RU99926U1

RU99926U1 - CONTAINER FOR CLONAL MICROPROPERY OF PLANTS (OPTIONS)

Info

Publication number: RU99926U1
Application number: RU2009135425/22U
Authority: RU
Inventors: Константин Александрович Шестибратов; Вадим Георгиевич Лебедев; Ольга Александровна Чурочкина; Маргарита Анатольевна Коромыслова
Priority date: 2009-09-23
Filing date: 2009-09-23
Publication date: 2010-12-10

Abstract

1. Контейнер для размножения растений in vitro из тканевых культур в питательной среде, содержащий корпус различный по объему и конфигурации из полипропилена для размещения питательной среды с эксплантами, герметично закрывающуюся крышку из полипропилена или полихлорвинила, снабженную отверстием для газообмена и, по меньшей мере, один фильтр, отличающийся тем, что контейнер содержит до 2 фильтров, каждый фильтр выполнен из слоя тканого или нетканого материала, снабжен односторонним клеевым слоем и закреплен клеевым слоем к верхней и/или к нижней поверхности крышки, прилегающей к внешней границе отверстия для газообмена, при этом площадь отверстия для газообмена относится к площади поверхности питающей среды, размещенной в корпусе контейнера, в диапазоне от 1/140 до 1/275, при этом в зависимости от этапа роста растения обеспечивается возможность присоединения к крышке, снабженной фильтром, другого типоразмера корпуса с большим объемом. ! 2. Контейнер по п.1, отличающийся тем, что в зависимости от типа крышки корпус контейнера имеет объем от 125 до 500 мл. ! 3. Контейнер по п.1, отличающийся тем, что форму отверстия для газообмена выбирают из группы, состоящей из круга, квадрата, прямоугольника, эллипса, треугольника, многоугольника. ! 4. Контейнер по п.1, отличающийся тем, что фильтр выполнен из материала фиксирующего пластыря, который выбирают из группы состоящей из Omniplast, Omnistrip, Omnisilk, Omnipor, Omnifix, URGO. ! 5. Контейнер для размножения растений in vitro из тканевых культур в питательной среде, содержащий корпус, различный по объему и конфигурации из полипропилена для размещения питательной среды с эксплантами, герметично закрывающуюся к� 1. The container for the propagation of plants in vitro from tissue cultures in a nutrient medium, comprising a housing of various sizes and configurations made of polypropylene for placement of a nutrient medium with explants, a hermetically sealed lid made of polypropylene or polyvinyl chloride, provided with an opening for gas exchange and at least one filter, characterized in that the container contains up to 2 filters, each filter is made of a layer of woven or non-woven material, provided with a single-sided adhesive layer and fixed with an adhesive layer to the upper and / or to neither the surface of the lid adjacent to the outer boundary of the gas exchange opening, wherein the gas exchange opening area refers to the surface area of the medium located in the container body in the range from 1/140 to 1/275, while depending on the stage of plant growth the possibility of attaching to the lid equipped with a filter, another type of housing with a large volume. ! 2. The container according to claim 1, characterized in that, depending on the type of lid, the container body has a volume of from 125 to 500 ml. ! 3. The container according to claim 1, characterized in that the shape of the gas exchange opening is selected from the group consisting of a circle, square, rectangle, ellipse, triangle, polygon. ! 4. The container according to claim 1, characterized in that the filter is made of a fixing patch material, which is selected from the group consisting of Omniplast, Omnistrip, Omnisilk, Omnipor, Omnifix, URGO. ! 5. A container for in vitro propagation of plants from tissue cultures in a nutrient medium, comprising a housing of various sizes and configurations made of polypropylene for placement of a nutrient medium with explants, hermetically sealed to

Description

Полезная модель относится к области размножения растений in vitro из тканевых культур в питательной среде для научных исследований и растениеводства.The utility model relates to the field of in vitro propagation of plants from tissue cultures in a nutrient medium for scientific research and crop production.

Процесс роста растения из клеток в значительной степени определяется микроклиматическими параметрами и составом питательной среды. К микроклиматическим параметрам относятся температура, свет, оптимальный состав кислорода и углекислого газа. Оптимальная скорость газообмена зависит от объемов контейнеров, этапа микроразмножения и роста биомассы, а также от возможности газообмена с окружающей средой.The process of plant growth from cells is largely determined by microclimatic parameters and the composition of the nutrient medium. Microclimatic parameters include temperature, light, the optimal composition of oxygen and carbon dioxide. The optimal gas exchange rate depends on the volume of containers, the stage of micropropagation and growth of biomass, as well as the possibility of gas exchange with the environment.

Известны контейнеры для клонального микрорастений, выполненные с герметически закрываемыми крышками без возможности газообмена, например, цилиндрические контейнеры, применяемые для хранения пищи для детей или контейнеры трапециидальной формы для хранения горячих продуктов [1].Known containers for clonal microplants made with hermetically sealed lids without the possibility of gas exchange, for example, cylindrical containers used to store food for children or trapezoidal containers for storing hot products [1].

Известны контейнеры фирмы GROWTEK [2], в которых для уменьшения каплеобразования используют специальный наклон во внутренней части крышки контейнера.GROWTEK containers are known [2], in which a special tilt is used in the interior of the container lid to reduce droplet formation.

Развитие растений в замкнутом объеме не достаточно эффективно, поэтому в ряде изобретений конструкции контейнеров для микроразмножения содержат элементы, которые осуществляют обмен газов между окружающей средой и между рабочим объемом контейнера.The development of plants in a closed volume is not effective enough, therefore, in a number of inventions, the designs of containers for micropropagation contain elements that exchange gases between the environment and between the working volume of the container.

