RU2817015C2

RU2817015C2 - Жидкие фармацевтические составы конъюгатов pth

Info

Publication number: RU2817015C2
Application number: RU2021126684A
Authority: RU
Inventors: Анья Р.Х. СКАНДС; Феликс КЛЕЕМАНН; Михаэль Дуэлунд CЕРЕНСЕН; Юлиа БАРОН; Эрик ХОФФМАНН; Кеннетт СПРОГЕЕ
Original assignee: Асцендис Фарма Боун Дизизис А/С
Priority date: 2019-02-11
Filing date: 2020-02-10
Publication date: 2024-04-09

Abstract

Группа изобретений относится к области медицины и раскрывает жидкий фармацевтический состав для приготовления лекарственного средства для лечения, контроля, отсрочки или предупреждения одного или нескольких заболеваний, которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предупредить с помощью PTH, где фармацевтический состав содержит конъюгат PTH, буферный агент, агент, регулирующий изотоничность, консервант и необязательно антиоксидант, и где конъюгат PTH содержит фрагмент PTH, который ковалентно и обратимо конъюгирован с растворимым в воде носителем, причем конъюгат PTH имеет формулу (IIf-i), где неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент PTH посредством образования амидной связи, и где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, показывает присоединение к фрагменту, где m и p независимо представляют собой целое число в интервале и включая 400 – 500; где фармацевтический состав содержит конъюгат PTH, в котором фрагмент PTH 0,05 – 5,0 мг/мл; янтарную кислоту 0,25 - 24 мг/мл; D-маннит 10 - 200 мг/мл; м-крезол 1 - 10 мг/мл, и где значение pH лежит в интервале от 3,0 до 6,0. Также группа изобретений относится к способу получения жидкого фармацевтического состава (варианты) и к применению жидкого фармацевтического состава (варианты). Техническим результатом является обеспечение стабильного длительного хранения и снижение агрегации конъюгата РТН в жидком фармацевтическом составе. 5 н. и 20 з.п. ф-лы, 25 табл., 5 пр.

Description

Настоящее изобретение относится к жидким фармацевтическим составам, содержащим конъюгат РТН, буферный агент, агент, регулирующий изотоничность, консервант и необязательно антиоксидант.

Гипопаратиреоидизм представляет собой редкое эндокринное заболевание с низким содержанием кальция в сыворотке и несоответствующим низким (недостаточным) уровнем циркулирующего паратиреоидного гормона, чаще всего у взрослых с осложнением в результате хирургического вмешательства на щитовидной железе. У пациентов, которые прошли иммунотерапию, направленную на молекулы иммунных контрольных точек, такие как цитотоксический Т-лимфоцитарный антиген-4 (CTLA-4), белок запрограммированной гибели клеток 1 (PD-1) и его лиганд PD-L1, также может развиться гипопаратиреоидизм как иммунное нежелательное влияние на паращитовидную железу. Стандартное лечение гипопаратиреоидизма включает активированные аналоги витамина D и добавки кальция, которые увеличивают всасывание кальция и фосфора и уровни в сыворотке при аномально повышенной экскреции кальция с мочой.

РТН представляет собой эндокринный гормон, который секретируется паращитовидной железой в ответ на снижение уровня кальция. В 2015 г. Natpara, РТН (1-84), был одобрен для ежедневной подкожной инъекции в качестве дополнения к витамину D и кальцию у пациентов с гипопаратиреоидизмом. Хотя это является важным достижением в лечении заболевания, Natpara не продемонстрировал способности снижать частоту гиперкальциемии (повышенный уровень кальция в сыворотке), гипокальциемии (низкий уровень кальция в сыворотке) или гиперкальциурии (повышенный уровень кальция в моче) по сравнению с традиционной терапией у получающих лечение пациентов.

РТН быстро всасывается и метаболизируется при подкожном введении, поскольку он расщепляется протеазами. Таким образом, существует большая потребность в улучшенных методах лечения гипопаратиреоидизма на основе РТН.

Конъюгация РТН с ПЭГ посредством ПЭГилирования является одним из подходов к повышению биологической стабильности. WO 2003/064462 А1 раскрывает фармацевтические композиции, содержащие стабильные конъюгаты РТН (1-34) и Цис- РТН (1-35) и производных ПЭГ. Хотя в этой заявке также предполагается, что варианты РТН и растворимые в воде полимеры могут быть связаны посредством гидролизуемой связи, полученной реакцией альдегид-ПЭГ и аминогрупп на РТН, в ней не приводится каких-либо подробностей о том, как получить или хранить такие конъюгаты до введения.

Расширение возможностей увеличения периода полувыведения РТН in vivo на основе конъюгации с растворимыми в воде фрагментами-носителями, такими как, например, ПЭГ, через обратимые линкеры пролекарств, было изучено в WO 2017/148883 A1, WO 2018/060310 A1, WO 2018/060311 А1 и WO 2018/060312 А1. Однако не предоставлено никакой информации о жидких фармацевтических составах, которые позволяют стабильно хранить эти обратимые конъюгаты.

Фармацевтические составы таких конъюгатов РТН, в которых растворимый в воде носитель присоединен к РТН посредством обратимой связи, должны обеспечивать достаточную стабильность конъюгата РТН, чтобы избежать преждевременного высвобождения РТН во время хранения. В случае, если обратимая связь между носителем и РТН разрушается во время хранения, концентрация легкодоступного лекарственного средства увеличивается. Это может привести к введению РТН на супрафизиологических уровнях, что приведет к риску передозировки при введении, что может привести к гиперкальциемии или остеопении. Следовательно, достижение длительного высвобождения РТН, которое будет поддерживать гомеостаз кальция и нормальную скорость обмена, важно для лечения гипопаратиреоидизма.

Кроме того, любое лекарственное средство, высвобождаемое во время хранения, подвергается быстрому почечному выведению при введении пациенту, и, следовательно, время, в течение которого состав длительного действия обеспечивает терапевтически релевантные количества лекарственного средства, сокращается.

Кроме того, известно, что РТН или его варианты, конъюгаты или производные могут подвергаться реакциям разложения во время хранения, что может привести к образованию примесей/пептидного повреждения в соответствующем составе, как например:

продукты разложения в результате окисления остатков метионина (Met/M) до сульфоксида метионина и сульфона метионина,

продукты разложения в результате окисления остатков триптофана (Trp/Т) до оксиндол-3-аланина, 5-гидрокситриптофана или путем диоксидирования до N-формилкинуренина и кинуренина,

продукты разложения, возникающие в результате изомеризации аспарагиновой кислоты (Asp/D) или остатков аспартата до изоаспарагиновой кислоты или изоаспартата, например, через промежуточное соединение сукцинимида,

продукты разложения, такие как, например, пептиды с усеченным Asp на С-конце, возникшие в результате расщепления пептидной связи при остатке аспарагиновой кислоты или аспартата,

продукты разложения в результате дезамидирования остатков аспарагина (Asn/N) до аспарагиновой кислоты или аспартата и/или до изоаспарагиновой кислоты или изоаспартата, например, через промежуточное соединение сукцинимида,

продукты разложения, такие как, например, пептиды с усеченным Asn или Asp на С-конце в результате расщепления пептидной связи при остатке аспарагина,

продукты разложения, возникающие в результате дезамидирования остатков глутамина (Gln/Q) до глутаминовой кислоты или изоглутаминовой кислоты, например, через промежуточное соединение глутаримида, и

агрегаты в результате агрегации пептида.

Поскольку вышеупомянутые продукты разложения или агрегаты, которые могут образовываться во время хранения, могут ухудшать биоактивность фрагмента РТН, желательно минимизировать их образование во время хранения. Кроме того, обратимая связь между фрагментом РТН и растворимым в воде носителем затрудняет хранение жидкого фармацевтического состава, содержащего конъюгат РТН.

Таким образом, важно определить подходящие жидкие фармацевтические составы конъюгата РТН, содержащие ПТГ, ковалентно связанный через обратимый линкер с растворимым в воде носителем, где пептид будет демонстрировать приемлемый профиль примесей и ограниченное преждевременное высвобождение РТН даже после длительного хранения

Таким образом, задача настоящего изобретения состоит в том, чтобы по меньшей мере частично преодолеть недостатки, описанные выше.

Эта цель достигается с помощью жидкого фармацевтического состава, где жидкий фармацевтический состав содержит конъюгат РТН, буферный агент, агент, регулирующую изотоничность, консервант и необязательно антиоксидант, и где конъюгат РТН содержит фрагмент РТН, который ковалентно и обратимо конъюгирован с растворимый в воде фрагментом-носителем.

Неожиданно было обнаружено, что жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению допускает стабильное длительное хранение. Более того, неожиданно было обнаружено, что агрегация конъюгата РТН в жидком фармацевтическом составе была снижена в жидком фармацевтическом составе согласно настоящему изобретению.

В контексте настоящего изобретения термины имеют следующие значения.

В контексте настоящего изобретения термин «РТН» относится ко всем полипептидам РТН согласно определенным вариантам осуществления из видов млекопитающих, например, из видов человека и млекопитающих, в частности из видов человека и мыши, а также их вариантам, аналогам, ортологам, гомологам и их производным и фрагментам, которые характеризуются повышением экскреции сывороточного кальция и почечного фосфора и снижением экскреции сывороточного фосфора и почечного кальция.

Термин "РТН" также относится ко всем полипептидам PTHrP, которые связываются с и активируют общий рецептор РТН/PTHrP1. Согласно определенным вариантам осуществления термин "РТН" относится к полипептидам РТН, а также их вариантам, гомологам и производным, проявляющим по существу одну и ту же биологическую активность, т.е. повышение экскреции сывороточного кальция и почечного фосфора и снижение экскреции сывороточного фосфора и почечного кальция.

Как применяется в настоящей заявке, термин "вариант полипептида РТН" относится к полипептиду из того же самого вида, который отличается от ссылочного полипептида РТН или PTHrP. Согласно определенным вариантам осуществления такой ссылочной последовательностью является последовательность полипептида РТН. В общем, различия ограничены таким образом, что аминокислотные последовательности ссылочного полипептида и варианта в общем очень подобны и, во многих областях, идентичны. Предпочтительно, варианты полипептида РТН на по меньшей мере 70%, 80%, 90%, или 95% идентичны ссылочному полипептиду РТН или PTHrP. Под полипептидном, имеющим аминокислотную последовательность на по меньшей мере, например, 95% "идентичную" рассматриваемой аминокислотной последовательности понимается, что аминокислотная последовательность данного полипептида идентична рассматриваемой последовательности, за исключением того, что данная полипептидная последовательность может включать вплоть до пяти аминокислотных изменений на каждые 100 аминокислот рассматриваемой аминокислотной последовательности. Эти замены в ссылочной последовательности могут происходить при амино (N-терминальное) или карбокси концевых (С-терминальное) положениях ссылочной аминокислотной последовательности или в любом мести между этими концевыми положениями, распределяясь либо по отдельности среди остатков в ссылочной последовательности, либо в виде одной или более соприкасающихся групп в ссылочной последовательности. Рассматриваемая последовательность может быть либо полностью аминокислотной последовательностью ссылочной последовательности, либо любым фрагментом, уточненным, как описано в настоящей заявке.

Такие варианты полипептида РТН могут быть вариантами, встречающимися в природе, как например встречающиеся в природе аллельные варианты, кодируемые одной из нескольких альтернативных форм РТН или PTHrP, занимающих данный локус на хромосоме или организме, или изоформы, кодируемые встречающимися в природе вариантами сплайсинга, происходящими из одного первичного транскрипта. Альтернативно вариант полипептида РТН может быть вариантом, который, как известно, не встречается в природе, и который может быть получен методиками мутагенеза, известными в данной области техники.

В данной области известно, что одна или более аминокислот могут быть удалены с N-конца и/или С-конца биоактивного пептида или белка без существенной потери биологической функции. Такие N- и/или С-концевые делеции также охватываются термином вариант полипептида РТН.

Специалистам в данной области техники также известно, что некоторые аминокислотные последовательности полипептидов РТН или PTHrP могут быть изменены без значительного влияния структуры или функции пептида. Такие мутанты включают делеции, вставки, инверсии, повторы и замены, выбранные в соответствии с общими правилами, известными в данной области техники, чтобы иметь небольшой эффект на активность. Например, указания относительно того, как сделать фенотипически молчащие аминокислота замены, приведены в Bowie et al. (1990), Science 247:1306-1310, который полностью включен в настоящее описание посредством ссылки, где авторы указывают, что существуют два основных подхода к изучению толерантности аминокислотной последовательности к изменению.

Варианты РТН также могут быть пептидами, в которых любой один или несколько остатков, вплоть до всех, чувствительных к дезамидированию или реакции, подобной дезамидированию (например, изомеризации), намеренно превращены в другие остатки перед хранением посредством дезамидирования или реакции, подобной дезамидированию, в любой степени, до 100% конверсии на преобразованный остаток. Варианты РТН также могут быть пептидами, в которых любой один или несколько, вплоть до всех, остатков, чувствительных к окислению, намеренно превращены в другие остатки перед хранением в любой степени, вплоть до 100% конверсии на преобразованный остаток.

Согласно определенным вариантам осуществления термин "РТН" также относится к следующим пептидным последовательностям:

SEQ ID NO: 1 (РТН 1-84):

SEQ ID NO: 2 (РТН 1-83):

SEQ ID NO: 3 (РТН 1-82):

SEQ ID NO: 4 (PTH 1-81):

SEQ ID NO: 5 (PTH 1-80):

SEQ ID NO: 6 (PTH 1-79):

SEQ ID NO: 7 (PTH 1-78):

SEQ ID NO: 8 (PTH 1-77):

SEQ ID NO: 9 (PTH 1-76):

SEQ ID NO: 10 (PTH 1-75):

SEQ ID NO: 11 (PTH 1-74):

SEQ ID NO: 12 (PTH 1-73):

SEQ ID NO: 13 (PTH 1-72):

SEQ ID NO: 14(PTH 1-71):

SEQ ID NO: 15 (PTH 1-70):

SEQ ID NO: 16 (PTH 1-69):

SEQ ID NO: 17 (PTH 1-68):

SEQ ID NO: 18 (PTH 1-67):

SEQ ID NO: 19 (PTH 1-66):

SEQ ID NO: 20 (PTH 1-65):

SEQ ID NO: 21 (PTH 1-64):

SEQ ID NO: 22 (PTH 1-63):

SEQ ID NO: 23 (PTH 1-62):

SEQ ID NO: 24 (PTH 1-61):

SEQ ID NO: 25 (PTH 1-60):

SEQ ID NO: 26 (PTH 1-59):

SEQ ID NO: 27 (PTH 1-58):

SEQ ID NO: 28 (PTH 1-57):

SEQ ID NO: 29 (PTH 1-56):

SEQ ID NO: 30 (PTH 1-55):

SEQ ID NO: 31 (PTH 1-54):

SEQ ID NO: 32 (PTH 1-53):

SEQ ID NO: 33 (PTH 1-52):

SEQ ID NO: 34(PTH 1-51):

SEQ ID NO: 35 (PTH 1-50):

SEQ ID NO: 36 (PTH 1-49):

SEQ ID NO: 37 (PTH 1-48):

SEQ ID NO: 38 (PTH 1-47):

SEQ ID NO: 39 (PTH 1-46):

SEQ ID NO: 40 (PTH 1-45):

SEQ ID NO: 41 (PTH 1-44):

SEQ ID NO: 42 (PTH 1-43):

SEQ ID NO: 43 (PTH 1-42):

SEQ ID NO: 44 (PTH 1-41):

SEQ ID NO: 45 (PTH 1-40):

SEQ ID NO: 46 (PTH 1-39):

SEQ ID NO: 47 (PTH 1-38):

SEQ ID NO: 48 (PTH 1-37):

SEQ ID NO: 49 (PTH 1-36):

SEQ ID NO: 50 (PTH 1-35):

SEQ ID NO: 51 (PTH 1-34):

SEQ ID NO: 52 (PTH 1-33):

SEQ ID NO: 53 (PTH 1-32):

SEQ ID NO: 54(PTH 1-31):

SEQ ID NO: 55 (PTH 1-30):

SEQ ID NO: 56 (PTH 1-29):

SEQ ID NO: 57 (PTH 1-28):

SEQ ID NO: 58 (PTH 1-27):

SEQ ID NO: 59 (PTH 1-26):

SEQ ID NO: 60 (PTH 1-25):

SEQ ID NO: 61 (амидированный PTH 1-84):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 62 (амидированный РТН 1-83):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 63 (амидированный РТН 1-82):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 64 (амидированный РТН 1-81):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 65 (амидированный РТН 1-80):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 66 (амидированный РТН 1-79):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 67 (амидированный РТН 1-78):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 68 (амидированный РТН 1-77):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 69 (амидированный РТН 1-76):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 70 (амидированный РТН 1-75):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 71 (амидированный РТН 1-74):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 72 (амидированный РТН 1-73):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 73 (амидированный РТН 1-72):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 74 (амидированный РТН 1-71):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 75 (амидированный РТН 1-70):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 76 (амидированный PTH 1-69):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 77 (амидированный PTH 1-68):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 78 (амидированный PTH 1-67):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 79 (амидированный PTH 1-66):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 80 (амидированный РТН 1-65):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 81 (амидированный РТН 1-64):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 82 (амидированный РТН 1-63):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 83 (амидированный РТН 1-62):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 84 (амидированный РТН 1-61):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 85 (амидированный РТН 1-60):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 86 (амидированный РТН 1-59):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 87 (амидированный РТН 1-58):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 88 (амидированный РТН 1-57):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 89 (амидированный РТН 1-56):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 90 (амидированный РТН 1-55):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 91 (амидированный РТН 1-54):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 92 (амидированный РТН 1-53):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 93 (амидированный РТН 1-52):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 94 (амидированный РТН 1-51):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 95 (амидированный РТН 1-50):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 96 (амидированный РТН 1-49):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 97 (амидированный РТН 1-48):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 98 (амидированный РТН 1-47):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 99 (амидированный РТН 1-46):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 100 (амидированный РТН 1-45):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 101 (амидированный РТН 1-44):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 102 (амидированный РТН 1-43):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 103 (амидированный РТН 1-42):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 104 (амидированный РТН 1-41):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 105 (амидированный РТН 1-40):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 106 (амидированный РТН 1-39):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 107 (амидированный РТН 1-38):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 108 (амидированный РТН 1-37):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 109 (амидированный РТН 1-36):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 110 (амидированный РТН 1-35):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 111 (амидированный РТН 1-34):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 112 (амидированный РТН 1-33):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 113 (амидированный РТН 1-32):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 114 (амидированный РТН 1-31):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 115 (амидированный РТН 1-30):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 116 (амидированный РТН 1-29):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 117 (амидированный РТН 1-28):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 118 (амидированный РТН 1-27):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 119 (амидированный РТН 1-26):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 120 (амидированный РТН 1-25):

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 121 (PTHrP):

Термин полипептид РТН также охватывает все полипептиды РТН и PTHrP, кодируемые аналогами, ортологами и/или видовыми гомологами РТН и PTHrP. Специалистам в данной области также известно, что аналоги PTHrP и PTHrP связываются для активации общего рецептора РТН/PTHrP1, поэтому термин полипептид РТН также охватывает все аналоги PTHrP.

В контексте настоящего изобретения термин «аналог РТН» относится к РТН и PTHrP разных и неродственных организмов, которые выполняют одни и те же функции в каждом организме, но которые не происходят из родовой структуры, которую имели предки организмов. Вместо этого аналогичные РТН и PTHrP возникали отдельно, а затем эволюционировали для выполнения одних и тех же или подобных функций. Другими словами, аналогичные полипептиды РТН и PTHrP представляют собой полипептиды с совершенно разными аминокислотными последовательностями, но которые обладают одинаковой биологической активностью, а именно повышают экскрецию сывороточного кальция и почечного фосфора и снижают экскрецию сывороточного фосфора и почечного кальция.

Как применяется в настоящей заявке термин "ортолог РТН" относится к РТН и PTHrP двух различных видов, последовательности которых связаны друг с другом через общий гомологичный РТН или PTHrP в родоначальном виде, но которые в ходе эволюции стали отличными друг от друга.

Как применяется в настоящей заявке, термин "гомолог РТН" относится к РТН и PTHrP различных организмов, которые осуществляют одну и ту же функцию в каждом организме и которые происходят из родоначальной структуры, которую в общем имели предки организмов. Другими словами, гомологичные РТН полипептиды представляют собой полипептиды с совершенно подобными аминокислотными последовательностями, которые имеют одну и ту же биологическую активность, а именно регулируют рост, пролиферацию и дифференциацию хондроцитов пластины роста хряща. Предпочтительно, гомологи полипептида РТН могут определяться как полипептиды, имеющие идентичность по меньшей мере 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или 95% со ссылочным полипептидом РТН или PTHrP.

Таким образом, полипептидом РТН в соответствии с настоящим изобретением может быть, например: (i) полипептид, в котором по меньшей мере один из аминокислотных остатков имеет в качестве заместителя консервативный или неконсервированный аминокислотный остаток, предпочтительно консервативный аминокислотный остаток, и такой замещенный аминокислотный остаток может или не может быть кодирован генетическим кодом; и/или (ii) полипептид, в котором по меньшей мере один из аминокислотных остатков включает группу заместителя; и/или (iii) полипептид, где полипептид РТН слит с другим соединением, как например соединение для увеличения периода полувыведения полипептида (например, полиэтилэтенгликоль); и/или (iv) полипептид, в котором дополнительные аминокислоты слиты с полипептидом РТН, как например, пептидная или лидерная или секреторная последовательность области слияния IgG Fc или последовательность, которая используется для очистки вышеуказанной формы полипептида, или последовательность белка-предшественника.

Как применяется в настоящей заявке, термин "фрагмент полипептида РТН" относится к любому пептиду, содержащему последовательный промежуток части аминокислотной последовательности РТН полипептида РТН или PTHrP.

Более конкретно, фрагмент полипептида РТН содержит по меньшей мере 6, как например по меньшей мере 8, по меньшей мере 10 или по меньшей мере 17 последовательных аминокислот РТН или PTHrP полипептида. Фрагмент полипептида РТН может быть дополнительно описан как подвид РТН или PTHrP полипептидов, содержащих по меньшей мере 6 аминокислот, где "по меньшей мере 6" определяется как целое число между 6 и целым числом, обозначающим С-концевую аминокислоту РТН полипептида. Также включены виды фрагментов полипептида РТН или PTHrP. Также включены виды фрагментов полипептида РТН или PTHrP из по меньшей мере 6 аминокислот в длину, как описано выше, которые дополнительно уточнены с точки зрения их N-концевых и С- концевых положений.

Также термином "фрагмент полипептида РТН" охватываются в качестве отдельных видов все фрагменты полипептида РТН или PTHrP из по меньшей мере 6 аминокислот в длину, как описано выше, которые могут быть в частности уточнены их N-концевым и С-концевым положением. То есть, каждая комбинация N-концевого и С-концевого положения, которые фрагмент из по меньшей мере 6 последовательных аминокислотных остатков в длину может занимать, на любой данной аминокислотной последовательности РТН или PTHrP полипептида.

Термин «РТН» также включает поли(аминокислотные) конъюгаты, которые имеют последовательность, как описано выше, но имеют основную цепь, которая включает как амидные, так и неамидные связи, такие как сложноэфирные связи, такие как, например, депсипептиды. Депсипептиды представляют собой цепочки аминокислотных остатков, в которых основная цепь включает как амидные (пептидные), так и сложноэфирные связи. Соответственно, термин «боковая цепь», используемый в настоящем документ, относится либо к фрагменту, присоединенному к альфа-углероду аминокислотного фрагмента, если аминокислотный фрагмент связан посредством аминных связей, таких как в полипептидах, либо к любому содержащему атом углерода фрагменту, присоединенному к основной цепи конъюгата поли(аминокислоты), как, например, в случае депсипептидов.

Согласно определенным вариантам осуществления термин "РТН" относится к полипептидам, имеющим основную цепь, образованную через амидные (пептидные) связи.

Поскольку термин РТН включает вышеописанные варианты, аналоги, ортологи, гомологи, производные и фрагменты РТН и PTHrP, все ссылки на конкретные положения в ссылочной последовательности также включают эквивалентные положения в вариантах, аналогах, ортологах, гомологах, производных и фрагментах фрагмента РТН или PTHrP, даже если не указано иное.

В контексте настоящего изобретения фраза «конъюгат РТН, фрагмент РТН которого», за которой следует количество в мг/мл, означает, что жидкий состав содержит конъюгат РТН, но для соответствующего количества рассматривается только фрагмент РТН вместо полного конъюгата РТН, т.е. фрагменты конъюгата РТН, отличные от фрагмента РТН, такие как растворимый в воде фрагмент-носитель не учитывается. Количество фрагмента РТН в конъюгате РТН может быть определено количественным аминокислотным анализом после полного гидролиза в кислых условиях конъюгата РТН или любыми известными аналитическими методами, которые позволяют количественно оценить неизвестный образец по сравнению с конъюгатом РТН с известным содержанием фрагмента РТН.

