Claims (5)
1. Способ получения натриевой соли ДНК из молок рыб путем их гомогенизации и удаления белков из комплекса с ДНК с помощью обработки ферментным препаратом, с последующим выделением чистой натриевой соли ДНК известными приемами, отличающийся тем, что к гомогенату молок добавляют коллазу, выделенную из гепатопанкреаса камчатского краба, обладающую протеолетической, липазной и нуклеазными активностями, и натриевую соль этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) до конечной концентрации в реакционной смеси 10-30 мМ, и инкубируют полученную реакционную смесь при температуре 20-40oC, предпочтительно 35-38oC, после чего добавляют хлористый натрий до концентрации 20-100 г/л в реакционной смеси, нагревают смесь до 56-60oC и выдерживают при данной температуре, после чего смесь охлаждают до 2-8oC и отделяют осадок либо центрифугированием, либо нутч-фильтрацией.1. A method of producing sodium salt of DNA from fish milk by homogenizing and removing proteins from the complex with DNA by treatment with an enzyme preparation, followed by isolation of pure sodium salt of DNA with known methods, characterized in that collase isolated from Kamchatka hepatopancreas is added to the milk homogenate crab with proteolytic, lipase and nuclease activity, and ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) sodium salt to a final concentration of 10-30 mM in the reaction mixture, and the resulting reaction is incubated the mixture at a temperature of 20-40 o C, preferably 35-38 o C, after which sodium chloride is added to a concentration of 20-100 g / l in the reaction mixture, the mixture is heated to 56-60 o C and kept at this temperature, after which the mixture is cooled to 2-8 o C and the precipitate is separated by centrifugation or suction filtration.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для получения низкомолекулярной ДНК добавляют ЭДТА до конечной концентрации в реакционной смеси 1-10 мМ. 2. The method according to p. 1, characterized in that to obtain low molecular weight DNA add EDTA to a final concentration in the reaction mixture of 1-10 mm.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для получения ДНК средних размеров добавляют ЭДТА до конечной концентрации в реакционной смеси 10 - 20 мМ. 3. The method according to p. 1, characterized in that to obtain medium-sized DNA add EDTA to a final concentration in the reaction mixture of 10 to 20 mm.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для получения высокомолекулярной ДНК добавляют ЭДТА до конечной концентрации в реакционной смеси 20 - 30 мМ. 4. The method according to p. 1, characterized in that to obtain high molecular weight DNA add EDTA to a final concentration in the reaction mixture of 20 to 30 mm.
5. Способ по п. 1-4, отличающийся тем, что для получения высокоочищенной ДНК с содержанием белка менее 0,1% раствор ДНК пропускают через колонку с анионообменником (Полисил СА-500, 20 - 30 мкм), промывают колонку 0,5 М раствором хлористого натрия, затем 1 М NaCl и элюируют высокочистую ДНК 2 М раствором хлористого натрия. 5. The method according to p. 1-4, characterized in that to obtain highly purified DNA with a protein content of less than 0.1%, the DNA solution is passed through a column with an anion exchanger (Polysil SA-500, 20-30 μm), the column is washed with 0.5 M solution of sodium chloride, then 1 M NaCl and elute high purity DNA with a 2 M solution of sodium chloride.