Известно устройство для микроразмножения растений [3], в котором для осуществления газообмена формируется щель между верхним и нижними листами, формирующими одну из сторон контейнера, при этом нижний лист ограничивает рабочие объемы нескольких ячеек, входящих в состав контейнера. Недостаток конструкции состоит в неудобстве загрузки эксплантов и питающей среды при заполнении ячеек и неконтролируемый уровень газового обмена.A device for micropropagation of plants is known [3], in which, for gas exchange, a gap is formed between the upper and lower sheets forming one of the sides of the container, while the lower sheet limits the working volumes of several cells that make up the container. The design drawback is the inconvenience of loading explants and the feed medium when filling the cells and the uncontrolled level of gas exchange.

Известен патент США №5,558,984 [4], в котором используют два типа мембраны. Через первую мембрану, размещенную на дне контейнера, осуществляется смена питающей среды, через вторую мембрану, расположенную на боковой стене контейнера, происходит газообмен. К недостатку таких конструкций контейнеров можно отнести сложность конструкции.Known US patent No. 5,558,984 [4], which use two types of membranes. Through the first membrane located at the bottom of the container, a change of the nutrient medium is carried out, through the second membrane located on the side wall of the container, gas exchange takes place. The disadvantage of such container designs is the complexity of the design.

Известно авторское свидетельство SU №1537181 [5], в котором для улучшения выращивания растения используют газоселективную мембрану, выполненную в виде кольца и вклеенную по торцам в материал крышки. За счет того, что конструкция микротеплицы дополнительно содержит вытяжную трубу, размещенную в центре крышки, то материал газоселективной мембраны должен обеспечивать достаточную жесткость для крепления трубы в центральной части крышки, которая контактирует с внутренней границей кольцевой мембраны. При этом затруднена возможность очистки мембраны или ее смены при разборке конструкции.The author's certificate SU No. 1537181 is known [5], in which, to improve plant growth, a gas-selective membrane made in the form of a ring and glued at the ends to the cover material is used. Due to the fact that the micro-greenhouse design additionally contains a chimney located in the center of the lid, the gas-selective membrane material must provide sufficient rigidity for fastening the pipe in the central part of the lid, which is in contact with the inner boundary of the annular membrane. At the same time, it is difficult to clean the membrane or change it when disassembling the structure.

Известна разработка фирмы Innosca [6]. Фирма разработала фильтр с порами 7 микрон и диаметром фильтра 25 мм., которые с помощью специального клея вклеивается в центральную часть верхней крышки контейнера. Фильтр используется для установки в крышки контейнеров фирмы Magenta, контейнеров цилиндрической формы других фирм и для установки в крышки контейнеров «baby food jars» используемых для приготовления пищи для детей.Known development company Innosca [6]. The company has developed a filter with pores of 7 microns and a filter diameter of 25 mm., Which are glued with special glue to the central part of the top lid of the container. The filter is used for installation in the lids of Magenta containers, cylindrical containers of other companies and for installation in the covers of “baby food jars” containers used for cooking food for children.

Следует отметить, что контейнеры разных фирм, в которые фирма Innosca устанавливает фильтры, имеют разный объем и соответственно разную площадь верхней поверхности питающей среды. В этих условиях возникает либо избыточный газообмен в маленьких контейнерах цилиндрической формы с внутренней поверхностью питающей среды около 7 см², либо проходит недостаточный газообмен для больших контейнеров фирмы Magenta с площадью поверхности питающей среды около 50 см². За счет большой разницы в газообмене для разных типов контейнеров газообмен проходит не эффективно, что приводит к снижению результатов микроразмножения.It should be noted that containers of different companies in which Innosca installs filters have different volumes and, accordingly, different areas of the upper surface of the medium. Under these conditions, either excess gas exchange occurs in small cylindrical containers with an inner surface of the medium of about 7 cm ² , or insufficient gas exchange occurs for large Magenta containers with a surface area of the medium of about 50 cm ² . Due to the large difference in gas exchange for different types of containers, gas exchange is not efficient, which leads to a decrease in micropropagation results.

Аналогичное техническое решение с установкой вклеиваемого фильтра выполненного на основе полимера полиэтилентерефталата (PTFE) с диаметром пор 10 микрон в крышку контейнера фирмы Magenta использует фирма Sirius Biotechnology Pte Ltd [7] для производства вентилируемого контейнера SIRIUS TCC-S450.A similar technical solution with the installation of an adhesive filter made of polymer-based polyethylene terephthalate (PTFE) with a pore diameter of 10 microns in the lid of a Magenta container is used by Sirius Biotechnology Pte Ltd [7] to produce a ventilated SIRIUS TCC-S450 container.

Серьезным недостатком вклеиваемых несменных фильтров является то, что они могут забиваться, менять свои газообменные свойства или трескаться при мойке и автоклавировании. Следует отметить, что из-за конструктивных особенностей рассматриваемых контейнеров стенки контейнеров выбраны достаточно толстыми, выполнены из полистирола и следовательно стоимость изготовления контейнеров достаточно высока. Для сокращения расходов их многократно используют, однако при этом теряется прозрачность материала, а также тратится значительное время на их мойку и автоклавирование, что дополнительных требует расходов на электроэнергию и горячую воду.A serious drawback of glued non-replaceable filters is that they can clog, change their gas exchange properties or crack during washing and autoclaving. It should be noted that due to the design features of the containers in question, the walls of the containers are selected rather thick, made of polystyrene, and therefore the cost of manufacturing containers is quite high. To reduce costs, they are reused, but at the same time the transparency of the material is lost, as well as considerable time is wasted on their washing and autoclaving, which requires additional costs for electricity and hot water.