Как применяется в настоящей заявке термин "около" в комбинации с числовым значением применяется для указания на диапазон в интервале и включая числовое значение плюс и минус не более 10% от указанного числового значения, более предпочтительно не более 8% от указанного значения, даже более предпочтительно не более 5% от указанного значения и наиболее предпочтительно не более 2% от указанного значения. Например, фраза "около 200" применяется для обозначения диапазона в интервале и включая 200+/-10%, т.е. в интервале и включая 180-220, предпочтительно 200+/-8%, т.е. в интервале и включая 184-216, даже более предпочтительно в интервале и включая 200+/-5%, т.е. в интервале и включая 190-210, и наиболее предпочтительно 200+/-2%, т.е. в интервале и включая 196-204. Понятно, что процент, приведенный как "около 20%" не означает "20%+/-10%", т.е. в интервале и включая 10-30%, но "около 20%" означает в интервале и включая 18-22%, т.е. плюс и минус 10% от числового значения, которое равно 20.

Как используется в настоящем документе, термин «противомикробный» относится к химическому веществу, такому как химическое вещество, которое убивает или подавляет рост микроорганизмов, таких как бактерии, грибы, дрожжи, простейшие, плесень и/или уничтожает вирусы.

Как применяется в настоящем документе, термин «антиадсорбционные агенты» относится в основном к ионным или неионным поверхностно-активным веществам, белкам или растворимым полимерам, используемым для покрытия или конкурентной адсорбции на внутренней поверхности контейнера, содержащего состав. Выбранная концентрация и тип наполнителя зависят от эффекта, которого следует избегать, но обычно монослой поверхностно-активного вещества образуется на границе раздела чуть выше критической концентрации мицеллообразования (CMC).

Как применяется в настоящем документе, термин «буфер» или «буферный агент» относится к химическому соединению, которое поддерживает рН в желаемом диапазоне. К физиологически приемлемым буферам относятся, например, фосфат натрия, сукцинат, гистидин, бикарбонат, цитрат, ацетат, сульфат, нитрат, хлорид и пируват. Также можно использовать антациды, такие как Mg(OH)₂ или ZnCO₃.

Как применяется в настоящем документе, термин "С_1-4алкил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленный или разветвленный алкильный фрагмент, имеющий от 1 до 4 атомов углерода. Если присутствует на конце молекулы, примерами неразветвленного или разветвленного С_1-4 алкила являются метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил. Когда два фрагмента молекулы связаны С_1-4 алкилом, примерами таких С_1-4 алкильных групп являются -СН₂-, -СН₂-СН₂-, -СН(СН₃)-, -СН₂-СН₂-СН₂-, -СН(С₂Н₅)-, -С(СН₃)₂-. Каждый водород С_1-4 алкильного углерода может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, С_1-4 алкил может быть прерван одним или более фрагментами, как определено далее.

Как применяется в настоящем документе, термин "C_1-6 алкил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленный или разветвленный алкильный фрагмент, имеющий от 1 до 4 атомов углерода. Если присутствует на конце молекулы, примерами неразветвленных или разветвленных С_1-6 алкильных групп являются метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, 2-метилбутил, 2,2-диметилпропил, н-гексил, 2-метилпентил, 3-метилпентил, 2,2-диметилбутил, 2,3-диметилпропил. Когда два фрагменты молекулы связаны С_1-6 алкильной группой, примерами таких С_1-6 алкильных групп являются -СН₂-, -СН₂-СН₂-, -СН(СН₃)-, -СН₂-СН₂-СН₂-, -CH(С₂Н₅)- и С(СН₃)₂-. Каждый атом водорода при С_1-6 атоме углерода может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, C_1-6 алкил может быть прерван одним или более фрагментами, как определено далее.

Соответственно, "С_1-10 алкил", "С_1-20 алкил" или "С_1-50 алкил" означает алкильную цепь, имеющую от 1 до 10, от 1 до 20 или от 1 до 50 атомов углерода, соответственно, где каждый атом водорода при С_1-10, С_1-20 или С_1-50 атоме углерода может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, С_1-10 или С_1-50 алкил может быть прерван одним или более фрагментами, как определено далее.

Как применяется в настоящей заявке, термин "С_2-6 алкенил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленный или разветвленный углеводородный фрагмент, содержащий по меньшей мере одну двойную связь углерод-углерод, имеющий от 2 до 6 атомов углерода. Если присутствует на конце молекулы, примерами являются СН=СН₂, -СН=СН-СН₃, -СН₂-СН=СН₂, -СН=СНСН₂-СН₃ и -СН=СН-СН=СН₂. Когда два фрагмента молекулы связаны С_2-6 алкенильной группой, тогда примером такого С_2-6 алкенила является -СН=СН-. Каждый атом водорода С_2-6 алкенильного фрагмента может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, С_2-6 алкенил может быть прерван одним или более фрагментами, как определено далее.

Соответственно, термин "С_2-10 алкенил", "С_2-20 алкенил" или "С_2-50 алкенил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленный или разветвленный углеводородный фрагмент, содержащий по меньшей мере одну двойную связь углерод-углерод, имеющий от 2 до 10, от 2 до 20 или от 2 до 50 атомов углерода. Каждый атом водорода С_2-10 алкенильной, С_2-20 алкенильной или С_2-50 алкенильной группы может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, С_2-10 алкенил, С_2-20 алкенил или С_2-50 алкенил может быть прерван одним или более фрагментами, как определено далее.

Как применяется в настоящей заявке, термин "С_2-6 алкинил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленный или разветвленный углеводородный фрагмент, содержащий по меньшей мере одну тройную связь углерод-углерод, имеющий от 2 до 6 атомов углерода. Если присутствует на конце молекулы, примерами являются -С≡СН, -СН₂-С≡СН, СН₂-СН₂-C≡СН и СН₂-С≡C-СН₃. Когда два фрагмента молекулы связаны алкинильной группой, тогда примером является -С≡С-. Каждый атом водорода С_2-6 алкинильной группы может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, могут присутствовать одна или более двойных связей. Необязательно, С_2-6 алкинил может быть прерван одним или более фрагментами, как определено далее.

Соответственно, как применяется в настоящей заявке, термин "С_2-10 алкинил", "С_2-20 алкинил" и "С_2-50 алкинил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленный или разветвленный углеводородный фрагмент, содержащий по меньшей мере одну тройную связь углерод-углерод, имеющий от 2 до 10, от 2 до 20 или от 2 до 50 атомов углерода, соответственно. Каждый атом водорода С_2-10 алкинильной, С_2-20 алкинильной или С_2-50 алкинильной группы может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, могут присутствовать одна или более двойных связей. Необязательно, С_2-10 алкинил, С_2-20 алкинил или С_2-50 алкинил может быть прерван одним или более фрагментом, как определено далее.

Как упомянуто выше, С_1-4 алкил, C_1-6 алкил, С_1-10 алкил, С_1-20 алкил, С_1-50 алкил, С_2-6 алкенил, С_2-10 алкенил, С_2-20 алкенил, С_2-50 алкенил, С_2-6 алкинил, С_2-10 алкинил, С_2-20 алкенил или С_2-50 алкинил может необязательно быть прерван одним или более фрагментами, которые предпочтительно выбирают из группы, состоящей из

пунктирные линии обозначают присоединение к оставшейся части фрагмента или реагента, и

-R и R^a независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила, бутила, пентила и гексила

Как применяется в настоящей заявке, термин "С_3-10 циклоалкил" означает циклическую алкильную цепь, имеющую от 3 до 10 атомов углерода, которая может быть насыщенной или ненасыщенной, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогексенил, циклогептил, циклооктил, циклононил или циклодецил. Каждый атом водорода С_3-10 циклоалкильного углерода может быть замещен заместителем, как определено выше. Термин "С_3-10 циклоалкил" также включает мостиковые бициклы, такие как норборнан или норборнен.

Термин "8-30-членный карбополициклил" или "8-30-членный карбополицикл" означает циклический фрагмент из двух или более колец с 8-30 кольцевыми атомами, где два соседних кольца разделяют по мере один кольцевой атом, и которая может содержать до максимального числа двойных связей (ароматическое или неароматическое кольцо, которое является полностью насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным). Предпочтительно 8-30-членный карбополициклил означает циклический фрагмент из двух, трех, четырех или пяти колец, более предпочтительно двух, трех или четырех колец.

Как применяется в настоящей заявке, термин "3-10-членный гетероциклил" или "3-10-членный гетероцикл" означает кольцо с 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 кольцевыми атомами, которое может содержать до максимального числа двойных связей (ароматическое или неароматическое кольцо, которое является полностью насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным), где по меньшей мере от одного кольцевого атома до четырех кольцевых атомов замещены гетероатомом, выбранным из группы, состоящей из серы (включая -S(O)-, -S(O)₂-), кислорода и азота (включая =N(O)-), и где кольцо связано с остатком молекулы через атом углерода или азота. Примеры 3-10-членных гетероциклов включают, но без ограничения к этому, азиридин, оксиран, тиран, азирин, оксирен, тиирен, азетидин, оксетан, тиетан, фуран, тиофен, пиррол, пирролин, имидазол, имидазолин, пиразол, пиразолин, оксазол, оксазолин, изоксазол, изоксазолин, тиазол, тиазолин, изотиазол, изотиазолин, тиадиазол, тиадиазолин, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, пирролидин, имидазолидин, пиразолидин, оксазолидин, изоксазолидин, тиазолидин, изотиазолидин, тиадиазолидин, сульфолан, пиран, дигидропиран, тетрагидропиран, имидазолидин, пиридин, пиридазин, пиразин, пиримидин, пиперазин, пиперидин, морфолин, тетразол, триазол, триазолидин, тетразолидин, диазепан, азепин или гомопиперазин. Каждый атом водорода 3-10-членного гетероциклила или 3-10-членной гетероциклической группы может быть замещен заместителем, как определено далее.

Как применяется в настоящей заявке, термин "8-11-членный гетеробициклил" или "8-11-членный гетеробицикл" означает гетероциклический фрагмент из двух колец с 8-11 кольцевыми атомами, где по меньшей мере один кольцевой атом разделен между двумя кольцами, и который содержит до максимального числа двойных связей (ароматическое или неароматическое кольцо, которое является полностью насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным), где по меньшей мере от одного кольцевого атома до шести кольцевых атомов замещены гетероатомом, выбранным из группы, состоящей из серы (включая -S(O)-, -S(O)₂-), кислорода и азота (включая =N(O)-), и где кольцо связано с остатком молекулы через атом углерода или азота. Примерами 8-11-членного гетеробицикла являются индол, индолин, бензофуран, бензотиофен, бензоксазол, бензизоксазол, бензотиазол, бензизотиазол, бензимидазол, бензимидазолин, хинолин, хиназолин, дигидрохиназолин, хинолин, дигидрохинолин, тетрагидрохинолин, декагидрохинолин, изохинолин, декагидроизохинолин, тетрагидроизохинолин, дигидроизохинолин, бензазепин, пурин или птеридин. Термин 8-11-членный гетеробицикл также включает спиро-структуры из двух циклов, такие как 1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]декан или мостиковые гетероциклы, такие как 8-аза-бицикло[3.2.1]октан. Каждый атом водорода 8-11-членного гетеробициклила или 8-11-членного гетеробицикла может быть замещен заместителем, как определено далее.

Подобным образом, термин "8-30-членный гетерополициклил" или "8-30-членный гетерополицикл" означает гетероциклический фрагмент из более чем двух колец с 8-30 кольцевыми атомами, предпочтительно тремя, четырьмя или пятью кольцами, где два соседних кольца разделяют по мере один кольцевой атом, и который может содержать до максимального числа двойных связей (ароматическое или неароматическое кольцо, которое является полностью насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным), где по меньшей мере от одного кольцевого атома до 10 кольцевых атомов замещены гетероатомом, выбранным из группы, состоящей из серы (включая -S(O)-, -S(O)₂-), кислорода и азота (включая =N(O)-), и где кольцо связано с остатком молекулы через атом углерода или азота.

Понятно, что фраза "пара R^x/R^y, соединяется вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием С_3-10 циклоалкила или 3-10-членного гетероциклила" в отношении фрагмента структуры

означает, что Rx и Ry образуют следующую структуру:

где R представляет собой С_3-10 циклоалкил или 3-10-членный гетероциклил.

Также понятно, что фраза “пара R^x/R^y, соединяется вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием кольца А“ в отношении фрагмента структуры

означает, что R^x и R^y образуют следующую структуру:

Термин “лекарственное средство“, как применяется в настоящей заявке, относится к веществу, применяемому для лечения, облегчения, профилактики или диагностике заболевания или, в противном случае, для улучшения физического или умственного здоровья. Если лекарственное средство, такое как РТН, конъюгировано с другим фрагментом, фрагмент полученного продукта, который происходит из РТН, обозначается как “лекарственный фрагмент“.

Как применяется в настоящей заявке, термин “эксципиент“ относится к разбавителю, вспомогательному средству или носителю, совместно с которым вводится терапевтическое средство, как например лекарственное средство или пролекарство. Такой фармацевтический эксципиент может представлять собой стерильную жидкость, такую как вода и масла, включая жидкости нефтяного, животного, растительного или синтетического происхождения, включая, но без ограничения к этому, арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, сезамовое масло и тому подобное. Вода является предпочтительным эксципиентом, когда фармацевтический состав вводится перорально. Соляной раствор и водный раствор декстрозы являются предпочтительными наполнителями, когда фармацевтический состав вводится внутривенно. Соляные растворы и водные растворы декстрозы и глицерина предпочтительно применяются в качестве жидких эксципиентов для инъецируемых растворов. Подходящие фармацевтические эксципиенты включают крахмал, глюкозу, лактозу, сахарозу, маннит, трегалозу, желатин, солод, рис, муку, мел, силикагель, стеарат натрия, глицерин моностеарат, тальк, хлорид натрия, сухое молоко, глицерин, пропиленгликоль, воду, этанол и тому подобное. Состав при желании может содержать также небольшие количества увлажняющих или эмульгирующих средств, рН-буферных средств, таких как, например, ацетат, сукцинат, трис, карбонат, фосфат, HEPES (4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфо кислота, MES (2-(N-морфолин)этансульфокислота) или может содержать детергенты, такие как Tween, полоксамеры, полоксамины, CHAPS, Igepal, или аминокислоты, такие как, например, глицин, лизин или гистидин. Такие фармацевтические составы могут иметь форму растворов, суспензий, эмульсий, таблеток, пилюль, капсул, порошков, препаратов с замедленным высвобождением и тому подобное. Фармацевтический состав может иметь вид суппозитория, с традиционными связующими средствами и эксципиентами, такими как триглицериды. Препарат для перорального введения может содержать стандартные эксципиенты, такие как фармацевтические марки маннита, лактозы, крахмала, стеарата магния, сахарина натрия, целлюлозы, карбоната магния и т.д. Такие составы содержат терапевтически эффективное количество лекарственного средства или биологически активного фрагмента, вместе с подходящим количеством эксципиента, так чтобы получилась форма, подходящая для введения пациенту. Состав должна соответствовать способу введения.

В контексте настоящего изобретения термин “состав“, “фармацевтический состав“, “смесь“ или “композиция“ относится к составу, содержащему один или несколько активных ингредиентов и один или несколько эксципиентов, а также любой продукт, который является прямым или косвенным результатом комбинации, комплексообразования или агрегации любых двух или более из ингредиентов композиции, или диссоциации одного или нескольких ингредиентов, или других типов реакций или взаимодействий одного или нескольких ингредиентов. Соответственно, фармацевтические составы согласно настоящему изобретению охватывают любой состав или композицию, полученную путем смешивания одного или нескольких конъюгатов РТН и фармацевтически приемлемого эксципиента, такого как буферный агент, агент, регулирующий изотоничность, консервант и необязательно антиоксидант.

Как применяется в настоящей заявке, термин “свободная форма“ лекарственного средства означает лекарственное средство в его немодифицированной, фармакологически активной форме, например, после высвобождения из конъюгата.

Как применяется в настоящей заявке, термин “функциональная группа“ означает группу атомов, которая может реагировать с другими группами атомов. Функциональные группы включают, но без ограничения к этому, следующие группы: карбоновая кислота (-(С=O)ОН), первичный и вторичный амин (-NH₂, -NH-), малеимид, тиол (-SH), сульфоновая кислота (-(O=S=O)OH), карбонат, карбамат (-O(C=O)N<), гидроксил (-ОН), альдегид (-(ОО)Н), кетон (-(С=O)-), гидразин (>N-N<), изоцианат, изотиоцианат, фосфорная кислота (-O(Р=O)ОНОН), фосфоновая кислота (O(Р=O)ОНН), галоацетил, алкилгалогенид, акрилоил, арилфторид, гидроксиламин, дисульфид, сульфонамиды, серная кислота, винилсульфон, винилкетон, диазоалкан, оксиран и азиридин.

Как применяется в настоящей заявке, “галоген“ означает фтор, хлор, бром или иод. В общем предпочтительно, что галогеном является фтор или хлор.

Как применяется в настоящем документе, термин “прерванный“ означает, что фрагмент вставлен между двумя атомами углерода или - если вставка находится на одном из концов фрагмента - между углеродом или гетероатомом и атомом водорода, Согласно определенным вариантам осуществления между атомом углерода и атомом водорода.

Как применяется в настоящем документе, термин “ингибитор (ингибиторы) иммунных контрольных точек“ относится к соединениям, которые препятствуют функции или ингибируют связывание лигандов, которые индуцируют передачу сигналов через рецепторы, экспрессируемые клеточной мембраной, что ингибирует функцию воспалительных иммунных клеток при активации рецептора. Такие соединения могут быть, например, биопрепаратами, такими как антитела, нанотела, протела, антикалины или циклические пептиды, или ингибиторы малые молекулы.

Как применяется в настоящем документе, термин “агент, регулирующий изотоничность“ относится к соединению, которое сводит к минимуму боль, раздражение и повреждение тканей, которые могут возникнуть в результате повреждения клеток из-за разницы осмотического давления между вводимым раствором и плазмой.

Как применяется в настоящем документе, термин “жидкий фармацевтический состав“ относится к смеси, содержащей растворимый в воде конъюгат PTH и один или несколько растворителей, таких как вода.

Как применяется в настоящем документе, термин “сухой фармацевтический состав“ означает, что фармацевтический состав предоставляется в сухой форме. Подходящими методами сушки являются распылительная сушка и лиофилизация, то есть сублимационная сушка. Такие сухие фармацевтические составы, содержащие конъюгаты РТН, имеют остаточное содержание воды максимум 10%, согласно определенному варианту осуществления менее 5% и согласно определенному варианту осуществления менее 2%, как определено с помощью метода Карла Фишера. Согласно определенному варианту осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению высушен посредством лиофилизации.

Как применяется в настоящей заявке, термин “фрагмент“ означает часть молекулы, в которой отсутствует один или более атомов по сравнению с соответствующим реагентов. Если, например, реагент формулы “Н-Х-Н“ реагирует с другим реагентом и становится частью продукта реакции, соответствующая составляющая продукта реакции имеет структуру “Н-Х-“ или “Х-”, где каждый ”-“ обозначает присоединение к другой составляющей. Соответственно, лекарственный фрагмент, такой как фрагмент РТН, высвобождается из конъюгата в качестве лекарственного средства, такого как РТН.

Понятно, что если обеспечивается последовательность или химическая структура группы атомов, где группа атомов присоединяется к двум фрагментам или прерывает составляющую, указанная последовательность или структура может быть присоединена к двум фрагментам в любой ориентации, если иного не указано. Например, составляющая “-C(O)N(R¹)-“ может быть присоединена к двум фрагментам или прерывать фрагмент либо как “-C(O)N(R¹)-“, либо как “-N(R¹)C(O)-“. Подобным образом, фрагмент:

может быть присоединена к двум фрагментам или может прерывать фрагмент либо как

, либо как

В случае, если фрагмент РТН содержит содержат одну или более кислотных или основных групп, настоящее изобретение также включает их соответствующие фармацевтически или токсикологически приемлемые соли, в частности их фармацевтически применимые соли. Таким образом, фрагменты РТН, содержащие кислотные группы, могут присутствовать и использоваться, в виде солей щелочных металлов, солей щелочноземельных металлов или солей аммония. Более точные примеры таких солей включают соли натрия, соли калия, соли кальция, соли магния или соли с аммиаком или органическими аминами, как например, этиламин, этаноламин, триэтаноламин, аминокислоты и другие соли или амины, известные специалистам в данной области техники. Фрагменты РТН, содержащие одну или более основных групп, т.е. групп, которые могут быть протонированы, могут присутствовать и использоваться согласно настоящему изобретению в форме их аддитивных солей с неорганическими или органическими кислотами. Примеры подходящих кислот включают хлорид водорода, бромид водорода, фосфорную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, метансульфокислоту, п-толуолсульфокислоту, нафталинсульфокислоту, щавелевую кислоту, уксусную кислоту, винную кислоту, молочную кислоту, салициловую кислоту, бензойную кислоту, муравьиную кислоту, пропионовую кислоту, пивалоиловую кислоту, диэтилуксусную кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, пимелиновую кислоту, фумаровую кислоту, малеиновую кислоту, яблочную кислоту, сульфаминовую кислоту, фенилпропионовую кислоту, глюконовую кислоту, аскорбиновую кислоту, изо никотиновую кислоту, лимонную кислоту, адипиновую кислоту и другие кислоты, известные специалистам в данной области техники. Специалистам в данной области техники известно превращение основной группы в катион, такие как алкилирование аминной группы с получением положительно заряженной аммониевой группы и соответствующего противоиона соли. Если фрагменты РТН одновременно содержат кислотные и основные группы, настоящее изобретение также включает, помимо упомянутых солевых форм, внутренние соли или бетаины (цвиттерионы). Соответствующие соли могут быть получены обычными методами, которые известны специалисту в данной области, например, контактированием этих пролекарств с органической или неорганической кислотой или основанием в растворителе или диспергаторе, или путем анионного или катионного обмена с другими солями. Составы согласно настоящему изобретению также включают все соли конъюгатов РТН, которые из-за низкой физиологической совместимости не подходят непосредственно для использования в фармацевтических препаратах, но могут использоваться, например, в качестве промежуточных продуктов для химических реакций или для получения фармацевтически приемлемых солей.

Как применяется в настоящем документе, термин “антиоксидант“ или “агент для защиты от окисления“ относится к соединению, которое подавляет окисление других соединений, таких как пептиды.

Как применяется в настоящем документе, термин “рН-регулирующий агент“ относится к химическому соединению, которое используется для регулирования рН жидкого раствора или состава.

Как применяется в настоящем документе, термин “фармацевтически приемлемый“ означает вещество, которое не причиняет вреда при введении пациенту и, конечно, означает одобренное регулирующим органом, таким как ЕМА (Европа) и/или FDA (США) и/или любое другое национальное регулирующее агентство, для использования у животных, предпочтительно для людей.

Как применяется в настоящем документе, термин “физиологические условия“ относятся к водному буферу при рН 7,4 и 37°С.

Термин “полипептид“, как он использован в настоящем документе, относится к цепи из по меньшей мере 2 и до, и включающей, 50 аминокислотных мономерных фрагментов, связанных пептидными (амидными) связями. Только для лекарственных средств РТН и фрагментов РТН также последовательности, содержащие более 50 аминокислот, для упрощения будут называться “полипептидами“.

Как применяется в настоящем документе, термин “белок“ относится к цепи из более 50 аминокислотных мономерных фрагментов, связанных пептидными связями, в которой обычно не более 12000 аминокислотных мономеров связаны пептидными связями, например, не более 10000 аминокислотных мономерных фрагментов, не более 8000 аминокислотных мономерных фрагментов, не более 5000 аминокислотных мономерных фрагментов или не более 2000 аминокислотных мономерных фрагментов.

Как применяется в настоящей заявке, термин “консервант“ относится к химическому соединению, которое обладает как микробиостатическими, так и микробиоцидными свойствами, убивая микроорганизмы, такие как бактерии, и предотвращая рост таких микроорганизмов.

Как применяется в настоящей заявке, термин “полимер“ означает молекулу, содержащую повторяющиеся структурные единицы, т.е. мономеры, связанные химическими связями линейным, кольцевым, разветвленным, сшитым или дендримерным образом или их комбинацией, которая может быть синтетического или биологического происхождения или комбинацией обоих. Понятно, что полимер может также содержать одну или более других химических групп и/или составляющих, таких как, например, одна или более функциональные группы. Предпочтительно, растворимый полимер имеет молекулярную массу, равную по меньшей мере 0.5 кДа, например, молекулярную массу, равную по меньшей мере 1 кДа, молекулярную массу, равную по меньшей мере 2 кДа, молекулярную массу, равную по меньшей мере 3 кДа, или молекулярную массу, равную по меньшей мере 5 кДа. Если полимер является растворимым, он предпочтительно имеет молекулярную массу, равную самое большее 1000 кДа, как например самое большее 750 кДа, как например самое большее 500 кДа, как например самое большее 300 кДа, как например самое большее 200 кДа, как например самое большее 100 кДа.

