SA515370129B1 - طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك - Google Patents
طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك Download PDFInfo
- Publication number
- SA515370129B1 SA515370129B1 SA515370129A SA515370129A SA515370129B1 SA 515370129 B1 SA515370129 B1 SA 515370129B1 SA 515370129 A SA515370129 A SA 515370129A SA 515370129 A SA515370129 A SA 515370129A SA 515370129 B1 SA515370129 B1 SA 515370129B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- niemann
- biomarker
- subject
- pick disease
- sample
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 434
- 208000014060 Niemann-Pick disease Diseases 0.000 title claims abstract description 410
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims description 93
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 claims abstract description 517
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 256
- OKTWQKXBJUBAKS-WQADZSDSSA-N 2-[[(e,2r,3s)-2-amino-3-hydroxyoctadec-4-enoxy]-hydroxyphosphoryl]oxyethyl-trimethylazanium;chloride Chemical group [Cl-].CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@H](O)[C@H](N)COP(O)(=O)OCC[N+](C)(C)C OKTWQKXBJUBAKS-WQADZSDSSA-N 0.000 claims description 119
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 93
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 56
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 45
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 claims description 33
- 208000035343 Infantile neurovisceral acid sphingomyelinase deficiency Diseases 0.000 claims description 32
- 201000000794 Niemann-Pick disease type A Diseases 0.000 claims description 32
- 208000007824 Type A Niemann-Pick Disease Diseases 0.000 claims description 32
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 claims description 22
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 11
- 208000007930 Type C Niemann-Pick Disease Diseases 0.000 claims description 9
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 9
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 9
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 9
- 208000010577 Niemann-Pick disease type C Diseases 0.000 claims description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 8
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 8
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 7
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims description 7
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 6
- 208000008291 Type B Niemann-Pick Disease Diseases 0.000 claims description 5
- 208000035374 Chronic visceral acid sphingomyelinase deficiency Diseases 0.000 claims description 4
- 201000000791 Niemann-Pick disease type B Diseases 0.000 claims description 4
- 230000007547 defect Effects 0.000 claims description 4
- 238000000816 matrix-assisted laser desorption--ionisation Methods 0.000 claims description 4
- 238000000018 DNA microarray Methods 0.000 claims description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims 4
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 235000017399 Caesalpinia tinctoria Nutrition 0.000 claims 2
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 claims 2
- 241000388430 Tara Species 0.000 claims 2
- HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N nifedipine Chemical compound COC(=O)C1=C(C)NC(C)=C(C(=O)OC)C1C1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 238000006748 scratching Methods 0.000 claims 2
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 claims 2
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical group O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 claims 1
- 241001093575 Alma Species 0.000 claims 1
- 241000252073 Anguilliformes Species 0.000 claims 1
- 241000616862 Belliella Species 0.000 claims 1
- 241000534000 Berula erecta Species 0.000 claims 1
- 102100037186 Cytochrome b-245 chaperone 1 Human genes 0.000 claims 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims 1
- 241001505295 Eros Species 0.000 claims 1
- 240000006890 Erythroxylum coca Species 0.000 claims 1
- 241000277301 Esociformes Species 0.000 claims 1
- 241000989913 Gunnera petaloidea Species 0.000 claims 1
- 101150029234 Hes5 gene Proteins 0.000 claims 1
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 claims 1
- 241001580017 Jana Species 0.000 claims 1
- 241000211815 Livia Species 0.000 claims 1
- 244000237986 Melia azadirachta Species 0.000 claims 1
- 235000013500 Melia azadirachta Nutrition 0.000 claims 1
- 235000006679 Mentha X verticillata Nutrition 0.000 claims 1
- 235000002899 Mentha suaveolens Nutrition 0.000 claims 1
- 235000001636 Mentha x rotundifolia Nutrition 0.000 claims 1
- 101000867030 Myxine glutinosa Homeobox protein engrailed-like B Proteins 0.000 claims 1
- 101000800755 Naja oxiana Alpha-elapitoxin-Nno2a Proteins 0.000 claims 1
- 241001325209 Nama Species 0.000 claims 1
- 101100109871 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) aro-8 gene Proteins 0.000 claims 1
- 240000002390 Pandanus odoratissimus Species 0.000 claims 1
- 235000005311 Pandanus odoratissimus Nutrition 0.000 claims 1
- 101150107341 RERE gene Proteins 0.000 claims 1
- 241000269435 Rana <genus> Species 0.000 claims 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 claims 1
- 235000008957 cocaer Nutrition 0.000 claims 1
- ZPUCINDJVBIVPJ-LJISPDSOSA-N cocaine Chemical compound O([C@H]1C[C@@H]2CC[C@@H](N2C)[C@H]1C(=O)OC)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZPUCINDJVBIVPJ-LJISPDSOSA-N 0.000 claims 1
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 claims 1
- 101150064521 cybC1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 238000005430 electron energy loss spectroscopy Methods 0.000 claims 1
- 108010049074 hemoglobin B Proteins 0.000 claims 1
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 claims 1
- 238000000291 inelastic electron tunnelling spectroscopy Methods 0.000 claims 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims 1
- 239000005020 polyethylene terephthalate Substances 0.000 claims 1
- 229920000139 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 claims 1
- 239000011435 rock Substances 0.000 claims 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims 1
- 108091007551 scavenger receptor class L Proteins 0.000 claims 1
- 238000004416 surface enhanced Raman spectroscopy Methods 0.000 claims 1
- 239000011800 void material Substances 0.000 claims 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 307
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 150
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 120
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 65
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 59
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 54
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 50
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 43
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 39
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 39
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 38
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 30
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 29
- 210000005155 neural progenitor cell Anatomy 0.000 description 29
- 208000002454 Nasopharyngeal Carcinoma Diseases 0.000 description 27
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 26
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 25
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 25
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 24
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 24
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 24
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 21
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 20
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 18
- 201000000785 Niemann-Pick disease type C2 Diseases 0.000 description 17
- 101001109579 Homo sapiens NPC intracellular cholesterol transporter 2 Proteins 0.000 description 16
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 16
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 15
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 15
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 15
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 15
- 208000015872 Gaucher disease Diseases 0.000 description 13
- 102100022737 NPC intracellular cholesterol transporter 2 Human genes 0.000 description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 201000011240 Frontotemporal dementia Diseases 0.000 description 12
- 208000000609 Pick Disease of the Brain Diseases 0.000 description 12
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 12
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 12
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 12
- 208000024571 Pick disease Diseases 0.000 description 11
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 11
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 11
- 230000006870 function Effects 0.000 description 11
- 201000000788 Niemann-Pick disease type C1 Diseases 0.000 description 10
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 10
- 238000002641 enzyme replacement therapy Methods 0.000 description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 9
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 9
- 101001124388 Homo sapiens NPC intracellular cholesterol transporter 1 Proteins 0.000 description 8
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 description 8
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 208000015439 Lysosomal storage disease Diseases 0.000 description 7
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 7
- 210000001638 cerebellum Anatomy 0.000 description 7
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- FGUUSXIOTUKUDN-IBGZPJMESA-N C1(=CC=CC=C1)N1C2=C(NC([C@H](C1)NC=1OC(=NN=1)C1=CC=CC=C1)=O)C=CC=C2 Chemical compound C1(=CC=CC=C1)N1C2=C(NC([C@H](C1)NC=1OC(=NN=1)C1=CC=CC=C1)=O)C=CC=C2 FGUUSXIOTUKUDN-IBGZPJMESA-N 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102100029565 NPC intracellular cholesterol transporter 1 Human genes 0.000 description 6
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 6
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 6
- WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N sphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@@H](N)CO WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N 0.000 description 6
- 101000785978 Homo sapiens Sphingomyelin phosphodiesterase Proteins 0.000 description 5
- 102100026263 Sphingomyelin phosphodiesterase Human genes 0.000 description 5
- 206010041660 Splenomegaly Diseases 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 150000001783 ceramides Chemical class 0.000 description 5
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 5
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 5
- 238000000589 high-performance liquid chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 5
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 5
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- GNFTZDOKVXKIBK-UHFFFAOYSA-N 3-(2-methoxyethoxy)benzohydrazide Chemical compound COCCOC1=CC=CC(C(=O)NN)=C1 GNFTZDOKVXKIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 4
- 206010019842 Hepatomegaly Diseases 0.000 description 4
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 4
- 239000010836 blood and blood product Substances 0.000 description 4
- 229940125691 blood product Drugs 0.000 description 4
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000306 component Substances 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 4
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 238000002552 multiple reaction monitoring Methods 0.000 description 4
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 4
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 4
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 4
- WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N (-)-D-erythro-Sphingosine Natural products CCCCCCCCCCCCCC=CC(O)C(N)CO WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N C16 ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N 0.000 description 3
- 101100377506 Drosophila melanogaster 14-3-3zeta gene Proteins 0.000 description 3
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 3
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 3
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N N-acetylsphinganine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@H](CO)NC(C)=O CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N 0.000 description 3
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 description 3
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 description 3
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 description 3
- -1 THAP ions Chemical class 0.000 description 3
- HATRDXDCPOXQJX-UHFFFAOYSA-N Thapsigargin Natural products CCCCCCCC(=O)OC1C(OC(O)C(=C/C)C)C(=C2C3OC(=O)C(C)(O)C3(O)C(CC(C)(OC(=O)C)C12)OC(=O)CCC)C HATRDXDCPOXQJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(CO)C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000001549 ceramide group Chemical group 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 3
- 239000012045 crude solution Substances 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 150000002305 glucosylceramides Chemical class 0.000 description 3
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 3
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UQRORFVVSGFNRO-UTINFBMNSA-N miglustat Chemical compound CCCCN1C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1CO UQRORFVVSGFNRO-UTINFBMNSA-N 0.000 description 3
- VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N newbouldiamide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)C(O)C(CO)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 3
- 208000021090 palsy Diseases 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- 238000000672 surface-enhanced laser desorption--ionisation Methods 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- XLEYFDVVXLMULC-UHFFFAOYSA-N 2',4',6'-trihydroxyacetophenone Chemical compound CC(=O)C1=C(O)C=C(O)C=C1O XLEYFDVVXLMULC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HOMYIYLRRDTKAA-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-N-[3-hydroxy-1-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoctadeca-4,8-dien-2-yl]hexadecanamide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(C(O)C=CCCC=CCCCCCCCCC)COC1OC(CO)C(O)C(O)C1O HOMYIYLRRDTKAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010008025 Cerebellar ataxia Diseases 0.000 description 2
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 2
- 206010011878 Deafness Diseases 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000024720 Fabry Disease Diseases 0.000 description 2
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 2
- 208000004547 Hallucinations Diseases 0.000 description 2
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 2
- 208000024556 Mendelian disease Diseases 0.000 description 2
- 201000011442 Metachromatic leukodystrophy Diseases 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000010346 Sphingolipidoses Diseases 0.000 description 2
- 201000001307 Sphingolipidosis Diseases 0.000 description 2
- 108010061312 Sphingomyelin Phosphodiesterase Proteins 0.000 description 2
- 208000010513 Stupor Diseases 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 2
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 239000012503 blood component Substances 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000005094 computer simulation Methods 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 2
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 238000012252 genetic analysis Methods 0.000 description 2
- 208000016361 genetic disease Diseases 0.000 description 2
- 150000002339 glycosphingolipids Chemical class 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000016354 hearing loss disease Diseases 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 208000024714 major depressive disease Diseases 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001512 miglustat Drugs 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 208000022018 mucopolysaccharidosis type 2 Diseases 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 2
- YHHSONZFOIEMCP-UHFFFAOYSA-O phosphocholine Chemical compound C[N+](C)(C)CCOP(O)(O)=O YHHSONZFOIEMCP-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 150000003019 phosphosphingolipids Chemical class 0.000 description 2
- ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N phthalaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1C=O ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 150000003141 primary amines Chemical group 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 235000012045 salad Nutrition 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- XXUZMUXGUINRJY-AVRRXFSTSA-N (7r,9z,29z,32r)-7,19,20,32-tetrahydroxy-19-(hydroxymethyl)-20-[(z,12r)-12-hydroxyoctadec-9-enoyl]octatriaconta-9,29-diene-18,21-dione Chemical compound CCCCCC[C@@H](O)C\C=C/CCCCCCCC(=O)C(O)(CO)C(O)(C(=O)CCCCCCC\C=C/C[C@H](O)CCCCCC)C(=O)CCCCCCC\C=C/C[C@H](O)CCCCCC XXUZMUXGUINRJY-AVRRXFSTSA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- SHXWCVYOXRDMCX-UHFFFAOYSA-N 3,4-methylenedioxymethamphetamine Chemical compound CNC(C)CC1=CC=C2OCOC2=C1 SHXWCVYOXRDMCX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150117081 51 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150012579 ADSL gene Proteins 0.000 description 1
- 102100020775 Adenylosuccinate lyase Human genes 0.000 description 1
- 108700040193 Adenylosuccinate lyases Proteins 0.000 description 1
- 240000000662 Anethum graveolens Species 0.000 description 1
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 1
- 102100021257 Beta-secretase 1 Human genes 0.000 description 1
- 208000020925 Bipolar disease Diseases 0.000 description 1
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241001432959 Chernes Species 0.000 description 1
- 102000012286 Chitinases Human genes 0.000 description 1
- 108010022172 Chitinases Proteins 0.000 description 1
- 241000223782 Ciliophora Species 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000019505 Deglutition disease Diseases 0.000 description 1
- 206010012239 Delusion Diseases 0.000 description 1
- 206010012559 Developmental delay Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 208000014094 Dystonic disease Diseases 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000020322 Gaucher disease type I Diseases 0.000 description 1
- 208000003078 Generalized Epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 208000010055 Globoid Cell Leukodystrophy Diseases 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002268 Hexosaminidases Human genes 0.000 description 1
- 108010000540 Hexosaminidases Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000894895 Homo sapiens Beta-secretase 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010021118 Hypotonia Diseases 0.000 description 1
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 1
- 208000028226 Krabbe disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283986 Lepus Species 0.000 description 1
- 208000010557 Lipid storage disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000353097 Molva molva Species 0.000 description 1
- 208000016285 Movement disease Diseases 0.000 description 1
- 101100079847 Mus musculus Neu1 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000007379 Muscle Hypotonia Diseases 0.000 description 1
- 206010028403 Mutism Diseases 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000008457 Neurologic Manifestations Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 206010029306 Neurological signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000026554 Niemann-Pick disease type E Diseases 0.000 description 1
- SUHOOTKUPISOBE-UHFFFAOYSA-N O-phosphoethanolamine Chemical compound NCCOP(O)(O)=O SUHOOTKUPISOBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037158 Partial Epilepsies Diseases 0.000 description 1
- 206010061334 Partial seizures Diseases 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 208000028017 Psychotic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010037423 Pulmonary oedema Diseases 0.000 description 1
- 235000012377 Salvia columbariae var. columbariae Nutrition 0.000 description 1
- 240000005481 Salvia hispanica Species 0.000 description 1
- 235000001498 Salvia hispanica Nutrition 0.000 description 1
- 101150107869 Sarg gene Proteins 0.000 description 1
- 102000011971 Sphingomyelin Phosphodiesterase Human genes 0.000 description 1
- 206010048327 Supranuclear palsy Diseases 0.000 description 1
- 102000007591 Tartrate-Resistant Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108010032050 Tartrate-Resistant Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 102000010126 acid sphingomyelin phosphodiesterase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 208000036878 aneuploidy Diseases 0.000 description 1
- 231100001075 aneuploidy Toxicity 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000012805 animal sample Substances 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000025341 autosomal recessive disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000001364 causal effect Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000003892 ceramide glucosyltransferase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 235000014167 chia Nutrition 0.000 description 1
- 150000001840 cholesterol esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000011208 chromatographic data Methods 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 235000019506 cigar Nutrition 0.000 description 1
- 230000001112 coagulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000009223 counseling Methods 0.000 description 1
- 229940109262 curcumin Drugs 0.000 description 1
- 235000012754 curcumin Nutrition 0.000 description 1
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 description 1
- 238000013211 curve analysis Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000020176 deacylation Effects 0.000 description 1
- 238000005947 deacylation reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000895 deafness Toxicity 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 231100000868 delusion Toxicity 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N diferuloylmethane Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C=CC(=O)CC(=O)C=CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 208000010118 dystonia Diseases 0.000 description 1
- 230000005584 early death Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- OCLXJTCGWSSVOE-UHFFFAOYSA-N ethanol etoh Chemical compound CCO.CCO OCLXJTCGWSSVOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000004992 fission Effects 0.000 description 1
- 229960000289 fluticasone propionate Drugs 0.000 description 1
- 201000007186 focal epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012520 frozen sample Substances 0.000 description 1
- 230000009760 functional impairment Effects 0.000 description 1
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229940125921 glucosylceramide synthase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 231100000888 hearing loss Toxicity 0.000 description 1
- 230000010370 hearing loss Effects 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 206010019847 hepatosplenomegaly Diseases 0.000 description 1
- VKYKSIONXSXAKP-UHFFFAOYSA-N hexamethylenetetramine Chemical compound C1N(C2)CN3CN1CN2C3 VKYKSIONXSXAKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002962 histologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 201000001993 idiopathic generalized epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 208000016245 inborn errors of metabolism Diseases 0.000 description 1
- 208000015978 inherited metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000013190 lipid storage Effects 0.000 description 1
- 230000004130 lipolysis Effects 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 1
- 208000014416 lysosomal lipid storage disease Diseases 0.000 description 1
- COTNUBDHGSIOTA-UHFFFAOYSA-N meoh methanol Chemical compound OC.OC COTNUBDHGSIOTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 1
- 208000004141 microcephaly Diseases 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 description 1
- 201000002273 mucopolysaccharidosis II Diseases 0.000 description 1
- 210000003007 myelin sheath Anatomy 0.000 description 1
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 101150107867 npc-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 201000002663 oligoasthenoteratozoospermia Diseases 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003950 pathogenic mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 208000005333 pulmonary edema Diseases 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000000197 pyrolysis Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 235000008001 rakum palm Nutrition 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000001711 saccadic effect Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 description 1
- JLVSPVFPBBFMBE-HXSWCURESA-N sphingosine-1-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@@H](N)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C JLVSPVFPBBFMBE-HXSWCURESA-N 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 238000013179 statistical model Methods 0.000 description 1
- 238000000528 statistical test Methods 0.000 description 1
- 238000011476 stem cell transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 230000009747 swallowing Effects 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000032895 transmembrane transport Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 210000003934 vacuole Anatomy 0.000 description 1
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 1
- 229940099072 zavesca Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/92—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving lipids, e.g. cholesterol, lipoproteins, or their receptors
-
- H—ELECTRICITY
- H01—ELECTRIC ELEMENTS
- H01J—ELECTRIC DISCHARGE TUBES OR DISCHARGE LAMPS
- H01J49/00—Particle spectrometers or separator tubes
- H01J49/0027—Methods for using particle spectrometers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2405/00—Assays, e.g. immunoassays or enzyme assays, involving lipids
- G01N2405/04—Phospholipids, i.e. phosphoglycerides
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2405/00—Assays, e.g. immunoassays or enzyme assays, involving lipids
- G01N2405/08—Sphingolipids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/04—Endocrine or metabolic disorders
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
يتعلق الاختراع الحالي بطريقة لتشخيص مرض Niemann–Pick في خاضع تشتمل على خطوة أ)، حيث الخطوة أ) تشتمل على الكشف عن مرقم حيوي biomarker في عينة من خاضع، حيث المرقم الحيوي هو المركب 509. شكل 7.
Description
طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك Method for the diagnosis of niemann—pick disease الوصف الكامل خلفية الاختراع يتعلق الاختراع الحالي بطريقة لتشخيص مرض نيمان بيك Niemann—Pick في خاضع؛ وطريقة لتشخيص مرض نيمان بيك ؛ مرض نيمان بيك من النوع A و8 أو مرض نيمان بيك من النوع © في خاضع؛ وطريقة لتحديد مسار مرض نيمان بيك في خاضع؛ وطريقة لتحديد فاعلية مركب لعلاج مرض glad بيك ؛ واستخدام تحليل قياس طيف الكتلة للكشف عن مرقم حيوي biomarker واستخدام مرقم حيوي لتشخيص مرض نيمان بيك ؛ واستخدام نسبة مستوى مرقم حيوي موجود في عينة من الخاضع بمستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل موجود في عينة من الخاضع للاستخدام في طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك ؛ وطاقم لتحديد وجود مرقم حيوي في عينة من 0 أمراض تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة )؛ يشار إليها في الوثيقة أيضًا على أنها اضطرابات تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) «(LSDs) lysosomal storage disorders هى مجموعة من الاضطرابات الأيضية النادرة الموروثة التي تنتج من عيوب في وظيفة الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة). LSDs تنتج عندما عضيات معينة فى خلايا الجسم - الجسيم الحال- تتوقف عن العمل. بعض أمراض تخزين الجسيمات المحللة ) تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) الأكثر بروزًا هي مرض جوشر Gaucher ومرض فابري Fabry LSDs يسببها خلل بالجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة )عادة كنتيجة ل نقص إنزيم واحد ضروري لأيض canal البروتينات السكرية أو ما يسمى بعديدات WS المخاطية. على نحو فردي؛ 15005 تحدث بشكل متكرر يعادل حوالي 1: 10000 إلى 1: 0 250000؛ على الرغم من ذلك؛ كمجموعة يكون الحدوث بمعدل ss 1: 5000. معظم هذه
الاضطرابات هي صبغيات جسدية موروثة بشكل رجعي؛ على الرغم من ذلك قليل منها موروثة ومرتبطة Jie «Xo مرض فابري ومتلازمة (MPS II) Hunter مثل الأمراض الوراثية الأخرى؛ يرث الأفراد نمطيًا أمراض تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) من ذويهم. على الرغم من أن كل اضطراب ينتج من طفرات جينية مختلفة تتم ترجمتها بنقص في النشاط الإنزيمي؛ تشترك جميعها في خصائص كيميائية حيوية مشتركة - Lis nearly جميع الاضطرابات بالجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) من التراكم غير الطبيعي للمواد داخل الجسيم الحال. تصيب أمراض تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) أغلب الأطفال وغالباً ما يتوفى المرضى في سن صغير وسن غير متوقع؛ ويتوفى العديد في خلال أشهر قليلة أو 0 بعد سنوات من الولادة. cigars الأطفال الآخرين من هذا المرض بعد سنين من المعاناة من أعراض متعددة لمرض محدد . تختلف أعراض مرض تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة) lysosomal storage disease ؛ بناءً على اضطراب محدد ومتغيرات أخرى مثل العمر عند بدء المرضء ويمكن أن يكون من متوسط إلى حاد. وبمكن أن تتضمن معوقات النمو developmental delay 5 ¢ اضطرابات الحركة movement disorders ؛ النويات seizures ؛ العتة dementia ؛ الصمم 5 و/ أو العمى 51000655. يكون المرضى الذين يعانين من داء الاختزان في الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) مصابين بتضخم الكبد enlarged livers (تضخم الكبد (hepatomegaly وتضخم الطحال enlarged spleens (تضخم الطحال «(splenomegaly مشاكل الرئة والقلب pulmonary and cardiac problems » والعظام 0 000688 التي تتطور بشكل غير طبيعي. لا توجد علاجات مسببة لأمراض تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة) وتكون المعالجة Bale عرضية»؛ رغم استخدام زراعة نخاع العظم والعلاج باستخدام الإنزيم enzyme (ERT) replacement therapy لبعض الأعراض بنجاح. بالإضافة إلى ذلك» يتم إجراء زراعة الدم بالحبل السري في Shall المتخصصة لعدة أمراض. بالإضافة إلى ذلك؛ يتم حالياً تقييم علاج
تقليل الركيزة (SRT) substrate reduction therapy طريقة مستخدمة لتقليل تراكم sale الاختزان» لبعض الأمراض. علاوة على ذلك؛ يكون العلاج المرافق؛ عبارة عن تقنية مستخدمة لتثبيت الإنزيمات المعيبة المنتجة بواسطة المرضى؛ وبتم فحصها Lad يتعلق بأمراض محددة. يُشكل علاج الجين AT gia من معالجة هذه الأمراض. مرض نيمان بيك هو مرض من مجموعة فرعية من (LEDS تسمى شحامات سفينغولية أو اضطرابات
تخزين الشحوم حيث كميات ضارة من المواد الدهنية؛ أو الشحوم؛ تتراكم في الطحالء الكبد؛ الرئتين» نخاع العظام؛ والدماغ. مرض نيمان بيك يورث بنمط رجعي صبغي جسدي؛ مما يعني أن كلتا النسختين؛ أو مركبات أليل؛ من الجين يجب أن تحدث بها طفرة (تغييره بحيث يتم إضعاف وظيفتها؛ على العكس من تعدد
0 الشكل؛ حيث يتم تغيير Adige النيوكليوتيد لكن لا يسبب أي توقف وظيفي) للشخص المتأثر بالاضطراب. (Ble ذوي الطفل الذي يعاني من اضطراب رجعي في الصبغيات الجسدية يكونوا غير مرضى ولكنهم يحملون نسخة من الجين المتغير. في 1961؛ تم تقديم التصنيف التالي: مرض نيمان بيك من النوع tA رضيعي كلاسيكي؛
5 مرض نيمان بيك من النوع 8: أحشائي؛ مرض نيمان بيك ؛ من النوع ©: دون الحاد/في الشباب؛ و مرض نيمان بيك من النوع Nova Scotian :D OV) مع وجود فهم أفضل لعلم gl) يمكن تصنيف الحالة كما يلي: مرض نيمان بيك ¢ مرتبط ب51/001؛ والذي يتضمن الأنواع A و8؛ و
0 مرض lass بيك ؛ من النوع ©؛ الذي يتضمن الأنواع 1© C25 ومرض نيمان بيك ؛ من النوع D الذي يسببه نفس الجين على أنه النوع Cl
الطفرات في جين 51/001 تسبب مرض نيمان بيك من الأنواع Bs A والطفرات في NPC1 و0002 تسبب مرض نيمان بيك ؛ من النوع ©؛ المشار إليه أيضًا في الوثيقة الحالية على نحو مفضل على أنه NPC gil 0 تم فصله بالأصل عن من النوع © لتحديد مجموعة من المرضى الذين يعانون بدلاً من ذلك من اضطرابات متطابقة تشاركوا في سلالة Nova Scotian واحدة. المرضى في هذه المجموعة معروف أنهم يتشاركون طفرة معينة في جين في جين 1 (NPC و1000 يستخدم الآن لاحتضان كلتا المجموعتين. في بديل رضيعي كلاسيكي من النوع A تسبب طفرة مغلطة نقص تام في سفينغومياليناز sphingomyelinase . سفينغوميالين Sphingomyelin هو مكون من غشاء الخلية يتضمن 0 الغشاء العضوي ولذا يحجب نقص الإنزيم تحلل الشحم؛ مما يتسبب في تراكم سفينغوميالين في الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) في ذريات الخلايا الملتهمة أحادية الخلايا بالخلايا الملتهمة الكبيرة. الخلايا المصابة تصبح كبيرة؛ أحيانًا وصولاً إلى 90 ميكرو متر من حيث القطر» بشكل ثانوي نسبة إلى انتفاخ الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) بسفينغوميالين والكوليسترول ale cholesterol الأنسجة يوضح الخلايا الملتهمة الكبيرة المثقلة 5 بالشحم في نخاع العظام؛ كما “الخلايا النسيجية 868-106" في ple الأمراض. يتم تكوين العديد من الفجوات الصغيرة ذات حجم موحد (Lad مما يضفي مظهر رغوي على السيتويلازم .cytoplasm نيمان بيك من النوع C هو مرض تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة) المرتبط بالطفرات في NPCT والجين 0025ل2. نيمان بيك من النوع © يصيب ما يقدر بعدد 1: 0 شخص. تقريبًا 9650 من الحالات تحدث قبل عمر 10 سنوات؛ لكن الأعراض يمكن أن 0 تظهر أولاً في العقد السادس. إلى يومنا هذا يمكن فقط sha) التشخيص القاطع لمرض نيمان بيك من النوع © بواسطة اختبار الأرومات الليفية fibroblasts المزروعة لأسترة الكوليسترول cholesterol esterification وتلطيخ الكوليسترول unesterified cholesterol الذي لم يعالج بالإستر بغفيليبين 10م71. الأرومات الليفية fibroblasts يتم إنمائها من خزعة صغيرة من الجلد مأخوذة من مريض مشكوك
بإصابته بمرض نيمان بيك من النوع © جنبًا إلى جنب مع التوافق الوراثي. وحيث أن العديد من الطفرات المختلفة يمكن أن تكون السبب في مرض تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) معينة يتم استخدام تسلسل الجين genes 001 أو الجين NPC2s في مرض نيمان بيك من النوع © لتأكيد تشخيص.
رغم وجود محاولات لاستخدام طرق التشخيص على أساس الحالات غير الطبيعية البيولوجية الكيميائية ذات الصلة؛ فهناك dala لم يتم استيفائها لاختبار بيولوجي كيميائي بسيط يظهر كشف عالي النوعية ومرتفع الحساسية لمرض تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) في مرحلة مبكرة؛ مراقبة تطور المرض والمراقبة المبكرة لفاعلية العلاجات المستخدمة. بالتالي؛ تعد عملية تحديد المرقمات الحيوية للكشف والتشخيص المبكر لمرض نيمان بيك ؛ مرض
las 0 بيك من النوع AB و/ أو مرض نيمان بيك من النوع© بتحسين الناتج الإكلينيكي للمرضى. وتكون هامة على وجه الخصوص للمرضى الذين يعانين من أعراض غامضة أو لا يعانين من أمراض أو للكشف عن لم يستجيبوا للعلاج. يجب أن يكون المرقم الحيوي ذو جدوى تقنية في عدة جوانب؛ ويكون من السهل قياسه؛ كما يكون نافعاً؛ ويكون متوافق وذو سعة نسبية بين العينات المصابة وعينات المقارنة؛ أو العينات المعالجة
5 فوضغير المعالجة؛ والعينات المستقرة؛ وتتسم بالدقة من الناحية الإكلينيكية؛ وقابلة للتصنيف باعتبارها عامل توقع وتشخيصي بدرجة كبيرة. في يومنا الحالي» لا يوجد أي مرقم حيوي لتشخيص مرض نيمان بيك ؛ بشكل أكثر تحديدًا للقيام بشخص تفاضلي بتشخيص مرض نيمان بيك من النوع A و8؛ ومرض نيمان بيك من النوع .
في مرض «Gaucher's يتضح أن «AT LSD وبعض إنزيمات الجسيم الحال؛ المستخدمة
0 كمرقمات حيوية مباشرة؛ والتي تتضمن حمض فوسفاتاز مقاوم للطرطرات؛ هكسوسامينيداز؛ و كيتيناز البشري؛ تكون عبارة عن كيتوترايوسيداز مرتفعة. بالتالي توجد محاولات لمراقبة الانخفاض في خلايا الاختزان في أنسجة بواسطة قياس المرقمات البديلة المذكورة Jie Gaucher LAY كيتوترايوسيداز 06 ىو 00118 ( )1994( 93 C.E.
Hollak et al., J.
Clin.
Invest. R.G.
Boot et al., Blood 103 (2004) 33-39 :1288-1292). و كذلك؛ بالإضافة إلى
المساوئ الأخرى في استخدام كيتوترايوسيداز كمرقم حيوي لمرض (Gaucher's يتراكم الإنزيم المذكور بصورة مستقلة عن الارتباط المباشر بمسبب مرض 5 "811006. علاوة على ذلك؛ يظهر ما يصل إلى 35 96 من الانتماءات العرقية المحددة نقص في ترميز الجين لكيتوترايوسيداز مما يؤدي إلى نشاط كيتوترايوسيداز المنخفض أو غير القابل للقياس الصناعي. تقييم استخدام جزيئات الاختزان الأولية كمرقم حيوي لتحديد جيلكوسيل سيراميد glucosyl 6 في بلازما مرضى مصابين بمرض Gaucher's والمقارنة بمستوى جيلكوسيل سيراميد في الأفراد الأصحاء Groener et al.
Biochim Biophys Acta. 2008 Jan-) Feb;1781(1-2):72-8. Epub 2007 Dec 5.; Plasma glucosylceramide and ceramide in type 1 Gaucher disease patients: correlations with disease (severity and response to therapeutic intervention.; Groener JE et al. 0 رغم ذلك» رغم زيادة جيلكوسيل سيراميد glucosyl ceramide الذي تم قياسه في الدراسة المذكورة في بلازما المرضى المذكورين؛ لا تكون الزيادة المذكورة في جيلكوسيل سيراميد بارزة بالتالي تكون نوعية وحساسية الطريقة منخفضة مما يوضح أن جيلكوسيل سيراميد لا يمكن استخدامه كمرقم حيوي لمرض .Gaucher’s 5 في 1989 أوضح sulfatide (galactosylsphingosine—-3—- 5.) Rosengren et al. O-sulfate) from metachromatic leukodystrophy and normal human brain, Rosengren B, Fredman P, Mansson JE, Svennerholm L.; J Neurochem. Apr;52(4):1035-41. 1989( أن داء اختزان الشحم لا يكون عبارة تقويض الشحوم السفينجولية الرئيسية فحسب ولكن يتأثر المركب الحال أيضاً. رغم ذلك» نتج عن الدراسة المذكورة أن المركبات 0 المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) لا تلعب دوراً رئيسياً في الآليات المسببة للمرض في داء اختزان الشحوم السفينجولي. بالتالي؛ يمكن أن يكون المركب الحال المذكور Ble عن مرقمات digs غير مناسبة لتشخيصداء اختزان الشحم السفينجولي Jie مرض وجوشر .Gaucher’s يكون من الضروري ملاحظة أنه حتى يومنا الحالي لم يتم استخدام أي مرقم حيوي مرتفع الحساسية 5 ومرتفع النوعية ولا يتوفر أي طرق لتشخيص مرض نيمان بيك ؛ على وجه التحديد تشخيص مرض
نيمان بيك من النوع By A مرض Glas بيك من النوع ©؛ وحامل مرض نيمان بيك من النوع C بالإضافة إلى الطرق المذكورة سابقاً التى تظهر حداً غير مرضاً للكشف؛ أو الحساسية و/ أو النوعية وبالتالي أثبتت عدم مناسبتها للاستخدام الإكلينيكي وهذه الطرق لا تسمح بتشخيص تفاضلي مختلف عن أنواع مرض Gla بيك ؛ die مرض نيمان بيك من النوع A و8؛ ومرض نيمان بيك من النوع
Cc 5 وفقًا لذلك؛ توجد حاجة لطرق تشخيص مرض نيمان بيك سريعة؛ وبسيطة؛ ويمكن الاعتماد عليها بصورة ضرورية؛ على وجه التحديد التشخيص التفاضلي لمرض نيمان بيك من النوع 8 By ومرض نيمان بيك من النوع © delay مرض نيمان بيك من النوع . في ضوء ما سبق؛ تتمثل مشكلة ١ لاختراع الحالي في توفير طرق لتشخيص مرض نيمان بيك ؛ على 0 وجه التحديد تشخيص مرض نيمان بيك من النوع By A ومرض نيمان بيك من النوع © وحامل مرض نيمان بيك من النوع . الوصف العام للاختراع من المشكلات الأخرى التي ينطوي عليها الاختراع الحالي توفير طريقة للتشخيص التفاضلي ل مجموعة أولى من مرض نيمان بيك تتكون من مرض نيمان بيك من النوع By A مجموعة ثانية من مرض نيمان بيك تتكون من مرض نيمان بيك من النوع © ومجموعة تالثة من مرض نيمان بيك تتكون من حامل مرض نيمان بيك من النوع . من المشكلات الأخرى كذلك التي ينطوي عليها الاختراع الحالي توفير الطريقة التي تسمح بتحديد إذا ما كان الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك من النوع © أو لا مرض نيمان بيك من النوع A و8 و/ أو من dala مرض نيمان بيك من النوع © أو إذا ما كان الخاضع يمكن أن يصاب بمرض Glas 20 بيك من النوع © أو لا مرض نيمان بيك من النوع A و8 و/ أو من حامل مرض نيمان بيك من النوع . من المشكلات الأخرى التي ينطوي عليها الاختراع الحالي توفير طريقة لتحديد مسار والتكهن بمرض نيمان بيك ؛ على وجه التحديد تشخيص مرض نيمان بيك من النوع A و8؛ ومرض نيمان بيك من النوع C وحامل مرض نيمان بيك من النوع .
من المشكلات الأخرى كذلك التي ينطوي عليها الاختراع الحالي توفير طريقة لتحديد بسرعة أكبر فاعلية علاج واحد على الأقل يتم تطبيقه على خاضع ظهر الاختبار ايجابيًا من حيث أنه يعاني من أو يمكن أن يصاب بمرض نيمان بيك ؛ على وجه التحديد مرض نيمان بيك من النوع 8 و8 أو مرض نيمان بيك من النوع © وحامل مرض نيمان بيك من النوع . من المشكلات الأخرى التي ينطوي عليها الاختراع الحالي توفير طريقة لتحديد فاعلية مركب لعلاج مرض نيمان بيك ؛ على dag التحديد مرض نيمان بيك من النوع A و8 و/ أو مرض نيمان بيك من النوع © وحامل مرض نيمان بيك من النوع . من المشكلات الأخرى التي ينطوي عليها الاختراع الحالي توفير مرقم حيوي يسمح بتشخيص نوعي وحساس لمرض نيمان بيك ؛ على وجه التحديد تشخيص نوعي وحساس لمرض نيمان بيك من النوع Bs A 0 ومرض نيمان بيك من النوع © وحامل مرض نيمان بيك من النوع . من المشكلات الأخرى كذلك التي ينطوي عليها الاختراع الحالي طاقم يشتمل على مركب يتفاعل مع مرقم حيوي نوعي وحساس لمرض نيمان بيك ؛ على dag التحديد لمرض نيمان بيك من النوع م و8 و/ أو مرض نيمان بيك من النوع © وحامل مرض نيمان بيك من النوع ©. هذه و other problems are solved بواسطة الخاضع matter of attached independent 5 عنصر الحماية5. Preferred النماذج may be taken من attached dependent عنصر الحماية5. عناصر الحماية هذه يتم ذكرها فيما يلي كنماذج. سوف يتم إدراك أن نماذج أخرى يمكن أن تنتج من الكشف الخاص بالمواصفة الحالية التي حتى الآن غير مقتصرة على النماذج التي تعد ذكر لعناصر الحماية.
خطوة 1 ¢ حيث الخطوة 1 تشتمل على ssl عن مرقم حيوي في de من الخاضع .
— 1 0 —
النموذج 2. الطريقة وفقًا للنموذج 1 حيث تشتمل الطريقة على
الخطوة ب) حيث الخطوة ب) تشتمل على تحديد مستوى المرقم الحيوي الموجود في العينة.
النموذج 3. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 أو 2؛ حيث مستوى المرقم الحيوي يدل على إذا ما كان
الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك أو لا أو إذا ما كان الخاضع يمكن أن يصاب بمرض نيمان
بيك أو لا.
تم علاجه من قبل من مرض نيمان بيك أو عينة من خاضع تم تشخيص إصابته بمرض نيمان بيك 0 الم يتم علاجه من قبل من مرض las بيك أو عينة من خاضع لم يتم تشخيص إصابته Uae
نيمان بيك .
النموذج 6. الطريقة Bg لأي من النماذج 1 إلى 5؛ حيث تشتمل الطريقة على
الخطوة ج)؛ Cus الخطوة ج) تشتمل على تطبيق» الحفاظ (pain ole رفع أو عدم تطبيق علاج
بناءً على إذا ما كان الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك أو يمكن أن يصاب بمرض نيمان بيك 5 النموذج 7. الطريقة Gg لأي من النماذج 1 إلى 6 حيث تشتمل الطريقة على
الخطوة د ( » حيث الخطوة د ( تشتمل على الكشف عن المرقم الحيوي في عينة من الخاضع بعد تطبيق
العلاج؛ الحفاظ عليه خفضه؛ رفعه أو عدم تطبيقه في الخطوة ج).
النموذج 8. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 7 حيث تشتمل الطريقة على
الخطوة »( « Cua الخطوة »( تشتمل على تحديد مستوى المرقم الحيوي فى العينة من الخاضع بعد 0 تطبيق العلاج؛ الحفاظ cle خفضه؛ dad) أو عدم تطبيقه في الخطوة ج).
النموذج 9. الطريقة وفقًا للنموذج 8؛ حيث تشتمل الطريقة على
— 1 1 —
الخطوة و)» حيث الخطوة و) تشتمل على تحديد إذا ما كان مستوى المرقم الحيوي المحدد في الخطوة
ب) أقل من مستوى المرقم الحيوي المحدد في الخطوة ه).
النتموذج 10. الطريقة Bg للنموذج 9 حيث تشتمل الطريقة على
الخطوة ز)؛ حيث الخطوة ز) تشتمل على تطبيق» الحفاظ min (lo رفع أو عدم تطبيق علاج dl 5 على الخطوة و).
