RU2816947C2 - КОНЪЮГАТ ИНГИБИТОРА 3-ГИДРОКСИ-3-МЕТИЛГЛУТАРИЛ-КоА РЕДУКТАЗЫ С ЛИГАНДОМ АСИАЛОГЛИКОПРОТЕИНОВОГО РЕЦЕПТОРА - Google Patents
КОНЪЮГАТ ИНГИБИТОРА 3-ГИДРОКСИ-3-МЕТИЛГЛУТАРИЛ-КоА РЕДУКТАЗЫ С ЛИГАНДОМ АСИАЛОГЛИКОПРОТЕИНОВОГО РЕЦЕПТОРА Download PDFInfo
- Publication number
- RU2816947C2 RU2816947C2 RU2022109586A RU2022109586A RU2816947C2 RU 2816947 C2 RU2816947 C2 RU 2816947C2 RU 2022109586 A RU2022109586 A RU 2022109586A RU 2022109586 A RU2022109586 A RU 2022109586A RU 2816947 C2 RU2816947 C2 RU 2816947C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- conjugate
- intermediate product
- dichloromethane
- statin
- asialoglycoprotein receptor
- Prior art date
Links
- 102000005427 Asialoglycoprotein Receptor Human genes 0.000 title claims abstract description 12
- 108010006523 asialoglycoprotein receptor Proteins 0.000 title claims abstract description 12
- 239000003446 ligand Substances 0.000 title claims abstract description 8
- 108090000895 Hydroxymethylglutaryl CoA Reductases Proteins 0.000 title claims abstract description 6
- 102000004286 Hydroxymethylglutaryl CoA Reductases Human genes 0.000 title claims abstract 3
- 229940123934 Reductase inhibitor Drugs 0.000 title claims abstract 3
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 16
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 9
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 9
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 claims description 8
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 7
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 claims description 6
- -1 N -acetylgalactosamine glycoside Chemical class 0.000 claims description 5
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 5
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims description 5
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 claims description 4
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 4
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims description 4
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 claims description 4
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 claims description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 4
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 claims description 4
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 3
- SCYULBFZEHDVBN-UHFFFAOYSA-N 1,1-Dichloroethane Chemical compound CC(Cl)Cl SCYULBFZEHDVBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 claims description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 2
- YDVNLQGCLLPHAH-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;hydrate Chemical compound O.ClCCl YDVNLQGCLLPHAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;methanol Chemical compound OC.ClCCl WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- MHYCRLGKOZWVEF-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hydrate Chemical compound O.CCOC(C)=O MHYCRLGKOZWVEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000000538 pentafluorophenyl group Chemical group FC1=C(F)C(F)=C(*)C(F)=C1F 0.000 claims description 2
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 claims 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 18
- 239000002471 hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase inhibitor Substances 0.000 abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 abstract description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 abstract description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 229910052723 transition metal Inorganic materials 0.000 abstract description 3
- 150000003624 transition metals Chemical class 0.000 abstract description 3
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 abstract description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 16
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 15
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 229960005370 atorvastatin Drugs 0.000 description 10
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 10
- XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N Atorvastatin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N 0.000 description 9
- XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N Atorvastatin Natural products C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 8
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical group CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 102100029077 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 3
- 229960003082 galactose Drugs 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000003524 antilipemic agent Substances 0.000 description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 238000010461 azide-alkyne cycloaddition reaction Methods 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- BJGBAZAEWKCPHZ-MQSFZEHASA-N (3r,5r)-7-[2-(4-fluorophenyl)-3-phenyl-4-(phenylcarbamoyl)-5-propan-2-ylpyrrol-1-yl]-3,5-dihydroxyheptanoic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1.C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 BJGBAZAEWKCPHZ-MQSFZEHASA-N 0.000 description 1
- HEWZVZIVELJPQZ-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethoxypropane Chemical compound COC(C)(C)OC HEWZVZIVELJPQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710158485 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase Proteins 0.000 description 1
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 1
- WDYVUKGVKRZQNM-UHFFFAOYSA-N 6-phosphonohexylphosphonic acid Chemical compound OP(O)(=O)CCCCCCP(O)(O)=O WDYVUKGVKRZQNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- VMQMZMRVKUZKQL-UHFFFAOYSA-N Cu+ Chemical class [Cu+] VMQMZMRVKUZKQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 206010019663 Hepatic failure Diseases 0.000 description 1
