicin med långtidsverkan som intagits, ) förmåga hos patienten att utföra sina normala aktiviteter och 6) bedömning av sjnkdomssymptomens svårighetsgrad.A questionnaire was completed by each patient each month. It was divided into six sections and concerned the following issues: 1) Duration of morning stiffness, l_ 2) assessment of pain observed in each of eight joints, 3) type and quantity of medicine with short-term effect taken, 4) type and quantity of medicine with long-term effect taken,) ability of the patient to perform their normal activities and 6) assessment of the severity of the disease symptoms.
“De i anslütning till frågorna angivna siffervärdena anger de poäng, som åsatts varje svar för utvärdering av frågeformuläret. Vid be- dömning av frågorna avseende medicinering gjordes ett försök att återspegla den relativa antiinflammatoriska och analgetiska verkan' hos olika använda mediciner. En 324 mg “Aspirin~E)-tablett" åsat~ tes vät 1. Alla .övriga mediciner (med undantag av guld, “Pla- guenil “ och kortisonsprutor, vil a bedömdes separat) åsattes “. Alla övriga salicylatpref_ parat, såsom “Tylenol", "Darvon“ och "Mortrin“ bedömdes ekvivalen- "-tablett och åsattes också värdet 1.The numerical values given in connection with the questions indicate the points that have been assigned to each answer for evaluating the questionnaire. In assessing the questions regarding medication, an attempt was made to reflect the relative anti-inflammatory and analgesic effect of various medications used. A 324 mg "Aspirin-E) tablet" was loaded with hydrogen 1. All other medications (with the exception of gold, "Plaguenil" and cortisone syringes, which will be assessed separately) were added. All other salicylate preparations, such as " Tylenol "," Darvon "and" Mortrin "were assessed as the equivalent" tablet "and were also assigned a value of 1.
Antalet gram kortison multiplicerades med fyra och antalet indocin- å (vikranhat = o,o64s "-tab- kapslar multipiícaraaas med 2,5. Antalet grain g) kodein multiplicerades med 2 och antalet "Butazoladin letter multiplicerades med 7.: I Medelpoängen för varje kategori framräknades för varje sexmânaders- period. Differenserna för medelvärden beräknades därefter genom att _ å! 448 344 subtrahera medelvärdena under administrering av immunmjölk från medelvärdena under administrering av kontrollmjölken. När resulta- ten framräknades på detta sätt, indikerades en förbättring i pá- tientens tillstånd under den period han erhöll immunmjölk med ne- gativa värden för proverna 1 och 6 och med positiva värden för al- r la övriga frågor. Medelvärdeskorrigerade värden för erytrocytsedi~ ementationshastigheten (ESR) och reumatoidfaktortitern (RF) visades på samma sätt. Dessa framräknades på sådant sätt att positiva vär- den återspeglar en lägre erytrocytsedimentationshastighet eller reumatoidfaktortiter under administrering av immunmjölk. värdena fframtogs statistiskt med användning av det statistiska analyssys- temet enligt Goodnight et al. (SAS Institute, Raleigh, N.C.).The number of grams of cortisone was multiplied by four and the number of indocin-å (vikranhat = 0, o64s "tab capsules multiplied by 2.5. The number of grain g) codeine was multiplied by 2 and the number of" Butazoladin letter was multiplied by 7 .: I The average score for each category was calculated for each six-month period. The differences for mean values were then calculated by _ å! 448 344 subtract the mean values during administration of immune milk from the mean values during administration of the control milk. When the results were calculated in this way, an improvement in the patient's condition during the period in which he received immune milk was indicated with negative values for samples 1 and 6 and with positive values for all other questions. Mean-corrected values for erythrocyte deposition rate (ESR) and rheumatoid factor titer (RF) were displayed in the same manner. These were calculated in such a way that positive values reflect a lower erythrocyte sedimentation rate or rheumatoid factor titers during administration of immune milk. the values were obtained statistically using the statistical analysis system according to Goodnight et al. (SAS Institute, Raleigh, N.C.).
Beräkningarna utfördes med hjälp av en dator IBM modell 370/155.The calculations were performed using a computer IBM model 370/155.