النموذج 11. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 10( حيث المرقم الحيوي يتم اختياره من مجموعة
تشتمل على ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509.
النموذج 12. الطريقة Gg لأي من النماذج 1 إلى 11؛ حيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين
حر.
0 النموذج 13. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 11؛ حيث المرقم الحيوي هو المركب 509. النموذج 14. الطريقة Ug لأي من النماذج 1 إلى 13 حيث تشتمل الطريقة على الكشف عن مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل في 8 أو في العينة من الخاضع. واحد على الأقل في 8 أو في العينة من الخاضع.
النموذج 16. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 14 إلى 15؛ حيث مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل يتم اختياره من مجموعة تشتمل على ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509؛ وحيث مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل يختلف عن المرقم الحيوي. النموذج 17. الطريقة Gg لأي من النماذج 14 إلى 16؛ حيث المرقم الحيوي هو المركب 509 وحيث مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل هو ليسو سفينغوميالين 70ا109000/6م50-5لا حر .
0 النموذج 18. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 14 إلى 16؛ حيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حر وحيث مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل هو المركب 509.
— 2 1 — النموذج 19. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 18 حيث تشتمل الطريقة على تحديد مستوى ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509 في 8 أو في العينة. النموذج 20 الطريقة Gg لأي من النماذج 14 إلى 19« على نحو مفضل 17 to 19 حيث تشتمل الطريقة على الخطوة ح)؛ Cus الخطوة ح) تشتمل على تحديد نسبة مستوى المرقم الحيوي في 8 أو في العينة إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل في 8 أو في العينة. إضافي واحد على الأقل؛ على نحو مفضل كما هو محدد في الخطوة ح)؛ يدل على إذا ما كان الخاضع يعاني من مرض Glas بيك أو لا أو إذا ما كان الخاضع يمكن أن يصاب بمرض نيمان 0 بيك أو لا. النموذج 22. الطريقة Gg لأي من النماذج 1 إلى 21 حيث تشتمل الطريقة على الكشف عن ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509 في 8 أو في العينة. النموذج 23. الطريقة Wg لأي من النماذج 1 إلى 22؛ حيث يتم الكشف عن المرقم الحيوي و/ أو مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل بواسطة اختبار مناعي؛ تحليل قياس طيف الكتلة؛ صفيف رقائق 5 حيوية؛ أحماض نووية وظيفية و/ أو مشتق فلوري من المرقم الحيوي و/ أو مشتق فلوري من مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل. النتموذج 24. الطريقة وفقًا للنموذج 23؛ حيث يتم الكشف عن المرقم الحيوي بواسطة تحليل قياس طيف الكتلة. النموذج 25. الطريقة وفقًا للنموذج 24( حيث تحليل قياس طيف الكتلة يتم اختياره من مجموعة Jai 0 على TOF-TOF (MS/MS (MALDI-Q TOF (MALDI (SELDI ر-0-اقع .TOF النموذج 26. الطريقة وفقًا للنموذج 25( حيث يشتمل تحليل قياس طيف الكتلة على أو يستخدم MS/MS
— 3 1 — النموذج 27. الطريقة Wg لأي من النماذج 1 إلى 26 حيث تشتمل الطريقة على ترسيب البروتين و/ أو HPLC النموذج 28. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 27؛ حيث تشتمل الطريقة على ترسيب البروتين» MS/MS 5 HPLC النموذج 29. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 28؛ حيث الخاضع يكون بشر. النموذج 30. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 29 حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تشتمل على مرض نيمان بيك من النوع By A مرض نيمان بيك من النوع ©؛ وحامل مرض نيمان بيك من النوع . النموذج 31. الطريقة hy لأي من النماذج 1 إلى 30؛ حيث الخطوة (a تشتمل على الكشف عن 0 المرقم الحيوي في die تشتمل على تعريض العينة لخطوة ترسيب البروتين» ترسيب البروتين من العينة؛ توفير مادة طافية من العينة؛ تعريض المادة الطافية من العينة MS/MS 5 HPLC وتحديد مستوى المرقم الحيوي و/ أو مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل الموجود/ الموجودين في المادة الطافية من العينة. النموذج 32. طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع؛ حيث تشتمل الطريقة على الخطوات au 15 1( إضافة معيار داخلي إلى عينة من الخاضع؛ حيث يتم اختيار العينة من الخاضع من مجموعة تشتمل على البلازماء المصل والدم؛ Glas) (2 خلط العينة التي تحتوي على القياس الداخلى؛ 3( تعريض العينة لخطوة ترسيب البروتين؛ بموجبه يتم ترسيب البروتين من العينة ويتم توفير مادة 0 طافية أولى من العينة؛ 4) اختياريًا تعريض المادة الطافية الأولى من العينة أو جزءِ على الأقل منها إلى خطوة فصل أولى توفر مادة طافية ثانية؛ بموجبه على نحو مفضل خطوة الفصل (AY) هي خطوة طرد مركزي؛
— 4 1 — (V تعريض المادة الطافية الأولى و/ أو المادة الطافية الثانية؛ أو جزءِ على الأقل منهاء إلى خطوة فصل ثانية» حيث خطوة الفصل الثانية تشتمل على حقن gia على الأقل من المادة الطافية الأولى و/ أو جزءِ على الأقل من المادة الطاقية الثانية في نظام HPLC-MS/MS واستخدام عمود السائل الكروماتوجرافي dle الأداء High performance liquid chromatography (HPLC) له تدرج من ماء حمضي إلى أسيتو نيتريل acetonitrile /أسيتون Cua ¢ acetone عمود HPLC
هو على نحو مفضل عمود HPLC مختار من مجموعة تشتمل على عمود HPLC به C8 وعمود HPLC به «C18 وحيث خطوة الفصل الثانية توفر due منفصلة؛ (Vi تعربض العينة المنفصلة إلى (MS/MS حيث يشتمل MS/MS على تأيين بالرش الكهربي ورصد التفاعلات العديدة؛
0 وتشتمل على خطوة 1 ¢ حيث الخطوة 1 تشتمل على ssl عن مرقم حيوي في de من الخاضع؛ واختياريًا الخطوة ب ¢ حيث الخطوة ب تشتمل على تحديد مستوى المرقم الحيوي الموجود فى العينة؛ حيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حر؛ و
5 حيث الطريقة هي على نحو مفضل الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 31؛ النموذج 33. طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع؛ حيث تشتمل الطريقة على الخطوات التالية: 1) إضافة معيار داخلي إلى عينة من الخاضع؛ حيث يتم اختيار العينة من الخاضع من مجموعة تشتمل على البلازماء المصل والدم؛
0 2) اختياربًا خلط العينة التى تحتوي على القياس الداخلى؛ 3( تعريض العينة لخطوة ترسيب البروتين؛ بموجبه يتم ترسيب البروتين من العينة ويتم توفير مادة طافية أولى من العينة؛
— 1 5 —
4( اختياريًا تعريض المادة الطافية الأولى من العينة أو جزءِ على الأقل منها إلى خطوة فصل أولى
توفر مادة طافية ثانية؛ بموجبه على نحو مفضل خطوة الفصل الأولى هي خطوة طرد مركزي؛
5) تعريض المادة الطافية الأولى و/ أو المادة الطافية call) أو gia على الأقل منهاء إلى خطوة
فصل ثانية» حيث خطوة الفصل الثانية تشتمل على حقن gia على الأقل من المادة الطافية الأولى
و/ أو جزء على الأقل من المادة الطافية الثانية في نظام HPLC-MS/MS واستخدام عمود HPLC
له تدرج من ماء حمضي إلى أسيتو نيتريل/أسيتون؛ حيث عمود HPLC هو على نحو مفضل عمود
H PLC مختار من مجموعة تشتمل على عمود H PLC به 0 وعمود H PLC به 8 1 C ¢ وحيث
خطوة الفصل الثانية توفر due منفصلة؛
6( تعريض العينة المنفصلة إلى (MS/MS حيث يشتمل MS/MS على تأيين بالرش الكهربي ورصد التفاعلات العديدة؛
وت تشتمل على
خطوة 1 ¢ حيث الخطوة 1 تشتمل على ssl عن مرقم حيوي في de من الخاضع؛
واختياريًا
الخطوة ب ¢ حيث الخطوة ب تشتمل على تحديد مستوى المرقم الحيوي الموجود فى العينة؛ 5 حيث المرقم الحيوي هو المركب 509؛ و
حيث الطريقة هي على نحو مفضل الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 31.
النموذج 34. طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع؛ حيث تشتمل الطريقة على الخطوات
التالية:
1) إضافة معيار داخلي إلى عينة من الخاضع؛ حيث يتم اختيار العينة من الخاضع من مجموعة 0 تشتمل على البلازماء المصل والدم؛
2) اختياريًا خلط العينة al) تحتوي على القياس الداخلي؛
— 6 1 — 3( تعريض العينة لخطوة ترسيب البروتين؛ بموجبه يتم ترسيب البروتين من العينة ويتم توفير مادة طافية أولى من العينة؛ 4) اختياريًا تعريض المادة الطافية الأولى من العينة أو جزءِ على الأقل منها إلى خطوة فصل أولى توفر مادة طافية ثانية؛ بموجبه على نحو مفضل خطوة الفصل (AY) هي خطوة طرد مركزي؛ 5) تعريض المادة الطافية الأولى و/ أو المادة الطافية الثانية» أو gia على الأقل منهاء إلى خطوة فصل ثانية» حيث خطوة الفصل الثانية تشتمل على حقن gia على الأقل من المادة الطافية الأولى و/ أو جزء على الأقل من المادة الطافية الثانية في نظام HPLC-MS/MS واستخدام عمود HPLC له تدرج من ماء حمضي إلى أسيتو نيتريل/أسيتون؛ حيث عمود HPLC هو على نحو مفضل عمود H PLC مختار من مجموعة تشتمل على عمود H PLC به 0 وعمود H PLC به 8 1 C ¢ وحيث 0 خطوة الفصل الثانية توفر due منفصلة؛ 6( تعريض العينة المنفصلة إلى (MS/MS حيث يشتمل MS/MS على تأيين بالرش الكهربي ورصد التفاعلات العديدة؛ ود تشتمل على خطوة 1 ¢ Cua الخطوة 1 تشتمل على ssl عن مرقم حيوي في عينة من الخاضع » والكشف عن 5 مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل في die من الخاضع واختياريًا الخطوة ب)؛ حيث الخطوة ب) تشتمل على تحديد مستوى المرقم الحيوي الموجود في العينة ومستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل موجود في العينة حيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين ca 0 حيث مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل هو المركب 509؛ و حيث الطريقة هي على نحو مفضل الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 31.
— 7 1 — النموذ d 5 3 الطريقة Ga, للنموذ z 34 حيث تشتمل الطريقة على الخطوة ج)؛ حيث الخطوة ج) تشتمل على تحديد نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر كما هو محدد في الخطوة ب). مفينغوميالين حر يدل على إذا ما كان الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك أو لا أو على إذا ما كان الخاضع يمكن أن يصاب بمرض نيمان بيك أو لا. النموذج 37. طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك ؛ مرض نيمان بيك من النوع A و8 أو ar نيمان بيك من النوع © في خاضع؛ حيث تشتمل الطريقة على الخطوات التالية: 1( إضافة معيار داخلي إلى die من الخاضع؛ حيث العينة من الخاضع يتم اختياره من مجموعة 0 تشتمل على البلازماء المصل والدم؛ 2( اختياريًا خلط العينة التى تحتوي على القياس الداخلى؛ 3( تعريض العينة لخطوة ترسيب البروتين؛ بموجبه يتم ترسيب البروتين من العينة ويتم توفير مادة طافية أولى من العينة؛ 4) اختياريًا تعريض المادة الطافية الأولى من العينة أو جزءِ على الأقل منها إلى خطوة فصل أولى 5 توفر sale طافية ثانية؛ بموجبه على نحو مفضل خطوة الفصل الأولى هي خطوة طرد مركزي؛ 5) تعريض المادة الطافية الأولى و/ أو المادة الطافية الثانية؛ أو ha منهاء إلى خطوة فصل ثانية؛ حيث خطوة الفصل الثانية تشتمل على حقن ein على الأقل من المادة الطافية الأولى و/ أو جزء على الأقل من المادة الطافية الثانية في نظام HPLC-MS/MS واستخدام عمود HPLC له تدرج form ماء حمضى إلى أسيتو نيتريل/أسيتون ؛ حيث عمود HPLC هو على نحو مفضل عمود H PLC 20 مختار من مجموعة تشتمل على عمود H PLC به 0 وعمود H PLC به 8 1 C ¢ وحيث خطوة الفصل الثانية توفر due منفصلة؛
— 8 1 — 6( تعريض العينة المنفصلة إلى (MS/MS حيث يشتمل MS/MS على تأيين بالرش الكهربي ورصد التفاعلات العديدة؛ وتشتمل على : خطوة of حيث الخطوة أ) تشتمل على الكشف عن مرقم حيوي في عينة من الخاضع؛ والكشف عن مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل في die من الخاضع؛ و الخطوة ب)؛ حيث الخطوة ب) تشتمل على تحديد مستوى المرقم الحيوي الموجود في العينة ومستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل موجود في العينة؛ و الخطوة Cus ((z الخطوة ج) تشتمل على تحديد نسبة مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل إلى مستوى المرقم الحيوي كما هو محدد في الخطوة ب ¢ حيث إن كان مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل يساوي أقل من أو بمقدار 0.031 نانو جم/ مل يدل ذلك على أن الخاضع لا يعاني من مرض نيمان بيك ؛ حيث إن كان مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل يساوي أكبر من 0.031 نانو جم/ مل يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك ؛ حيث إن كان مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل يساوي أكبر من 0.031 نانو جم/ مل plan 5 بيك من النوع )؛ و حيث إن كان مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل يساوي أكبر من 1.7 نانو جم/ مل يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك مختار من مجموعة تتكون من مرض نيمان بيك من النوع 8 أو 8 ومرض نيمان بيك من النوع ©؛ و حيث إن كان مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل يساوي أكبر من 1.7 نانو جم/ مل ونسبة 0 مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل إلى مستوى المرقم الحيوي أكبر من 0.045 يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض las بيك من النوع 8 و8؛ و
— 9 1 — حيث إن كان مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل يساوي أكبر من 1.7 نانو جم/ مل ونسبة مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل إلى مستوى المرقم الحيوي أقل من أو بمقدار 0.045 يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك من النوع ©؛ و حيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حر؛ حيث مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل هو المركب 509؛ و حيث الطريقة هي على نحو مفضل الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 31؛ النموذج 38. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 31 إلى 37؛ حيث يشتمل القياس الداخلي على 05- فلوتيكاسون بروبريونات و/ أو ليسو-652. النموذج 39. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 38( حيث الخطوة ب)»؛ الخطوة ج) و/ أو الخطوة 0 ه) تشتمل على مقارنة مستوى المرقم الحيوي في العينة و/ أو مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل في العينة و/ أو نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل في العينة من الخاضع بقيمة حدية. النموذج 40. الطريقة Gg لأي من النماذج 1 إلى 39؛ على نحو مفضل 39؛ حيث إذا كان مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أكبر من القيمة الحدية يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع 5 يعاني من مرض نيمان بيك أو يمكن أن يصاب بمرض نيمان بيك . النموذج 41. الطريقة Wy لأي من النماذج 1 إلى 39؛ على نحو مفضل 39؛ حيث إذا كانت نسبة مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل في العينة من الخاضع أكبر من القيمة الحدية يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك أو يمكن أن يصاب بمرض نيمان بيك . 0 النموذج 42. الطريقة Gg لأي من النماذج 1 إلى 39؛ على نحو مفضل 39؛ Cua إذا كان مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أقل من القيمة الحدية يدل ذلك على أن الخاضع لا يعاني من أو يمكن ألا يصاب بمرض نيمان بيك .
— 0 2 — النموذج 43. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 39( على نحو مفضل 39( حيث if نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل في العينة من الخاضع أقل من القيمة الحدية يدل ذلك على أن الخاضع لا يعاني من أو يمكن ألا يصاب بمرض نيمان بيك . النموذج 44. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 43؛ حيث يتم اختيار القيمة الحدية بحيث 8 أو الحساسية لتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع تتراوح على نحو مفضل من حوالي %98.5 إلى 0 على نحو أكثر تفضيلاً 1699.5 إلى 96100؛ و/ أو بحيث 8 أو نوعية تشخيص مرض نيمان بيك من النوع C في خاضع تتراوح من %99.4 إلى 00 61 على نحو مفضل 00 %1 النموذج 45 . الطريقة Ga, لأي من النماذج 1 إلى 44 حيث الخطوة ب و/ أو الخطوة (z و/ أو الخطوة ه) تشتمل (تشمل) على 0 مستوى المرقم الحيوي في الخاضع المذكور و/ أو مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل تتم مقارنته/ تتم مقارنتها بمستوى المرقم الحيوي و/ أو إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل 5 تتم الكشف عنه في عينة من العينات التجريبية؛ و/ أو أن نسبة مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل إلى مستوى المرقم الحيوي تتم مقارنتها بنسبة مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل إلى مستوى المرقم الحيوي الذي تم الكشف عنه 0 في عينة من العينات التجريبية.
— 1 2 — النموذ z 46. الطريقة Lg للنموذ z 45 حيث dual) التجريبية هي عينة من خاضع لا يعاني من مرض نيمان بيك . النموذج 47. الطريقة ig لأي من النماذج 45 10 46؛ حيث إذا كان مستوى المرقم الحيوي في dal من الخاضع أكبر من مستوى المرقم الحيوي في العينة التجريبية يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من و/ أو يمكن أن يصاب بمرض نيمان بيك . إضافي واحد على الأقل في العينة من الخاضع إلى مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أكبر من نسبة مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل في العينة التجريبية إلى مستوى المرقم الحيوي في العينة التجريبية؛ يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من و/ أو يمكن أن يصاب 0 بمرض نيمان بيك . النموذج 49. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 48( حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تشتمل على نيمان بيك من النوع A أو 8؛ نيمان بيك من النوع ©؛ وحامل نيمان بيك من النوع .C النموذج 50. الطريقة وفقًا للنموذج 49 حيث مرض نيمان بيك من النوع © يتم اختياره من مجموعة 5 تشتمل على مرض نيمان بيك من النوع Cl مرض نيمان بيك من النوع C2 ومرض نيمان بيك من النوع نا. النموذج 51. الطريقة Gg لأي من النماذج 1 إلى 50؛ على نحو مفضل إلى النموذج 50 Cun يتم اختيار العينة من الخاضع من مجموعة تشتمل على الدم؛ منتج من الدم؛ البول؛ call) المائع الدماغى التنخاعى؛ البرازء عينة نسيجية واللمف. النموذ z 52 الطريقة Lg للنموذ S1 z حيث يتم اختيار العينة من عينة الخاضع من مجموعة تشتمل على الدم ومنتج من الدم. النموذج 53. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 51 إلى 52؛ حيث منتج الدم يتم اختياره من مجموعة تشتمل على المصل والبلازما.
— 2 2 — النموذج 54. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 53 على نحو مفضل 53( حيث الطريقة لها حد كشف عن ليسو سفينغوميالين حر يساوي 0.04 نانو جم/ مل. نيمان بيك من النوع C وحيث المرقم الحيوي هو sud سفينغوميالين حر والقيمة الحدية تساوي 6.5 نانو جم/ مل؛ وحيث العينة من الخاضع هي على نحو مفضل المصل أو البلازما. بيك من النوع © وحيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حر والقيمة الحدية تساوي 9.23 نانو جم/ مل؛ وحيث العينة من الخاضع هي على نحو مفضل المصل أو البلازما. 0 بيك من النوع A أو 8 وحيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حر والقيمة الحدية تساوي 59 نانو جم/ مل؛ وحيث العينة من الخاضع هي على نحو مفضل المصل أو البلازما. نيمان بيك من النوع C وحيث المرقم الحيوي هو المركب 509 والقيمة الحدية تساوي 0.031 نانو جم/ مل؛ وحيث العينة من الخاضع هي على نحو مفضل المصل أو البلازما. 5 النموذج 59. الطريقة Gy لأي من النماذج 1 إلى 54؛ حيث الطريقة هي لتشخيص مرض نيمان بيك من النوع © وحيث المرقم الحيوي هو المركب 509 والقيمة الحدية تساوي 1.7 نانو جم/ مل؛ وحيث العينة من الخاضع هي على نحو مفضل المصل أو البلازما. النموذج 60. الطريقة Gy لأي من النماذج 1 إلى 54؛ حيث الطريقة هي لتشخيص مرض نيمان بيك من النوع A أو 8 وحيث المرقم الحيوي هو المركب 509 والقيمة الحدية تساوي 5.0 نانو جم/ cde 0 وحيث العينة من الخاضع هي على نحو مفضل المصل أو البلازما. بيك من النوع C وحيث نسبة مستوى المركب 509 في العينة من الخاضع إلى مستوى ليسو
— 3 2 — سفينغوميالين حر المرقم الحيوي في العينة من الخاضع تتم مقارنتها بالقيمة الحدية؛ وحيث القيمة الحدية تساوي 0.087؛ وحيث العينة من الخاضع هي على نحو مفضل المصل أو البلازما. بيك من النوع A أو 8 وحيث نسبة مستوى المركب 509 في العينة من الخاضع إلى مستوى ليسو مفينغوميالين حر المرقم الحيوي في العينة من الخاضع تتم مقارنتها بالقيمة الحدية؛ وحيث القيمة الحدية تساوي 0.045؛ وحيث العينة من الخاضع هي على نحو مفضل المصل أو البلازما. النموذج 63. الطريقة dg لأي من النماذج 51 إلى 52؛ حيث الدم هو الدم بالكامل. النموذج 64. الطريقة وفقًا للنموذج 63؛ Cus يتم تجميع الدم بالكامل على بطاقة ترشيح دم جافة. النموذ z 65. طريقة لتحديد مسار مرض نيمان بيك فى pals حيث تشتمل الطريقة على خطوة 1 حيث 1 تشتمل على تحديد عند عدة نقاط زمنية مستوى مرقم حيوي موجود في عينة الخاضع. النموذ z 66. الطريقة Lg للنموذ z 5؛ حيث المرقم الحيوي يتم اختياره من مجموعة تشتمل على ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509. النموذج 67. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 65 إلى 66؛ حيث المرقم الحيوي يتم اختياره من مجموعة 5 تتكون من ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509. النموذج 68. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 65 إلى 67؛ حيث الخاضع تم علاجه سابقًا من مرض نيمان بيك و/ أو حيث الخاضع تم سابقًا تشخيص إصابته بمرض نيمان بيك . و/ أو حيث الخاضع لم يتم lla تشخيص إصابته بمرض نيمان بيك . 0 النموذج 70. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 65 إلى 69؛ حيث تشتمل الطريقة على الخطوة ب)؛ Cua الخطوة ب) تشتمل على تطبيق» الحفاظ (pain (le رفع أو عدم تطبيق علاج sly على إذا ما كان الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك أو يمكن أن يصاب بمرض نيمان بيك .
— 2 4 —
النموذج 71. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 65 إلى 70( حيث تشتمل الطريقة على الخطوة ج حيث الخطوة (z تشتمل على adsl) عن المرقم الحيوي في عينة من الخاضع بعد تطبيق العلاج؛ الحفاظ عليه خفضه؛ dad) أو عدم تطبيقه في الخطوة ب). النموذج 72. الطريقة Gg لأي من النماذج 65 إلى (T1 حيث تشتمل الطريقة على
الخطوة 2( « حيث الخطوة 2( تشتمل على تحديد مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع بعد تطبيق العلاج؛ الحفاظ عليه خفضه؛ dad) أو عدم تطبيقه في الخطوة ب). النموذج 73. الطريقة Gg لأي من النماذج 65 إلى (T1 حيث تشتمل الطريقة على الخطوة ه)ء؛ حيث الخطوة ه) تشتمل على تحديد إذا ما كان مستوى المرقم الحيوي المحدد في الخطوة أ) أقل من مستوى المرقم الحيوي المحدد في الخطوة د).
0 1 النموذ d 74 الطريقة Ga, للنموذ z 3 حيث تشتمل الطريقة على الخطوة و)؛ حيث الخطوة و) تشتمل على تطبيق» الحفاظ على» (min رفع أو عدم تطبيق علاج بناءً على الخطوة ه). النموذج 75. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 65 إلى 74( حيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حر. 5 النموذج 76. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 65 إلى 74؛ حيث المرقم الحيوي هو المركب 509. النموذج 77. الطريقة Gy لأي من النماذج 65 إلى 76( حيث تشتمل الطريقة على الكشف عن مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل في العينة من الخاضع. واحد على الأقل في العينة من الخاضع.
— 5 2 — النموذج 79. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 77 إلى TO حيث مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل يتم اختياره من مجموعة تشتمل على ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509؛ وحيث مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل يختلف عن المرقم الحيوي. النموذج 80. الطريقة Gg لأي من النماذج 77 إلى 79؛ حيث المرقم الحيوي هو المركب 509 وحيث مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل هو ليسو سفينغوميالين حر.
النموذج 81. الطريقة Gy لأي من النماذج 65 إلى 80؛ حيث تشتمل الطريقة على تحديد مستوى ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509. النموذج 82. الطريقة Gg لأي من النماذج 77 إلى 81« على نحو مفضل 80 إلى 81 حيث تشتمل الطريقة على
0 الخطوة ح)؛ Cus الخطوة ح) تشتمل على تحديد نسبة مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل في العينة من الخاضع إضافي واحد على الأقل كما هو محدد في الخطوة ح) يدل على إذا ما كان الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك أو لا أو إذا ما كان الخاضع يمكن أن يصاب بمرض نيمان بيك أو لا.
5 النموذج 84. الطريقة وففًا لأي من النماذج 65 إلى 83؛ ua تشتمل الطريقة على الكشف عن ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509 في العينة من الخاضع. النموذج 85. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 65 إلى 84؛ حيث يتم الكشف عن المرقم الحيوي و/ أو مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل بواسطة اختبار مناعي؛ تحليل قياس Cada الكتلة؛ صفيف رقائق حيوية؛ أحماض نووية وظيفية و/ أو مشتق فلوري من ليسو سفينغوميالين حر.
0 النموذج 86. الطريقة Wg للنموذج 85؛ حيث يتم الكشف عن المرقم الحيوي بواسطة تحليل قياس طيف الكتلة.
— 6 2 — النموذج 87. الطريقة وفقًا للنموذج 86( حيث تحليل قياس طيف الكتلة يتم اختياره من de gana تتكون من ESI-O-TOF ; TOF-TOF (MS/MS (MALDI-Q TOF (MALDI (SELDI النموذج 88. الطريقة وفقًا للنموذج 87( حيث يشتمل تحليل قياس طيف الكتلة على أو يستخدم MS/MS MS/MS النموذج 89. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 65 إلى 88( حيث تشتمل الطريقة على ترسيب البروتين و/ أو HPLC النموذج 90. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 65 إلى 89؛ حيث تشتمل الطريقة على ترسيب البروتين» MS/MS ; HPLC النموذج 91. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 65 إلى 90 حيث الخاضع يكون بشر. 0 النموذج 92. الطريقة Wg لأي من النماذج 65 إلى 91 حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تشتمل على مرض نيمان بيك من النوع By A مرض نيمان بيك من النوع ©؛ وحامل مرض نيمان بيك من النوع . النموذج 93. الطريقة Gg لأي من النماذج 65 إلى 92؛ Cua الخطوة د) تشتمل على الكشف عن المرقم الحيوي في عينة تشتمل على تعريض العينة لخطوة ترسيب البروتين؛ ترسيب البروتين من 5 العينة؛ توفير مادة طافية من العينة؛ تعريض المادة الطافية من العينة HPLC و1/15/1/5 وتحديد مستوى المرقم الحيوي و/ أو مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل الموجود/ الموجودين في المادة الطافية من العينة. النموذج 94. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 65 إلى 93؛ حيث مرض نيمان بيك من النوع © يتم اختياره من مجموعة تشتمل على مرض نيمان بيك من النوع «C1 مرض نيمان بيك من النوع C2 0 ومرض نيمان بيك من النوع نا. التموذج 95. طريقة لتحديد فاعلية علاج واحد على الأقل يتم تطبيقه على خاضع ظهر الاختبار ايجابيًا من حيث أنه يعاني من أو (Sa إصابته بمرض نيمان بيك تشتمل على
— 2 7 —
خطوة 1 حيث الخطوة 1 تشتمل على الكشف عن عند عدة نقاط زمنية مستوى مرقم حيوي و/ أو
عن مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل موجود في عينة من الخاضع.
النموذ d 96. الطريقة Ga, للنموذ z 95 حيث تشتمل الطريقة على
الخطوة ب)؛ حيث الخطوة ب) تشتمل على تحديد عند عدة نقاط زمنية مستوى مرقم حيوي و/ أو
عن مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل موجود في عينة من الخاضع.
النموذ z 97 الطريقة Ga, للنموذ z 6. حيث تشتمل الطريقة على
الخطوة ج)؛ حيث الخطوة ج) تشتمل على تحديد نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى مرقم حيوي
إضافى واحد على الأقل كما هو محدد في الخطوة ب).
النموذج 98. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 95 أو OT حيث المرقم الحيوي يتم اختياره من مجموعة 0 تشتمل على ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509.
النموذج 99. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 95 إلى 98 حيث مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل
يتم اختياره من مجموعة تشتمل على ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509؛ وحيث مرقم حيوي
إضافي واحد على الأقل يختلف عن المرقم الحيوي.
النموذج 100 . الطريقة Lg لأي من النماذج 95 إلى 99 حيث المرقم الحيوي هو المركب 509 5 وحيث مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل هو ليسو سفينغوميالين حر.
النموذج 101. الطريقة Wg لأي من النماذج 95 إلى 100؛ حيث الخاضع تم علاجه سابقًا من
مرض نيمان بيك أو تشخيص إصابته بمرض نيمان بيك .
النموذج 102. الطريقة Gg لأي من النماذج 95 إلى 100؛ حيث الخاضع لم يتم علاجه سابقًا من
مرض نيمان بيك أو حيث الخاضع لم يتم سابقًا تشخيص إصابته بمرض نيمان بيك . 0 التموذج 103. الطريقة Gg لأي من النماذج 95 إلى 102( حيث تشتمل الطريقة على
الخطوة د)» حيث الخطوة د) تشتمل على (ula الحفاظ (le خفض»؛ رفع أو عدم تطبيق علاج
واحد على الأقل يتم تطبيقه على الخاضع بناءً على انخفاض في مستوى المرقم الحيوي و/ أو مرقم
— 8 2 — حيوي إضافي واحد على الأقل كما هو محدد في الخطوة ب) و/ أو نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل كما هو محدد في الخطوة ج). النموذج 104. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 95 إلى 102( حيث تشتمل الطريقة على الخطوة ه)؛ حيث الخطوة ه) تشتمل على الكشف عن المرقم الحيوي و/ أو مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل في العينة من الخاضع؛ حيث العينة تم أخذها قبل بدء العلاج بعد تطبيق» الحفاظ (aid lo رفع أو عدم تطبيق علاج واحد على الأقل في الخطوة د) و اختياريًا تحديد مستوى مرقم حيوي و/ أو عن مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل موجود في due من الخاضع؛ واختياريًا تحديد نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل. النموذج 105. الطريقة FEE لأي من النماذج 95 إلى 104 حيث العلاج يتم اختياره من مجموعة 0 تشتمل على العلاج باستبدال الإنزيمات؛ العلاج بخفض الركيزة؛ العلاج المرافق؛ العلاج الجيني؛ زرع الخلايا الجذعية stem cell لتخطي DNA/RNA النموذج 106. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 95 إلى 105( حيث تشتمل الطريقة على الخطوة و)» حيث الخطوة و) تشتمل على تحديد إذا ما كان مستوى المرقم الحيوي المحدد في الخطوة ب) أقل من مستوى المرقم الحيوي المحدد في الخطوة ه)؛ و/ أو 5 تحديد إذا ما كان مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل المحدد في الخطوة ب) أقل من مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل المحدد في الخطوة ه)؛ و/ أو تحديد إذا ما كان نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل كما هو محدد في الخطوة ج) أقل من نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل كما هو محدد في الخطوة ه). النموذ z 107 الطريقة Ga, للنموذ z 106 ¢ حيث تشتمل الطريقة على الخطوة ز). Cua الخطوة ز) تشتمل على (gals الحفاظ (le خفض؛ رفع أو عدم تطبيق علاج واحد على الأقل يتم تطبيقه على الخاضع بناءً على الخطوة و).
— 9 2 — النموذج L108 الطريقة وفقًا لأي من النماذج 95 إلى 107( حيث يتم الكشف عن المرقم الحيوي biomarker و/ أو مرقم حيوي إضافى واحد على الأقل بواسطة اختبار immunoassay elie ٠» تحليل قياس طيف الكتلة mass spectrometric analysis « صفيف رقائق حيوية biochip array ¢ أحماض نووية وظيفية functional nucleic acids 5 | أو مشتق فلوري fluorescent derivative 5 من المرقم الحيوي biomarker
النموذ ٠ 1 09 d الطريقة Ga, للنموذ z 08 1 ¢ حيث يتم asst عن المرقم الحيوي و/ أو مرقم حبوي
إضافى واحد على الأقل بواسطة تحليل قياس طيف الكتلة. النموذج 110. الطريقة Bg للنموذج 109» حيث تحليل قياس طيف الكتلة يتم اختياره من مجموعة تتكون من .ESI-O-TOF 3 TOF-TOF (MS/MS (MALDI-Q TOF (MALDI (SELDI
0 النموذج L111 الطريقة Gg للنموذج 110( حيث يشتمل تحليل قياس طيف الكتلة على أو يستخدم MS/MS النموذج L112 الطريقة Wy لأي من النماذج 95 إلى 111 حيث تشتمل الطريقة على ترسيب البروتين و/ أو HPLC النموذج 113. الطريقة Gg لأي من النماذج 96 to 112( حيث تشتمل الطريقة على ترسيب
البروتينء MS/MS 3 HPLC النموذج L114 الطريقة وفقًا لأي من النماذج 95 إلى 113( حيث الخاضع يكون بشر. النموذج 5 1 1 . الطريقة Gg لأي من النماذج 95 إلى 4 1 1 3 Uae Cua نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تشتمل على مرض نيمان بيك من النوع By A مرض نيمان بيك من النوع ©؛ وحامل مرض نيمان بيك من النوع .
0 النموذج 116. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 95 إلى 115( حيث خطوة الكشف عن المرقم الحيوي في العينة من الخاضع تشتمل على ترسيب البروتين من العينة من الخاضع؛ حيث يوفر ترسيب البروتين من العينة مادة طافية من العينة؛ تعريض حجم من المادة الطافية ل0 101 3 MS/MS
— 0 3 — وتحديد مستوى المرقم الحيوي و/ أو مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل الموجود/ الموجودين في النموذج 117. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 115 إلى 116؛ حيث مرض نيمان بيك من النوع © يتم اختياره من مجموعة تشتمل على مرض نيمان بيك من النوع (C1 مرض نيمان بيك من النوع 02 ومرض نيمان بيك من النوع نا. النموذ z 118 طريقة لتحديد فاعلية مركب لعلاج مرض نيمان بيك ¢ حيث تشتمل الطريقة على الخطوات التالية: أ) تحديد مستوى مرقم حيوي في die من خاضع يعاني من مرض نيمان بيك ؛ ب) إعطاء إلى الخاضع المذكور المركب المذكور؛ 0 ج) تحديد مرة أخرى مستوى المرقم الحيوي في die من الخاضع بعد إعطاء المركب إلى الخاضع؛ و د) تحديد إذا ما كان مستوى المرقم الحيوي المحدد في الخطوة ج) أقل من مستوى المرقم الحيوي المحدد في الخطوة أ)؛ حيث إذا كان مستوى المرقم الحيوي المحدد في الخطوة ج) أقل من مستوى المرقم الحيوي المحدد 5 في الخطوة أ) يدل ذلك على فاعلية المركب المذكور. النموذج 119. الطريقة Lg للنموذج 118 حيث الخطوة أ) وج) تشتمل كل منها بالإضافة إلى ذلك على تحديد مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل موجود في العينة؛ وحيث الخطوة د) تشتمل بالإضافة إلى ذلك على 0 تحديد إذا ما كان مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل المحدد في الخطوة ج) أقل من مستوى مرقم حيوي la) واحد على الأقل المحدد في الخطوة of وحيث
— 1 3 — مستوى مرقم حبوي واحد على J لأقل محدد في الخطوة ج الذي يكون أقل من مستوى مرقم حيوي واحد على الأقل محدد فى الخطوة أ) يدل على فاعلية المركب المذكور. النموذج 120. الطريقة Ga, للنموذج 119 ¢ حيث الخطوة أ) تشتمل بالإضافة إلى ذلك على تحديد نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل؛
الخطوة ج) بالإضافة إلى ذلك تشتمل على تحديد نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى مرقم حيوي إضافى واحد على الأقل وحيث الخطوة 2( تشتمل على تحديد إذا ما كان نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى مرقم حيوي إضافى واحد على الأقل المحدد
0 في الخطوة ج)؛ أقل من نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل المحدد فى الخطوة 1 وحيث نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل المحدد في الخطوة ج) التي تكون أقل من نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل المحدد فى الخطوة أ) يدل على فاعلية المركب المذكور.
5 النموذج 121. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 118 إلى 120 حيث المرقم الحيوي يتم اختياره من مجموعة تشتمل على ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509؛ وحيث المرقم الحيوي يختلف عن مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل. النموذ z 2 . الطريقة Ga, للنموذ z 121« حيث تشتمل الطريقة على تحديد مستوى المرقم الحيوي في العينات التجريبية.
0 النموذج 123. الطريقة Wg لأي من النماذج 118 إلى 121؛ حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تشتمل على نيمان بيك من النوع 8 أو 8؛ نيمان بيك من النوع ©؛ وحامل نيمان بيك من النوع .
— 2 3 — النتموذج L124 الطريقة By للنموذج 123( حيث مرض نيمان بيك من النوع © يتم اختياره من مجموعة تشتمل على مرض نيمان بيك من النوع (C1 مرض نيمان بيك من النوع C2 ومرض نيمان بيك من النوع نا. النموذ z 5. استخدام تحليل قياس طيف الكتلة للكشف عن مرقم حيوي » حيث المرقم الحيوي يتم اختياره من مجموعة تشتمل على ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509. النموذج 126. الاستخدام وفقًا للنموذج 125؛ حيث يشتمل الكشف على استخدام HPLC النموذج 127. الاستخدام وفقًا لأي من النماذج 125 إلى 126؛ حيث يشتمل تحليل قياس طيف الكتلة على أو يستخدم MS/MS 0 لأي من النماذج 1 إلى 127( حيث المرقم الحيوي يتم اختياره من مجموعة تشتمل على ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509. لأي من النماذج 1 إلى 124( حيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حر. 5 في من النماذج 1 إلى 124( حيث المرقم الحيوي هو المركب 509. النموذج 131. الاستخدام وفقًا لأي من النماذج 125 إلى 130( حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تشتمل على نيمان بيك من النوع 8 أو 8؛ نيمان بيك من النوع ©؛ وحامل نيمان بيك من النوع . النموذج 132. الاستخدام Gg للنموذج 130( حيث مرض نيمان بيك من النوع © يتم اختياره من 0 مجموعة تشتمل على مرض نيمان بيك من النوع «C1 مرض نيمان بيك من النوع C2 ومرض نيمان بيك من النوع نا.
— 3 3 —
النموذج L133 استخدام نسبة مستوى مرقم حيوي موجود في عينة من الخاضع بمستوى مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل موجود في عينة من الخاضع للاستخدام في طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك ؛ على نحو مفضل في الطريقة Gy لأي من النماذج 1 إلى 124؛ حيث المرقم الحيوي يتم اختياره من مجموعة تشتمل على ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509.
