RU2814825C1 - Способ определения адгезивной активности лактобактерий и/или бифидобактерий пробиотического или аутопробиотического препарата и способ индивидуального подбора указанных препаратов - Google Patents
Способ определения адгезивной активности лактобактерий и/или бифидобактерий пробиотического или аутопробиотического препарата и способ индивидуального подбора указанных препаратов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2814825C1 RU2814825C1 RU2023108364A RU2023108364A RU2814825C1 RU 2814825 C1 RU2814825 C1 RU 2814825C1 RU 2023108364 A RU2023108364 A RU 2023108364A RU 2023108364 A RU2023108364 A RU 2023108364A RU 2814825 C1 RU2814825 C1 RU 2814825C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lactobacilli
- bifidobacteria
- probiotic
- autoprobiotic
- adhesive activity
- Prior art date
Links
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 title claims abstract description 50
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 title claims abstract description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 title claims abstract description 30
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 title claims abstract description 30
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 title claims abstract description 28
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 title claims abstract description 19
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 9
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 claims description 20
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 claims description 13
- 238000013528 artificial neural network Methods 0.000 claims description 9
- 238000013135 deep learning Methods 0.000 claims description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 5
- 238000012937 correction Methods 0.000 claims description 4
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000005859 cell recognition Effects 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 10
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 208000027244 Dysbiosis Diseases 0.000 description 7
- 230000007140 dysbiosis Effects 0.000 description 7
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 7
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 5
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 4
- GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 238000010801 machine learning Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 1
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000003736 gastrointestinal content Anatomy 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 108010006741 lactobacterin Proteins 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000003062 neural network model Methods 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003909 pattern recognition Methods 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии. Описана группа изобретений, включающая способ определения адгезивной активности лактобактерий и/или бифидобактерий пробиотического или аутопробиотического препарата и способ индивидуального подбора пробиотического или аутопробиотического препарата, содержащих лактобактерии и/или бифидобактерии, включающий определение адгезивной активности лактобактерий и/или бифидобактерий вышеуказанным способом. Изобретение расширяет арсенал способов оптимизации подбора пробиотических препаратов для конкретного человека и идентификации аутоштаммов микроорганизмов. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 табл., 2 пр.
Description
Группа изобретений относится к области медицины, а именно к микробиологии, и может быть использовано в бактериологических лабораториях для индивидуального подбора пробиотических препаратов, содержащих лактобактерии и/или бифидобактерии, а также для идентификации выделенных у обследуемого аутоштаммов лактобактерий и/или бифидобактерий.
Известно, что лактобациллы являются одним из важных компонентов кишечного биоценоза. У этих бактерий имеется выраженная антагонистическая активность по отношению к патогенным и условно-патогенным бактериям, что является важным механизмом предотвращения дисбактериозов кишечника. По мнению многих исследователей, поддержание нормальной численности лактобацилл на слизистых желудочно-кишечного тракта является важным этапом лечения дисбактериоза кишечника и, связанного с ним, дисбактериоза влагалища.
Сформировавшиеся дисбактериозы кишечника трудно поддаются лечению и для полного выздоровления, сопровождающегося нормализацией микрофлоры и восстановлением эубиоза, требуется длительное время. Для этих целей неоднократно предлагалось использовать препараты, содержащие живые лактобактерий, например, лактобактерин. Главным условием эффективности такого лечения является прикрепление лактобактерий к клеткам эпителия желудочно-кишечного тракта - т.е. адгезия. Способность к адгезии является одним из важнейших свойств микроорганизмов, способствующих формированию определенных микробных ценозов, в том числе и аутохтонных ценозов, ведущая роль в которых принадлежит бифидобактериям и лактобактериям. [Мельников В.А. Стулова С.В. Тюмина О.В. Денисова Н.Г. Щукин В.Ю Аутотрансплантация лактобацилл в восстановлении индивидуального биоценоза влагалища женщины. Фундаментальные исследования. - 2012. - №1 - С. 64-67].