Resultat' 7 Immunmjölken tolererades väl av samtliga patienter med undantag av en, som led av periciös anemi. Denna patient klagade över diar- .rê och studiet av denne patient avbröts. Några patienter rapporte- rade en viktökning under behandlingens gäng. Denna kan ha berott på det ökade kaloriintaget från mjölken eller återspeglar eventuellt en allmän förbättring i deras fysiska välbefinnande. 16 448 344 :mw.w .#Q®fi0HHMmoMmflowvmwHm># ¶ Høxmwflflfiuflmnøm W Hfimndë mm@@,o ¶fl@m«1o| _ß.«: m.m« w@w,w íám ßm mm .w. @ßßß.o «ßm.o+ . ~.wm NN@.mm_ ß.mm mm~.wm mm mw mmm .ß mmvoo.o mmv.ø|¶ m.m« ßvv.N m.ß« «mm.v Å vmí ßw @«uHHø>m .U @~oo.o ww~,o1 :.~« åmN.~ w.wv mw@.« :N ßm »mnH@pm..p ¶m#oo»o¶ ::m.o« f.#«. ß:«.~ w.«N mo@.« àw mm Muw> .w ¶ ¶ ¶ main ¶ ¶ ¶ , ¶ nwfiwnww wflflpmnma .w mwøo.o omm,o+ vfam «ßæ.« v.@ß ¶ :Nm.N .àw ßw ¶ ¶ ¶ nnw .m wßmo.ø _«wo.o+ w.mßv ::m.o ¶ß,o:« mNm.o :N ßm ¶ qøfiwøxflflwa qmfln< .w mo#o.o m#«.:+ m.«o« m«m.m« «.:o« mwwfom àm um nwflfifim 1m¶ ovoo.o ¶mfm.o+ m.om mNß.ø @ ¶ß.m@¶ ¶ w:@,o ímm mm nwppmw .n ß~«o,o «w@«.o+ ß.m@ @m@.o mfww. v«wß.o, Nmí ww Hwfimqm .w mvoø,o «-»o+ o.mm mw@.o «.:ß #om.o ám ßm qmmx ,w møoo.ø woß.o+ o.mmv ßwm.ø m.o@ mmm,o íí àw mm ¶Hw»wwn .m v«Qo.o ¶,¶. m#m~o+ ¶ ¶ m.wm w~w.o ß.@m .mßolv dw mm Hwøqwn .w _o«oo.ø¶¶ ¶mwN.o+ ¶ ¶. w.:ß mmm.ø¶ w.mw :mw.o. :m ¶ ßw_¶ Hmwmfiwqmn .°. ¶ v«mo.o_ mm«.o+ ¶ m,m@¶ mf@.o_ ß.mw ¶mmw«o :N ¶ ßm flmflmwpanm .Q o~#o,o wmm.o+¶ m,o@ @«ß,o .«,ß@ ¶ :m@.o ¶¶«m_ ßw pmfiwm .~_ ¶ . ¶ ¶ . ¶ Mnw>@wm .N voøo,o ß:m.o| @.mß @ßw1o¶ ß,m@ ¶H¶Nßm.o :N »N pumflmpmnownos .« m mnønwwwflfl * > o _|Mwmmm ¶ # > o nflwwmm _ asaw ¶ Hfionpnom @øHw>H@@wz¶ mfiwfiamøaaw Mamflafiflønpqom nwøoflnmm nmfloflpd>nwmßo ~ ~......_-............._,......._......;,......_...... 448 544 _17 Såsom framgår av tabell 3 observerades patienterna under totalt, 27 kontrollperioder (sekmånadersperioder, under vilka de erhöll kontrollmjölk) och 24 testperioder (sexmånadersperioder under vilka de erhöll immunmjölk). En patient hade blivit utsatt för en_fysisk skada i en av anklarna och ena foten. Smärtan i dessa leder utvärderades ej, vilket är anledningen till det lägre anta- let perioder vad gäller utvärdering av dessa leder. Erytrocytsedi- mentationshastigheten för en patient var så extremt onormal (mer än tvâ_standardavvikelser från medelvärdena för övriga patienter) att de ej upptecknades. Detta är anledningen till det lägre anta- let observationer avseende denna variabel.Results '7 Immune milk was well tolerated by all patients except one who suffered from pericardial anemia. This patient complained of diarrhea and the study of this patient was discontinued. Some patients reported weight gain during treatment. This may have been due to the increased caloric intake from the milk or may reflect a general improvement in their physical well-being. 16 448 344: mw.w. # Q® fi0 HHMmoMm fl owvmwHm> # ¶ Høxmw flflfi u fl mnøm W H fi mndë mm @@, o ¶fl @ m «1o | _ß. «: m.m« w @ w, w íám ßm mm .w. @ ßßß.o «ßm.o +. ~ .wm NN @ .mm_ ß.mm mm ~ .wm mm mw mmm .ß mmvoo.o mmv.ø | ¶ mm «ßvv.N m.ß« «mm.v Å vmí ßw @« uHHø> m .U @ ~ oo.o ww ~, o1:. ~ «åmN. ~ w.wv mw @.«: N ßm »mnH @ pm..p ¶m # oo» o¶ :: mo «f. #«. ß: «. ~ w.« N mo @. «àw mm Muw> .w ¶ ¶ ¶ main ¶ ¶ ¶, ¶ nw fi wnww w flfl pmnma .w mwøo.o omm, o + vfam« ßæ. «v. @ ß ¶: Nm .N .àw ßw ¶ ¶ ¶ nnw .m wßmo.