RU2819521C1 - Способ дооперационной диагностики медуллярного рака щитовидной железы - Google Patents
Способ дооперационной диагностики медуллярного рака щитовидной железы Download PDFInfo
- Publication number
- RU2819521C1 RU2819521C1 RU2023130897A RU2023130897A RU2819521C1 RU 2819521 C1 RU2819521 C1 RU 2819521C1 RU 2023130897 A RU2023130897 A RU 2023130897A RU 2023130897 A RU2023130897 A RU 2023130897A RU 2819521 C1 RU2819521 C1 RU 2819521C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- microrna
- mtc
- expression level
- mir
- expression
- Prior art date
Links
- 208000023356 medullary thyroid gland carcinoma Diseases 0.000 title claims abstract description 38
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 238000010882 preoperative diagnosis Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 208000009018 Medullary thyroid cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 9
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 51
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000002380 cytological effect Effects 0.000 claims description 12
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 claims description 9
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 3
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 claims description 3
- 208000013076 thyroid tumor Diseases 0.000 claims description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 208000037196 Medullary thyroid carcinoma Diseases 0.000 description 29
- 208000013818 thyroid gland medullary carcinoma Diseases 0.000 description 29
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 23
- 108091093189 Mir-375 Proteins 0.000 description 17
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 16
- 108091062225 miR-323 stem-loop Proteins 0.000 description 14
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 13
- 208000009453 Thyroid Nodule Diseases 0.000 description 9
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 6
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 6
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 6
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 5
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 5
- 108020005196 Mitochondrial DNA Proteins 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 208000003200 Adenoma Diseases 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 210000005131 Hürthle cell Anatomy 0.000 description 3
- 101150048834 braF gene Proteins 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- 102000049982 HMGA2 Human genes 0.000 description 2
- 108700039143 HMGA2 Proteins 0.000 description 2
- 101150073387 Hmga2 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100121437 Homo sapiens GCM2 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100395337 Homo sapiens HMGA2 gene Proteins 0.000 description 2
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 2
- 108091028049 Mir-221 microRNA Proteins 0.000 description 2
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 2
- 201000004260 follicular adenoma Diseases 0.000 description 2
- 208000030878 follicular thyroid adenoma Diseases 0.000 description 2
- 238000012252 genetic analysis Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 108091061917 miR-221 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091063489 miR-221-1 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091055391 miR-221-2 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 108091031076 miR-221-3 stem-loop Proteins 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000000849 parathyroid Effects 0.000 description 2
- 239000005315 stained glass Substances 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 206010001233 Adenoma benign Diseases 0.000 description 1
- 206010004412 Benign neoplasm of thyroid gland Diseases 0.000 description 1
- 210000003771 C cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010018498 Goitre Diseases 0.000 description 1
- 101000984753 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase B-raf Proteins 0.000 description 1
- 108091093105 Nuclear DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000035965 Postoperative Complications Diseases 0.000 description 1
- 206010071987 RET gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000003066 decision tree Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 201000003872 goiter Diseases 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000010197 meta-analysis Methods 0.000 description 1
- 201000002120 neuroendocrine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 210000002990 parathyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для дооперационной диагностики медуллярного рака щитовидной железы (МРЩЖ). Из образцов опухоли щитовидной железы, полученных путем тонкоигольной аспирационной пункционной биопсии, выделяют микроРНК. Определяют уровни экспрессии микроРНК-375 и микроРНК-323. Рассчитывают значение показателя 1/[(уровень экспрессии микроРНК-375) × (уровень экспрессии микроРНК-323)]. При значении данного показателя, равном или менее 110, диагностируют МРЩЖ. Способ обеспечивает упрощение и ускорение дооперационной диагностики МРЩЖ при сохранении высокой точности анализа за счет использования минимального набора значимых микроРНК. 2 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для дооперационной диагностики медуллярного рака щитовидной железы.