- 238000006736 Huisgen cycloaddition reaction Methods 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 208000021642 Muscular disease Diseases 0.000 description 1
- 208000000112 Myalgia Diseases 0.000 description 1
- 201000009623 Myopathy Diseases 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 240000001987 Pyrus communis Species 0.000 description 1
- 206010039020 Rhabdomyolysis Diseases 0.000 description 1
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 229960004829 atorvastatin calcium trihydrate Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012925 biological evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006957 competitive inhibition Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000006352 cycloaddition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- DQYBDCGIPTYXML-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;hydrate Chemical compound O.CCOCC DQYBDCGIPTYXML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000010579 first pass effect Methods 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 1
- 238000000589 high-performance liquid chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 238000010874 in vitro model Methods 0.000 description 1
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 1
- 238000012886 linear function Methods 0.000 description 1
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 1
- 208000007903 liver failure Diseases 0.000 description 1
- 231100000835 liver failure Toxicity 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N rosuvastatin Chemical compound CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N 0.000 description 1
- 229960000672 rosuvastatin Drugs 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000000276 sedentary effect Effects 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 1
- 125000001425 triazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- GRVDJDISBSALJP-FIBGUPNXSA-N trideuterio($l^{1}-oxidanyl)methane Chemical compound [2H]C([2H])([2H])[O] GRVDJDISBSALJP-FIBGUPNXSA-N 0.000 description 1
Abstract
Настоящее изобретение относится к конъюгату ингибитора 3-гидрокси-3-метилглутарил-КоА редуктазы с лигандом асиалогликопротеинового рецептора для лечения и профилактики сердечно-сосудистых заболеваний общей формулы (I) и его допустимым для использования в фармацевтике солям, где X представляет собой -OH или –NHAc, Y представляет собой
, ,
, или ,
каждый a, b, c и d независимо представляет собой -H, -D или -CH3, каждый k, l, m и n независимо 0, 1 или 2, Z представляет собой алкил (С2-С6), -O-, -S-, -NH-, -N(CH3)-, -NH-C(O)-, C(O)-NH-, -CH=CH- или -O-CH2-CH2-O-. Изобретение также относится к способу получения коньюгата формулы (I), не требующему использования потенциально токсичных катализаторов на основе переходных металлов. Технический результат: получены новые конъюгаты статинов с лигандами асиалогликопротеинового рецептора, которые являются хорошо растворимыми и стабильными и могут найти применение в медицине для лечения гиперлипидемии и атеросклероза. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 табл., 5 пр.
Description
Область техники
Настоящее изобретение относится к области медицинской химии, а именно к способам повышения селективности действия, биодоступности и эффективности препаратов путем создания систем для их направленного транспорта в целевые клетки. Предложенные пролекарства гиполипидемических препаратов могут быть применены в медицине для таргетного лечения сердечно-сосудистых заболеваний.
Уровень техники
Сердечно-сосудистые заболевания являются одной из основных причин смертности, а также временной и стойкой утраты трудоспособности населения в развитых странах мира. К факторам риска возникновения таких распространенных патологий как ишемическая болезнь сердца и артеросклероз относят гипертонию, сахарный диабет, курение, наследственность, малоподвижный образ жизни, ожирение, и особенно гиперлипидемию. Статины - класс лекарственных средств, который применяется для лечения и профилактики гиперлипидемии и атеросклероза. Терапевтический эффект достигается путем регулирования биосинтеза эндогенного холестерина за счет ингибирования редуктазы 3-гидрокси-3-метилглутарил-кофермента А (ГМГ-КоА-редуктазы). За последние 20 лет было показано достоверное влияние статинов на снижение сердечно-сосудистой и общей смертности независимо от пола, возраста, исходного уровня холестерина [Рациональная фармакотерапия сердечно-сосудистых заболеваний / под общ. ред. Е.И. Чазова, Ю.А. Карпова. - 2-е изд. - М.: Литтерра, 2016. - 784 с]. Невзирая на положительный терапевтический эффект статинов, нельзя не отметить некоторые общие проблемы их использования. Так, получены данные о серьезных побочных эффектах (миалгия, головная боль, боли в животе, бессонница и т.д.) и противопоказаниях (алкоголизм, печеночная недостаточность). Для большинства препаратов данного класса также существуют проблемы низкой водорастворимости и биодоступности, «эффекта первого прохождения», которые влекут за собой увеличение суточной дозы. При этом, при значительном повышении концентрации действующего вещества в плазме крови возрастает риск развития миопатии и рабдомиолиза [B.Tomlinson, et al. Drugs Aging 18 (2001) 665-683]. Таким образом, актуальной задачей является оптимизация фармакокинетических и фармакодинамических свойств существующих гиполипидимических средств.
Скорректировать фармакологический профиль и улучшить биодоступность препаратов можно путем создания системы направленного транспорта статинов в клетки печени [A. Date A.A., Nagarsenker M.S. Journal of Pharmacy and Pharmacology. 2007. V.59. P. 1583-1584]. Данный подход призван обеспечить проникновение активной молекулы в целевой орган в эффективной концентрации, а также ограничить взаимодействие лекарства с нецелевыми клетками. В результате это позволит снизить необходимую дозу введения препарата, а также минимизировать побочные эффекты от его приема.