ø _ «wo.o + w.mßv :: mo ¶ß, o:« mNm.o: N ßm ¶ qø fi wøx flfl wa qm fl n <.w mo # oo m # «. : + m. «o« m «mm« «.: o« mwwfom àm um nw flfifi m 1m¶ ovoo.o ¶mfm.o + m.om mNß.ø @ ¶ß.m@¶ ¶ w: @, o ímm mm nwppmw .n ß ~ «o, o« w @ «. o + ß.m @ @ m @ .o mfww. v «wß.o, Nmí ww Hw fi mqm .w mvoø, o« - »o + o.mm mw @ .o«.: ß # om.o ám ßm qmmx, w møoo.ø woß.o + o.mmv ßwm.ø mo @ mmm, o íí àw mm ¶Hw »wwn .mv« Qo.o ¶, ¶. m # m ~ o + ¶ ¶ m.wm w ~ w.o ß. @ m .mßolv dw mm Hwøqwn .w _o «oo.ø¶¶ ¶mwN.o + ¶ ¶. w.:ß mmm.ø¶ w.mw: mw.o. : m ¶ ßw_¶ Hmwm fi wqmn. °. ¶ v «mo.o_ mm« .o + ¶ m, m @ ¶ mf @ .o_ ß.mw ¶mmw «o: N ¶ ßm fl m fl mwpanm .Q o ~ # o, o wmm.o + ¶ m, o @ @« ß, o. «, ß @ ¶: m @ .o ¶¶« m_ ßw pm fi wm. ~ _ ¶. ¶ ¶. ¶ Mnw> @wm .N voøo, o ß: m.o | @ .mß @ ßw1o¶ ß, m @ ¶H¶Nßm.o: N »N pum fl mpmnownos.« m mnønwww flfl *> o _ | Mwmmm ¶ #> o n fl wwmm _ asaw ¶ H fi onpnom @ øHw> H @@ wz¶ m aw ø fi nwøo fl nmm nm fl o fl pd> nwmßo ~ ~ ......_-............._, ......._......;, ..... ._...... 448 544 _17 As shown in Table 3, patients were observed for a total of, 27 control periods (six-month periods during which they received control milk) and 24 test periods (six-month periods during which they received immune milk). A patient had been subjected to a physical injury in one of the ankles and one foot. The pain in these joints was not evaluated, which is the reason for the lower number of periods in terms of evaluation of these joints. The erythrocyte sedimentation rate for one patient was so extremely abnormal (more than two standard deviations from the mean values for other patients) that they were not recorded. This is the reason for the lower number of observations regarding this variable.
Medelvärdena och variationskoefficienterna (C.V;) är angivna i ta- bellen för varje variabel. Differenserna mellan medelvärdena fram- räknades genom att subtrahera medelvärdet erhållet under de perio- der patienterna mottog immunmjölk från de medelvärden som erhölls under perioder då de erhöll kontrollmjölk. En gynnsam reaktion på immunmjölken är indikerad med negativa värden för morgonstelhet (fråga 1) och månatlig förändring (frågorna 6a, b och c) och med positiva värden för övriga variabler. En effektiv reaktion på im- munmjölk erhölls för samtliga data ur frågeformulären. Sannolikhe- ten (P) indikerar en.hög grad av statistisk signifikans i varje försök. De små differensvärdena erhållna för erytrocytsedimenta- tionshastigheten och reumatoidfaktortitern var ej signifikanta.The means and coefficients of variation (C.V;) are given in the table for each variable. The differences between the mean values were calculated by subtracting the mean value obtained during the periods when the patients received immune milk from the mean values obtained during periods when they received control milk. A favorable reaction to the immune milk is indicated with negative values for morning stiffness (question 1) and monthly change (questions 6a, b and c) and with positive values for other variables. An effective response to immune milk was obtained for all data from the questionnaires. The probability (P) indicates a high degree of statistical significance in each experiment. The small difference values obtained for the erythrocyte sedimentation rate and the rheumatoid factor titer were not significant.