Известно, что адгезия лактобацилл носит специфический характер и зависит от соответствия рецепторов конкретного штамма лактобацилл к рецепторам эпителиальных клеток конкретного человека. С момента рождения у ребенка формируется толерантность к нормальной микрофлоре матери [тендеров Б.А. Нормальная микрофлора и ее роль в поддержании здоровья человека. Росс. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. 1998; 8 (1): 61-65]. В течение жизни сайты адгезии - места прикрепления бактерий к слизистой и рецепторы нормофлоры к эпителиоцитам желудочно-кишечного тракта (далее - ЖКТ) становятся генетически детерминированными, специфическими для каждого конкретного человека. К сайтам адгезии могут надежно прикрепиться только аутоштаммы этого конкретного человека или производственные штаммы бактерий нормофлоры с рецепторами, близкими по строению к аутоштаммам.
Адгезивность является важным свойством для успешного приживления пробиотических штаммов коммерческих препаратов на основе латобактерий. Интенсивность адгезии может существенно варьировать в зависимости от используемых пробиотических штаммов и от условий проведения эксперимента по ее оценке.
Известен способ определения адгезивной активности лактобактерий к буккальному и влагалищному эпителию, где доказана возможность использования буккального эпителия при оценке адгезивности пробиотических штаммов лактобактерий [Бойцов А.Г., Рищук С.В., Ильясов Ю.Ю., Гречанинова Т.А. Адгезия лактобактерий к клеткам вагинального и буккального эпителия // Вестник Санкт-Петербургской Медицинской академии им И.И. Мечникова. - 2004. - №4(5). С. 191-193]. Согласно известному методу, взятие буккального эпителия производили путем соскоба клеток эпителия с внутренней поверхности щеки стерильными шпателями. Затем соскобленный эпителий погружали в буфер и осаждали центрифугированием. Клетки помещали в пробирки Эппендорфа с цитрат-фосфатным буфером.
Известен способ определения антагонистической активности пробиотиков по патенту RU 2187801 (опубл. 20.08.2002), включающий воздействие пробиотика на бактериальную тест-культуру, отличающийся тем, что в качестве тест-культуры используют люминисцентные бактерии, а антагонистическую активность пробиотика оценивают по изменению интенсивности биолюминесценции бактерий тест-культуры.
Известен по патенту RU 2412989 (опубл. 27.02.2011) способ индивидуального выявления антагонистической активности пробиотических препаратов, содержащих лактобактерий и/или бифидобактерии, в отношении условно-патогенных микроорганизмов, выделенных при диагностике дисбактериоза кишечника, при котором выделяют штаммы условно-патогенных микроорганизмов (УПМ) из фекалий обследуемого, затем выделяют лактобактерий и/или бифидобактерии, входящие в состав пробиотического препарата в чистой культуре. Определяют антагонистическую активность лактобактерий и/или бифидобактерии одновременно методом двухслойного агара и методом перевернутого агара, при этом посев осуществляют по Gold. Оценивают мощность антагонистического воздействия пробиотических штаммов по степени интенсивности подавления штаммов УПМ по сравнению с контролем. При индивидуальном выявлении антагонистической активности пробиотических препаратов, содержащих лактобактерий, при отсутствии антагонистической активности или выявлении низкой или средней степени интенсивности подавления УПМ антагонистическую активность дополнительно определяют капельной методикой.
Известен по патенту RU 2428468 (опубл. 10.09.2011) способ индивидуального подбора пробиотических препаратов, содержащих лактобактерий и/или бифидобактерии, для элиминации условно-патогенных микроорганизмов, выделенных от пациента при исследовании на дисбактериоз кишечника. Индивидуальный подбор пробиотиков осуществляют при средней или высокой степенях адгезивной активности пробиотических штаммов с использованием буккального эпителия конкретного пациента, а также наличии биосовместимости пробиотических и индигенных лакто- и бифидобактерий и высокой степени антагонистической активности пробиотических штаммов несколькими способами в отношении УПМ, выделенного от конкретного пациента.
Недостатками известных способов является то, что оценка адгезивной активности ведется визуально, образцы при длительном нахождении на свету высыхают, выцветают, подсчет ведется длительно и работа превращается в рутинную. Также не исключен человеческий фактор - ошибки при подсчете, поэтому необходима автоматизация оценки индекса адгезивности в образцах.