Статины оказывают обратимое, конкурентное ингибирование ГМГ-КоА-редуктазы, ключевого фермента биосинтеза холестерина. Хорошей молекулярной мишенью для адресной доставки в клетки печени, где в основном и происходит биосинтез холестерина, признан асиалогликопротеиновый рецептор (ASGPR). Это связано со способностью ASGPR переносить через мембрану высокомолекулярные соединения, быстрым циклом регенерации и минимальным уровнем экспрессии на внепеченочных типах клеток. Известно, что ASGPR может селективно связываться с остатками галактозы и N-ацетилгалактозамина, это позволяет осуществлять направленный транспорт лекарственных молекул с помощью данных векторных фрагментов [D'Souza A.A., Devarajan P.V. Journal of Controlled Release. 2015. V.203. P. 126-139.]. Введение углеводных фрагментов, как правило, приводит к увеличению растворимости соединений в воде. В случае статинов это представляет дополнительные преимущества, так как низкую биодоступность препаратов связывают с высокой липофильностью [Shaker M.A. Journal of Drug Delivery Science and Technology. 2018. V.43. P. 178-184.]. Также известно, что прием более водорастворимых статинов (например, розувастатина) оказывает меньше негативных последствий для организма [Bratton L.D., et al. Bioorg. Med. Chem. 2007. V.15. P. 5576-5589], так как с высокой липофильностью связывают и способность данных препаратов неспецифически проникать и накапливаться в нецелевых типах клеток [Roth B.D., et al. J. Med. Chem. 1991. V.34. P. 463-466]. Таким образом, увеличение гидрофильности статинов можно рассматривать как одну из стратегий снижения вероятности развития у пациентов побочных эффектов.
На сегодняшний день известно ограниченное число примеров использования лигандов ASGPR для создания низкомолекулярных пролекарств статинов.
В работах [Zhang X, et al. Bioconjugate Chemistry. 2017. V.28. P. 2109-2113] и [Zhang Y., et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry. 2019. V.27. P. 2187-2191] исследованы соединения на основе N-ацетилгалактозамина и N-ацетилглюкозамина общей формулы (1):
(1)
Авторами показано, что конъюгаты аторвастатина с остатком N-ацетилглюкозамина растворяются в воде лучше, чем исходный аторвастатин. Кроме того, синтезированные соединения проявили ингибирующую активность по отношению к ГМГ-КоА-редуктазе в модельных in vitro экспериментах. В тоже время, исследованные конъюгаты продемонстрировали низкую устойчивость к действию эстеразы свиной печени при pH 7.4 и 4.5, что ставит под сомнение перспективу их использования в качестве лекарств, принимаемых перорально. Соединения формулы (1) были получены по реакции азид-алкинового циклоприсоединения, катализируемого солями меди(I). Несмотря на общемировое признание того, что циклоприсоединение, катализируемое медью – быстрый и эффективный метод конъюгации, данный тип реакций все же нежелателен для синтеза большинства лекарственных препаратов вследствие токсичности меди для живых клеток и отсутствия методов надежного удаления ее следов из конечного продукта [Морозова М.А., Новый метод гидро-дедиазонирования и региоселективный цинк-катализируемый метод 1,3-диполярного циклоприсоединения: дис. на соискание ученой степени канд. хим. наук: 02.00.03. - Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Национальный исследовательский Томский политехнический университет», Томск, 2017 - 120 с.].
Наиболее близким аналогом (прототипом) данного изобретения является конъюгат аторвастатина с производными N-ацетил-D-галактозамина общей формулы (2) [Худяков А.Д., Маклакова С.Ю. «Синтез конъюгатов аторвастатина с производными N-ацетил-D-галактозамина для направленного транспорта в клетки печени». Материалы Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых учёных «Ломоносов-2021», секция «Химия». - М.: Издательство «Перо», 2021. С.756].
(2)
Структура формулы (2) отличается от структуры формулы (1) тем, что действующее вещество в них соединено с углеводным фрагментом посредством амидной связи. Это позволяет предположить, что механизм и скорость их расщепления в биологических средах будут иными чем в случае конъюгатов, описанных в работах [Zhang X, et al. Bioconjugate Chemistry. 2017. V.28. P. 2109-2113; Zhang Y., et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry. 2019. V.27. P. 2187-2191]. Хотя в самой публикации данные о синтезе не приведены, резонно предположить, что триазольный фрагмент с комплексными полифункционализированными заместителями в 1 и 4 положениях формируется с помощью медь(I)-катализируемой реакции азид-алкинового циклоприсоединения по аналогии с синтезом соединений формулы (1).