Медуллярная рак щитовидной железы (МРЩЖ) это нейроэндокринная карцинома, возникающая из С-клеток щитовидной железы. Дооперационная диагностика этого заболевания основана на проведении тонкоигольной аспирационная биопсии узлов щитовидной железы (ТАБ), определении специфичных мутации гена RET и определении уровня кальцитонина крови. Первые два метода являются информативными примерно в половине случаев, а кальцитонин имеет так называемую «серую зону» (при значении от 10 до 100 пг/мл) и как следствие низкую предсказательную ценность положительного результата. Сложность и неоднозначность первичной диагностики МРЩЖ отражена в клинических рекомендациях Американской тиреоидной ассоциации (АТА), в которых с одной стороны осуждается целесообразность определения уровня кальцитонина у всех пациентов с узлами щитовидной железы, что экономически нецелесообразно, а с другой стороны, динамическое наблюдение при неопределенных заключениях результатов ТАБ увеличивает сроки до выполнения оперативного лечения, тем самым ухудшая его прогноз (1). Все это диктует необходимость поиска новых маркеров, которые способны повысить точность дооперационной диагностики МРЩЖ.
В последнее время особое внимание уделяется роли микроРНК в развитии МРЩЖ. Это класс малых некодирующих РНК, которые регулируют посттранскрипционную экспрессию генов. Использование различных микроРНК в качестве диагностических маркеров дифференцированных форм рака щитовидной железы в настоящее время уже успешно реализовано в различных генетических панелях, таких как ThyGenX/ThyraMIR, Rosetta Reveal (2), mir-THYpe (3) ТироидИНФО (4).
Известен способ дооперационной диагностики МРЩЖ, основанный на анализе 108 генов из смыва пунктата узла щитовидной железы Afirma Genomic Sequencing Classifier (GSC). Этот способ позволили со 100% чувствительностью и специфичностью определить МРЩЖ у 21 из 211 пациентов с цитологическим заключением Bethesda III-VI (5).
Также известен способ диагностики МРЩЖ в комплексе молекулярно-генетического теста ThyraMIR, основанный на анализе экспрессии 10 различных микроРНК. Данный тест основан на вычитании критического порогового значения одной микроРНК из критических пороговых значений других микроРНК. Тест также позволили со 100% чувствительностью и специфичностью определить МРЩЖ у 11 из 314 пациентов с цитологическим заключением Bethesda III-IV, основываясь в основном на показателях микроРНК-375 (6).
Известен способ дооперационной дифференциальной диагностики узловых образований щитовидной железы человека (7), включающий взятие образца ткани узлового образования щитовидной железы, выделение суммарного пула РНК из образца, измерение уровня экспрессии диагностируемых микроРНК методом ОТ-ПЦР в реальном времени, анализ уровня экспрессии гена HMGA2, митохондриальной ДНК, а также определение мутации V600E в гене BRAF с последующим сравнительным анализом изменения уровня экспрессии диагностируемых биомаркеров в норме и при узловых образованиях щитовидной железы и составлением заключения о наличии и характере узлового образования, характеризующийся тем, что измеряют уровень экспрессии трех микроРНК, а именно микроРНК-146b, -221, -375, дополнительно измеряют уровень экспрессии гена GCM2, характеризующего клетки паращитовидной железы, а заключение о наличии и характере узлового образования составляют на основании дерева принятия решений, построенного на основе средних значений уровней экспрессии измеряемых биомаркеров в разных типах узловых образований щитовидной железы, согласно которому анализируемый образец относят к одному, выбранному из следующей группы: узловое образование паращитовидной железы, доброкачественное узловое образование щитовидной железы, злокачественное узловое образование щитовидной железы, включающее папиллярный рак, медуллярный рак, гюртлеклеточный рак, фолликулярные опухоли с маркерами злокачественности, при этом, в частном случае, если в образце опухолевой ткани значение биомаркера HMGA2 выше или равно 0,015, miR-221 выше или равно 0,07, miR-375 выше или равно 3,5, уровень митохондриальной ДНК менее 5500 и отсутствует мутация V600E в гене BRAF, то делают заключение о вероятности наличия у пациента фолликулярной опухоли с маркерами злокачественности.
Недостатками способа являются длительность и высокая трудоемкость, связанная с необходимостью измерения уровня экспрессии гена HMGA2, митохондриальной ДНК, а также определение мутации V600E в гене BRAF с последующим сравнительным анализом изменения уровня экспрессии диагностируемых биомаркеров в норме и при узловых образованиях щитовидной железы, кроме этого, дополнительно измеряют уровень экспрессии гена GCM2, характеризующего клетки паращитовидной железы. Для диагностики МРЩЖ используют показания уровня экспрессии только одной микроРНК-375 (выше или равно 3,5), что недостаточно для точной дооперационной диагностики МРЩЖ.