När emellertid erytrocytsedimentationshastigheten bedömdes på in- dividuell basis, uppvisade fyra av de tjugo patienterna statistiskt g signifikanta sänkningar vid behandling med immunmjölk. Även om immunmjölk inte hade någon signifikant inverkan på-medel- värdena för reumatoidfaktortitern, fick man vid undersökning av enskilda patienter fram en del intressanta svar. Sju av de tjugo studerade patienterna hade negativ reumatoidfaktortiter vid minst ett tillfälle under den periody som de mottog immunmjölk. Fyra av dem blev negativa under den period de mottog immunmjölk och deras titer blev ej positiv under efterföljande sexmånadersperiod när ao mottog kontrollmjölk, såsom är visat 1 fig. 2) En fortsatt stu- .die efter denna rapportperiod visade att tretton av tjugofem pati- ontoähado förlorat roumatoidfaktorn 1 sitt blod. 448544 Z i 1sf Diskussion d j _ j.However, when the rate of erythrocyte sedimentation rate was assessed on an individual basis, four of the twenty patients showed statistically significant reductions in treatment with immune milk. Although immune milk did not have a significant effect on the mean values for the rheumatoid factor titer, some interesting responses were obtained when examining individual patients. Seven of the twenty patients studied had negative rheumatoid factor titers on at least one occasion during the period they received immune milk. Four of them became negative during the period they received immune milk and their titer did not become positive during the subsequent six-month period when ao received control milk, as shown in Fig. 2). A further study after this reporting period showed that thirteen of twenty-five patients received lost the roumatoid factor 1 its blood. 448544 Z i 1sf Discussion d j _ j.
Den vetenskapsman, som var ansvarig för dessa studier, intervjua- de personligen varje patient i månadsintervall och antecknade.de- ras svar på frågorna. Alla ansträngningar gjordes för att inte på- verka patientens svar. Patienterna informerades från början om och påmindes då och då om att de under vissa perioder av behand- lingen skulle få ett kontrollprov, Man förutsatte att patienten med denna vetskap skulle besvara frågorna mera objektivt och utan förutfattad mening. Inte vid något tillfälle informerades patien- terna om att de erhöll immunmjölk eller kontrollmjölk. I Frågan beträffande medicinering "igår" (fråga 3) och frågan avseen- de långtidsmedioinering (fråga 4) är objektiva och är av primär be- tydelse vid beaktande av svaren som ges på övriga frågor. Dessa 7 frågor är viktiga av två skäl: I I I ' Ti Om immunmjölken är effektiv, när det gäller att lindra symptom., av sjukdomen, skulle patienten förväntas ta mindre mediciner än vad som var tillåtet ad-libitum; Patienterna rapp rterade att de i medeltal intog fyra tabletter mindre av äÅspirin " eller därmed' ekvivalenta tabletter per dag under de perioder, som de erhöll im- munmjölk. De rapporterade också att de fick mindre mängd långtids- 'verkande medicin under dessa perioder och 2) om patienterna tog mindre mängder analgetika och andra mediçi- ner användbara för behandling av reumatoid artrit, Skulle man för- vänta sig att de skulle rapportera ett försämrat välbefinnande oav- sett immunmjölken påverkade sjukdomen gynnsamt. ” Såsom framgår av fig.'2 rapporterades signifikant mindre antal led- besvär under perioder då patienterna fick immunmjölk även om de intog mindre mängd mediciner för sin artrit.: Studiet av patienterna startade med månadsintervall under en ett- årsperiod ooh tilldelningen av typ av mjölkprodukt (immunmjölk el- ler kontrollmjölk) skedde slumpvis. Iakttagelsen att positiva svar eller förbättringar uppnåddes för samtliga parametrar i frågefor- muläret och att dessa medelvärden var statistiskt signifikanta är en stark indikation om att immunmjölken hade en gynnsam inverkan på patienterna, Denna slutsats förstärks av iakttagelsen att 20% av patienterna förnam en statistiskt signifikant (p < 0,05) sänk- m; är .h 448 544 19 'ning i erytrocytsedimentationshastigheten vid behandling med im- munmjölk. f_Resultaten av värdena för reumatoidfaktortitern är svåra att ut- värdera. Detta beror åtminstone_till en del på det faktum att reu- matoidfaktorns ursprung och roll i etiologin och prognosen för~. reumatoid artrit ej är kända. Rose et al (1948) har visat att rö- da blodcailer' nos får, sam senaibilniaerats maa antikroppar fràaka- nin, undergick agglutinering i närvaro av blodserum från patienter med reumatoid artrit. Resultatet beror av den specifika reaktionen mellan normal immunglobulin (lgG från antingen kanin eller männis- ka) med reumatoidfaktorer. Beteendet hos reumatoidfaktorn överens- stämmer väl med vad man kan förvänta sig hos antikroppar gentemot lgG (Epstein et al, 1956). Närvaron av reumatoidfaktorer har satts i samband med sjukdomens svårighetsgrad, när det gäller reumatoid. artrit och kan identifieras genom att iaktta ntfällda proteiner if vävnader hos patienter med reumatoid artrit. Även