النموذ z 134. طاقم لتحديد وجود مرقم حيوي في عينة من خاضع Gus يشتمل الطاقم على أ) شريك تفاعل للمرقم الحيوي؛ ب) اختياريًا دعامة صلبة تشتمل على كاشف احتجاز واحد على الأقل متصل بهاء حيث يريط كاشف الاحتجاز المرقم الحيوي؛ و ج) تعليمات لاستخدام الدعامة الصلبة للكشف عن المرقم الحيوي؛
0 حيث المرقم الحيوي يتم اختياره من مجموعة تشتمل على ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509. النموذج 135 الطاقم Gg للنموذج 2),؛ حيث يكون الطاقم من أجل نيمان بيك في خاضع؛ و/ أو ج) الاستخدام في طريقة لتحديد فاعلية علاج واحد على الأقل يتم تطبيقه على خاضع؛
5 حيث على نحو مفضل الطريقة حسب of ب) و/ أو ج) هي الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 124. النموذج 136. الطاقم Gg لأي من النماذج 134 إلى 135 حيث Uae نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تشتمل على نيمان بيك من النوع A أو 8؛ نيمان بيك من النوع ©؛ وحامل نيمان بيك من النوع . النموذج 137. الطاقم وفقًا للنموذج 136( حيث مرض نيمان بيك من النوع © يتم اختياره من
0 مجموعة تشتمل على مرض نيمان بيك من النوع «C1 مرض نيمان بيك من النوع C2 ومرض نيمان بيك من النوع نا.
-4 3 — النموذج 138. الطريقة Gg لأي من النماذج 1 إلى 124؛ على نحو مفضل النماذج 1 إلى 64؛ حيث المرقم الحيوي هو المركب 09 حيث إذا كان مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أكبر من 0.031 نانو جم/ مل يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك ؛ حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تتكون من مرض نيمان بيك من النوع ه و/ أو B مرض نيمان بيك من النوع © وحامل مرض نيمان بيك من النوع . النموذج 139. الطريقة Ws لأي من النماذج 1 إلى 124؛ على نحو مفضل النموذج 138؛ Cun المرقم الحيوي هو المركب 509 حيث إذا كان مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أكبر من 0.031 نانو جم/ مل وأقل من 0 أو بمقدار 1.7 نانو جم/ مل يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تتكون من dela مرض نيمان بيك من النوع . النموذج 140. الطريقة Wy لأي من النماذج 1 إلى 124؛ على نحو مفضل أي من النماذج 138 و139؛ حيث المرقم الحيوي هو المركب S509 حيث إذا كان مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أكبر من 1.7 نانو جم/ مل يدل ذلك 5 على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض las بيك ؛ حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تتكون من مرض نيمان بيك من النوع 8 و/ أو 8 ومرض نيمان بيك من النوع . النموذج 141. الطريقة Wy لأي من النماذج 1 إلى 124؛ على نحو مفضل أي من النماذج 138 إلى 140 ¢ حيث المرقم الحيوي هو المركب 509 0 حيث إذا كان مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أكبر من 1.7 نانو جم/ مل وأقل من أو Cua مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تتكون من مرض نيمان بيك من النوع .
— 5 3 — النموذج L142 الطريقة Wy لأي من النماذج 1 إلى 124 على نحو مفضل أي من النماذج 138 إلى 141 ¢ حيث المرقم الحيوي هو المركب 509 حيث إذا كان مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أكبر من 5.0 نانو جم/ مل يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك ؛
حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تتكون من مرض نيمان بيك من النوع A و/أو 8. النموذج 143. الطريقة Wy لأي من النماذج 1 إلى 124؛ على نحو مفضل أي من النماذج 138 إلى 142؛ Cua المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حرء حيث إذا كان مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أكبر من 6.5 نانو جم/ مل يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك ؛
0 حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تتكون من مرض نيمان بيك من النوع A و/أو 8؛ مرض نيمان بيك من النوع © وحامل مرض نيمان بيك من النوع . النموذج 144. الطريقة Wy لأي من النماذج 1 إلى 124؛ على نحو مفضل أي من النماذج 138 إلى 143؛ Cua المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حرء حيث إذا كان مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أكبر من 6.5 نانو fan مل وأقل من أو lia 5 9.23 نانو جم/ مل يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تتكون من dela مرض نيمان بيك من النوع . النموذج 145. الطريقة Wy لأي من النماذج 1 إلى 124؛ على نحو مفضل أي من النماذج 138 إلى 144؛ Cua المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حر ؛ حيث إذا كان مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أكبر من 9.23 نانو جم/ مل يدل ذلك 0 على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك ؛ حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تتكون من مرض نيمان بيك من النوع 8 و/ أو 8 ومرض نيمان بيك من النوع .
النموذج 146. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 124؛ على نحو مفضل أي من النماذج 138 إلى 145؛ حيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين On حيث إذا كان مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أكبر من 9.23 نانو جم/ مل وأقل من أو بمقدار 59 نانو جم/ مل يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك
حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تتكون من مرض نيمان بيك من النوع . النموذج 147. الطريقة Wy لأي من النماذج 1 إلى 124؛ على نحو مفضل أي من النماذج 138 إلى 146؛ حيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين on Cua إذا كان مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أكبر من 59 نانو جم/ مل يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك ؛
0 حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تتكون من مرض نيمان بيك من النوع A و/أو 8. النموذج 148. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 124؛ على نحو مفضل أي من النماذج 138 إلى 147؛ حيث if نسبة مستوى المركب 509 في العينة من الخاضع إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر أكبر من 0.087 يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك ؛
5 حيث lad (aye بيك يتم اختياره من مجموعة تتكون من مرض نيمان بيك من النوع . النموذج 149. الطريقة وفقًا لأي من النماذج 1 إلى 124؛ على نحو مفضل أي من النماذج 138 إلى 148؛ حيث if نسبة مستوى المركب 509 في العينة من الخاضع إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر أكبر من 0.045 يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك ؛
0 حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تتكون من مرض نيمان بيك من النوع 8 و/ أو 8 ومرض نيمان بيك من النوع .
٠ 3 7 ٠
النموذج 150. الطريقة Wy لأي من النماذج 1 إلى 124؛ على نحو مفضل أي من النماذج 138
إلى 149؛
حيث If نسبة مستوى المركب 509 في dial) من الخاضع إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر أكبر
من 0.045 وأقل من أو بمقدار 0.087 يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من مرض نيمان
بيك
حيث مرض نيمان بيك يتم اختياره من مجموعة تتكون من مرض نيمان بيك من النوع A و/أو 8.
المخترعون الحاليون وجدوا على نحو مثير للدهشة أن المركب 465؛ المشار إليه في الوثيقة الحالية
Lad على نحو مفضل على أنه ليسو سفينغوميالين حر يشّكل مرقم حيوي يسمح بطريقة لتشخيص
مرض نيمان بيك في خاضع؛ بشكل أكثر تحديدًا تشخيص مرض نيمان بيك في خاضع بنوعية 0 وحساسية عالية لاستخدام ليسو سفينغوميالين الحر المذكور كمرقم حيوي.
المخترعون الحاليون وجدوا Load على نحو مثير للدهشة أن المركب 509 يشكل مرقم حيوي يسمح
بطريقة لتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع؛ بشكل أكثر تحديدًا تشخيص مرض نيمان بيك في
علاوة على ذلك؛ المخترعون الحاليون وجدوا أيضًا على نحو مثير للدهشة أن نسبة مستوى Cal 5 509 في عينة من خاضع إلى مستوى المركب 465 في 8؛ على نحو مفضل العينة من الخاضع
المحدد كل منها على نحو مفضل بواسطة طرق الاختراع الحالي؛ تكون ملائمة لتشخيص مرض
نيمان بيك من النوع © في خاضع؛ بشكل أكثر تحديدًا تشخيص مرض نيمان بيك من النوع © في
خاضع بنوعية وحساسية عالية.
بعبارات أخرى المركب 465 والمركب 509؛ على الترتيب؛ PSE المرقمات الحيوية التي تسمح 0 بطريقة تشخيص التفاضلي لمجموعة أولى من مرض نيمان بيك تتكون من مرض نيمان بيك من
النوع / و8؛ مجموعة ثانية من مرض نيمان بيك تتكون من مرض نيمان بيك من النوع © ومجموعة
ثالثة من مرض نيمان بيك تتكون من حامل مرض نيمان بيك من النوع ©. Gg لذلك من الممكن
تمييز خاضع ينتمي إلى أو يفترض أنه ينتمي إلى المجموعة الأولى من مرض نيمان بيك من خاضع
ينتمي إلى أو يفترض أنه ينتمي إلى المجموعة الثانية من مرض نيمان بيك و/ أو المجموعة الثالثة
من مرض نيمان بيك . Gy لذلك من الممكن Wad تمييز خاضع ينتمي إلى أو يفترض أنه ينتمي إلى المجموعة الثانية من مرض نيمان بيك من خاضع ينتمي إلى أو يفترض أنه ينتمي إلى المجموعة الأولى من مرض نيمان بيك و/ أو المجموعة الثالثة من مرض نيمان بيك . وفقًا لذلك من الممكن Lad تمييز خاضع ينتمي إلى أو يفترض أنه ينتمي إلى المجموعة الثالثة من مرض نيمان بيك من خاضع ينتمي إلى أو يفترض أنه ينتمي إلى المجموعة الأولى من مرض نيمان بيك و/ أو المجموعة الثانية من مرض نيمان بيك . نسبة مستوى المركب 509 في عينة من خاضع إلى مستوى المركب 465 في 8 أو في العينة من الخاضع تسمح بتمييز مرض نيمان بيك من النوع © من مرض نيمان بيك من النوع Gag By A cll من الممكن تمييز خاضع يعاني من مرض نيمان بيك من النوع © من خاضع يعاني من إما 0 مرض نيمان بيك من النوع A أو 8. يعد Load ضمن الاختراع الحالي أن نسبة مستوى المركب 509 في عينة من خاضع إلى مستوى المركب 465 في 8 أو في العينة من الخاضع تسمح بتحديد إذا ما كان خاضع يعاني من أو يمكن أن يصاب بمرض نيمان بيك من النوع © أو لا. المخترعون الحاليون وجدوا Und على نحو مثير للدهشة أن ليسو سفينغوميالين حر؛ يمكن الكشف عنه بواسطة طرق الاختراع الحالي؛ يدور في دم خاضع بتركيز يساوي حوالي 1000/1 من إجمالي 5 مفينغوميالين. علاوة على ذلك؛ المخترعون الحاليون وجدوا على نحو مثير للدهشة أن؛ على العكس من إجمالي سفينغوميالين؛ ليسو سفينغوميالين الحر الموجود في دم الخاضع يكون مفيدًا في طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع تشتمل على خطوة الكشف عن مرقم حيوي في عينة من الخاضع؛ حيث المرقم الحيوي هو gad سفينغوميالين حر. المخترعون الحاليون وجدوا Wail على نحو مثير للدهشة أن مستوى ليسو سفينغوميالين حر محدد في عينة من خاضع بواسطة طرق 0 الاختراع الحالي يسمح بتشخيص مرض نيمان بيك بحساسية ونوعية عالية. حتى الآن الاختراع الحالي يبتعد عن معطيات الفن السابق من حيث أن طريقة الاختراع الحالي تشتمل على تحديد مستوى مركب ليسو واستخدام المركب ليسو المذكور كمرقم حيوي لتشخيص شحامات سفينغولية. بشكل أكثر تحديدًاء المخترعون الحاليون وجدوا على نحو مثير للدهشة أن تحديد مستوى ليسو سفينغوميالين حر في die من خاضع maw بتشخيص مرض نيمان بيك بحساسية 5 ونوعية عالية.
يرجع الفضل أيضًا إلى المخترعون الحاليون في اكتشاف أن ein من إجمالي سفينغوميالين المتراكم في مرض نيمان بيك ؛ يوجد كجزيء في صورة ليسو حر die أي ليسو سفينغوميالين حر؛ ويدور في دم خاضع في صورة الليسو الحر المذكورة بجانب سفينغوميالين. علاوة على ذلك؛ المخترعون الحاليون وجدوا أيضًا على نحو مثير للدهشة أن المركب 509؛ يمكن الكشف عنه بواسطة طرق الاختراع الحالي؛ يدور في دم الخاضع. علاوة على ذلك؛ المخترعون الحاليون وجدوا على نحو مثير للدهشة أن المركب 509 الذي يوجد في دم الخاضع يكون مفيدًا في طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع تشتمل على خطوة الكشف عن مرقم حيوي في عينة من الخاضع؛ حيث المرقم الحيوي هو المركب 509. المخترعون الحاليون وجدوا Wal على نحو مثير للدهشة أن مستوى المركب 509 المحدد في العينة من خاضع بواسطة طرق الاختراع الحالي 0 يسمح بتشخيص مرض نيمان بيك بحساسية ونوعية عالية. فيما يخص الاختراع الحالي تتم الإشارة إلى تركيز أو مستوى المركب 509. تركيز أو مستوى المركب 9 هذا يتحدد على نحو مفضل كما يلي. في تجهيزة تحليلية كما هو موصوف في الجزءٍ المستخدم كمثال بمزيد من التفصيل تتم إضافة القياس الداخلي إلى العينة المراد تحليلها. في سيتق هذا التحليل 8 يتم الحصول على كروماتوجراف يحدد كقمم فردية المركبات المختلفة التي تم الكشف عنه في 5 العينة. المركبات المختلفة تتضمن؛ من بين أخرى؛ المركب 509 والقياس الداخلي. لتحديد من هذا الكروماتوجراف والقمم الموضحة به يتم تحديد تركيز أو مستوى المركب 509 بمنطقة ذروة القمة المناظرة Spall 509 ومنطقة ذروة القمة المناظرة للمعيار الداخلي. يتم تبعًا لذلك تحديد نسبة منطقة ذروة القمة المناظرة للمركب 509 ومنطقة ذروة القمة المناظرة للمعيار الداخلي ومعادلتها بتركيز القياس الداخلي المضاف إلى العينة المراد تحليلها. تركيز OF المركب 509 الذي تم الحصول عليه Gs 0 لذلك يشار إليه في الوثيقة الحالية أيضًا كتركيز متعادل للمركب 509. في نماذج طرق الاختراع الحالي هذه حيث يتم استخدام تركيز أو مستوى المركب 509؛ إما هكذا أو عند حساب نسبة تتضمن تركيز أو مستوى المركب 509 المذكور مثل نسبة تركيز المركب 509 في العينة من الخاضع إلى تركيز gud سفينغوميالين حر في العينة من الخاضع؛ تركيز المركب 9 يتم على نحو مفضل معادلته بتركيز المركب 509.
المصطلح “اضطراب تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة )”؛ المشار إليه في الوثيقة الحالية Lal على أنه “مرض تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة )” أو PLSD" كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية؛ على نحو مفضل يشير إلى أمراض وراثية واضطرابات أيضية تنتج من عيوب في وظيفة الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ). اضطرابات تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) يسببها خلل بالجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) عادة كنتيجة لنقص إنزيم واحد ضروري لأيض الشحوم. البروتينات السكرية أو ما يسمى بعديدات السكاريد المخاطية. مثل الأمراض الوراثية الأخرى؛ يرث الأفراد أمراض تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة )من ذويهم. على الرغم من أن كل اضطراب ينتج من طفرات جينية مختلفة تتم 0 ترجمتها بنقص في النشاط الإنزيمي؛ تشترك جميعها في خصائص كيميائية حيوية مشتركة - تنشأ جميع الاضطرابات بالجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) من التراكم غير الطبيعي للمواد داخل الجسيم الحال. مرض نيمان بيك ؛ المشار إليه في الوثيقة الحالية Load على نحو مفضل على أنه (NP هو أمراض وراثية لصبغيات جسدية موروثة بشكل رجعي يتم تصنيفها في مجموعة فرعية من LSD تسمى 5 شحامات مفينغولية أو اضطرابات تخزين الشحوم حيث كميات ضارة من المواد الدهنية؛ أو الشحوم؛ تتراكم في الطحال؛ الكبد؛ الرئتين؛ نخاع العظام؛ والدماغ. aly على طفرة البروتين ld) مرض نيمان بيك يتم عادة تقسيمه إلى أربع مجموعات فرعية؛ أي مرض نيمان بيك من النوع CB A Dy المشار إليه في الوثيقة الحالية Lad على نحو مفضل على أنه (NPA حالة مرض نيمان بيك من النوع NPB A في dlls مرض نيمان بيك من النوع 8؛ NPC في حالة مرض نيمان بيك 0 .من النوع © NPD NPD في حالة مرض نيمان بيك من النوع 0؛ على الترتيب. بالتالي مرض نيمان بيك كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية على نحو مفضل يشتمل على مرض نيمان بيك من النوع A مرض نيمان بيك من النوع 8؛ مرض نيمان بيك من النوع © ومرض نيمان بيك من النوع .D مرض نيمان بيك الموروث هذا بنمط رجعي صبغي جسدي يعني أن WS النسختين؛ أو مركبات 5 أليل؛ من الجين يجب أن يحدث بها طفرة أو تغييره بحيث يتم إضعاف وظيفتها؛ على العكس من
— 1 4 — تعدد الشكل؛ حيث يتم تغيير متوالية النيوكليوتيد لكن لا يسبب أي توقف وظيفي؛ للشخص المتأثر بالاضطراب. (Ble ذوي الطفل الذي يعاني من اضطراب رجعي في الصبغيات الجسدية يكونوا غير مرضى ولكنهم يحملون نسخة من الجين المتغير. يشار إلى هذا الحامل في الوثيقة الحالية بأنه حامل مرض نيمان بيك ؛ على سبيل المثال حامل مرض نيمان بيك من النوع LC إذا كان كلا الوالدين يحمل المرض» يوجد احتمالية 9625 مع كل حمل لأن يصاب الطفل بالمرض. الاستشارات الوراثية والاختبارات الوراثية يوصى بها الأسر التي يمكن أن تكون حاملة لمرض نيمان بيك . NPA يضعف التكهن معه بمعظم الحالات حيث يكون الموت Gain بعمر 18 شهر. NPC s NPB (Sa التكهن معهم بشكل أفضل؛ في العديد من المرضى الذين يعانون من هذه الاضطرابات في عمر المراهقة أو البلوخ. 0 مرض lati بيك من النوع © يتميز Gly (gn Wha وإكلينيكيًا عن أمراض Niemann Pick من النوع A أو .B الطفرات في جين 51/0101 نقص تام أو جزئي في الإنزيم المسمى السفينغومياليناز الحمضي الذي يتسبب في تراكم سفينغوميالين والمؤدي إلى (NPB y NPA على الترتيب. تقريبًا 695 من حالات مرض نيمان بيك من النوع ©( المشار إليها في الوثيقة dal على نحو مفضل على أنه النوع Cl أو 1ل يسببها الطفرات الوراثية فى جين 1ل بينما طم المشار إليها في الوثيقة الحالية على نحو مفضل على أنه النوع C2 أو (NPC2 يسببها الطفرات فى الجين Mellon SH et al., March 2008. Brain research reviews 7 ) NPC2 410-20 :(2). في منتج بروتين NPC ذات جين به طفرة كبيرة؛ لا يعد NPC إنزيم لكن يبدو أنه يعمل كبروتين تاقل عبر الأغشية في نظام جسيمات داخلية-جسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة )؛ يُحرك جزيئات كبيرة غير ALE للذويان في الماء عبر الخلية. البروتين المشّفر بواسطة NPC2 (pall هو بروتين غير إنزيمي قابل للذوبان في الماء يبدو أنه يتعاون مع البروتين NPC في نقل الجزبئات في الخلية. مقاطعة نظام النقل هذا يتسبب في تراكم الكوليسترول والشحوم السكرية في الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ).
الاكتشافات الإكلينيكية حول 11061 5 NPC2 متشابهة لأن الجينات المتناظرة يشترك كلاها في خروج الشحوم؛ على وجه التحديد الكوليسترول؛ من الجسيمات الداخلية أو الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة )المتأخرة. جين NPCL يوجد على الكروموسوم 18 (-18011 Zhang JR et al., June 2008, The Journal of clinical investigation 118( )2 2281-90 :)6(( NPD تم فصله بالأصل عن NPC لتحديد مجموعة من المرضى الذين يعانون بدلاً من ذلك من اضطرابات متطابقة تشاركوا في سلالة Nova Scotian واحدة. المرضى في هذه المجموعة معروف أنهم يتشاركون طفرة معينة في جين في جين 80001. في النموذج Of مرض نيمان بيك من النوع NPC »© يشتمل على .NPD في نموذج آخر لمرض نيمان بيك من النوع © NPC يشتمل على .NPC2,NPC1 0 الأفراد المصابين ب©0ل!ا يمكن أن تظهر عليهم أعراض تشتمل على تضخم الطحال؛ تضخم الكبد أو تضخم الكبد والطحال؛ لكن هذا الاكتشاف يمكن ألا يوجد في حالات البدء اللاحقة. اليرقان المطول أو احمرار الصفراء المتزايد يمكن أن يوجد عند الولادة. في بعض الحالات؛ على الرغم من ذلك تضخم الطحال و/ أو الكبد لا يحدث saad أشهر أو سنوات أو لا يحدث على الإطلاق. تضخم 5 الطحال و/ أو الكبد يصبح غالبًا Ji وضوحًا بمرور الوقت؛ على العكس من ذلك تقدم LSD الأخرى NPA i و2008 أو مرض :680008. لا يسبب تضخم الأعضاء sale تعقيدات كبيرة. المرض العصبي المترقي Progressive neurological disease هو طابع ل00ل ويكون مسئولاً عن الإعاقة والموت المبكر في جميع الحالات بعد مرحلة الطفولة المبكرة. الأطفال المصابين NPC يمكن أن يعانون أوليًا من تأخيرات في الوصول إلى مهارات النمو الأساسية الطبيعية قبل 0 ظههور التأخر Shay) ؛ أي العته dementia على سبيل المثال. العلامات والأعراض العصبية تتضمن رنح مخيخي Lill jue « cerebellar ataxia jue » 38 البلع dysphagia ؛ الرعاش tremor ؛ كل من الصرع الجزثي والعام partial and generalized epilepsy ؛ الشلل فوق النووي الرأسي يشتمل على شلل يؤدي إلى النظر لأعلى vertical supranuclear palsy comprising upgaze palsy ؛ شلل يؤدي إلى
النظر للأسفل downgaze palsy « شلل رمشي أى saccadic palsy or paralysis (Li « انقلاب النوم sleep inversion ؛ جمدة الصرع الضحكي gelastic cataplexy ؛ خلل التوتر dystonia « بشكل أكثر شيوعًا يبداً بالتفاف واحدة من الأقدام عند المشي (خلل التوتر الفعلي 8 80000 ) ويمكن أن ينتشر ليصبح عام؛ فرط التشنج؛ نقص التوتر؛ استرخاء (stall 5 صغر الرأس؛ ذهان؛ العته المترقي؛ فقدان السمع المترقي؛ اضطراب ثنائي القطبية ؛ الاكتئاب الكبير والذهاني الذي يمكن أن يتضمن الهلوسات delusions ala gy « hallucinations ¢ الخرس mutism « أو ذهول Stupor في المراحل النهائية من (NPC يكون المريض طريح الفراش؛ بشلل تام في العين» فقد الحركة الإرادية ولديه عته حاد loss of volitional movement and has .severe dementia 0 المواد المتراكمة؛ الكوليسترول والشحوم السكرية glycolipids ؛ لها أدوار مختلفة تلعبها في الخلية. الكوليسترول عبارة عن مكون أساسي لأغشية خلية البلازماء والتي تحدد الخلية ككل وعضياتها. وهي كتلة بنائية أساسي من الهرمونات المنشطة شاملة الستيرودات العصبية -steroid hormones في (NPC تتراكم كميات كبيرة من الكوليسترول الحر أو غير المعالج بإستر free or unesterified cholesterol accumulates في dla الجسيمات ؛ وتؤدي إلى نقص نسبي في هذا الجزيء في العديد من الأغشية وتخليق الستيرويد steroid ربط تراكم الشحوم الجليكوسفيونجية glycosphingolipids في الجهاز العصبي بالتغيرات البنيوية؛ أي توليد WAY المتغضنة خارجيا وتكوين العصبونات المنتفخة .meganeurite formation يتم تشخيصس NPC بواسطة اختبار الأرومات الليفية المزروعة لأسترة الكوليسترول وتلطيخ الكوليسترول الذي لم يعالج بالإستر بفيليبين 81010. الأرومات الليفية يتم إنماؤها من خزعة صغيرة 0 -من الجلد مأخوذة من مريض مشكوك بإصابته NPC يمكن تأكيد التشخيص بواسطة تحديد الطفرات في 80001 أو جينات NPC2 عادة مع يتعلق تشخيص المرضى بأنهم مصابين ب NPC بسن بدء الإصابة. عادة ما يخضع الأطفال في سن ما قبل الولادة أو الرضع في الشهور أو السنوات القليلة الأولى من andl بينما يصاب المراهقون والبالغون بصور من WINPC تطور داخلي وتقدم ella ويمكن أن يعيش الأفراد 5 المصابين إلى العقد السابع. تم التعرف على حالات NPC مع زيادة التردد. وكان هناك شك أن
هناك العديد من المرضى المصابين ب NPC لم يتم تشخيصهم؛ بسبب نقص الوعي بالأمراض
وغياب المراقبة المتاحة أو الاختبارات التشخيصية. لنفس السبب يتم تأخير التشخيص بسبب لعدة
سنوات.
حالياء لا يوجد علاج سببي ل NP وغالبا ما يكون العلاج عرضيا ويكون محدودا بالرعاية التي غالبا
ما تكون داعمة. كان هناك محاولة لزرع عضو مع القليل من النجاح. كان هناك محاولة زرع نخاع
العظام ل (NPB يتضمن المنظور المستقبلي العلاج باستبدال الإنزيمات؛ المشار إليه في الوثيقة
الحالية أيضًا على نحو مفضل ERT (Jie والعلاج الجيني. هناك العديد من استراتيجيات العلاج
الأخرى الموجودة تحت الفحص في مزرعة الخلية ونماذج حيوانات Gas NPC سيكلودكسترين
Jas «cyclodextrin الكوليسترول «cholesterol mobilization ستيرويد | عصبي neurosteroid 0 وكيوركيومين Curcumin كعامل مضمن كالسيوم مضاد للالتهابات Loyd—)
.(Evans E et al., October 2008, Nature medicine 14 (11): 1247-55
يحتوي العقار Zavesca على Migllustat كمكون نشط تم اعتماده في دول الاتحاد الأوروبي لعلاج
المظاهر العصبية في المرضى البالغين والأطفال المصابين ب نيمان بيك من النوع ج. Miglustat
عبارة عن جليكوسيل مثبط سيراميد سنيثاز glucosylceramide synthase inhibitor « والذي 5 يثبط تخليق الشحوم الجليكوسفيونجية glycosphingolipids في الخلايا. وقد اتضح أنه يؤخر بدء
المرض في فار (NPC وتشير البيانات المنشورة بواسطة التجرية السريرية متعددة المركز ل
Miglustat في الولايات المتحدة وبربطانيا وتقارير الحالة إلى أنه يمكن أن تقوم بتخفيف مسار
NPC البشري.
سفينغوميالين عبارة عن 8 iS الشحم سفيني موجود في الأغشية الخلوية WAL الحيوانية animal «cells 0 خصوصا في جراب ميلين الغشاء membranous myelin sheath الذي يحيط
.nerve cell axons بأكسونات الخلية العصبية
في البشرء يعتقد أن سفينغوميالين sphingomyelin عبارة عن غشاء خلية للشحم فوسفوري
glycerol غير مشتق من جليسرول phospholipid ceramide ؛ يتكون سفينغوميالين من لب سيراميد sphingolipids شأن كل الشحوم السفينية als amide عبر رابط أميد fatty acid مرتبط بحمض دهني sphingosine أي سفينجوسين « core
linkage بالإضافة إلى ذلك» وهي تحتوي على مجموعة رأسية قطبية واحدة والتي تكون إما عبارة
عن فوسفوكولين phosphocholine أو فوسوفكوربلكولين phosphochorylicholine أو فوسفو
5 ليثانول أمين .phosphoethanolamine يتضمن sphingomyelin lle sainen المثال الصيغة: 1 CHg 0 HN Crh POAC Hy 70-7 هم HC" N CH 1 OH 0 | )(
يتسبب القصور الإنزيمي NPB NPA في إعاقة تدهور الشحم» بما يؤدي إلى تراكم سفينغوميالين
مع الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) في ذريات الخلايا الملتهمة أحادية 0 الخلايا بالخلايا الملتهمة الكبيرة. الخلايا المصابة تصبح كبيرة؛ أحياثًا وصولاً إلى 90 ميكرون من
حيث ail) بشكل ثانوي نسبة إلى انتفاخ الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة
) بسفينغوميالين والكوليسترول.
سوف يفهم الخبير في المجال أن المصطلح “انحلال سفينغوميالين "lyso—sphingomyelin كما
هو مستخدم في الوثيقة الحالية. على نحو مفضل بشكل متصل بالطرق الخاصة بالاختراع» على نحو مفضل يعني أن الجزيء يوجد في صورة أمينو الحر 800100 free الخاص به. بشكل أكثر
دقة؛ انحلال سفينغوميالين كما هو مستخدم في الوثيقة dled) على نحو مفضل يختلف عن
سفينغوميالين في أنه لا توجد شق حمض دهني مرتبط بمجموعة أساسية أو أمينية لشق سفينجوسين
للجزيء. علاوة على ذلك؛ انحلال سفينغوميالين يشار ad) في الوثيقة الحالية أيضًا كمركب 465؛
سفينجوسيل فوسفوريل كولين Sphingosylphosphorylcholine أو سفينجوسين فوسغفوريل كولين .Sphingosine phosphorylcholine 0 انحلال سفينغوميالين lyso—sphingomyelin المثالي
له صيغة:
CH; 0 MH, جوا on اس C Hyon OB OLA i 0 0 Ch; l, 0 سوف agh الشخص الماهر في الفن أن المصطلح “انحلال سفينغوميالين حر” كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية على نحو مفضل يشير إلى انحلال سفينغوميالين والذي يمثل عينة من الخاضع؛ مثل cpl و؛ على نحو مفضل؛ ليست نتيجة لتلاعب العينة من الخاضع المذكور. يمكن وصف هذا التلاعب في العينة Groener et al. (Groener et al., Biochimica et dug Biophysica Acta 1781(2908)72 - 78, 2007) وفقًا لذلك؛ انحلال سفينغوميالين الحر الموجود هكذا في دم خاضع يتم die سحب العينة؛ بشكل أكثر تحديدًا هو أمر غير انحلال سفينغوميالين الذي يتم توليده بواسطة العلاج الكيميائي أو البيوكيميائي Biochimica أو الفيزيائي 38 للعينة المتضمنة في الدم والعينة؛ على الترتيب» على نحو مفضل خارج جسم المريض. 0 سوف يفهم الخبير الشخص الماهر في الفن أن انحلال سفينغوميالين حر كما هو مستخدم في الوثيقة dll على نحو مفضل يوجد بالإضافة إلى ذلك إلى سفينغوميالين وهو عبارة عن المركب الذي تم إنتاجه بواسطة النشاط الأيضي للخاضع. وفقًا لذلك؛ سفينغوميالين» والذي هو عبارة عن جزيء متراكم متصل بمرض نيمان بيك ؛ Jie مرض نيمان بيك من النوع A والنوع 8؛ يوجد في العينة من الخاضع وتمت مقارنته بجزيء في صورة ناتج a أي انحلال سفينغوميالين a موجود في شق 5 حمض دهني واحد على الأقل لدم الخاضع مرتبط بمجموعة أساسية أو أمينية لشق سفينجوسين لانحلال سفينغوميالين. في النموذج الخاص بالمرقم الحيوي Wy للاختراع الحالي يتم الكشف عن المرقم الحيوي بواسطة اختبار مناعي»؛ تحليل قياس طيف الكتلة؛ صفيف رقائق حيوية؛ أحماض نووية وظيفية و/ أو مشتق فلوري من المرقم الحيوي. في اتصال بما سبق؛ سوف يكون من المهم ملاحظة أن هذه الكشف يسمح 0 بالكشف الانتقائي للمرقم الحيوي كما هو موجود في دم خاضع هكذا og وجه التحديد غير ناتج لتلاعب في العينة من الخاضع المذكور الناتج عن التغير في تركيز المرقم الحيوي؛ Jie اشتقاق 1 في تحلل 601 By لطريقة الفن السابق كما هو موصوف أعلاه. هذه المعالجة يمكن أن تتسبب في عدم القدرة على تمييز المرقم الحيوي Gy للاختراع الحالي؛ Jie ليسو سفينغوميالين حر
وبالتالي المرقم الحيوي وفقًا للاختراع الحالي لا يمكن الكشف aie هكذا ومستوى المرقم الحيوي المذكور لا يمكن تحديده هكذاء على الترتيب؛ دون الكشف عن المادة الأخرى التي تمت معالجتهاء على سبيل المثال 601 المشتق في ليسو- 601 Gg لطريقة الفن السابق. في ضوئها يتم مباشرة إدراك أن المرقم الحيوي الموجود في دم الخاضع Jie سفينغوميالين ليسو الحر الموجود هكذا في دم الخاضع؛ يوجد Lad في عينة من الخاضع هكذا ويمكن؛ مع ذلك؛ ترقيمة انتقائياً ب و/ أو ربطه بوسيلة مثل صبغة فلورية أو جزيء حمض نووي يرتبط بصورة محددة بالمرقم الحيوي. يسمح هذا الترقيم الانتقائي أو الارتباط بالكشف عن و/ أو تحديد مستوى المرقم الحيوي الذي تم ترقيمه أو المرتبط» دون cas الارتباط ب أو تحويل مادة أخرى؛ مثل ليسو- 651 من الفن السابق؛ الذي لا يمكن تمييزه من المرقم الحيوي» بشكل أكثر دقة المرقم الحيوي الذي تم ترقيمه أو المرتبط. فيما يتعلق 0 بذلك؛ على سبيل المثال يتعلق مشتق فلوري من المرقم الحيوي وفقًا للاختراع الحالي بالمرقم الحيوي الذي تم ترقيمه ب و/ أو ربطه بصبغة أو جزيء فلوري؛ أي يسفر عن مشتق فلوري من المرقم الحيوي؛ الذي يسمح بالكشف عن Fide فلوري و/ أو تحديد مستوى المشتق الفلوري للمرقم الحيوي Wd للاختراع. تُعد المادة المُشار إليها في هذه الوثيقة بالمركب 509« والتي يمكن الكشف عنها بواسطة طرق 5 الاختراع الحالي والتي تُعد مفيدة في الطريقة وفقًا للاختراع الحالي كمرقم حيوي Bale لها وزن أيوني شبه جزيئي يبلغ 509.3 وبشكل أكثر تحديدًا يبلغ 509.265 (0/2) (كأيون 100 HM شبه جزيئي وحيد النظير) حيث تكون الصيغة التجرببية من المركب 509 عبارة عن C24 1150 OT N2 © (أيون /1+1! شبه جزيئي). على نحو مفضل تم الكشف die كارتحال MRM في نمط ESI إيجابي ب 509 m/z إلى 184 00/2 في عينة البلازما من خاضع Gy لطريقة الاختراع الحالي؛ 0 بشكل أكثر تحديدًا في المثال 1 والمثال 2 كما هو موصوف في هذه الوثيقة. الصيغة البنياوية للمركب 509 ك THM] هي
CH, 0 OH JPN NP PN C7 TT TT Te يع 7 Me HN, OH 1 بموجبه على نحو مفضل يكون الوزن الجزيئي لمركب له الصيغة أعلاه 509.265 كأيون شبه جزيئي وحيد النظير /ا+1١ (m/z) كانت ظروف تحديد الصيغة البنائية الموضحة أعلاه كما يلي. تم إخضاع العينة التي تتكون من جزءِ HPLC الذي يحتوي على المركب 1509 PSD (MALDI-RTOF-MS و CID- TOF/RTOF-MS مرتفع الطاقة. يتم خلط العينة ومحلول القالب 1: 1 (حجم/ (pan بموجبه بلغ محلول القالب 15 مجم من THAP بالإضافة إلى 1000 ميكرو لتر من ميثانول 016107800١ أو في Ala وسط يحتوي على صوديوم 5000107 تحت ظروف مناسبة لإذابة الصوديوم» 15 مجم من THAP بالإضافة إلى 1000 ميكرو لتر من ميثانول مشبع ب NaCl تم 0 تطبيق إجمالي 0.8 ميكرو لتر من خليط العينة ومحلول القالب على هدف من الصلب الذي لا يصداً (طريقة التقطير على الجاف). بالإضافة إلى ذلك؛ تم غسل gia من مستحضرات خالية من الصوديوم باستخدام 2 ميكرو لتر من 0.1 96 مائي حجم/ حجم من محلول TFA تمت معايرة TOF باستخدام زيت خروع +[Na+M] Os) تريسينويل جليسرول triricinoleoyl glycerol « 2 955.7( وكذلك العديد من أيونات THAP (ions ). تم تحديد أطياف العاكس الأيوني 5 باستخدام 500 إلى 1000 نبضة ليزرء PSD وتم تحديد أطياف CID باستخدام ما يصل إلى 0 نبضة ليزر. غاز التصادم : (He طاقة التصادم 20 كلفن فولت. Yay من ذلك؛ تم الحصول على الصيغة البنائية للأيون الموضح أعلاه [/1+1]+ وكذلك للأيونات +[Na-H2+M] 5 +[Na+M] بواسطة تحليل قياس طيف الكتلة باستخدام Orbitrap LTQ-XL مع HCD 5 CID بعد البروتوكول الموضح أعلاه لتحضير العينة. 0 المصطلح "العينة' كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية يعني على نحو مفضل كمية محدودة من مادة خاضع؛ حيث تكون sale الخاضع المذكورة جزءِ من أو تم أخذها من خاضع و/ أو جسم
خاضع. على نحو مفضل؛ المادة المذكورة يتم اختيارها من مجموعة تشتمل على موائع الجسم مثل coal منتج من الدم؛ البول؛ اللعاب؛ المائع الدماغي النخاعي واللمف؛ كما Shall أو أي نوع من الأنسجة و أو مادة الخلية التي تمثل جزء من خاضع و/ أو جسم خاضع. يتم بواسطة الشخص الماهر في (Call إدراك أن وجود و/ أو مستوى مرقم حيوي Why للاختراع في العينة المذكورة يقصد أن يكون مشابهاً ل و يمثل وجود و/ أو مستوى المرقم الحيوي بكمية أكبر من تلك الخاصة بمادة الخاضع. بشكل أكثر دقة وللتوضيح؛ يمثل مثال غير chia مستوى مرقم حيوي وفقًا للاختراع المحدد في عينة؛ على سبيل المثال؛ بعض الملي من دم الخاضع أيضاً مستوى المرقم الحيوي المذكور في دم جسم الخاضع. علاوة على ذلك»؛ في النموذج من الطريقة Gy للاختراع لتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع؛ تشتمل عينة من الخاضع على sale الخاضع المذكورة في صورة 0 تمت معالجتهاء على سبيل (JB تثبيتها و/ أو حفظها بحيث تكون العينة المذكورة مناسبة للاستخدام في الطريقة وفقًا للاختراع؛ ويالتالي لا تعمل هذه المعالجة؛ التثبيت و/ أو الحفظ على نحو مفضل على توليد ليسو-سفينغوميالين و/ أو المركب 509 الذي لم يكن موجوداً هكذا في دم المريض. يمكن بالتالي تخفيف sale الخاضع في العينة؛ على سبيل المثال باستخدام المذيب المناسب للطريقة Bag للاختراع مثل ميثانول و/ أو cele ويمكن تجفيفها؛ على سبيل المثال على 5 بطاقة مرشح» (Sarg إذابتها بعد تجفيفهاء على سبيل المثال بمذيب مناسب للطريقة ay للاختراع مثل ميثانول و/ أو ماء؛ أو يمكن إضافة مادة؛ حيث تمنع المادة المذكورة الدم من التجلط على سبيل المثال EDTA (Jie أو هيبارين heparin يتم أيضاً بواسطة الشخص الماهر في الفن إدراك أن الطريقة Gg للاختراع تشتمل على مادة الخاضع المذكور تلك يتم فصلها إلى مكونات مادة الخاضع المذكور و/ أو يتم استخلاص مكونات فردية من sale الخاضع المذكور؛ على سبيل 0 المثال يتم فضل الدم إلى البلازما أو المصل ومكونات الدم الخلوية أو يتم ترسيب البروتين من العينة. Gg لذلك» في نموذج الطريقة وفقًا للاختراع Mal) حيث تشتمل الطريقة على ترسيب البروتين و/ أو (HPLC يتسبب ترسيب البروتين على نحو مفضل في أ) ترسيب مكونات الدم الخلوية و/ أو البروتين» على نحو أكثر تفضيلاً من كرية بعد خطوة الفصل بالطرد «Sal وب) لا يتم ترسيب المرقم الحيوي على نحو مفضل وبوجد في المادة الطافية بعد خطوة الطرد المركزي. 5 الشخص الماهر في الفن يدرك Hale أنه في نموذج الطريقة وفقًا للاختراع الحالي حيث تشتمل الطريقة على مادة HPLC الطافية التي تحتوي على المرقم (المرقمات) الحيوية Gy للاختراع
الحالي أو يتم إخضاع gia منها ل Lad (HPLC يتعلق بذلك من المهم إدراك أن المادة الطافية أو
جزءِ منها والذي يتم إخضاعه HPLC تشتمل على المرقم الحيوي ليتم الكشف عنه؛ على نحو
مفضل؛ وكذلك قياس داخلي. في نموذج الطريقة وفقًا للاختراع حيث تتم إضافة القياس الداخلي
إلى العينة؛ يمكن إضافة القياس الداخلي إلى العينة قبل أو بعد خطوة الترسيب؛ أي يمكن إضافة
القياس الداخلي في العينة مباشرةً بعد أخذ العينة من الخاضع؛ أو يمكن إضافته إلى المادة الطافية
التي يتم إخضاعها ل (HPLC وكذلك بين هاتين النقطتين الزمنيتين. يدرك الشخص الماهر في
الفن» كيفية وزمن إضافة القياس الداخلي على نحو مفضل المضاف إلى العينة لتحقيق كشف دقيق
وتحديد مستوى المرقم الحيوي.