Наиболее близким к заявляемому способу - прототипом, является способ дооперационной дифференциальной диагностики новообразований щитовидной железы, включающий молекулярно-генетическое исследование, при котором предварительно высушенный цитологический препарат смывают с цитологических стекол лизирующим буфером, далее производят выделение ДНК и микроРНК с помощью наборов для выделения, а затем производят детекцию и количественную оценку диагностически значимых микроРНК, основанную на методе полимеразной цепной реакции (ПЦР). При условии показателей HMGA2 более 0,09, микроРНК-221 более 0,0105 и микроРНК-375 более -12,1213, определяют фолликулярную опухоль с признаками злокачественности. При условии показателей микроРНК-146b более 0,1721, определяют папиллярный рак. При показателях микроРНК-375 более 5,2514, определяют медуллярный рак. Показатель соотношения митохондриальной ДНК/ядерной ДНК более 5716,3013 определяет В-клеточный рак. Наличие мутации V600 в гене BRAF определяет папиллярный рак и является риском наличия высокой биологической агрессивности данного папиллярного рака и распространенного процесса (8).
Недостатками известного способа являются длительность и трудоемкость способа, связанная с необходимостью измерения большого количества биомаркеров, а также недостаточная точность анализа, поскольку для диагностики МРЩЖ используют показания уровня экспрессии только одной микроРНК-375 (более 5,2514), что недостаточно для точной дооперационной диагностики МРЩЖ.
Задачей изобретения является создание точного и более простого и быстрого способа дооперационной диагностики МРЩЖ щитовидной железы с целью как можно более раннего начала лечения данной группы пациентов.
Технический результат: упрощение и ускорение дооперационной диагностики МРЩЖ при сохранении высокой точности анализа.
Предлагаемый молекулярно-генетический способ заключается в следующем.
Цитологический окрашенный препарат, полученный путем тонкоигольной аспирационной пункционной биопсии из опухоли щитовидной железы, смывают с цитологических стекол 200 мкл лизирующего буфера, далее из него производят выделение ДНК и микроРНК с помощью наборов для выделения, затем производят детекцию и количественную оценку микроРНК-375 и микроРНК-323, основанную на методе ОТ-ПЦР (полимеразной цепной реакции). Используют стандартную концентрацию праймеров 0,5 мкМ, концентрация флуоресцентно меченого зонда - 0,25 мкМ. Реакцию обратной транскрипции проводят в течение 15 мин. при 16°С, 15 мин. при 42°С, затем обратную транскриптазу инактивируют 2 мин. при 95°С и отбирают 3 мкл полученной смеси для ПЦР в реальном времени. Протокол ПЦР: предварительный прогрев при 95°С - 2 мин, 50 циклов: денатурация при 94°С - 10 сек, отжиг праймеров и элонгация: 60°С - 20 сек. Рассчитывают значение соотношения 1/[(уровень экспрессии микроРНК-375) × (уровень экспрессии микроРНК-323)] и при полученном значении соотношения, равном или менее 110, диагностируют МРЩЖ.
Предлагаемый способ отличается простотой и меньшей трудоемкостью в сравнении с прототипом, вследствие подбора минимально значимого количества диагностируемых микроРНК (микроРНК-375 и микро РНК-323), что позволяет упростить и ускорить проведение диагностики (на проведение анализа необходимо 3,5 часа, вместо 8 часов по прототипу), а также полностью исключить ложноположительные заключения.
Для доказательства достижения решаемой задачи, анализу подвергнуты цитологические образцы 30 пациентов с МРЩЖ. Контрольные группы составили доброкачественное образование (ДО) - 23 случаев, фолликулярная аденома (ФА) - 25, Гюртлеклеточная аденома (ГКА) - 30, фолликулярный рак (ФР) - 30, Гюртлеклеточная рак (ГКР) - 24, папиллярный рак (ПР) - 37. Были оценены уровни экспрессии микроРНК-375, микроРНК-323, а также рассчитаны значения соотношения 1/[(уровень экспрессии микроРНК-375) × (уровень экспрессии микроРНК-323)].
В таблице 1 представлены уровни экспрессии микроРНК-375, микроРНК-323, значения соотношения 1/[(уровень экспрессии микроРНК-375) × (уровень экспрессии микроРНК-323)] в различных типах опухолей, где ME - медиана, Q1, Q3 - 1 и 3 квартили, М - среднее. При МРЩЖ уровень микроРНК-375, микроРНК-323 и значения соотношения 1/[(уровень экспрессии микроРНК-375) × (уровень экспрессии микроРНК-323)] статистически значимо отличались от всех типов опухолей (р менее 0,0001).