Понятно, что белок или полипептид также представляет собой полимер, в котором аминокислоты являются повторяющимися структурными единицами, даже если боковые цепи каждой аминокислоты могут быть разными.

Как применяется в настоящем документе, термин “полимерный“ или “полимерный фрагмент“ означает реагент или фрагмент, содержащий один или несколько полимеров или полимерных фрагментов. Полимерный реагент или фрагмент может необязательно также содержать один или несколько других фрагментов, которые Согласно определенным вариантам осуществления выбраны из группы, состоящей из:

• C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила, С_2-50 алкинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, фенила, нафтила, инденила, инданила и тетралинила, и

• связей, выбранных из группы, содержащей

где

пунктирные линии обозначают присоединение к оставшейся части составляющей или реагента, и

-R и R^a независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила, бутила, пентила и гексила.

Специалист в данной области понимает, что продукты полимеризации, полученные из реакции полимеризации, не все имеют одинаковую молекулярную массу, а скорее имеют молекулярно-массовое распределение. Следовательно, диапазоны молекулярных масс, молекулярные массы, диапазоны количества мономеров в полимере и количества мономеров в полимере, как применяется в настоящей заявке, относятся к сред не числовой молекулярной массе и среднему числу мономеров, т.е. к среднему арифметическому молекулярной массы полимера или полимерного фрагмента и среднему арифметическому числа мономеров полимера или полимерного фрагмента.

Соответственно, в полимерном фрагменте, содержащем “x“ мономерных единиц, любое целое число, приведенное для “x“, поэтому соответствует арифметическому среднему числу мономеров. Любой диапазон целых чисел, приведенный для “х“, обеспечивает диапазон целых чисел, в котором лежит арифметическое среднее число мономеров. Целое число для “х“, приведенное как “около х“, означает, что арифметические средние числа мономеров лежат в диапазоне целых чисел х +/- 10%, предпочтительно х +/- 8%, Согласно определенным вариантам осуществления лежат в диапазоне целых чисел х +/- 5% и Согласно определенным вариантам осуществления лежат в диапазоне целых чисел х +/- 2%.

Как применяется в настоящем документе, термин “на основе ПЭГ' в отношении фрагмента или реагента означает, что указанный фрагмент или реагент содержит ПЭГ. Согласно определенным вариантам осуществления ф или реагент на основе ПЭГ содержит по меньшей мере 10% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 20% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 30% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 40% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 50% (мас./мас.), как например по меньшей мере 60% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 70% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 80% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 90% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 95% (мас/мас.) ПЭГ. Оставшийся массовый процент фрагмента или реагента на основе ПЭГ представляет собой другие фрагменты, выбранные из следующих фрагментов и связей

• алкила, С_1-50 алкенила, С_2-50 алкинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетер о бицик лила, фенила, нафтила, инденила, ннданила и тетралинила, и

• связей выбранных из группы, содержащей

где

Как применяется в настоящей заявке, термин “на основе ПЭГ, содержащий по меньшей мере Х% ПЭГ“ в отношении фрагмента или реагента означает, что указанная фрагмент или реагент содержит по меньшей мере Х% (мас./мас.) единиц этиленгликоля (-СН₂СН₂О-), где единицы этиленгликоля могут быть расположены блочным, чередующимся образом или могут быть расположены случайным образом в составляющей или реагента, и предпочтительно все единицы этиленгликоля указанной составляющей или реагента присутствуют в одном блоке, оставшиеся массовые проценты фрагмента или реагента на основе ПЭГ составляют другие фрагменты, предпочтительно выбранные из следующих составляющих и связей:

• С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила, С_2-50 алкинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетфобиггиклила, фенила, нафтила, инденила, инданила и тетралинила, и

• связей, выбранных из группы, содержащей

где

Термин «на основе гиалуроновой кислоты», «содержащая по меньшей мере Х% гиалуроновая кислота» применяется соответствующим образом.

Специалистам в данной области техники также известно, что конъюгаты согласно настоящему изобретению являются пролекарствами. Используемый в настоящем документе термин «пролекарство» относится к фрагменту лекарственного средства, например фрагменту РТН, обратимо и ковалентно конъюгированному с растворимым в воде носителем, таким как -Z, через обратимый линкерный фрагмент. Пролекарство высвобождает обратимо и ковалентно связанный фрагмент лекарственного средства в форме соответствующего лекарственного средства. Другими словами, пролекарство представляет собой конъюгат, содержащий фрагмент лекарственного средства, такой как фрагмент РТН, который ковалентно и обратимо конъюгирован с растворимым в воде носителем через обратимый линкерный фрагмент, и при этом конъюгирование носителя с обратимым линкерным фрагментом осуществляется либо напрямую, либо через спейсер. Такие пролекарства или конъюгаты высвобождают ранее конъюгированный фрагмент лекарственного средства в форме свободного лекарственного средства.

Как применяется в настоящей заявке, термин “случайная спираль“ относится к пептиду или белку, принимающему/имеющему/образующему, Согласно определенным вариантам осуществления имеющему конформацию, которая по существу не имеет определенной вторичной и третичной структуры, как определено с помощью спектроскопии кругового дихроизма, проводимой в водном буфере при температуре окружающей среды, и рН 7,4. Согласно определенным вариантам осуществления, температура окружающей среды составляет около 20°С, т.е. между 18°С и 22°С, наиболее высокой температурой окружающей среды является 20°С.

Как применяется в настоящем документе, термин “обратимая связь“ означает связь, которая является расщепляемой, в отсутствии ферментов при физиологических условиях (водный буфер при рН 7.4, 37°С) с периодом полувыведения в интервале от одного часа до шести месяцев, предпочтительно от одного часа до четырех месяцев, даже более предпочтительно от одного часа до трех месяцев, даже более предпочтительно от одного часа до двух месяцев, даже более предпочтительно от одного часа до одного месяца. Соответственно, стабильная связь представляет собой связь, имеющую период полувыведения при физиологических условиях (водный буфер при рН 7.4, 37°С), равный более чем шести месяцам.

Как применяется в настоящем документе, термин “обратимый линкерный фрагмент“ представляет собой фрагмент, который ковалентно конъюгирован с фрагментом лекарственного средства, такой как фрагмент РТН, через обратимую связь и также ковалентно конъюгирован с растворимым в воде носителем, таким как -Z, где ковалентная конъюгация с указанным носителем является либо прямой, либо через спейсерный фрагмент, такой как -L₂-. Согласно определенным вариантам осуществления связью между -Z и -L²- является стабильная связь.

Как применяется в настоящем документе, термин «реагент» означает химическое соединение, которое содержит по меньшей мере одну функциональную группу для реакции с функциональной группой другого химического соединения или лекарственного средства. Понятно, что лекарственное средство, содержащее функциональную группу (такую как первичный или вторичный амин или гидроксильная функциональная группа), также представляет собой реагент.

Как применяется в настоящем документе, термин “спейсер“ или “спейсерный фрагмент“ относится к фрагменту, подходящему для соединения двух фрагментов. Подходящие спейсеры могут быть выбраны из группы, состоящей из C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила или С_2-50 алкинила, где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил или С_2-50 алкинил необязательно прерывается одной или более группами, выбранными из -NH-, -N(C_1-4 алкила)-, -О-, -S-, -С(О)-, -C(O)NH-, -C(O)N(C_1-4алкила)-, -О-С(О)-, -S(O)-, -S(O)₂-, 4- 7-членного гетероциклила, фенила и нафтила.

Как применяется в настоящем документе, термин «замещенный» означает, что один или несколько атомов Н молекулы или фрагмента заменены другим атомом или группой атомов, которые упоминаются как «заместитель».

Согласно определенным вариантам осуществления такой один или несколько заместителей независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила, где -T⁰, C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)-, и -OC(O)N(R^x3)-,

-R^x1, -R^x1a, -R^x1b независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т⁰, С_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила, где -Т⁰, C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)-, и -OC(O)N(R^x3)-,

каждый T⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила и 8-11-членного гетеробициклила, где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или несколькими -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, каждый -R^x2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(C-)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b), -OC(O)N(R^x4R^x4a) и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R^x3, -R^x3a, -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и С_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Согласно определенным вариантам осуществления один или несколько заместителей независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где -Т⁰, С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)-, и -OC(O)N(R^x3)-,

каждый -R^x1, -R^x1a, -R^x1b, -R^x3, -R^x3a независимо выбран из группы, состоящей из -Н, галогена, C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и С_2-6 алкинила,

каждый Т⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила и 8-11-членного гетеробициклила, где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или несколькими -R^x2, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R^x2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b), -OC(O)N(R^x4R^x4a) и С_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбран из группы, состоящей из -Н, галогена, С_1-6 алкила, C_2-6 алкенила и С_2-6 алкинила,

Согласно определенным вариантам осуществления один или несколько заместителей независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, C_1-6 алкила, С_2-6алкенила и С_2-6 алкинила, где -Т⁰, С_1-6 алкил, С_2-6 алкенил и С_2-6 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-6 алкил, С_2-6 алкенил и С_2-6 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)-, и -OC(O)N(R^x3)-,

каждый -R^x1, -R^x1a, -R^x1b, -R^x2, -R^x3, -R^x3a независимо выбран из группы, состоящей из -Н, галогена, C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и C_2-6 алкинила,

каждый Т⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила и 8-11-членного гетеробициклила, где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или несколькими -R^x2, которые являются одинаковыми или различными.

Согласно определенным вариантам осуществления максимум 6 -Н атомов необязательно замещенной молекулы независимо замещены заместителем, например, 5 -Н атомов независимо замещены заместителем, 4 -Н атома независимо замещены заместителем, 3 -Н атома независимо замещены заместителем, 2 -Н атома независимо замещены заместителем, или 1 -Н атом замещен заместителем.

Как применяется в настоящем документе, термины “стабильный“ и “стабильность“ применительно к фармацевтическому составу означают, что по истечении срока хранения, например, через один месяц, два месяца, четыре месяца, шесть месяцев, восемь месяцев, двенадцать месяцев, восемнадцать месяцев, двадцать четыре месяца, тридцать шесть месяцев, сорок восемь месяцев, шестьдесят месяцев, в частности, после указанного времени хранения фармацевтический состав содержит менее 5% лекарственного средства в его свободной форме и менее 20%, например менее 10% или, как например, менее 5% примесей, таких как примеси, возникшие в результате изомеризации аспарагиновой кислоты или аспартата, окисления метионина и агрегации пептида. Примеси могут быть количественно определены с помощью RP-HPLC или SEC на основании их соответствующей площади пика относительно общей площади пиков всех связанных с конъюгатом РТН пиков на хроматограммах, и примеси в фрагменте РТН конъюгата РТН могут быть определены после высвобождения фрагмента РТН из конъюгата РТН.

Как применяется в настоящем документе, термин “стабилизатор“ относится к соединениям, используемым для стабилизации конъюгата лекарственного средства. Стабилизация может быть достигнута посредством усиления пептид-стабилизирующих сил или путем прямого связывания эксципиентов с конъюгатом лекарственного средства.

Как применяется в настоящем документе, термин “поверхностно-активное вещество“ относится к смачивающим агентам, которые снижают поверхностное натяжение жидкости.

Как применяется в настоящем документе, термин “герметизация контейнера“ означает, что контейнер представляет собой закрытый таким образом, что он является воздухонепроницаемым, не допускающим газообмена между внешней и внутренней частью и сохраняющим содержимое стерильным.

Как применяется в настоящем документе, термин «терапевтически эффективное количество» означает количество, достаточное для лечения, облегчения или частичной остановки клинических проявлений данного заболевания и его осложнений. Эффективное количество для каждой цели будет зависеть от тяжести заболевания или травмы, а также от веса и общего состояния пациента. Следует понимать, что определение подходящей дозировки может быть достигнуто с использованием рутинных экспериментов, путем построения матрицы значений и тестирования различных точек в матрице, что находится в пределах обычных навыков квалифицированного врача. В контексте настоящего изобретения терапевтически эффективное количество относится к дозам, которые направлены на достижение терапевтического эффекта в течение длительного периода времени, то есть по меньшей мере в течение одного дня, как например в течение двух дней, как например в течение трех дней, как например в течение четырех дней, как например в течение пяти дней, как например в течение шести дней, как например в течение одной недели или как например в течение двух недель.

Как применяется в настоящем документе, термин «бесследный линкер» означает обратимый линкер, который при расщеплении высвобождает лекарственное средство в его свободной форме.

Как применяется в настоящем документе, термин «стандартная доза» означает количество лекарственного средства, вводимое пациенту при однократной дозе.

Как применяется в настоящем документе, термин “растворимый в воде“, относящийся к растворимому в воде носителю, означает, что когда такой носитель является частью конъюгата РТН, по меньшей мере 1 г конъюгата РТН, содержащего такой растворимый в воде носитель, может раствориться в одном литре воды при 20°С с образованием гомогенного раствора.

В общем, термин “содержит“ или “содержащий“ также охватывает “состоит из“ или “состоящий из“.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент РТН конъюгата РТН имеет последовательность SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:51, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:107, SEQ ID NO:108, SEQ ID NO:109, SEQ ID NO:110, SEQ ID NO:111, SEQ ID NO: 112, SEQ ID NO:113, SEQ ID NO:114 или SEQ ID NO:115. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент РТН имеет последовательность SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:51, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:110, SEQ ID NO:111 или SEQ ID NO: 112. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент РТН имеет последовательность SEQ ID NO:50. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент РТН имеет последовательность SEQ ID NO: 52. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент РТН имеет последовательность SEQ ID NO:110. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент РТН имеет последовательность SEQ ID NO: 111. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент РТН имеет последовательность SEQ ID NO: 112. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент РТН имеет последовательность SEQ ID NO:51.

Согласно определенным вариантам осуществления растворимый в воде фрагмент-носитель определяется как переменная -Z, которая описана более подробно в других частях настоящего документ.

Жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит буферный агент. Примерные буферные агенты могут быть выбраны из группы, состоящей из янтарной кислоты, лимонной кислоты, молочной кислоты, уксусной кислоты, глутаминовой кислоты, фумаровой кислоты, аспарагиновой кислоты, глутаровой кислоты, фосфорной кислоты, гистидина, глюконовой кислоты, винной кислоты, яблочной кислоты и их смесей. Специалисту в данной области техники ясно, что соответствующие конъюгированные основания или соли буферных агентов, как например сукцинат, цитрат, лактат, ацетат, глутамат, фумарат, аспартат, глутарат, фосфат, глюконат, тартрат, малат и их смеси, соответственно, также могут быть включены.

Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является янтарная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является лимонная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является молочная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является уксусная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является глутаминовая кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является фумаровая кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является аспарагиновая кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является глутаровая кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является фосфорная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является гистидин. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является глюконовая кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является винная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является яблочная кислота.

Согласно определенным вариантам осуществления буферный агент имеет концентрацию в интервале от 0.25 до 24 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления буферный агент имеет концентрацию в интервале от 0.6 до 6.0 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления буферный агент имеет концентрацию в интервале от 1.0 до 1.4 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления буферный агент имеет концентрацию около 1.18 мг/мл.

Для поддержания определенного значения рН или диапазона рН жидкий фармацевтический состав содержит буферный агент. Буферный агент поддерживает значение рН жидкого фармацевтического состава в желаемом диапазоне. Согласно определенному варианту осуществления значение рН жидкого фармацевтического состава не выше 6, поскольку в основных условиях обратимая связь внутри конъюгата РТН может быть нестабильной.

Согласно определенным вариантам осуществления значение рН жидкого фармацевтического состава составляет от около рН 3.0 до около рН 6.0. Согласно определенным вариантам осуществления значение рН жидкого фармацевтического состава составляет от около рН 3.5 до около рН 5.0. Согласно определенным вариантам осуществления значение рН жидкого фармацевтического состава составляет от около рН 3.7 до около рН 4.3. Согласно определенным вариантам осуществления значение рН жидкого фармацевтического состава составляет 4.0.

Жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит агент, регулирующий изотоничность. Агент, регулирующий изотоничность, может быть выбран из группы, состоящей из: маннит, трегалоза, сахароза, раффиноза, желатин, лактоза, двухосновный фосфат кальция, сорбит, ксилит, глицин, гистидин, этанол, гидроксиэтилкрахмал, хлорид калия, хлорид натрия, декстроза, декстран, Ficoll^®, пропиленгликоль и их смеси.

Согласно определенным вариантам осуществления агент, регулирующий изотоничность, выбран из группы, состоящей из: маннит, трегалоза, сахароза, раффиноза, желатин, лактоза, двухосновный фосфат кальция, сорбит, ксилит, глицин, гистидин, этанол, гидроксиэтилкрахмал, хлорид калия, хлорид натрия, декстроза, декстран, пропиленгликоль и их смеси.

Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является маннит. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является трегалоза. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является сахароза. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является раффиноза. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является желатин. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является лактоза. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является двухосновный фосфат кальция. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является сорбит. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является ксилит. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является глицин. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является гистидин. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является этанол. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является гидроксиэтилкрахмал. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является хлорид калия. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является хлорид натрия. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является декстроза. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является декстран. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является Ficoll. Согласно определенным вариантам осуществления агентом, регулирующим изотоничность, является пропиленгликоль.

Как определено в настоящем документе, термин «трегалоза» предназначен для охвата всех состояний солей и гидратации трегалозы, таких как трегалоза безводная или дигидрат трегалозы. Согласно определенным вариантам осуществления термин «трегалоза» относится к безводной трегалозе. Согласно определенным вариантам осуществления термин «трегалоза» относится к дигидрат трегалозы.

Как определено в настоящем документе, термин маннит“ охватывает как D-маннит, так и L-маннит, и их смеси. Согласно определенным вариантам осуществления термин “маннит“ относится к L-манниту. Согласно определенным вариантам осуществления термин “маннит“ относится к D-манниту. Согласно определенным вариантам осуществления термин “маннит“ относится к смеси L-маннита и D-маннита.

Согласно определенным вариантам осуществления агент, регулирующий изотоничность, имеет концентрацию в интервале от 10 до 200 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления агент, регулирующий изотоничность, имеет концентрацию в интервале от 30 до 60 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления агент, регулирующий изотоничность, имеет концентрацию в интервале от 36 до 48 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления агент, регулирующий изотоничность, имеет концентрацию около 41.7 мг/мл.

Жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит консервант. Консервант может быть выбран из группы, состоящей из м-крезол, бензиловый спирт, бензойная кислота, фенол, метилпарабен, этилпарабен, пропилпарабен, бутилпарабен, сорбат калия, хлорбутанол, бензиловый спирт, нитрат фенилртути, тимеросал, сорбиновая кислота, сорбат калия, хлоркрезол, бензалкония хлорид, 2-этоксиэтанол, хлоргексидин, хлорбутанол, фенилэтиловый спирт, ацетат фенилртути и их смеси.

Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является м-крезол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является бензиловый спирт. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является бензойная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является фенол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является метилпарабен. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является этилпарабен. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является пропилпарабен. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является бутилпарабен. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является сорбат калия. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является хлоркрезол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является бензиловый спирт. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является нитрат фенилртути. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является тимеросал. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является сорбиновая кислота. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является сорбат калия. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является хлоркрезол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является бензалкония хлорид. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является 2-этоксиэтанол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является хлоргексидин. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является хлорбутанол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является фенилэтиловый спирт. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является ацетат фенилртути.

Согласно определенным вариантам осуществления консервант имеет концентрацию в интервале от 1 до 10 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления консервант имеет концентрацию в интервале от 1.5 о 3.5 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления консервант имеет концентрацию в интервале от 2 до 3 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления консервант имеет концентрацию около 2.5 мг/мл.

Жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может дополнительно содержать рН-регулирующий агент. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующий агент представляет собой кислоту. Примеры кислот могут быть выбраны из группы, состоящей из: соляная кислота, фосфорная кислота, угольная кислота, азотная кислота и их смеси.

Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является соляная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является фосфорная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является угольная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является азотная кислота.

Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является основания. Примеры оснований могут быть выбран из группы, состоящей из Трис (трис(гидроксиметил)аминометан), гидроксид калия, лизин, гидроксид натрия и их смеси.

Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является Трис.Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является гидроксид калия. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является лизин. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является гидроксид натрия.

Согласно определенным вариантам осуществления, рН-регулирующим агентом является смесь по меньшей мере одного основания и по меньшей мере одной кислоты. Согласно определенным вариантам осуществления, рН-регулирующим агентом является смесь одного основания и одной кислоты. Согласно определенным вариантам осуществления, рН-регулирующим агентом является смесь гидроксида натрия и соляной кислоты.

Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующий агент или смесь рН-регулирующих агентов имеет концентрацию в интервале от 0.01 до 5 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующий агент или смесь рН-регулирующих агентов имеет концентрацию в интервале от 0.04 до 2.5 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующий агент или смесь рН-регулирующих агентов имеет концентрацию в интервале от 0.08 до 1.25 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующий агент или смесь рН-регулирующих агентов имеет концентрацию около 0.13 мг/мл. Подразумевается, что в случае смеси рН-регулирующих агентов указанные концентрации относятся к общей концентрации всех рН-регулирующих агентов.

Жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению необязательно содержит антиоксидант. Примеры антиоксидантов могут быть выбран из группы, состоящей из: метионин, бутилгидрокситолуол, бутилгидроксианизол, токоферол, пропилгаллат, аскорбиновая кислота, бисульфит натрия, этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA), цистеин, глутатион, монотиоглицерин, поли(этиленимин), витамин Е, эктоин, морин и их смеси.

Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является метионин. Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является аскорбиновая кислота. Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является бутилгидрокситолуол. Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является бутилгидроксианизол. Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является токоферол. Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является пропилгаллат. Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является бисульфит натрия. Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является монотиоглицерин. Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является EDTA. Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является цистеин. Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является глутатион. Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является поли(этиленимин). Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является витамин Е. Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является эктоин. Согласно определенным вариантам осуществления антиоксидантом является морин.

Как определено в настоящем документе, термин «метионин» охватывает как D-метионин, так и L-метионин и их смеси. Согласно определенному варианту осуществления термин «метионин» относится к L-метионину. Согласно определенному варианту осуществления термин «метионин» относится к D-метионину. Согласно определенному варианту осуществления термин «метионин» относится к смеси D-метионина или L-метионин. Согласно определенному варианту осуществления термин «метионин» относится к гидрохлоридной соли L-метионина.

Как определено в настоящем документе, термин «EDTA» предназначен для охвата всех форм EDTA, которые известны в данной области техники, например, соли EDTA, включая соли металлов EDTA, например, динатриевая соль EDTA, дикалиевая соль EDTA, кальциевая соль EDTA, димагниевая соль EDTA или их смеси. Согласно определенному варианту осуществления EDTA относится к динатриевой соли EDTA. Согласно определенному варианту осуществления термин «EDTA» относится к дикальциевой соли EDTA. Согласно определенному варианту осуществления термин «EDTA» относится к безводному EDTA.

Согласно определенным вариантам осуществления молярное соотношение антиоксиданта и фрагмента РТН составляет от около 0.1:1 до около 100:1. Согласно определенным вариантам осуществления молярное соотношение антиоксиданта и фрагмента РТН составляет от около 0.1:1 до около 70:1. Согласно определенным вариантам осуществления молярное соотношение антиоксиданта и фрагмента РТН составляет от около 0.1:1 до около 15:1. Согласно определенным вариантам осуществления молярное соотношение антиоксиданта и фрагмента РТН составляет от около 1:1 до около 10:1. Согласно определенным вариантам осуществления молярное соотношение антиоксиданта и фрагмента РТН составляет от около 3:1 до около 7:1.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению не содержит антиоксидант.

Жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит конъюгат РТН.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав содержит конъюгат РТН, фрагмент РТН которого присутствует при концентрации от 0.05 до 5.0 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав содержит конъюгат РТН, фрагмент РТН которого присутствует при концентрации от 0.1 до 5.0 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав содержит конъюгат РТН, фрагмент РТН которого присутствует при концентрации от 0.1 до 1.5 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав содержит конъюгат РТН, фрагмент РТН которого присутствует при концентрации от 0.25 до 0.35 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав содержит конъюгат РТН, фрагмент РТН которого присутствует при концентрации около 0.3 мг/мл. Понятно, что указанные выше концентрации относятся к количеству фрагмента РТН, но не ко всему конъюгату РТН.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат РТН имеет формулу (Ia) или (Ib)

где

-D представляет собой фрагмент РТН,

-L¹- представляет собой обратимый линкерный фрагмент, соединенный с фрагментом РТН -D через функциональную группу РТН,

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсерный фрагмент,

-Z представляет собой растворимый в воде фрагмент-носитель,

х представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 и 16, и

у представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4 и 5.