Технической проблемой, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является разработка новых конъюгатов статинов с лигандами асиалогликопротеинового рецептора, растворимость которых в воде сравнима или превосходит аналоги, а стабильность в условиях, имитирующих физиологические, исключает возможность высвобождения действующего вещества до попадания в целевые клетки печени, и при этом синтез которых можно осуществлять без использования потенциально токсичных катализаторов на основе переходных металлов.
Раскрытие изобретения
Техническим результатом заявляемого изобретения являются низкомолекулярные конъюгаты статинов общей формулы (I), в которых гиполипидемический препарат соединен с остатком галактозы и N-ацетилгалактозамина с помощью короткого или средней длины линкера (длина углеродной цепи от 2 до 6 метиленовых звеньев, допустимо вхождение в нее гетероатомов) и амидной связи, характеризующиеся повышенной стабильностью в физиологических условиях (конъюгаты не претерпевают значимого гидролиза в водных средах pH 5.0 и 7.4 с или без добавления выбранных гидролаз в течение 24 часов), повышенной растворимостью в воде (концентрация насыщенных водных растворов более чем 3 раза превосходит концентрацию насыщенного раствора соответствующего немодифицированного препарата), а также разработка способа получения конъюгаты статинов без использования токсичных катализаторов на основе переходных металлов. Это позволяет использовать заявляемые конъюгаты в качестве действующего вещества в фармацевтических композициях, применяемых перорально для лечения или профилактики сердечно-сосудистых заболеваний.
Технический результат достигается конъюгатом общей формулы (I):
(I)
и допустимыми для использования в фармацевтике солями, гидратами, энантиомерами и стереоизомерами,
где X представляет собой -OH или -NHAc
Y представляет собой
каждый a, b, c и d независимо представляет собой -H, -D или -CH3
каждый k, l, m и n независимо 0, 1 или 2
Z представляет собой алкил (С2-С6), -O-, -S-, -NH-, -N(CH3)-, -NH-C(O)-, C(O)-NH-, -CH=CH- или -O-CH2-CH2-O-.
Технический результат также достигается способом получения заявляемого конъюгата, заключающегося в проведении реакции ацилирования между подходящим активированным эфиром статина и подходящим гликозидом галактозы или N-ацетилгалактозамина c концевой аминогруппой в органическом растворителе в присутствии основания, взятых из расчёта, что на 1.0 мольный эквивалент активированного эфира берут 1.0-1.5 мольный эквивалент гликозида и 1.5-5.0 мольный эквивалент основания, реакционную смесь перемешивают в течение не менее 8 часов при комнатной температуре для получения промежуточного продукта, который выделяют путем экстракции, дополнительно очищают прямой колоночной хроматографией и переводят в конечный продукт путем удаления защитных групп и выделения обращенно-фазовой хроматографией. Предпочтительно в качестве активированных эфиров статинов использовать пентафторфенил- или NHS-эфиры статинов. В качестве органического растворителя - ДМФА, ТГФ, дихлорметан или аналогичные ему по свойствам галогензамещённые углеводородные растворители (дихлорэтан, хлороформ и т.д.). В качестве основания предпочтительно использовать третичные амины, например, триэтиламин или диизопропилэтиламин. Выделение промежуточного продукта предпочтительно проводить путем экстракции в системе дихлорметан-вода или этилацетат-вода. Далее предпочтительно проведение очистки промежуточного продукта прямой колоночной хроматографией в системе этилацетат-гексан или дихлорметан-метанол. Для удаления защитных групп предпочтительно использовать раствор метилата натрия в метаноле, взятого из расчета, что на 1 эквивалент промежуточного продукта берут не менее 3 эквивалентов метилата натрия. Далее предпочтительно проводить нейтрализацию реакционной смеси до pH 6 с помощью ионно-обменной смолы Dowex 50W-X8 H+. Конечный продукт предпочтительно выделять с помощью обращено-фазовой хроматографии в системе вода-ацетонитрил.
Краткое описание чертежей
Изобретение поясняется следующими чертежами.
На фиг. 1 приведены примеры кинетических зависимостей, полученных при измерении концентрации конъюгатов и высвобождаемого ими аторвастатина при выдерживании в модельных растворах (на рисунке данные, полученные для соединения из Примера 2).
Осуществление изобретения
Ниже приведены определения терминов, которые используются в описании настоящего изобретения.
«Асиалогликопротеиновый рецептор (ASGPR)» - трансмембранный белок, преимущественно экспрессируемый гепатоцитами, распознающий производные D-галактозы и N-ацетилгалактозамина и участвующий в их транспорте в клетку.
«Конъюгат» - комплекс, формирующийся при помощи ковалентных связей между лекарственным соединением и лигандом-носителем.