Наименьшее значение уровня экспрессии микроРНК-375 при МРЩЖ составило 2,1, наименьшее значение уровня экспрессии микроРНК-323 составило 0,0002, наибольшее значение соотношения 1/[(уровень экспрессии микроРНК-375) × (уровень экспрессии микроРНК-323)] при МРЩЖ составило 110. Пороговое значение для диагностики МРЩЖ с помощью микроРНК-375 принято 2,1 и выше, для микроРНК-323 - 0,0002 и выше, соответственно для соотношения 1/[(уровень экспрессии микроРНК-375) × (уровень экспрессии микроРНК-323)] - 110 и ниже.
В таблице 2 представлены диагностические характеристики микроРНК-375, микроРНК-323 и соотношения 1/[(уровень экспрессии микроРНК-375) × (уровень экспрессии микроРНК-323)] для выявления МРЩЖ (включая 95% доверительный интервал), где ПЦПР -предсказательная ценность положительного результата, ПЦОР - предсказательная ценность отрицательного результата.
Из таблицы 2 видно, что способ диагностики МРЩЖ, основанный на измерении уровня экспрессии микроРНК-375 и уровня экспрессии микроРНК-323 (колонки 3, 4) не позволяет обеспечить 100% точность диагностики, и только использование для анализа значений соотношения 1/[(уровень экспрессии микроРНК-375) × (уровень экспрессии микроРНК-323)] позволяет повысить точность диагностики и обладает 100% чувствительностью, 100% специфичностью, 100% ПЦПР и 100% ПЦОР.
Ниже приведены конкретные примеры, иллюстрирующие эффективность заявленного способа дооперационной диагностики МРЩЖ. Пример 1.
У пациентки А., 39 лет, выявлен узел в щитовидной железе 1,0 см. Ей была выполнена тонкоигольная пункционная биопсия щитовидной железы под УЗИ контролем, по результатам цитологического исследования получено доброкачественное заключение (Bethesda II). Однако уровень базального кальцитонина был выше референтного значения - 15 (норма до 10 пг/мл). Для исключения МРЩЖ пациентке была выполнена операция тиреоидэктомия. Гистологическое заключение - зоб. Ретроспективно был проведен молекулярно-генетический анализ первичного цитологического материала с окрашенного стекла этой пациентки заявляемым способом.
Цитологический окрашенный препарат с цитологических стекол смывали 200 мкл лизирующего буфера в пробирку объемом 1,5 мл, далее произвели выделение ДНК и микроРНК с помощью набора «РеалБест экстракция 100» (АО «Вектор-Бест», Новосибирск) в соответствии с инструкцией производителя. Затем провели детекцию и количественную оценку микроРНК-375 и микроРНК-323, основанную на методе ОТ-ПЦР в реальном времени на амплификаторе CFX96 (Bio-Rad Laboratories, США).
Использовали стандартную концентрацию праймеров 0,5 мкМ, концентрация флуоресцентно меченого зонда - 0,25 мкМ. Реакцию обратной транскрипции провели в течение 15 мин. при 16°С, 15 мин. при 42°С, затем обратную транскриптазу инактивировали 2 мин. при 95°С и отбирали 3 мкл полученной смеси для ПЦР в реальном времени. Протокол ПЦР: предварительный прогрев при 95°С - 2 мин, 50 циклов: денатурация при 94°С - 10 сек, отжиг праймеров и элонгация: 60°С - 20 сек. Анализ полученных данных проводили 2(-ΔCt) методом (9). Уровень экспрессии микроРНК-375 составил 0,00208, а уровень экспрессии микроРНК-323 составил 0,040037. Значение показателя 1/[(уровень экспрессии микроРНК-375) × (уровень экспрессии микроРНК-323)]=1/(0,00208 × 0,040037) составило 12008, на основании чего было сделано заключение об отсутствии у пациентки МРЩЖ.
Пример 2.