Согласно определенным вариантам осуществления -D ковалентно и обратимо соединен с -L¹-.

Согласно определенным вариантам осуществления х формулы (Ia) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 6 и 8. Согласно определенным вариантам осуществления х формулы (Ia) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 4, и 6. Согласно определенным вариантам осуществления х формулы (Ia) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 4 и 6. Согласно определенным вариантам осуществления х формулы (Ia) представляет собой 1.

Согласно определенным вариантам осуществления у формулы (Ib) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 2, 3, 4 и 5. Согласно определенным вариантам осуществления у формулы (Ib) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 2, 3, и 4. Согласно определенным вариантам осуществления у формулы (Ib) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 2 и 3.

Согласно определенным вариантам осуществления у формулы (Ib) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2 и 3. Согласно определенным вариантам осуществления у формулы (Ib) представляет собой 1. Согласно определенным вариантам осуществления у формулы (Ib) представляет собой 2.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат РТН имеет формулу (Ia) c x=1.

Согласно определенным вариантам осуществления -D имеет последовательность SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:51, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:107, SEQ ID NO:108, SEQ ID NO:109, SEQ ID NO:110, SEQ ID NO:111, SEQ ID NO: 112, SEQ ID NO: 113, SEQ ID NO:114 или SEQ ID NO:115.

Согласно определенным вариантам осуществления -D имеет последовательность SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:51, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:110, SEQ ID NO:111 или SEQ ID NO: 112.

Согласно определенным вариантам осуществления -D имеет последовательность SEQ ID NO:50. Согласно определенным вариантам осуществления -D имеет последовательность SEQ ID NO: 52. Согласно определенным вариантам осуществления -D имеет последовательность SEQ ID NO:110. Согласно определенным вариантам осуществления -D имеет последовательность SEQ ID NO: 111. Согласно определенным вариантам осуществления -D имеет последовательность SEQ ID NO: 112. Согласно определенным вариантам осуществления -D имеет последовательность SEQ ID NO:51.

Фрагмент -L¹- конъюгирован либо с функциональной группой боковой цепи аминокислотного остатка -D, либо с N-концевой аминной функциональной группой, либо с С-концевой карбоксильной функциональной группой -D, либо с атомом азота в основной полипептидной цепи -D. Присоединение к N-концу или С-концу может происходить либо непосредственно через соответствующую аминую или карбоксильную функциональную группу, соответственно, либо ненапрямую, когда спейсерный фрагмент сначала конъюгирован с аминной или карбоксильной функциональной группой, с которой спейсерный фрагмент -L¹-конъюгирован.

Согласно определенным вариантам осуществления остаток аминокислоты РТН, с которой -L¹- конъюгирован, содержит функциональную группу, выбранную из группы, состоящей из карбоновой кислоты, первичного и вторичного амина, малеимида, тиола, сульфоновой кислоты, карбоната, карбамата, гидроксила, альдегида, кетона, гидразина, изоцианата, изотиоцианата, фосфорной кислоты, фосфоновой кислоты, галоацетил, алкилгалогенида, акрилоила, арилфторида, гидр оксил амина, сульфата, дисульфида, винилсульфона, винилкетона, диазоалкана, оксирана, гуанидина и азиридина. Согласно определенным вариантам осуществления остаток аминокислоты РТН, с которой -L¹-конъюгирован, содержит функциональную группу, выбранную из группы, состоящей из гидроксила, первичного и вторичного амина и гуанидина. Согласно определенным вариантам осуществления остаток аминокислоты РТН, с которой -L¹- конъюгирован, содержит первичную или вторичную аминную функциональную группу. Согласно определенным вариантам осуществления остаток аминокислоты РТН, с которой -L¹- конъюгирован, содержит первичную аминную функциональную группу.

Если фрагмент -L¹- конъюгирован с функциональной группой боковой цепи аминокислотного остатка РТН, указанный аминокислотный остаток выбран из группы, состоит из протеиногенных аминокислотных остатков и непротеиногенных аминокислотных остатков

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с функциоальной группой боковой цепи непротеиногенного аминокислотного остатка РТН. Понятно, что такая непротеиногенная аминокислота не обнаруживается в последовательности нативного РТН или его фрагментов, и что она может присутствовать только в вариантах, аналогах, ортологах, гомологах и производных РТН.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с функциоальной группой боковой цепи протеиногенного аминокислотного остатка РТН. Согласно определенным вариантам осуществления указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из гистидина, лизина, триптофана, серина, треонина, тирозина, аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты и аргинина. Согласно определенным вариантам осуществления указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из лизина, аспарагиновой кислоты, аргининан и серина. Согласно определенным вариантам осуществления указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из лизина, аргинина и серина.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с функциоальной группой боковой цепи гистидина РТН. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с функциоальной группой боковой цепи лизина РТН. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹-конъюгирован с функциоальной группой боковой цепи триптофана РТН. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с функциоальной группой боковой цепи серина РТН. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с функциоальной группой боковой цепи треонина РТН. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹-конъюгирован с функциоальной группой боковой цепи тирозина РТН. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с функциоальной группой боковой цепи аспарагиновой кислоты РТН. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с функциоальной группой боковой цепи глутаминовой кислоты РТН. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с функциоальной группой боковой цепи аргинина РТН.

Понятно, что не каждый фрагмент может содержать все эти аминокислотные остатки.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с N-концевой аминной функциональной группой РТН, либо напрямую через соответствующую аминную функциональную группу, либо ненапрямую, где спейсерный фрагмент сначала конъюгирован с аминной функциональной группой, с которой спейсерный фрагмент -L¹- конъюгирован. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- непосредственно конъюгирован с N-концевой аминной функциональной группой РТН, как например РТН 1-34, т.е. РТН, имеющий последовательность SEQ ID NO:51. N-терминальное присоединение -L¹- является предпочтительным, т.е. присоединение -L¹- к N-концу РТН, потому что обнаружено, что такое место присоединения защищает N-конец, который имеет важное значение для активности РТН. Основным метаболитом, образованным из конъюгата РТН с N-концевым присоединением -L¹-, является PTH(1-33), т.е. 33 N-концевые аминокислоты РТН, метаболит которого, как известно, является активным.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с С-концевой функциональной группой РТН, либо непосредственно через соответствующую карбоксильную функциональную группу, либо ненапрямую, когда спейсерный фрагмент сначала конъюгирован с карбоксильной функциональной группой, с которой спейсерный фрагмент -L¹- конъюгирован.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- непосредственно конъюгирован с N-концевой аминной функциональной группой РТН.

Фрагмент -L¹- может быть соединен с -D через любой тип связи, при условии, что она обратима. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с -D через связь, выбранную из группы, состоящей из амида, сложного эфира, карбамата, ацеталя, аминаля, имина, оксима, гидразона, дисульфида и ацилгуанидина. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с -D через связь, выбранную из группы, состоящей из амида, сложного эфира, карбамата и ацилгуанидина. Понятно, что некоторые из этих связей сами по себе необратимы, но что соседние группы, содержащиеся в -L¹-, делают эти связи обратимыми.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с -D через сложноэфирную связь. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹-конъюгирован с -D через карбаматную связь. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с -D через ацилгуанидин. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- конъюгирован с -D через амидную связь.

Фрагмент -L¹- представляет собой обратимый линкер, из которого лекарственное средство, т.е. РТН, высвобождается в его свободной, что означает, что -L¹-представляет собой бесследный линкер. Подходящие обратимые линкеры известны в данной области техники, как например, фрагменты обратимых линкеров, раскрытые в WO 2005/099768 А2, WO 2006/136586 А2, WO 2011/089216 А1 и WO 2013/024053 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- представляет собой обратимый линкер, как описано в WO 2011/012722 A1, WO 2011/089214 A1, WO 2011/089215 A1, WO 2013/024052 А1 и WO 2013/160340 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки.

Фрагмент -L¹- раскрывается в WO 2009/095479 А2. Соответственно, в одном предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения фрагмент -L¹- имеет формулу (II):

где пунктирная линия обозначает присоединение к азоту, гидроксилу или тиолу -D, который представляет собой фрагмент РТН,

-Х- представляет собой -C(R⁴R^4a)-, -N(R⁴)-, -Ο-, -C(R⁴R^4a)-C(R⁵R^5a)-, -C(R⁵R^5a)-C(R⁴R^4a)-, -C(R⁴R^4a)-N(R⁶)-, -N(R⁶)-C(R⁴R^4a)-, -C(R⁴R^4a)-0-, -О-C(R⁴R^4a)-, или -C(R⁷R^7a)-,

X¹ представляет собой С или S(O),

-X²- представляет собой -C(R⁸R^8a)- или -C(R⁸R^8a)-C(R9R^9a)-,

=Х представляет собой =O, =S или =N-CN,

-R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R⁴, -R^4a, -R⁵, -R^5a, -R⁶, -R⁸, -R^8a, -R⁹, -R^9a независимо выбирают из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, независимо выбирают из группы, состоящей из -Н; и С_1-6 алкила, при условии, что в случае, если один из

-R³, -R^3a или оба отличны от водорода, они соединены с N, к которому они присоединены через SP³-гибридизованный атом углерода;

-R⁷ представляет собой -N(R¹⁰R^10a); или -NR¹⁰-(C=O)-R¹¹;

-R^7a, -R¹⁰, -R^10a, -R¹¹ независимо друг от друга представляют собой -Н; или C_1-6 алкил;

необязательно, одна или более из пар -R^1a/-R^4a, -R^1a/-R^5a, -R^1a/-R^7a, -R^4a/-R^5a, -R^8a/-R^9a образуют химическую связь;

необязательно, одна или более из пар -R¹/-R^1a, -R²/-R^2a, -R⁴/-R^4a, -R⁵/-R^5a, -R⁸/-R^8a, -R⁹/-R^9a соединяются вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием С_3-10 циклоалкила; или 3-10-членного гетероциклила,

необязательно, одна или более из пар -R¹/-R⁴, -R¹/-R⁵, -R¹/-R⁶, -R¹/-R^7a, -R⁴/-R⁵, -R⁴/-R⁶, -R⁸/-R⁹, -R¹/-R³ соединяются вместе с атомами, к которым они присоединены, с образованием кольца А;

необязательно, R³/R^3a соединяются вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 3-10-членного гетероцикла,

А выбирают из группы, состоящей из фенила; нафтила; инденила; инданила; тетралинила; С_3-10 циклоалкила; 3-10-членного гетероциклила; и 8-11-членного гетеробициклила, и

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (II), не замещен -L²-Z или заместителем,

где

-L²- представляет собой одинарную химическую связь или спейсер, и

-Z представляет собой растворимый в воде носитель.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (II) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (II) дополнительно не замещен.

Понятно, что если -R³/-R^3a формулы (II) соединяются вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 3-10-членного гетероцикла, только такие 3-10-членные гетероциклы могут быть образованы, в которых атомы, непосредственно соединенные с атомом азота, представляют собой SP³ гибридизованные атомы углерода. Другими словами, такой 3-10-членный гетероцикл, образованный -R³/-R^3a вместе с атомом азота, с которыми они соединены, имеет следующую структуру:

где

пунктирная пиния обозначает присоединение к остатку -L¹-;

кольцо содержит от 3 до 10 атомов, включая по меньшей мере один атом азота; и

R^# и R^## представляют собой SP³ -гибридизованный атом углерода.

Также понятно, что 3-10-членный гетероцикл может быть дополнительно замещен.

Примерными вариантами выполнения подходящих 3-10-членных гетероциклов, образованных -R³/-R^3a формулы (II) вместе с атомом азота, к которому они присоединены, являются следующие:

где

пунктирная пиния обозначает присоединение к остатку молекулы; и -R выбирают из группы, состоящей из -Н и С_1-6 алкила.

-L¹- формулы (II) может необязательно быть дополнительно замещенной. В общем, любой заместитель может применяться, до тех пор, пока принцип расщепления не затронут, т.е. водород, помеченный звездочкой в формуле (II), не заменен, а азот фрагмента

формулы (II) остается частью первичного, вторичного или третичного амина, т.е. -R³ и R^3a независимо друг от друга представляют собой -Н или соединены с -N< через SP³-гибридизованный атом углерода.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹ или -R^1a формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R² или -R^2a формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R или -R^3a формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁴ формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁵ или -R^5a формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁶ формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁷ или -R^7a формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁸ или -R^8a формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁹ или -R^9a формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R¹⁰ формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R¹¹ формулы (II) замещен -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -Х- формулы (II) выбран из группы, состоящей из -C(R⁴R^4a)-, -N(R⁴)- и -C(R⁷R^7a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -Х- формулы (II) представляет собой -C(R⁴R^4a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -Х- формулы (II) представляет собой -C(R⁷R^7a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁷ формулы (II) представляет собой -NR¹⁰-(C=O)-R¹¹

Согласно определенным вариантам осуществления -R^7a формулы (II) выбран из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления -R^7a формулы (II) представляет собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹⁰ формулы (II) выбран из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления -R¹⁰ формулы (II) представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹¹ формулы (II) выбран из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления -R¹¹ формулы (II) представляет собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹¹ формулы (II) замещен -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -Х- формулы (II) представляет собой -N(R⁴)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁴ формулы (II) выбран из группы, состоящей из -Н, метила и этила.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁴ формулы (II) представляет собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления X¹ формулы (II) представляет собой С.

Согласно определенным вариантам осуществления =Х³ формулы (II) представляет собой =O.

Согласно определенным вариантам осуществления -X2- формулы (II) представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁸ и -R^8a формулы (II) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R⁸ и -R^8a формулы (II) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R⁸ и -R^8a формулы (II) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹ и -R^1a формулы (II) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила.

Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R¹ и -R^1a формулы (II) представляет собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления оба -R¹ и -R^1a формулы (II) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R¹ и -R^1a формулы (II) представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления оба -R¹ и -R^1a формулы (II) представляют собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления -R² и -R^2a формулы (II) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R² и -R^2a формулы (II) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R² и -R^2a формулы (II) представляют собой Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (II) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила.

Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R³ и -R^3a формулы (II) представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ формулы (II) представляет собой метил и -R^3a формулы (II) представляет собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (II) представляют собой оба -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -D соединен с -L¹- через азот посредством образования амидной связи.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIa-i):

где

пунктирная линия показывает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент РТН посредством образования амидной связи,

-R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R³, -R^3a, -R⁷, -R^7a и -X²- имеют значения как определено для формулы (II), и

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIa-i), не замещен -L²-Z или заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIa-i) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIa-i) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹ и -R^1a формулы (IIa-i) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R¹ и -R^1a формулы (IIa-i) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R¹ и -R^1a формулы (IIa-i) представляют собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁷ формулы (IIa-i) представляет собой -NR¹⁰-(C=O)-R¹¹.

Согласно определенным вариантам осуществления -R^7a формулы (IIa-i) выбран из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления -R^7a формулы (IIa-i) представляет собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹⁰ формулы (IIa-i) выбран из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления -R¹⁰ формулы (IIa-i) представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹¹ формулы (IIa-i) выбран из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления -R¹¹ формулы (IIa-i) представляет собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹¹ формулы (IIa-i) замещен -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -X² - формулы (IIa-i) представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁸ и -R^8a формулы (IIa-i) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно

определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R⁸ или -R^8a формулы (IIa-i) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам

осуществления оба -R⁸ и -R^8a формулы (IIa-i) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R² и -R^2a формулы (IIa-i) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R² или -R^2a формулы (IIa-i) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R² и -R^2a формулы (IIa-i) представляют собой Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIa-i) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R³ или -R^3a формулы (IIa-i) представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ формулы (IIa-i) представляет собой -Н и -R^3a формулы (IIa-i) представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIa-ii):

где пунктирная линия обозначает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент РТН посредством образования амидной связи,

-R³, -R^3a, -R¹⁰, -R¹¹ и -X²- имеют значения как определено для формулы (II), и

где -L¹ - замещен -L² -Z, и где -L¹ - необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIa-ii) не замещен -L²-Z или заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIa-ii) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIa-ii) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления -X2- формулы (IIa-ii) представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁸ и -R^8a формулы (IIa-ii) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R⁸ или -R^8a формулы (IIa-ii) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R⁸ и -R^8a формулы (IIa-ii) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIa-ii) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R³ или -R^3a формулы (IIa-ii) представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ формулы (IIa-ii) представляет собой -Н и -R^3a формулы (IIa-ii) представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹⁰ формулы (IIa-ii) выбран из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления -R¹⁰ формулы (IIa-ii) представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹¹ формулы (IIa-ii) выбран из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления -R¹¹ формулы (IIa-ii) представляет собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹¹ формулы (IIa-ii) замещен -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIa-ii'):

где

где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, показывает присоединение к -L²-,

-R³ -R^3a, -R¹⁰ и -X²- имеют значения как определено для формулы (II), и

где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIa-ii') не замещен заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIa-ii') дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления -X²- формулы (IIa-ii') представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁸ и -R^8a формулы (IIa-ii') независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R⁸ или -R^8a формулы (IIa-ii') представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R⁸ и -R^8a формулы (IIa-ii') представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIa-ii') независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R³ и -R^3a формулы (IIa-ii') представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ формулы (IIa-ii') представляет собой -Н и -R^3a формулы (IIa-ii') представляет собой метил. Согласно определенным вариантам осуществления -R¹⁰ формулы (IIa-ii') выбран из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления -R¹⁰ формулы (IIa-ii') представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIa-iii):

где пунктирная линия обозначает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент РТН посредством образования амидной связи, и

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIa-iii) не замещен -L²-Z или -L²-Z' или заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIa-iii) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIa-iii) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIa-iii'):

где

где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, показывает присоединение к -L² -, и

где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIa-iii') не замещен заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIa-iii') дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIb-i):

где

где пунктирная линия показывает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент РТН посредством образования амидной связи,

-R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R³, -R^3a, -R⁴ и -X² - имеют значения как определено для формулы (II), и

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-i) не замещен -L²-Z или заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIb-i) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIb-i) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹ и -R^1a формулы (IIb-i) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R¹ или -R^1a формулы (IIb-i) представляет собой метил. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R¹ и -R^1a формулы (IIb-i) представляют собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁴ формулы (IIb-i) выбран из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁴ формулы (IIb-i) представляет собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -X² - формулы (IIb-i) представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁸ и -R^8a формулы (IIb-i) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R⁸ и -R^8a формулы (IIb-i) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R⁸ и -R^8a формулы (IIb-i) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R² и -R^2a формулы (IIb-i) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R² или -R^2a формулы (IIb-i) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R² и -R^2a формулы (IIb-i) представляют собой Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIb-i) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R³ или -R^3a формулы (IIb-i) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R³ и -R^3a формулы (IIb-i) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIb-ii):

-R², -R^2a, -R³, -R^3a и -X² - имеют значения как определено для формулы (II), и

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-ii) не замещен -L²-Z или заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIb-ii) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIb-ii) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления -X²- формулы (IIb-ii) представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁸ и -R^8a формулы (IIb-ii) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R⁸ или -R^8a формулы (IIb-ii) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R⁸ и -R^8a формулы (IIb-ii) представляют собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления -R² и -R^2a формулы (IIb-ii) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R² или -R^2a формулы (IIb-ii) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R² и -R^2a формулы (IIb-ii) представляют собой Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIb-ii) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R³ или -R^3a формулы (IIb-ii) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R³ и -R^3a формулы (IIb-ii) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIb-ii'):

где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, показывает присоединение к -L²-, -R², -R^2a, -R^3a и -X² - имеют значения как определено для формулы (II), и

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-ii') не замещен -L²-Ζ или заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIb-ii') дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления -X² - формулы (IIb-ii') представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁸ и -R^8a формулы (IIb-ii') независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R⁸ или -R^8a формулы (IIb-ii') представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R⁸ и -R^8a формулы (IIb-ii') представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R² и -R^2a формулы (IIb-ii') независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R² или -R^2a формулы (IIb-ii') представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R² и -R^2a формулы (IIb-ii') представляют собой Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R^3a формулы (IIb-ii') независимо выбран из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления -R^3a формулы (IIb-ii') представляет собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIb-iii):

где

где пунктирная линия показывает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент РТН посредством образования амидной связи, и

где -L¹ - замещен -L²-Z, и где -L¹ - необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-iii) не замещен -L²-Z или заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIb-iii) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIb-iii) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIb-iii'):

где

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, показывает присоединение к -L² -, и

где -L¹ - замещен -L²-Ζ, и где -L¹ - необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-iii') не замещен -L²-Ζ или заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIb-iii') дополнительно не замещен.

Другой фрагмент -L¹- раскрыт WO 2016020373 А1, которая включена в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте. Соответственно, согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (III):

где

пунктирная линия показывает присоединение первичного или вторичного амина или гидроксила -D, который представляет собой фрагмент РТН, посредством образования амидной или сложноэфирной связи, соответственно, -R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R³ и -R^3a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -C(R⁸R^8aR^8b), -C(=O)R⁸, -C≡N, -C(=NR⁸)R^8a, -CR⁸(=CR^8aR^8b), -C≡CR⁸ и -Τ,

-R⁴, -R⁵ и -R^5a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -C(R⁹R^9aR^9b) и -Т,

a1 и а2 независимо друг от друга представляют собой 0 или 1,

каждый -R⁶, -R⁶a, -R⁷, -R^7a, -R⁸, -R^8a, -R^8b, -R⁹, -R^9a, -R^9b независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, галогена, -CN, -COOR¹⁰, -OR¹⁰, -C(O)R¹⁰, -C(O)N(R¹⁰R^10a), -S(O)2N(R¹⁰R^10a), -S(O)N(R¹⁰R^10a), -S(O)2R¹⁰, -S(O)R¹⁰, -N(R¹⁰)S(O)2N(R^10aR¹⁰b), -SR¹⁰, -N(R¹⁰R^10a), -NO₂, -OC(O)R¹⁰, -N(R¹⁰)C(O)R^10a, -N(R¹⁰)S(O)₂R^10a, -N(R¹⁰)S(O)R^10a, -N(R¹⁰)C(O)OR^10a, -N(R¹⁰)C(O)N(R^10aR¹⁰b), -OC(O)N(R¹⁰R^10a), -T, C_1-20 алкила, C_2-20 алкенила и C_2-20 алкинила, где -Τ, C_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R¹¹, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R¹²)-, -S(O)₂N(R¹²)-, -S(O)N(R¹²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R¹²)S(O)₂N(R^12a)-, -S-, -N(R¹²)-, -OC(OR¹²)(R^12a)-,

-N(R¹²)C(C-)N(R^12a)-, и -OC(C-)N(R¹²)-,

каждый -R¹⁰, -R^10a, -R^10b независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -Т, C_1-20 алкила, С_2-20 алкенила и С_2-20 алкинила, где -Т, C_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R¹¹, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R¹²)-, -S(O)₂N(R¹²)-, -S(O)N(R¹²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R¹²)S(O)₂N(R^12a)-, -S-, -N(R¹²)-, -OC(OR¹²)(R^12a)-, -N(R¹²)C(O)N(R^12a)-, и -OC(O)N(R¹²)-,

каждый Τ независимо друг от друга выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила и 8-11-членного гетеробициклила, где каждый Τ независимо необязательно замещен одним или несколькими -R¹¹, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R¹¹ независимо друг от друга выбран из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR¹³, -OR¹³, -C(O)R¹³, -C(O)N(R¹³R^13a), -S(O)₂N(R¹³R^13a), -S(O)N(R¹³R^13a), -S(O)₂R¹³, -S(O)R¹³, -N(R¹³)S(O)₂N(R^13aR^13b), -SR¹³, -N(R¹³R^13a), -NO₂, -OC(O)R¹³, -N(R¹³)C(O)R^13a, -N(R¹³)S(O)₂R^13a, -N(R¹³)S(O)R^13a, -N(R¹³)C(O)OR^13a, -N(R¹³)C(O)N(R^13aR^13b), -OC(O)N(R¹³R^13a) и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R¹², -R^12a, -R¹³, -R^13a, -R^13b независимо выбран из группы, состоящей из -Η и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

необязательно, одна или несколько пар -R¹/-R^1a, -R²/-R^2a, -R³/-R^3a, -R⁶/-R⁶a, -R⁷/-R^7a соединены вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием С_3-10 циклоалкила или 3-10-членного гетероциклила,

необязательно, одна или несколько пар -R¹/-R², -R¹/-R³, -R¹/-R⁴, -R¹/-R⁵, -R¹/-R⁶, -R¹/-R⁷, -R²/-R³, -R²/-R⁴, -R²/-R⁵, -R²/-R⁶, -R²/-R⁷, -R³/-R⁴, -R³/-R⁵, -R³/-R⁶, -R³/-R⁷, -R⁴/-R⁵, -R⁴/-R⁶, -R⁴/-R⁷, -R⁵/-R⁶, -R⁵/-R⁷, -R⁶/- соединены вместе с атомами, к которым они присоединены, с образованием кольца А,

А выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, и 8-11-членного гетеробициклила,

где

-L¹ - замещен -L²-Z, и где -L¹ - необязательно дополнительно замещен, где -L² - представляет собой простую химическую связь или спейсер, и

-Z представляет собой растворимый в воде носитель

Согласно определенным вариантам осуществления необязательные дополнительные заместители -L¹- формулы (III) имеют значения, как описано выше.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (III) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (III) дополнительно не замещен.

