Claims (1)
Предполагаемое изобретение относится к медицинской и микробиологической промышленности, в частности к технологии получения копропорфирина III. Задачей предлагаемого решения явилось получение копропорфирина III в водорастворимой форме с использованием штамма Arthrobacter globiformis ИНБИ-121, высокопродуктивного в отношении синтеза копропорфирина III. Водорастворимая форма копропорфирина III может быть использована в медицине для диагностики и лечения рака более эффективно и с меньшими побочными явлениями, чем известные водорастворимые формы. Копропорфирин III штамм Arthrobacter globiformis при культивировании в жидкой питательной среде образует копропорфирин III. Штамм получен селекционным путем методом ступенчатого отбора по признаку устойчивости к копропорфирину III и последующей селекцией на подобранных средах. Штамм Arthrobacter globiformis ИНБИ-121 отличается от штамма ВКМ В-658 устойчивостью к копропорфирину III в средах с концентрацией последнего 500 - 800 мг/л. Кроме того, предлагаемый штамм является более продуктивным в отношении копропорфирина III и уровень этой продуктивности, в отличии от исходного штамма, не подвержен широким колебаниям. Он варьирует от 170 до 270 мг/л. Для проведения направленного биосинтеза копропорфирина III культивирование продуцента осуществляют на среде следующего состава, мас. %: глюкоза 8,0, кукурузный экстракт 3,0, смесь аминокислот гидролизатных (САГ) 0,2 - 0,5, аммоний фосфорнокислый двузамещенный 0,05 - 0,2, вода - остальное, рН 6,8 - 7,2. Длительность ферментации 8 - 10 сут при 32 - 36oC. Предлагаемый способ биосинтеза позволяет повысить производительность процесса и обеспечивает высокий уровень синтеза копропорфирина III (200 - 300 мг/л) в условиях стабильного рН без дозирования глюкозы, кислоты или соды. Способ получения водорастворимой формы копропорфирина III основан на сочетании приемов переосаждения, проводимых в специально подобранных условиях, с сорбционной хроматографией на макропористом сополимере стирола и дивинилбензола в солевой форме. Способ позволяет получать высокоочищенный препарат водорастворимой соли копропорфирина III (90 - 96 % чистоты) при использовании экологически безопасных технологических приемов.The alleged invention relates to the medical and microbiological industry, in particular to a technology for the production of coproporphyrin III. The objective of the proposed solution was to obtain coproporphyrin III in a water-soluble form using a strain of Arthrobacter globiformis INBI-121, highly productive in relation to the synthesis of coproporphyrin III. The water-soluble form of coproporphyrin III can be used in medicine for the diagnosis and treatment of cancer more effectively and with fewer side effects than the known water-soluble forms. Coproporphyrin III strain Arthrobacter globiformis when cultured in a liquid nutrient medium forms coproporphyrin III. The strain was obtained by selection by the method of stepwise selection on the basis of resistance to coproporphyrin III and subsequent selection on selected media. The strain Arthrobacter globiformis INBI-121 differs from the VKM B-658 strain by resistance to coproporphyrin III in media with a concentration of the latter 500-800 mg / l. In addition, the proposed strain is more productive in relation to coproporphyrin III and the level of this productivity, in contrast to the original strain, is not subject to wide fluctuations. It varies from 170 to 270 mg / l. To conduct directed biosynthesis of coproporphyrin III, the producer is cultured on a medium of the following composition, wt. %: glucose 8.0, corn extract 3.0, a mixture of hydrolyzate amino acids (SAG) 0.2 - 0.5, ammonium phosphate disubstituted 0.05 - 0.2, water - the rest, pH 6.8 - 7.2 . The duration of fermentation is 8-10 days at 32 - 36 o C. The proposed biosynthesis method allows to increase the productivity of the process and provides a high level of synthesis of coproporphyrin III (200 - 300 mg / l) under conditions of stable pH without dosing glucose, acid or soda. A method of obtaining a water-soluble form of coproporphyrin III is based on a combination of reprecipitation techniques, carried out under specially selected conditions, with sorption chromatography on a macroporous copolymer of styrene and divinylbenzene in salt form. The method allows to obtain a highly purified preparation of a water-soluble salt of coproporphyrin III (90 - 96% purity) using environmentally friendly technological methods.