يتم مباشرةً إدراك أنه بعد هذه المعالجة. التثبيت و/ أو الحفظ يتم إخضاع العينة إلى طرق الاختراع 0 للكشف عن و/ أو تحديد مستوى مرقم حيوي الموجود في العينة المذكورة وبالتالي لا تعمل هذه
المعالجة؛ التثبيت و/ أو الحفظ على نحو مفضل على توليد ليسو -سفينغوميالين -50لاا
sphingomyelin و/ أو المركب 509 الذي لم يكن موجوداً هكذا في عينة المريض.
في نموذج الطريقة وفقًا للاختراع الحالي حيث يتم تجميع الدم بالكامل على بطاقة ترشيح دم جافة
على نحو مفضل تقريبًا 3 ميكرو لتر من الدم الكامل يتم جمعها على بقعة من بطاقة ترشيح الدم 5 الجاف المذكور التي تتسم بقطر يبلغ 3 مم. الشخص الماهر في الفن سوف يدرك أن الحجم
الدقيق الذي تم جمعه بالتالي يمكن أن يختلف ly على نسبة الكريات الحمراء في الدم لمريض
تم استخدام مستويات جلوكوسيل سيراميد والسيراميد المنتج لها في الفن السابق لتتوافق مع وجودها
في البلازما مع شدة مرض Gaucher's من النوع | وتستجيب لتطبيق العلاج ( Groener et .(al., Biochimica et Biophysica Acta 1781(2908)72 - 78, 2007 0 وبالتالي» وجد
أن مستوى 601 مختلف على الرغم من أن مستويات السيراميد لم تكن مختلفة بصورة كبيرة في
بلازما المرضى بمرض Gaucher's الذي تمت معالجته والذي لم تتم معالجته من النوع J
/551 تم استخدام نسبة Groener et al. (Groener et al., supra) في الدراسة التي ذكرها
سيراميد للتمييز بين مرضى مرض 6800007838 والمرضى الأصحاء . تم قياس 601 و سيراميد
باستخدام كروماتوجراف سائل عالي الأداء (HPLC) بصورة أساسية كما هو موصوف في .Groener et al. (J.E.M.
Groener et al., Clin.Chern. 53 (2007) 742-747( فيما يتعلق بذلك من المهم إدراك أن 601 الموجود في البلازما يتكون أساساً من شق سكر وشق سيراميد. يشتمل شق السيراميد على سفينجوسين وشق حمض دهني. وفقًا لطريقة الفن السابق يتم استخلاص الشحوم و سيراميد ويتم نزع أسيتيل من جليكوسيل سيراميد بواسطة التحلل المائي القلوي بالتالي لتشكيل صورة ليسو؛ أي ليسو- 651 ( T.
Taketomi et al., J.
Biochem. (Tokyo) 120 (1996) 573-579 بعد ذلك» يتم ترقيم Gb] sud الناتج بواسطة صبغة فلورية بواسطة الاشتقاق باستخدام ©- فتثالاداي ألد هايد (OPA) O-phthaldialdehyde عند مجموعة أمين أولية. بعد ذلك تم فصل قواعد سفينجويد المشتقة بواسطة HPLC في الطور 0 العكسي وتم الكشف die باستخدام كاشف فلوري. بالتالي تكون الطريقة المذكورة من الفن السابق قادرة على الكشف عن 601 الإجمالي الذي يتكون من ليسو-601 all و6801 وتكون غير قادرة على تمييز مستوى ليسو-601 الحر من (grime 601 في die من خاضع. يتراوح Bale مستوى 601 الإجمالي المذكور بعد انشطار شقوق حمض دهني مختلفة من مجموعة NH2 من 1 من 5 إلى 30 ميكرو جرام لكل مل من البلازما أو المصل. يتضح من هذا أنه في طريقة Groener et al. (Groener et al., supra) 15 يتم استخدام 801 الإجمالي الذي تم تحضيره والذي تم الحصول عليه؛ على الترتيب؛ من عينة؛ على نحو مفضل عينة الدم؛ من خاضع كمرقم حيوي بخلاف ليسو-601 الحر الموجود في الدم ووفقًا لذلك أيضاً في العينة دون إجراء انشطار شق/ شقوق الحمض الدهني؛ على نحو مفضل انشطار تم إجراؤه بواسطة القائم على التشغيل الذي يقوم بمعالجة العينة. ويقدر ما يتعلق الاختراع الحالي بالكشف عن ليسو سفينغوميالين حر بخلاف 0 مفينغوميالين الإجمالي. على الرغم من أن 601 الإجمالي الذي تم قياسه في صورة ليسو-601 في الدراسة المذكورة من الفن السابق تمت زيادته في بلازما المرضى المذكورين؛ لم تكن الزيادة المذكورة في 651 الإجمالي سائدة وبالتالي كانت نوعية وحساسية الطريقة منخفضة لتوضح أن Gb] غير مناسب كمرقم spa لمرض Gaucher
إنه نموذج طرق الاختراع الحالي الذي يشتمل على الكشف عن و/ أو تحديد مستوى ليسو سفينغوميالين حر في عينة من خاضع بحيث يتم تحديد ليسو سفينغوميالين حر و/ أو مستوى ليسو سفينغوميالين حر منفصلاً عن و/ أو بعيداً عن سفينغوميالين أو مستوى سفينغوميالين الذي قد يكون موجوداً في دم خاضع. في نموذج آخر يتم الكشف عن سفينغوميالين و/ أو مستوى مفينغوميالين/ تحديده بالإضافة إلى ذلك للكشف عن أيون و/ أو تحديد مستوى ليسو سفينغوميالين
حر. بصورة هامة؛ يتم ترقيم كل أمين أولي يدور في البلازما ويكون بصورة كافية آلف للدهون ليتم استخلاصه بالتتابع بسفينغوميالين باستخدام مذيب عضوي وفقًا للطريقة المذكورة في الفن وفقًا لذلك وبالتالي يكون قادراً على توزيع ليسو -سفينغوميالين المنشطر .cleaved lyso-sphingomyelin
0 في نموذج المرقم الحيوي Wy للاختراع الحالي ينطبق ما تم توضيحه أعلاه فيما يتعلق بليسو سفينغوميالين حر أيضاً على أي مرقم حيوي By للاختراع الحالي موجود في صورة ليسو حر free-lyso وبقدر ما يتجاوز» المرقم الحيوي ty للاختراع الحالي واستخدامه بوضوح إجراء طرق تشخيص مرض نيمان بيك ؛ على نحو مفضل مرض نيمان بيك من النوع A و8؛ مرض نيمان بيك من
5 النوع © و/ أو حامل مرض نيمان بيك من النوع ©؛ يحاول الفن السابق المعروف؛ بشكل أكثر تحديدًا؛ محاولات هذه الطرق باستخدام المرقمات الحيوية. يتم مباشرةً إدراك أن طريقة تشخيص مرض la بيك المناظرة للطريقة التي يتم تطبيقها بواسطة et al 563060©613. لتشخيص مرض Gaucher (Groener et al., supra) تكون غير ضارة مقارنة بطرق الاختراع الحالي في أن تشخيص مرض نيمان بيك 5 على هذه الطريقة من الفن السابق باستخدام إجمالي سفينغوميالين
0 بخلاف ليسو سفينغوميالين حر مثل طريقة الفن السابق باستخدام 651 الإجمالي بخلاف ليسو- 1 الحر لا يُعد مناسباً للتطبيق السريري الموثوق cal أي لا تتسم الطريقة بحساسية ونوعية كافية لتشخيص مرض Gaucher بواسطة التنبؤ الموتوق احصائياً الآمن. وعلى العكس بصورة واضحة يوفر الاختراع الحالي الطرق لتشخيص مرض las بيك والمرقمات الحيوية المستخدمة في الطرق المذكورة التي mand بتشخيص مرض نيمان بيك بحساسية ونوعية
عالية. بصورة cpl تسمح طرق الاختراع الحالي باستخدام المرقم الحيوي/المرقمات الحيوية Bag للاختراع الحالي بصورة مختلفة بتشخيص مرض نيمان بيك من النوع By A ومرض نيمان بيك من النوع )؛ وحامل مرض نيمان بيك من النوع © في خاضع. وفق علمهم يعتقد المخترعون الحاليون أن طرق الاختراع الحالي تسمح لأول مرة بتحديد مرض نيمان بيك من النوع © من مرض نيمان بيك من النوع A و8 باستخدام مرقم حيوي/ مرقمات حيوية Bg للاختراع الحالي في اختبار cam وأكثر أهمية؛ مرتفع الحساسية ومرتفع النوعية مناسب للتطبيق السريري. المصطلح 'مرض نيمان بيك status’ كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية؛ على نحو مفضل يشير إلى حالة مرض في الخاضع. تتضمن أمثلة أنواع حالات مرض نيمان بيك ؛ على سبيل المثال لا الحصرء مخاطر خاضع يعاني أو يخضع لمرض نيمان بيك ؛ مرحلة المرض في الخاضع وفاعلية 0 علاج المرض. تعرف حالات أخرى ودرجات كل حالة في الفن. في النموذج Gg للاختراع الحالي تشتمل حالة مرض نيمان بيك على حالة مرض نيمان بيك شديدة؛ متوسطة؛ أو صحية. المصطلح 'تشخيص” كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية» على نحو مفضل يعني تحديد وجود أو غياب مرض أو اضطراب في خاضع و/ أو تحديد إذا ما كان خاضع يعاني من خطر تطور مرض» اضطراب أو الأعراض المرتبطة بمرض أو اضطراب وكذلك Alay gall مرضة. يعني 5 مصطلح “تشخيص” أو 'تشخيص” كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية على نحو مفضل أيضاً أنه يتم تحديد سبب abel مرض موجودة أو ستوجد بعد ذلك. فيما يتعلق بذلك من المهم ملاحظة أن الشخص الماهر في الفن؛ Jie الطبيب الماهر الذي تتم استشارته بواسطة خاضع يعاني من الأعراض أو يحتمل أن يكون مريضاً؛ يقوم بتطبيق طرق الاختراع الحالي وبالتالي يحدد إذا ما كان خاضع يعاني من خطر الإصابة pape على dag 0 التحديد مرض نيمان بيك وبشكل أكثر تحديدًا مرض نيمان بيك من النوع AB مرض نيمان بيك من النوع © و/ أو حامل مرض نيمان بيك من النوع ©؛ إذا ما كان خاضع يعاني من هذا pall أو يتوقع حالة هذا المرض؛ على نحو مفضل بناءً على النتيجة التي تم الحصول عليها بواسطة تطبيق طرق الاختراع الحالي.
بناءً على التشخيص المذكور الشخص الماهر في الفن سوف يوصي بتطبيق؛ الحفاظ (lo (mis رفع أو عدم تطبيق العلاج أو لإجراء اختبارات تشخيصية أخرى. إنه بالتالي نموذج الطريقة وفقًا للاختراع الحالي لتشخيص مرض نيمان بيك الذي يشتمل على الطريقة بتوصية معينة إذا ما كان ينبغي تطبيق العلاج؛ الحفاظ عليه خفضه؛ dad) أو عدم تطبيقه. المصطلح “تشخيص تفاضلي” كما هو مستخدم في الوثيقة Led lad) يخص الطريقة ag للاختراع Ja على نحو مفضل يعني أن الطريقة تسمح بتحديد وجود أو غياب مرض أو اضطراب في خاضع و/ أو تحديد إذا ما كان خاضع عرضة لخطر الإصابة بمرض» اضطراب أو أعراض فيما يخص مرض أو اضطراب كما توقع حالة مرض؛ حيث المرض هو كل من أو أي 0 من مرض نيمان بيك من النوع Bs A مرض نيمان بيك من النوع ©؛ وحامل مرض نيمان بيك من النوع . المصطلح “الكشف عن” في سياق الاختراع الحالي يعني الطرق التي تتضمن الكشف عن وجود أو غياب مادة في عينة و/ أو النوع المؤهل من المادة المذكورة. يمكن تحقيق عملية الكشف بواسطة الطرق المعروفة في الفن وتلك الموصوفة كذلك في الوثيقة الحالية؛ بما في ذلك؛ لكن لا تقتصر 5 علىء القياس المباشر للبروتين (البروتينات) المتأثر على سبيل المثال متوالية من الجينات NPC1 (SMPD1 و/ أو .NPC2 أي طريقة ملائمة يمكن استخدامها للكشف عن واحد أو أكثر من المرقمات الحيوية الموصوفة في الوثيقة الحالية. هذه الطرق تتضمن؛ دون حصر» القياس الطيفي للكتلة Je) سبيل المثال (HPLC-MS/MS الفلورية fluorescence (على سبيل المثال اختبار مناعي بيني sandwich immunoassay (( ا10١-الفلوري أو الاشعه فوق 0 البنفسجية HPLC-UV على نحو مفضل بعد اشتقاق ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509. مرقم حيوي كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية؛ على نحو مفضل Ble عن أي مركب بيولوجي؛ Jie البروتين وشطية منه؛ ببتيد peptide ؛ بولي ببتيد polypeptide ؛ جليكان بروتيني 607 ؛ جليكويروتين glycoprotein ؛ بروتين شحمي lipoprotein » كريوهيدرات
carbohydrate « شحم lipid ؛ حمض نووي acid 01101616 ؛ مادة كيمياثية عضوية وغير عضوية organic or inorganic chemical ¢ بوليمر طبيعي Natural polymer « وجزيء صغيرء والذي يوجد بصورة تفاضلية في عينة تم الحصول عليها من خاضع لحالة من النمط الظاهري ( أي التي تتضمن مرض ) مقارنة ب حالة النمط الظاهري الأخرى ( أي لا تتضمن المرض) والتي يمكن عزلها عن؛ أو قياسها في العينة تم الحصول عليها من خاضع. علاوة على ذلك» يمكن أن يكون المرقم الحيوي عبارة عن الجزيء السليم الكلي؛ أو يمكن أن يكون عبارة عن die da والذي يتم الكشف عنه بشكل مفضل بواسطة تحليل القياس الطيفي الكتلي» جسم مضادء بروتين آخر مرتبط على وجه التحديد بالمرقم الحيوي؛ الأحماض النووية الوظيفية المرتبط على وجه التحديد بالمرقم الحيوي و/ أو مرقم فلوري. يعد المرقم الحيوي أيضاً إخباري إذا ارتبط الجانب 0 القابل للقياس للمرقم الحيوي بالحالة المحددة للمريض»؛ مثل حالة محددة ل MLD. يمكن أن يتضمن Cals قابل للقياس مذكور؛ على سبيل (Jha وجود؛ غياب»؛ أو مستوى المرقم الحيوي في العينة التي تم الحصول عليها من خاضع و/ أو وجودها كجزء من سمة المرقمات الحيوية. يمكن أيضاً أن يكون الجانب القابل للقياس عبارة عن نسبة اثنين أو أكثر من الجوانب القابلة للقياس للمرقمات الحيوية؛ وتكون المرقمات الحيوية أو لا تكون ذات هوية معروفة؛ على سبيل المثال. 5 تشتمل dow المرقمات الحيوية على اثنين على الأقل من الجوانب القابلة للقياس المذكورة؛ حيث تتناظر الجوانب القابلة للقياس مع نفس الفئات أو فئات مختلفة للمرقمات الحيوية مثل؛ على سبيل المثال. حمض نووي و كربوهيدرات. يمكن أن تشتمل daw المرقم الحيوي Lad على 3 4؛ 5 على الأقل؛ 10 20؛ 30 أو أكثر من الجوانب القابلة للقياس. في نموذج؛ تشتمل سمة المرقم الحيوي على مئات؛ أو حتى «YT الجوانب القابلة للقياس. في نموذج «AT تشتمل سمة المرقم 0 الحيوي على جانب قابل للقياس واحد على الأقل لمرقم حيوي واحد على الأقل وجانب قابل للقياس واحد على الأقل لمقياس داخلي واحد على الأقل. في نموذج الطريقة وفقًا للاختراع الحالي تتم إضافة معيار داخلي إلى عينة تم الحصول عليها من الخاضع. يتضح أن بواسطة الإضافة المذكورة لمقياس داخلي؛ الذي تمت الإشارة ad) هنا أيضاً بتعبير 5ا؛ إلى العينة؛ أي العينة المتزايدة؛ المراد إخضاعها لطريقة وفقًا للاختراع الحالي؛ يكون 5 تركيز 15 في العينة معروف cy على سبيل المثال؛ بواسطة تحديد المساحة أسفل المنحنى؛ أي
مساحة الذروة؛ للمقياس الداخلي؛ على سبيل المثال» عمود الاستشراب للقياس الطيفي الكتلي HPLC والعلاقة بين مساحة الذروة وتركيز المادة؛ على سبيل المثال [51S أو المرقم الحيوي وفقًا للاختراع الحالي؛ على سبيل المثال ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 بالتالي يمكن حسابهاء fin بواسطة حساب نسبة مساحة الذروة لليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509
ومساحة الذروة ل IS يدرك الشخص الماهر في Gall أيضًا أن العديد من الجزيئات يمكن استخدامها ك 15. مع ذلك يفضل IS الذي له بنية كيميائية مشابهة مقارنة بجزيء مثل المرقم الحيوي؛ على سبيل المثال ليسو سفينغوميالين حر lyso—sphingomyelin و/ أو المركب 9. وفقًا cli يحصل المخترعون الحاليون في نموذج تم اختياره من ليسو -652 غير الموجود كما هو في الطبيعة. في نموذج مفضل يمكن تمييز الجزيء الذي يكون عبارة عن IS عن
0 المرقم الحيوي أو المرقمات الحيوية وفقًا للاختراع الحالي؛ على سبيل المثال ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 في الطريقة Gy للاختراع الحالي. في نموذج مفضل آخر يتم اختيار IS بحيث لا يوجد الجزيء بصورة نمطية أو يكون نادر في الطبيعة. في النموذج Gy للاختراع الحالي حيث تتم إضافة المعيار الداخلي إلى عينة تم الحصول عليها من الخاضع؛ يكون من المفضل أن تتم إضافة IS بحيث تتم إضافتها في مذيب؛ مثل إيثانول؛ قبل الإضافة المذكورة إلى العينة. في
5 نموذج مفضل AT يتم اختيار المذيب بحيث يكون المذيب المذكور قادرًا على ترسيب البروتين؛ بشكل مفضل يكون قادرًا على تحقيق خطوة ترسيب البروتين كموضوع الطريقة وفقًا للاختراع الحالي. في بعض نماذج الاختراع الحالي يكون ترسيب البروتين و/ أو خطوة ترسيب البروتين عبارة عن ea من طريقة الاختراع الحالي. يتضح أن الترسيب كما هو مستخدم هناء بشكل مفضل يعني
0 تكوين مادة صلبة في محلول» أي على سبيل المثال تكوين ناتج ترسيب البروتين في عينة؛ Jia (dias الذي تم الحصول عليه من الخاضع. عند الترسيب؛ يحدث ترسيب البروتين؛ في عينة؛ تسمى المادة الصلبة التي تم تشكيلها ناتج الترسيب؛ أو عند دمجها بواسطة الفرز بالطرد المركزي؛ كرية. يسمى Bld) المتبقي فوق المادة الصلبة في أي حالة المادة الطافية. يتوقع الاختراع الحالي طرق مختلفة لترسيب و/ أو فصل المادة الطافية المذكورة ناتج الترسيب أو الكرية المذكورة؛
5 وتشتمل» من بين أشياء coal على ترسب أو ترسيب ally بالطرد المركزي. سيعلم ذوي المهارة
في المجال الطرق الأخرى لترسيب البروتين و/ أو لفصل المادة الطافية وناتج ترسيب البروتين» مع ذلك يعمل الماهر في المجال أنه إذا تم استخدام الطريقة؛ بشكل مفضل طريقة للاختراع» فيؤدي ترسيب البروتين إلى إعاقة جهاز مثل عمود أو عمود HPLC مستخدم بالاشتراك مع الاختراع الحالي ing فصل البروتين المترسب عن المذيب و/ أو العينة.
في بعض النماذج hy للاختراع الحالي مستوى مرقم حيوي Bag للاختراع الحالي؛ على سبيل المثال ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 المحدد بواسطة طريقة الاختراع الحالي في عينة تتم مقارنتها بمستوى نفس العينة أو مرقم حيوي آخر للاختراع الحالي المحدد بواسطة طريقة للاختراع a في due أخرى؛ مثل تلك التي يتم الحصول عليها من نفس المريض؛ من مريض OAT من عينة مقارنة و/ أو من نفس النقاط الزمنية أو نقاط زمنية مختلفة؛ و/ أو قيمة القطع؛ و/ أو مستوى
0 عينة مقارنة و/ أو مستوى IS بالاشتراك مع ذلك يعني تعبير مقارنة" أو ' مقارن ب" كما هو مستخدم هناء بشكل مفضل المقارنة الحسابية لاثنين أو AST من قيم مستويات المرقم (المرقمات) الحيوية. بالتالي سيتضح أن مباشرةً ما إذا كانت واحدة على الأقل من القيم المذكورة أعلى؛ أقل أو متماثلة إذا تمت مقارنة اثنين على الأقل من تلك القيم مع بعضها البعض. في بعض النماذج Gg للاختراع al) الطريقة Gag للاختراع الحالي تشتمل على خطوة تحديد
نسبة مستوى اثنين من المرقمات الحيوية المحددة بواسطة الطريقة وفقًا للاختراع الحالي. في نموذج أكثر تفضيلاً يتم تحديد النسبة بقسمة مستوى المرقم الحيوي الأول» أي مرقم حيوي hy للاختراع الحالي» على مستوى المرقم الحيوي الثاني» أي مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل Gy للاختراع الحالي؛ حيث تم تحديد مستوى كلا المرقمات الحيوية بواسطة الاختراع الحالي. في نموذج أكثر تفضيلاً كذلك يتم تحديد النسبة بقسمة مستوى المرقم الحيوي ومستوى مرقم حيوي إضافي واحد
0 على J) حيث على النحو الأكثر تفضيلاً على الإطلاق المرقم الحيوي هو المركب 509 ومرقم حيوي إضافي واحد على الأقل هو ليسو سفينغوميالين حر. وجد المخترعون الحاليون أن مستويات النسبة المذكورة لاثنين من المرقمات الحيوية تدل على أن الخاضع يعاني من أو يمكن أن يصاب بمرض نيمان بيك ؛ بشكل أكثر تحديدًا يعاني من أي واحد من مرض نيمان بيك من النوع A و8؛ مرض نيمان بيك من النوع ©؛ وحامل مرض نيمان بيك من النوع ©. في نموذج أكثر تفضيلاً
سبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر كونها أكبر من القيمة الحدية يدل
على أن الخاضع يعاني من أو يمكن أن يصاب بمرض نيمان بيك من النوع ©. من المهم فهم فيما يخص ذلك أن القيمة الحدية التي تتم مقارنة النسبة المذكورة بها هي قيمة تسمح بالتشخيص بأعلى انتقائية وحساسية. في نموذج الطريقة وفقًا للاختراع الحالي حيث يتم تحديد نسبة اثنين من المرقمات الحيوية المحددة بواسطة الطريقة Gy للاختراع Jal وتدل على أن الخاضع يعاني من مرض معين؛ على سبيل المثال بواسطة مقارنة النسبة المذكورة بالقيمة الحدية؛ يتم الأخذ في الاعتبار دمج التشخيص pli على النسبة المذكورة مع التشخيص بناءً على مستوى واحد أو أكثر من المرقمات الحيوية المفردة الموجودة في العينة مما يدل على أن الخاضع يعاني من مرض معين؛ على سبيل المثال بواسطة مقارنة المستوى (المستويات) المذكور بالقيمة (القيم) الحدية المناظرة. بعبارات أخرى؛ يتم الأخذ في 0 الاعتبار أولاً الكشف عن مرقم حيوي في عينة من الخاضع؛ تحديد مستوى المرقم الحيوي المذكور الموجود في العينة ومقارنة المستوى المذكور للمرقم الحيوي المذكور بالقيمة الحدية الأولى» حيث القيمة الحدية الأولى المذكورة تسمح بتشخيص مرض؛ على نحو مفضل تشخيص تفاضلي للمرض المذكور؛ ثانيًا الكشف عن المرقم الحيوي الإضافي في die من الخاضع؛ تحديد مستوى المرقم الحيوي الإضافي المذكور الموجود في العينة ومقارنة المستوى المذكور للمرقم الحيوي المذكور 5 بالقيمة الحدية All) حيث القيمة الحدية الثانية المذكورة تسمح whe من تشخيص المرض أو تأكيد نتيجة التشخيص بالمرقم الحيوي المستخدم أولاً؛ و/ أو على نحو مفضل تشخيص تفاضلي للمرض المذكور؛ Bly تحديد نسبة مستوى المرقم الحيوي إلى مستوى المرقم الحيوي الإضافي ومقارنة النسبة المذكورة بالقيمة الحدية AEN حيث القيمة الحدية الثالثة المذكورة تسمح بمزيد من تشخيص المرض أو تأكيد نتيجة تشخيص بالمرقم الحيوي المستخدم أولاً والمرقم الحيوي الإضافي؛ 0 و/ أو على نحو مفضل تشخيص تفاضلي المرض المذكور. المصطلح “القيمة الحدية” كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية على نحو مفضل يشير إلى مستوى؛ تركيز و/ أو عيار مرقم حيوي By للاختراع الحالي. في بعض النماذج حيث نسبة مستويين؛ تركيزات و/ أو عيارات المرقمات الحيوية Bg للاختراع الحالي تعتبر القيمة الحدية المشار إليها على أنها قيمة النسبة التي بها تتم مقارنة نسبة مستوبين؛ تركيزات و/ أو عيارات المرقمات 5 الحيوية؛ وحيث إذا تم رفع نسبة المستوبين المذكورين؛ تركيزات و/ أو عيارات المرقمات الحيوية
— 9 5 — وفقًا للاختراع الحالي المحددة بواسطة طرق الاختراع الحالي» متزايدة أو أعلى مقارنة بالقيمة الحدية التي بها تمت مقارنة نسبة المستوبين»؛ تركيزات و/ أو عيارات المرقمات الحيوية؛ يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة بمرض نيمان بيك ؛ و/ أو على نحو مفضل مرض نيمان بيك من النوع By A مرض نيمان بيك من النوع ©؛ و/ أو حامل مرض Glan 5 بيك من النوع ©؛ و/ أو حيث إن تم خفض نسبة المستويين المذكورين» تركيزات و/ أو
عيارات المرقمات الحيوية وفقًا للاختراع all أو كانت أقل مقارنة بالقيمة الحدية التي بها تمت مقارنة نسبة المستويين» تركيزات و/ أو عيارات المرقمات الحيوية؛ يدل ذلك على أن الخاضع لا يعاني من أو ليس عرضة لخطر الإصابة بمرض نيمان بيك . في نموذج محدد منه :
0 يسمح استخدام المركب 509 كمرقم حيوي بما يلي بحساسية مقدارها 9694.4 ونوعية مقدارها 9696.1؛ و/ أو تشخيص NP من النوع ©باستخدام القيمة الحدية للمركب 509 تساوي 1.7 نانو جم/ مل بحساسية مقدارها 9697.2 ونوعية مقدارها 9693.3؛ و/ أو
تشخيص حامل NP من النوع© باستخدام القيمة الحدية للمركب 509 تساوي 0.031 نانو جم/ Je بحساسية مقدارها 100 % ونوعية مقدارها 5م يسمح استخدام ليسو سفينغوميالين حر كمرقم حيوي إضافي بما يلي تشخيص NP من النوع By A باستخدام القيمة الحدية لليسو سفينغوميالين حر تساوي 59 نانو جم/ مل بحساسية مقدارها 9694.4 ونوعية مقدارها 9699.3؛ و/ أو مل بحساسية مقدارها 9694.4 ونوعية مقدارها ¢%81.3 و/ أو
تشخيص حامل NP من النوع © باستخدام القيمة الحدية لليسو سفينغوميالين حر تساوي 6.5 نانو جم/ مل بحساسية مقدارها 906100 ونوعية مقدارها ¢%61.2 و يسمح استخدام نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر بما يلي تشخيص NP من النوع A و8 باستخدام القيمة الحدية لنسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر تساوي 0.045 بحساسية مقدارها 9694.4 ونوعية مقدارها 9682.1؛ و/
أو تشخيص NP من النوع © باستخدام القيمة الحدية لنسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر تساوي 0.087 بحساسية مقدارها 9694.4 ونوعية مقدارها 9695.5. المصطلح “النسبة” كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية على نحو مفضل يعني أنه بين رقمين من
0 نفس النوع؛ مثل مستويات اثنين من المرقمات الحيوية Wy للاختراع الحالي؛ Jie مستويات المركب 9 والمركب 465؛ توجد علاقة يتم عادة التعبير عنها على أنها AT ب" "أ:ب" أو 'نسبة أ إلى ب" على سبيل المثال "نسبة مستويات المركب 509 إلى المركب 465”. على نحو أكثر تفضيلاً “النسبة” تدل على عدد مرات الرقم الأول؛ أي "أ" يحتوي على الثاني؛ أي "ب" حيث النسبة المذكورة ليس بالضرورة رقم صحيح. بعبارات أخرى إذا على سبيل المثال “نسبة مستوى
5 المركب 509 إلى المركب 465” تتعلق بقيمة ممثلة لمستوى المركب 509 تمت قسمتها على قيمة ممثلة لمستوى 465. فيما يتعلق بذلك يجدر ملاحظة أنه يرجع الفضل إلى المخترعون الحاليون في اكتشاف أن العلاقة بين اثنين من المرقمات الحيوية ذات قيمة تشخيصية؛ وبمقارنتها بقيمة حدية مناظرة تسمح بتشخيص مرض نيمان بيك ؛ بشكل أكثر تحديدًاء مرض نيمان بيك من النوع ©. سوف يدرك
0 مبشرة بالتالي أن العلاقة المذكورة بين مستويات اثنين من المرقمات الحيوية By للاختراع الحالي يمكن التعبير عنها و/ أو معالجتها بواسطة العمليات الحسابية المختلفة و/ أو النماذج الحسابية المختلفة يمكن تطبيقها على مستوى واحد أو كلا مستويات اثنين من المرقمات الحيوية. وفقًا لذلك؛ فمن ضمن الاختراع الحالي أن العمليات الحسابية و/ أو النماذج الحسابية المختلفة يتم تطبيقها على واحد أو أكثر من مستويات (مستوى) المرقمات الحيوية المحدد Bag للاختراع الحالي. على
سبيل المثال قيمة مقلوية لنسبة مستوى اثنين من المرقمات الحيوية يمكن استخدامها بدلاً من النسبة في بعض النماذج hy للاختراع الحالي مستوى المرقم الحيوي يتم Lal تحديده في مجموعة تجريبية. كما هو مستخدم في الوثيقة Alla مجموعة تجريبية iS على نحو مفضل عينة من خاضع حيث حالة الخاضع المذكور المصاب بمرض نيمان بيك تكون معروفة. في النموذج
المجموعة التجريبية هي die مريض يتمتع بالصحة. في نموذج آخر مقدار من المرقم الحيوي المذكور is المضاف إلى العينة المذكورة من مريض يتمتع بالصحة قبل تحديد مستوى المرقم الحيوي المذكور في العينة المذكورة من مريض يتمتع بالصحة تشتمل على المرقم الحيوي المضاف المذكور بطريقة الاختراع الحالي. في نموذج آخر المجموعة التجريبية هي عينة من خاضع واحد
0 على الأقل يعاني من حالة مرض نيمان بيك معروفة؛ حالة مرض نيمان بيك المعروفة هذه تشتمل على حالة مرض نيمان بيك حادة؛ خفيفة؛ أو صحية؛ على سبيل المثال pane بمجموعة تجريبية. في نموذج مفضل آخر حالة مرض نيمان بيك تشتمل Wad على نوع مرض نيمان بيك ؛ على نحو أكثر تفضيلاً تشتمل على مرض نيمان بيك من النوع «CB eA وفي نموذج مفضل آخر كذلك تشتمل Wad على الحالة الوراثية بخصوص الطفرات من الجينات؛ المؤثرة في الأمراض
5 المذكورة؛ تشتمل على 50/0001 (NPC2 3 NPC1 أي تشتمل على الخاضع الطفرات متجانسة الزيجوت و/ أو الطفرات المركبة غير متجانسة الزيجوت؛ الخاضع يكون حامل للطفرة. في نموذج مفضل آخر المجموعة التجريبية هي die من خاضع لا يتم علاجه من مرض نيمان بيك . في نموذج مفضل AT كذلك المجموعة التجريبية هي عينة من خاضع مفرد أو مجموعة من العينات من خاضعين مختلفين و/ أو العينات المأخوذة من الخاضع(الخاضعين) عند نقاط زمنية
0 مختلفة. المصطلح "level" أو “مستوى مرقم حيوي” كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية؛ على نحو مفضل يعني تركيز مادة و/ أو عيار sald) على نحو مفضل للمرقم الحيوي By للاختراع وعلى نحو أكثر تفضيلاً لليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509؛ في عينة خاضع. سيتضح للماهرين في المجال أنه في النماذج المحددة للعينة المذكورة ليس من الضروري إخضاعها إلى طريقة
5 الاختراع كعينة غير dallas تشتمل الطريقة على تحديد مستوى المرقم الحيوي المذكور؛ أي يمكن
إخضاع العينة المذكورة؛ على سبيل المثال إلى خطوة ترسيب البروتين» فصل؛ مثل فرز بالطرد المركزي و/ أو HPLC وإخضاعها على التوالي إلى خطوة تحديد المستوى للمرقم الحيوي؛ Jie باستخدام تحليل القياس الطيفي الكتلي. يجب Wal ملاحظة أن كلما تم استخدام المصطلح "8" لمستوى مرقم حيوي فيما يخص مستوى المرقم الحيوي حسب الاختراع الذي يتم تحديده dg
للاختراع Jali يعني "176" لمستوى المرقم الحيوي Gy للاختراع الحالي الذي يتم تحديده بواسطة طرق الاختراع الحالي و والتي يتم استخدامها في العينة التي يتم إخضاعها لطريقة (Bh) للاختراع. يكون مستوى المرقم الحيوي مختلفاً بين الحالات المختلفة لمرض نيمان بيك ؛ إذا تم حسام متوسط مستوى المرقم الحيوي في المجموعات المختلفة التي تكون هامة من الناحية الإحصائية. تتضمن
0 الاختبارات الشائعة ذات الأهمية الإحصائية؛ من بين أشياء أخرى؛ اختبار أ ANOVA (Mann-Whitney «(Wilcoxon نسبة الاحتمالات و (Kruskal-Wallis المرقمات الحيوية؛ بمفردها أو في توليفة؛ توفر قياسات للخطورة النسبية حيث ينتمي الخاضع إلى حالة نمط ظاهر أو dlls أخرى. بالتالي» تكون المرقمات الحيوية للاختراع Jal) نافعة في نموذج للاختراع الحالي كمرقمات لمرض» الفاعلية العلاجية لعقار أو علاج.
5 يعني التعبير " تحديد المستوى" للمرقم الحيوي كما هو مستخدم (lia بشكل مفضل طرق تتضمن التحديد الكمي لكمية من مادة واحدة على الأقل في عينة تم الحصول عليها من خاضع و/ أو التحديد الكمي لكمية من المواد المذكورة المتضمنة في gia من جسم الخاضع؛ مثل اللعاب؛ الدم؛ العقد اللمفية؛ مصل؛ بلازما أو محلول أم و/ أو التحديد الكمي لكمية الماد المذكورة في الخاضع؛ تم اختيار المادة من المجموعة التي تشتمل على المرقم الحيوي.
0 سيتضح للماهرين في المجال أن الكشف عن و/ أو تحديد مستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو Sal 509 في عينة من الخاضع بالتالي يشتمل بشكل مفضل أن سفينغوميالين الموجود في دم خاضع لم يتم تحويله (Lila أو تحويله أو استشقاقه بحيث لا يمكن الكشف عن ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 و/ أو لا يمكن تحديد مستواه بصورة منفصلة عن و/ أو بعيداً عن سفينغوميالين. سوف يدرك الشخص الماهر في الفن أن سفينغوميالين الموجود في عينة
5 من خاضع يخضع لخطوة إزالة الأسيل؛ Jie بواسطة التحلل Ala) في هيدروكسيد ميثانوليك
صوديوم؛ وبالتالي ينتج die صورة غير مرغوب فيها صورة محولة؛ متحولة؛ مشتقة كيميائياً من سفينغوميالين والتي لا يمكن تمييزها عن ليسو سفينغوميالين الحر. يرجع بالتالي الفضل إلى المخترعون الحاليون في اكتشاف أن ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 بعيدًا عن سفينغوميالين يكون مفيدًا في طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك .
في نماذج مفضلة لطريقة الاختراع الحالي تهدف الطريقة إلى الكشف عن و/ أو تحديد مستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 في عينة من خاضع؛ حيث سفينغوميالين الموجود في العينة من الخاضع لا يتم إخضاعه لخطوة تؤدي إلى إزالة الأسيل من سفينغوميالين» على نحو مفضل لا يتم إخضاعه لخطوة تؤدي إلى انشطار شطر الحمض الدهني من سفينغوميالين المتضمن في العينة. في نموذج مفضل آخر لطريقة الاختراع الحالي يكون سفينغوميالين الموجود
0 في العينة من الخاضع غير محول؛ متحول؛ أو مشتق كيميائياً. في نموذج مفضل AT للطريقة للإختراع lal) يتم فصل ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 الموجود في العينة من الخاضع عن سفينغوميالين الموجود في العينة من الخاضع قبل قبل خطوة يمكن أن تؤدي إلى انشطار شطر الحمض الدهني من سفينغوميالين و/ أو قبل الخطوة حيث يتم تحويل» تحول؛ أو اشتقاق سفينغوميالين كيميائيًا. في نموذج مفضل آخر كذلك يتم إجراء خطوة الكشف عن و/ أو
5 تحديد مستوى مرقم حيوي في عينة من الخاضع؛ حيث المرقم الحيوي هو gud سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509؛ بعد فصل باستخدام HPLC بتطبيق تحليل القياس الطيفي الكتلي. في نموذج طرق الاختراع يتم تصنيف الخاضع بالصحة فيما يتعلق بمرض نيمان بيك من النوع م أو 8 إذ لم يكن لديه طفرة للأجزاء الوظيفية لتشفير الجين 50/0101 و/ أو عدم وجود طفرة جين 1 مما يؤدي إلى تقليل أو نقص البروتين المناظر أو نشاطه؛ مما يؤدي إلى وجود أعراض
0 مرتبطة بمرض نيمان بيك من Ags أو 8. يتم اعتبار الخاضع صحيح الجسم بخصوص مرض نيمان بيك ؛ إذا كان الخاضع لا يعاني من أي أعراض مرتبطة بمرض نيمان بيك . علاوة على ذلك في نموذج طرق الاختراع يتم تصنيف الخاضع بالصحة Lad يتعلق بمرض نيمان بيك من النوع ©؛ إذ لم يكن لديه طفرة للأجزاء الوظيفية لتشفير الجين 81001 والجين NPC2 و/ أو عدم وجود طفرة الجين 8001 والجين NPC2 مما
5 يؤدي إلى تقليل أو نقص البروتينات المناظرة أو نشاطهاء مما يؤدي إلى أعراض مرتبطة بمرض
نيمان بيك من النوع ©. في نماذج معينة لطرق الاختراع الحالي؛ يتم الأخذ في الاعتبار تشخيص حامل مرض نيمان بيك من النوع ©. من هذا المنطلق يكون من الضروري ملاحظة أن المريض يكون حاملاً لطفرة كما تم التوضيح سابقاً ولا يعد صحيحاً من حيث معنى الاختراع الحالي رغم أن الحامل المذكور يمكن ألا يعاني من أعراض مرتبطة بمرض نيمان بيك . في نماذج معينة لطرق الاختراع الحالي مرض نيمان بيك يشتمل Load على حامل مرض نيمان بيك من النوع ©. ويكون
من الضروري ملاحظة أن طرق الاختراع تكون مناسبة بالتساوي لتحديد حامل مرض نيمان بيك من النوع ©. تكون طرق الاختراع الحالي مناسبة لتشخيص ما إذا كان الخاضع حامل لمرض نيمان بيك من النوع ©. تكون طريقة الحالي مناسبة أيضًا لتمييز» تشخيص و/ أو التشخيص المختلف سواء كان الخاضع صحيحاً؛ أو حامل مرض نيمان بيك من النوع © أو هو مريض
0 بمرض نيمان بيك ؛ بشكل أكثر تحديدًا على نحو مفضل مربض بمرض نيمان بيك من النوع 8/8 و/ أو مريض بمرض نيمان بيك من النوع ©. سوف يتم الكشف عن الطفرات المذكورة؛ أي طفرات NPC1 (SMPD1 أو (NPC2 إذا خضعت عينة من الخاضع للاختبارات الوراثية لهذه الطفرات كما هو موصوف في الوثيقة الحالية. في نموذج آخر للاختراع الحالي يتم استخدام عينة من خاضع صحيح الجسم كعينات تجريبية أو
5 كصفيف متعادل في طرق الاختراع الحالي. يكون الصفيف المتعادل كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية على نحو مفضل عبارة عن عينة من خاضع صحيح الجسم. مع ذلك سوف يفهم أن الصفيف المتعادل هذا يمكن أن يحتوي على مستوى أساسي من ليسو سفينغوميالين حر Cally 09. في نموذج By للاختراع الحالي يدل مستوى المرقم الحيوي على خاضع يعاني من أو في خطر
0 الإصابة بمرض أو اضطراب. تتم مقارنة مستوى المرقم الحيوي المحدد بواسطة الطريقة ag للاختراع الحالي بمستوى المرقم الحيوي بالمجموعة التجريبية؛ Cus نتيجة المقارنة المذكورة تسمح بتشخيص المرض. بشكل أكثر تحديدًاء مقارنة مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع بمستوى المرقم الحيوي بالمجموعة التجريبية تشتمل على مقارنة مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع بالقيمة
5 الحدية؛ حيث إذا ارتفع مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع؛ زاد أو كان أعلى مقارنة
بالقيمة الحدية؛ يدل ذلك على أن الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة بمرض نيمان بيك ؛ و/ أو على نحو مفضل مرض نيمان بيك من النوع By A مرض نيمان بيك من النوع ©؛ و/ أو حامل مرض نيمان بيك من النوع ©؛ و/ أو حيث إذا انخفض مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أو كان أقل مقارنة بالقيمة الحدية يدل ذلك على أن الخاضع لا يعاني من أو ليس عرضة لخطر الإصابة بمرض نيمان بيك .