Дополнительные варианты осуществления для -L¹- раскрыты в ЕР 1536334 В1, WO 2009/009712 A1, WO 2008/034122 A1, WO 2009/143412 A2, WO 2011/082368 А2 и US 8618124 B2, которые включены в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте.

Дополнительные варианты осуществления для -L¹- раскрыты в US 8946405 B2 и US 8754190 B2, которые включены в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте. Соответственно, фрагмент -L¹- имеет формулу (IV):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -D, который представляет собой фрагмент РТН, и где присоединение происходит через функциональную группу -D, выбранную из группы, состоящей из -ОН, -SH и -NH₂,

m представляет собой 0 или 1,

по меньшей мере один или оба ил -R¹ и -R² представляет собой/независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -CN, -ΝΌ₂, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, -C(O)R³, -S(O)R³, -S(O)₂R³ и -SR⁴,

один и только один из -R¹ и -R² выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного арилалкила и необязательно замещенного гетероарилалкила,

-R³ выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного гетероарилалкила, -OR⁹ и -N(R⁹)₂,

-R⁴ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероарилалкила,

каждый -R⁵ независимо выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенилалкила, необязательно замещенного алкинилалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероарилалкила,

-R⁹ выбран из группы, состоящей из -Н и необязательно замещенного алкила,

-Y- отсутствует, и -Х- представляет собой -О- или -S-, или

-Y- представляет собой -N(Q)CH₂-, и -Х- представляет собой -О-,

Q выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероарилалкила,

необязательно, -R¹ и -R² могут быть соединены с образованием 3-8-ми членного кольца, и

необязательно, оба -R⁹ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероциклильное кольцо,

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен,

где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер, и

Только в контексте формулы (IV) применяемые термины имеют следующие значения:

Термин "алкил", как применяется в настоящей заявке, включает линейные, разветвленные или циклические насыщенные углеводородные группы, имеющие от 1 до 8 атомов углерода, или в некоторых вариантах выполнения настоящего изобретения от 1 до 6 или от 1 до 4 атомов углерода.

Термин "алкокси" включает алкильные группы, связанные с кислородом, включая метокси, этокси, изопропокси, циклопропокси, циклобутокси и подобное.

Термин "алкенил" включает неароматические ненасыщенные углеводороды с двойными связями углерод-углерод.

Термин "алкинил" включает неароматические ненасыщенные углеводороды с тройными связями углерод-углерод.

Термин "арил" включает ароматические углеводородные группы, имеющие от 6 до 18 атомов углерода, предпочтительно от 6 до 10 атомов углерода, включая группы, такие как фенил, нафтил и антраценил. Термин "гетероарил" включает ароматические кольца, содержащие от 3 до 15 атомов углерода, содержащие по меньшей мере один N, О или S атом, предпочтительно от 3 до 7 атомов углерода, содержащие по меньшей мере один N, О или S атом, включая группы, такие как пирролил, пиридил, пиримидинил, имидазолил, оксазолил, изооксазолил, тиазолил, изотиазолил, хинолил, индолил, инденил и подобное.

Согласно определенным вариантам осуществления алкенильные, алкинильные, арильные или гетероарильные фрагменты могут быть соединены с оставшейся частью молекулы через алкиленовую связь. При этих обстоятельствах заместитель будет называться алкенилалкил, алкинилалкил, арилалкил или гетероарилалкил, что указывает на то, что алкиленовая составляющая находится между алкенилом, алкинилом, арилом или гетероарилом и молекулой, с которой связан алкенил, алкинил, арил или гетероарил.

Термин "галоген" включает бром, фтор, хлор и иод.

Термин "гетероциклическое кольцо" относится к 4-8-членному ароматическому или не ароматическому кольцу, содержащему от 3 до 7 атомов углерода и по меньшей мере один N, О, или S атом. Примерами являются пиперидинил, пиперазинил, тетрагидропиранил, пирролидин и тетрагидрофуранил, а также примерные группы, приведенные вые для термина "гетероарил".

Когда кольцевая система необязательно замещена, подходящие заместители выбирают из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила или дополнительного кольца, где каждый необязательно дополнительно замещен. Необязательные заместители в любой группе, включая вышеуказанные, включают гало, нитро, циано, OR, -SR, -NR², -OCOR, -NRCOR, -COOR, -CONR², -SOR, -SO₂R, -SONR², -SO₂NR², где каждый R независимо представляет собой алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил, или две R группы, взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют кольцо.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IV) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Дополнительный вариант осуществления для -L¹- раскрыт в WO 2013/036857 A1, которая включена в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте. Соответственно, согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (V):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -D, который представляет собой фрагмент РТН, и где присоединение происходит через аминную функциональную группу -D,

-R¹ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенный C₁-C₆ линейного, разветвленного или циклического алкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, алкокси, и -NR⁵ ₂,

-R² выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного С₁-С₆ алкила, необязательно замещенного арила и необязательно замещенного гетероарил,

-R³ выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного С₁-С₆ алкила, необязательно замещенного арила и необязательно замещенного гетероарил,

-R⁴ выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного C₁-C₆ алкила, необязательно замещенного арила и необязательно замещенного гетероарила,

каждый -R⁵ независимо друг от друга выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного C1-С6 алкила, необязательно замещенного арила и необязательно замещенного гетероарила, или два -R⁵ вместе могут представлять собой циклоалкил или циклогетероалкил,

где -L¹ - замещен -L²-Z, и где -L¹ - необязательно дополнительно замещен, где

-Z представляет собой растворимый в воде полимерный носитель.

Только в контексте формулы (V) применяемые термины имеют следующие значения:

"Алкил", "алкенил" и "алкинил" включают линейные, разветвленные или циклические углеводородные группы, имеющие от 1 до 8 атомов углерода или 1-6 атомов углерода или 1-4 атомов углерода, где алкилом является насыщенный углеводород, алкенил включает одну или более двойных связей углерод-углерод, и алкинил включает одну или более тройных связей углерод-углерод. Если иного не указано, они содержат 1-6 атомов углерода.

"Арил" включает ароматические углеводородные группы, имеющие от 6 до 18 атомов углерода, предпочтительно 6-10 атомов углерода, включая группы, такие как фенил, нафтил и антрацен. "Гетероарил" включает ароматические кольца, содержащие 3-15 атомов углерода, содержащие по меньшей мере один N, О или S атом, предпочтительно 3-7 атомов углерода, содержащие по меньшей мере один N, О или S атом, включая группы, такие как пирролил, пиридил, пиримидинил, имидазолил, оксазолил, изооксазолил, тиазолил, изотиазолил, хинолил, индолил, инденил и подобное.

Термин "замещенный" означает алкильную, алкенильную, алкинильную, арильную или гетероарильную группу, включающую одну или более групп заместителей вместо одного или более атомов водорода. Заместители могут в общем быть выбраны из галогена, включая F, Cl, Br и I; низшего алкила, включая линейный, разветвленный и циклический; низшего галоалкила, включая фторалкил, хлоралкил, бромалкил и иодалкил; ОН; низшего алкокси, включая линейные, разветвленные и циклические; SH; низшего алкилтио, включая линейный, разветвленный и циклический; амино, алкиламино, диалкиламино, силила, включая алкилсилил, алкоксисилил и арилсилил; нитро; циано; карбонила; карбоновой кислоты, сложного эфира карбоновой кислоты, карбоксильного амида, аминокарбонила; аминоацила; карбамата; мочевины; тиокарбамата; тиомочевины; кетона; сульфона; сульфонамида; арила, включая фенил, нафтил и антраценил; гетероарила, включая 5-членные гетероарилы, включая пиррол, имидазол, фуран, тиофен, оксазол, тиазол, изоксазол, изотиазол, тиадиазол, триазол, оксадиазол и тетразол, 6-членные гетероарилы, включая пиридин, пиримидин, пиразин, и конденсированные гетероарилы, включая бензофуран, бензотиофен, бензоксазол, бензимидазол, индол, бензотиазол, бензизоксазол и бензизотиазол.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (V) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Другой вариант осуществления для -L¹- раскрыт в US 7585837 B2, которая включена в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте. Соответственно, согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-имеет формулу (VI):

где

R¹ и R² независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, алкила, алкокси, алкоксиалкила, арила, алкарила, агалкила, галогена, нитро, -SO₃H, -SO₂NHR⁵, амино, аммония, карбоксила, РО₃Н₂ и ОРО₃Н₂,

R³, R⁴ и R⁵ независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, алкила и арила,

-L² - представляет собой простую химическую связь или спейсер, и

Подходящими заместителями для формулы (VI) являются фрагменты алкил (как например C_1-6 алкил), алкенил (как например С_2-6 алкенил), алкинил (как например С_2-6 алкинил), арил (как например фенил), гетероалкил, гетероалкенил, гетероалкинил, гетероарил (как например ароматический 4-7 членный гетероцикл) или галоген.

Только в контексте формулы (VI) применяемые термины имеют следующие значения:

Термины "алкил", "алкокси", "алкоксиалкил", "арил", "алкарил" и "аралкил" означают алкильные радикалы, содержащие 1-8, предпочтительно 1-4 атомов углерода, например, метил, этил, пропил, изопропил и бутил, и арильные радикалы, содержащие 6-10 атомов углерода, например, фенил и нафтил. Термин "галоген" включает бром, фтор, хлор и иод.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (VI) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Дополнительный вариант осуществления для -L¹- раскрыт в WO 2002/089789 A1, которая включена в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте. Соответственно, фрагмент -L¹- имеет формулу (VII):

где

L₁ представляет собой бифункциональную связывающую группу,

Υ₁ и Υ₂ независимо представляют собой О, S или NR⁷,

R², R³, R⁴, R⁵, R⁶ и R⁷ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, C_1-6 алкилов, С_3-12 разветвленных алкилов, С_3-8 циклоалкилов, C_1-6 замещенных алкилов, С_3-8 замещенных циклоалкилов, арилов, замещенных арилов, аралкилов, С_1-6 гетероалкилов, замещенных С_1-6 гетероалкилов, С_1-6 алкокси, фенокси и С_1-6 гетероалкокси,

Ar представляет собой составляющую, которая при включении в формулу (VII), образует мультизамещенный ароматический углеводород или мульти-замещенную гетероциклическую группу,

X представляет собой химическую связь или составляющую, которая активно переносится в клетку-мишень, гидрофобную составляющую или их комбинацию,

у равно 0 или 1.

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, где

-L² - представляет собой простую химическую связь или спейсер, и -Z представляет собой растворимый в воде носитель.

Только в контексте формулы (VII) применяемые термины имеют следующие значения:

Термин "алкил", как следует понимать, включает, например, неразветвленные, разветвленные, замещенные С_1-12 алкилы, включая алкокси, С_3-8 циклоалкилы или замещенные циклоалкилы, и т.д.

Термин "замещение", как следует понимать, включает добавление или замещение одного или более атомов, содержащихся в функциональной группе, или соединения с одним или более отличными атомами.

Замещенные алкилы включают карбоксиалкилы, аминоалкилы, диалкиламины, гидр оксиал килы и мер капто алкилы; замещенные циклоалкилы включают составляющие, как например 4-хлорциклогексил; арилы включают составляющие, как например нафтил; замещенные арилы включают составляющие, как например 3-бром-фенил; аралкилы включают составляющие, как например толуил; гетероалкилы включают составляющие, как например этилтиофен; замещенный гетероалкилы включают составляющие, как например 3-метокситиофен; алкокси включает составляющие, как например метокси; и фенокси включает составляющие, как например 3-нитрофенокси. Гало-, как необходимо понимать, включает фтор, хлор, иод и бром.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (VII) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- содержит подструктуру формулы (VIII):

где

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к азоту фрагмента -D, который представляет собой фрагмент РТН, посредством образования амидной связи,

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к оставшейся части -L¹-, и

где

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (VIII) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (VIII) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- содержит подструктуру формулы (IX):

где

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к азоту фрагмента -D, который представляет собой фрагмент РТН, посредством образования карбаматной связи,

где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер, и -Z представляет собой растворимый в воде носитель.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IX) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IX) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления -L²- представляет собой химическую связь или спейсерный фрагмент.

Согласно определенным вариантам осуществления -L²- представляет собой химическую связь.

Согласно определенным вариантам осуществления -L²- представляет собой спейсерный фрагмент.

Когда -L²- отличен от простой химической связи, -L²- выбран из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -OC(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила, где -T-, C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y3)-, -S(O)₂N(R^y3)-, -S(O)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -OC(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)-, и -OC(O)N(R^y3)-,

-R^y1 и -R^y1a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т, C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила, где -Т, C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^y2, которые являются одинаковыми или различными,, и где C_1-50 алкил, С_2-50алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y4)-, -S(O)₂N(R^y4)-, -S(O)N(R^y4)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y4)S(O)₂N(R^y4a)-, -S-, -N(R^y4)-, -OC(OR^y4)(R^y4a)-, -N(R^y4)C(O)N(R^y4a)-, и -OC(O)N(R^y4)-,

каждый T независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, 8-30-членного карбополициклила и 8-30-членного гетерополициклила, где каждый Т независимо необязательно замещен одним или несколькими -R^y2, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R^y2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^y5, -OR^y5, -C(O)R^y5, -C(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂N(R^y5R^y5a), -S(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂R^y5, -S(O)R^y5, -N(R^y5)S(O)₂N(R^y5aR^y5b), -SR^y5, -N(R^y5R^y5a), -NO₂, -OC(O)R^y5, -N(R^y5)C(O)R^y5a, -N(R^y5)S(O)₂R^y5a, -N(R^y5)S(O)R^y5a, -N(R^y5)C(O)OR^y5a, -N(R^y5)C(O)N(R^y5aR^y5b), -OC(O)N(R^y5R^y5a) и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными, и

каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и -R^y5b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Когда -L²- отличен от простой химической связи, -L²- согласно определенным вариантам осуществления выбран из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -OC(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, C_1-20 алкила, C_2-20 алкенила и C_2-20 алкинила, где -T-, C_1-20 алкил, C_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y3)-, -S(O)₂N(R^y3)-, -S(O)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -OC(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)-, и -OC(O)N(R^y3)-,

-R^y1 и -R^y1a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т, С_1-10 алкила, C_2-10 алкенила и C_2-10 алкинила, где -Т, С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^y2, которые являются одинаковыми или различными,, и где С_1-10 алкил, C_2-10 алкенил и C_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y4)-, -S(O)₂N(R^y4)-, -S(O)N(R^y4)-, -S(O)r, -S(O)-, -N(R^y4)S(O)₂N(R^y4a)-, -S-, -N(R^y4)-, -OC(OR^y4)(R^y4a)-, -N(R^y4)C(C-)N(R^y4a)-, и -OC(O)N(R^y4)-,

-R^y2 выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^y5, -OR^y5, -C(O)R^y5, -C(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂N(R^y5R^y5a), -S(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂R^y5, -S(O)R^y5, -N(R^y5)S(O)₂N(R^y5aR^y5b), -SR^y5, -N(R^y5R^y5a), -NO₂, -OC(O)R^y5, -N(R^y5)C(O)R^y5a,

-N(R^y5)S(O)₂R^y5a, -N(R^y5)S(O)R^y5a, -N(R^y5)C(O)OR^y5a, -N(R^y5)C(O)N(R^y5aR^y5b), -OC(O)N(R^y5R^y5a) и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными, и

каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и -R^y5b независимо друг от друга выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Когда -L²- отличен от простой химической связи, -L²- выбран из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -OC(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила, где -T-, C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y3), -S(O)₂N(R^y3)-, -S(O)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -OC(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)-, и -OC(O)N(R^y3)-,

-R^y1 и -R^y1a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т, C_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила,

каждый Т независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, 8-30-членного карбополициклила и 8-30-членного гетерополициклила,

каждый -R^y2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена и C_1-6 алкила, и

каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и -R^y5b независимо друг от друга выбран из группы, состоящей из -Н и С_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Согласно определенным вариантам осуществления -L - представляет собой С_1-20 алкильную цепь, которая необязательно прерывается одной или несколькими группами, независимо выбранными из -О-, -Т- и -C(O)N(R^y1)-, и где С_1-20 алкильная цепь, необязательно замещена одной или несколькими группами, независимо выбранными из -ОН, -Т и -C(O)N(R^y6R^y6a), где -R^y1, -R^y6, -R^y6a независимо выбраны из группы, состоящей из Н и С_1-4 алкила, и где Т выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, 8-30-членного карбополициклила и 8-30-членного гетерополициклила.

Согласно определенным вариантам осуществления -L²- имеет длину цепи от 1 до 20 атомов.

Как применяется в настоящем документе, термин "длина цепи" в отношении фрагмента -L²- относится к числу атомов -L²-, присутствующих в самом коротком соединении между -L¹- и -Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -L²- имеет формулу (i)

где

где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, показывает присоединение к -L¹-,

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к -Z,

n выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 и 18, и

где фрагмент формулы (i) необязательно дополнительно замещен

Согласно определенным вариантам осуществления n формулы (i) выбран из группы, состоящей из 3, 4, 5, 6, 7, 8 и 9. Согласно определенным вариантам осуществления n формулы (i) представляет собой 4, 5, 6 или 7. Согласно определенным вариантам осуществления n формулы (i) представляет собой 4. Согласно определенным вариантам осуществления n формулы (i) представляет собой 5. Согласно определенным вариантам осуществления n формулы (i) представляет собой 6.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-L²- выбран из группы, состоящей из

и

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент РТН посредством образования амидной связи, и

где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, показывает присоединение к -Z.

где

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-L²- имеет формулу (IIca-ii).

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-L²- имеет формулу (IIcb-iii).

Носитель -Z содержит С_8-24 алкил или полимер. Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит полимер. Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит полимер, выбранный из группы, состоящей из 2-метакрилоил-оксиэтила фосфоилхолинов, поли(акриловых кислот), поли(акрилатов), поли(акриламидов), поли(алкилокси) полимеров, поли(амидов), поли(амидоаминов), поли(аминокислот), поли(ангидридов), поли(аспартамидов), поли(масляных кислот), поли(гликолевых кислот), полибутилентерефталатов, поли(капролактонов), поли(карбонатов), поли(цианоакрилатов), поли(диметилакриламидов), поли(сложных эфиров), поли(этиленов), поли(этиленгликолей), поли(этиленоксидов), поли(этилфосфатов), поли(этилоксазолинов), поли(гликолевых кислот), поли(гидроксиэтилакрилатов), поли(гидроксиэтил-оксазолинов), поли(гидроксиметакрилатов), поли(гидроксипропилметакриламидов), поли(гидроксипропил метакрилатов), поли(гидроксипропилоксазолинов), поли(иминокарбонатов), поли(молочных кислот), поли(сополимеров молочных и гликолевых кислот), поли(метакриламидов), поли(метакрилатов), поли(метилоксазолинов), поли(органофосфазенов), поли(ортосложных эфиров), поли(оксазолинов), поли(пропиленгликолей), поли(силоксанов), поли(уретанов), поли(виниловых спиртов), поли(виниламинов), поли(винилметиловых простых эфиров), поли(винилпирролидонов), силиконов, целлюлоз, карбометилцеллюлоз, гидроксипропилметилцеллюлоз, хитинов, хитозанов, декстранов, декстринов, желатинов, гиалуроновых кислот и производных, функционализированных гиалуроновых кислот, маннанов, пектинов, рамногалактуронанов, крахмалов, гидроксиалкил крахмалов, гидроксиэтил крахмалов и других полимеров на основе углеводов, ксиланов и их сополимеров.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z имеет молекулярную массу в интервале от 5 до 200 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Z имеет молекулярную массу в интервале от 8 до 100 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Z имеет молекулярную массу в интервале от 10 до 80 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Z имеет молекулярную массу в интервале от 12 до 60 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Z имеет молекулярную массу в интервале от 15 до 40 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Z имеет молекулярную массу около 20 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Z имеет молекулярную массу около 40 кДа.

Согласно определенным вариантам осуществления такой растворимый в воде носитель -Z содержит белок. Согласно определенным вариантам осуществления белки выбирают из группы, состоящей из карбоксил-терминального пептида хорионического гонадотропина, как описано в US 2012/0035101 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки, альбумина, XTEN, как описано в WO 2011123813 А2, которая включена в настоящую заявку посредством ссылки, последовательностей пролиновых/аланиновых случайных спиралей, как описано в WO 2011/144756 А1, который включен в настоящую заявку посредством ссылки, последовательностей пролина/аланина/серина, как описано в WO 2008/155134 А1 и WO 2013/024049 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылками, с Fc слитых белков.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой полисаркозин. Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит поли(N-метилглицин). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит белковый фрагмент случайной спирали.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит один белковый фрагмент случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит два белковых фрагмента случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит три белковых фрагмента случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит четыре белковых фрагмента случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит пять белковых фрагментов случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит шесть белковых фрагментов случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит семь белковых фрагментов случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит восемь белковых фрагментов случайной спирали.

Согласно определенным вариантам осуществления такой белковый фрагмент случайной спирали содержит по меньшей мере 25 аминокислотных остатков и самое большее 2000 аминокислот. Согласно определенным вариантам осуществления такой белковый фрагмент случайной спирали содержит по меньшей мере 30 аминокислотных остатков и самое большее 1500 аминокислотных остатков. Согласно определенным вариантам осуществления такой белковый фрагмент случайной спирали содержит по меньшей мере 50 аминокислотных остатков и самое большее 500 аминокислотных остатков.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит белковый фрагмент случайной спирали, в котором по меньшей мере 80%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 85%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 90%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 95%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 98% и согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 99% общего числа аминокислот, образующих белковый фрагмент случайной спирали, выбраны из аланина и пролина. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 10%, но менее 75%, согласно определенным вариантам осуществления менее 65% общего числа аминокислотных остатков такого белкового фрагмента случайной спирали представляют собой остатки пролина. Согласно определенным вариантам осуществления такой белковый фрагмент случайной спирали является таким, как описано в WO 2011/144756 А1, которая включена в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полно.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит по меньшей мере один фрагмент, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 51 и SEQ ID NO: 61, как раскрыто в WO 2011/144756 которая включена в настоящий документ посредством ссылки. Фрагмент, такой белок случайной спирали, содержащий аланин и пролин, будет упоминаться как "РА" или "фрагмент РА".

Соответственно, -Z содержит фрагмент РА.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит белковый фрагмент случайной спирали, в котором по меньшей мере 80%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 85%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 90%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 95%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 98% и согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 99% общего числа аминокислот, образующих указанный белковый фрагмент случайной спирали, выбраны из аланина, серина и пролина. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 4%, но менее 40% общего числа аминокислотных остатков такого белкового фрагмента случайной спирали представляют собой остатки пролина. Согласно определенным вариантам осуществления такой белковый фрагмент случайной спирали является таким, как описано в WO 2008/155134 А1, которая включена в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте. Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит по меньшей мере один фрагмент, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 54 и SEQ ID NO: 56, как раскрыто в WO 2008/155134 A1, которые включены в настоящий документ посредством ссылки. Фрагмент, содержащий белковый фрагмент случайной спирали, содержащий аланин, серин и пролин, будет упоминаться как "PAS" или "фрагмент PAS".

Соответственно, -Z содержит фрагмент PAS.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит белковый фрагмент случайной спирали, в котором по меньшей мере 80%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 85%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 90%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 95%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 98% и согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 99% общего числа аминокислот, образующих указанный белковый фрагмент случайной спирали, выбраны из аланина, глицина и пролина. Фрагмент, содержащий белковый фрагмент случайной спирали, содержащий аланин, глицин и пролин, будет упоминаться как "PAG" или "фрагмент PAG ".

Соответственно, -Z содержит фрагмент PAG.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит белковый фрагмент случайной спирали, в котором по меньшей мере 80%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 85%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 90%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 95%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 98% и согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 99% общего числа аминокислот, образующих указанный белковый фрагмент случайной спирали, выбраны из пролина и глицина. Фрагмент, содержащий такой белковый фрагмент случайной спирали, содержащий пролин и глицин, будет упоминаться как "PG" или "фрагмент PG".