Технической проблемой, решаемой данным изобретением, является повышение точности способа для оптимизации подбора пробиотических препаратов для конкретного человека и идентификации аутоштаммов микроорганизмов, а также снижение времени получения результата.
Решение технической проблемы достигается тем, что способ определения адгезивной активности лактобактерий и/или бифидобактерий пробиотического или аутопробиотического препарата включает получение буккального эпителия обследуемого, выделение входящих в состав пробиотического или аутопробиотического препарата лактобактерий и/или бифидобактерий в чистой культуре, проведение реакции адгезии клеток буккального эпителия с лактобактериями и/или бифидобактериями, определение адгезивной активности в образцах по индексу адгезивности, при этом изображения образцов переводят в электронный вид с помощью цифрового микроскопа, и загружают в программу, в которой осуществляют распознавание клеток с помощью нейронной сети с глубоким обучением.
Индекс адгезивности определяют как отношение количества адгезированных бактерий к единице площади клетки буккального эпителия с учетом корректирующего коэффициента. Индекс адгезивности в диапазоне 0,1-0,32 характеризует низкую степень адгезивной активности, в диапазоне 0,321-0,97 - среднюю, выше 0,97 - высокую.
Данная градация была получена эмпирическим путем и позволяет более точно относить каждый случай к конкретному значению качественной характеристики, а также вносить новые необходимые корректировки в связи с обновлением статистики.
Корректирующий коэффициент - величина, учитывающая масштаб и габариты изображения для более наглядного предоставления результатов.
Решение технической проблемы достигается также тем, что способ индивидуального подбора пробиотического или аутопробиотического препарата, содержащих лактобактерий и/или бифидобактерии, включает определение адгезивной активности лактобактерий и/или бифидобактерий, при этом адгезивную активность определяют как описано выше с последующим подбором пробиотического или аутопробиотического препарата на основании индекса адгезивности, характеризующего среднюю или высокую степень адгезивной активности.
Согласно предложенному способу взятие буккального эпителия производят путем соскоба клеток эпителия с внутренней поверхности щеки стерильными шпателями. Соскобы помещают в цитрат-фосфатный буфер и доставляют в лабораторию в течение 2-3 часов. Непосредственно перед началом исследования эпителиальные клетки отмывают путем трехкратного центрифугирования (1000 об/мин - 5 минут) для удаления клеточных обломков.
Стандартными способами выделяют чистую культуру лактобактерий и/или бифидобактерий из аутоштаммов, выделенных из фекалий обследуемого, с целью для подтверждения идентичности аутоштаммов лактобактерий и бифодобактерий.
Для проведения исследования по адгезии лактобактерий и/или бифидобактерий к буккальному эпителию, лактобактерий и/или бифидобактерий трижды отмывают цитрат-фосфатным буфером Мак-Илвейна с рН 5,4 путем центрифугирования. Из осадка готовят суспензию лактобактерий с титром 106 клеток в 1 мл по «стандарту мутности».
Затем проводят реакцию адгезии клеток буккального эпителия с лактобактериями и/или бифидобактериями. Для изучения адгезивной активности в пробирку Эппендорфа вносят 800 мкл суспензии эпителиальных клеток и 600 мкл суспензии лактобактерий (бифидобактерий). Содержимое пробирок тщательно перемешивают и инкубируют в течение 2 часов при температуре 37°С с периодическим повторным перемешиванием путем переворачивания пробирок. После инкубации не адсорбированные бактериальные клетки удаляют путем двукратного отмывания путем центрифугирования (1000 об/мин в течение трех минут). Далее проводят контрастное окрашивание образцов спиртовым раствором 0,5% кристаллического фиолетового. Образец считают пригодным для дальнейшего исследования, если при микроскопии (увеличение ×900) в каждом поле зрения было не менее 2-3 эпителиальных клеток. При микроскопии препарата подсчитывают количество бактериальных клеток, прикрепившихся к поверхности каждой эпителиальной клетки. Ручным способом в каждом препарате анализируют не менее 5-ти клеток, определяют индекс адгезивности по среднеарифметическому числу адгезированных микроорганизмов (см. табл.). Результат выражают в виде среднеарифметического числа лактобактерий (бифидобактерий) на поверхности одного эпителиоцита, в частности для подтверждения идентичности выделенных аутоштаммов лактобактерий, поскольку к эпителиоцитам щечного эпителия конкретного человека могут надежно прикрепиться только аутоштаммы этого конкретного человека или производственные штаммы бактерий нормофлоры с рецепторами, близкими по строению к аутоштаммам.