Наиболее близким техническим решением к рассматриваемому, является разработка фирмы TISSUE QUICK PLANT LABORATORIES [8]. Фирма разработала фильтр с микропорами на основе сложного полиэфира полиэтилентерефталата (PTFE), снабженного сеткой для создания конструкционной жесткости и клеевым слоем нанесенном по краям диска. Фильтр диаметром 18,6 мм и рабочим диаметром 10 мм устанавливается на крышку цилиндрического контейнера диаметром 90 мм и высотой 70 мм. Однако технология производства фильтра достаточно дорога, что определяет его высокую цену. При этом для окупаемости расходов также требуется проводить многоразовое использование как фильтра, так и контейнера в котором он установлен, что требует промывок и автоклавирования. Кроме этого за счет малой площади пор фильтра его эффективность по газообмену жестко связана с определенным объемом небольшого контейнера, что не очень удобно для проведения разных этапов выращивания растений требующих разных объемов контейнера.The closest technical solution to this one is the development of TISSUE QUICK PLANT LABORATORIES [8]. The company developed a micropore filter based on polyester polyethylene terephthalate (PTFE), equipped with a mesh to create structural rigidity and an adhesive layer applied to the edges of the disk. The filter with a diameter of 18.6 mm and a working diameter of 10 mm is mounted on the lid of a cylindrical container with a diameter of 90 mm and a height of 70 mm. However, the filter manufacturing technology is quite expensive, which determines its high price. At the same time, for cost recovery, it is also required to reuse both the filter and the container in which it is installed, which requires rinsing and autoclaving. In addition, due to the small pore area of the filter, its gas exchange efficiency is tightly associated with a certain volume of a small container, which is not very convenient for carrying out different stages of growing plants that require different container volumes.

Технический результат, на достижение которого направлена заявленная полезная модель, связан с обеспечением улучшенных условий микроразмножения при минимальных расходах.The technical result, the claimed utility model is aimed at achieving, is associated with providing improved conditions for micropropagation at minimal cost.

Следующий технический результат, на достижение которого направлена заявленная полезная модель, связан с расширением арсенала технических средств за счет обеспечения возможности вторичного применения крышки с установленным фильтром используемой при микроразмножении, для формирования другой конструкции контейнера с большим объемом, обеспечивающий улучшенные условия роста растения на последующем этапе выращивания.The following technical result, the claimed utility model is aimed at achieving, is related to the expansion of the arsenal of technical means by providing the possibility of secondary use of the cover with the filter used for micropropagation, to form another container design with a large volume, providing improved plant growth conditions at the next stage of cultivation .

Следующий технический результат, на достижение которого направлена заявленная полезная модель связан с возможностью исключения трудовых затрат, связанных с чисткой и стерилизацией контейнеров за счет их одноразового использования.The following technical result, the claimed utility model is aimed at achieving, is related to the possibility of eliminating labor costs associated with cleaning and sterilizing containers due to their single use.

Одним объектом полезной модели является контейнер для микроразмножения растений in vitro из тканевых культур в питательной среде, который содержит корпус различный по объему и конфигурации для размещения питательной среды с эксплантами и герметично закрывающуюся крышку, снабженную отверстием для газообмена, причем над отверстием размещен, по меньшей мере, один фильтр. Фильтр выполнен из слоя тканого или нетканого материала, снабженного односторонним клеевым слоем. Фильтр закреплен клеевым слоем к верхней и/или к нижней поверхности крышки, прилегающей к внешней границе отверстия для газообмена. При этом для осуществления эффективного газообмена площадь отверстия в крышке относится к площади поверхности питающей среды, размещенной в корпусе контейнера, в диапазоне от 1/140 до 1/275.One object of the utility model is a container for micropropagation of plants in vitro from tissue cultures in a nutrient medium, which contains a housing of various sizes and configurations for accommodating a nutrient medium with explants and a hermetically sealed lid equipped with a gas exchange hole, with at least one located above the hole one filter. The filter is made of a layer of woven or non-woven material provided with a single-sided adhesive layer. The filter is fixed with an adhesive layer to the upper and / or lower surface of the cover adjacent to the outer border of the gas exchange hole. Moreover, for effective gas exchange, the area of the opening in the lid refers to the surface area of the medium located in the container body, in the range from 1/140 to 1/275.

Другим объектом полезной модели является контейнер для микроразмножения растений in vitro из тканевых культур в питательной среде, который содержит корпус различный по объему и конфигурации для размещения питательной среды с эксплантами и герметично закрывающуюся крышку, снабженную отверстием для газообмена.Another object of the utility model is a container for micropropagation of plants in vitro from tissue cultures in a nutrient medium, which contains a housing of various sizes and configurations for accommodating a nutrient medium with explants and a hermetically sealed lid equipped with a gas exchange hole.

Контейнер содержит от 2 до 5 фильтров, каждый фильтр выполнен из слоя тканого или нетканого материала, снабженного односторонним клеевым слоем. При этом первый фильтр закреплен клеевым слоем к поверхности крышки, прилегающей к внешней границе отверстия для газообмена, другие фильтры закреплены последовательно друг над другом, при этом соотношение площади отверстия для газообмена к площади поверхности питающей среды лежит в пределах от 1/100 до 1/140.The container contains from 2 to 5 filters, each filter is made of a layer of woven or non-woven material, equipped with a single-sided adhesive layer. In this case, the first filter is fixed with an adhesive layer to the surface of the lid adjacent to the outer boundary of the gas exchange hole, the other filters are fixed sequentially one above the other, while the ratio of the area of the gas exchange hole to the surface area of the medium lies in the range from 1/100 to 1/140 .