om en liten pro- centandel patienter med reumatoid artrit ej har positiv reumatoid- faktortiter anser de flesta reumatologer att positiva agglutine- _ ringsreaktioner ej övergår till negativa, även när sjukdomen är på återgång. De Forest et al (1958) har emellertid beskrivit ett litet antal patienter, som hade positiv reumatoidfaktortiter och som övergick till negativt efter sjukdomens återgång. När sjukdo- men bröt ut på nytt igen, blev provet ånyo positivt. Aho et al (1959) har emellertid noterat att de flesta patienter, vars sjuk- I domer blivit inaktiva, förblev serologiskt positivaa Det faktum att negativa titervärden iakttogs hos 60% av de i föreliggande un- _ dersökning undersökta patienterna och att hos hälften av dessa ti- tern förblev negativ under sex månader, visar att immunmjölk påver- kar en primär etiologisk faktor ansvarig för reumatoid artrit.The scientist responsible for these studies personally interviewed each patient at monthly intervals and recorded their answers to the questions. Every effort was made not to affect the patient's response. The patients were informed from the beginning and were reminded from time to time that during certain periods of the treatment they would receive a control sample. It was assumed that the patient with this knowledge would answer the questions more objectively and without preconceived notions. At no time were the patients informed that they had received immune milk or control milk. I The question regarding medication "yesterday" (question 3) and the question regarding long-term mediation (question 4) are objective and are of primary importance when considering the answers given to other questions. These 7 questions are important for two reasons: If the immune milk is effective in relieving symptoms of the disease, the patient would be expected to take less medication than was allowed ad-libitum; Patients reported taking an average of four tablets less äspirine or equivalent tablets per day during the periods in which they received immune milk. They also reported receiving less long-acting medication during these periods and 2 ) if patients took smaller amounts of analgesics and other drugs useful for the treatment of rheumatoid arthritis, one would expect them to report a deterioration in well-being regardless of the immune milk affecting the disease favorably. "As shown in Fig. 2, significant smaller number of joint problems during periods when patients received immune milk even if they took a smaller amount of medication for their arthritis .: The study of patients started at monthly intervals over a one-year period and the allocation of type of milk product (immune milk or control milk) was random. The observation that positive answers or improvements were achieved for all parameters in the questionnaire and that these mean rden was statistically significant is a strong indication that the immune milk had a beneficial effect on the patients. This conclusion is reinforced by the observation that 20% of the patients experienced a statistically significant (p <0.05) decrease; is .h 448 544 19 'increase in the erythrocyte sedimentation rate during treatment with immune milk. f_The results of the rheumatoid factor titer values are difficult to evaluate. This is due at least in part to the fact that the origin and role of the rheumatoid factor in the etiology and prognosis of ~. rheumatoid arthritis is not known. Rose et al (1948) have shown that red blood cells' nos sheep, sam senabilniaerat maa antibodies from aakinin, underwent agglutination in the presence of blood serum from patients with rheumatoid arthritis. The result depends on the specific reaction between normal immunoglobulin (IgG from either rabbit or human) with rheumatoid factors. The behavior of the rheumatoid factor is well in line with what can be expected in antibodies to IgG (Epstein et al, 1956). The presence of rheumatoid factors has been linked to the severity of the disease, in the case of rheumatoid. arthritis and can be identified by observing precipitated proteins in tissues in patients with rheumatoid arthritis. Although a small percentage of patients with rheumatoid arthritis do not have positive rheumatoid factor titers, most rheumatologists believe that positive agglutination reactions do not turn into negative ones, even when the disease is recurring. However, De Forest et al (1958) have described a small number of patients who had positive rheumatoid factor titers and who turned negative after the recurrence of the disease. When the disease broke out again, the test became positive again. However, Aho et al (1959) have noted that most patients whose diseases became inactive remained serologically positive. The fact that negative titer values were observed in 60% of the patients examined in the present study and that in half of them titer remained negative for six months, showing that immune milk affects a primary etiological factor responsible for rheumatoid arthritis.