Изображения образцов переводят в электронный вид с помощью цифрового микроскопа, и загружают в программу, в которой осуществляется распознавание клеток с помощью нейронной сети с глубоким обучением.
Для успешного и эффективного использования методов машинного обучения крайне важно решить первичную ключевую задачу - создать data-set, набор данных, на основании которого будут осуществляться все дальнейшие эксперименты по применению технических решений. Методы распознавания изображений крайне чувствительны к тому, на основании какой выборки осуществляется обучение моделей, и то на какой выборке данных она будет эксплуатироваться в дальнейшем. Как следствие вышесказанного, возникает задача - стандартизация полученных изображений, но поскольку ключевым возможным фактором вариативности получаемых изображений является изменчивость исходных образов, то возникает задача - стандартизация исследуемых объектов. Исследуемые образцы, прошедшие стадии подготовки к исследованию, например, отмывание и окрашивание, имеют ряд факторов, которые могут повлиять на изменчивость. Вторичным фактором изменчивости получаемых изображений является настройка микроскопа и экспозиции камеры, с помощью, которых осуществляется фотосъемка образцов.
На следующем этапе подготовки изображений осуществлялось формирование выборки изображений с клетками лакто- и бифидобактерий. В результате, было отобрано около 500 изображений, которые с наибольшей дисперсионностью описывают полноту выборки с требуемыми свойствами, и на основании которой осуществлялось тестирование инструментов распознавания.
В рамках поиска технического решения рассматриваемой задачи были протестированы алгоритмические методы распознавания с использованием машинного обучения, нейронные сети с глубоким обучением, нейронные сети с кластеризацией выборки и их различные технологии; в результате тестирования и оценки качества, скорости распознавания было принято решением использовать нейронные сети с глубоким обучением.
В рамках используемого метода распознавания было протестировано 50 обученных моделей нейронных сетей. Скорость распознавания одного изображения занимает около 2-х секунд. Погрешность вычислений многократно ниже методов ручного подсчета.
Разработка системы распознавания образов на основе нейронных сетей с глубоким обучением позволяет ускорить процесс оценки адгезионных процессов в несколько раз, повысить точность получаемых результатов. Многократно снизить нагрузку на органы зрения специалистов.
Пример 1. У обследуемого С.О.С. производят взятие буккального эпителия путем соскоба клеток эпителия с внутренней поверхности щеки стерильным шпателем. Получают суспензию лактобактерий, выделенных из чистой культуры пробиотического препарата. Далее проводят реакцию адгезии клеток буккального эпителия с лактобактериями, как описано выше. Затем полученные изображения образцов отбирают и переводят в цифровой вид согласно заявляемому способу. Далее изображения анализируют с помощью нейронной сети с глубоким обучением. В результате анализа был получен ответ, что индекс адгезивности составляет 0,34.
Пример 2. У обследуемого К.В.И. производят взятие буккального эпителия путем соскоба клеток эпителия с внутренней поверхности щеки стерильным шпателем. Затем получают аутоштамм следующим образом: пробу содержимого толстой кишки отбирают в предварительно взвешенную стерильную емкость. Определяют количество отобранной пробы путем повторного взвешивания контейнера. Для декантаминации биоматериала от транзиторной микрофлоры проводят последовательны е десятикратные разведения испытуемого образца физиологическим раствором до 10-8.
Для выделения бифидобактерий готовят 1 ряд из 10 пробирок со средой Блаурокка. Для выделения лактобактерий готовят 7 пробирок со средой МРС-4. Исследуемый материал из разведений 10-6 засевают на соответствующие питательные среды для выделения лактобактерий и бифидобактерий. Через двое суток материал из изолированных колоний лактобактерий, выросших на среде МРС-4, в наибольшем разведении (103) и из изолированных колоний бифидобактерий, выросших на питательной среде Блаурокка, в наибольшем разведении (107), вновь пересевают на соответствующие селективные питательные среды. Выросшие через 2 суток после второго пассажа изолированные колонии бифидобактерий и лактобактерий пересевают на жидкие среды МРС-4 и Блаурокка для получения биомассы микроорганизмов, которая используется в виде аутоштаммов для лечения дисбактериоза кишечника.