«Лиганд» - химическое соединение, которое образует нековалентный комплекс с той или иной биомолекулой (чаще всего белком, например, клеточным рецептором, но иногда, например, с ДНК) и производит, вследствие такого связывания, те или иные биохимические, физиологические или фармакологические эффекты.
Представленные ниже примеры иллюстрируют, но не ограничивают настоящее изобретение.
Пример 1. Синтез NHS-эфира аторвастатина
Тригидрат кальциевой соли аторвастатина (1.0 г, 0.8 ммоль) перемешивали в течение 15 минут в 40 мл 1М раствора HCl и экстрагировали аторвастатин в виде кислоты дихлорметаном (3 раза по 40 мл). Объединенные органические вытяжки сушили над Na2SO4. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 10 мл ацетона, добавляли к нему 2,2-диметоксипропан (2.5 мл, 20.0 ммоль) и моногидрат пара-толуолсульфокислоты (0.02 г, 0.1 ммоль) и перемешивали 24 часа. После этого в реакционную смесь добавляли триэтиламин (0.075 мл, 0.5 ммоль) и удаляли растворитель при пониженном давлении. К остатку добавляли 5 мл ТГФ и 1 мл 1М раствора NaOH, оставляли перемешиваться на ночь. На следующий день к полученной смеси приливали 1.2 мл 1М раствора HCl и удаляли ТГФ при пониженном давлении. Для выделения продукта в индивидуальном виде проводили экстракцию в системе диэтиловый эфир-вода. Органическую фракцию высушивали над Na2SO4, растворитель удаляли при пониженном давлении. Получали 0.9 г (94%) белого кристаллического вещества.
К раствору данного соединения (0.45 г, 0.75 ммоль) в 5 мл CH2Cl2 добавляли DIC (131 мкл, 0.82 ммоль), DMAP (0.01 г, 0.075 ммоль) и N-гидроксисукцинимид (0.09 г, 0.75 ммоль). Реакцию перемешивали в течение ночи. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Продукт очищали колоночной хроматографией (EtOAc:Гексан 1:1, по объему). Получали 0.39 г (75%) белого кристаллического вещества.
1Н ЯМР (DMSO-d6, δ, м.д., J, Гц): 0.99-1.12 (м, 1Н), 1.19 (с, 3Н), 1.33 (с, 3Н), 1.37 (д, 6H, J=7.0), 1.47 (д, 1Н, J=12.5), 1.53-1.66 (м, 2Н), 2.67 (дд, 1Н, J=15.9, 8.4), 2.80 (с, 4Н), 2.85 (дд, 1Н, J=15.9, 4.3), 3.17-3.27 (м, 1Н), 3.76-3.85 (м, 2Н), 3.90-3.99 (м, 1Н), 4.20-4.26 (м, 1Н), 6.96-7.04 (м, 2Н), 7.05-7.11 (м, 4Н), 7.18-7.28 (м, 6Н), 7.51 (д, 2Н, J=7.8), 9.81 (уш. с, 1Н).
Масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C40H43FN3O7 [М+Н]+ m/z 696.3079, найдено 696.3102.
Пример 2. Получение 1-((3R,5R)-7-((6-(((3R,4R,5R,6R)-3-ацетамидо-4,5-дигирокси-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этил)амино)-3,5-дигидокси-7-оксогептил)-5-(4-фторфенил)-2-изопропил-N,4-дифенил-1H-пиррол-3-карбоксамида
К раствору NHS-эфира аторвастатина (75 мг, 0.11 ммоль) в дихлорметане добавляли диизопропилэтиламин (75 мкл, 0.43 ммоль) и 1-O-(2’-аминоэтил)-2-ацетамидо-2-дезокси-3,4,6-три-О-ацетил-β-D-галактопиранозу (41 мг, 0.11 ммоль) [синтез описан в M. Manoharan, K.G. Rajeev, J. Nair, M. Maier. US Patent US 2016/0199513 A1. 2016]. Перемешивали 24 часа. Реакционную смесь выливали в воду, экстрагировали дихлорметаном. Продукт очищали колоночной хроматографией (CH2Cl2:MeOH 50:1→20:1, по объему). Получали 62 мг (60%) промежуточного продукта в виде белого кристаллического соединения.
Полученный продукт растворяли в 3 мл метанола и добавляли 1 мл 0.2М раствора метилата натрия в метаноле. Перемешивали 3 часа. После чего добавляли в реакционную смесь ионно-обменную смолу Dowex 50W-X8 H+ до pH 6, которую затем отфильтровывали. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Для очистки продукта использовали обращенно-фазовую хроматографию. Получали 25 мг (48%) в виде белого кристаллического соединения.