ينطبق مثل ذلك إذا نسبة اثنين من المرقمات الحيوية Bg للاختراع الحالي تتم مقارنتها بالقيمة الحدية؛ حيث إذا ارتفع مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع؛ زاد أو كان أعلى مقارنة بالقيمة الحدية؛ يدل ذلك على أن الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة بمرض نيمان بيك ؛ و/ أو على نحو مفضل مرض نيمان بيك من النوع By A مرض نيمان بيك من النوع ©؛ و/
0 أو حامل مرض نيمان بيك من النوع ©؛ على النحو الأكثر تفضيلاً على الإطلاق مرض نيمان بيك من النوع . يعني المصطلح “عرضة لخطر الإصابة بمرض” كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية على نحو مفضل أنه من المحتمل أن يعاني الخاضع من مرض مذكور و/ أو سوف يصاب بمرض مذكور أو أعراض مرتبطة بمرض مذكور؛ على وجه التحديد في حالة عدم استخدام علاج. من هذا
5 المنطلق تم تحديد أن LDS تكون عبارة عن اضطرابات جينية وبالتالي حدوث الحالات النسبية؛ على وجه التحديد يكون الآباء الذين يعانون من مرض مذكور أو الذي يعانين من طفرة تكون السبب في مرض مذكور Sly على الخاضع؛ على سبيل المثال طفل أبوين يعانين من مرض نيمان بيك من النوع © المرضى؛ المعرض لخطر الإصابة بمرض مذكور. سيتم Lad تحديد أن تطور المرض يرتبط بحدوث أعراض وكذلك شدة العرض المذكور. بالتالي؛ يمكن أن يكون
0 الخاضع الذي لا يعاني من أعراض في الوقت الحالي؛ على الرغم من ذلك عرضة للإصابة بالمرض؛ على سبيل المثال» حيث تكون عبارة عن طفرات وراثية لجين؛ التي تسبب مرض؛ لم يحدث أي أعراض أو أي أعراض شديدة. رغم ذلك» يتضح مباشرةً أن الطرق والمرقمات الحيوية للاختراع الحالي» على وجه التحديد إذا تم زيادة مستوى (مستويات) المرقم (المرقمات) الحيوية المذكورة Gg للاختراع الحالي؛ mandy بتشخيص أن الخاضع المذكور يكون عرضة لخطر
5 الإصابة بالمرض بصورة مستقلة عن وجود أو غياب أعراض. بالتالي» تسمح الطرق وفقًا للاختراع
الحالي بتحديد ما إذا كان الخاضع عرضة للمعاناة من مرض نيمان بيك . في نطاق الاختراع الحالي أيضًا استخدام العلاج؛ الحفاظ عليه؛ تقليله؛ زيادته أو عدم استخدامه على أساس ما إذا كان الخاضع عرضة للمعاناة من مرض نيمان بيك أو لا. في نطاق الاختراع الحالي Load تسمح مقارنة مستوى المرقم الحيوي في العينة التي تم الحصول عليها من خاضع بعينة عينة مقارنة مستوى بتحديد حدة مرض نيمان بيك ؛ حيث إذا ارتفع مستوى
المرقم الحيوي في العينة من الخاضع. زاد أو كان أعلى مقارنة بمستوى المجموعة التجريبية؛ يدل ذلك على أن الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة بمرض نيمان بيك بحالة أكثر حدة أو تطور؛ وحيث إذا انخفض مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع أو كان أقل مقارنة بمستوى المجموعة التجريبية يدل على أن الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة بمرض نيمان بيك
0 بحالة أقل حدة أو تطور. في نموذج آخر للاختراع الحالي إن مقارنة مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع بمستوى المجموعة التجريبية تشتمل على مقارنة مستوى المرقم الحيوي في الخاضع المذكور بمستوى المرقم الحيوي الذي تم الكشف عنه في عينة من العينات التجريبية؛ حيث إذا ارتفع مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع. زاد أو كان أعلى مقارنة بالعينة التجريبية يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من و/ أو عرضة لخطر الإصابة بمرض
5 ثيمان بيك ؛ و/ أو ارتفع مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع, زاد أو كان أعلى مقارنة بالعينة التجريبية يدل ذلك على أن الخاضع الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة بمرض نيمان بيك بحالة أكثر حدة أو تطور. العينة التجريبية المذكورة على نحو مفضل يتم اختيارها من مجموعة تشتمل على خاضعين أصحاء؛ خاضعين يعانين من مرض نيمان بيك أو يمكن إصابتهم بأعراض مرض نيمان بيك » خاضعين تم اختبارهم بصورة موجبة بالنسبة لطفرة أو توليفة من
0 الطفرات من الجينات 510/001 0001 3 Gus (NPC2 الطفرة أو التوليفة من الطفرات من الجينات 51/001 10061 و0002" SL على احتمالية إصابة الخاضع بمرض نيمان بيك من النوع © بحالة شديدة أو أقل شدة أو تطور. في نموذج آخر للاختراع الحالي أنه يتم تحديد مستوى المجموعة التجرببية في عينة من مجموعة تجريبية؛ حيث اختياريًا تتم إضافة ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 إلى العينة من المجموعة التجريبية بمقدار معين قبل تحديد مستوى ليسو
5 مفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 في العينة من المجموعة التجريبية.
يرجع الفضل إلى المخترعون الحاليون في أنه يمكن إنشاء طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع حيث تشتمل الطريقة على الكشف عن مرقم حيوي في die من خاضع؛ Cus المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509؛ على نحو مفضل تشتمل كذلك على تحديد مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع؛ eg نحو أكثر تفضيلاً تشتمل كذلك على مقارنة مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع بالقيمة الحدية؛ مما يوضح حساسية عالية؛ أي حساسية تساوي على الأقل 9699.0 9699.1 9699.2 9699.3 9699.4 9699.5 06. %99.7 9699.8؛ 9699.9 أو 96100. بعبارات أخرى حساسية؛ والتي تعني النسب الموجبة الفعلية والتي تم تحديدها بشكل صحيح كما هي مرتفعة؛ مما يعني أن نسبة مرضى نيمان بيك تم تحديدهم بصورة صحيحة بأنهم مصابون بالمرض مرتفعة كما تم التوضيح سابقاً. على 0 النقيض؛ في الاختبار الاحصائي كما تم الوصف هنا تعني النوعية نسبة العوامل السلبية التي تم تحديدها بشكل صحيح كعينات مقارنة سالبة؛ بعبارة أخرى نسبة المرضى الأصحاء الذين تم تحديد عدم إصابتهم بمرض نيمان بيك . سيدرك الماهرون في المجال أن التوقع الأمثل للاختبار التشخيصي Jie في بعض النماذج لطرق Bay للاختراع الحالي بهدف dag عام لتحقيق 96100 من الحساسية؛ أي توقع يكون جميع المرضى مصابين بالمرض؛ مثل مرض نيمان بيك أو يمكن 5 إصابتهم بالمرض المذكور؛ باعتبارهم مصابين بالمرض أو معرضين لخطورة المعاناة من المرض المذكور؛ على الترتيب. في نموذج طرق الاختراع الحالي تُفضل نوعية مقدارها على الأقل 9680.0 9685.0 9690.0 0+ %97.5 9699.0 %99.1 9699.2 9699.3 9699.4 9699.5 9699.6 07. %99.8 9699.9 أو 96100. في نموذج آخر للاختراع الحالي تسمح طرق الاختراع 0 الحالي الطرق بتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع بصورة مستقلة عن حالة تطور مرض نيمان بيك في الخاضع. بشكل أكثر تحديدًاء تسمح طرق الاختراع Jal بتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع يعاني من حالة مبكرة من مرض نيمان بيك كما في خاضع يعاني من حالة مرض نيمان بيك متقدمة أو متطورة. Sale يتم قياس قدرة الطريقة على تشخيص مرض نيمان بيك ؛ بشكل أكثر تحديدًا مرض نيمان بيك 5 .من النوع A و8 أو مرض نيمان بيك من النوع © أو Jala مرض نيمان بيك من النوع ©؛ بطريقة
صحيحة كطريقة Galil الحساسية للطريقة؛ تكون نوعية الطريقة أو المساحة أسفل منحني خواص تشغيل المستقبل (يتم الإشارة إليه هنا أيضًا 'منحنى ROC curve '). يكون منحنى ROC عبارة عن رسم بياني للمعدل الموجب الحقيقي ضد المعدل الموجب الخاطئ لقيم القطع المحتملة المختلفة للطريقة التشخيصية. يظهر منحنى ROC العلاقة بين الحساسية والنوعية. تكون الحساسية عبارة عن نسبة المعدلات الموجبة الحقيقة والمتوقعة أن تكون موجبة بواسطة SLAY) بينما تكون النوعية هي نسبة المعدلات السالبة الحقيقة المتوقع أن تكون سالبة بواسطة الاختبار. يمكن أن يوفر منحنى ROC حساسية الاختبار كدالة على 1-نوعية. كلما زادت المساحة تحت المنحنى ROC كلما aly قدرة القيمة التنبؤية للاختبار. بالتالي؛ تكون الزيادة في الحساسية مصحوية بانخفاض في النوعية. كلما اقترب المنحنى من المحور الأيسر ثم الحافة العلوية لحيز (ROC كلما زادت دقة الاختبار. 0 على النقيض» كلما اقترب المنحنى من 45- درجة قطرية للرسم البياني ROC كلما انخفضت دقة الاختبار. بالتالي؛ تكون المساحة أسفل ROC عبارة عن مقياس لدقة الاختبار. تعتمد دقة الاختبار على كيفية قيام الاختبار بفصل المجموعات المختبرة بصورة جيداً إلى تلك التي تتضمن والتي لا تتضن المرض المذكور في الاختراع. تمثل المساحة أسفل المنحنى ( يتم الإشارة إليه هنا Load بتعبير ("AUC 1 طريقة تامة؛ بينما تمثل مساحة 0.5 طريقة أقل نفعاً. بالتالي؛ يكون للطرق التشخيصية 5 المفضلة للاختراع الحالي AUC أكبر من 0.50؛ ويكون للطرق الأكثر تفضيلاً 6لا أكبر من
9 ويكون لأغلب الطرق المفضلة AUC أكبر من 0.97. تكون المقاييس النافعة والمناسبة الأخرى للانتفاع من الطريقة عبارة عن قيمة تنبؤية موجبة وقيمة تنبؤية سالبة. تكون القيمة التنبؤية الموجبة عبارة عن نسبة القيم الموجبة الفعلية التي يتم اختبارها موجباً. بينما تكوت القيمة التنبؤية السالبة عبارة عن نسبة القيم السالبة الفعلية التي يتم اختبارها سالباً. 0 سيدرك الماهرون في المجال أنه رغم كون النوعية و/ أو الحساسية لطرق وفقًا للاختراع الحالي مرتفعة كما ورد سابقاً وتم تحديدها كما تم الوصف سابقاً في الأمثلة الواردة هناء لا يمكن استبعاد الحالات الفردية حيث يعاني المريض من مرض نيمان بيك من الاختبار السالبة الخاطئ أو حيث يتم المريض غير المصاب بمرض نيمان بيك صورة موجبة خاطئة باستخدام طريقة للاختراع. بالتالي سيدرك الماهرين في المجال مباشرةً أنه وفقًا لطرق الاختراع الحالي؛ حيث تتم مقارنة مستوى المرقم 5 الحيوي بالقيمة الحدية حيث يتم استخدام المقارنة المذكورة بالقيمة الحدية المذكوة لتشخيص مرض؛
تشتمل على كل (gly واحد من مرض نيمان بيك من النوع By A مرض نيمان بيك من النوع © وحامل مرض نيمان بيك من النوع 0؛ تمثل القيمة الحدية المذكورة مستوى المرقم الحيوي المذكور والتي تميز على وجه التحديد حالة مرض عن أخرى؛ أي التي تميز مستوى المرقم الحيوي الذي يشير إلى أن الخاضع يعاني مرض نيمان بيك من النوع 8 أو 8 عن مستوى المرقم الحيوي الذي يشير إلى أن الخاضع يكون حامل مرض نيمان بيك من النوع ©؛ و/ أو من مستوى و/ أو 8 قيمة في الخاضع صحيح الجسم. بذلك؛ يتضح للماهرين في المجال أنه وفقًا لطرق الاختراع الحالي؛ حيث (Sa عدم استبعاد الطريقة التي تشخص الحالات الفردية مرض نيمان بيك من النوع BoA مرض نيمان بيك من النوع © و/ أو حامل مرض نيمان بيك من النوع © حيث يتم اختبار المريض الذي لا يعاني من مرض نيمان بيك بصورة موجبة خاطئة؛ أو حيث يتم تشخيص النوع و/ أو الحالة 0 بصورة غير صحيحة باستخدام طريقة الاختراع. مع الأخذ في الاعتبار الحالات المذكورة Leng يتم تحديد نوعية وحساسية الطريقة Gy للاختراع ola ستكون النوعية والحساسية أقل من القيم المذكورة سابقاً. رغم ذلك؛ يدرك الماهر في المجال أن النوعية المرتفعة المذكورة والحساسية المرتفعة المذكورة كما تم التوضيح سابقاً لم يتم وصفها من قبل كطريقة لتشخيص مرض Glan بيك . بالتالي يكون من الضروري ملاحظة أنه رغم اختلاف 5 الحساسية والنوعية لطريقة الاختراع الحالي إذا كانت مجموعات المريض غير المذكورة في جزء (Jal) أي تغيير عدد المرضى؛ ستخضع لطرق الاختراع الحالي؛ فيعتقد المخترعون بشدة عدم وجود طريقة معروفة في المجال السابق تستخدم؛ على وجه الخصوص تستخدم المرقمات الحيوية لتحقيق النوعية والحساسية المرتفعة مقارناً بالطرق Ey للاختراع الحالي. ويكون ذلك صحيحاً على وجه التحديد حيث يسمح حد الكشف عن طرق الاختراع الحالي بتحديد مستوى ليسو سفينغوميالين حر 0 ولمركب 509 في خاضعين أصحاء. وفقًا لذلك؛ يتم اختبار الخاضع المريض بصورة سالبة خاطئة باستخدام طرق الاختراع الحالي التي تم اختبارها بصورة سالبة خاطئة بسبب أن مستوى المرقم الحيوي في العينة التي تم الحصول عليها من الخاضع المريض المختبر بصورة سالبة خاطئة المذكور تكون مرتفعة مثل مستوى المرقم الحيوي في عينة من الخاضعين الأصحاء. على وجه التحديد ويكون من الضروري ملاحظة أنه لم يتم اختبار الخاضع المختبر بصورة سالبة المذكور بصورة سالبة بسبب أن 5 مستوى المرقم الحيوي يكون منخفض للغاية للتحديد بواسطة لطريقة الاختراع الحالي.
"حد "CaaS لمادة مثل ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509؛ كما هو مستخدم في الوثيقة AW وبكون بشكل مفضل Ble عن مستوى المادة المحدد بواسطة طريقة تحديد مستوى المادة؛ حيث يكون المستوى أقل أو منخفض عن حد الكشف المذكور ولا يمكن تحديده بواسطة الطريقة المذكورة. بالتالي يتضح مباشرةً أن " القيمة الحدية" و'حد الكشف”؛ كما هو مستخدم هناء يُفضل ألا تكون متماثلة بشكل ضروري؛ رغم أن كلاها يعكس مستوى محدد للمادة؛ على سبيل المثال مرقم حيوي للاختراع الحالي. يتضح Sale أنه على النقيض سيتم اختيار القيمة الحدية بشكل مفضل بحيث تكون الانتفائية والحساسية للطريقة مرتفعة قدر الإمكان على النقيض يُمثل حد الكشف مستوى مطلق للمرقم الحيوي للاختراع الحالي والذي يعكس أدنى مستوى من المرقم الحيوي والذي يمكن الكشف die باستخدام طريقة لتحديد مستوى المرقم الحيوي المذكور. بالتالي يتضح مباشرةً أن حد 0 الكشف يعتمد على طريقة تحديد مستوى sale وعلى مستوى المادة المراد تحديده بواسطة الطريقة. سيدرك الماهر في المجال مباشرةً أن حد الكشف المرتفع؛ أي الذي يزيد عن القيمة الحدية النمطية من المحتمل أن يؤدي إلى انخفاض حساسية الطريقة حيث تعتمد نسبة القيم الموجبة الصحيحة والمتوقع أن تكون موجبة بواسطة الاختبار أيضًا على ما إذا تم تحديد مستوى المرقم الحيوي للقيم الموجبة الصحيحة المذكورة. بعبارة أخرى؛ إذا كان حد الكشف أعلى من القيمة الحدية النمطية؛ 5 فيكون ill الموجبة الصحيحة مستوى مرقم حيوي أعلى قليلاً من القيمة الحدية ولا يمكن تميزه عن القيم السالبة الحقيقة التي يكون لها مستوى مرقم حيوي أقل من القيمة الحدية حيث لا يمكن تحديد مستوى المرقم الحيوي لكلا القيم الموجبة الصحيحة التي يكون لها مستوى مرقم حيوي أعلى قليلاً من القيمة الحدية و القيم الموجبة التي يكون لها مستوى مرقم حيوي أقل من القيمة الحدية. بالتالي يتضح مباشرة أن حد الكشف المنخفض يعد مميزاً. بالتالي يوضح المخترعون أن حد الكشف المنخفض 0 يسمح باستخدام طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع تشتمل على خطوة تحديد مستوى مرقم حيوي الموجود في العينة بمعدل انتقائية وحساسية مرتفع. تكون "القيمة الحدية النمطية" كما هو مستخدم هناء بشكل مفضل عبارة عن القيمة الحدية كما تم الوصف هنا ويكون لطريقة استخدام
القيمة الحدية النمطية المذكورة أعلى انتقائية وحساسية. يتمثل نموذج لطرق الاختراع الحالي في الاشتمال على خطوة التحقق من الطريقة المذكورة بواسطة 5 تشخيص مرض أو اضطراب»؛ بشكل مفضل مرض نيمان بيك في خاضع بواسطة طريقة الاختراع
الحالي؛ خطوة تشخيص المرض أو اضطراب؛ بشكل مفضل مرض نيمان بيك ؛ في خاضع بواسطة الاختبار الوراثي؛ تشتمل على تسلسل الجين؛ بشكل مفضل تسلسل طفرة الجين التي تعرف للماهرين في المجال بالتسبب في المرض أو اضطراب؛ بشكل أكثر تفضيلاً متوالية تشفير الجين 81061 والجين NPC2s في dlls مرض نيمان بيك من النوع © وحامل مرض نيمان بيك من النوع والجين 500001 في حالة مرض نيمان بيك من النوع By A ومقارنة نتائج الطريقة المذكورة الاختبار الوراثي المذكور. يعد الخاضعين الأصحاء كما هو مستخدم هناء بشكل مفضل أصحاء بالنسبة لمرض أو اضطراب إذا كان الخاضع المذكور لا يعاني من أعراض مرتبطة بمرض مذكور أو اضطراب وإذا كانت نتيجة الاختبار الوراثي لا تظهر طفرات جين معروفة للماهرين في المجال بالتسبب في المرض أو الاضطراب. يتضح أيضًا أن الخاضعين الأصحاء يكونو خاضعين تم 0 اختبارهم بشكل موجب حيث لا يعانين من مرض نيمان بيك . في نموذج مفضل يكون الخاضعين الأصحاء Ble عن خاضع غير حامل لمرض plan بيك ؛ على نحو أكثر Saati غير حامل لمرض نيمان بيك من النوع . يعني التعبير “تحديد جودة Alla مرض نيمان بيك “في خاضع كما هو مستخدم هناء بشكل مفضل تصنيف سمة المرقم الحيوي لخاضع تم اختياره من المجموعة التي تشتمل على تحديد أو الكشف 5 عن وجود أو غياب مرض نيمان بيك في الخاضع؛ لتوقع بدء أو خطر الإصابة ب10/ا في الخاضع؛ لتحديد فترة مرض نيمان بيك في خاضع؛ لتحديد و/ أو توقع شدة مرض نيمان بيك في خاضع؛ لتحديد ما إذا كان الخاضع يعاني من Ala مبكرة من مرض نيمان بيك أو are Ala نيمان بيك متقدمة أو متطورة أو لتحديد ما إذا كان مستوى المرقم الحيوي في خاضع يتغير بدرجة كبيرة بمرور الوقت. 0 يشير التعبير" التحكم في معالجة الخاضع” أو “التحكم في الخاضع” كما هو مستخدم هناء بشكل مفضل إلى سلوك الإكلينيكي أو الطبيب التالي لتحديد حالة مرض نيمان بيك . على سبيل المثال؛ إذا كانت نتيجة الطريقة وفقًا للاختراع الحالي غير حاسمة أو وجود سبب يجعل تأكيد الحالة ضرورياً؛ فيمكن أن يطلب الطبيب اختبارات جديدة؛ مثل اختبار وظيفة البروتينات المصابة و/ أو متوالية تشفير الجين 51/001 20001 والجين (NPC2 على الترتيب. Yay من ذلك»؛ إذا كانت الحالة pis 5 إلى أن معالجة مرض نيمان بيك تكون ملائمة؛ فيمكن أن يضع الطبيب جدول للخاضع لعلاج
مرض نيمان بيك من النوع A و8 أو مرض نيمان بيك من النوع ©. على غرار ذلك؛ إذا كانت
الحالة سالبة أو إذا أوضحت النتائج أن المعالجة ناجحة؛ فلا تكون هناك dala لتحكم آخر. رغم
ذلك سيدرك الماهرون في المجال مباشرةً أنه بالإضافة إلى علاج الجين فيجب استخدام أي علاج مستخدم طول العمر في مريض مرض نيمان بيك . علاوة على ذلك يشتمل نموذج الاختراع الحالي
للتحكم في معالجة الخاضع على معايرة جرعة من عقار مستخدم كعلاج لمرض نيمان بيك ؛ مثل وحدات إنزيم ناتج عودة الارتباط الجيني مستخدم في (ERT تم إعطاؤه إلى مريض. في بعض نماذج
طرق الاختراع الحالي حيث يتم تحديد مستوى المرقم الحيوي الموجود في عينة تم الحصول عليها
من خاضع عند نقاط زمنية متعددة؛ أو مقارنته بمستويات أخرى من المرقم الحيوي؛ القيمة الحدية
و/ أو مستوى المرقم الحيوي المذكور في عينة المقارنة؛ فيقوم الماهر باستخدام أو عدم استخدام
0 علاج؛ أو تعديل علاج مستخدم بالفعل لمعالجة أو عدم معالجة؛ أو استمرار معالجة مرض نيمان في نطاق الاختراع الحالي يقوم الماهر باستخدام جرعة و/ أو الحفاظ على جرعة أو تعديل جرعة؛
مثل استخدام جرعة أو جرعة مرتفعة؛ أي زيادة جرعة؛ إذا اظهرت هذه المقارنة لمستوى المرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية على سبيل المثال أن مستوى المرقم الحيوي
5 المذكور و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية أكبر من على سبيل المثال؛ القيمة الحدية؛ أي تم تشخيص أن المريض يعاني من مرض نيمان بيك ؛ أو أن المستوى و/ أو النسبة المحددة في
نفس المريض مبكراً يكون منخفضاً أو ما شابه ذلك؛ أي يكون العلاج المستخدم غير كافياً؛ أي لا
يؤدي إلى تقليل المستوى. من ناحية أخرى يقوم الماهر في المجال باستخدام أو عدم استخدام الجرعة
أو الحفاظ على أو تقليل الجرعة؛ Jie عند استخدام الجرعة أو تقليل الجرعة؛ أي تقليل الجرعة؛ إذا
0 كانت تلك المقارنة توضح أن مستوى و/ أو نسبة مستوى اثنين من المرقمات الحيوية على سبيل المثال أن مستوى المرقم الحيوي المذكور و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية أقل من
على سبيل المثال؛ القيمة الحدية؛ يتم تشخيص عدم إصابة المريض بمرض نيمان بيك ؛ أو أن المستوى و/ أو النسبة المحددة في نفس المريض مبكراً يكون laine أي يكون العلاج المستخدم
كافياً أي تؤدي الجرعة إلى تقليل المستوى. في نموذج للاختراع الحالي يكون المستوى المرتفع نسبياً
5 .من ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 بناءاً على المقارنة المذكورة hase على استخدام
جرعة مرتفعة من إنزيم ناتج عودة الارتباط الجيني مستخدم في ERT و/ أو يكون مستوى منخفض نسبياً من ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 بناءً على بناءاً على المقارنة المذكورة مؤشراً على استخدام deja منخفضة من إنزيم ناتج عودة الارتباط الجيني مستخدم في (ERT رغم ذلك سيتضح مباشرةً أن الماهر في المجال سيأخذ في الاعتبار تاريخ المريض؛ أي يقوم الماهر في المجال بالتحكم في معالجة الخاضع لمريض يعاني من مرض نيمان بيك وتتم معالجته بحيث يكون مستوي المرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية أقل من القيمة الحدية؛ على سبيل المثال» لن يقرر توقف المعالجة بدلاً من تقليل الجرعة وزيادة الفترة الزمنية بين الاستخدامات
الأخرى لطرق الاختراع الحالي. يمكن تحديد فترة مرض نيمان بيك بواسطة الطريقة وفقًا للاختراع الحالي بواسطة تحديد مستوى المرقم 0 الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية في العينة من الخاضع عند نقاط زمنية مختلفة في مسار المرض. ويكون من الضروري ملاحظة أن الاستخدام المفرد لطريقة تشخيص مرض نيمان بيك Gy للاختراع الحالي تسمح بتشخيص مرض نيمان بيك وفي نماذج محددة تشتمل على خطوة التحكم في معالجة الخاضع على أساس تشخيص ما إذا كان الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة بمرض نيمان بيك . إذا تم اختبار عينة الخاضع التي تم إخضاعها بعد ذلك 5 لطريقة الاختراع الحالي بشكل موجب pana يعاني من أو معرض لخطر تطوير مرض نيمان بيك فيعلم الأطباء الماهرين كيفية اخذ قرار يتعلق بالتحكم في معالجة الخاضع؛ أي معالجة الخاضع؛ مثل استخدام جرعة محددة من إنزيم بالنسبة ل (ERT يتضح مباشرةً أنه بصورة مستقلة عن قرار الأطباء الماهرين حول كيفية التحكم في معالجة الخاضع يمكن أن يقرر الطبيب الماهر الاستخدام الإضافة الواحد على الأقل لطريقة Gg للاختراع الحالي في نقطة زمنية لاحقة, بالتالي يتمثل نموذج 0 لللاختراع الحالي في مستويات المرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية المحددة عند نقاط زمنية Cus (Aelita تعني النقاط الزمنية المختلفة مقارنة نقطتين زمنيتين على الأقل. دون الرغبة في التقيد بنظرية يجد المخترعون الحاليون أنه (ginal Gg المرقم الحيوي للاختراع الحالي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية في صورة العينات يمكن أن يرتبط مريض محدد بشدة المرض في المريض المذكور عند النقطة الزمنية للعينة التي تم أخذها من المريض. ومن 5 ثم يتضح مباشرة أن المستوى المرتفع للمرقم الحيوي و/ أو النسبة المرتفعة لمستويات اثنين من
المرقمات الحيوية المحددة في العينة في نقطة زمنية لاحقة مقارنة بمستوى المرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية المحددة في العينة لنقطة زمنية مبكرة يكون مؤشر على حالة
شديدة للغاية لخاضع عند نقطة زمنية لاحقة مقارنة بحالة الخاضع عند نقطة زمنية مبكرة. يكون المستوى المنخفض للمرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية المحددة في
العينة في نقطة زمنية لاحقة مقارنة بمستوى المرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية للمرقم الحيوي المحدد في العينة لنقطة زمنية مبكرة يشير إلى حالة أقل حدة لخاضع عند
نقطة زمنية لاحقة مقارنة بحالة الخاضع عند نقطة زمنية مبكرة. بالتالي؛ في جانب يوفر الاختراع الحالي طريقة لتحديد فترة مرض نيمان بيك في خاضع تشتمل على خطوة تحديد عند نقاط زمنية متعددة مستوى المرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية الموجود في عينة
0 من الخاضع؛ حيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509. في جانب آخر يتعلق الاختراع طريقة لتحديد فاعلية معالجة واحدة على الأقل تم استخدامها على خاضع تم اختباره
بشكل موجب يعاني من أو عرضة لخطر تطوير مرض نيمان بيك تشتمل على خطوة تحديد عند
نقاط زمنية متعددة مستوى المرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية الموجود
في عينة من الخاضع؛ حيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509. سيتضح
5 للماهرين في المجال مباشرةً أن طرق الاختراع الحالي بالتالي تسمح باختيار علاج و/ أو ضبط الجرعات و/ أو جرعة العلاج الذي تم اختياره على أساس نتائج طريقة الاختراع. على سبيل المثال
إذا وضع جدول للخاضع لعلاج مرض نيمان بيك فيمكن استخدم طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك
في خاضع Gy للاختراع الحالي كل 3 شهور وستتم مقارنة مستويات المرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية المحددة بالتالي Lad مقارنة بتحديد فاعلية المعالجة
0 «(لمعالجات) و/ أو العلاج / العلاجات المستخدمة إلى الخاضع. إذا وصل الخاضع إلى حالة؛ حيث يتم الحفاظ على مستوى ثابت للمرقم الحيوي و/ أو نسبة ثابتة لمستويات اثنين من المرقمات الحيوية
بمرور الوقت يمكن تقليل مرات استخدام طريقة تشخيص مرض نيمان بيك في خاضع وفقًا للاختراع
الحالي إلى كل 6 أشهر . إذا تغيرات جرعة العلاج؛ يتم تقليل وحدات إنزيم ناتج عودة الارتباط الجيني المستخدمة في ERT أو زيادتهاء ويجب إعادة ضبط مرات استخدام طريقة تشخيص مرض نيمان
5 بيك في خاضع By للاختراع الحالي كل 3 أشهر. من خلال مقارنة المستويات المحددة للمرقم الحيوي و/ أو نسب مستويات اثنين من المرقمات الحيوية في العينات من الخاضع سيدرك الطبيب
الماهر ما إذا كان مستوى المرقم الحيوي يزداد؛ ينخفض أو ما إذا كان يتم الحفاظ على مستوى ثابت للمرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية بمرور الوقت. وفقًا لذلك» يمكن أن يقرر الطبيب الماهر تقليل جرعة العلاج؛ مثل وحدات إنزيم ناتج عودة الارتباط الجيني مستخدم في 1 ؛ لزيادة جرعة العلاج؛ أو للحفاظ على جرعة العلاج Gy لمقارنة مستويات المرقم الحيوي و/ أو نسب مستويات اثنين من المرقمات الحيوية المحددة بالطريقة Gy للاختراع الحالي. يكون الانخفاض بنسبة حوالي 9660 من مستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 في فترة 12 شهر مؤشراً على العلاج الناجح لمرض نيمان بيك ؛ حيث يعني الانخفاض كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية» على نحو مفضل أنه تمت مقارنة مستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 9 المحدد بواسطة الطريقة Gg للاختراع الحالي المحدد عند نهاية الفترة الزمنية بمستوى ليسو 0 مفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 المحدد بواسطة الطريقة وفقًا للاختراع all المحدد عند بدء الفترة الزمنية المذكورة. وفقًا لذلك يمكن أن يقرر الطبيب الماهر تقليل جرعة العلاج المستخدم أو الحفاظ على جرعة العلاج. إذا كان انخفاض مستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 ضعيفاً بدرجة كبيرة يمكن أن يقرر الطبيب الماهر زيادة جرعة العلاج . يتسم المخترعون الحاليون بالقدرة على تمييز أن انخفاض مستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 يترابط مع فاعلية 5 العلاج . كلما كان الانخفاض في مستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 شديداً في الفترة الزمنية؛ Jie 12 شهر؛ كلما كان العلاج ie lanl على سبيل المثال SRT (ERT أو علاج يعتمد على مرافق. بالتالي يتمثل نموذج آخر للاختراع الحالي في أن طريقة الاختراع الحالي تكون لمقارنة فاعلية علاج أو اثنين على الأقل من العلاجات المستخدمة لخاضع. الشخص الماهر في الفن بالتالي سوف يدرك أن ؛ أي مسار مرض نيمان بيك ؛ كما بالتالي يدرك 0 الماهرون في المجال أن تطورء أي فترة مرض نيمان بيك ellie فاعلية العلاج في خاضع مفرد (Ka مراقبتها بواسطة التحديد المتكرر لمستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية في العينات من الخاضع. في جانب آخر يتعلق الاختراع بطريقة لتحديد فاعلية معالجة واحدة على الأقل تم استخدامها على خاضع تم اختباره بشكل موجب يعاني من أو عرضة لخطر تطوير مرض نيمان بيك تشتمل على 5 خطوة تحديد عند نقاط زمنية متعددة مستوى المرقم الحيوي و/ أو نسبة مستوى اثنين من المرقمات
الحيوية الموجودة في die من الخاضع؛ Cus المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509. بالاشتراك مع ما تم توضيحه سابقاً بالنسبة للتحكم في معالجة الخاضع سيدرك الماهرين في المجال مباشرةً أنه يمكن مقارنة فاعلية معالجة واحدة أو توليفة من معالجتين على الأقل باستخدام طرق الاختراع الحالي. بالتالي من المحتمل اختبار ومقارنة العديد من العقاقير الجديدة؛ صور الجرعة؛ الجرعات أو معالجات مرض نيمان بيك بواسطة طريقة الاختراع الحالي. في نموذج للاختراع الحالي تكون طريقة تشخيص مرض نيمان بيك By للاختراع الحالي معتمدة على ما إذا كان الخاضع يعاني من أو لم تتم معالجته مسبقاً من مرض نيمان بيك . بالتالي يمكن أن تكون العينة التي تم الحصول عليها لخاضع عبارة عن عينة تم الحصول عليها من الخاضع تمت معالجته مسبقاً من مرض نيمان بيك كذلك عينة تم الحصول عليها من الخاضع لم تتم معالجته
مسبقاً بالنسبة لمرض نيمان بيك . يتمثل نموذج آخر للاختراع Mall تشتمل طريقة الاختراع الحالي على خطوة التحكم في معالجة الخاضع و/ أو تحديد مستوى المرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية في العينة من الخاضع بعد التحكم في الخاضع. يمكن أن يعتمد علاج الخاضع المذكور على تشخيص ما إذا كان الخاضع يعاني من أو معرض لخطر الإصابة بمرض نيمان بيك ؛ عند الكشف عن المرقم الحيوي في عينة تم الحصول عليها من خاضع بعد التحكم في
5 الخاضع؛ أو عند تحديد مستوى المرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية في العينة من الخاضع بعد التحكم في الخاضع. رغم ذلك سيدرك الماهرون في المجال أن عينة بعض من المرضى غير المصابين بمرض نيمان بيك أو من بعض المرضى الذين تمت معالجتهم بنجاح من مرض نيمان بيك ستظهر مستوى ليسو مفينغوميالين حر و/ أو COA 509 أقل من حد الكشف.