Согласно определенным вариантам осуществления такой фрагмент PG содержит фрагмент формулы (а-0)

[(Gly)_p-Pro-(Gly)_q]_r(a-0),

где

р выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4 и 5,

q выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4 и 5,

r представляет собой целое число в интервале и включая 10 - 1000,

при условии, что по меньшей мере один из р и q представляет собой по меньшей мере 1.

Согласно определенным вариантам осуществления р формулы (а-0) выбран из группы, состоящей из 1, 2 и 3.

Согласно определенным вариантам осуществления q формулы (а-0) выбран из 0, 1 и 2.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент PG содержит последовательность SEQ ID NO: 122: GGPGGPGPGGPGGPGPGGPG.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент PG содержит последовательность SEQ ID NO: 97 формулы (а-0-а)

где

v представляет собой целое число в интервале и включая 1 - 50.

Соответственно, -Z содержит фрагмент PG.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит белковый фрагмент случайной спирали, в котором по меньшей мере 80%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 85%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 90%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 95%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 98% и согласно определенным вариантам осуществления 99% общего числа аминокислот, образующих указанный белковый фрагмент случайной спирали, выбраны из аланина, глицина, серина, треонина, глутамата и пролин. Согласно определенным вариантам осуществления такой белковый фрагмент случайной спирали является таким, как описано в WO 2010/091122 А1 которая включена в настоящий документ посредством ссылки. Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит по меньшей мере один фрагмент, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 184, SEQ ID NO: 185, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 189, SEQ ID NO: 190, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 193, SEQ ID NO: 194, SEQ ID NO: 195, SEQ ID NO: 196, SEQ ID NO: 197, SEQ ID NO: 198, SEQ ID NO: 199, SEQ ID NO: 200, SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 205, SEQ ID NO: 206, SEQ ID NO: 207, SEQ ID NO: 208, SEQ ID NO: 209, SEQ ID NO: 210, SEQ ID NO: 211, SEQ ID NO: 212, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 214, SEQ ID NO: 215, SEQ ID NO: 216, SEQ ID NO: 217, SEQ ID NO: 218, SEQ ID NO: 219, SEQ ID NO: 220, SEQ ID NO: 221, SEQ ID NO: 759, SEQ ID NO: 760, SEQ ID NO: 761, SEQ ID NO: 762, SEQ ID NO: 763, SEQ ID NO: 764, SEQ ID NO: 765, SEQ ID NO: 766, SEQ ID NO: 767, SEQ ID NO: 768, SEQ ID NO: 769, SEQ ID NO: 770, SEQ ID NO: 771, SEQ ID NO: 772, SEQ ID NO: 773, SEQ ID NO: 774, SEQ ID NO: 775, SEQ ID NO: 776, SEQ ID NO: 777, SEQ ID NO: 778, SEQ ID NO: 779, SEQ ID NO: 1715, SEQ ID NO: 1716, SEQ ID NO: 1718, SEQ ID NO: 1719, SEQ ID NO: 1720, SEQ ID NO: 1721 и SEQ ID NO: 1722, как раскрыто в WO 2010/091122 A1, которые включены в настоящий документ посредством ссылки. Фрагмент, содержащий такой белковый фрагмент случайной спирали, содержащий аланин, глицин, серин, треонин, глутамат и пролин, будет упоминаться как "XTEN" или "фрагмент XTEN", аналогично его обозначению в WO 2010/091122 А1.

Соответственно, -Z содержит фрагмент XTEN.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит производное жирной кислоты. Согласно определенным вариантам осуществления производные жирной кислоты являются такими, как раскрыто в WO 2005/027978 А2 и WO 2014/060512 А1, которые включены в настоящий документ посредством ссылки.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой полимер на основе гиалуроновой кислоты.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой носитель, как раскрыто в WO 2012/02047 А1, которая включена в настоящий документ посредством ссылки. Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой носитель, как раскрыто в WO 2013/024048 А1, которая включена в настоящий документ посредством ссылки.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой полимер на основе ПЭГ, такой как линейный, разветвленный или с множеством плечей полимер на основе ПЭГ.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой линейный полимер на основе ПЭГ.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой полимер на основе ПЭГ с множеством плечей. Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой полимер на основе ПЭС с множеством плечей, имеющий по меньшей мере 4 плеча на основе ПЭГ.

Согласно определенным вариантам осуществления такой полимер на основе ПЭС с множеством плечей -Z конъюгирован с множеством фрагментов -L²-L¹-D, где каждый фрагмент -L²-L¹-D согласно определенным вариантам осуществления соединен с концом плеча. Согласно определенным вариантам осуществления такой полимер на основе ПЭС с множеством плечей -Z конъюгирован с 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или 16 фрагментами -L²-L¹-D. Согласно определенным вариантам осуществления такой полимер на основе ПЭС с множеством плечей -Z конъюгирован с 2, 3, 4, 6 или 8 фрагментами -L²-L¹-D. Согласно определенным вариантам осуществления такой полимер на основе ПЭС с множеством плечей -Z конъюгирован с 2, 4 или 6 фрагментами -L²-L¹-D, согласно определенным вариантам осуществления такой полимер на основе ПЭС с множеством плечей -Z конъюгирован с 4 или 6 фрагментами -L²-L¹-D, и согласно определенным вариантам осуществления такой полимер на основе ПЭС с множеством плечей -Z конъюгирован с 4 фрагментами -L²-L¹-D.

Согласно определенным вариантам осуществления такой полимер на основе ПЭС с множеством плечей -Z представляет собой производное ПЭГ с множеством плечей, как например, подробно описано в продуктах, перечисленных в JenKem Technology, USA (доступно для скачивания по ссылке http://www.jenkemusa.com/Pages/PEGProducts.aspx on Dec 18, 2014), как например производное ПЭГ с 4-мя плечами, в частности производное ПЭГ с 4-мя плечами, содержащее пентаэритритольное ядро, производное ПЭГ с 8-ью плечами, содержащее гексаглицериновое ядро, и ПЭГ с 8-ю плечами, содержащее трипентаэритритольное ядро. Согласно определенным вариантам осуществления растворимый в воде носитель на основе ПЭГ -Z содержит фрагмент, выбранный из:

ПЭГ амин с 4-мя плечами, содержащий пентаэритритольное ядро:

с n в интервале от 20 до 500,

ПЭГ амин с 8-ю плечами, содержащий гексаглицериновое ядро:

с n в интервале от 20 до 500, и

R = структура гексаглицеринового или трипентаэритритольного ядра, и

ПЭГ амин с 6-ю плечами, содержащий дипентаэритритольное ядро:

с n в интервале от 20 до 500, и

R = содержащий сорбит или дипентаэритритольное ядро,

и где пунктирные линии показывают присоединение к остатку конъюгата РТН.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ. Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ, имеющий одну, две, три, четыре, пять или шесть точек разветвления. Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ, имеющий одну, две или три точки разветвления. Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ, имеющий одну точку разветвления. Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ, имеющий две точки разветвления. Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ, имеющий три точек разветвления.

Согласно определенным вариантам осуществления точка разветвления выбрана из группы, состоящей из -N<, -СН< и >С<.

Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент на основе ПЭГ -Z имеет молекулярную массу по меньшей мере 10 кДа.

Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z имеет молекулярную массу в интервале и включая 10 кДа - 500 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z имеет молекулярную массу в интервале и включая 10 кДа - 250 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z имеет молекулярную массу в интервале и включая 10 кДа - 150 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z имеет молекулярную массу в интервале и включая 12 кДа - 100 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z имеет молекулярную массу в интервале и включая 15 кДа - 80 кДа.

Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z имеет молекулярную массу в интервале и включая 10 кДа - 80 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса составляет около 10 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z составляет около 20 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z составляет около 30 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z составляет около 40 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z составляет около 50 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z составляет около 60 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z составляет около 70 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z составляет около 80 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z имеет молекулярную массу около 40 кДа.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит фрагмент

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит амидную связь.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит фрагмент формулы (а)

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²- или к оставшейся части -Z,

ВР^а представляет собой точку разветвления, выбранную из группы, состоящей из -N<, -CR< и >С<,

-R выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила,

а представляет сбой 0, если ВР^а представляет собой -N< или -CR< и n представляет сбой 1, если ВР^а представляет собой >С<,

-S^a-, -S^a'-, -S^a''- и -S^a'''- независимо друг от друга представляют собой химическую связь или выбраны из группы, состоящей из С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила, где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R1, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R²)-, -S(O)₂N(R²)-, -S(O)N(R²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R²)S(O)₂N(R^2a)-, -S-, -N(R²)-, -OC(OR²)(R^2a)-, -N(R²)C(O)N(R^2a)- и -OC(O)N(R²)-,

каждый -T- независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, 8-30-членного карбополициклила и 8-30-членного гетерополициклила, где каждый -Т-независимо необязательно замещен одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R¹ независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR³, -OR³, -C(O)R³, -C(O)N(R³R^3a), -S(O)₂N(R³R^3a), -S(O)N(R³R^3a), -S(O)₂R³, -S(O)R³, -N(R³)S(O)₂N(R^3aR^3b), -SR³, -N(R³R^3a), -NO₂, -OC(O)R³, -N(R³)C(O)R^3a, -N(R³)S(O)₂R^3a, -N(R³)S(O)R^3a, -N(R³)C(O)OR^3a, -N(R³)C(O)N(R^3aR^3b), -OC(O)N(R³R^3a) и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R², -R^2a, -R³, -R^3a и -R^3b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и С_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными, и

-Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' независимо представляют собой полимерный фрагмент.

Согласно определенным вариантам осуществления ВР^а формулы (а) представляет собой -N<. Согласно определенным вариантам осуществления ВР^а формулы (а) представляет собой >С<. Согласно определенным вариантам осуществления ВР^а формулы (а) представляет собой -CR<. Согласно определенным вариантам осуществления -R представляет собой -Н. Соответственно, а формулы (а) представляет собой 0.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a- формулы (а) представляет собой химическую связь.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a- формулы (а) выбран из группы, состоящей из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)0-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R⁴)-, -S(O)₂N(R⁴)-, -S(O)N(R⁴)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R⁴)S(O)₂N(R^4a)-, -S-, -N(R⁴)-, -OC(OR⁴)(R^4a)-, -N(R⁴)C(O)N(R^4a)-, и -OC(O)N(R⁴)-, где -T- представляет собой 3-10-членный гетероциклил, и -R⁴ и -R^4a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a- формулы (а) представляет собой С_1-10 алкил, который прерывается одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -C(O)N(R⁴)- и -О-.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a'- формулы (а) представляет собой химическую связь.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a'- формулы (а) выбран из группы, состоящей из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -С(O)0-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R⁴)-, -S(O)₂N(R⁴)-, -S(O)N(R⁴)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R⁴)S(O)₂N(R^4a)-, -S-, -N(R⁴)-, -OC(OR⁴)(R^4a)-, -N(R⁴)C(O)N(R^4a)-, и -OC(O)N(R⁴)-, где -R⁴ и -R^4a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления -S^a'- формулы (а) выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, бутила, которые необязательно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -О-, -С(О)- и -C(O)N(R⁴)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a''- формулы (а) представляет собой химическую связь.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a''- формулы (а) выбран из группы, состоящей из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R⁴)-, -S(O)₂N(R⁴)-, -S(O)N(R⁴)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R⁴)S(O)₂N(R^4a)-, -S-, -N(R⁴)-, -OC(OR⁴)(R^4a)-, -N(R⁴)C(O)N(R^4a)-, и -OC(O)N(R⁴)-, где -R⁴ и -R^4a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления -S^a''- формулы (а) выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, бутила, которые необязательно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -О-, -С(О)- и -C(O)N(R⁴)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a'''- формулы (а) представляет собой химическую связь.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a'''- формулы (а) выбран из группы, состоящей из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -С(O)O, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R⁴)-, -S(O)₂N(R⁴)-, -S(O)N(R⁴)-, -S(O)r, -S(O)-, -N(R⁴)S(O)₂N(R^4a)-, -S-, -N(R⁴)-, -OC(OR⁴)(R^4a)-, -N(R⁴)C(O)N(R^4a)-, и -OC(O)N(R⁴)-, где -R⁴ и -R^4a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления -S^a'''- формулы (а) выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, бутила, которые необязательно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -О-, -С(О)- и -C(O)N(R⁴)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) независимо содержат полимер, выбранный из группы, состоящей из 2-метакрилоил-оксиэтилфосфоилхолинов, поли(акриловых кислот), поли(акрилатов), поли(акриламидов), поли(алкилокси) полимеров, поли(амидов), поли(амидоаминов), поли(аминокислот), поли(ангидридов), поли(аспартамидов), поли(масляных кислот), поли(гликолевых кислот), полибутилентерефталатов, поли(капролактонов), поли(карбонатов), поли(цианоакрилатов), поли(диметилакриламидов), поли(сложных эфиров), поли(этиленов), поли(этиленгликолей), поли(этиленоксидов), поли(этилфосфатов), поли(этилоксазолинов), поли(гликолевых кислот), поли(гидроксиэтилакрилатов), поли(гидроксиэтил-оксазолинов), поли(гидроксиметакрилатов), поли(гидроксипропилметакриламидов), поли(гидроксипропил метакрилатов), поли(гидроксипропилоксазолинов), поли(иминокарбонатов), поли(молочных кислот), поли(сополимеров молочных и гликолевых кислот), поли(метакриламидов), поли(метакрилатов), поли(метилоксазолинов), поли(органофосфазенов), поли(ортосложных эфиров), поли(оксазолинов), поли(пропиленгликолей), поли(силоксанов), поли(уретанов), поли(виниловых спиртов), поли(виниламинов), поли(винилметиловых простых эфиров), поли(винилпирролидонов), силиконов, целлюлоз, карбометилцеллюлоз, гидроксипропил метилцеллюлоз, хитинов, хитозанов, декстранов, декстринов, желатинов, гиалуроновых кислот и производных, функционализированных гиалуроновых кислот, маннанов, пектинов, рамногалактуронанов, крахмалов, гидроксиалкил крахмалов, гидроксиэтил крахмалов и других полимеров на основе углеводов, ксиланов и их сополимеров.

Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) независимо содержат фрагмент на основе ПЭГ. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) независимо содержат фрагмент на основе ПЭГ, содержащий по меньшей мере 20% PEG, согласно определенным вариантам осуществления, содержащий по меньшей мере 30%, согласно определенным вариантам осуществления, содержащий по меньшей мере 40% PEG, согласно определенным вариантам осуществления, содержащий по меньшей мере 50% PEG, согласно определенным вариантам осуществления, содержащий по меньшей мере 60% PEG, согласно определенным вариантам осуществления, содержащий по меньшей мере 70% PEG, согласно определенным вариантам осуществления, содержащий по меньшей мере 80% PEG и согласно определенным вариантам осуществления, содержащий по меньшей мере 90% PEG.

Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) независимо имеют молекулярную массу в интервале и включая 5 кДа - 50 кДа, согласно определенным вариантам осуществления имеют молекулярную массу в интервале и включая 5 кДа - 40 кДа, согласно определенным вариантам осуществления в интервале и включая 7.5 кДа - 35 кДа, согласно определенным вариантам осуществления в интервале и включая 7.5 - 30 кДа, согласно определенным вариантам осуществления в интервале и включая 10 - 30 кДа.

Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу около 5 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу около 7.5 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу около 10 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу около 12.5 кДа. Согласно другому варианту осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу около 15 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу около 20 кДа.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит один фрагмент формулы (а). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит два фрагмента формулы (а). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит три фрагмента формулы (а). Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой фрагмент формулы (а).

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит фрагмент формулы (b):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²- или к остальной части -Z, и

m и р независимо друг от друга представляют собой целое число в интервале и включая 150 - 1000, согласно определенным вариантам осуществления целое число в интервале и включая 150 - 500, согласно определенным вариантам осуществления целое число в интервале и включая 200 - 500, и согласно определенным вариантам осуществления целое число в интервале и включая 400 -500.

Согласно определенным вариантам осуществления m и р формулы (b) представляют собой одно и то же целое число. Согласно определенным вариантам осуществления m и р формулы (b) представляют собой около 450.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой фрагмент формулы (b).

Согласно определенным вариантам осуществления общая масса конъюгата РТН составляет по меньшей мере 10 кДа, как например по меньшей мере 12 кДа, как например по меньшей мере 15 кДа, как например по меньшей мере 20 кДа или как например по меньшей мере 30 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления общая масса конъюгата РТН составляет самое большее 250 кДа, как например самое большее 200 кДа, 180 кДа, 150 кДа или 100 кДа.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат РТН имеет формулу (IIe-i):

где

где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, показывает присоединение к фрагменту

где

m и р независимо представляют собой целое число в интервале и включая 400-500.

Согласно определенным вариантам осуществления -D присоединен к конъюгату PTH формулы (IIe-i) через N-концевую аминную функциональную группу фрагмента РТН.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат РТН имеет формулу (IIf-i):

где

Согласно определенным вариантам осуществления -D присоединен к конъюгату РТН формулы (IIf-i) через N-концевую аминную функциональную группу фрагмента РТН.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может содержать один или несколько дополнительных эксципиентов, как например, стабилизатор, антиадсорбционный агент, модификаторы вязкости и антибиотики. Подразумевается, что один эксципиент может иметь несколько функций, например, двойную или тройную.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может содержать стабилизатор, как например, стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из: аланин, аргинин, аспарагиновая кислота, глицин, гистидин, лизин, пролин, сахара такие как глюкоза, сахароза, трегалоза, полиолы, такие как глицерин, маннит, сорбит, соли, такие как фосфат калия, сульфат натрия, хелатирующие агенты, такие как EDTA, гексафосфат, лиганды, такие как ионы двухвалентных металлов, другие соли или органические молекулы, такие как фенольные производные, олигомеры или полимеры, такие как циклодекстрины, декстран, дендримеры, ПЭГ, PVP, протамин и HSA. Подразумевается, что сахар может выполнять несколько функций, например, быть агентом, регулирующем изотоничность, и стабилизатором.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может содержать антиадсорбционный агент, как например, антиадсорбционный агент, выбранный из группы, состоящей из ионных или неонных поверхностно-активных веществ или других белков или растворимых полимеров, которые используются для покрытия или конкурентной адсорбции на внутренней поверхности состава или контейнера состава, таких как полоксамер (Плюроник F-68), додециловый простой эфир ПЭГ (Brij 35), декстран, полиэтиленгликоль, ПЭГ-полигистидин, BSA, HSA и желатины. Выбранная концентрация и тип эксципиента зависят от эффекта, которого следует избегать, но обычно монослой поверхностно-активного вещества образуется на границе раздела прямо выше CMC.

Неожиданно было обнаружено, что в жидком фармацевтическом составе согласно настоящему изобретению не наблюдается окисление при остатках метионина фрагмента РТН в течение по меньшей мере 6 месяцев, что исключает необходимость антиоксиданта. Соответственно, согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав не содержит антиоксидант.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит конъюгат РТН, янтарную кислоту, маннит, м-крезол и необязательно антиоксидант.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав содержит

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.05 - 5.0 мг/мл
янтарная кислота	0.25 - 24 мг/мл
D-маннит	10 - 200 мг/мл
м-крезол	1-10 мг/мл

и где значение рН лежит в диапазоне от 3.0 до 6.0.

и где значение рН лежит в диапазоне от 3.5 до 5.0.

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.05 - 5.0 мг/мл
янтарная кислота	0.25 -24 мг/мл
D-маннит	10 - 200 мг/мл
м-крезол	1-10 мг/мл

и где значение рН лежит в диапазоне от 3.7 до 4.3.

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.1 - 5.0 мг/мл
янтарная кислота	0.25 - 24 мг/мл
D-маннит	10 - 200 мг/мл
м-крезол	1-10 мг/мл

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.1 - 5.0 мг/мл
янтарная кислота	0.25 - 24 мг/мл
D-маннит	10-200 мг/мл
м-крезол	1-10 мг/мл

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.1-5.0 мг/мл
янтарная кислота	0.25-24 мг/мл
D-маннит	10-200 мг/мл
м-крезол	1-10 мг/мл

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.1-1.5 мг/мл
янтарная кислота	0.6-6.0 мг/мл
D-маннит	30-60 мг/мл
м-крезол	1.5-3.5 мг/мл

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.25-0.35 мг/мл
янтарная кислота	1.0-1.4 мг/мл
D-маннит	36-48 мг/мл
м-крезол	2.0-3.0 мг/мл

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	около 0.15 мг/мл
янтарная кислота	1.0-3.0 мг/мл
D-маннит	33-51 мг/мл
м-крезол	1.0-3.0 мг/мл

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.15 мг/мл
янтарная кислота	1.0-3.0 мг/мл
D-маннит	33-51 мг/мл
м-крезол	1.0-3.0 мг/мл

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит конъюгат РТН, который содержит около 0.3 мг/мл фрагмента РТН, около 1.18 мг/мл янтарной кислоты, около 41.7 мг/мл D-маннита, около 2.5 мг/мл м-крезола, и где значение рН составляет около 4.0.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит конъюгат РТН, который содержит 0.3 мг/мл фрагмента РТН, 1.2 мг/мл янтарной кислоты, 42 мг/мл D-маннита, 3 мг/мл м-крезола, и где значение рН составляет 4.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит конъюгат РТН, который содержит 0.3 мг/мл фрагмента РТН, 1.18 мг/мл янтарной кислоты, 41.7 мг/мл D-маннита, 2.5 мг/мл м-крезола, и где значение рН составляет 4.0.

Специалистам в данной области известно, что жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может содержать рН-регулирующий агент.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит конъюгат РТН, который содержит около 0.3 мг/мл фрагмента РТН, около 1.18 мг/мл янтарной кислоты, около 41.7 мг/мл D-маннита, около 2.5 мг/мл м-крезола, около 3.5 мг/мл 1.0 Н гидр оксид а натрия и имеет рН около 4.0.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит конъюгат РТН, который содержит 0.3 мг/мл фрагмента РТН, 1.2 мг/мл янтарной кислоты, 42 мг/мл D-маннита, 3 мг/мл м-крезола, 4 мг/мл 1.0 Н гидроксида натрия и имеет рН около 4.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит конъюгат РТН, который содержит 0.3 мг/мл фрагмента РТН, 1.18 мг/мл янтарной кислоты, 41.7 мг/мл D-маннита, 2.5 мг/мл м-крезола, 3.5 мг/мл 1.0 Н гидроксида натрия и имеет рН около 4.0.

Жидкий фармацевтический состав, как описано выше, представляет собой жидкий фармацевтический состав, который является стабильным в течение по меньшей мере 6 месяцев, как например в течение по меньшей мере 7 месяцев, как например в течение по меньшей мере 8 месяцев, как например в течение по меньшей мере 9 месяцев, как например в течение по меньшей мере 10 месяцев, как например в течение по меньшей мере 11 месяцев, как например в течение по меньшей мере 12 месяцев. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 14 месяцев, как например в течение по меньшей мере 16 месяцев, как например в течение по меньшей мере 18 месяцев, как например в течение по меньшей мере 20 месяцев, как например в течение по меньшей мере 22 месяцев, как например в течение по меньшей мере 24 месяцев, как например в течение по меньшей мере 36 месяцев.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав, как описано выше, хранится при температурах в интервале от -80°С до 25°С, как например, от -20°С до 25°С, как например, от -15°С до 25°С, как например, от -10°С до 25°С, как например, от -5°С до 25°С, как например, от 0°С до 25°С, как например, от 2°С до 8°С. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав хранится при 2°С. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав хранится при 4°С. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав хранится при 5°С. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав хранится при 8°С. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав хранится при 10°С. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав хранится при 16°С. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав хранится при 20°С. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав хранится при 25°С. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав хранится при 30°С. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав хранится при 40°С.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 36 месяцев, при хранении при 2°С до 8°С. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 36 месяцев, при хранении при 2°С. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 6 месяцев, при хранении при 5°С. Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 2 недель при хранении при 30°С.

Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружила, что в жидком фармацевтическом составе согласно настоящему изобретению обратимая связь между РТН и растворимый в воде носителем является стабильной, что устраняет необходимость лиофилизации и восстановления из лиофилизата. Однако, если желательно, жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может быть высушен, например, путем лиофилизации, с образованием высушенного, например, лиофилизированного фармацевтического состава.

Согласно определенным вариантам осуществления способ получения жидкого фармацевтического состава согласно настоящему изобретению включает стадии:

(i) смешивание конъюгата РТН с по меньшей мере буферным агентом, агентом, регулирующим изотоничность, консервантом и необязательно антиоксидантом,

(ii) доведение значения рН смеси согласно стадии (i),

(iii) необязательно, фильтрация смеси согласно стадии (ii),

(iv) перенос количеств смеси согласно стадии (ii) или (iii), эквивалентных желаемому числу доз в контейнер,

(v) герметизация контейнера, и

где порядок стадий (ii) и (iii) необязательно может быть обратным.

Согласно определенным вариантам осуществления порядок стадий (ii) и (iii) не изменяют на обратный.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат РТН на стадии (i) смешивают с буферным агентом, агентом, регулирующим изотоничность, консервантом и необязательно антиоксидантом.