Пациентка В. 25 лет, выявлен узел щитовидной железы. Выполнена тонкоигольная пункционная биопсия щитовидной железы под УЗИ контролем, по результатам цитологического исследования фолликулярная опухоль (Bethesda II, риск злокачественности менее 5%). Уровень кальцитонина 35 пг/мл. В соответствии с клиническими рекомендациями, цитологическое заключение Bethesda II не является показанием к оперативному лечению. Однако, повышенный уровень кальцитонина, стал основанием для проведения диагностической операции. Ретроспективно был проведен молекулярно-генетический анализ первичного цитологического материала с окрашенного стекла этой пациентки заявляемым способом, аналогично примеру 1. Уровень экспрессии микроРНК-375 составил 2,80106, а уровень экспрессии микроРНК-323 составил 0,00327. Значение показателя 1/[(уровень экспрессии микроРНК-375) × (уровень экспрессии микроРНК-323)]=1/(2,80106 × 0,00327) составило 109, на основании чего было сделано заключение о наличии у пациентки МРЩЖ.
Предлагаемый способ обеспечивает сокращение количества необоснованных хирургических вмешательств, которые могут привести к значительному снижению качества жизни за счет наличия специфических послеоперационных осложнений.
Источники информации
1. Wells SA Jr et al. American Thyroid Association Guidelines Task Force on Medullary Thyroid Carcinoma. Revised American Thyroid Association guidelines for the management of medullary thyroid carcinoma. Thyroid. 2015 Jun; 25(6):567-610. doi: 10.1089/thy.2014.0335. PMID: 25810047; PMCID: PMC4490627.
2. Vargas-Salas, S., , J.R., Urra, S., , J.M., Mena, N., Uslar, Т., Lagos, M., , M., & , H.E. (2018). Genetic testing for indeterminate thyroid cytology: review and meta-analysis. Endocrine-related cancer, 25(3), R163-R177. https://doi.org/10.1530/ERC-17-0405.
3. Santos, M., Buzolin, A.L., Gama, R.R., Silva, E., Dufloth, R.M., Figueiredo, D., & Carvalho, A.L. (2018). Molecular Classification of Thyroid Nodules with Indeterminate Cytology: Development and Validation of a Highly Sensitive and Specific New miRNA-Based Classifier Test Using Fine-Needle Aspiration Smear Slides. Thyroid: official journal of the American Thyroid Association, 28(12), 1618-1626. https://doi.org/10.1089/thy.2018.0254.
4. Titov S, Demenkov PS, Lukyanov SA, et al. Preoperative detection of malignancy in fine-needle aspiration cytology (FNAC) smears with indeterminate cytology (Bethesda III, IV) by a combined molecular classifier [published online ahead of print, 2020 Mar 25.
5. Randolph GW, Sosa JA, Hao Y, et al. Preoperative Identification of Medullary Thyroid Carcinoma (MTC): Clinical Validation of the Afirma MTC RNA-Sequencing Classifier. Thyroid. 2022 Sep; 32(9): 1069-1076. doi: 10.1089/thy.2022.0189. Epub 2022 Aug 8. PMID: 35793115; PMCID: PMC9526471.
6. Ciarletto AM, Narick C, Malchoff CD, et al. Analytical and clinical validation of pairwise microRNA expression analysis to identify medullary thyroid cancer in thyroid fine-needle aspiration samples. Cancer Cytopathol. 2021; 129(3):239-249. doi: 10.1002/cncy.22365.
7. Патент RU 2757347 C1, опубл. 13.10.2021, Бюл. 29.
8. Патент RU 2705110 C1, опубл. 06.11.2019, Бюл. 31.