0 دون الرغبة في التقيد بنظرية يفترض المخترعون الحاليون أن مستوى ليسو سفينغوميالين حر ومستوى المركب 509 ونسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى sud سفينغوميالين حر؛ على الترتيب؛ الموجود في عينة من خاضع يرتبط أيضًا مع حدة المرض في خاضع يعاني من مرض نيمان بيك Lad ٠ يخص ذلك يفترض المخترعون الحاليون أنه على الرغم من أنه؛ في الأساس؛ مستوى ليسو سفينغوميالين حرء مستوى المركب 509 و/ أو نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو
5 مفينغوميالين حر يكون مختلقًا في أشخاص محددين؛ ويشكل أكثر تحديدًا يمكن أن يكون مختلقًا في
أشخاص محددين يكون لهم نفس الطفرة (الطفرات)؛ كلما كان مستوى ليسو سفينغوميالين حر مستوى المركب 509 ونسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حرء على الترتيب؛ مرتفعًا زادت حدة فترة مرض نيمان بيك من حيث المتوسط الاحصائي lig للدرجة الإكلينيكية. بالتالي يرتبط مستوى ليسو سفينغوميالين حر؛ مستوى المركب 509 و/ أو نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حرء على الترتيب؛ بحدة مرض نيمان بيك حيث يتم اختبار المرضى بصورة موجبة بالنسبة للطفرات المختلفة للجينات (NPC2 3 NPC1 (SMPD1 على الترتيب؛ والمعروف أنها تتسبب بشكل عام في فترة متوسطة أو فترة شديدة من مرض نيمان بيك ؛ يرتبط مستوى ليسو سفينغوميالين حرء مستوى المركب 509 و/ أو نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر؛ على الترتيب؛ المحدد في المرض المذكور Liban] بالشدة المرتبطة عادة بتلك 0 الطفرة. بالتالي يتعلق نموذج آخر لجوانب أخرى للاختراع الحالي بطريقة لتحديد حدة مرض نيمان بيك في خاضع تشتمل على خطوة أ) تحديد مستوى المرقم الحيوي و/ أو نسبة levels اثنين من المرقمات الحيوية الموجود في عينة من الخاضع حيث المرقم الحيوي هو ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 وخطوة 5 _ب) تحديد حدة مرض نيمان بيك ؛ على سبيل المثال بواسطة مقارنة مستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية في خاضع على نحو مفضل المحدد بواسطة طريقة الاختراع الحالي بالدرجة الإكلينيكية. بناءاً على ذلك يكون من الضروري ملاحظة أنه إذا تم تحديد مستوى ليسو سفينغوميالين حر؛ مستوى المركب 509 و/ أو نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر» على الترتيب؛ 0 في العينات من مرضى يعانون من مرض نيمان بيك تظهر الطفرة المرتبطة sale بمسار oar نيمان بيك أكثر حدة بناءً على متوالية الجين المناظر (متماثل الزيجوت ومركب مغاير الزيجوت) الخاضع لطريقة الاختراع الحالي ويكون متوسط مستوى ليسو سفينغوميالين حرء المركب 509 و/ أو نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر على الترتيب؛ أكبر من متوسط مستوى ليسو سفينغوميالين حر؛ المركب 509 و/ أو نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو
سفينغوميالين حر؛ على الترتيب؛ المحدد في العينات من مرضى يعانون من مرض نيمان بيك تظهر الطفرة المرتبطة عادة بمسار مرض نيمان بيك JST خفة بناءً على متوالية الجين Ohl) تطبيق نفس الطريقة. "الطفرة المرتبطة عادة بفترة مرض نيمان بيك أكثر حدة” كما هو مستخدم في adsl الحالية على نحو مفضل معروف أنها تسبب فترة مرض نيمان بيك أكثر حدة - ويكون ذلك صحيح على وجه الخصوص في حالة كون الخاضع متماثل الزيجوت كما بالنسبة للطفرة المذكورة. بالتناظر مع نموذج يتم تحديد متوسط مرتفع لمستوى ليسو سفينغوميالين حرء المركب 509 و/ أو نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى gud سفينغوميالين حر؛ على الترتيب؛ في الجينات متماثلة الزيجوت مقارنة بالطفرات متماثلة الزيجوت المرتبطة عادة بفترة مرض نيمان بيك أكثر خفة. she على ذلك المرضى ممن لديهم مركب مغاير الزيجوت مرتبط عادة بفترة مرض نيمان بيك أكثر حدة 0 لديهم مستوى أقل بكثير من مستوى gud مفينغوميالين gn مستوى المركب 509 و/ أو نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حرء على الترتيب؛ من تلك متماثلة الزيجوت. سيعلم ذوي المهارة في المجال أن الدرجات الإكلينيكية تصنف حدة مرض نيمان بيك أو أعراض أو جميع أعراض المرض. بالتالي يتمثل نموذج لطريقة للاختراع الحالي في أن فترة مرض نيمان بيك في مريض تكون متوقعة وأكثر شدة على وجه التحديد لمرض نيمان بيك وبتم تحديدها على أساس
5 مستوى المرقم الحيوي المحدد وفقًا لطريقة الاختراع الحالي. سوف يدرك الشخص الماهر في الفن أن مستوى المرقم الحيوي Gy للاختراع الحالي المحدد في عينة من خاضع حيث المستوى المذكور للمرقم الحيوي يرتبط بحدة مرض نيمان بيك كما هو موصوف أعلاه. سوف يكون دالاً على تطبيق علاج معين و/ أو جرعة أو جرعة من العلاج المذكور. على سبيل المثال؛ إذا كان مستوى المرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية المحددة 0 وفيا لطرق الاختراع يرتبط بحالة مرض نيمان بيك "sala" فيتم وضع جدول للخاضع لعلاج مرض نيمان بيك ويمكن تطبيق طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع Ey للاختراع الحالي كل 3 أشهر وسوف تتم مقارنة مستويات المرقم الحيوي بالتالي المحدد لتحديد فاعلية العلاج(العلاجات) و/ أو العلاج/العلاجات المطبقة على الخاضع. إن وصل الخاضع إلى حالة؛ حيث مستوى المرقم الحيوي و/ أو نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية؛ على cull يرتبط بحالة مرض نيمان 5 بيك "خفيفة" أو حيث يتم الحفاظ على مستوى ثابت و/ أو نسبة ثابتة للمرقم الحيوي بمرور الوقت
فيمكن تقليل مرات استخدام طريقة تشخيص مرض نيمان بيك في خاضع وفقًا للاختراع الحالي إلى كل 6 شهور. في جانب آخر يتعلق الاختراع الحالي بطريقة لتحديد فاعلية تركيبة لعلاج مرض نيمان بيك . يمكن أن تشتمل هذه الطريقة على خطوات تحديد مستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 و/ أو نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر؛ على الترتيب» في خاضع يعاني من مرض نيمان بيك ؛ إعطاء إلى الخاضع المذكور المركب المذكور بكمية فعالة لتحديد فاعلية المركب المذكور؛ إعادة تحديد مستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 و/ أو نسبة مستويات المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر؛ على الترتيب؛ في الخاضع المذكور؛ مقارنة مستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 و/ أو نسبة مستويات المركب 509 إلى 0 مستوى ليسو سفينغوميالين حرء على الترتيب؛ المحدد قبل وبعد إعطاء التركيبة المذكورة؛. حيث (Sine منخفض من ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 و/ أو نسبة منخفضة من مستويات المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر؛ على الترتيب»؛ المحدد بعد إعطاء التركيبة المذكورة مقارنة بمستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 و/ أو نسبة مستويات المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر على الترتيب؛ المحدد بعد إعطاء التركيبة المذكورة يدل على فاعلية 5 المركب المذكور لعلاج مرض نيمان بيك . يصيب مرض نيمان بيك أغلب الأطفال وعادةً يتوفون في سن صغير (By عمر غير متوقع؛ ويمكن العديد في خلال بضع أشهر أو سنوات من الولادة. يموت العديد من الأطفال الآخرين من هذا المرض بعد سنوات من المعاناة من مجموعة أعراض للاضطراب. يمكن أن يسمح المرقم الحيوي المفضل لتشخيص مرض نيمان بيك ؛ على نحو مفضل مرض نيمان 0 بيك من النوع C بتشخيص مرض نيمان بيك ؛ على نحو مفضل مرض نيمان بيك من النوع ؛ بحساسية ونوعية عالية بغض النظر عن عمر الخاضع. وجد المخترعون الحاليون أن المرقمات الحيوية Uy للاختراع الحالي تكون مفيدة لتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع بغض النظر عن عمر الخاضع. يتمثل بالتالي نموذج الاختراع الحالي في أن الطريقة By للاختراع الحالي تسمح بتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع بغض النظر عن العمر.
— 0 8 — في نموذج مفضل الطريقة By للاختراع الحالي الخاضع هو خاضع صغير السن. الخاضع صغير السن كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية على نحو مفضل هو خاضع عمره أقل من 30 عام؛ على نحو أكثر تفضيلاً أقل من 20 عام وعلى النحو الأكثر تفضيلاً على الإطلاق أقل من 10 أعوام. شرح مختصر للرسومات يتم الآن توضيح الاختراع الحالي أيضاً بواسطة الأشكال والأمثلة التالية التي يمكن من خلالها
الوصور إلى سمات (gal النماذج ومزايا أخرى. يبشكل أكثر تحديدًا 3 الشكل 1 يكون عبارة عن مخطط صندوقي يحدد مستويات المركب 465 بوحدة نانو جم/ مل من البلازما؛
0 الشكل 2 يكون عبارة عن مخطط صندوقي يحدد مستويات المركب 509 بوحدة نانو جم/ مل من البلازما؛ الشكل 3 يكون عبارة عن مخطط صندوقى يحدد نسبة مستويات المركب 509 إلى مستويات المركب 465؛ الأشكال 4أ؛ 4ب و4ج هي رسوم بيانية توضح خصائص تشغيل المستقبل (ROC) لتشخيص
(NP 5 النوع م و8؛ الأشكال 5ا؛ 5ب و5ج هي رسوم بيانية توضح خصائص تشغيل منحنيات المستقبل (ROC) لتشخيص NP من النوع 6؛ الشكل 6 هو رسم بياني يوضح خصائص تشغيل منحنيات مستقبل (ROC) المركب 465 والمركب 509 لتشخيص حامل NP من النوع ©؛
0 الشكل 7 هو مخطط يوضح مستويات مرقم حيوي بالبلازما وفقًا للاختراع الحالي كدالة عبر الزمن لإجمالي 6 من مرضى بمرض نيمان بيك من النوع C وحامل واحد لمرض نيمان بيك من النوع «C
— 8 1 —
الشكل 18 هو كروماتوجراف قياس طيف الكتلة HPLC يعرض حدة ذروة ليسو سفينغوميالين cn المركب 509 ويتبع لخاضع سليم صحيًا ¢ الأشكال 8هب» 8ج 8د و8ه هي كروماتوجراف قياس طيف الكتلة HPLC يعرض حدة ذروة ليسو سفينغوميالين حرء المركب 509 وهو لمريض مصاب بمرض نيمان بيك من النوع 0 ؛
ا لأشكال 9 ¢ وب ‘ z9 و9د هى مخططات صندوقية أو مخططات تشتت تحدد مستويات المركب 5 أو المركب 509 بوحدة نانو جم/ مل من البلازما بناءً على عمر المرضى. الوصف التفصيلى: الأمثلة : في الأمثلة المذكورة Lad يلى يتم استخدام البلازما أو المصل البشري كعينة تم الحصول عليها من الخاضع. رغم ذلك سيدرك الماهرون في المجال انه بالاعتماد على النوع المستخدم من
0 عينة تم الحصول عليها من الخاضع؛ Jie تشتمل على اللعاب؛ محلول أم؛ بلازماء cams الدم التام» الدم على بطاقة ترشيح الدم الجاف أو منتج دم آخرء يجب ضبط طريقة الاختراع الحالي Gy لنوع العينة وعلاوة على ذلك يجب تحديد القيمة الحدية لكل نوع عينة وفقًا للطريقة المذكورة في الأمثلة التالية. اكتشف المخترعون الحاليون أن استخدام عينة المصل البشري في الطريقة كما تم الوصف Lad يلي بدلاً من عينة البلازما البشرية سيؤدي إلى نتائج مماثلة من حيث مستوى ليسو
5 مفينغوميالين حر والمركب 509؛ على الترتيب؛ إذا تم أخذ عينة المصل البشري وعينة البلازما البشرية من نفس الخاضع؛ عند نفس النقطة الزمنية؛ و إذا تم قياس العينات بالتوازي؛ و؛ بشكل أكثر تحديداً» سيؤدي إلى نفس dal) الحدية. المثال 1: طريقة للكشف عن ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 في مصل بشري المعدات .
0 للكشف عن ليسو سفينغوميالين حر و/ أو مادة لها وزن جزيئي يساوي 508؛ تم الكشف عنها كارتحال MRM فى نمط m/z 509 lay) إلى 184 7/2 المشار إليه فى الوثيقة الحالية Loaf كالمركب 509 في عينة البلازما من خاضع تم استخدام المعدات التالية.
— 2 8 — مضخة Series 200, Perkin Elmer, USA HPLC pump Series 200, Perkin Elmer, USA فرن العمود Series 200, Perkin Elmer, USA Column oven lea كشف انتقائى كتلى API 5000, AB SCIEX, USA/Canada وسيلة تدويم متعددة ١ لأنابيب Henry Troemner LLC, USA ١ DVX-2500 خلاط دوامى Vortex Genie 2; Scientific Industries Vortex mixer فرز بالطرد المركزي Megafuge 1.0; Heraeus, Germany| Centrifuge ممص (ممصات)؛ قطارة Eppendorf, Germany| pipette اا | 2 oe 0 | ً ١ مواد كاشفة للكشف عن ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 في die البلازما من خاضع تم استخدام المواد الكاشفة التالية. إلى هذا المدى تعتمد هذه القيم على درجة حرارة ( dad Jie الرقم الهيدروجيني (PH مثل تم تحديد القيم عند درجة حرارة تبلغ 25 درجة مثوية. أسيتونيتريل : درجة HPLC أو درجة متدرجة (ACN) Acetonitrile ’ | 6 ”
— 3 8 — حمض فورميك Formic «.p.a 98 - 100 % (FA) acid ميثانول Methanol كمية متدرجة (LiChrosolv) (MeOH) حمض تراي فلورو أسيتيك |Trifluoroacetic 0 باريوم > 98 % (TFA) يعني الاختصار “.0.8” كما هو مستخدم هنا “تحليل أولي”. يعني التعبير “باريوم 00000070" كما هو مستخدم هناء بشكل مفضل درجة تجارية من المركب الكيميائي الذي يكون له نقاء يبلغ القيمة المحددة سابقاً. 8511/-١ كما هو مستخدم هنا يشير إلى نقاء قياسي لدرجة الماء تم تحقيقه بواسطة طرق التنقية التي تشتمل على تناضح عكسي والموجات فوق البنفسجية (أكسدة بالأشعة فوق البنفسجية .(Ultraviolet (UV) Oxidation تحضير مقاييس المعايرة : تم تحضير محلول خام من ليسو-سفينغوميالين بواسطة إذابة 2.16 مجم ليسو-سفينغوميالين LS) تم توصيلها بواسطة (Matreya نقاء مقدر بقيمة 9695.1) في 5 Je من [MeOH الماء )1 : 4؛ حجم/ حجم). على التوالي يتم تحضير المحلول VI-A كخليط من 74 ميكرو لتر من محلول sud -سفينغوميالين خام و5 مل [MeOH الماء ) 4:1 حجم/ حجم) كما هو موضح فيما يلي:
— 8 4 —
ترقيم تركيز حجم محلول حجم المذيب
المحلول التجرية المحلول[ميكرو المذيب
الناتج [ميكرو جم/ [A] [مل]
مل] DMSO/MeOH 5 — gua 74 | 6.0803 V1-A سفينغوميالين ) 1: 4؛ حجم/ —stock حجم) بالتالي تم تحضير مقاييس المعايرة بواسطة محلول مرتفع VI-A أو مقاييس المعايرة مرتفعة التركيز في المذيب [MeOH الماء )1 : 1[؛ حجم/ حجم). يتم عرض مخطط الزيادة التفصيلي فيما يلي .
SH pas [احجم محلول | حجم | المذيب | الحجم
المحلول Sl جم/ | المحلول[ميكرو المذيب [مل]
الناتج | مل] [A [مل]
3.0303 /MeOH | 3.5 VI-A 119.2 200.26 | Std5A-
:1( الماء NPC
1؛ حجم/ حجم)
/MeOH 23١ VI-A 29.9| 60.002 | Std4a- | 3.0927 NPC الماء (1: 1؛ حجم/ حجم) /MeOH 3| Std5A- 297 | 18.040 | Std3A- | 3.297 NPC NPC الماء (1: 1؛ حجم/ حجم) /MeOH 3| Std5A- 92.7| 6.0025 | Std2A- | 3.0299 NPC NPC الماء (1: 1؛ حجم/ حجم) /MeOH 3| Std5A- 30.3| 2.0024 | Std1A- 3.6192 NPC NPC الماء (1: 1؛ حجم/ حجم) بالنسبة للمعايرة؛ يكون لمقاييس المعايرة خمس مستويات تركيز تتراوح بين 2.00 و200 نانو جم/ مل تم استخدامها. تحضير العينات التجريبية العينات التجريبية تم تحضير بواسطة محلول مرتفع VI-A في صفيف متعادل. سوف يتم عرض مخطط الزيادة المفصل فيما يلي.
— 6 8 — المحلول ١ مل] المحلول[ميكرو صفيف الناتج لتر] متعادل [مل] 3S QC الأساسي 3 * Al- NPC QcC- |100.07 50.2 هالا |3 3.0502 -81 NPC * التركيز الأساسي يكون أقل من 10 نانو جم/ ce بالتالي مستوى 00-81-1106 لا يتأثر الصفيف المتعادل كصفيف متعادل؛ تم استخدام البلازما البشرية للخاضعين الأصحاء. الشخص الماهر في الفن سوف يدرك أن البلازما المذكورة من الخاضع صحيح الجسم سوف تحتوي على مستوى أساسي من ليسو سفينغوميالين حر و/ أو (gine أساسي من المركب 509. المستوى الأساسي المذكور من ليسو سفينغوميالين حر يساوي حوالي 9. 3 نانو [o> مل Lg لطرق ا لاختراع الحالي . من الواضح بالتالي أن العينات التجريبية التي تم تحضيرها بواسطة ارتفاع الصفيف المتعادل؛ يشتمل الصفيف المتعادل على المستوى الأساسي المذكور من ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509؛ على الترتيب؛ يشتمل 0 أيضًا على المستوى الأساسي المذكور من ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509 بالإضافة إلى ذلك إلى مستوى sud سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 الذي تم الحصول عليه بواسطة الارتفاع باستخدام محلول مركز أو عينة تجريبية عالية التركيز. oll Gy مستوى ليسو سفينغوميالين حر في العينات التجريبية يكون كما يلي:
— 7 8 — QC-B1-NPC 100 نانو جم/ مل + التركيز الأساسي في الصفيف المتعادل الشخص الماهر في الفن سوف يدرك أن البلازما البشرية من الخاضع صحيح الجسم المستخدمة كصفيف متعادل يمكن شرائها من أي مصدر تجاري معروف للشخص الما هر في الفن ٠ يجدر ملاحظة أن إذا تم عرضيًا استخدام البلازما من خاضع لا يتمتع بالصحة؛ أي من خاضع يعاني من ae 5 نيمان بيك ‘ كصفيف متعادل؛ سوف يتسيبب ذلك فى مستويات مرتفعة بشكل غير معتاد من ليسو سفينغوميالين حر أو المركب 509 في العينات التجريبية المحدد بواسطة الطريقة وفقًا للاختراع الحالي وبالتالي سوف يدرك sd بينما يتم تحديد مدى التحمل بالطريقة على أنه ضمن نطاق 9615 أعلى أو أقل من المستويات المقدرة العينات التجريبية الخاضعة للطريقة Gg للاختراع الحالي. عينات الدراسة 0 تحضير القياس الداخلى تم تحضير محلول خام قياسي داخليى (IS1)Internal Standard بإذابة 1.00 مجم من ليسو- 2 (كما تم توصيله بواسطة (Matreya في 2 مل من DMSO | MeOH (1/1؛ حجم/ حجم). بالتالي يتم تحضير محلول تشغيل قياسي داخلي كخليط من 410 ميكرو لتر من محلول خام IST و500 ملي لتر من إيثانول. يمكن شراء إيثانول من أي مصدر تجاري؛ حيث يكون الإيثانول عبارة عن إيثانول مطلق له درجة مناسبة للطرق الموصوفة هنا. سيدرك الماهرين في المجال أن البروتينات المتضمنة في 50 ميكرو لتر من عينة يجب ترسيبها إذا تمت إضافة 100 ميكرو لتر من محلول تشغيل قياسي داخلي مذكور إلى العينة. تخزين العينات والمحاليل يتم تخزين عينات المقارنة أو عينات الدراسة مباشرةً عند أقل من -20 درجة متوية في الحال أو تم تقل كميات متساوية إلى قوارير زجاجية جديدة قبل التخزين في نفس الظروف. تم تجميد محاليل مركزة ( محاليل la 534-/-1/ الخ) كذلك يتم تجميد المحاليل الخام القياسية الداخلي عند أقل من -20 درج gia قيد الزيادة التالية.
— 8 8 — تم تخزين محلول التشغيل القياسي الداخلي عند أقل من -20 درج مئوية حتى الاستخدام. دون الرغبة بالتقيد بأي نظرية يفترض المخترعون الحاليون أن كل من ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 3 على الترتيب ¢ مستقرين فى المحاليل المذكورة أعلاه 0 بشكل أكثر دقةء مستوى ليسو -سفينغوميالين ومستوى المركب 509 بعينة البلازما و/ أو المصل من مريض مصاب بمرض نيمان بيك المحدد بواسطة طرق الاختراع الحالي وجد أنها متطابقة؛ إذا تم تحديد كان مستوى ليسو سفينغوميالين حر و؛ على الترتيب؛ مستوى المركب 509 في العينات المذكورة قبل ويعد التخزين عند 37 درجة متوية لمدة يومان. وفقًا لذلك؛ يمكن نقل المحاليل والعينات Gg للاختراع الحالي بعدة طرق معروفة جيدًا للشخص الماهر في (Gill حيث يفضل استخدام سلسلة باردة Jail مادة المريض لكن ليس مطلويًا بالضرورة. الشخص الماهر في الفن سوف يعرف Load الطرق وظروفها المناظرة 0 لتخزين مناسب للمحاليل والعينات» حيث؛ على سبيل المثال» يمكن تخزين المحاليل والعينات المذكورة لعدة أسابيع. تحضير العينة للتحليل تم تحضير جميع العينات المستخدمة في أي دفعة تحليلية للتحليل كما يلي: تمت إذابة العينات المجمدة عند ما يقرب من 20 إلى 25 درج مئوية في حمام ماء مأخوذ من 5 الظروف المحيطة. بعد الإذابة يتم مزج العينات. تم نقل 50 ميكرو لتر من العينة إلى قارورة عينة تمت إضافة 100 ميكرو لتر من محلول التشغيل القياسي الداخلي ( في 011]) إلى العينة يتم على التوالي مزج الخليط الذي تم الحصول عليه على التوالي باستخدام جهاز تدويم متعدد الأنابيب DVX-2500 عند 2500 دورة في الدقيقة لحوالي 30 ثانية 0 تتم فرز الخليط الذي تم الحصول عليه على التوالي بالطرد المركزي لفصل الطور عند 4000 دورة في الدقيقة لحوالي دقيقتين. نقل حجم المادة الطافية كافى لأغراض الحقن ( ما يقرب من 100 ميكرو لتر) في قوارير العينة الذاتية الملائمة ( المخروطية)
— 9 8 — الطرق : متغيرات كروموتوجرافية ووسيلة أخذ العينة الذاتية تم على التوالي إخضاع العينات التي تم تحضيرها للتحليل كما هو مذكور سابقاً للطريقة المذكورة فيما يلي: مذيب متحرك الطور 50١ Mobile phase solvent ملي مولار FA في ماء A مذيب متحرك الطور 8 50 ملي مولار FA في انف أسيتون ) 1:1 حجم/حجم) دورة كروموتوجرافية 0.0 - 4.0 دقيقة كمية متدرجة خطية: 5 96 ج- 8 66 96 8 Chromatographic run 1 - 5.1 دقيقة من متساوي التأثير: 100 % 8 1 - 5.9 4282 من متساوي التأثير: 5 96 8 I~ ’ | ’ ب شطف وسيلة الحقن TFA % 1 فى 70 % MeOH Injector flush ) Security Guard C8 + mm ID 2.1 x 50 (ACE 3 C8
— 0 9 — تقريبًا 3.2 إلى . 3.4 دقيقة: ليسو-سفينغوميالين زمر الاحتجاز نص 2 |وليسو-(15) 2 Gb Retention time تقريبًا 3.6 إلى 3.9 دقيقة: المركب 509 تم شراء عمود 08 3 BACE C) ACE رقم العمود (ACE=112-0502 المستخدم في الوثيقة الحالية من Aberdeen (Advanced Chromatography Technologies تكون المتوالية كما هو مستخدم هناء بشكل مفضل Ble عن دفعة من عدد محدد من العينات؛ على نحو مفضل 250 في أقصى تسلسل تم تحليله؛ حيث تظل المتغيرات التي تشتمل على التدفق ودرجة الحرارة غير متغيرة . تكون عمليات الضبط والمعايرة التي تم إجراؤها بين المتوالية معروفة للماهرين في المجال وتشتمل على تبادل العمود . تكون عمليات الضبط المذكورة في الحدود المحددة عبارة عن تغيرات صغيرة ويتم تسجيلها في صورة الكشف : 0 يتم على التوالي glad) العينات التي تم تحضيرها على التوالي لطريقة الكشف والتي يتم وصف متغيراتها فيما يلي: نمط تأين MS : التأين بالرش الإلكتروني (ESI) نمط كشف MS : مراقبة التفاعل المتعدد (MRM) ل
— 1 9 — jl فصل منشط تصادمياً :(CAD) ١ | 7 5 ّ, | 7 ّ, ف He mjz 282.2 — 624.5 ليسو-2ط (القياس الداخلي) i | !ّ 8: 7 | ْ ّ! ف - 7 ١ | 7 5 َّ | قن ف is > mjz 282.2 — 624.5 ليسو-2ط (القياس الداخلي) DP (إزالة المجموعات المحتمل 0 فولت (declustering potential
— 2 9 — CXP (جهد خروج خلية التصادم 8 فولت (collision cell exit potential الشخص الماهر في الفن سوف يدرك أن الطرق للكشف عن ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 9 و/ أو تحديد مستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 في عينة من خاضع استخدام تحليل قياس طيف الكتلة يمكن أن يستخدم أيضًا عمليات انتقال أخرى Lady تسمح بكشف معين عن و/ أو تحديد كم ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 في العينة المذكورة من خاضع. تقييم وحساب النتائج لتقييم و لحساب النتائج الذي تم الحصول عليه باستخدام الطرق المحددة مسبقاً يتم استخدام البروتوكول التالي. إجراء تقريب يتم تقريب تركيز_البيانات Akad في والمشتقة من نظام البيانات الكروموتوجرافي (CDS) chromatographic data system 0 إلى 5 أرقام كبيرة. يتم إجراء المزيد من الحسابات في malin جدولة للدقة الحسوبية التامة ويتم التقريب على التوالي إلى مواضع الأرقام / الأرقام العشرية الهامة المراد تسجيلها. من ثم يمكن وجود انحرافات عن النتائج الوسيط الناتجة عن التقريب. يتم تسجيل الدقة ومعاملات التغير (CV) coefficients of variation مع واحد أو اثتين من مواضع الأرقام العشرية؛ على التوالي. 5 ملاحظة بالإضافة إلى إجراء التقريب: يمكن تقربب الرقم الأخير المسجل إلى كان الرقم التالي مساوباً أو أكبر من 5 الارتداد والاحصائيات على أساس معايير المعايرة يتم إنشاء توافق منحني المعايرة باستخدام برنامج معالجة البيانات بواسطة متوسطات نسب مساحة الذروة ( مساحة الذروة لليسو-سفينغوميالين الحر والمركب 509؛ على 0 الترتيب» الموجود في العينة التي تم الحصول عليها من خاضع / مساحة الذروة لمقياس داخلي). تم تقييم تركيزات sud سفينغوميالين حر والمركب 509 باستخدام باستخدام طريقة المقياس الداخلي A
— 3 9 — الرياعية (لا = bX + ax2 + 6) نمط الارتداد الذي يستخدم عامل وزن 1/ تركيز لحساب تركيز كل ناتج تحلل في كل دفعة مراد تقييمها. يتم حساب التركيزات بواسطة متوسطات لها الصيغة التالية: peak arearatio) - 48)6- وال + -b XXX الا اس ات <- 6006901132107 28 على أساس قيم المتوسطات؛ سيتم حساب دقة النتائج ( من حيث (CVS ومعدلات دقة ( الصيغ الموضحة فيما يلي) باستخدام البرنامج “123 JLotus calculated concentration «100 = (96) 2600186 expected concentration يتم وصف النماذج الإحصائية الملائمة في على سبيل المتال Green, J.R., Statistical Treatment of Experimental Data (Elsevier, New York, 1977), page 210 ffLothar Sachs, Angewandte Statistik - Anwendung statistischer Methoden (Springer, Berlin, Heidelberg, New York, Tokyo 10 1984( الشخص الماهر في الفن سوف يدرك أنه وفقًا لمادة. غير معروف بنيتها الجزيئية؛ لا يتم تخليق عنصر مرجعى. تقييم هذه المادة يكون بالتالى بناءً على نسبة منطقة الذروة إلى القياس الداخلى المضاف إلى كل عينة والمقارنة بين المرضى والأشخاص الأصحاء؛ على الترتيب. برنامج تم الحصول على cally معالجة البيانات؛ احصائيات وتقديرات باستخدام A Analyst® software 1.4.2 أو أعلى (AB SCIEX, USA/Canada) وكذلك 97 1-2-3 Lotus أو أعلى .(Lotus Corp, USA) كتيبات Arbeiten mit SmartSuite 97 (Lotus Development Corp., )1997
— 4 9 — توثيق Documentation of Analyst® Software (AB SCIEX, | zl المستخدم USA/Canada): Operator’s Manual & 0001310155 Manual Addendum Online Help System ;"“New Functionality in Analyst 1.2 Analyst 1.4 (or higher) JE 2: الاختبارات الوراثية وتصنيف المشتركين فى الدراسة بعد موافقة المرضى للمشاركة فى الدراسة»؛ المرضى خضعوا للاختبارات الوراثية للكشف عن طفرات من الجينات Lay .NPC2 43 NPC1 (SMPD1 لذلك؛ 5 إلى 10 مل من EDTA الدم التي تم عمل متوالية منها (Seeman et al) Seeman et al.l i; 1995( كانت جينات مناسبة أخرى بجانب تم عمل متوالية من الجينات NPC2; NPC1 (SMPD1 بالإضافة إلى ذلك؛ على وجه التحديد في المجموعات التجريبية. تم التحكم في الاختبارات الوراثية باستخدام عينات اختبار من عمر وجنس مطابق لمرضى المجموعة التجريبية. تم تحليل 448 من عينات البلازما من 304 خاضع.
0 بشكل أكثر دقة؛ لعدد 274 من المرضى عينة بلازما واحدة؛ لعدد 14 من المرضى Ci من عينات البلازماء ولعدد 16من المرضى أكثر من اثنتين من عينات البلازما كانت متوفرة. وفقًا لنتيجة الاختبارات الوراثية الموصوفة أعلاه ٠ المرضى المشاركين في الدراسة تم تصنيفهم إلى المجموعات التالية:
1.) المرضى المصابين بمرض نيمان بيك من النوع A أو 8: المعيار الذهبي للتشخيص كان
5 الكشف عن اثنين من الطفرات المسببة للأمراض فى جين 5/0/0001؛ إما المركب متماثل الزيجوت أو المركب مغاير الزيجوت (تتم تسمية المجموعة بأحرف على أنها 'نيمان بيك من النوع (AB 2.) المرضى المصابين بمرض نيمان بيك من النوع iC
— 5 9 — المعيار الذهبى لتشخيص كان الكشف عن الطفرات المسببة للأمراض فى الجين 81061 أو الجين 2 إما المركب متماثل الزيجوت أو المركب مغاير الزيجوت (تتم تسمية المجموعة Cab على أنها "نيمان بيك من (Ces being heterozygous carriers of one ca jl (.3 الطفرة فى NPC1 أو الجين NPC2 typically relatives of affected) 5 المرضى) (تتم تسمية المجموعة بأحرف على أنها “حامل نيمان بيك من النوع "). 4) المرضى المصابين باضطرابات تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة )الأخرى كمجموعة مقارنة (تتم تسمية المجموعة بأحرف على أنها LSD" الأخرى")؛ تشتمل هذه على المرضى المصابين بمرض Krabbe من بين أمراض أخرى. المرضى الذين ثبت عند 0 اختبارهم أنهم مصابين بمرض Gaucher تم وضعهم في مجموعات منفصلة؛ تم اثبات جميع التشخيصات بواسطة الكشف عن اثنين من الطفرات المسببة للأمراض. 5.) المجموعات التجريبية متطابقة العمر والنوع الصحي (تتم تسمية المجموعة بأحرف على أنها 'المجموعة التجريبية"). يتم تصوير توزيع نوع 304 من المرضى في الجدول [ب.
الجدول 1[ب : 304 خاضع مصنفين حسب النوع ال كا
— 6 9 — الجدول التالي 1ج يوضح توزيع عمر 304 من المرضى وتصنيف المرض المذكور بناءً على نتائج الاختبارات الوراثية الموصوفة أعلاه كما نوع المرض المذكور. الجدول 1ج: خصائص المرضى من 304 خاضع NP C | NP A/B حامل LSD | Gaucher [NP المجموعات 0 الأخرى التجريبية المتمتعة بالصحة N 18 36 16 14 114 106 الأفراد قياسات | 19 63 26 18 151 111 N
العمر 2.0 17.0 47.5 44.0 34.0 47.0 د oo =F ])1.0- |)7.8- |)355- |27.5- |)14.0- )36.0 (المدى
14( 25.0( |53.3( |38.0( الس ال المتوس ط وبين (98=n) (91=n) (13=n) (14=n) | (34=n)| (11=-n) الريعين) (عدد الحالات (
ذك | أنث ا ذكر | أنثى ا ذكر af] ا ذكر | أنثى ا ذكر S|] al]
ر اى م نه ني ل اه نك نك نه نك اد أذ اا % فيا50ا50 ]47 |.50 .71.50.50 .035.47.52.28 64.0 هذه .0 O0.] 2.1 0 0 0 4 6 7 3 8 2 مجموع dae dl
-08- العصر |.1 ]10 |14 |.19 .47 |.47 | .44 | .48 |.24 | .44 |.47 | .46 ol 0+ S| 0 Of 5| 0| 0.|5 | 0] cu 51 5 المة 0 10 38 0 | )10 | )26 لمتوس |) )5912 ) )31 ) )27 )20 )100 |( )39 | )35 ط وبين | - .0 .0 .8- | .0- | .0- و 5- |5- -s. -s. .3- |.0- الربعين) | 11 .24 .52 .60 | .49 | .50 ينا | )47 | وو .54 .55 .53 | .56 0١ 0١ (5 8 0 )0١ (0 OF © ) (5 ( (0 ( (5. | (0. ( تم تحديد مستوى ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 في عينات 304 خاضع المذكورين Gig للطريقة الموصوفة في المثال 1. الجدول 1د يوضح متوسط والمتوسط الحسابي لمستويات ليسو سفينغوميالين حر وللمركب 509 كما نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر في العينات المذكورة من 304 خاضع المذكورين. الجدول 1د: قيم المتوسط الحسابي (المدى بين الربعين) في مجموعات مختلفة I ال سد ف" NP A/B 18 494.0 )274.6- | 30.94 )17.78-[ 0.07 634.8( 41.84( )0.06 0.10( 4.14[-12.5) 0 36 NP C )2.67-| 0.24 24.7( 5.58( )0.13 0.32(
— 9 9 — حامل NPC |16 9.4 )12.6-6.7( | 0.16 )0.07- | 0.03 0.66( (0.01- 0.07( Gaucher 14 3.0 )9.7-0.5( 0.09 )0.05- | 0.01 (13=n) (0.17 )0.01- 0.10( (13=n) 0 الأخرى |114 5.3 )7.6-0.5( 0.04 )0.02- | 0.01 0.07( (0.005- 0.02( المجموعة 106 4.7 )6.4-2.4( 0.04 )0.02- | 0.01 التجريبية 0.06( (0.005- 0.02( يتم توضيح مستوى ليسو سفينغوميالين حر في العينات من المرض المذكور بناءة على التصنيف بواسطة التحليل الوراثي في الشكل 1. الشكل 1 يكون عبارة عن مخطط صندوقي يحدد مستويات ليسو سفينغوميالين حرء أي المركب 5. المحور لا يوضح مستويات معالجة بخوارزمية من ليسو سفينغوميالين حر بوحدة نانو جم/ مل المحددة في بلازما المرضى بواسطة الطريقة Gy للاختراع all حيث المحور * يصور مجموعات من المرضى ¢(dgn) x-axis depicts groups of patients الذين تم تقسيمهم في مجموعات كما هو موصوف في المثال 2. يمثل المخطط الإطاري نسبة 25 و75 بالمئة من كل مجموعة من المرضى بواسطة أسفل وأعلى الإطار؛ على الترتيب؛ يمثل الحيز بالقرب من منتصف الإطار نسبة 50 بالمئة (أي الوسيط الحسابي) لكل مجموعة؛ تمثل الشعيرات انحراف معياري واحد 0 أعلى وأقل من متوسط البيانات؛ يتم توضيح أي بيانات غير متضمنة بين الشعيرات كقيم خارج معيارية بدائرة صغيرة أو نجمة.
كانت الحالات المعالجة كما يلى: NP A/B 1.00 NP C 2.00 0 حامل © NP Gaucher 4.00 LSD 5.00 الأخرى 0 من المجموعات التجريبية المتمتعة بالصحة التحليل الوراثي في الشكل 2. الشكل 2 يكون عبارة عن مخطط صندوقي يحدد مستويات المركب 509 ¢ المحور لا يوضح مستويات معالجة بخوارزمية من المركب 509 بوحدة نانو جم/ مل المحددة في بلازما المرضى بواسطة الطريقة Gg للاختراع الحالي Cua المحور X يصور مجموعات من المرضى ) (d gn » الذين تم تقسيمهم في Jia المخطط الإطاري نسبة 25 و75 بالمئة من كل مجموعة من المرضى بواسطة أسفل وأعلى الإطار؛ على الترتيب؛ يمثل الحيز بالقرب من منتصف الإطار نسبة 50 بالمئة (أي الوسيط الحسابي) 0 لكل مجموعة؛ تمثل الشعيرات انحراف معياري واحد أعلى وأقل من متوسط البيانات؛ يتم توضيح أي بيانات غير متضمنة بين الشعيرات كقيم خارج معيارية بدائرة صغيرة أو نجمة. كانت الحالات المعالجة كما يلى :
NP A/B 1.00
NP C 2.00
NP © حامل 0
Gaucher 4.00 LSD 5.00 الأخرى Clegendll (0 6.00) التجريبية106 لمتمتعة بالصحة يتم توضيح نسبة مستوى المركب 509 ومستوى ليسو سفينغوميالين حر في العينات من المرض المذكور بناءً على التصنيف بواسطة التحليل الوراثى فى الشكل 3. الشكل 3 يكون عبارة عن مخطط صندوقي يحدد على المحورلا نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى المركب 465 المحدد كل منها في بلازما المرضى بواسطة الطريقة Gy للاختراع الحالي؛ 5 حيث المحور X يصور مجموعات من المرضى (090)؛ الذين تم تقسيمهم في مجموعات كما هو بواسطة أسفل وأعلى الإطارء على الترتيب؛ يمثل الحيز بالقرب من منتصف الإطار نسبة 50 بالمئة (أي الوسيط الحسابي) لكل مجموعة؛ تمثل الشعيرات انحراف معياري واحد أعلى وأقل من متوسط البيانات؛ يتم توضيح أي بيانات غير متضمنة بين الشعيرات كقيم خارج معيارية Bly صغيرة أو 0 نجمة. كانت الحالات المعالجة كما يلى:
El 6.00 من المجموعات106
J
في المرضى المصنفين كمرضى مصابين NPC يتم تصوير نوع الطفرة وتوزيع أنواع طفرات جين للنتائج التي تم الحصول عليها في الاختبارات الوراثية كما هو Gg © بمرض نيمان بيك من النوع موصوف أعلاه في الجدول 12 أدناه. © الجدول 2ا: تم الكشف عن توزيع الطفرات في المرضى مصابين بمرض نيمان بيك من النوع كانت 48 من 72 من القياسات صحيحة / 36 من الأفراد (قياسان لكل فرد) كا نا td
يتم تصوير نوع الطفرة وتوزيع أنواع طفرات جين 50/0101 في المرضى المصنفين كمرضى بمرض نيمان بيك من النوع 8/8 Gag للنتائج التي تم الحصول عليها في الاختبارات الوراثية كما هو موصوف أعلاه في الجدول 2ب أدناه. الجدول 2ب: تم الكشف عن توزيع الطفرات في مرض نيمان بيك من النوع AB المرضى كانت 34 من 36 من القياسات صحيحة / 18من الأفراد قياسان لكل فرد
مك بذ سحت المثال 3: تشخيص مرض نيمان بيك باستخدام ليسو سفينغوميالين حر و/ أو المركب 509 كمرقم حيوي
تم استخدام البروتوكولات الموصوفة في المثال 1 أعلاه لإنتاج كروماتوجرافات قياس طيف كتلة HPLC لعدد 448 من عينات البلازما المشتقة من 304 خاضع. يتم تصوير كروماتوجرافات قياس طيف كتلة HPLC المستخدمة كمثال التي تعرض حدة ذروة ليسو سفينغوميالين حر وهي لأربعة من المرضى مصابين بمرض نيمان بيك من النوع © وفرد سليم الصحة من مجموعة تجريبية في الشكل 8أ؛ الشكل 8ب؛الشكل 8ج الشكل 8د والشكل 8ه . بشكل أكثر تحديدًاء الشكل 18 يوضح كروماتوجرافات قياس طيف كتلة HPLC التي تعرض حدة ذروة بوحدة سنتي بواز لليسو سفينغوميالين حر (اللوح العلوي)؛ المركب 509 sll) الأوسط) 5 IS (اللوح السفلي) لعينة من الخاضع صحيح الجسم AS على زمن الاحتجاز بالدقائق. الشكل 8ب؛ الشكل 8ج؛ الشكل 8د والشكل 8ه يوضحان كروماتوجرافات قياس طيف كتلة HPLC التي تعريض 0 حدة ذروة بوحدة سنتي بواز لليسو سفينغوميالين حر (اللوح العلوي)؛ المركب 509 (اللوح الأوسط) 1S (اللوح السفلي) لعينة من الخاضع صحيح الجسم كدالة على زمن الاحتجاز بالدقائق. يتم تصوير زمن الاحتجاز لمادة كما هو مستخدم في الوثيقة الحالية؛ على نحو مفضل على المحور X ويكون الوقت المنقضي بين وقت حقن ذوابة؛ على سبيل المثال مرقم حيوي Gy للاختراع الحالي و/ أو القياس الداخلي؛ ووقت التصفية التتابعية للحد الأقصى لذروة الذوابة المذكورة. الشخص الماهر في 5 الفن سوف يدرك أن زمن الاحتجاز salad وفقًا للطرق الموصوفة هنا هو سمة فريدة للذوابة المذكورة ويمكن استخدامها لأغراض التحديد. محلول عمل القياس الداخلي الذي يشتمل على ليسو-652 كقياس داخلي تمت إضافته إلى dill كما هو موصوف في المثال 1. من المهم فهم أنه بواسطة الإضافة المذكورة 181 إلى العينة؛ أي ارتفاع العينة؛ لإخضاعها للطريقة Gy للاختراع الحالي» يمكن بالتالي حساب تركيز 15 في العينة يكون معروفًا وبتحديد المنطقة تحت الذروة» أي منطقة الذروة؛ 0 للقياس الداخلي في علاقة كروماتوجراف قياس طيف الكتلة HPLC المذكورة بين منطقة الذروة وتركيز مادة؛ على سبيل المثال ل 15 و/ أو مرقم حيوي. بشكل أكثر دقة؛ الشخص الماهر في الفن سوف يدرك أن منطقة الذروة sald مصورة في كروماتوجراف قياس طيف الكتلة Jie (HPLC كروماتوجراف قياس طيف الكتلة HPLC المصور في الشكل 18( الشكل 8ب؛ الشكل 8ج؛ الشكل 8د أو الشكل 8ه؛ تمثل قياس لمقدار من المادة المذكورة معرضة لتحليل قياس طيف الكتلة HPLC 5 علاوة على ذلك؛ الشخص الماهر في الفن سوف يكون قادرًا على حساب مقدار من المادة في عينة
سفينغوميالين حر في عينة معرضة للطريقة Gg للاختراع الحالي» استخدام نسبة منطقة الذروة من ليسو سفينغوميالين حر؛ مقدار منه مراد تحديده بواسطة الطريقة المذكورة ومنطقة الذروة ل IS على سبيل المثال ليسو-52© حر؛ كما منحنيات المعايرة الناتجة باستخدام الطريقة المذكورة وليسو مفينغوميالين الحر المذكور و/ أو 5ا. Gay لذلك؛ يسمح ذلك بالتحديد التالي لمستوى ليسو سفينغوميالين حر. بخصوص المركب 1109>465 تم استبداله بمقدار 0.02؛ مما يشير إلى نصف حد الكشف لمقارنة القيمة التشخيصية لمختلف المرقمات الحيوية ولحساب الارتباطات بين المرقمات الحيوية قمنا Yl بتجميع البيانات باستخدام القيمة المقاسة الأولى لكل مرقم لكل مريض. 0 تتم استخدام التقنيات الإحصائية للعينة المزاوجة لمقارنة اثنين من المرقمات الحيوية. الطريقة تستغل المكافئ الحسابىي ل AUC إلى إحصائيات Delong E.R., ( Mann-Whitney U-statistic .(Delong D.M., Clarke-Pearson D.L., 1988, Biometrics, 44, 837-45. تم تقييم دقة مستويات مختلف المرقمات الحيوية (ليسو سفينغوميالين حر؛ المركب 509( التي تم الحصول عليها بواسطة الطريقة الموصوفة فى المثال 1 أعلاه؛ كما دقة نسبة اثنين من المرقمات 5 الحيوية Gy للاختراع الحالي؛ لتمييز المرضى المصابين بمرض نيمان بيك عن المرضى ممن ليس لديهم مرض نيمان بيك ؛ كما لتمييز المرضى المصابين بمرض نيمان بيك من النوع © عن المرضى المصابين بمرض نيمان بيك من النوع AB استخدام تحليل منحنى خصائص تشغيل المستقبل Metz C.E.,1978, Semin ( (ROC) Receiver Operating Characteristic Nucl Med, 8, 283-98; Zweig M.H., Campbell G., 1993, Clin Chem, 39, 0 561-77( تم حساب منحنيات خصائص تشغيل المستقبل Receiver Operating Characteristic (00+ا)_باستخدام البرنامج الإحصائي 18 (PASW Statistics نسخة الإصدار 18.0.2 )© Inc., 2009, Chicago, IL, www.spss.com ,5055). مقارنات منحنيات ROC والنماذج
المختلطة الخطية تم إجراؤها باستخدام برمجيات SAS النسخة 9.2 من نظام SAS بنسخة
(© 2008 SAS Institute Inc., Cary, NC, USA) Windows
النتائج المصورة في منحنيات ROC الموضحة في الشكل 4؛ الشكل 5 والشكل 6 Lad توضح
نوعية وحساسية الطريقة وفقًا للاختراع الحالي بناءًة على مختلف القيم الحدية لليسو سفينغوميالين حر.