(i) смешивание конъюгата РТН с по меньшей мере янтарной кислотой, маннитом, м-крезолом и необязательно антиоксидантом,

(v) герметизация контейнера, и

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат РТН на стадии (i) смешивают с янтарной кислотой, маннитом, м-крезолом и необязательно антиоксидантом.

(i) смешивание конъюгата РТН с по меньшей мере янтарной кислотой, маннитом, м-крезолом и необязательно антиоксидантом с получением состава, содержащего:

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.05-5.0 мг/мл
янтарная кислота	0.25-24 мг/мл
D-маннит	10-200 мг/мл
м-крезол	1-10 мг/мл

(ii) доведение значения рН смеси согласно стадии (i) до значения рН в интервале от рН 3.0 до рН 6.0 с помощью NaOH и HCl,

(v) герметизация контейнера, и

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат РТН на стадии (i) смешивают с янтарной кислотой, маннитом и м-крезолом с получением состава, содержащего:

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.05-5.0 мг/мл
янтарная кислота	0.25-24 мг/мл
D-маннит	10-200 мг/мл
м-крезол	1-10 мг/мл.

Согласно определенным вариантам осуществления на стадии (ii) значение рН доводят до значения рН в интервале от рН 3.5 до рН 5.0. Согласно определенным вариантам осуществления на стадии (ii) значение рН доводят до значения рН в интервале от рН 3.7 до рН 4.3.

(i) смешивание конъюгата РТН с по меньшей мере следующими: янтарная кислота, маннит, м-крезол, необязательно антиоксидант с получением состава, содержащего:

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.10-5.0 мг/мл
янтарная кислота	0.25-24 мг/мл
D-маннит	10-200 мг/мл
м-крезол	1-10 мг/мл

(vi) перенос количеств смеси согласно стадии (ii) или (iii), эквивалентных желаемому числу доз в контейнер,

(vii) герметизация контейнера, и

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.10-5.0 мг/мл
янтарная кислота	0.25-24 мг/мл
D-маннит	10-200 мг/мл
м-крезол	1-10 мг/мл.

Согласно определенным вариантам осуществления способ получения жидкого фармацевтического состава согласно настоящему изобретению включает стадии

(i) смешивание конъюгата РТН с по меньшей мере янтарной кислотой, маннитом, м-крезолом и необязательно антиоксид антом с получением состава, содержащего:

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.10-1.5 мг/мл
янтарная кислота	0.6-6 мг/мл
D-маннит	30-60 мг/мл
м-крезол	1.5-3.5 мг/мл

(v) герметизация контейнера, и

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.10-1.5 мг/мл
янтарная кислота	0.6-6 мг/мл
D-маннит	30-60 мг/мл
м-крезол	1.5-3.5 мг/мл.

(v) герметизация контейнера, и

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.25-0.35 мг/мл
янтарная кислота	1.0-1.4 мг/мл
D-маннит	36-48 мг/мл
м-крезол	2.0-3.0 мг/мл.

Согласно определенным вариантам осуществления способ получения жидкого фармацевтического состава согласно настоящему изобретению включает стадии (i) смешивание конъюгата РТН с по меньшей мере янтарной кислотой, маннитом, м-крезолом и необязательно антиоксид антом с получением состава, содержащего:

(v) герметизация контейнера, и

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.15 мг/мл
янтарная кислота	1.0-3.0 мг/мл
D-маннит	33-51 мг/мл
м-крезол	1.0-3.0 мг/мл.

(i) смешивание конъюгата РТН с по меньшей мере янтарной кислотой, маннитом, м-крезолом и необязательно антиоксид антом с получением состава, содержащего

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.30 мг/мл
янтарная кислота	1.18 мг/мл
D-маннит	41.7 мг/мл
м-крезол	2.5 мг/мл

(ii) доведение значения рН смеси согласно стадии (i) до рН около 4 с помощью NaOH и HCl,

(v) герметизация контейнера, и где порядок стадий (ii) и (iii) необязательно может быть обратным.

Конъюгат РТН, в котором фрагмент РТН	0.30 мг/мл
янтарная кислота	1.18 мг/мл
D-маннит	41.7 мг/мл
м-крезол	2.5 мг/мл.

Согласно определенным вариантам осуществления значение рН состава согласно стадии (i) доводят до рН 4.

Согласно одному аспекту настоящее изобретение относится к контейнеру, содержащему жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению.

Согласно определенным вариантам осуществления контейнер может быть выбран из группы, состоящей из пузырька, шприца, как например, двухкамерный шприц, ампулы и картриджа, как например двухкамерный картридж.

Согласно определенным вариантам осуществления картридж предназначен для применения со шприцем-ручкой, как например автоинжектор.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению обеспечивается в виде однократной дозы, что означает, что контейнер, содержащий жидкий фармацевтический состав, содержит одну терапевтическую дозу.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав содержит множество доз, что означает, что контейнер содержащий жидкий фармацевтический состав, содержит более чем одну терапевтическую дозу.

Согласно определенным вариантам осуществления многодозовый жидкий фармацевтический состав содержит по меньшей мере 2 дозы, как например по меньшей мере 4 дозы, как например по меньшей мере 6 доз, как например по меньшей мере 8 доз, как например по меньшей мере 10 доз, как например по меньшей мере 12 доз конъюгата РТН и согласно определенным вариантам осуществления как например по меньшей мере 14 доз.

Согласно определенным вариантам осуществления многодозовый жидкий фармацевтический состав содержит по меньшей мере 2, 4, 6, 8, 10, 12 или 14 доз конъюгата РТН.

Таким образом, согласно другому аспекту настоящего изобретения жидкий фармацевтический состав обеспечивается в виде многодозового состава.

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к жидкому фармацевтическому составу согласно настоящему изобретению для применения в качестве лекарственного средства.

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к жидким фармацевтическим составам согласно настоящему изобретению для применения для лечения, контроля, отсрочки или предупреждения одного или нескольких заболеваний, которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предупредить с помощью РТН.

настоящее изобретение относится к жидким фармацевтическим составам согласно настоящему изобретению для применения для лечения одного или нескольких заболеваний, которое можно лечить с помощью РТН.

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способу лечения, контроля, отсрочки или предупреждения у пациента одного или нескольких заболеваний, которое можно лечить с помощью РТН, где способ включает введение пациенту терапевтически эффективного количества жидкого фармацевтического состава согласно настоящему изобретению.

Согласно определенным вариантам осуществления указанные одно или нескольких заболеваний, которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предупредить с помощью РТН, выбраны из группы, состоящей из: гипопаратиреоидизма, гиперфосфатемия, остеопороз, восстановление перелома, размягчение костей, размягчение костей и остеопороз у пациентов с гипофосфатазией, вызванный стероидами остеопороз, мужской остеопороз, артрит, остеоартрит, незавершенный остеогенез, фиброзная дисплазия, ревматоидный артрит, болезнь Паджета, гуморальная гиперкальцемия, ассоциированная с злокачественным новообразованием, остеопении, периодонтит, перелом костей, алопеция, вызванная химиотерапией алопеция и тромбоцитопения.

Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предупредить с помощью РТН, выбраны из группы, состоящей из гипопаратиреоидизма, гиперфосфатемии, остеопороза, восстановления перелома, размягчения костей, размягчения костей и остеопороза у пациентов с гипофосфатазией, вызванного стероидами остеопороза, мужского остеопороза, артрита, остеоартрита, незавершенного остеогенеза, фиброзной дисплазии, ревматоидного артрита, болезни Паджета, гуморальной гиперкальцемии, ассоциированной с злокачественным новообразованием, остеопении, периодонтита, перелома костей, алопеции, вызванной химиотерапией алопеции и тромбоцитопении, хронического периодонтита, остеонекроза челюсти и плохо заживающих переломов из-за мутаций гена ALPL.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на CTLA-4 (цитотоксический Т-лимфоцит-ассоциированный белок 4), PD-1 (белок запрограммированной гибели клеток 1), PD-L1 (лиганд-1 запрограммированной смерти клетки 1), PD-L2 (лиганд-запрограммированной смерти клетки), KIR (иммуноглобулиноподобный рецептор киллерных клеток), В7-Н3, В7-Н4, BTLA (аттенюатор В- и Т-лимфоцитов), LAG3 (ген активации лимфоцитов 3), TIM-3 (домен иммуноглобулина Т-клеток и домен 3 муцина), VISTA (V-доменный Ig подавить активации Т клеток), ILT2/LILRB1 (Ig-подобный транскрипт 2/лейкоцит Ig-подобный рецептор 1), ILT3/LILRB4 (Ig-подобный транскрипт 3/ лейкоцит Ig-подобный рецептор 4), ILT4/LILRB2 (Ig-подобный транскрипт 4/ лейкоцит Ig-подобный рецептор 2), TIGIT (иммунорецептор Т клеток с доменами Ig и ITIM), NKG2A, PVRIG или их комбинации.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на CTLA-4, PD-1, PD-L1 или их комбинацию.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на CTLA-4, с ингибиторами иммунных контрольных точек, как например, ипилимумаб, тремелимумаб, MK-1308, FPT155, PRS010, BMS-986249, BPI-002, CBT509, JS007, ONC392, ТЕ1254, IBI310, BR02001, CG0161, KN044, PBI5D3H5, BCD145, ADU1604, AGEN1884, AGEN1181, CS1002 или СР675206.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на PD-1, с ингибиторами иммунных контрольных точек как например, пембролизумаб, ниволумаб, пидилизумаб, AMP-224, BMS-936559, цемиплимаб или PDR001.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на PD-L1, с ингибиторами иммунных контрольных точек, как например, MDX-1105, MEDI4736, атезолизумаб, авелумаб, BMS-936559 или дурвалумаб.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на PD-L2.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на KIR, с ингибиторами иммунных контрольных точек, как например, лирилумаб (IPH2102) или IPH2101.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на В7-Н3, с ингибиторами иммунных контрольных точек, как например, MGA271.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на В7-Н4 с ингибиторами иммунных контрольных точек, как например, FPA150.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на BTLA.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на LAG3 с ингибиторами иммунных контрольных точек, как например, IMP321 (эфтилагимод альфа), релатлимаб, MK-4280, AVA017, BI754111, ENUM006, GSK2831781, INCAGN2385, LAG3Ig, LAG525, REGN3767, Sym016, Sym022, TSR033, TSR075 или XmAb22841.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на TIM-3 с ингибиторами иммунных контрольных точек, как например, LY3321367, MBG453 или TSR-022.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на VISTA с ингибиторами иммунных контрольных точек, как например, JNJ-61610588.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на ILT2/LILRB1.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на ILT3/LILRB4.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на ILT3/LILRB2 с ингибиторами иммунных контрольных точек, как например, MK-4830.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на TIGIT с ингибиторами иммунных контрольных точек, как например, MK-7684, PTZ-201, RG6058 или СОМ902.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на NKG2A с ингибиторами иммунных контрольных точек, как например, IPH-2201.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на PVRIG с ингибиторами иммунных контрольных точек, как например, СОМ701.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным как на PD-1, так и CTLA-4.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек ниволумабом.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек ипилимумабом.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек пембролизумабом.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек комбинацией ниволумаба и ипилимумаба.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является ревматоидный артрит, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является ревматоидный артрит, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на PD-1 или PD-L1.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является ревматоидный артрит, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на PD-1.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является ревматоидный артрит, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек, нацеленным на PD-L1.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является ревматоидный артрит, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек ниволумабом.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является ревматоидный артрит, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек пембролизумабом.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является ревматоидный артрит, вызванный лечением ингибитором иммунных контрольных точек комбинацией ниволумаба и ипилимумаба.

Согласно определенным вариантам осуществления указанным заболеванием является ревматоидный артрит, который снова возник после лечения ингибитором иммунных контрольных точек.

Жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению можно вводить, например, посредством местного, энтерального или парентерального введения и методами наружного применения, инъекцией или инфузией, в том числе внутрисуставное, околосуставное, внутрикожное, подкожное, внутримышечное, внутривенное, внутрикостное, внутрибрюшинное, интратекальное, внутрикапсулярное, внутриглазное, интравитреальое, интратимпанальное, внутрипузырное, внутрисердечное, транстрахеальное, субкутикулярное, субкапсулярное, внутрижелудочковое введение, внутригрудинная инъекция, инфузия, интраназальное, пероральное, транспульмональное и транс дермальное введение, прямая доставка в мозг через имплантированное устройство, позволяющее доставить настоящее изобретение или тому подобное в ткань мозга или мозговые жидкости (например, резервуар Оммайя), прямая интрацеребровентрикулярная инъекция или инфузия, инъекция или инфузия в мозг или связанные с мозгом области, инъекция в субхориоидальное пространство, ретроорбитальная инъекция и окулярная инсталляция, предпочтительно посредством подкожной инъекции.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению вводят посредством подкожной инъекции.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению вводят посредством подкожной инъекции с помощью шприца и иглы или шприца-ручки, как например, авто инжектор.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению вводят посредством подкожной инъекции с помощью шприца и иглы.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению вводят посредством подкожной инъекции с помощью шприца-ручки.

Согласно определенным вариантам осуществления жидкий фармацевтический состав согласно настоящему изобретению вводят посредством подкожной инъекции с помощью авто инжектора.

Период времени между двумя последовательными подкожными введениями, т.е. интервал введения, согласно определенным вариантам осуществления, составляет по меньшей мере каждые 12 часов, 24 часа, 36 часов, 48 часов, 60 часов, 72 часа, 84 часа, 96 часов, 108 часов, 120 часов, 132 часа, 144 часа, 156 часов, одна неделя, две недели, три недели или четыре недели.

Согласно определенным вариантам осуществления период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет 12 часов. Согласно определенным вариантам осуществления период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет 24 часа. Согласно определенным вариантам осуществления период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет 48 часов. Согласно определенным вариантам осуществления период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет 72 часа. Согласно определенным вариантам осуществления период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет 96 часов. Согласно определенным вариантам осуществления период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет 120 часов. Согласно определенным вариантам осуществления период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет 144 часа. Согласно определенным вариантам осуществления период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет одну неделю.

Примеры Материалы и способы

Все материалы были коммерчески доступны, если не указано иное.

Для получения составов готовили сток-растворы эксципиента. Все эксципиенты смешивали и заполняли водой до 90% от конечного объема, и расчетное количество раствора NaOH было добавлено в раствор для достижения желаемого значения рН конечного состава после добавления соединения 1. Затем соответствующее количество раствора соединение 1 добавляли и растворяли. После регулирования рН объем доводили до конечного объема в мерных колбах. Составы фильтровали через фильтр PVDF 0,2 мкм перед заполнением.

Визуальная оценка: картриджи проверяли на наличие или отсутствие видимых частиц при осторожном ручном радиальном перемешивании в течение 5 секунд перед белым фоном и в течение 5 секунд перед черным фоном в соответствии с Европейской фармакопеей (8-е издание, монография 2.9.20). Оценку проводили независимо двумя подготовленными экспертами. Для классификации наблюдаемых видимых частиц использовалась числовая оценка на основе «Deutscher Arzneimittel-Codex» (DAC 2006).

Значение рН: Значение рН составов измеряли при комнатной температуре с помощью калиброванного рН-метра с использованием электрода с нормальной ионной силой.

Осмоляльность: Осмоляльность образцов измеряли методом понижения точки замерзания.

Визуализация микропотока: Измерения визуализации микропотока проводили на системе анализатора частиц MFI-5200.

HP-SEC использовали для определения чистоты соединения 1: образцы анализировали на колонке 10х300 мм, состоящей из поперечно-сшитой агарозы и декстрана класса, подходящего для фракционирования глобулярных белков с молекулярной массой от 10 000 до 600 000 г/моль. Длина волны обнаружения была при длине волны 215 нм.

RP-HPLC применяли для обнаружения свободного РТН и определения чистоты и содержания соединения 1: использовали колонку С 18 2,1х100 мм с размером пор 130 и размером частиц 1,7 мкм. Детектирование проводили на длине волны 215 нм. Содержание определяли путем измерения эталонного образца.

Анализ RP-HPLC после высвобождения in vitro: высвобождение РТН из соединения 1 проводили при рН 10,1 и 5°С, чтобы минимизировать разрушение пептида. После 76 ч инкубации при 5°С выделение останавливали добавлением уксусной кислоты. Полученный образец подвергали RP-HPLC на колонке С 18 2,1 у 100 мм с размером пор 130 и размером частиц 1,7 мкм. Детектирование проводили на длине волны 215 нм.

Пример 1: Синтез соединения 1

Соединение 1 синтезировали как описано в WO 2017/148883 А1 для коньюгата 18.

Пример 2: Тестирование стабильности составов, содержащих соединение 1

Оценивали влияние значения рН жидкого фармацевтического состава на количество высвобожденного РТН(1-34) из соединения 1. Для этого были приготовлены четыре различных состава (F1, F2, F3 и F4), содержащие соединение 1 (таблица 1). Каждый состав содержал 0,4 мг РТН (1-34)/мл.

Составы помещали в картриджи и инкубировали в инкубаторах, установленных на 5°С, 25°С/60% RH и 40°С/75% RH в течение до 3 месяцев. Через 2 недели, 1 месяц и 3 месяца по одному картриджу на состав и условия хранения извлекали и подвергали анализу. В таблице 2 показано количество высвобожденного свободного РТН с течением времени для F1, F2, F3 и F4, как определено с помощью RP-HPLC. Было замечено, что большее количество свободного РТН выделялось в жидких фармацевтических составах с более высокими значениями рН.

5°С выделение останавливали добавлением уксусной кислоты. Полученный образец подвергали анализу RP-HPLC.

Таблица 3 показывает, что процент соединений дезамидированного пептида более значителен для составов с более высокими значениями рН, в то время как процент усеченных соединений пептида, т.е. РТН (1-30) более значителен в составах с более низкими значениями рН. В целом, самая высокая чистота пептида с течением времени наблюдалась для состава F1 для образцов, инкубированных при 40°С/75% RH.

Пример 3: Стабильность к окислению соединений, содержащих 1

Исследовано влияние антиоксидантов и кислорода в свободном пространстве (HS) на стабильность соединения 1 и свободного РТН. Были приготовлены четыре различных состава (F5, F6, F7 и F8), содержащие соединение 1 при рН 4,0, в которых варьировали концентрацию антиоксиданта и объем HS (таблица 4). Каждый состав содержал 0,4 мг РТН(1-34)/мл.

Составы помещали в картриджи с различным свободным пространством (без HS, 50 мкл HS или 200 мкл HS). Картриджи инкубировали в инкубаторах при 5°С и 25°С/60% относительной влажности до 6 месяцев. Через 2 недели, 1 месяц, 3 месяца и 6 месяцев один картридж для каждого состава и условий хранения был извлечен и подвергнут анализу RP-HPLC.

Таблица 5 показывает, что для составов, хранящихся при 5°С, свободный РТН не выделялся в течение 6 месяцев. В составах, хранящихся при 25°С, через 3 месяца было обнаружено примерно 0,9% свободного РТН.

После индуцированного высвобождения РТН из соединения 1 (рН 10,1 и 5°С) полученные смеси подвергали анализу RP-HPLC. Как показано в Таблице 6, обнаруженное количество окисленных веществ не изменилось для всех составов.

Вариации объема свободного пространства и концентрации антиоксиданта не оказали значительного влияния на уровни окисленных веществ.

Пример 4: Влияние концентрации консерванта на стабильность соединения 1

Исследовано влияние концентрации консерванта и типа консерванта на стабильность соединения 1 и пептида. Для достижения этой цели были приготовлены четыре различных состава (F9, F10, F11, F12), содержащие соединение 1 при рН 4,0. Каждый состав содержал 0,4 мг РТН (1-34)/мл. Составы помещали в картриджи и инкубировали в инкубаторах при 5°С и 40°С/75% RH в течение 6 месяцев. Через 1 месяц, 3 месяца и 6 месяцев по одному картриджу на состав и условия хранения извлекали из соответствующего инкубатора и подвергали анализу.

Анализ RP-HPLC не выявил свободного РТН для всех составов, которые хранили при 5°С в течение 6 месяцев. Для составов, хранящихся при 40°С, уровни свободного РТН увеличивались до 5,0% и 5,5% через 3 месяца. Таблица 8 показывает, что для тестируемых составов не было обнаружено значительных различий.

После высвобождения РТН из соединения 1 (рН 10,1 и 5°С) полученные растворы подвергали анализу RP-HPLC. Как показано в таблице 9, анализ RP-HPLC не показал снижения чистоты пептида для всех составов, хранящихся при 5°С. Уровни дезамидирования, усечения, т.е. количество ПТГ (1-30), и степень окисления не изменились после 6 месяцев хранения при 5°С. Составы, хранящиеся при 40°С в течение 3 месяцев, показали снижение чистоты пептидов около с 90% при t0 до 56-58% через 3 месяца. Дезамидирование увеличилось с 2% до около 17%, РТН (1-30), увеличилось с 0,1-0,2% до 10%. Уровень окисления не изменился, за исключением небольшого увеличения для состава F9. Существенных различий между анализируемыми составами не наблюдалось. Следовательно, концентрация или тип консерванта не оказывает значительного влияния на стабильность соединения 1 и чистоту пептида.

Пример 5: Тестирование стабильности составов, содержащих соединение 1

Оценивали влияние концентрации соединения 1 и эксципиентов, а также влияние рН. Для этой цели были приготовлены 19 составов (F13 - F31, см. Таблицу 10), содержащих соединение 1 при рН в диапазоне 3,5-4,5. Каждый состав содержал 0,2-0,8 мг РТН (1-34)/мл.

Составы помещали в картриджи и инкубировали в инкубаторах, установленных на 5°С, 25°С/60% RH, 30°С/65% RH и 40°С/75% RH в течение до 6 месяцев. Через 1 месяц, 3 месяца и 6 месяцев по одному картриджу на состав и условия хранения извлекали из соответствующего инкубатора и подвергали анализу. Результаты визуального контроля показали, что для всех жидких фармацевтических составов от F13 до F31 образцы были прозрачными, бесцветными и не содержали частиц во время исследования стабильности (6 месяцев). Лишь эпизодически были обнаружены некоторые видимые частицы. Также в выбранных условиях не образовывались видимые агрегаты.

Значение рН жидких фармацевтических составов от F13 до F31 контролировали в течение 24 месяцев при хранении при 5°С, в течение 6 месяцев при хранении при 25°С и 30°С и в течение 3 месяцев при хранении при 40°С, и наблюдали, что значения рН оставались в пределах ±0,1 от заданного значения. Никаких различий в составах не наблюдалось.

Затем были измерены разные значения осмоляльности жидких фармацевтических составов от F13 до F31 из-за разных количеств эксципиента в составах. Неизменные значения осмоляльности были обнаружены для всех составов после 24 месяцев хранения при 5°С, после 6 месяцев хранения при 25°С и 30°С, а также после 3 месяцев хранения при 40°С.

Что касается результатов Micro Flow-Imaging (MFI), было отмечено, что очень низкие концентрации частиц были измерены для всех составов при t0 и во время исследования стабильности в течение до 24 месяцев, когда составы хранили при 5°С, и до 6 месяцев, когда составы хранили при 25°С и 30°С и до 3 месяцев, когда составы хранили при 40°С. Каплеобразные частицы силиконового масла обнаруживались лишь эпизодически.

Также было проведено исследование фотостабильности с тестом на воздействие света, где жидкий состав, содержащий 0,3 мг РТН (1-34) / мл, 1,18 мг/мл янтарной кислоты, 41,7 мг/мл маннита, 2,5 мг/мл м-крезола при рН 4.0, подвергали освещению 71798 люкс-часов в сочетании с УФ-светом 8 Вт/м². Никаких различий между подверженным воздействию составом и эталоном не наблюдалось.

Согласно анализу HP-SEC, доля высокомолекулярных веществ не изменилась в течение 24 месяцев, когда составы хранили при 5°С, и в течение 6 месяцев исследования стабильности, когда составы хранили при 25°С, 30°С и 40°С. Постоянное количество частиц HMW указывает на то, что агрегаты не образуются в течение 24 месяцев, когда составы хранили при 5°С, и в течение 6 месяцев, когда составы хранили при 25°С, 30°С и 40°С.

Анализ с помощью RP-HPLC показал, что содержание соединения 1 не изменилось, когда составы хранили при 5°С в течение до 24 месяцев (таблица 11). Незначительное снижение содержания наблюдалось для некоторых составов при хранении в течение 6 месяцев при 25°С. Как показано в Таблице 12, эта тенденция была более выраженной при хранении при более высоких температурах. Составы с более высоким значением рН показали немного более выраженное снижение содержания соединения 1, чем составы с более низким рН.

Чистота соединения 1 показала лишь небольшое снижение, когда составы хранили при 5°С в течение до 24 месяцев (таблица 13). Снижение чистоты было более выраженным при более высоких температурах для всех составов (таблица 14). Составы с более высокими значениями рН были более подвержены влиянию, чем составы с более низким рН.