Immunmjölkens verkan när det gäller att undanröja symptomen av reumatoid artrit är särskilt relevant vid beaktande av den nyligen beskrivna relationen mellan histokompabilitetsantigenerna (HL-A) och mottagligheten för reumatisk sjukdom (Brewerton, 1976). Histo- kompabilitetsantigener är genetiskt fast1agda'antigener som åter- finns i alla människooeller. De gener, som bestämmer dessa anti- gener benämnas histokompabilitetsgener. Man känner för närvarande till över fyrtio av dessa genetiskt bestämda antigener. De är ana svariga för avvisningen av.överförd vävnad mellan andra individer 44s;344 V 1 20 än identiska tvillingar. I stort liknar histokompabilitetsantige- nerna ABO-blodgrupper genom att de ärvs under livstid. Deras funk- tioner är ännu ej kända.med undantag av i den mycket artificiella situationen vid transplantation. Det är emellertid känt att histo- ' kompabilitetsgenerna har nära förbindelse med immunsvargenerna_på ' den sjätte kromosomen; I detta sammanhang kan de vara bestämmande över immunsvaret hos en individ mot en främmande inbrytare, såsom den bakterie.The effect of immune milk in eliminating the symptoms of rheumatoid arthritis is particularly relevant in view of the recently described relationship between histocompatibility antigens (HL-A) and susceptibility to rheumatic disease (Brewerton, 1976). Histo-compatibility antigens are genetically determined antigens that are found in all human cells. The genes that determine these antigens are called histocompatibility genes. Over forty of these genetically determined antigens are currently known. They are responsible for the rejection of transferred tissue between individuals other than identical twins. In general, histocompatibility antigens resemble ABO blood groups in that they are inherited for life. Their functions are not yet known, except in the very artificial situation of transplantation. However, it is known that the histocompatibility genes are closely related to the immune genes on the sixth chromosome; In this context, they can determine the immune response of an individual to a foreign invader, such as the bacterium.
Personer med HLA-B27 tycks vara särskilt mottagliga mot en rad! reumatiska sjukdomar. Man har kunnat fastslå att denna histokomt -pabilitetsantigen dikterar en typ-av immunsvar, som i närvaro av -andra disponerande faktorer leder till renmatoid artrit. Efter en tarminfektion med Yersinia enterooolitica¿ utvecklar en del pati- ienter en akut perifer artrit (Ahovenen et al, 1969). På samma sätt utvecklar efter salmonellainfektion ca 2% av patienterna akut per- fer artrit (Warren, 1970). HLA-B27 återfanns hos fyrtiotre av fyrtionio patienter med yersinia arthritis och hos femton av sex- * ton patienter med salmonellaartrit (Aho, 1974). Det är ett intres- _sant konstaterande att infektionsämnen kan trivas.i tarmområdet utan att ge upphov till lokala symptom. Hos patienter med HLA-B27 'etableras_en reaktion som resulterar i artrit. Det är sålunda in- te nödvändigt att infektionsämnet vinner tillträde till lederna.People with HLA-B27 seem to be particularly susceptible to a line! rheumatic diseases. It has been established that this histocomal -pability antigen dictates a type-of immune response, which in the presence of other predisposing factors leads to renmatoid arthritis. Following an intestinal infection with Yersinia enterooolitica¿, some patients develop acute peripheral arthritis (Ahovenen et al, 1969). Similarly, after salmonella infection, about 2% of patients develop acute peripheral arthritis (Warren, 1970). HLA-B27 was found in forty-three of forty-nine patients with yersinia arthritis and in fifteen of six- * ton patients with salmonella arthritis (Aho, 1974). It is an interesting finding that infectious agents can thrive in the intestinal tract without giving rise to local symptoms. In patients with HLA-B27, a reaction is established that results in arthritis. Thus, it is not necessary for the infectious agent to gain access to the joints.