9. Livak KJ, Schmittgen TD. Analysis of relative gene expression data using realtime quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method. Methods. 2001 Dec; 25(4):402
Claims (1)
- Способ дооперационной диагностики медуллярного рака щитовидной железы, включающий выделение микроРНК из цитологических препаратов, полученных путем тонкоигольной аспирационной пункционной биопсии из опухоли щитовидной железы, определение уровня экспрессии микроРНК, основанное на методе полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени, отличающийся тем, что определяют уровни экспрессии микроРНК-375 и микроРНК-323, далее рассчитывают значение показателя 1/[(уровень экспрессии микроРНК-375) × (уровень экспрессии микроРНК-323)] и при значении данного показателя, равном или менее 110, диагностируют у пациента медуллярный рак щитовидной железы.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2819521C1 true RU2819521C1 (ru) | 2024-05-21 |
Family
ID=
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2569154C1 (ru) * | 2014-10-08 | 2015-11-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт молекулярной и клеточной биологии Сибирского отделения Российской академии наук (ИМКБ СО РАН) | Способ дифференциальной диагностики новообразований щитовидной железы человека |
| EP2772550B1 (en) * | 2010-11-17 | 2017-03-29 | Interpace Diagnostics, LLC | Mirnas as biomarkers for distinguishing benign from malignant thyroid neoplasms |
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2772550B1 (en) * | 2010-11-17 | 2017-03-29 | Interpace Diagnostics, LLC | Mirnas as biomarkers for distinguishing benign from malignant thyroid neoplasms |
| RU2569154C1 (ru) * | 2014-10-08 | 2015-11-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт молекулярной и клеточной биологии Сибирского отделения Российской академии наук (ИМКБ СО РАН) | Способ дифференциальной диагностики новообразований щитовидной железы человека |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| СЕРДЮКОВА О.С. и др. МикроРНК - перспективные молекулярные маркеры обнаружения рака в узлах щитовидной железы. Клиническая и экспериментальная тиреоидология. 2018; 14(3): 140-148. GALUPPINI F. et al. MicroRNAs in Medullary Thyroid Carcinoma: A State of the Art Review of the Regulatory Mechanisms and Future Perspectives. Cells. 2021 Apr 20; 10(4): 955. KHATAMI F. et al. Genetic and Epigenetic of Medullary Thyroid Cancer. Iran Biomed J. 2018 May 1; 22(3): 142-50. Epub 2017 Nov 11. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6908571B2 (ja) | 前立腺癌の予後を定量化するための遺伝子発現プロフィールアルゴリズムおよび試験 | |
| US12060617B2 (en) | Marker genes for prostate cancer classification | |
| JP6246845B2 (ja) | 遺伝子発現を用いた前立腺癌の予後を定量化する方法 | |
| CN106459961B (zh) | 胰腺癌的检测试剂盒或装置以及检测方法 | |
| JP2019527544A (ja) | 分子マーカー、参照遺伝子、及びその応用、検出キット、並びに検出モデルの構築方法 | |
| US20110294684A1 (en) | Gene expression signatures for lung cancers | |
| CN111662982B (zh) | 用于脑胶质瘤早期诊断和/或复发监测的生物标志物及其应用 | |
| WO2017223216A1 (en) | Compositions and methods for diagnosing lung cancers using gene expression profiles | |
| WO2022121960A1 (zh) | 泛癌症早筛预测方法 | |
| US20120004127A1 (en) | Gene expression markers for colorectal cancer prognosis | |
| CN116987791B (zh) | 一组血浆标志物在甲状腺结节良恶性鉴别中的应用 | |
| EP3953492A1 (en) | Method for determining rcc subtypes | |
| RU2819521C1 (ru) | Способ дооперационной диагностики медуллярного рака щитовидной железы | |
| WO2023172974A2 (en) | Dna methylation biomarkers for detection of high-grade dysplasia and esophageal or junctional adenocarcinoma | |
| WO2019245587A1 (en) | Methods and compositions for the analysis of cancer biomarkers | |
| WO2019018764A1 (en) | METHODS OF DETERMINING RESPONSE TO PARP INHIBITORS | |
| WO2016205911A1 (pt) | Método de detecção in vitro de câncer de tireoide em um paciente, método in vitro de diferenciação entre câncer de tireoide e tecido de tireoide normal ou de lesões benignas de tireoide, uso de um conjunto de genes, método de obtenção de dados para direcionamento do tratamento do cancer de tireoide, kit laboratorial e dispositivo para classificar uma amostra biológica de glândula tireoide como maligna ou benigna | |
| CN108085386B (zh) | 骨肉瘤miRNA检测的内参基因的鉴定 | |
| US20190010558A1 (en) | Method for determining the risk of recurrence of an estrogen receptor-positive and her2-negative primary mammary carcinoma under an endocrine therapy | |
| RU2757347C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики узловых образований щитовидной железы человека | |
| CN110982901B (zh) | 用于侵袭性甲状腺乳头状癌诊断的循环环状rna标志物及应用 | |
| CN115807081A (zh) | 诊断甲状腺癌的基因标志物及其用途 | |
| CN116716405A (zh) | 与食道鳞状细胞癌相关的诊断标志物及其应用 | |
| CN118326047A (zh) | 一组microRNA标志物在甲状腺结节良恶性鉴别中的应用 | |
| CN115125302A (zh) | miRNA在制备乳腺癌耐药性评估的诊断试剂或试剂盒中的应用 |