В составах, хранимых при 5°С в течение 24 месяцев, свободный РТН не обнаруживался. Для составов, хранящихся при более высоких температурах, с течением времени наблюдалось небольшое увеличение свободного РТН.

Составы с более высокими значениями рН показали более сильное увеличение количества свободных форм РТН, чем составы с более низкими значениями рН, но не наблюдали существенных различий между проанализированными составами.

RP-HPLC после высвобождения РТН (рН 10,1 и 5°С) не показала значительных изменений чистоты свободного РТН для составов, хранящихся при 5°=С в течение до 24 месяцев. При более высоких температурах было обнаружено снижение чистоты в зависимости от времени и температуры. Составы с более низкими значениями рН характеризовались несколько более низкой чистотой, чем составы с более высоким рН.

Как показано в таблицах 21 и 22, после высвобождения РТН не было обнаружено существенного увеличения окисленных частиц ни для каких составов или условий хранения. Во всех составах было обнаружено лишь незначительное увеличение одного окисленного вещества. Это увеличение было несколько более выраженным при более высокой температуре.

RP-HPLC анализы показали зависящее от времени и температуры увеличение РТН (1-30) для всех составов. Составы с более низким рН характеризовались немного большим количеством РТН (1-30) по сравнению с составами с более высокими значениями рН.

Таблицы 24 и 25 показывают зависящее от температуры и времени увеличение количества дезамидированных форм для всех составов. Для составов, хранящихся при 5°С, количество дезамидированных форм существенно не изменилось после хранения в течение 24 месяцев.

Аббревиатуры

CHAPS - 3-[(3-холамидопрпил)диметиламмонио]-1-пропансульфонат

EDTA - этилендиаминтетрауксусная кислота

HEPES - 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновая кислота

LC-MS - сопряженная с жидкостной хроматографией масс-спектрометрия

м - месяц

n.d. - не поддается определению или ниже предела количественного определения (LOQ)

рН - potential Hydrogenii

РТН - паращитовидный гормон

RH - относительная влажность

RP-HPLC - обращенно-фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография

SEC - эксклюзионная хроматография по размеру

с - секунды

TFA - трифторуксусная кислота

ТРИС - трис(гидроксиметил)аминометан

UPLC - сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография

н - неделя.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Асцендис Фарма Гроус Дизордерс А/С

<120> ЖИДКИЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ СОСТАВЫ КОНЪЮГАТОВ PTH

<130> CPX72171PC

<160> 122

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 84

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<400> 1

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu Thr Lys

65 70 75 80

Ala Lys Ser Gln

<210> 2

<211> 83

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-83

<400> 2

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu Thr Lys

65 70 75 80

Ala Lys Ser

<210> 3

<211> 82

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-82

<400> 3

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu Thr Lys

65 70 75 80

Ala Lys

<210> 4

<211> 81

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-81

<400> 4

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu Thr Lys

65 70 75 80

Ala

<210> 5

<211> 80

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-80

<400> 5

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu Thr Lys

65 70 75 80

<210> 6

<211> 79

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-79

<400> 6

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu Thr

65 70 75

<210> 7

<211> 78

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-78

<400> 7

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu

65 70 75

<210> 8

<211> 77

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-77

<400> 8

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val

65 70 75

<210> 9

<211> 76

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-76

<400> 9

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn

65 70 75

<210> 10

<211> 75

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-75

<400> 10

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val

65 70 75

<210> 11

<211> 74

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-74

<400> 11

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp

65 70

<210> 12

<211> 73

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-73

<400> 12

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala

65 70

<210> 13

<211> 72

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-72

<400> 13

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys

65 70

<210> 14

<211> 71

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-71

<400> 14

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp

65 70

<210> 15

<211> 70

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-70

<400> 15

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala

65 70

<210> 16

<211> 69

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-69

<400> 16

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu

65

<210> 17

<211> 68

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-68

<400> 17

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly

65

<210> 18

<211> 67

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-67

<400> 18

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu

65

<210> 19

<211> 66

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-66

<400> 19

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser

65

<210> 20

<211> 65

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-65

<400> 20

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys

65

<210> 21

<211> 64

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-64

<400> 21

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

<210> 22

<211> 63

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-63

<400> 22

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His

50 55 60

<210> 23

<211> 62

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-62

<400> 23

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser

50 55 60

<210> 24

<211> 61

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-61

<400> 24

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu

50 55 60

<210> 25

<211> 60

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-60

<400> 25

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val

50 55 60

<210> 26

<211> 59

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-59

<400> 26

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu

50 55

<210> 27

<211> 58

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-58

<400> 27

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val

50 55

<210> 28

<211> 57

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-57

<400> 28

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn

50 55

<210> 29

<211> 56

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-56

<400> 29

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp

50 55

<210> 30

<211> 55

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-55

<400> 30

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu

50 55

<210> 31

<211> 54

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-54

<400> 31

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys

50

<210> 32

<211> 53

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-53

<400> 32

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys

50

<210> 33

<211> 52

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-52

<400> 33

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg

50

<210> 34

<211> 51

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-51

<400> 34

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro

50

<210> 35

<211> 50

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-50

<400> 35

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg

50

<210> 36

<211> 49

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-49

<400> 36

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln

<210> 37

<211> 48

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-48

<400> 37

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

<210> 38

<211> 47

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-47

<400> 38

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly

35 40 45

<210> 39

<211> 46

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-46

<400> 39

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala

35 40 45

<210> 40

<211> 45

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-45

<400> 40

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp

35 40 45

<210> 41

<211> 44

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-44

<400> 41

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg

35 40

<210> 42

<211> 43

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-43

<400> 42

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro

35 40

<210> 43

<211> 42

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-42

<400> 43

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala

35 40

<210> 44

<211> 41

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH-41

<400> 44

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu

35 40

<210> 45

<211> 40

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-40

<400> 45

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro

35 40

<210> 46

<211> 39

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-39

<400> 46

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala

35

<210> 47

<211> 38

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-38

<400> 47

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly

35

<210> 48

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-37

<400> 48

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu

35

<210> 49

<211> 36

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-36

<400> 49

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala

35

<210> 50

<211> 35

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-35

<400> 50

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val

35

<210> 51

<211> 34

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-34

<400> 51

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe

<210> 52

<211> 33

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-33

<400> 52

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn

<210> 53

<211> 32

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-32

<400> 53

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

<210> 54

<211> 31

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-31

<400> 54

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val

20 25 30

<210> 55

<211> 30

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-30

<400> 55

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp

20 25 30

<210> 56

<211> 29

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-29

<400> 56

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln

20 25

<210> 57

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-28

<400> 57

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu

20 25

<210> 58

<211> 27

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-27

<400> 58

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys

20 25

<210> 59

<211> 26

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-26

<400> 59

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys

20 25

<210> 60

<211> 25

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> человеческий PTH 1-25

<400> 60

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg

20 25

<210> 61

<211> 84

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-84

<220>

<221> MOD_RES

<222> (84)..(84)

<223> амидирование

<400> 61

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu Thr Lys

65 70 75 80

Ala Lys Ser Gln

<210> 62

<211> 83

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-83

<220>

<221> MOD_RES

<222> (83)..(83)

<223> амидирование

<400> 62

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu Thr Lys

65 70 75 80

Ala Lys Ser

<210> 63

<211> 82

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-82

<220>

<221> MOD_RES

<222> (82)..(82)

<223> амидирование

<400> 63

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu Thr Lys

65 70 75 80

Ala Lys

<210> 64

<211> 81

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-81

<220>

<221> MOD_RES

<222> (81)..(81)

<223> амидирование

<400> 64

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu Thr Lys

65 70 75 80

Ala

<210> 65

<211> 80

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-80

<220>

<221> MOD_RES

<222> (80)..(80)

<223> амидирование

<400> 65

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu Thr Lys

65 70 75 80

<210> 66

<211> 79

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-79

<220>

<221> MOD_RES

<222> (79)..(79)

<223> амидирование

<400> 66

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu Thr

65 70 75

<210> 67

<211> 78

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-78

<220>

<221> MOD_RES

<222> (78)..(78)

<223> амидирование

<400> 67

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val Leu

65 70 75

<210> 68

<211> 77

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-77

<220>

<221> MOD_RES

<222> (77)..(77)

<223> амидирование

<400> 68

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn Val

65 70 75

<210> 69

<211> 76

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-76

<220>

<221> MOD_RES

<222> (76)..(76)

<223> амидирование

<400> 69

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val Asn

65 70 75

<210> 70

<211> 75

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-75

<220>

<221> MOD_RES

<222> (75)..(75)

<223> амидирование

<400> 70

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp Val

65 70 75

<210> 71

<211> 74

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-74

<220>

<221> MOD_RES

<222> (74)..(74)

<223> амидирование

<400> 71

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala Asp

65 70

<210> 72

<211> 73

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-73

<220>

<221> MOD_RES

<222> (73)..(73)

<223> амидирование

<400> 72

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys Ala

65 70

<210> 73

<211> 72

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-72

<220>

<221> MOD_RES

<222> (72)..(72)

<223> амидирование

<400> 73

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp Lys

65 70

<210> 74

<211> 71

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-71

<220>

<221> MOD_RES

<222> (71)..(71)

<223> амидирование

<400> 74

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala Asp

65 70

<210> 75

<211> 70

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-70

<220>

<221> MOD_RES

<222> (70)..(70)

<223> амидирование

<400> 75

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu Ala

65 70

<210> 76

<211> 69

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-69

<220>

<221> MOD_RES

<222> (69)..(69)

<223> амидирование

<400> 76

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly Glu

65

<210> 77

<211> 68

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-68

<220>

<221> MOD_RES

<222> (68)..(68)

<223> амидирование

<400> 77

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu Gly

65

<210> 78

<211> 67

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-67

<220>

<221> MOD_RES

<222> (67)..(67)

<223> амидирование

<400> 78

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser Leu

65

<210> 79

<211> 66

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-66

<220>

<221> MOD_RES

<222> (66)..(66)

<223> амидирование

<400> 79

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys Ser

65

<210> 80

<211> 65

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-65

<220>

<221> MOD_RES

<222> (65)..(65)

<223> амидирование

<400> 80

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

Lys

65

<210> 81

<211> 64

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-64

<220>

<221> MOD_RES

<222> (64)..(64)

<223> амидирование

<400> 81

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His Glu

50 55 60

<210> 82

<211> 63

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-63

<220>

<221> MOD_RES

<222> (63)..(63)

<223> амидирование

<400> 82

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser His

50 55 60

<210> 83

<211> 62

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-62

<220>

<221> MOD_RES

<222> (62)..(62)

<223> амидирование

<400> 83

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu Ser

50 55 60

<210> 84

<211> 61

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-61

<220>

<221> MOD_RES

<222> (61)..(61)

<223> амидирование

<400> 84

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val Glu

50 55 60

<210> 85

<211> 60

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-60

<220>

<221> MOD_RES

<222> (60)..(60)

<223> ацетилирование

<400> 85

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu Val

50 55 60

<210> 86

<211> 59

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-59

<220>

<221> MOD_RES

<222> (59)..(59)

<223> амидирование

<400> 86

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val Leu

50 55

<210> 87

<211> 58

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-58

<220>

<221> MOD_RES

<222> (58)..(58)

<223> амидирование

<400> 87

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn Val

50 55

<210> 88

<211> 57

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-57

<220>

<221> MOD_RES

<222> (57)..(57)

<223> амидирование

<400> 88

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp Asn

50 55

<210> 89

<211> 56

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-56

<220>

<221> MOD_RES

<222> (56)..(56)

<223> амидирование

<400> 89

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu Asp

50 55

<210> 90

<211> 55

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-55

<220>

<221> MOD_RES

<222> (55)..(55)

<223> амидирование

<400> 90

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys Glu

50 55

<210> 91

<211> 54

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-54

<220>

<221> MOD_RES

<222> (54)..(54)

<223> амидирование

<400> 91

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys Lys

50

<210> 92

<211> 53

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-53

<220>

<221> MOD_RES

<222> (53)..(53)

<223> амидирование

<400> 92

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg Lys

50

<210> 93

<211> 52

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-52

<220>

<221> MOD_RES

<222> (52)..(52)

<223> амидирование

<400> 93

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro Arg

50

<210> 94

<211> 51

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-51

<220>

<221> MOD_RES

<222> (51)..(51)

<223> амидирование

<400> 94

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg Pro

50

<210> 95

<211> 50

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-50

<220>

<221> MOD_RES

<222> (50)..(50)

<223> амидирование

<400> 95

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln Arg

50

<210> 96

<211> 49

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-49

<220>

<221> MOD_RES

<222> (49)..(49)

<223> амидирование

<400> 96

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

Gln

<210> 97

<211> 48

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-48

<220>

<221> MOD_RES

<222> (48)..(48)

<223> амидирование

<400> 97

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly Ser

35 40 45

<210> 98

<211> 47

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-47

<220>

<221> MOD_RES

<222> (47)..(47)

<223> амидирование

<400> 98

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala Gly

35 40 45

<210> 99

<211> 46

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-46

<220>

<221> MOD_RES

<222> (46)..(46)

<223> амидирование

<400> 99

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp Ala

35 40 45

<210> 100

<211> 45

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-45

<220>

<221> MOD_RES

<222> (45)..(45)

<223> амидирование

<400> 100

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg Asp

35 40 45

<210> 101

<211> 44

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-44

<220>

<221> MOD_RES

<222> (44)..(44)

<223> амидирование

<400> 101

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro Arg

35 40

<210> 102

<211> 43

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-43

<220>

<221> MOD_RES

<222> (43)..(43)

<223> амидирование

<400> 102

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala Pro

35 40

<210> 103

<211> 42

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-42

<220>

<221> MOD_RES

<222> (42)..(42)

<223> амидирование

<400> 103

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu Ala

35 40

<210> 104

<211> 41

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-41

<220>

<221> MOD_RES

<222> (41)..(41)

<223> амидирование

<400> 104

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro Leu

35 40

<210> 105

<211> 40

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-40

<220>

<221> MOD_RES

<222> (40)..(40)

<223> амидирование

<400> 105

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala Pro

35 40

<210> 106

<211> 39

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-39

<220>

<221> MOD_RES

<222> (39)..(39)

<223> амидирование

<400> 106

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly Ala

35

<210> 107

<211> 38

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-38

<220>

<221> MOD_RES

<222> (38)..(38)

<223> амидирование

<400> 107

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu Gly

35

<210> 108

<211> 37

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-37

<220>

<221> MOD_RES

<222> (37)..(37)

<223> амидирование

<400> 108

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala Leu

35

<210> 109

<211> 36

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-36

<220>

<221> MOD_RES

<222> (36)..(36)

<223> амидирование

<400> 109

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val Ala

35

<210> 110

<211> 35

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-35

<220>

<221> MOD_RES

<222> (35)..(35)

<223> амидирование

<400> 110

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe Val

35

<210> 111

<211> 34

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-34

<220>

<221> MOD_RES

<222> (34)..(34)

<223> амидирование

<400> 111

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn Phe

<210> 112

<211> 33

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-33

<220>

<221> MOD_RES

<222> (33)..(33)

<223> амидирование

<400> 112

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

Asn

<210> 113

<211> 32

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-32

<220>

<221> MOD_RES

<222> (32)..(32)

<223> амидирование

<400> 113

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His

20 25 30

<210> 114

<211> 31

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-31

<220>

<221> MOD_RES

<222> (31)..(31)

<223> амидирование

<400> 114

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val

20 25 30

<210> 115

<211> 30

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-30

<220>

<221> MOD_RES

<222> (30)..(30)

<223> амидирование

<400> 115

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp

20 25 30

<210> 116

<211> 29

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-29

<220>

<221> MOD_RES

<222> (29)..(29)

<223> амидирование

<400> 116

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln

20 25

<210> 117

<211> 28

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-28

<220>

<221> MOD_RES

<222> (28)..(28)

<223> амидирование

<400> 117

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu

20 25

<210> 118

<211> 27

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-27

<220>

<221> MOD_RES

<222> (27)..(27)

<223> амидирование

<400> 118

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys

20 25

<210> 119

<211> 26

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-26

<220>

<221> MOD_RES

<222> (26)..(26)

<223> амидирование

<400> 119

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys

20 25

<210> 120

<211> 25

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> амидированный человеческий PTH 1-25

<220>

<221> MOD_RES

<222> (25)..(25)

<223> амидирование

<400> 120

Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu Asn

1 5 10 15

Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg

20 25

<210> 121

<211> 141

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<400> 121

Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln

1 5 10 15

Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu His His Leu Ile Ala Glu Ile His

20 25 30

Thr Ala Glu Ile Arg Ala Thr Ser Glu Val Ser Pro Asn Ser Lys Pro

35 40 45

Ser Pro Asn Thr Lys Asn His Pro Val Arg Phe Gly Ser Asp Asp Glu

50 55 60

Gly Arg Tyr Leu Thr Gln Glu Thr Asn Lys Val Glu Thr Tyr Lys Glu

65 70 75 80

Gln Pro Leu Lys Thr Pro Gly Lys Lys Lys Lys Gly Lys Pro Gly Lys

85 90 95

Arg Lys Glu Gln Glu Lys Lys Lys Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp Leu

100 105 110

Asp Ser Gly Val Thr Gly Ser Gly Leu Glu Gly Asp His Leu Ser Asp

115 120 125

Thr Ser Thr Thr Ser Leu Glu Leu Asp Ser Arg Arg His

130 135 140

<210> 122

<211> 20

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная случайная спираль

<400> 122

Gly Gly Pro Gly Gly Pro Gly Pro Gly Gly Pro Gly Gly Pro Gly Pro

1 5 10 15

Gly Gly Pro Gly

20

<---

Claims

1. Жидкий фармацевтический состав для приготовления лекарственного средства для лечения, контроля, отсрочки или предупреждения одного или нескольких заболеваний, которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предупредить с помощью PTH, где фармацевтический состав содержит конъюгат PTH, буферный агент, агент, регулирующий изотоничность, консервант и необязательно антиоксидант, и где конъюгат PTH содержит фрагмент PTH, который ковалентно и обратимо конъюгирован с растворимым в воде носителем, причем конъюгат PTH имеет формулу (IIf-i):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент PTH посредством образования амидной связи, и

где

m и p независимо представляют собой целое число в интервале и включая 400 - 500;

где фармацевтический состав содержит

конъюгат PTH, в котором фрагмент PTH 0,05 - 5,0 мг/мл

янтарную кислоту 0,25 - 24 мг/мл

D-маннит 10 - 200 мг/мл

м-крезол 1 - 10 мг/мл,

и где значение pH лежит в интервале от 3,0 до 6,0.

2. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где антиоксидант выбран из группы, состоящей из метионина, бутилгидрокситолуола, бутилгидроксианизола, токоферола, пропилгаллата, аскорбиновой кислоты, бисульфита натрия, этилендиаминтетрауксусной кислоты, цистеина, глутатиона, монотиоглицерина, поли(этиленимина), витамина E, эктоина, морина и их смесей.

3. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где антиоксидантом является метионин.

4. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где фармацевтический состав дополнительно содержит pH-регулирующий агент.

5. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где фрагмент PTH имеет последовательность SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:51, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:107, SEQ ID NO:108, SEQ ID NO:109, SEQ ID NO:110, SEQ ID NO:111, SEQ ID NO:112, SEQ ID NO:113, SEQ ID NO:114 или SEQ ID NO:115.

6. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где фрагмент PTH имеет последовательность SEQ ID NO:51.

7. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где заболевание выбрано из группы, состоящей из гипопаратиреоидизма, гиперфосфатемии, остеопороза, восстановления перелома, размягчения костей, размягчения костей и остеопороза у пациентов с гипофосфатазией, вызванного стероидами остеопороза, мужского остеопороза, артрита, остеоартрита, незавершенного остеогенеза, фиброзной дисплазии, ревматоидного артрита, болезни Паджета, гуморальной гиперкальцемии, ассоциированной с злокачественным новообразованием, остеопении, периодонтита, перелома костей, алопеции, вызванной химиотерапией алопеции и тромбоцитопении, хронического периодонтита, остеонекроза челюсти и плохо заживающих переломов из-за мутаций гена ALPL.

8. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где заболеванием является гипопаратиреоидизм.

9. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где фармацевтический состав содержит

конъюгат PTH, в котором фрагмент PTH 0,1 - 5,0 мг/мл

янтарную кислоту 0,25 - 24 мг/мл

D-маннит 10 - 200 мг/мл

м-крезол 1 - 10 мг/мл, и

где значение pH лежит в интервале от 3,0 до 6,0.

10. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где фармацевтический состав содержит

конъюгат PTH, в котором фрагмент PTH 0,1 - 1,5 мг/мл

янтарную кислоту 0,6 - 6,0 мг/мл

D-маннит 30 - 60 мг/мл

м-крезол 1,5 - 3,5 мг/мл, и

где значение pH лежит в интервале от 3,0 до 6,0.

11. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где фармацевтический состав содержит

янтарную кислоту 0,6 - 6,0 мг/мл

D-маннит 30 - 60 мг/мл

м-крезол 1,5 - 3,5 мг/мл, и

где значение pH лежит в интервале от 3,5 до 5,0.

12. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где фармацевтический состав содержит

янтарную кислоту 0,6 - 6,0 мг/мл

D-маннит 30 - 60 мг/мл

м-крезол 1,5 - 3,5 мг/мл, и

где значение pH лежит в интервале от 3,7 до 4,3.

13. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где фармацевтический состав содержит

конъюгат PTH, в котором фрагмент PTH 0,25 - 0,35 мг/мл

янтарную кислоту 1,0 - 1,4 мг/мл

D-маннит 36 - 48 мг/мл

м-крезол 2,0 - 3,0 мг/мл, и

где значение pH лежит в интервале от 3,0 до 6,0.

14. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где фармацевтический состав содержит

янтарную кислоту 1,0 - 1,4 мг/мл

D-маннит 36 - 48 мг/мл

м-крезол 2,0 - 3,0 мг/мл, и

где значение pH лежит в интервале от 3,5 до 5,0.

15. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где фармацевтический состав содержит

янтарную кислоту 1,0 - 1,4 мг/мл

D-маннит 36 - 48 мг/мл

м-крезол 2,0 - 3,0 мг/мл, и

где значение pH лежит в интервале от 3,7 до 4,3.

16. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где фармацевтический состав содержит конъюгат PTH в концентрации 0,3 ± 10% мг/мл фрагмента PTH, около 1,18 ± 10% мг/мл янтарной кислоты, около 41,7 ± 10% мг/мл D-маннита, около 2,5 ± 10% мг/мл м-крезола, и где значение pH составляет около 4,0 ± 10%.

17. Жидкий фармацевтический состав по п. 1, где фармацевтический состав содержит конъюгат PTH в концентрации 0,3 мг/мл фрагмента PTH, 1,18 мг/мл янтарной кислоты, 41,7 мг/мл D-маннита, 2,5 мг/мл м-крезола, и где значение pH составляет 4,0.

18. Способ получения жидкого фармацевтического состава по п.1, где способ включает стадии

(iii) необязательно фильтрация смеси согласно стадии (ii),

(v) герметизация контейнера, и

19. Способ получения жидкого фармацевтического состава по п.1, где способ включает стадии

(v) герметизация контейнера, и

20. Способ получения по п. 18 или 19, где порядок стадий (ii) и (iii) не изменяют на обратный.

21. Способ получения по п. 19, где конъюгат PTH на стадии (i) смешивают с янтарной кислотой, маннитом, м-крезолом и необязательно антиоксидантом.

22. Применение жидкого фармацевтического состава по п.1 в качестве лекарственного средства для лечения, контроля, отсрочки или предупреждения одного или нескольких заболеваний, которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предупредить с помощью PTH.

23. Применение жидкого фармацевтического состава по п.1 для получения лекарственного средства для лечения, контроля, отсрочки или предупреждения одного или нескольких заболеваний, которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предупредить с помощью PTH.

24. Применение по п. 23, где заболевание выбрано из группы, состоящей из гипопаратиреоидизма, гиперфосфатемии, остеопороза, восстановления перелома, размягчения костей, размягчения костей и остеопороза у пациентов с гипофосфатазией, вызванного стероидами остеопороза, мужского остеопороза, артрита, остеоартрита, незавершенного остеогенеза, фиброзной дисплазии, ревматоидного артрита, болезни Паджета, гуморальной гиперкальцемии, ассоциированной с злокачественным новообразованием, остеопении, периодонтита, перелома костей, алопеции, вызванной химиотерапией алопеции и тромбоцитопении, хронического периодонтита, остеонекроза челюсти и плохо заживающих переломов из-за мутаций гена ALPL.

25. Применение по п. 23 или 24, где заболеванием является гипопаратиреоидизм.