1Н ЯМР (CD3OD, δ, м.д., J, Гц): 1.32-1.38 (м, 2Н), 1.46-1.55 (м, 7Н), 1.64-1.68 (м, 2Н, CH2-2’), 1.98 (c, 3Н), 2.21-2.33 (м, 2Н), 3.33-3.48 (м, 4Н), 3.55 (дд, 1Н, J=10.6, 3.2), 3.61-3.67 (м, 2Н), 3.70-3.91 (м, 6Н), 4.01-4.11 (м, 2Н), 4.33 (д, 1Н, J=8.4), 6.98-7.02 (м, 3Н), 7.06-7.21 (м, 11Н).
Масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C43H54FN4O10 [М+Н]+ m/z 805.3819, найдено 805.3815.
Пример 3. Получение 1-((3R,5R)-7-((6-(((3R,4R,5R,6R)-3-ацетамидо-4,5-дигирокси-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)гексил)амино)-3,5-дигидокси-7-оксогептил)-5-(4-фторфенил)-2-изопропил-N,4-дифенил-1H-пиррол-3-карбоксамида
К раствору NHS-эфира аторвастатина (84 мг, 0.12 ммоль) в дихлорметане добавляли диизопропилэтиламин (75 мкл, 0.43 ммоль) и 1-O-(6’-аминогексил)-2-ацетамидо-2-дезокси-3,4,6-три-О-ацетил-β-D-галактопиранозу (53 мг, 0.12 ммоль) [синтез описан в Petrov R. A., et al. Synthesis and biological evaluation of novel mono- and bivalent ASGP-R-targeted drug-conjugates. // Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 2018. V.28. P. 382-387.]. Перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь выливали в воду, экстрагировали дихлорметаном. Продукт очищали колоночной хроматографией (Гексан:EtOAc 1:1, по объему). Получали 90 мг (75%) промежуточного продукта в виде белого кристаллического соединения.
Полученный продукт растворяли в 4 мл метанола и добавляли 1.3 мл 0.2М раствора метилата натрия в метаноле. Перемешивали 2 часа. После чего добавляли в реакционную смесь ионно-обменную смолу Dowex 50W-X8 H+ до pH 6, которую затем отфильтровывали. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Для очистки продукта использовали обращенно-фазовую хроматографию. Получали 18 мг (23%) белого кристаллического соединения.
1Н ЯМР (CD3OD, δ, м.д., J, Гц): 1.31-1.42 (м, 6Н), 1.45-1.73 (м, 12Н), 1.97 (c, 3Н), 2.25-2.29 (м, 2Н), 3.12-3.19 (м, 2Н), 3.32-3.39 (м, 1Н), 3.43-3.51 (м, 2Н), 3.57 (дд, 1Н, J=10.7, 3.0), 3.61-3.68 (м, 1Н), 3.71-3.80 (м, 2Н), 3.83 (д, 1Н, J=3.0), 3.84-3.93 (м, 3Н), 3.97-4.13 (м, 2Н), 4.35 (д, 1Н, J=8.4), 7.03-7.13 (м, 8Н), 7.20-7.27 (м, 4Н), 7.30 (д, 2Н, J=8.1).
Масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C47H61FN4O10 [М+Н]+ m/z 861.4444, найдено 861.4434.
Пример 4. Измерение растворимости полученных конъюгатов
Измерение растворимости проводили согласно описанной ранее методике [Zhang X. et al. Bioconjugate chemistry. 2017. V.28. P. 2109-2113]. Для исследуемых соединений стоили градуировочные прямые, отражающие зависимость оптической плотности растворов на длине волны 290 нм от их концентрации. Далее по построенным прямым определяли концентрацию веществ в насыщенных растворах. Для приготовления насыщенных растворов исследуемый образец, взятый в заведомом избытке, перемешивали в течение 15 минут в одном миллилитре воды, отделяли не растворившийся остаток центрифугированием.
Было определено, что растворимость кальциевой соли аторвастатина - 0.106 ± 0.009 мМ, а молярные растворимости конъюгатов - 0.33-0.43 мМ (Таблица 1). Данные, полученные экспериментально, находятся в согласии с расчетными значениями показателя ClogP, вычисленными с помощью программы CS ChemDraw Ultra (Cambridge Soft Corporation, Cambridge, MA, США).
Таблица 1.
Измерение концентрации насыщенных водных растворов конъюгатов
| Соединение | Коэффициент пропорциональности линейной функции1 | Среднее значение интенсивности поглощения тест-растворов | Концентрация насыщенного раствора, мМ | ClogP |
| Аторвастатин (кальциевая соль) |
0.01174 ± 0.00004 | 0.062 | 0.106 ± 0.009 | 4.46 |
| Конъюгат (пример 3) | 0.0101 ± 0.0006 | 0.167 | 0.331 ± 0.005 | 4.14 |
| Конъюгат (пример 2) | 0.00907 ± 0.00005 | 0.194 | 0.43 ± 0.02 | 3.20 |
1 y - интенсивность поглощения при 290 нм, х - концентрация растворов сравнения (мкМ)
Полученные результаты свидетельствуют в пользу того, что использование выбранных N-ацетилгалактозамин-содержащих фрагментов для синтеза конъюгатов благотворно влияет на их растворимость в воде.