تم الإبلاغ عن المنطقة تحت المنحنى (AUC) area under the curve و9695 حدود الثقة
لليسو سفينغوميالين حر في الجدول 3.
الأشكال 4 إلى ج هي رسوم بيانية توضح خصائص تشغيل منحنيات المستقبل (ROC) لتشخيص
NP من النوع A و8؛ المحور Jia X “1-نوعية” والمحور لا يمثل حساسية.
الشكل 14 يوضح منحنيات ROC للمركب 465 والمركب 509 لتشخيص NP من النوع Bs A حيث الاختبار للكشف عن الاختلافات بين منحنيات ROC تسبب فى P dad تساوي 0.363.
منحنى ROC للمركب 465 المصور بواسطة الخط المتصل يعكس AUC بمقدار 0.9628؛ Lin
منحنى ROC للمركب 509 المصور بواسطة الخط المتقطع يعكس AUC بمقدار 0.9916. يستند
المخطط البياني على تشخيص 303 مربض في المجمل؛ حيث 18 منهم تم اختبار كونهم يحملون 5 الحالية.
الشكل 4ب يوضح منحنيات ROC للمركب 465 ونسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى المركب
5 لتشخيص NP من النوع (Bg A حيث الاختبار للكشف عن الاختلافات بين منحنيات ROC 20 يعكس AUC بمقدار 0.9903. يستند المخطط البياني على تشخيصض 146 مريض في المجمل؛
حيث 15 منهم تم اختبار كونهم يحملون مرض NP من النوع 8/8 بواسطة الاختبارات الوراثية كما
الشكل 4 C يوضح منحنيات ROC للمركب 509 ونسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى المركب
5 لتشخيص NP من النوع A و01 8 303 العينات» حيث 18 منهم يحملون مرض NPC من
النوع A/B وحيث اختبار 810//ا للكشف عن الاختلافات بين ROC ciliate تسبب في P ded تساوي م > 0.0001. منحنى ROC للمركب 509 المصور بواسطة الخط المتصل يعكس AUC بمقدار 0.9916؛ بينما منحنى ROC لنسبة مستويات المركب 509 إلى مستوى المركب 465 المصور بواسطة الخط المتقطع يعكس AUC بمقدار 0.8520. يستند المخطط البياني على 55 تشخيص 303 مريض في المجمل؛ حيث 18 منهم تم اختبار كونهم يحملون مرض NP من النوع 8 بواسطة الاختبارات الوراثية كما هو موصوف في المثال 2 في الوثيقة الحالية. الأشكال 5 إلى ج هي رسوم by توضح خصائص تشغيل منحنيات المستقبل (ROC) لتشخيص NP من النوع ؛ المحور * يمثل “1-نوعية” والمحور لا يمثل حساسية. الشكل 15 يوضح منحنيات ROC للمركب 465 والمركب 509 لتشخيص NP من النوع ©؛ حيث 0 الاختبار للكشف عن الاختلافات بين منحنيات ROC تسبب في قيمة © تساوي 0.0003. منحنى ROC للمركب 465 المصور بواسطة الخط المتصل يعكس AUC بمقدار 0.8944؛ بينما منحنى ROC للمركب 509 المصور بواسطة الخط المتقطع يعكس AUC بمقدار 0.9371. يستند المخطط البياني على تشخيص 303 مريض في المجمل؛ Cua 36 منهم تم اختبار كونهم يحملون مرض NP من النوع © بواسطة الاختبارات الوراثية كما هو موصوف في المثال 2 في الوثيقة الحالية. الشكل 5ب يوضح منحنيات ROC للمركب 465 ونسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى المركب 5 لتشخيص NP من النوع ©؛ حيث الاختبار للكشف عن الاختلافات بين منحنيات ROC تسبب في قيمة P تساوي 0.0001. منحنى ROC للمركب 465 المصور بواسطة الخط المتصل يعكس AUC بمقدار 0.8685؛ بينما منحنى ROC لنسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى المركب 5 المصور بواسطة الخط المتقطع يعكس AUC بمقدار 0.9654. يستند المخطط البياني على 0 تشخيص 303 مريض في المجمل؛ حيث 36 منهم تم اختبار كونهم يحملون مرض NP من النوع © بواسطة الاختبارات الوراثية كما هو موصوف في المثال 2 في الوثيقة الحالية. الشكل 5ج يوضح منحنيات ROC للمركب 509 ونسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى المركب 5 لتشخيص NP من النوع ©؛ حيث الاختبار للكشف عن الاختلافات بين منحنيات ROC تسبب في قيمة P تساوي 0.0065. منحنى ROC للمركب 509 المصور بواسطة الخط المتصل
يعكس AUC بمقدار 0.9371؛ بينما منحنى ROC لنسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى المركب المصور بواسطة الخط المتقطع يعكس AUC بمقدار 0.9800. تستند الرسوم البيانية على تشخيص 303 مربض في المجمل؛ حيث 36 منهم تم اختبار كونهم يحملون مرض NP من النوع 5 الشكل 6 هو رسم بياني يوضح خصائص تشغيل منحنيات مستقبل (ROC) المركب 465 وللمركب 9 لتشخيص حامل NP من النوع ©؛ يستند المخطط البياني على تشخيص 146 مريض في المجمل؛ حيث / منهم تم اختبار كونهم حاملين لمرض NP من النوع © بواسطة الاختبارات الوراثية كما هو موصوف في المثال 2 في الوثيقة الحالية. المحور * يمثل “1-نوعية” والمحور لا يمثل الحساسية. الاختبار للكشف عن الاختلافات بين منحنيات ROC تسبب فى قيمة © تساوي ROC aie .0.5991 0 للمركب 465 المصور بواسطة الخط المتصل يعكس AUC بمقدار 8 بينما منحنى ROC للمركب 509 المصور بواسطة الخط المتقطع يعكس AUC بمقدار 0.6984. الجدول 3 : حساسية ونوعية مختلف المرقمات الحيوية بخصوصض N PC CTT 0 (n) NP A/B 8 من 304 8 من 303 8 من 303 ١ | ١ ١ %94.4 %94.4 %94.4 %99.3 1 .%96 %82.1
AUC و017695 | 0.96 )1.00-0.90( | 0.99 (0.98- | 0.85 (0.81- في تحليل ROC 1.00( 0.90( 6 من 304 6 من 303 6 من 303 ١ | ١ J ' ١ %94.4 %97.2 %94.4 %81.3 %93.3 %95.5 CI%95, AUC | 0.90 )0.93-0.86( | 0.94 )0.91-| 0.98 )0.96- في تحليل ROC 0.97( 1.00( الجدول 4 أدناه يوضح Gy لذلك حساسية ونوعية الطريقة وفقًا للاختراع الحالي ply على مختلف القيم الحدية لليسو سفينغوميالين حر. مقارنة مستوى المرقم الحيوي في عينة من خاضع محدد بواسطة الطريقة وفقًا للاختراع الحالي بالقيمة الحدية؛ على نحو مفضل القيمة الحدية تسمح بتشخيص التمتع بنوعية وحساسية عالية بالتالي تسمح بتشخيص مرض نيمان بيك في الخاضع المذكور؛ حيث رفع مستوى المرقم الحيوي في العينة من الخاضع مقارنة بالقيمة الحدية يدل على خاضع يعاني من أو في خطر الإصابة بمرض نيمان بيك وحيث مستوى منخفض من المرقم الحيوي في العينة من الخاضع مقارنة بالقيمة الحدية يدل على خاضع لا يعاني من أو ليس عرضة لخطر الإصابة بمرض نيمان بيك . مقارنة نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية في عينة من خاضع محدد بواسطة الطريقة dy 0 للاختراع الحالي بالقيمة الحدية؛ على نحو مفضل القيمة الحدية تسمح بتشخيص التمتع بنوعية وحساسية عالية بالتالي تسمح بتشخيص مرض نيمان بيك في الخاضع المذكور؛ حيث رفع نسبة مستويات اثنين من المرقمات الحيوية في العينة من الخاضع مقارنة بالقيمة الحدية يدل على خاضع يعاني من أو في خطر الإصابة بمرض نيمان بيك وحيث نسبة منخفضة من مستويات اثنين من
المرقمات الحيوية في العينة من الخاضع مقارنة بالقيمة الحدية يدل على خاضع لا يعاني من أو
ليس عرضة لخطر الإصابة بمرض نيمان بيك .
Uy لذلك؛ في الجدول 3 حساسية ونوعية ليسو سفينغوميالين حر كمرقم حيوي مستخدم في طريقة
لتشخيص مرض نيمان بيك ؛ وبشكل أكثر تحديدًا تتم مقارنة مختلف أنواع مرض نيمان بيك في
5 عينة من خاضع باستخدام مختلف القيم الحدية. تم تحديد ليسو سفينغوميالين حر وفقًا لطريقة الاختراع
الحالى. يمكن أخذ القيمة الحدية المثالية للمرقمات الحيوية المناظرة والمرض من الجدول 3 أعلاه.
سوف يدرك الشخص الماهر في الفن أن الطريقة Gg للاختراع الحالي التي تستخدم ليسو سفينغوميالين
حر و/ أو المركب 509 كمرقم حيوي؛ و/ أو نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو
سفينغوميالين حر؛ لتشخيص مرض نيمان بيك تكون مفيدة JS واضح عن طرق الفن السابق. 0 وفيا لذلك؛ مستويات المركب 509 المحددة في عينة من خاضع وفقًا لطريقة الطلب الحالي أكبر
من 5 نانو جم/ مل تسمح بتشخيص أن الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة NPL من
النوع / و8 بحساسية مقدارها 9694.4 ونوعية مقدارها 96.1
مستويات المركب 509 المحددة في عينة من خاضع Bg لطريقة الطلب الحالي أكبر من 1.7 نانو
جم/ مل تسمح بتشخيص أن الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة ب0لا من النوع © 1 بحساسية مقدارها %97.2 ونوعية مقدارها 3 %93.
مستويات المركب 509 المحددة في عينة من خاضع وققًا لطريقة الطلب الحالي أكبر من 0.031
نانو جم/ مل تسمح بتشخيص أن الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة بحامل NP من
النوع C بحساسية مقدارها 100 % ونوعية مقدارها %22.5
مستويات ليسو سفينغوميالين حر المحددة في عينة من خاضع وفقًا لطريقة الطلب الحالي أكبر من 0 59 نانو جم/ مل تسمح بتشخيص أن الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة NP من النوع
.9699.3 و8 بحساسية مقدارها 9694.4 ونوعية مقدارها A
مستويات ليسو سفينغوميالين حر المحددة في عينة من خاضع وفقًا لطريقة الطلب الحالي أكبر من
3 نانو جم/ مل تسمح بتشخيص أن الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة ب0لاا من
النوع © بحساسية مقدارها 9694.4 ونوعية مقدارها 9681.3.
مستويات ليسو سفينغوميالين حر المحددة في عينة من خاضع وفقًا لطريقة الطلب الحالي أكبر من 6.5 نانو جم/ مل تسمح بتشخيص أن الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة بحامل NP
من النوع C بحساسية مقدارها 100 % ونوعية مقدارها %61.2
نسبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر المحددة في عينة من خاضع Gly
لطريقة الطلب الحالي أكبر من 0.045 تسمح بتشخيص أن الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر
الإصابة NP من النوع A و8 بحساسية مقدارها 9694.4 ونوعية مقدارها 9682.1.
0 سبة مستوى المركب 509 إلى مستوى ليسو سفينغوميالين حر المحددة في die من خاضع وفقًا لطريقة الطلب الحالي أكبر من 0.087 تسمح بتشخيص أن الخاضع يعاني من أو عرضة لخطر الإصابة NP من النوع © بحساسية مقدارها 9694.4 ونوعية مقدارها 91695.5. المتال 4: تحليل تغيّر المرقمات الحيوية بمرور الوقت الطريقة والمرضى المستخدمين lad يخص هذا المثال كانت تلك كما هو موصوف فى الأمثلة 1
5 إلى 3. لتحليل كيفية jan مستوى المرقمات الحيوية؛ مثل المركب 509؛ بمرور الوقت في المرضى المصابين بمرض نيمان بيك تم تحليل البيانات غير المجمعة لأولئك المرضى ممن لهم تم تحليل أكثر من عينة بلازما واحدة؛ أي ستة من مرضى NPC من النوع © وحامل واحد لمرض NPC من النوع LC النقطة الزمنية صفر تم ضبطها حسب القياس الأول تحت العلاج لكل مريض. تم
0 استخدام النماذج المختلطة الخطية لاختبار إن حدث انخفاض متعمد على الوقت. يتم توضيح مستويات المركب 509 بمرور الوقت للمرضى الفرديين في الشكل 7.
بشكل أكثر تحديدًاء؛ الشكل 7 هو مخطط يوضح مستويات المركب 509 بوحدة نانو جم/ مل من LDU كدالة عبر الزمن لإجمالي 6 من مرضى بمرض نيمان بيك من النوع © delay واحد
لمرض نيمان بيك من النوع . تم تحديد مستوى المرقم الحيوي المناظر بواسطة الطريقة Gy للاختراع الحالي في due بلازما من مرضى مصابين بمرض نيمان بيك من النوع © الذين كانوا معرضين للعلاج أثناء مسار الدراسة. كل منحنى وكل رقم مريض 3 على الترتيب 3 يمثل مستويات محددة في البلازما المجمعة من نفس المريض عند نقاط زمنية مختلفة كما هو محدد على المحور JX المحور * Jia النقاط الزمنية لتجميع البلازماء حيث النقطة الزمنية صفر تدل على القياس الأول تحت العلاج لكل مريض. لتحليل تغيّر مستوى المرقم الحيوي وفقًا للاختراع الحالي بمرور الوقت في مرضى مصابين بمرض نيمان بيك
من النوع © كما هو موصوف في المثال 3 البيانات غير المجمعة تم استخدام لأولئك المرضى ممن لهم تم تحليل أكثر من عينة بلازما واحدة. في الشكل 7 المحورلا Jia مستويات المركب 509 كدالة عبر الزمن. المثال 5: تحليل مستويات المرقمات الحيوية بناءً على أعمار الخاضعين. تصيب أمراض تخزين الجسيمات المحللة ( تقوم بتحليل وتفكيك الجزئيات الكبيرة ) أغلب الأطفال
5 وغالباً ما يتوفى المرضى في سن صغير وسن غير متوقع؛ وبتوفى العديد في خلال أشهر SALE بعد سنوات من الولادة. وبموت الأطفال الآخرين من هذا المرض بعد سنين من المعاناة من أعراض متعددة لمرض محدد . من المهم بالتالي اختبار dad المرقمات الحيوية وفقًا للاختراع لتشخيص مرض Glan بيك في مجموعات من المرضى صغيري السن.
0 المرقم الحيوي المفضل لتشخيص مرض نيمان بيك ؛ على نحو مفضل مرض نيمان بيك من النوع ©؛ يمكن أن يسمح بتشخيص مرض Glas بيك ؛ على نحو مفضل مرض نيمان بيك من النوع ©؛ بحساسية ونوعية عالية بغض النظر عن عمر الخاضع.
تم تحليل مستويات المركب 465 والمركب 509؛ على الترتيب؛ المحددة وفقًا لطريقة الاختراع الحالي نسبة إلى عمر الخاضع. يتم توضيح النتيجة في الجدول 5 والشكل 9. الجدول 5 أدناه يوضح توزيع العمر بين الخاضعين الذين تم اختبارهم. الجدول 5أ: توزيع العمر لعمر بالسنين EH مده I Ic [yw (mn
LSD 5.00 الأخرى I 0 حامل نيمان بيك من النوع © 03 gaucher 4.00 LSD 5.00 الأخرى 1 4.00 40-31 0 حامل نيمان بيك من النوع © 03 gaucher 4.00 LSD 5.00 الأخرى 20 5.00 50-41 0 حامل نيمان بيك من النوع © oo 0 نيمان بيك من النوع 8/8 gaucher 4.00 LSD 5.00 60-51 0 الأخرى 0 حامل نيمان بيك من النوع © gaucher 4.00 7.00 70-61 LSD 5.00 الأخرى
wees ] 8.00 71 أو 00. 5 LSD الأخرى 03 olde 7" 1 بشكل أكثر تحديدًا؛ الشكل 19 هو مخطط إطاري والشكل 9ب هو مخطط تشتت يوضح مستويات ليسو سفينغوميالين حر؛ أي المركب 465؛ والشكل 9ج هو مخطط إطاري والشكل 9د هو مخطط تشتت يوضح مستويات المركب 509؛ المحور لا يوضح مستويات معالجة بخوارزمية من ليسو سفينغوميالين حر والمركب 509؛ على الترتيب؛ بوحدة نانو جم/ مل المحددة في بلازما المرضى بواسطة الطريقة وفقًا للاختراع الحالي؛ حيث المحور * يصور مجموعات من المرضى بواسطة سنوات العمر. في المخططات الإطارية تم تجميع المرضى حسب العمر بالسنين كما هو محدد؛ أي المرضى الذين أعمارهم joa -¢10 20-11 30-21 40-31« 50-41 60-51« 70-61 عام أو أعمارهم 71 عام وأكبر يمثل المخطط الإطاري نسبة 25 و75 بالمئة من كل مجموعة من المرضى بواسطة أسفل وأعلى الإطارء على الترتيب؛ يمثل الحيز بالقرب من منتصف الإطار نسبة 50 بالمئة 0 (أي الوسيط الحسابي) لكل مجموعة؛ تمثل الشعيرات انحراف معياري واحد el وأقل من متوسط البيانات؛ يتم توضيح أي بيانات غير متضمنة بين الشعيرات كقيم خارج معيارية Bly صغيرة أو يمكن أن يستنتج مباشرة المأخوذة من ذلك أن المركب 509 كما المركب 465 هما مرقمات حيوية تسمح بتشخيص مرض نيمان بيك ؛ على نحو مفضل مرض نيمان بيك من النوع AB وعلى نحو 5 أكثر تفضيلاً مرض نيمان بيك من النوع © بحساسية ونوعية عالية بغض النظر عن عمر الخاضع. علاوة على ذلك يمكن من ذلك استنتاج أن الطريقة Gy للاختراع Jill Jal تسمح بتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع بغض النظر عن العمر. بشكل أكثر تحديدًاء الطريقة وفقًا للاختراع الحالي تسمح بتشخيص مرض نيمان بيك في خاضع؛ حيث الخاضع هو خاضع صغير (ull بشكل أكثر تحديدًا أقل من 30 سنوات العمر؛ أقل من 20 سنوات العمر أو أقل من 10 سنوات. المثال 6: ليسو -053 حر في مخيخ جرذان متحورة وراثيا
تم تحديد مستوى ليسو سفينغوميالين حر في مخيخ 3 جرذان متحورة NPCL —/= Gls ومقارنته بالمستوى في عينة من حيوان بمجموعة تجريبية )+/+ (NPCI يتم توضيح النتائج في الجدول 6. الجدول 6 ليسو - الهوية | الكود الجنس الصفيف سفينغوميالين حر 1١ 6 مخيخ 20061 أنثى ١ P50| مستخلص الأنسجة | 11.8 I= الفأرية 2١ G7 مخيخ 000611 |أنثى 0501 | مستخلص الأنسجة | 20.9 I= الفأرية 8 10مخيخ 1 |أنثى 0501 ١ مستخلص الأنسجة | 20.1 I= الفأرية G9 1ح مخيخ | 0061 | ذكر ١ بالغ | مستخلص الأنسجة| 7.21 Na الفأرية يمكن الاستنتاج مما ذكر أعلاه أنه تم رفع مستوى ليسو سفينغوميالين حر » بواسطة تقريبًا عامل 2 إلى 3؛ في مخيخ في حيوانات NPCI-/- إلى العينات من حيوانات المجموعة التجريبية دون تعطيل call أي +/+ NPCL
Claims (2)
1. طريقة في المختبر لتشخيص مرض نيمان بيك Niemann—Pick في خاضع؛ حيث تشتمل الطريقة على رصد مؤشرات حيوية biomarker في عينة من خاضع؛ وحيث يكون المرقم الحيوي biomarker عبارة عن مركب ٠5 ؛ ويكون المركب 509 له الصيغة البنائية التالية: CH, 9 OH Ny PN Ea oa Ny Ea الح الل 0 NT Pag pd FP ~~. A “CH, ري ان وك و ولا لير Nag Ta TE Ne, 0 م من H.C - H ea H,C HO ١ HN_ OH l
2. الطريقة وفقًا لعنصر الحماية 1؛ حيث تشتمل الطريقة كذلك على تحديد مستوى المرقم الحيوي biomarker الموجود فى العينة.
0 3. الطريقة وفقًا لعنصر الحماية 2 حيث يدل مستوى المرقم الحيوي biomarker على ما إذا كان الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك Niemann—Pick أم لاء وما إذا كان الخاضع معرض لخطورة الإصابة بمرض نيمان بيك Niemann—Pick أم لا. 4 طريقة في المختبر لتحديد دورة مرض نيمان بيك Niemann—Pick في خاضع؛ حيث تشتمل الطريقة على تحديد؛ عند عدة نقاط زمنية؛ مستوى مرقم حيوي موجود في عينة من خاضع؛ Cus يكون المرقم الحيوي biomarker عبارة عن مركب ١4 ©؛ ويكون المركب 509 له الصيغة البنائية التالية: Hy 9 OH ANT aN PEN Raia LL SE rN Sl PN EX A A اليم احا جح a od ليم"
H.C HO 1 HN OH I
5. طريقة في المختبر لتحديد فعالية على الأقل علاج واحد يتم استخدامه لخاضع كانت نتيجة alias إيجابية Lad يتعلق بالمعاناة أو التعرض لخطر الإصابة بمرض نيمان بيك Niemann— (Pick حيث تشتمل الطريقة على (Aa) عند عدة نقاط زمنية» مستوى مرقم حيوي موجود في عينة من خاضع؛ Cus يكون المرقم الحيوي biomarker عبارة عن مركب ٠١4 ؛ ويكون المركب 509 له الصيغة البنائية التالية: CH, o OH PN Sa TCH, “>> نص Sa لح ا بي > Se a > ب “مات ب HC
H.C HO [ HN OH 1
0
6. طريقة في المختبر لتشخيص مرض نيمان بيك Niemann—Pick باستخدام تحليل طيف 0 الكتلة لرصد مرقم حيوي» حيث يكون المرقم الحيوي biomarker عبارة عن مركب 509 له الصيغة البنائية التالية: CH, 0 OH I I 1 CN د ع ae oe دج ا جد عد عدا اقب "CH, يح مذ يب Son برج > تب 7 >< oi لي 0 HC H,C HO HN_ OH ! de gana J 15 أدوات لتحديد وجود مرقم حيوي في due من Cua pals تشتمل مجموعة ١ لأدوات على : أ) شريك تفاعل للمؤشر الحيوي؛ حيث يكون شريك التفاعل عبارة عن جسم مضاد؛ ب) بشكل اختياري مادة حاملة صلبة يشتمل على الأقل على كاشف التقاط واحد ale به؛ حيث يرتبط كاشف الالتقاط بالمرقم الحيوي biomarker ؛ و 0 ج) أوامر لاستخدام الحامل الصلب لرصد المرقم الحيوي biomarker «
حيث يكون المرقم الحيوي biomarker عبارة عن مركب ٠١4 ؛ ويكون المركب 509 له الصيغة البنائية التالية: CH, 0 OH Ne ND WP : TCH, ل ا اا REP NE اك ا د م بت سس سا ا ص 7 HC
H.C HO 1 HN, OH [
0
8. الطريقة Gg لأي من عناصر الحماية من 1 إلى 5؛ حيث تشتمل الطريقة على كشف مرقم حيوي إضافي واحد على الأقل في عينة خاضع أو في العينة الخاصة بالخاضع؛ ويفضل أن تشتمل الطريقة على تحديد مستوى المرقم الحيوي biomarker الإضافي الواحد على الأقل في 0 عينة من الخاضع أو في العينة الخاصة بالخاضع.
9. الطريقة وفقًا لعنصر الحماية (A حيث يكون المرقم الحيوي biomarker الإضافي الواحد على الأقل عبارة عن أيزو -سفينغوميالين lyso—sphingomyelin 5 10. الطريقة Wy لأي من عناصر الحماية من 8 إلى 9؛ حيث تشتمل الطريقة على رصد نسبة مستوى المرقم الحيوي biomarker في عينة أو في العينة إلى مستوى المرقم الحيوي biomarker الإضافي الواحد على الأقل في عينة أو في العينة؛ حيث أن نسبة مستوى المرقم الحيوي biomarker إلى مستوى المرقم الحيوي biomarker الإضافي الواحد على الأقل تدل على ما إذا كان الخاضع يعاني من مرض نيمان بيك Niemann—Pick أم oY أو ما إذا كان الخاضع 0 معرض لخطورة الإصابة بمرض نيمان بيك Niemann—Pick أم لا.
1. الطريقة Gg لأي من عناصر الحماية من ١ إلى © ومن / إلى ١٠؛ حيث يتم رصد المرقم الحيوي biomarker و/أو المرقم الحيوي biomarker الإضافى الواحد على الأقل عن طريق
قياس المناعة immunoassay » تحليل طيف الكتلة spectrometric analysis 111355 مصفوفة رقاقات حيوية biochip array ¢ أحماض نووية وظيفية functional nucleic acids lf مشتق فلوري functional nucleic acids من مرقم حيوي biomarker و/أو مشتق فلوري fluorescent من مرقم حيوي biomarker إضافي واحد على الأقل.
2. الطريقة Gig لعنصر الحماية 11( حيث يتم رصد المرقم الحيوي biomarker عن طريق تحليل طيف الكتلة؛ ويفضل اختيار تحليل طيف الكتلة من المجموعة التي تتألف من ا0اع5؛ TOF-TOF (MS/MS (MALDI-Q TOF (MALDI و .ESI-O-TOF
13. الطريقة وفقًا لأي من عناصر الحماية من ١ إلى 6 ومن 8 إلى OY حيث يتم اختيار مرض نيمان بيك Niemann—Pick من المجموعة التي تشتمل على مرض نيمان بيك Niemann— Pick من النوع أ وب؛ ومرض نيمان بيك Niemann—Pick من النوع ج؛ ومرض نيمان بيك Niemann—Pick من نوع المادة الحاملة carrier ج.
507717711111111: 71 6 RY NS x aK Ra i i N wn A § iF ob i 4 i 85 1 8# Fees pi 1 £ By 1 + : 1 9 By 1 : i wn § 2 W 1 0 Wn 1 Eel ¥ \ يي 3 1 Yee at fad N pos i S \ 22 0 Ld N 3 ag Lod 1 ِْ 8 1 2 By - 1 ¥ + 0 1 | ١ \ % iF حي i Wingy, ¥ : i 1 wn 3 5 د § . % 3 Es i x 1 a RY : k HN =3 i نا ْ: i \ \ as ! \ \ ; Tt 1 0 1 oy § ody RN i 1 1 ا 1 عيب N i ky : 8 اخ § : 8 \ Ea £3 W wn i 1 hy . i i § ~ i Lin § N \ = RY N N 9 3 i ; \ gb 3 wt 5 \ \ % i i wn Pp § % 1 : i \ RI TPE 3 ki Ey 1 i \ ساس يق مال piel عرشي 1 BR ove Penne (ek oo py ie H Jane i : مض ب its ا ET ممصا ع يت gid برض Ghar Rs in pa حول
ححا اح ا ا ا ا اح ا ا ا ا اح ا ا ا ا اا ا ا ا اا ا حا ا حا حا حا حا حا ححا ا i i H د Rue B H H H oe H i H 4 H H i H 1 H H بج 8 1 on i 1 i i N H i N H H ds i : : 8 1 1 8 1 8 1 8 8 H H دن H 1 8 i : * H H i H 1 : 1 4 H 3 H i 3 a : 1 سح i N H lk | 3 1 8 1 H > ES ا i i H + Bog 3 N H i H N § LI N H Poteet 8 x H 2 1 = : i 8 1 i 3 H 1 Sona i & 3 8 H By HS 9 EE i ad H : ; 8 ب H 5 : i > ) ِ 3 H ; H : 8 8 : 8 H Nn H د * i 1 = H 3 H - x H & H i ye H ; H 8 3 1 H 3 3 = UY a i i RE £3 HS H i H ol) i hes i Keel i 0 . i i : = i § H et 0 8 H a 3 3 1 8888 > 3 + i 5 > السك i i اس مه سس ب 7 5 5 8 لمك a en الم لحر الها i aR ye Nr Ba Re راضم CE eal Se | Stat i مركن AR FEES Or saan ga حا ع FIL Ce - حت ب 8 ا اك يمي د رجي عرسي I i Sada ha ' الس مر الل لاسن FERRE dgn
ب jis بج re اال
اس سس i : 3,0 x H 71« i يي 1 1 1 H > : «A 8 1 Td i 1 i 1 i & i
: اج 1 1 oo i 1 a | ; i N i 8 8 1 i i : 3 ed 3 N H 1 kK N 8 a 3 Ny 3 ! Fe 1 i i nil 1 ل بيب po oe 3 a Wa 1 H "0 Lad * 5 4 TH H i = £3 3 i 3 = 1 w i 3 3 د 1 = N a المي 3 3 { = a | ws ] : ٍ MH i 1 ايج : : 3 3 he i : ¢ 8 يخ بخ 5 ’ = Aad 8 i Eo wa : i { i 1 ch J HE IRN الا ااا
BIR Eo Dineen aE اط يك معن SE leat dain Ge Egy Sd Rs
i الج SER ع مي
8 8 ا الا 0 x 3 - بح "XR %, N EE 3 جتحت تح ميت جح ححا حي “للحي جحي الجن لجح لح الس سد لاحت بح الحا بحت د i NE : 5 N N : 5 N N 0 0 i N الج سس ستيج ؟ 8 N N ا 5 N N ا 0 N ؟ 0 5 N N : 4 = N NEE 5 N HN 38 5 8 8 5 8 ؟: 5 N N 53 8 N
NE. 58 N
NE. E N YOR 5 N HN 3 5 8 3 5 8 ii NEE: 5 N iE N X - N WRF : x 0 3 RE: 0 N شن 8 ؟ N N 5 N NE 5 N NEE: 2 N ؟ 5 N NEE: 5 N ؟ 5 N NE 5 N NEE: 5 N ؟ . N ؟ 8 5 N ؟ OR E N N 5 N ؟ 0 + N ؟ 8 N * ؟ 0 N ؟ 5 N NE E N ; ؟ 3 E N ؟ 3 i N
Ee . ؟ 5 0 ف : PE: PL اد x : ا TPT ¥ + 0 N pe * N 8 N N N N E N N 25 N ge i > 1 ف N 5 N : N 58 N N 0 N N 5 N N x N N E N N 5 N N 5 N N E N N E N N 5 N N E N N 5 N Gow) 5 0 ® ¥ EN ge N 3 N N x N 0 N N 8 N N 5 N N 5 N N 1 N N 8 N N 5 N N IE: N N 5 N N N N 5 N N x N N i N N 5 N N 5 N N 5 N N J N N 5 N N E N N 5 N % N 5 N 3 1: N د 3 3 N . NL N 1 ys 1 م SR ال اس الت ا ا 3 v= 3 > 0 i er * 1 = x &a 3 7 2 % SIE Ag ai fa PRR AER ل RN RRR TERE REL RER RARER EEL RAR NER REX RAR oes poe oo 3 H Alc) f Le Py wre % 3 اموي امود م اد وتم وح الست { >, EES is «% 0 الم ا حت ات تح ل ل ا
WLLL لمعيس يس رس ابس مالالا ' منحنيات ROC للمقارنات ; E اي تتا ل لا دده اليس سام لاا رادا اماد يور i N ] Ra k ا 1 Ey NNN NN ee a 0 ْ : ب ge ~ اا te إ j i i 3 : = i ; x k ب i > a N 1 x k ب 3 3 1 Ey k + ب 2 i 1 ; 1 م § Po ص i نا - 3 i x HR i i Ll ol i E 1 2 0 ا i I] م 0 إ ! Po 1 5 Fon ol : ¥ : ES God : 4 حب i x i 3 = FS i 5 1 k 2 ب § x 3. i i k: oF i i 8# ¥ د H - 1 3 2 i ; ب § 1 Lo حا ال i 1 : § Hs i 3 NETTR oo Lo ES * 1 yo 2 : a # k 1 0 10 3 ا i H i A H E Ey i : 5 x k Lhd Po : Ed < 1 = ES k 1 : صخر ; ب + wm 3 SAREE Eaaaaaanan ¥ جمس مت ¥ بجي + =< مجو جم 0 i ; د 1 3 be ¥ EER E * ب 0 ع xo Ta سك 1 Rn ; 1 i A El E , اا ا ا PUGH 06 oes ! : ARERR 1 تك + ena ا 1 ادي 8 soon § + iy ne aa a Ss a ee a ee ae aa aaa ae K شكل wid are i م A ب جيب od Lah 3 Rog ياف — TR > ااا > احا -- ro ا 2 i 0 برجي ل 8 0 i : § ) fr ل ; ب ا 3 i i E 1 ؟ : ا ١ م 8 2 : 5 N : § i tod : yr \ TE 1] § : 2 \ : 3 : 3 7 N 0 ١ Ll ! ب \ to : . PF م PoE : PE , Ll ! م 8 0 0 \ : i § م : N . : a N ال دراج : E يحي re. x <5 : N E PE 0 5 Je to : 6 0: PoE 3 y og PoE . PoE 3 ٍٍ PoE .