Следующим объектом полезной модели является то, что в зависимости от этапа роста растения обеспечивается возможность присоединения к крышке, снабженной фильтром, других типоразмеров корпуса с большим внутренним объемом в диапазоне от 125 мл. до 500 мл. или от 500 мл. до 2000 мл., а эффективность газообмена регулируется количеством используемых фильтров.The next object of the utility model is that, depending on the stage of plant growth, it is possible to attach to the cover equipped with a filter other sizes of the case with a large internal volume in the range of 125 ml. up to 500 ml. or from 500 ml. up to 2000 ml., and gas exchange efficiency is regulated by the number of filters used.

Следующим объектом полезной модели является то, что фильтр выполнен из материала фиксирующего пластыря, который выбирают из группы состоящей из Omniplast, Omnistrip, Omnisilk, Omnipor, Omnifix, URGO.The next object of the utility model is that the filter is made of a fixing patch material, which is selected from the group consisting of Omniplast, Omnistrip, Omnisilk, Omnipor, Omnifix, URGO.

Следующим объектом полезной модели является то, что форму отверстия для газообмена выбирают из группы, состоящей из: круга, квадрата, прямоугольника, эллипса, треугольника, многоугольника.The next object of the utility model is that the shape of the gas exchange hole is selected from the group consisting of: circle, square, rectangle, ellipse, triangle, polygon.

Перечень фигурList of figures

На фиг.1 изображен разрез фрагмента контейнера в сборе. Где а) фильтрующий элемент закреплен над отверстием для газообмена на верхней поверхности крышки, б) фильтрующие элементы закреплены над отверстием для газообмена на верхней и нижней поверхности крышки, в) фильтрующие элементы установлены над отверстием для газообмена в виде многослойной конструкции (друг над другом).Figure 1 shows a sectional view of a fragment of the container assembly. Where a) the filter element is fixed above the gas exchange hole on the upper surface of the cover, b) the filter elements are fixed above the gas exchange hole on the upper and lower surface of the cover, c) the filter elements are installed above the gas exchange hole in the form of a multilayer structure (one above the other).

На фиг.2 изображены растения осины, полученные в результате микроразмножения размножения осины из стеблевых эксплантов (междоузлий). Где: а) представлен внешний вид сверху контейнера с крышкой без отверстия для газообмена, b) представлен внешний вид сверху контейнера с крышкой с отверстием для газообмена закрытое фильтром.Figure 2 shows aspen plants obtained by micropropagation of aspen propagation from stem explants (internodes). Where: a) a top view of a container with a lid without a gas exchange opening is shown; b) a top view of a container with a lid with a gas exchange hole closed by a filter is shown.

ОписаниеDescription

Контейнер для выращивания растений in-vitro при клональном микроразмножении содержит корпус 1 и съемную крышку 2, обеспеченную отверстием 4 и фильтром 3. При этом корпус может быть изготовлен в форме полого цилиндра со сферическим или плоским дном, в виде полого параллелипипеда, полого куба или полых усеченных конусообразных цилиндрических или пирамидальных тел, преимущественно с плоским дном или в виде перевернутых усеченных конусообразных цилиндрических или пирамидальных тел с плоским дном для последующей установки контейнеров на стеллажи с горизонтальной поверхностью. Более предпочтительны варианты форм корпусов контейнера прямоугольной или цилиндрической формы, поперечное сечение которых представляет перевернутую усеченную трапецию. Эти формы корпусов контейнеров широко используют для хранения пищевых продуктов в многоразовых и одноразовых контейнерах.The container for growing plants in vitro during clonal micropropagation comprises a housing 1 and a removable lid 2 provided with an opening 4 and a filter 3. Moreover, the housing can be made in the form of a hollow cylinder with a spherical or flat bottom, in the form of a hollow parallelepiped, hollow cube or hollow truncated conical cylindrical or pyramidal bodies, mainly with a flat bottom or in the form of inverted truncated conical cylindrical or pyramidal bodies with a flat bottom for subsequent installation of containers on the stella and with the horizontal surface. More preferred are the shapes of the container bodies of a rectangular or cylindrical shape, the cross section of which represents an inverted truncated trapezoid. These forms of container bodies are widely used for storing food in reusable and disposable containers.

Конструкции контейнеров приспособлены для фиксации крышек на корпусе контейнера. С этой целью крышки и корпус содержат дополнительные зоны, которые обеспечивают стыковку крышки и корпуса и обеспечивают дополнительную жесткость конструкции. Дополнительно крышки снабжены удобным язычком для отсоединения крышки от корпуса.The designs of the containers are adapted to fix the lids on the container body. To this end, the covers and the housing contain additional zones that provide the joint of the cover and the housing and provide additional structural rigidity. Additionally, the covers are equipped with a convenient tab for disconnecting the cover from the housing.

Наиболее предпочтительным материалом контейнера является полипропилен. Контейнеры из полипропилена (ПП) дешевы (от 1,5 рублей за контейнер 250 мл) и выпускаются многими производителями, например фирмой «Upax-Unity» [9]. Контейнеры просты в изготовлении и производятся путем горячего формования (термоформование) полипропиленовой ленты.The most preferred container material is polypropylene. Polypropylene (PP) containers are cheap (from 1.5 rubles per 250 ml container) and are produced by many manufacturers, for example, Upax-Unity [9]. The containers are easy to manufacture and are produced by hot forming (thermoforming) polypropylene tape.

