RU96109046A

RU96109046A - Одноцепочечные формы квартета гликопротеиновых гормонов

Info

Publication number: RU96109046A
Application number: RU96109046/04A
Authority: RU
Inventors: Боим Ирвинг
Original assignee: Вашингтон Юниверсити
Priority date: 1994-08-12
Filing date: 1995-08-01
Publication date: 1998-08-20

Claims

1. Гликозилированный или негликозилированный белок, который содержит аминокислотную последовательность α субъединицы, общей для гликопротеиновых гормонов, ковалентно связанную, необязательно через линкерный фрагмент, с аминокислотной последовательностью β субъединицы одного из указанных гормонов, причем указанные α и β субъединицы состоят из нативных аминокислотных последовательностей или вариантов указанных аминокислотных последовательностей.

2. Белок по п.1, в котором указанный белок включает указанный линкерный фрагмент, а указанный линкерный фрагмент необязательно содержит лекарственный препарат, который должен быть доставлен к рецептору гликопротеинового гормона.

3. Белок по п.1, в котором положение, проксимальное к C-концу β субъединицы, ковалентно связано, необязательно через линкерный фрагмент, с положением, проксимальным к N - концу α субъединицы, или положение, проксимальное к C-концу α субъединицы, ковалентно связано, необязательно через линкерный фрагмент, с положением, проксимальным к N-концу β субъединицы.

4. Белок по п.1, в котором β субъединица является β субъединицей хорионического гонадотропина человека или ее вариантом, или β субъединица является β субъединицей ФСГ или ее вариантом; или β субъединица является β субъединицей ФСГ, удлиненной в положении, проксимальном к ее C-концу, за счет полного или части КТП звена или ее вариантом, или β субъединица является β субъединицей ЛГ или ее вариантом; или β субъединица является β субъединицей ЛГ, удлиненной в положении, проксимальном к ее C-концу, за счет полного КТП звена или его части, или ее вариантом, или β субъединица является β субъединицей ТСГ или ее вариантом; или β субъединица является β субъединицей ТСГ, удлиненной в положении, проксимальном к ее C-концу, за счет полного КТП звена или его части, или ее вариантом, и/или α субъединица является удлиненной в положении, проксимальном к ее N-концу, за счет полного или части КТП звена, или ее вариантом.

5. Белок по п.1, в котором α субъединица, β субъединица или обе модифицированы за счет вставки полного КТП звена, его части или его варианта в некритический ее участок, и/или в котором указанный линкерный фрагмент включает полное КТП звено, его часть или его вариант.

6. Белок по п.5, в котором указанная часть КТП звена имеет положение 112 - 132, 115 - 132, 116 - 132 или 118 - 132 или 112 - 127, 115 - 127, 116 - 127 или 118 - 127 и/или указанный КТП имеет один или более 0-связанных сайтов гликозилирования, модифицированных или подвергнутых делеции, и/или указанный некритический участок является проксимальным по отношению к C-концу, или указанный некритический участок является проксимальным по отношению к N-концу.

7. Белок по п.1, в котором указанная β субъединица модифицирована в одном или более из N-связанных сайтов гликозилирования, и/или в котором указанная α субъединица модифицирована в одном или более из N-связанных сайтов гликозилирования: и/или который не гликозилирован, и/или в котором одна или более из аминокислот в положениях 85 - 92 α субъединицы удалена.

8. Гликозилированный или негликозилированный белок, который содержит аминокислотную последовательность β субъединицы гликопротеинового гормона, ковалентно связанную, необязательно через линкерный фрагмент, с аминокислотной последовательностью β субъединицы того же самого или отличного гликопротеинового гормона, причем указанные β субъединицы состоят из нативных аминокислотных последовательностей указанных гормонов или вариантов указанных аминокислотных последовательностей, или аминокислотную последовательность α субъединицы гликопротеинового гормона, ковалентно связанную, необязательно через линкерный фрагмент, с аминокислотной последовательностью α субъединицы того же самого или отличного гликопротеинового гормона, причем указанные α субъединицы состоят из нативных аминокислотных последовательностей указанных гормонов или вариантов указанных аминокислотных последовательностей.

9. Белок по п.8, в котором положение, проксимальное к C-концу одной α или β субъединицы, ковалентно связано, необязательно через линкерный фрагмент, с положением, проксимальным к N-концу другой α или β субъединицы.

10. Белок по п.8, в котором указанный белок включает линкерный фрагмент.

11. Фармацевтическая или ветеринарная композиция, которая содержит белок по п.1 или 8 в смеси с приемлемым фармацевтическим эксципиентом.

12. Антитела, иммуноспецифичные к белку по п.1 или 8.

13. Молекула ДНК или РНК, которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок по п.1 или 8.

14. Экспрессионная система для продуцирования одноцепочечной формы гликопротеинового гормона, включающая первую нуклеотидную последовательность, кодирующую белок по п.1 или 8, операбельно связанную с контрольной последовательностью, способной осуществить экспрессию указанной первой нуклеотидной последовательности.

15. Экспрессионная система по п.14, включающая далее вторую нуклеотидную последовательность, кодирующую сигнальный пептид, операбельно связанный с белком, кодируемым указанной первой нуклеотидной последовательностью.

16. Клетка-хозяин, модифицированная так, что содержит экспрессионную систему по п.15.

17. Способ получения одноцепочечной формы гликопротеинового гормона, включающий культивирование клеток по п.16 в условиях, в которых указанный гликопротеиновый гормон продуцируется, и выделение гликопротеинового гормона из культуры.