2 IE i : 3 Lo : ا ا : اا لا ا ا قا 3 5 sre E ¥ ak tI § PoE إْ ما to Ea RE PoE § 2 3 PE IE ] لط | ْ : El 1 الح ححا ججح ا ا ا i Le »م . مس مسي 0 الح انان aa 0 8 > 0 ' Fw ay i" dias +. <؟ 8 . ١ عد SHUR A كم التو : = لجح ججح ججح ججح جح ججح ححا ا RE ED \ ا 7 - امج i بي ERT SARS SETS سا سناد اا RARE acaba 8 ARTERY a X ¢ . 5 :
Ek SEE اا : Hog ميات اك ا ا د د م اا ا ل 4 xx Ni ion حم SN A 3 i § ; الى i § ; 0 6 i I oF i wey 4 i} i § : ب : i Po - . oF od : : = 3 ; 3 3 = i i ¥ 3 Rg 5 i BE El ا بن ¥ & ! J 3 ead E ’ EE SE 1 M Ea + XE ما «Ya LE 0 Ker gin
Ca ا اس
ال لكك الماح ا 8 8 8 ممم
ليد يد يحي يحي يح يل بيدا ليح يي ييح يدها يجيد يجيد يجيد يجيد جيجه ححا حي لجح حي ادح ددح ددحا
خ
§ : 8 ل : متنحنيات عن i 5 H A A AAA AT AAA AAA AAA AA AY 8 % we Ad AY EE oe i H “on Wo Rana > حم N HN H ed 8 2 y i N RR ن أ : a v i i ase » 5 N xX HN 3 ب H i i i 2 t H HEE F > t i HEE § 5 t i EE A \ 8 yf i t I" 1 8 i ETT 6 N i ® HES 5 t i + N 5 t i 3 § 3 - v i {3 = t x HN 1: بل v 8 HI : =: 1 i HE A N i HE ed t H : * a { i ; HE = t x HN > a v x he) H + a) v H eg LL TR 3 Ra SI 4 i [ - UY x v H : 5 N i : : rE t H J 1 0 1 3# He A t i ؟ 5 i N H ؟: 5 : i 1 * > N i HE = t i 13 a t i oa 3 : : eed i ال اا # # t H TR A { i HE i t H 1: ؟ > { i HE 5 t H 3 3 ao v i HEE 5 t i HEE 5 t 8 1 1 8 3 1% 1 H ghd : BREN i i id H SE EA i 8 . i t rr a XE FF NR Fors i . « x 0 Yo i Co [IETS i REPRE i H ححا A LA لتحا LA AA TARA لاح i i FN am 1: i i AME ROG Sad Xs oy of H Hl . FRR WENN OEE X34 BH age. Al ¥ تعد دلي د اح كي ميد حيط Fy ah ORE RS 3 ببح واي يبيو واي اياي واي اياي اياي اياي ياي يا ياي ب وكيا ااا بويا ييح ياي بابي اح ايا يلحا باب ححا ااا
شكل وي ‘ ٍّ الست دا > ات سس ا ا ا ا متحتيات Roc إٍْ اما 1 i EH § ; 1 By: 0 1 oo ARRAN x oar 0 © يجي جم ماج 7 k] 3 N Fd Xa ¥ 1 ب v N SR i 5 ا i i 5 8 1
EE. - ; إٍْ i ب RE 1 : و ب § 3 8 م i id H 5 “ال :8 ; م i edd I 5 8 ل 1 i : 2 8 i i 6 8 i 8 1# ٍْ is 5 8 1 td 5 : i 5 8 1 id Ps ; ' إٍْ § - 8 ؟. i i wd 3 x : 3 : LE اا i 8 5 8# ؟ * ال 1 os - ; أ Powe id 0 i pos i 8 8 ; 5 #4 1 i i 8 1 8 = : 1 i RP 5 8 © 0 الح إٍْ i 5 ؟ ؟: 7 1 N 3 oF Hi : ; 10 ؟ 1 i Es 8 1 ; سن 1 i EE VY ; 1 H © ؟ : i 8 = ل مك 1 i 3 8 i : : > سر i vs 0. 84 لوا 1 حي v Wx EN # سن 1 i ا لخ الا 1 لعي i I { ل ل 1 ا العام AE tS جا لبي واد 18 ال الب i : nia ian ana تت تي تن تيت diana ina ل i
J اندي AAA LLL LAA AAA LLL LAA AAA LARA AKA ALLL A AAA ALLEL A RAK KL LER AAA ARAL LARA RAR RAR ARRAS 3 ES ب 8 H aE اد 58 rg ar 3 bh R 3 5 : ب 0 8 Vaal Pa ROC متحتات 8 بك للا 3 A A A A EE A EE EEE EEE EEE EE ETERS EET ENE N FERRER ARERR “sx N 58 3 3 H Toes ال ل N SE 5 cs i 3 3 5 5 A 3 3 ¥ :: م a 3 3 ; . i a i } : 8 5 3 3 8 ب a i } K 0 0 A i 3 x el 5 3 ل HR a i a ee ee E 1 N 3 : 7 1 N 3 : : 8 1 N 3 : : 1 1 N 3 i bY 1 1 N 3 3 Eg 1 N 3 . bY Eg 1 N H : 1 ب i N 4 oie 3 1 N Fh RN te N 5 i N + 3 Ww 58 1 N 3 :: gE 1 N 3 :: 1 1 N H 8 RB 1 N 3 BY 0 1 3 Hy 5 Eg 3 N 3 ad 5 1 N 3 “8 5 1 N H > ٍ i N 3 RE 5 1 N 3 fe ps 1 N 3 3 i 8 1 N k 3 fo 5 1 $ 3 3 fo i 3 3 8 H bE ل i HN 5d - 3 N 5 جا ام RIS = 3 $ 3 م 3 1 3 $ 3 3 jos = 3 $ 3 sy RB 3
3 3. Hy kes g 3 N % H 3 0 8 oi 3 8 5 8 LF 3 3 Rp 3 3 Hy 3X 5 3 N 3 ¥ ot 1 3 Hy bd Eg 3 3 Hy 3 5 3 3 Hy :) os 3 3 Hy FE 3 N 3 81 3 3 Hy ER 3 N 3 di i N TF snl 8 8 جني التي i $ ِ 8 I, 3 $ 3 FI 3 $ 3 FR 3 3 3 PEIN i N i © i by 3 ب 8 1 3 Hy a 3 $ 3 3 3 3 bh a oe a 3 N H ب 1 i N H a] H i N H Ea H i N Yoo i N x Ios 8 3 i HN WI ESE ANU IE i N Yo i i ١ 8 ro pd N 1 الت تت لت ال ; N ا ل RE 3 مسف EE] NR ES Ri 2 اع N boa 5 BH : 8 : 8 اال ا 8 REE N RE a. S 8 : للستت Sx متي won 3 ¥ 1 : لمحي AP CR re: I 8 لفاك المع REAR ال المج بي مع H ا BERLE LIVIA ROMA HES ل N
; : Bl 5 . I p HE: B FES B i B ii B HE: B aol 2 3 : Yi B $i B 3: B : 5: : i B i B & NS TY BS i : Coca bo i H PAT ARE H ou” : 1 اشيج ل الل لج ل ال اا * § bode fens 3 soa al A 3 H Eo dese Bigs ed 8
©». الا سا : BAA NRE = سسب Fuh ا CE OCU. FR ne H Doe SR ; ب حي امد : : > a? ل ل لت لح ا alla RS ed 3 ممت 8 § RR EE 3 LAT he B 3 FC H a ال 0" RRA 1 ا ا ARAN AS NN RNA CS N RETR SEWER RNS a : EPP اي Cac SS ; : wl H © EA ap a [Rye Tas LEN Fours Ya Fan RE Fue Re ا + ا fal الزمن oad CE E بم ب 5 إ 0 ص ِ AF oF : ا we ال ا أ برذ سني يواد يق « ا SRR حت ا هراج ال 3 EN 8 عيين مج اج مح اج ب بج و مو# ةع 3 EN og لج »7< وج 3 fa cal ~~ ~ 5 اي Saupe " Lx = % ا ا ال تعجر ul > 5 يج ب 8 Rs : : = ال ا . wae as ١ EU 1 اج م J اا C ب oe = ¥ « 8 & Ex x H + i b% لا الى 0: EA د لظ خخ H x SETS ؟ SENT WA CERNE J 5 8 2 يا اج 8 RS ا em اا د د ب ال hs % we 8 اا م نر الا اج ا ا ا CEs pp wl I SE ERE "3 ا FIFE OB SI i EL sey 5 81 6+ 1 ب bo - 8 = 2 ., Bs i = PER { % i : : FO - PE : EY = 8 30 83 ERE 30# إْ of & EAE TE SE SSS EN > i hi FANE 5+ +5 ARRAS Sp. “i 8 150 gx rg 1+ + ل خِ ا اهل ال ا 8 8 8 اج i > Terre FETE EE phoma PRE IE EN RA = SE SE A عل SRE SE ل EY SN £ f اخ أ OR EY EN ب & 2 8 نع ال i Li ب > E23 SI SE 5 0: + " 1 : اله ان ا s 3 ب fir) ¥ pe UT ae Brg ne hos . 8 fo A ~% NEE و 5 4 المي 2 دجي يم i oo 1 ل ل لج £ سم vp § الل thee ةا bp cv be TET Tx لا 2 pe ب x Joven: Sew مدن A اي ¥ Tow a Sk 3 i Be oe NE EE EEE Ta سمجلا ف 5 ا ل 3 5 & 8 + pS 3 > k “& i 3 FU Be الل 8 EE «ة لا ٍ : & E ® oh 3 ا i 4 : ا ا ل : الم CR ل الي 7 حا المع oe * hu : Ni, Sx 3 Soe hy ea 3 اي ا ne يني ا ماسم 1 نت
. KE og Sed # بوحدة ستقي بواز HOSED * : oe He of انج اله اله الها a “ الب عه لاض لبط ا RE جخ ها اج اج جا الها ارا الج ابح اج ا جنم 32 RI 3 = ادا A A TA Aa ا من A واي انعا كح % ES ا 1 x RY ال N % Ss Ea 1 8 Ter 2 i SA FE oy A H Er EEE Ww 3. Sa 3 ! ps © : wr ® 8 ا x - : ات جد د we # اي 3 3 808 واج = اع ] : رس = & - % 2 5 م 0 كد ا لز ايد لخ ا ترات 8 { داج دج يخ © ٠ IE J م Va oR دا Rg ال ا 8 لالز يج ل »ل RY ا : EH vs ¥ FEL ل i Ral مال : الي i الب مخ الخ Rx x a 1 3 3 الجا © 10 Re 0 ¥ 1 بين To 8 " { جنا - : + 8 0 8 الج 0 صل 0 ا ا ل
.م ¢ :8 > 7 ذا اب الخ الي 8 1 fran NEESER Sole an SR a ا + اله ث8 : = REC ا : ا اخ TE SE 3 BN : Fw + Koy og اا L اج I الا اك ل Loy 4 5 © 8 م الج ني داج ان ال EN i > ed * IN oo 3 ا ايل A a 8 3 جين 53 # “ox oF FTN So 8 8 اا لا 4 S08 ؟ © UE ESR ag i ا الخد الج : 5 wo JE SN 3 3 > ¥ § OE 3 To Neem SR لخ خلا 1S ¥ i Vs ؟+ج fy oF 3 td $e % xr “7 با 3 (0 5 © ob oR oR ©« اليا © ؟ 3 ا Yan i 3 = i wo}
§ . H 1 2 0 ا 2 + 1 a on @ 3 £0 1g ¥ إٍْ x £ - 5 0 Re CRY 3 Woe wooo ER N 24 5030 ل نم > : is hy EE N 8 ال ا N اا اما انم 0 1 + Ean TE t ¥ ال Shon كا oF a ل 8 8 بن ON 2 3 pee LE SC A i x Nae ANS & ب لالتحا ER دوس > a PT La يي rs + Semen RNS he 3 اح 4# ا ا سوا ا ae جا = »
X مي ا ال EE Er 58 Hg tie بتكتفة. برجدة z po مي وار Naki اللتلماية<: ابجع لجال لضان نا نس جص اج لتخا م ا ب 0 جه و ري راع ا ا ا ل د عدا ان اي RING & ل og BE EA .ا en ب ال . I in : © حك لحا لب لا حك حا ألا امم اجر جوع وت سي < ال ا ا ki; 08 PEE & Hoe 3 i Ey re ا ا BE 8 H 2 ا & 2 ow x N ال A + ; - ا ات Oh 5ل هخ ال« د : « NRE J DRE NE § 1 + + Foy قا 9 5 ١ x ١ + ال woes د لا لكر i ال« AE + ال اذ CHR SE CO CR 1 1 اج ا ++ § ا اي § ad Eo & i & IESE TI ب 350 اج ed ات 8 Bog 3 TERY ERE 8 م اج اله + LXE 8 RY ب - HN 8 i H af » 0 0 - ke hn Fo § if : Ee ¥ 3 { @ عا 3 H ا bi { * 1 wd 8 ب ب 5 el ¥ . } EAE SO SEE SE ET ل 7 "م 0 a & الإ wo 0 ا ابا SEE + A i RS DT اخ اعرد ةا { 51281 3 i CFF EEE Sob BoE ooo 0" wo LIP TO OE A A <I -* +4 >» جد © BOB og EROS م THe i ب ال 0# 4 FE 5 نا الا ES جا + NR H Nag 8 E a د iN حصي 0 نا ام واكم “م 2 SES SE SEES SE I مخ انح >“ + ): ال Fwd - Ea FLL DL + %» BBE ؟ © FA مد - 8200 & الا : 2 3 : : م wu 0 | ha الا WwW Sen i 2a i “a H a 3 5 i 3 wi H 3 } الج i & 0 > مخ & 6 i Ra & 5 1 3 Bt = Te i > al Se i EE SE Sa . i vote wn ا $d x - ان مح 5 EY 4 يج اا 0 ا : sii igs ا 2 4 م ؟ 5 1A ! I EE © — Re k: RRR ——- BREN: a 4 + ب ‘o ® 1 0 § wd 5 Ol { i fs es « . بواز in لكثافة؛ بوحدة دج ماسج ي اج ب بللا 8 ام rere pe ا هلا Bears Se ادا لح eR دي ¥ & : 5 دعم د ده ا نا ا الا ال ha 3. © إ wo 88 : 1 35ج 8ج 3 1 3 م م 54ج 8 ات © i 3 + * & Foo 3 +4 : 7 bo] R hod » N راب * الى IU 8# ٍٍ 3 ا + + Fos *« ذا ء ج ْ Sow YF Sd «ا © .ا د x3 i wr nN 2 لا > pe د i J H ¥ ل الس ا« § 8 % 5 ل 4 + 3 fo انمي الى wR pe ادا الع ل لك i 8 UT Bax 8 By ow 0 Ta Hr RR + H cow PE Sob % EE 0 EE TRE © 8 1 # § ع Jos PO i ; i Ge - da Tg 1 ل hs : : & b ¥ { الحا م 3 1 3 x 3 54 Pir د م - 8 ا ل ¥ He i 0 wt £ ا ا ل CH SU VS SH. 4 od مع ا A EUS SE J م SC (| 2» + #*< اب الج * A of * 25ت US SER EO S Cor يا © لش الي اي © ل a = E 3 1 4 = I t 0 1 + ow أ ب 5 = 3 =x wn te RE pi S&F ai So = xe Cr 4 i my EES PFS MI ED Ede ب 5 [33 ny 0 + Ms “8 w= = = B Ba ¥ + Jo hs ها 8 £ Ai i i a b od 5 ١ يمح لي ال ow = JE eS 3 اب x + = RS £ # 5 ل > 5 y + 5: ل ب EEE wi يج Ea Tg 9 Bi 1 ا ب ذا ا د ابت ا 8 4 ا SI. 3 _ acs 0 4 = hg LY 5 ] جم انان الم © انم الى ات #8 CL ‘ © 0 5 ¥ 0 Ro 3 Se, J¥ 1 9 د ّ ا i اين 0 4 اج م ممح
Bp pikes موحدة ARI ow . بت با ادا عم جد بد ات EE خ + ho oF Fic Divi 0 #8 > اا ات الات اي ا اع 2 i 3 ى 5ت ; ¥ £8 5 xo s vy " - BN N & دمن § ES : g§ 2.) 8 1 ا pe fi. RE EY i SE : yk oo ا TY oe op P32 يج SER © { SET I !# حم © #534 20 ة يو ل STE TE EE 3 SU Aw 8“ نا اجا ا هد ل ا ae 1 1م1520 2[1081 7 Sa BX ما لم ا جا \ 5653161 سس" ol H . i جم 8 ب يا ليخ i ps SF i oer te ¥ X ; «& | Eo. 5 الا اا = الع 7 يا = * : ل ا يبا x 1 بع Rey £ Pu a ب = « 0 Fe ا 1 E h { BR م ال ل الا يج ا 8 1 |: 1 Je i “8 + كر و Be he 7 & 3 8 ل ay i j EE A AEE 1 5 ! © مرا به الل اعم = SE الك ال x Ca i Tec ppe FEOEEL SL GL << 6ج _ #5 NE ا لخلا ا الا ال الها ها تل م ام انك اط EE ress bd + fF 8 الي 1 Pa ©+ 11+45 E48 ؟ © “ i ني "ْ * H La 8 2 b & 8 wg fp bs ل“ ER ET 8# :ل > ا * + »» _؟ YS oa Fog os مما £40 ry ...ههه اسه ف 3 “ Soe BOYS OF 3 ع ا i ةج 1 re > © 8 ها ا ا oF Jha سلتي Bay ARIAS 3 الم خا لبا ل SEV ليت الت اسم حب نيم سب ب ا FP مد الم امن و جد اخ ا 8 NE 8 x EEE EE جاه تاجو = fr Ropes Va domain neni on Soni Sete in I i % § 2x : oF ا“ EY { EE 2 5 : EA © FON Do ; bi : STE TE * § م الا لي | Ree S wd 2 > 7 Rg . 8 > Ed 8 & 8: w Top og oY aus b N i © i Foy 59848 5 8 ' & 8 x 5 8 8 م اغا i : ل bygpb it LT TI NE il 0 ® R i i بس ة مخ hi H F La YY بو : 2 بت 7 i 3 م ¥ + : rl 8 Kem w hy ل ¥ يبع Bh H if ee £ CAEN »ا بج اج © x 3 > ا ل ل ا SA ا J NO A N i 1 5 3 W 1 3 م 0 3 ّ J oF & 5 تت i iw 0 J SE CE SE SS + : ب ال الج Fo £ on b 1 م ¥ ¥ 3 re . ty t &Y¥ pe إل ال ا ا : اب SEE SI 2 + م 6: : Xo 5 3 fo es الخ لل داتع اح > و ال ak يي 8 ¥ Eon 5 ا § t 4 i ge TE ¥ & } 1 = Rg 1: ا 2 TE TE ل + ا © د Re - H نا لحي N w iS : ? : EO hn £ oo م اج ا « fired 9 a EF اا : ا إ ا اي ال« FO جع اخ 3 0 ie ا 3 لا v EY < Dl——— 59 ل ا ¥ wh 0 0 R 3 Coo BU we ص سي ّْ 0 0 1 ألم ب 1 sd H :
ا اجاج اا ماي .5 Bas ge SRR ستتي يرال 8 wm a. 0: - SN bed % م بد دا بن لين انم g ¥ EAE BEE.
ECR x © + ES ب ب + 0 NY 0 > a ES هي RO EE I SNC EAE PA WE RAE Ea: 8 8 % 1 ا & 4 خم 3 x 3 ¥ & ا £ Re اب 5 د ال لذ بد oD > = N ج ب * 0 0 الا( الك ما I ال fr 4 7 ل الحا «* ا ae Sa i ن 0 داج خط 5 Toy op bor 52 BEG ® ord Fy fg yLy oy EE RE ١ + ل اب اللي 8 7 5 oo L 5 Fe Xa BNE EE: > بج 3 ال الم 5 1 ل الا ل لراك ا EER ROY EELS OL 4 ار : 3 ب ل i 1 ا اا نا ص 5 h "م ا LE. } 8 4 5 > i { Fw B i 3 ¥ ا ل 8 مضي i Pow ا ع #8 اها ل RE SEN SER Ey SERS ue wd no > hd 3 & 4 &, 8 2 2 = [ مد لبجلا | RCE 3 ل ROE OT نج 534 جد تج pe 3 اع الا اج ESOT EEE 8 لخ يط اال $ fa 0 Soa dry = * كل A OR 9 SEES ل وات 2 RE FTYL EER LE 1 : 8 © © 5 5 ؟ Ta FL LL Es iN 5 . : 34 : 5 for od & ا ب يي 8 N : A i x N 1 1 1 الت > 5 Fs ¥ oF % = ® 3 ا 5 EH TEE, SS # i ج %- 338 2 8 & ا WF ER . SHH EAE HEHE TS. go SR SO 3 hi wi مم اال خا ع انج FER LES : § : = rey 0 ا El A EE es a = ا
ستتي برل Bia gp REY
$e . REE J hd aN ele عي اج <7 ين احج or »ةد دح SE GN 808 j EEE AN © 3 E & A A لاط كا بحت NEN LES 31 0 1 : 3 5 nN i 3 SOW N : ¥ 5% i + 8 © ا ال ل ل اللا 1 تا الها الما 4 ِ 5 R i PARA :اج 0 ب“ 0 o AES SE EE BE RETR E إْ > |. با انج الا << اخ لاج H EN) : : إْ +504 وج 8 BOW Fey & 3 hy & = JR ye Ete rb EO ني i سس اب »م 8 = يخا A, ; ES ¥ i ad v & N i a LF م قن EEE EE - SN EIR # SEE CS T أ + + IPE A FIRE Bo 4 » oo 7 k HE VE I - الام & ! 3 : EO £3 Ff k k A 3 PIR i 5 EE EE NEES ED ج
©. 8 3 4 1 SLE NE TE اج + ¥ Noo u 0 { § ب ا ااا ® 3 . 3 8 5 2# Ce = EE SI CRE خا bier it م Elves a 1 بن 5 I * a 0 > ا ا o 1 اج 0 بيد ا نا
Fae سنت Tan ge BRIER we A TE لد IE TE SE NE 3 By o 3 ww اج جا + ها OW hi | 4 + نا يدا نا رد ند نب ان ا ¥ >< * Ld م x x » > + 3 ل د EA تيد ne 8 x 8 8 i & Posy & § a ¥ <2 ا ل ® 1 ood 238 3 SIR TI A SE Co جل« s & 0% " ERE SN ¥ = 3 8 ke » To i Toa EF TaN 8 EE om i Foo ان خا ل ا الى © : el i 3 WOOF oR wow hy SHEE SAI EEN 13 Soggy kK Sh ov hd + N اال EE TE SR ايد ان عي Ce N se bE Egy 0 a! 3 0 ا row ‘a i % بخ 4 8 oo, LE 1 x oa 5 i I Ng - oo Sa 3 x i SO ام .ا ام 5 ؟ ح ن ¥ Bo 3 ل ERR ا م ا ىل قط م تب od 5 S&L oo oe kb 1 الل 2 0 ا © a Te EET EER « 505 85 + الج مهد 03 BO jo 1 we احم ا ان SA, ل ey 3 © اع ات ا اتا الج ا d ؛ ERY ORE ةا L § an 2 ES ا 2 SEE J] 8 : ا SE ب N pr ب N { { & Aa iS 5 a i a Ed اام i د اس ل 8 & i ax oe © 3 EN 3 < * * ذا الج Na ب" : SEE + DRE با م ب SE ® 3
4. WL a + ¥ لمر ا NADER NE SEE آأ اذخ 23 Ny EEE EO ا EE CI § H
ص Fai Tim gy REE Ei Y REECE SEE ع جد راج اي داس اس اح ا TT ءا 0 ااا Sr ولاج ES = FARE dn da RR Rn nh ed ae Le “5 & = 1 0 ج 0% ْ 3 ¢ 8# 8 إٍْ «x 2 0 2. fe \ 8p £ wo 5 ْ SEE BE BE woes بي اي by * ل 8% * Ww Foe od FY 2 A&R Re i sn SE NE ل SS i BoE 1 نر انب لي SH بع يخا ليد 3 جح الا ٠ 3 1) i ¥ 8 § 4 : Soe Xow oR t eo ESF i yr Tiere bE i SR 3 3 Sa 0 ةج 1 1 0 = > = ! 1 ¥ LI a x wm i i JE 8 هرا ال Soa 3 to FREE الثاني A + OE £ 5 0 د ابه خا ل ال لط £ Ny Eh 0 Se ow 8% ا لخ + % i RF ¥ Tr a : J 3 RO TE مد ا aoa ا يذ Tal pre LYE ل ko SERIE IEE AE TE EE A ل RE 8 51305 جم ا 1 Ex ؟ © ؟ 6 555+ ؟++ة دي bs Ee Tr =e LL ER يي # ٍ £ اط # د جم LE 5 £ ارا آم الى ال <4 = لا اله الث اعد الل 8 > EEE «I لا الك Ey 1 LIE - Tog & i & لس م يج الل 50 ججح ال ا اا vg » so 4 ou ES 2 Fi 5 انا اه
any ARO ستتي برل ادن اع له أن لاي أت اجا ا يجا ليد ايا ايا a Foi 8 + REY NOR WT i) Ts شاه ابيع i. 8 ba Co ras anaes حك نط xX + 0X UR SRA LA A va a sata ل i ® = RANA RAR ب . i 8 مب أل الال IN * i os 3 8 3 SU I 1 0 \ لل ة ٍْ + © 5 5 بي SY yor Px EE I EE I | أن se انيد اي SEE oy CORR عل ا EOE EE ER » EEE EEE EEE ! H سس 0 ha 1 £9 إ Phy ا ب 5 9 : : E x 0 إٍْ ا ا TT LL لأ سا « IE SR AE © ْ: يحضم ا ل Jie 1 3 #8 ل ى 85 [ERE نج 1 3 م : عد IRS ook © اج A الي ا For BBG سل 4 F& i Ee لي كوه خخ م SO د © DST SI 1 8 >< PR ادا x PETE ا داج الى ان bs EC = العام با © 4 4 0 “ا ا IE Al © 3 OE BX & = 3 & © ؟ _؟ 5 LF RORY Ea 0 > : © ; | ¢ i 4 oa) Ke 8 الع ال 0 : ٍ 0 ب 1 i du ¥ an & § a J تخ اخ اخ : ا & TEL 5 ١ SERRE NE RES 8 3 ْ لج د + IS اله خا 5 8 0 »> ؟* RE H م [SE - 0 ا 3 $s 8 = i ¥ Bu جد الا لإا هاا - 8 Hy a x [IN ب PS & LE Ba
: aa اق 3 RN متف برجدة ستتي ا © 4 لذ انا لبا انحا لكا بي لبا بي بي اله 0 3 Te : Boro Ror Bow 8s = #« اجا اج احا A مداه لجا & & ا EE RRC Roa NW 3 a SSE ow H ا 2%) 1 a = 2 #2 3 3 x § FOE يج 880 y= 1 OE 8 0 & % { Soon 3. EIR ! “اي SVE * نم 28 5 .ده * »تت SI ال يم ثم 4 اج !ةم wf لا x 5 ا الل w EY OR a ENE SU SG iE SS كرا يخ SEP EENI EEE Sow KORE oy ¥ ا اناا B ا ER FREY ERE EY 5 i N - od اد ا i Ay : % ا i “5 ل I On ES : اا اع i wy ¥ م : لين ب نما لم a i IEE Fi 5 8 + & & 3 ب 5 0 . “EA ¥ Boy PE SEAT ل« SN FERN ERE: Fore Bod 3 8 8 LE 4% 0% YO Segre dbo. كلش Boh = ال + حك اب i 4 الح 88 ا ل Ya FL LE < % B % wv 3 #2 3 Bond } $& H Hb ب > i 2 ٍ : ْ > Ed IS hd \ Ls Ag & = h 2 & CF 3 & ط حم اذا اج 8 8 1 A ¥ EAE i as a Seow Te 0 oS اللا الح > انا خ« i SEER ٍْْ SR RON OB 1 م ا :+ © )وج 4 RN — % الا نا ا اذ © 63و25 H = 1 ألم د ا اج 3 H }
Has sri Baas SAREE 2 0 % لت حت تت ا ل NE Re Yn i : : & i > & اا 3 § IE م 0 جم % ES 5 ا ER = 8 38 9 ا ا NY i a BE i 3: 38 : ST op op Foz oa * + { SIE J لوق SR 5 8 i Bow or لخ !داج بال ow wow Pou EX FR A I ب ا SEE I TE A م “ا ود ليم ج ¥ الا ا OR WN OY ORB 83 اللا 0 Ri A to إْ ,أ الخ N = * 8 0 عيبي Py ١ عٍِ لج ها لا © الات 8 ب بن ب واب 3 oO ¥ hd 1 A IRE JE EEE £0 » IRE EE EEE الج + ا و اللا ب ER IE A كه Fret rrsr i bie EE Eo Loa © ةل { LEE # & #8 2 ¥ &® > = ; * يما كل ا < fort 3 : ER A 0 0" -* ببستت هه ا 34# :وخ ا الل A ry 0 hg 2 Lis pb » L
A. = E & يح ل LY ES بس El i 2 ع
ES Haw سلتي Baa py REA & ER el Kd oo = من ام يب من x FEA مها اجا لج ماحد لها داج 2 ةج تج اي كج تلن مط ل ا ا . . © § 3% ْ ب 5 1 ْ i 2 3 & ) OW ىم EE ني § FEE 5 +5 ٍ ا ال ا 2 SOR ب *ح لي & & SERN») * 3 3ج م ابي َي ال ا ادي PE ا ال الك ¥ pow EY a Ek 1 i و ل ا سلا د« قت H 8 SL yp i 3 te ع & > ROE SO 5 5 4 i ل الك : ا ادق الاب ال pe & ts H ¥icrbrogy ا00 To oy Sr | 5 ES EY 0 8 § :
4. 5 3 1 يي & ا الح اي # ¥ 5 ¥ * - ل ا لا ان ا وان FEI | 8 1 حم 0 ¥ i ص Tow ¢ i 0 ل 0 Peo i « Foo EERE YY Rod PY ) Siuipe bor EEYEL Prikl eve by BT EGE EE EE * RES ْ £ £ Hc i H ESS 8 8 H oe * 4 LI { ES د « : ¥, ْ a 8 ٍ 8 ٍ 7 0 ا ال ال انالا 3 i £8 Fy 8 ] ات SEE 2 Be 3 ": . 2 و ٠ م“ 8 # pS Hs Ea es كنا
. 8 © د il 8, 4 الى ا i a
Blagg RISE مستي وال د بجا © 0 8 د و +< تح SER BE كدة 1 كا BUS يجي na الما يا 5 i ا RS 8 i مرا i الي 0 LH 8 <8 i g 8 i = 3 od 8 : ةي 1 bg NR Re & 2 ¥ = ب« 8 3% SEC g yer #8 1 2 * 5ت أ و 4# 0 حكني :عم :2 SR 5 7 5 ! ل و5 ةو er 2 3 % BE} 8 & WOE sg N سمي ل 038% ةج SE I pa 8 he i 3 3 ¥ % 8 5 A 5 ؟ © EEE EE تت © Sar i 0 : FE 4 : + wo ¥ ¥ i 0 1 8 جم اند ل ا EC NP = & »م RS CO RS 3 8 ky : ؟ تاد Foe oe dT دج 2 ؟ 10 ia I ‘ SOR) 1 a 1 خم ال 8 ا > x wa E 5 CE 0 1 الا :0 Sg eg SE ¥ ere goyy ok ba RE 3 Ni Eo a £3 انج + : 3 I SE UE SE { SE EE SE ¥ EL ge NN SE 0 5 x N لع HEE SE EE ا £ ؟ SR SY 8 الت ا La 5 x | fe > x po : xs os BE a i إٍْ fg tl i 3 : # ال اي & 0 Toorak DRE ٠ و ل اا جل 5 3 4 اك Ion ¥ 3 by 4 ال« ال ox ow ¥ 3 a | = ال x ¥ ® خا 8 حا oN Ln ol i oo 8 8 SE SS H ةط ل 3 ب $i LEVEE م BN بد 8 > : + اله i = Td
1 0 1 8 £5 : TV 08 ًّ ا | REA oe RR i pa لماه ع مج AN وي ٍ Ey : جني مر رن دي ol Fotos x اص كن أ ماج الما HEE EN Bes يا Sauter \ اد لمر ا 0 م ٍ 4 د 6 ie مني ينل لمج ٍ ٍ ٍ NE § 3 “8 N 1 N iN 8 3 “8 N 3 “8 HE 8 i 1 H 0 H 0 3 He J i a Yan XR i 1 i i i * ٍ: i 5 = H Sy i i 8 ْ i 3 RE) i 3 Avs i i Ra H i \ - 8 3 ل 0 A يي 8 HH ts ! NH 8: coi 3 3 أ 8 ود حا 8 3 ؟ : pl 3 الا slp & 0 ants . ) A YAS ON Tg Died الجخ i - لاد الك 1 VG تنية .نا اا 1 Yad Toa الا ل م ل 8 1 8 3 RJ LY SESH [Rg إْ ا : د : NTN EY B \ H i 5 8 N ay ; iN يا 3 TR 3 3 ha 0 : NN 5 ] 0 HI ; NN i 8 7 3 1 ¥ 1 0#: NE iY Fi 4 i 8 8# 5 § 1 5 : : 1 1 ١ 8 N Ww oy pac 5 1 i] 1: EY i ا 1 ٍ A BRN N H Ny 8 8 8 : 3 WN N 3 3 8 8 8 : 3 5 N 3 Ny WN 3 ia ! : 1 i 3 ححا ال i 5 1 1 id ad WE H SH 3 : bet ed دن لل ته للستت ا ro A م + ل i A. TT FNR— 2 ARAN 3 LEE SN bY ما 0 عير a gS: X
3 1 ا نا 8 5 id &*
a. : den 0 ا ا ا اج y 3 i متي الوا لصا عا رق ذا i § i 1 RE LR Sd ; § i Eo لت وى pe مرش Yoon x of N i 1 Ci os + x 3 3 AN لمي ل مواد aes N & 3 i Fo Ea Ge thn ل 0 ل fs اا حا i " 1 3 عرض تست 17 Hy 2 متاق 6 1 اا ؟ 8 ¥ i 5 8 1 RN 3 8 ~ 5 Sk ا § i 0 Sel SE ge sn iis a 1 i CIR CE A رقن اداج EE N X Hats BBR توا من رع oy 8 5 مرحي حي ا ا Poi § رضي الو تجا عق ارج حا ا ب 8 ؟ ؟ ka = 1 Se ؟ § 2 5 i A ot خض حرشن م موا فيا RN LER Ge ؟ SN: > ES x 3 > = el dE 0 0 8 ا ُ Ne Fe جرعي ممت 0 By > 3 8 ا مط Rg 3 oN 8 ال TOF. Ne io Mag v ¥ fot ؟ Ek 3 يت ses Pg * 1777 ره لجر" 8 3 - : i RA i 8) إ : ّ : f i i Fd i ) i i B i i 1 i i $e i ) : CN | i i a ww RI 0 i > Pola Smet EX + 0 i NT I. ER 3 i SE ا : i a t] 3 5 0 88 Sal oF i t] oO x SEE Os ww d i § SLT ere ا لك FRR sok § i YL > SORE CR الاي اماي B = a i ماد ey 3 ER EE So We ا o i © الك اج 0 © جاح اج Em es ا : i TW م ا خا © ب" TNE ا بي 3 t Ra RN TR SRY لاي 2 CSN 0 CA Ee SG ا Fook ® SE 0 8 المي Ba EE أو I Ta) k مي ا i Peel Sra انض FY a i ¥ ot Ne RN RTE a ا NEE ل ا ااا * المي i ع . 8S NR Nan الح 8 ع + مان راج الخ ع we ال i EC LE 3 Fa ا + i 1 : مال الع ع“ ا ps 8 2 ro 0 E t SHE TS XE E i oF RE i 8 م لجن i : a لي ki i oF i Yo wa Eo i 3 الا ال ال Ae NRE RR ااا a يار i NESE ع ا i i i { i { i § ood ا Raa > AAR + ل ال 7 ٍ ا اا + 1 EY FN ل جحي IN ¥ Na Koy م با 8 مد حت م ا 7 الع
1 i den v i 3 م ؟ NP Vo اي لجاب اه ع قرع من vod ‘ يا ES سم ERIN (0 1 8 اجا برا ليت مح لاس رج مي ا N 8 حر مد 8“ ا ب ال EY ' 8 NR Se 0 re 1 N N WN RR اجا a tN N ; NM jo i PNY NN N N i : © 8 8 : tN i a ve ال 8 1 i ra Wy 1 i NEE i 8) iO i : N RRR 3 : : م ا : a NE J i + إٍْ لا 8 1 i 1 = : voy 3 8 i Uo ا : RE I : CO 8 8 i TE ; N > i ا 0 : 0 : ا 3 ER E X © i 0 :: > RK 0 1: Bi i ¥ Fal oN : 0 8 i i v : 8 i 2 8 : x N 1 : Fh boon ae تل AY i ب 3 3 - Na ا Bed > Xe 8: ا يدام ان“ على صر NE we Be ow { 8 i و 5 i I ———— WS Sead Fok © 3 Tenghod لتنا لخد لمق الاجر Tat Rady ب ل ES) o
ا R 8 8 1 ; N i : gg 3 § LK 5 N 3 i Po 3 : ! ارش لاج وتان H 1 > RIA & 3 راض لل تاكن مي < : i 8 N 3 FERN : أجل عرق Poa § R GEER SRN RE 3 3 § ¥ ار لمتحا ب : 3 9 BN css 3 : 3 5 : الت اس Da 8 م« iT i 0 i HENRY io i i a es lr 0 :0 م 4 i) رضي RR م مهاه عع راق Foret IR 3 $ ؟ NORE Ri 0 8 1 اح 8 I بل م ES { § ؟ ٠: $ 3 : Se Creo ee ؟ تقال جراطي اباي لعج N Fo Ga 2 8 ؟ SO Ny : . ؟ اهن ام ا REE SH Ne متاق ا > ا yd : د i sd a RN EN To Rap Signs + 2 ال 1 : 5 7 3 0 Ne i * ال ا كر EE 8 i : > : ا a : Ce i > امح الا so : ¥ : > ال ا Toa i معي Sg 3 TE i . : i ES : : 3 i :ا ARREST : - ps + ¥ ل + x so 2 الع Es Xu &s و سي andl
لاله الهيلة السعودية الملضية الفكرية ا Sued Authority for intallentual Property RE .¥ + \ ا 0 § 8 Ss o + < م SNE اج > عي كي الج TE I UN BE Ca a ةا ww جيثة > Ld Ed H Ed - 2 Ld وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها of سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. Ad صادرة عن + ب ب ٠. ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > فهذا ص ب 101١ .| لريا 1*١ v= ؛ المملكة | لعربية | لسعودية SAIP@SAIP.GOV.SA
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP13002515 | 2013-05-14 | ||
| PCT/EP2014/001306 WO2014183873A1 (en) | 2013-05-14 | 2014-05-14 | Method for the diagnosis of niemann-pick disease |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SA515370129B1 true SA515370129B1 (ar) | 2019-11-18 |
Family
ID=48428310
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SA515370129A SA515370129B1 (ar) | 2013-05-14 | 2015-11-11 | طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US10302664B2 (ar) |
| EP (1) | EP2997384B1 (ar) |
| JP (2) | JP6660291B2 (ar) |
| CA (1) | CA2912274A1 (ar) |
| CY (1) | CY1121790T1 (ar) |
| DK (1) | DK2997384T3 (ar) |
| ES (1) | ES2731920T3 (ar) |
| SA (1) | SA515370129B1 (ar) |
| TR (1) | TR201906195T4 (ar) |
| WO (1) | WO2014183873A1 (ar) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IL298675A (en) * | 2013-06-07 | 2023-01-01 | Genzyme Corp | A marker for disorders of acid sphingomyelinase and its uses |
| EP3221705A1 (en) * | 2014-11-19 | 2017-09-27 | Centogene AG | Method for the diagnosis of niemann-pick disease using a biomarker |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9908190D0 (en) * | 1999-04-09 | 1999-06-02 | Pharming Intellectual Pty Bv | Diagnosis of lysosomal storage disorders using saposins and other markers |
| GB0128498D0 (en) * | 2001-11-28 | 2002-01-23 | Inst Of Child Health | International standards for sphingolipids |
| NZ543309A (en) * | 2003-03-31 | 2008-12-24 | Womens & Childrens Hospital | Multiplex screening for lysosomal storage disorders (LSDs) |
| BRPI0416434A (pt) * | 2003-11-25 | 2007-02-21 | Sinai School Medicine | métodos para aumentar a atividade de uma proteìna de ácido esfingomielinase (asm), para estender a meia-vida e prolongar a atividade de uma proteìna asm purificada, para aumentar a produção de uma proteìna asm recombinante através de uma célula hospedeira, e usos de uma composição de asm tipo alelo-selvagem, purificada e um composto análogo de ceramida ou esfingomielina, e de um composto análogo de ceramida ou de esfingomielina |
| WO2007109881A1 (en) * | 2006-03-24 | 2007-10-04 | Phenomenome Discoveries Inc. | Biomarkers useful for diagnosing prostate cancer, and methods thereof |
| US8497122B2 (en) | 2008-04-11 | 2013-07-30 | Washington University | Biomarkers for Niemann-pick C disease and related disorders |
| US8313949B2 (en) * | 2009-04-16 | 2012-11-20 | Nextcea Inc. | Detecting phospholipidosis and diagnosing lysosomal storage disorders |
| HRP20211992T1 (hr) * | 2009-08-28 | 2022-04-01 | Icahn School Of Medicine At Mount Sinai | Zamjenska enzimska terapija povećanjem doze za liječenje nedostatka kiseline sfingomijelinaze |
-
2014
- 2014-05-14 TR TR2019/06195T patent/TR201906195T4/tr unknown
- 2014-05-14 WO PCT/EP2014/001306 patent/WO2014183873A1/en active Application Filing
- 2014-05-14 ES ES14724315T patent/ES2731920T3/es active Active
- 2014-05-14 US US14/890,969 patent/US10302664B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2014-05-14 JP JP2016513253A patent/JP6660291B2/ja active Active
- 2014-05-14 CA CA2912274A patent/CA2912274A1/en not_active Abandoned
- 2014-05-14 EP EP14724315.8A patent/EP2997384B1/en active Active
- 2014-05-14 DK DK14724315.8T patent/DK2997384T3/da active
-
2015
- 2015-11-11 SA SA515370129A patent/SA515370129B1/ar unknown
-
2019
- 2019-07-03 CY CY20191100702T patent/CY1121790T1/el unknown
-
2020
- 2020-02-07 JP JP2020019691A patent/JP6989636B2/ja active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2020101554A (ja) | 2020-07-02 |
| ES2731920T3 (es) | 2019-11-19 |
| US10302664B2 (en) | 2019-05-28 |
| JP2016522406A (ja) | 2016-07-28 |
| EP2997384A1 (en) | 2016-03-23 |
| US20160109470A1 (en) | 2016-04-21 |
| JP6660291B2 (ja) | 2020-03-11 |
| EP2997384B1 (en) | 2019-04-10 |
| CY1121790T1 (el) | 2020-07-31 |
| WO2014183873A1 (en) | 2014-11-20 |
| CA2912274A1 (en) | 2014-11-20 |
| TR201906195T4 (tr) | 2019-05-21 |
| JP6989636B2 (ja) | 2022-01-05 |
| DK2997384T3 (da) | 2019-07-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11841362B2 (en) | Method for the diagnosis of Niemann-Pick disease | |
| US20220011321A1 (en) | Method for the Diagnosis of Gaucher's Disease | |
| US20200284806A1 (en) | Method for the Diagnosis of Metachromatic Leukodystrophy | |
| AU2012266768A1 (en) | Method for the diagnosis of Gaucher's disease | |
| SA515370129B1 (ar) | طريقة لتشخيص مرض نيمان بيك | |
| US20180348239A1 (en) | Method for the Diagnosis of Niemann-Pick Disease Using a Biomarker | |
| RU2780331C2 (ru) | Способ диагностики болезни гоше |