Удобный язычок для отсоединения крышки от корпуса, кольца жесткости на крышке и корпусе, формирующие возможность плотной стыковки и герметизацию стыка, возможность автоклавирования контейнера - создают неоспоримые преимущества данной упаковки для выполнения задач микроразмножения.A convenient tongue for disconnecting the lid from the body, stiffening rings on the lid and the body, forming the possibility of tight joining and sealing of the joint, the possibility of autoclaving the container - create the undeniable advantages of this package for performing micropropagation tasks.

Кроме этого полипропилен подходит для производства контейнеров для микроразмножения, поскольку полипропилен признан безопасным полимером и экологически чистым материалом. Полипропилен рекомендован в качестве безопасного материала для одноразовой упаковки и применяется для фасовки и упаковки продуктов детского питания. Кроме этого известно, что полипропилен обладает высокой прочностью, термостойкостью и прозрачностью. Полипропилен сохраняет целостность при воздействии агрессивных химических соединений, хорошо держит форму при нагреве или автоклавировании, не теряя при этом пластичностьIn addition, polypropylene is suitable for the production of containers for micropropagation, since polypropylene is recognized as a safe polymer and environmentally friendly material. Polypropylene is recommended as a safe material for disposable packaging and is used for packaging and packaging of baby food. In addition, it is known that polypropylene has high strength, heat resistance and transparency. Polypropylene retains integrity when exposed to aggressive chemical compounds, keeps its shape well when heated or autoclaved, without losing plasticity

Контейнеры из полипропилена выпускаются с емкостью от 125 мл. до 2000 мл. Наиболее подходящие для задач микроразмножения, являются контейнеры объемом от 125 до 500 мл. с одним типом прямоугольной крышки, размером 100×75 мм. в комбинации с разными корпусами с высотой от 35 до 100 мм., или контейнеры с крышкой 186×132 мм в комбинации с разными корпусами с высотой от 35 до 122 мм., с объемом от 500 мл до 2000 мл. Универсальность стыковки крышек с верхней частью контейнеров позволяет в последующем автоматизировать разлив питающей среды и укладку эксплантов на автоматизированных линиях микрочеренкования. Разный объем и высота контейнеров позволяет улучшить условия роста растений на последующих этапах формирования растения для подготовки его выращивания в теплице.Polypropylene containers are available with a capacity of 125 ml. up to 2000 ml. The most suitable for micropropagation tasks are containers with a volume of 125 to 500 ml. with one type of rectangular cover, size 100 × 75 mm. in combination with different cases with a height of 35 to 100 mm., or containers with a lid 186 × 132 mm in combination with different cases with a height of 35 to 122 mm., with a volume of 500 ml to 2000 ml. The universality of docking of covers with the upper part of containers allows subsequently to automate the filling of the medium and the placement of explants on automated microcrossing lines. The different volume and height of the containers makes it possible to improve the conditions for plant growth in the subsequent stages of plant formation for the preparation of its growth in the greenhouse.

Таким образом, выбранная конструкция и материал контейнера позволяет обеспечить один из технических результатов, связанный со снижением расходов на улучшение условий жизнедеятельности растений. Снижение расходов связано с выбором контейнеров с низкой стоимостью, с повышением удобства транспортировки и хранения из-за малого веса и объема упаковки контейнеров, с простотой и удобством подготовки контейнеров к клональному микроразмножению. Данные возможности конструкции контейнера - создают неоспоримые преимущества для выполнения задач микроразмножения.Thus, the selected design and material of the container allows us to provide one of the technical results associated with lower costs for improving the living conditions of plants. The reduction in costs is associated with the choice of containers with low cost, with an increase in the convenience of transportation and storage due to the low weight and volume of packaging of containers, with the simplicity and convenience of preparing containers for clonal micropropagation. These capabilities of the container design - create undeniable advantages for performing micropropagation tasks.

В зависимости от типа корпуса контейнера крышки могут закрепляться или с помощью защелок или закручиваться по резьбе. Поскольку крышки не соприкасаются с питающей средой, то в качестве материала крышек может быть использован не только полипропилен, но и другие типы пластмасс, кроме фторопласта, обладающего низкой адгезией к разным типам клея.Depending on the type of container body, the lids can be fastened either with latches or screwed into threads. Since the caps do not come in contact with the supply medium, not only polypropylene, but also other types of plastics, except for fluoroplastic, which has low adhesion to different types of glue, can be used as the material of the caps.

Для реализации технической задачи необходима конструкция прочного, недорогого фильтра, снабженного с одной стороны клеящим слоем. Известно, что в конструкциях фильтров для очистки воздуха используют тканные и нетканые фильтры, которые обеспечивают газообмен и эффективно задерживают частицы пыли и микроорганизмы, находящиеся в окружающей среде. В результате исследования было обнаружено, что пропитка нетканых и тканых материалов водоотталкивающими жидкостями, а также последующее одностороннее нанесение клея на поверхность тканных и нетканых материалов, незначительно снижает эффективность газообмена таких материалов и позволяет создать гибкие воздушные фильтры простым креплением тканых материалов по краям отверстий диаметром до 2 до 15 мм. с помощью клеевого соединения. Кроме этого было обнаружено, что расширение числа последовательно наклеенных фильтров друг над другом позволяет увеличить размер отверстия за счет усиления конструкции, а использование разного количества слоев от 2 до 5 позволяет регулировать газообмен не меняя отверстие в крышке контейнера.To implement the technical task, the construction of a durable, inexpensive filter, equipped with an adhesive layer on one side, is necessary. It is known that woven and non-woven filters are used in the design of filters for air purification, which provide gas exchange and effectively trap dust particles and microorganisms in the environment. As a result of the study, it was found that the impregnation of non-woven and woven materials with water-repellent liquids, as well as the subsequent one-sided application of glue on the surface of woven and non-woven materials, slightly reduces the gas exchange efficiency of such materials and allows the creation of flexible air filters by simply attaching woven materials along the edges of holes with diameters up to 2 up to 15 mm. using adhesive bonding. In addition, it was found that expanding the number of sequentially glued filters on top of each other allows increasing the size of the hole by strengthening the structure, and using a different number of layers from 2 to 5 allows you to control gas exchange without changing the hole in the lid of the container.