Immunmjölk är till gagn för patienter med reumatoid artrit, efter- som den innehåller antikroppar som effektivt inaktiverar_eller neutraliserar skadliga bakterier och/eller metaboliska produkter därav. ' 7 I *Immune milk is beneficial for patients with rheumatoid arthritis, as it contains antibodies that effectively inactivate or neutralize harmful bacteria and / or metabolic products thereof. '7 I *
Claims (4)
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US87514078A | 1978-02-06 | 1978-02-06 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SE7900798L SE7900798L (en) | 1979-08-07 |
SE448344B true SE448344B (en) | 1987-02-16 |
Family
ID=25365266
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SE7900798A SE448344B (en) | 1978-02-06 | 1979-01-30 | ANTIBODY FOR TREATMENT OF REUMATOID ARTHRIT AND SETTING TO MAKE IT |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS54113425A (en) |
CH (1) | CH651210A5 (en) |
DE (1) | DE2904044C2 (en) |
DK (1) | DK158138C (en) |
FR (1) | FR2416015A1 (en) |
GB (1) | GB2013691B (en) |
HK (1) | HK30283A (en) |
IT (1) | IT1116524B (en) |
NL (1) | NL7900766A (en) |
SE (1) | SE448344B (en) |
Families Citing this family (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4732757A (en) * | 1978-02-06 | 1988-03-22 | Stolle Research And Development Corporation | Prevention and treatment of rheumatoid arthritis |
USRE33565E (en) * | 1978-02-06 | 1991-04-02 | Stolle Research And Development Corporation | Prevention and treatment of rheumatioid arthritis |
EP0059598B1 (en) * | 1981-02-26 | 1985-07-17 | Unilever Plc | A process and apparatus for the recovery of immunoglobulines |
DE3172807D1 (en) * | 1981-04-28 | 1985-12-12 | Stolle Res & Dev | Method of obtaining an anti-inflammatory bovine milk |
JP2561234B2 (en) * | 1981-05-12 | 1996-12-04 | スト−ル・リサ−チ・アンド・デイベロップメント・コ−ポレ−ション | Anti-inflammatory agent |
JPS58154513A (en) * | 1982-03-09 | 1983-09-14 | Sendai Biseibutsu Kenkyusho | Preventive and remedying drug |
US4636384A (en) * | 1982-06-03 | 1987-01-13 | Stolle Research & Development Corporation | Method for treating disorders of the vascular and pulmonary systems |
DE3378890D1 (en) * | 1983-06-07 | 1989-02-16 | Stolle Res & Dev | Deodorant containing bacterial antibodies |
JPS6112629A (en) * | 1984-06-28 | 1986-01-21 | Lion Corp | Composition for oral cavity application |
DE3785033T2 (en) * | 1987-07-21 | 1993-10-07 | Stolle Res & Dev | Method for obtaining immunoregulatory factors by mammalian immunization. |
JP2664906B2 (en) * | 1987-08-13 | 1997-10-22 | ストール・リサーチ・アンド・デイベロップメント・コーポレーション | Improved mammalian immunization |
EP1171161A1 (en) * | 1999-04-19 | 2002-01-16 | Richard Weisbart | Treatment of adult rheumatoid arthritis by oral administration of pooled human immunoglobulin and an antacid |
JP2004525077A (en) * | 2000-09-28 | 2004-08-19 | リサーチ コーポレイション テクノロジーズ,インコーポレイテッド | Treatment of immune-mediated diseases by oral administration of immunoglobulin G enriched plasma fraction |
US20040202660A1 (en) * | 2001-01-30 | 2004-10-14 | Joy Campbell | Methods and compositions for treatment of immune dysfunction disorders |
US20050271674A1 (en) * | 2001-01-30 | 2005-12-08 | Campbell Joy M | Methods and compositions for modulating the immune system of animals |
JP4960632B2 (en) * | 2006-01-10 | 2012-06-27 | 学校法人北里研究所 | Composition for treating and preventing herpes simplex virus infection comprising immune milk composition as active ingredient |
JP5361132B2 (en) * | 2006-03-10 | 2013-12-04 | 国立大学法人信州大学 | An oral immunomodulator containing immunoglobulin G, a method for producing the same, and a food or drink comprising the oral immunomodulator |
JP2008179572A (en) * | 2007-01-25 | 2008-08-07 | Shinshu Univ | IMMUNOGLOBULIN Fc FRAGMENT RECEPTOR PROTEIN AND/OR PRODUCTION INHIBITOR OF IMMUNOGLOBULIN Fc FRAGMENT RECEPTOR LIKE PROTEIN, AND USE OF THE SAME |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CH488013A (en) * | 1965-10-24 | 1970-03-31 | Immune Milk Company Of America | Process for the production of antitoxins |
DE1617769A1 (en) * | 1967-06-10 | 1971-04-01 | Rehm Eberhard | Process for the production of milk containing specific antibodies and preparations made therefrom |
JPS5136326A (en) * | 1974-09-24 | 1976-03-27 | Komatsu Seiren Co | SEIKEIGORU FUBOORU |
JPS5837285B2 (en) * | 1975-05-29 | 1983-08-15 | カブシキガイシヤ ミドリジユウジ | It is very difficult to understand the situation. |
JPS521014A (en) * | 1975-06-17 | 1977-01-06 | Stolle Res & Dev | Pharmaceutically acceptable carrier containing milk immunoglobulin |