Пример 5. Исследование кинетики гидролиза синтезированных конъюгатов аторвастатина
Исследование стабильности полученных соединений проводили согласно методике [Petrov R. A. et al. Molecular Pharmaceutics. 2020. V.18. P.461-468]. Образец конъюгата разбавляли буферным раствором, при необходимости добавляли раствор фермента и выдерживали при 37°C в течение 24 часов, отбирая пробы в определенные временные интервалы. В исследовании использовали ацетатный буферный раствор (рН 5.0 - среда эндосом) [Maxfield F. R., Yamashiro D. J. Immunobiol. Proteins and Peptides IV. 1987. V.225. Р. 189-198], натрий-фосфатный буфер (pH 7.4 - плазмы крови), и также натрий-фосфатный буферный раствор с добавлением эстеразы свиной печени. Фермент был взят по аналогии с публикацией [Zhang Y., et al. Bioorg. Med. Chem. 2019. V.27. P. 2187-2191]. Анализ проб проводили с помощью ВЭЖХ-МС.
Конъюгаты оказались стабильными в условиях экспериментов: значимого изменения их концентрации, как и накопления продуктов гидролиза не наблюдали даже через 24 часа ни в водных средах, ни в буферном растворе с ферментом (фиг. 1).
Claims (18)
1. Конъюгат ингибитора 3-гидрокси-3-метилглутарил-КоА редуктазы с лигандом асиалогликопротеинового рецептора для лечения и профилактики сердечно-сосудистых заболеваний общей формулы (I):
(I)
и его допустимые для использования в фармацевтике соли,
где X представляет собой -OH или –NHAc,
Y представляет собой
, ,
,
или ,
каждый a, b, c и d независимо представляет собой -H, -D или -CH3,
каждый k, l, m и n независимо 0, 1 или 2,
Z представляет собой алкил (С2-С6), -O-, -S-, -NH-, -N(CH3)-, -NH-C(O)-, C(O)-NH-, -CH=CH- или -O-CH2-CH2-O-.
2. Способ получения конъюгата по п. 1, характеризующийся тем, что проводят реакцию ацилирования между активированным эфиром статина и соответствующим гликозидом галактозы или N-ацетилгалактозамина c концевой аминогруппой в органическом растворителе в присутствии основания, взятых из расчёта, что на 1.0 мольный эквивалент активированного эфира берут 1.0-1.5 мольный эквивалент гликозида и 1.5–5.0 мольный эквивалент основания, реакционную смесь перемешивают в течение не менее 8 ч при комнатной температуре для получения промежуточного продукта, который выделяют путем экстракции, дополнительно очищают прямой колоночной хроматографией и переводят в конечный продукт путем удаления защитных групп и выделения обращенно-фазовой хроматографией.
3. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что в качестве активированных эфиров статинов используют пентафторфенил- или NHS-эфиры статинов.
4. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что в качестве органического растворителя используют ДМФА, ТГФ, дихлорметан, дихлорэтан, хлороформ.
5. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что в качестве основания предпочтительно использовать третичные амины, выбранные из группы, включающей триэтиламин или диизопропилэтиламин.
6. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что выделение промежуточного продукта проводят путем экстракции в системе дихлорметан-вода или этилацетат-вода, с последующей очисткой промежуточного продукта прямой колоночной хроматографией в системе этилацетат-гексан или дихлорметан-метанол.
7. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что для удаления защитных групп используют раствор метилата натрия в метаноле, взятого из расчета, что на 1 эквивалент промежуточного продукта берут не менее 3 эквивалентов метилата натрия, с последующей нейтрализацией реакционной смеси до pH 6 с помощью ионно-обменной смолы Dowex 50W-X8 H+.
8. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что конечный продукт выделяют с помощью обращенно-фазовой хроматографии в системе вода-ацетонитрил.