В дальнейших экспериментах было выявлено неочевидное свойство материалов, используемых в медицине для создания фиксирующих пластырей, при создании фильтров с высокой воздухо- и паропроницаемостью. В качестве клеевой основы таких пластырей используют каучуковый или полиакрилатный клей. Тканые или нетканые материалы обрабатывают водоотталкивающими соединениями. Испытания фильтров, выполненных из разных типов фиксирующих пластырей, входящих в группу, состоящую из пластырей Omniplast, Omnistrip, Omnisilk, Omnipor, Omnifix, URGO [10], показал их эффективность при создании фильтров с достаточным газообменом в разных типах контейнеров с разным объемом, и их эффективность при фильтрации загрязнений воздуха.In further experiments, an unobvious property of the materials used in medicine to create fixing plasters was revealed when creating filters with high air and vapor permeability. As the adhesive base of such adhesives, rubber or polyacrylate adhesive is used. Woven or non-woven materials are treated with water-repellent compounds. Tests of filters made from different types of fixing adhesives included in the group consisting of Omniplast, Omnistrip, Omnisilk, Omnipor, Omnifix, URGO adhesives [10], showed their effectiveness in creating filters with sufficient gas exchange in different types of containers with different volumes, and their effectiveness in filtering air pollution.

Было установлено, что для контейнеров с объемом от 125 мл до 500 мл. площадь отверстия 4 для газообмена относится к площади поверхности 5 питающей среды 6, размещенной в корпусе 1 контейнера, в диапазоне от 1/140 до 1/275, что соответствует диаметру отверстия для газообмена в пределах от 5 до 7 мм в контейнере с площадью питающей среды от 52 до 55 кв. см. При этом фильтр закрепляют клеевым слоем к верхней и/или к нижней поверхности крышки, прилегающей к внешней границе отверстия для газообмена.It was found that for containers with a volume of 125 ml to 500 ml. the area of the gas exchange hole 4 refers to the surface area 5 of the feed medium 6 located in the container body 1 in the range from 1/140 to 1/275, which corresponds to the diameter of the gas exchange hole in the range from 5 to 7 mm in the container with the area of the feed medium from 52 to 55 sq. see. At the same time, the filter is fixed with an adhesive layer to the upper and / or lower surface of the cover adjacent to the outer boundary of the gas exchange hole.

В другом варианте для контейнеров от 500 мл. до 2000 мл. формируют отверстие большее 7 мм и соотношение площади отверстия для газообмена к площади поверхности питающей среды лежит в пределах от 1/100 до 1/140. Для регулирования эффективности газообмена используют от 2 до 5 фильтров. Каждый фильтр выполнен из слоя тканого или нетканого материала, снабженного односторонним клеевым слоем, при этом первый фильтр закреплен клеевым слоем к поверхности крышки, прилегающей к внешней границе отверстия для газообмена, другие фильтры закреплены последовательно друг над другом.In another embodiment, for containers from 500 ml. up to 2000 ml. form a hole greater than 7 mm and the ratio of the area of the hole for gas exchange to the surface area of the medium lies in the range from 1/100 to 1/140. From 2 to 5 filters are used to control the efficiency of gas exchange. Each filter is made of a layer of woven or non-woven material provided with a one-sided adhesive layer, with the first filter being fixed with an adhesive layer to the surface of the lid adjacent to the outer border of the gas exchange hole, other filters are fixed sequentially one above the other.

Форму отверстия 4 для газообмена в контейнере выбирают из группы, состоящей из: круга, квадрата, прямоугольника, эллипса, треугольника, многоугольника.The shape of the gas exchange opening 4 in the container is selected from the group consisting of: circle, square, rectangle, ellipse, triangle, polygon.

Таким образом синергетический эффект при использовании тонких одноразовых контейнеров на основе полипропилена и фильтров выполненных из материалов снабженных клеевым однослойным покрытием, в том числе выполненных из тканых и нетканых материалов дает возможность получить простую, дешевую и надежную конструкцию, обеспечивающую оптимальные условия для микроразмножения растений.Thus, the synergistic effect when using thin disposable containers based on polypropylene and filters made of materials equipped with an adhesive single-layer coating, including those made of woven and non-woven materials, makes it possible to obtain a simple, cheap and reliable design that provides optimal conditions for plant micro-propagation.