JPS5381613A (en) * | 1976-12-28 | 1978-07-19 | Green Cross Corp:The | Remedies for enteral infection diseases |
CH627079A5 (en) * | 1977-04-15 | 1981-12-31 | Nestle Sa | Process for preparing a protein concentrate containing immunological factors of milk origin |
-
1979
- 1979-01-30 SE SE7900798A patent/SE448344B/en not_active IP Right Cessation
- 1979-01-31 NL NL7900766A patent/NL7900766A/en not_active Application Discontinuation
- 1979-02-02 GB GB7903836A patent/GB2013691B/en not_active Expired
- 1979-02-02 DE DE2904044A patent/DE2904044C2/en not_active Expired
- 1979-02-02 FR FR7902807A patent/FR2416015A1/en active Granted
- 1979-02-05 JP JP1215279A patent/JPS54113425A/en active Granted
- 1979-02-05 IT IT47888/79A patent/IT1116524B/en active
- 1979-02-06 CH CH1168/79A patent/CH651210A5/en not_active IP Right Cessation
- 1979-02-06 DK DK049479A patent/DK158138C/en not_active IP Right Cessation
-
1983
- 1983-08-25 HK HK302/83A patent/HK30283A/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CH651210A5 (en) | 1985-09-13 |
IT1116524B (en) | 1986-02-10 |
FR2416015B1 (en) | 1983-06-17 |
HK30283A (en) | 1983-09-02 |
SE7900798L (en) | 1979-08-07 |
DK158138B (en) | 1990-04-02 |
IT7947888A0 (en) | 1979-02-05 |
NL7900766A (en) | 1979-08-08 |
DK158138C (en) | 1990-08-27 |
FR2416015A1 (en) | 1979-08-31 |
JPS54113425A (en) | 1979-09-05 |
JPH0160455B2 (en) | 1989-12-22 |
DE2904044A1 (en) | 1979-08-30 |
GB2013691B (en) | 1982-08-18 |
DE2904044C2 (en) | 1986-02-06 |
GB2013691A (en) | 1979-08-15 |
DK49479A (en) | 1979-08-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4732757A (en) | Prevention and treatment of rheumatoid arthritis | |
SE448344B (en) | ANTIBODY FOR TREATMENT OF REUMATOID ARTHRIT AND SETTING TO MAKE IT | |
Liebhaber et al. | Alterations of lymphocytes and of antibody content of human milk after processing | |
US4324782A (en) | Dental caries inhibiting product of immunized cow's milk having antibodies specific to killed Streptococcus mutans cells | |
US20090258121A1 (en) | Method of producing nutritional products from human milk tissue and compositions thereof | |
Gabriel Michael et al. | The antimicrobial activity of human colostral antibody in the newborn | |
KR20000048855A (en) | Oral administration of chicken yolk antibodies to treat disease | |
Tawfeek et al. | Efficacy of an infant formula containing anti-Escherichia coli colostral antibodies from hyperimmunized cows in preventing diarrhea in infants and children: a field trial | |
Hammon | Staphylococcus enterotoxin: an improved cat test, chemical and immunological studies | |
JPS6160618A (en) | Vaccine for treating urinary tract infection | |
USRE33565E (en) | Prevention and treatment of rheumatioid arthritis | |
Moodley et al. | The operculum syndrome: an unusual complication of tuberculous meningitis | |
Henderson et al. | Clinical problems: Subclinical Brucella infection in man | |
Alexander | Treatment of bacterial meningitis | |
Newby et al. | The immune response of the pig following oral immunisation with soluble protein | |
Söderström et al. | Another Swedish family with complete properdin deficiency: association with fulminant meningococcal disease in one male family member | |
Dawson et al. | Immunological and Blood Products: Pharmaceutical Monographs | |
Nickerson et al. | Studies of immune and normal opsonins during experimental staphylococcal infection in rabbits | |
ROSEBURY | The Aerobic Non-hemolytic Streptococci: a Critical Review of their Characteristics and Pathogenicity with Special Reference to the Human Mouth and to Subacute Bacterial Endocarditis | |
Jones et al. | UDDER INFECTION WITH STREPTOCOCCI OF THE SCARLET FEVER TYPE: I. Spontaneous and Experimental Udder Infection. | |
Nathanson et al. | Cyclophosphamide-induced immunosuppression demonstrated in Pasteurella multocida-vaccinated chickens | |
Kohler et al. | Studies of Escherichia Coli in Gnotobiotic Pigs: II. The Immune Response | |
Eyre et al. | PROPHYLACTIC VACCINATIONS: AGAINST CATARRHAL AFFECTIONS OF THE RESPIRATORY TRACT | |
Cooper et al. | Immune responses of rats to live Vibrio cholerae: antibodies in serum and intestinal secretions | |
Cullor | Safety and efficacy of gram-negative bacterial vaccines |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
NAL | Patent in force |
Ref document number: 7900798-5 Format of ref document f/p: F |
|
NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 7900798-5 Format of ref document f/p: F |