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2022109586A RU2022109586A (ru) | 2023-10-11 |
| RU2816947C2 true RU2816947C2 (ru) | 2024-04-08 |
Family
ID=
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015071388A1 (en) * | 2013-11-14 | 2015-05-21 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | Apob antisense conjugate compounds |
| RU2696096C2 (ru) * | 2017-12-07 | 2019-07-31 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | Низкомолекулярные конъюгаты противоопухолевых агентов и высокоселективных лигандов асиалогликопротеинового рецептора для терапии онкологических патологий печени |
| RU2734658C2 (ru) * | 2014-05-01 | 2020-10-21 | Ионис Фармасьютикалз, Инк. | Композиции и способы модулирования экспрессии ангиопоэтин-подобного белка 3 |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015071388A1 (en) * | 2013-11-14 | 2015-05-21 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | Apob antisense conjugate compounds |
| RU2734658C2 (ru) * | 2014-05-01 | 2020-10-21 | Ионис Фармасьютикалз, Инк. | Композиции и способы модулирования экспрессии ангиопоэтин-подобного белка 3 |
| RU2696096C2 (ru) * | 2017-12-07 | 2019-07-31 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | Низкомолекулярные конъюгаты противоопухолевых агентов и высокоселективных лигандов асиалогликопротеинового рецептора для терапии онкологических патологий печени |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ZHANG X, et al. GlcNAc Conjugated Atorvastatin with Enhanced Water Solubility and Cellular Internalization. Bioconjugate Chemistry. 2017, v.28, p. 2109-2113. ZHANG Y., et al. Targeted delivery of atorvastatin via asialoglycoprotein receptor (ASGPR). Bioorganic & Medicinal Chemistry. 2019, v.27, p. 2187-2191. ХУДЯКОВ А.Д. и др. Синтез конъюгатов аторвастатина с производными N-ацетил-D-галактозамина для направленного транспорта в клетки печени. Материалы Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых учёных "Ломоносов-2021", секция "Химия", 2021. стр.756. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10800804B2 (en) | Hybrid galactoside inhibitor of galectins | |
| US7638623B2 (en) | Galactoside inhibitors of galectins | |
| CA3020585A1 (en) | Targeted nucleic acid conjugate compositions | |
| SK113797A3 (en) | Bioactive compounds conjugated with glycides | |
| WO2012025857A1 (en) | Cycloalkyl methoxybenzyl phenyl pyran derivatives as sodium dependent glucose co transporter (sglt2) inhibitors | |
| CA2209084A1 (en) | Lewis x derivative and process for producing the same | |
| RU2816947C2 (ru) | КОНЪЮГАТ ИНГИБИТОРА 3-ГИДРОКСИ-3-МЕТИЛГЛУТАРИЛ-КоА РЕДУКТАЗЫ С ЛИГАНДОМ АСИАЛОГЛИКОПРОТЕИНОВОГО РЕЦЕПТОРА | |
| Frydrych et al. | Nucleotide analogues containing a pyrrolidine, piperidine or piperazine ring: Synthesis and evaluation of inhibition of plasmodial and human 6-oxopurine phosphoribosyltransferases and in vitro antimalarial activity | |
| Rosenquist et al. | Synthesis of carbocyclic 2', 3'-dideoxy-2'-C-hydroxymethyl nucleosides as potential inhibitors of HIV | |
| JP3207852B2 (ja) | 抗ウィルス剤及び抗癌剤としての２′―デオキシ―４′―チオリボヌクレオシド | |
| Cheng et al. | Tethered derivatives of D-glucose and pentacyclic triterpenes for homo/heterobivalent inhibition of glycogen phosphorylase | |
| CA2281133C (en) | Multiple-agents-binding compound and use thereof | |
| WO2021193951A1 (ja) | ポリエチレングリコール鎖を有する糖化合物、及び抗体薬物複合体の前駆体 | |
| JP2009274955A (ja) | 変形性関節症治療薬 | |
| JP5717281B2 (ja) | ダブルビオチンアンカー型リガンド固定化分子 | |
| Tsoukala et al. | Synthesis of 3-fluoro-6-S-(2-S-pyridyl) nucleosides as potential lead cytostatic agents | |
| KR20110013438A (ko) | 당류 구조물, 그리고 이러한 구조물의 제조 및 사용 방법 | |
| MURATA et al. | Synthesis of biologically active acycloazt derivatives and related compounds | |
| Schäfer et al. | Aziridine ring opening as regio-and stereoselective access to O-glycosyl amino acids and their transformation into O-glycopeptide mimetics | |
| Yamashita et al. | An efficient synthesis of novel deoxy phospha sugar pyrimidine nucleosides | |
| Mishra et al. | An expeditious synthesis of novel DNA nucleobase mimics of (+)-anisomycin | |
| Lin et al. | Dichotomous Selectivity in Indium-Mediated Aza-Barbier-Type Allylation of 2-N-Acetyl Glycosyl Sulfinylimines in Brine: Convenient Access to Potent Anti-Influenza Agents | |
| US6498277B1 (en) | Disulfone reagents and methods of preparing and using same | |
| JP2009274954A (ja) | 創傷治癒促進剤 | |
| JP5438998B2 (ja) | 新規糖鎖プライマーとその利用 |