Устройство работает следующим образом. Предварительно, перед установкой фильтрующего элемента, в крышке с помощью пуансона формируют отверстие для газообмена, площадь которого выбирают с учетом площади верхней поверхности питающей среды. Выбирают тип фильтрующего элемента и из выбранного материала пластыря вырезают фильтр в зависимости от формы отверстия и площади клеевого соединения. Приклеивают, по меньшей мере, один фильтр к верхней и/или нижней крышке используя давление на его внешнюю поверхность. На фиг.1а приведен вариант фильтра 3 укрепленного на верхней поверхности крышки 2. На фиг.1б приведен вариант крепления фильтров 3 к верхней и нижней части крышки. На фиг.1в) приведен вариант, в котором сформирована многослойная конструкция фильтра 3 за счет приклеивания фильтров друг над другом.The device operates as follows. Previously, before installing the filter element, a hole for gas exchange is formed in the lid using a punch, the area of which is selected taking into account the area of the upper surface of the medium. The type of filter element is selected and a filter is cut out of the selected patch material depending on the shape of the hole and the area of the adhesive joint. At least one filter is glued to the upper and / or lower cover using pressure on its outer surface. On figa shows a variant of the filter 3 mounted on the upper surface of the cover 2. On figb shows an option for mounting filters 3 to the upper and lower parts of the cover. On figv) shows a variant in which a multilayer structure of the filter 3 is formed by gluing the filters on top of each other.

В корпус контейнера помещают питающую среду 6, в которой размещают экспланты растений, которые вырастают и формируют многочисленные пазушные побеги 7 представленные на Фиг.2а и б. Закрывают крышку и помещают контейнер на световой стеллаж, или в камеру с регулированием температуры и длительности светового периода выращивания растений. При высадке растений крышку снимают. После завершения процесса клонального микроразмножения из корпуса контейнера удаляются остатки питающей среды, корпус промывается и автоклавируется или корпус контейнера заменяют на другой с большим объемом и с другими характеристиками питающей среды. Из-за малой стоимости контейнера возможно его одноразовое применение.A nutrient medium 6 is placed in the container body, in which plant explants are placed that grow and form numerous axillary shoots 7 shown in Figs. 2a and 2b. Close the lid and place the container on a light rack, or in a chamber with temperature and duration of the light period of growing plants. When planting plants, the cover is removed. After the completion of the clonal micropropagation process, residues of the nutrient medium are removed from the container body, the body is washed and autoclaved, or the container body is replaced with another one with a large volume and with different characteristics of the nutrient medium. Due to the low cost of the container, its one-time use is possible.

Пример Клональное микроразмножение растений в контейнереExample Clonal micropropagation of plants in a container

В качестве примера, который включает, но не ограничивает других вариантов, ниже приведен пример клонального микроразмножения лиственного растения осины. Наиболее эффективный способ размножения микрорастений осины - микрочеренкование.As an example, which includes, but is not limited to other options, the following is an example of clonal micropropagation of an aspen deciduous plant. The most effective way to propagate aspen microplants is microcherenking.

В качестве эксплантов применяют 1-узловые сегменты микропобегов, длиной 0,8-1,5 см, с листовой пластинкой или, возможно, без нее. Экспланты в количестве 20-25 штук помещают вертикально в агаризованную питательную среду WPM (40 мл), размещенную в 250-мл контейнере. Контейнер плотно закрывается крышкой и устанавливается на световой стеллаж, который размещен в термостатируемой комнате или боксе. Каждые 30 дней, после формирования многочисленных пазушных побегов (см. Фиг.2) выполняют субкультивирование.As explants, 1-nodal segments of microprobes are used, 0.8-1.5 cm long, with or without a leaf blade. Explants in an amount of 20-25 pieces are placed vertically in a WPM agar medium (40 ml), placed in a 250 ml container. The container is tightly closed by a lid and installed on a light rack, which is placed in a thermostatic room or box. Every 30 days, after the formation of numerous axillary shoots (see Figure 2), subculture is performed.

Для предотвращения бактериального заражения, питательные среды, применяемые на этапе микроразмножения, чередуют: безгормональная среда; среда, дополненная 500-1000 мг/л карбенициллина или 500-1000 мг/л цефотаксима. При наличии обоих антибиотиков, желательно применять их совместно, в концентрации 500 мг/л.To prevent bacterial infection, nutrient media used at the stage of micropropagation alternate: hormone-free environment; medium supplemented with 500-1000 mg / l carbenicillin or 500-1000 mg / l cefotaxime. In the presence of both antibiotics, it is advisable to use them together at a concentration of 500 mg / L.

Для укоренения использовали 1-2-почечные сегменты побегов длиной не менее 1 см. Пучки побегов подходящего размера доставали из культуральных сосудов и помещали в чашки Петри, где и производили отбор материала для укоренения. Выбранные побеги и сегменты побегов помещали по 20-25 штук в 250 мл контейнеры, содержащие 40 мл агаризованной среды WPM без гормонов и культивировали при стандартных условиях в течение 4-х недель. Первые корешки появляются через 10 дней, а спустя месяц образуется хорошо развитая корневая система с корнями 2-го и 3-го порядка. На фиг 2 представлены результаты микроразмножения растения осины в контейнере без применения фильтра для газообмена Фиг.2а и с фильтром для газообмена Фиг.2б. Результаты эксперимента показывают большую эффективность микроразмножения с использованием фильтра выполненного из материала пластыря Omniplast.For rooting, 1-2-kidney segments of shoots with a length of at least 1 cm were used. Bundles of shoots of a suitable size were removed from the culture vessels and placed in Petri dishes, where material was taken for rooting. Selected shoots and shoot segments were placed in 20-25 pieces in 250 ml containers containing 40 ml of hormone-free WPM medium and cultured under standard conditions for 4 weeks. The first roots appear after 10 days, and a month later a well-developed root system with roots of the 2nd and 3rd order is formed. Figure 2 presents the results of micropropagation of an aspen plant in a container without the use of a filter for gas exchange of Fig.2a and with a filter for gas exchange of Fig.2b. The results of the experiment show greater micropropagation efficiency using a filter made of Omniplast patch material.

Предложенный контейнер может быть изготовлен промышленным способом из известных материалов с использованием известных технологий и технических средств и использован для научных исследований или при производстве посадочного материала растений в сельском и лесном хозяйстве.The proposed container can be manufactured industrially from known materials using known technologies and technical means and used for scientific research or in the production of planting material of plants in agriculture and forestry.

ЛитератураLiterature

1. Технические материалы фирмы «Kitchen Culture. Kits Inc» Bringing Plant Tissue Culture into the Classroom and Home (http://www.kitchenculturekit.com).1. Technical materials of the company "Kitchen Culture. Kits Inc »Bringing Plant Tissue Culture into the Classroom and Home (http://www.kitchenculturekit.com).

2. Технические материалы фирмы «GROWTEK». Novel plant tissue culture system for plantlet growth and aseptic seed germination (http//www.gbiogene.com).2. Technical materials of the company "GROWTEK". Novel plant tissue culture system for plantlet growth and aseptic seed germination (http // www.gbiogene.com).

3. Танклевский М.М. и др. Контейнер для микроразмножения растений. Авт свидетельство SU 1341114, 08.04.1985.3. Tanklevsky M.M. et al. Container for micropropagation of plants. Aut certificate SU 1341114, 04/08/1985.

4. Young, et al. Automated system and process for heterotrophic growth of plant tissue, Патент США №5,558,984 September 24, 1996.4. Young, et al. Automated system and process for heterotrophic growth of plant tissue, US Patent No. 5,558,984 September 24, 1996.

5. Стрельцов Б.Н. и др. Микротеплица, Авторское свид. SU №1537181 от 23.01.905. Streltsov B.N. Mikroteplitsa, Author's certificate. SU No. 1537181 dated 23.01.90

6. Технические материалы фирмы «Innosca» (http://www.innosca.com/resources/Innosca_catalogue.pdf).6. Technical materials of the Innosca company (http://www.innosca.com/resources/Innosca_catalogue.pdf).

7. Технические материалы фирмы «Sirius Biotechnology Pte Ltd» (http://www.tradeget.com/free_list/p80449/Our_Product.html).7. Technical materials of Sirius Biotechnology Pte Ltd (http://www.tradeget.com/free_list/p80449/Our_Product.html).

8. Технические материалы фирмы «TISSUE QUICK PLANT LABORATORIES» (http://www.tissuequickplantlabs.com/amdpg5nf.htm).8. Technical materials of the company "TISSUE QUICK PLANT LABORATORIES" (http://www.tissuequickplantlabs.com/amdpg5nf.htm).

9. Технические материалы компании «Upax-Unity». Технические параметры одноразовых контейнеров (http://upax.ru/prod/?del=22).9. Technical materials of Upax-Unity. Technical parameters of disposable containers (http://upax.ru/prod/?del=22).

10. Рекламный проспект (http:/www.apteka-vd.ru/cat.php?code=bnt).10. Advertising brochure (http: /www.apteka-vd.ru/cat.php? Code = bnt).

Claims

1. The container for the propagation of plants in vitro from tissue cultures in a nutrient medium, comprising a housing of various sizes and configurations made of polypropylene for placement of a nutrient medium with explants, a hermetically sealed lid made of polypropylene or polyvinyl chloride, provided with an opening for gas exchange and at least one filter, characterized in that the container contains up to 2 filters, each filter is made of a layer of woven or non-woven material, provided with a single-sided adhesive layer and fixed with an adhesive layer to the upper and / or to neither the surface of the lid adjacent to the outer boundary of the gas exchange opening, wherein the gas exchange opening area refers to the surface area of the medium located in the container body in the range from 1/140 to 1/275, while depending on the stage of plant growth the possibility of attaching to the lid equipped with a filter, another type of housing with a large volume.

2. The container according to claim 1, characterized in that, depending on the type of lid, the container body has a volume of from 125 to 500 ml.

3. The container according to claim 1, characterized in that the shape of the gas exchange opening is selected from the group consisting of a circle, square, rectangle, ellipse, triangle, polygon.

4. The container according to claim 1, characterized in that the filter is made of a fixing patch material, which is selected from the group consisting of Omniplast, Omnistrip, Omnisilk, Omnipor, Omnifix, URGO.

5. A container for propagating in vitro plants from tissue cultures in a nutrient medium, comprising a housing of various sizes and configurations made of polypropylene for accommodating a nutrient medium with explants, a hermetically sealed lid made of polypropylene or polyvinyl chloride, provided with a gas exchange opening, characterized in that the container contains from 2 to 5 filters, each filter is made of a layer of woven or non-woven material provided with a single-sided adhesive layer, while the first filter is fixed with an adhesive layer to the roof surface and adjacent to the outer boundary of the holes for gas exchange, other filters mounted in series above each other, wherein the ratio of opening area for gas transfer to surface area of the feed medium is in the range of 1/100 to 1/140.

6. The container according to claim 5, characterized in that the container body has a volume of from 500 to 2000 ml.

7. The container according to claim 5, characterized in that the shape of the gas exchange hole is selected from the group consisting of a circle, square, rectangle, ellipse, triangle, polygon.

8. The container according to claim 5, characterized in that the filter is made of a fixing patch material, which is selected from the group consisting of Omniplast, Omnistrip, Omnisilk, Omnipor, Omnifix, URGO.