Контроль полученного аутопробиотического препарата осуществляют общепринятыми методами посева на селективные питательные среды: Эндо, Плоскирева, МПА для определения посторонней микрофлоры - на этих средах в аэробных условиях рост бактерий отсутствует.
Оценку количественного содержания бактерий аутоштаммов в биомассе аутопробиотика бифидобактерий проводят на среде Блаурокка и лактобактерий на агаризованной среде МРС-4 (путем подсчета колоний в среде Блаурокка в 10-8, 10-9 разведениях, на агаризованной среде МРС-4 в 10-6, 10-7 разведениях и выражают в КОЕ/г кишечного содержимого). В биомассе аутопробиотика содержание бифидобактерий составило (1,0-2,4)×109 КОЕ/г, содержание лактобактерий - (1,0-2,5)×107 КОЕ/г. Уровень кислотообразующей активности бифидобактерий составил (98±4) Т° (единиц Тернера), лактобактерий.. (114±4) Т°.
Получают суспензию бифидобактерий, выделенных из чистой культуры аутопробиотика. Далее проводят реакцию адгезии клеток буккального эпителия с бифидобактерими, как описано выше. Затем полученные изображения образцов отбирают и переводят в цифровой вид согласно заявляемому способу. Далее изображения анализируют с помощью нейронной сети с глубоким обучением. В результате анализа был получен ответ, что индекс адгезивности составляет 0,64.
Claims (5)
1. Способ определения адгезивной активности лактобактерий и/или бифидобактерий пробиотического или аутопробиотического препарата, включающий получение буккального эпителия обследуемого, выделение входящих в состав пробиотического или аутопробиотического препарата лактобактерий и/или бифидобактерий в чистой культуре, проведение реакции адгезии клеток буккального эпителия с лактобактериями и/или бифидобактериями, определение адгезивной активности в образцах по индексу адгезивности, отличающийся тем, что изображения образцов переводят в электронный вид с помощью цифрового микроскопа, и загружают в программу, в которой осуществляют распознавание клеток с помощью нейронной сети с глубоким обучением.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что индекс адгезивности определяют как отношение количества адгезированных микроорганизмов к единице площади клетки буккального эпителия с учетом корректирующего коэффициента.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что индекс адгезивности в диапазоне 0,1-0,32 характеризует низкую степень адгезивной активности, в диапазоне 0,321-0,97 - среднюю, выше 0,97 - высокую.
4. Способ по п. 2, отличающийся тем, что корректирующий коэффициент представляет собой величину, учитывающую масштаб и габариты изображения.
5. Способ индивидуального подбора пробиотического или аутопробиотического препарата, содержащих лактобактерий и/или бифидобактерий, включающий определение адгезивной активности лактобактерий и/или бифидобактерий, отличающийся тем, что адгезивную активность определяют по пп. 1-4 с последующим подбором пробиотического или аутопробиотического препарата на основании индекса адгезивности, характеризующего среднюю или высокую степень адгезивной активности.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2814825C1 true RU2814825C1 (ru) | 2024-03-05 |
Family
ID=
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2303812C2 (ru) * | 2004-12-29 | 2007-07-27 | Общество с ограниченной ответственностью "НПФ РЕНАМ" | Способ распознавания и подсчета клеток в биологических средах человека и животных и устройство для его осуществления |
| RU2428468C1 (ru) * | 2010-06-03 | 2011-09-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ индивидуального подбора пробиотических препаратов, содержащих лактобактерии и/или бифидобактерии для элиминации условно-патогенных микроорганизмов, выделенных от пациента при исследовании на дисбактериоз кишечника |
| WO2020242341A1 (ru) * | 2019-05-27 | 2020-12-03 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Лаб Кмд" | Метод для выделения и классификации типов клеток крови с помощью глубоких сверточных нейронных сетей |
| RU2697613C9 (ru) * | 2018-11-20 | 2022-04-15 | Хуавей Текнолоджис Ко., Лтд. | Способ распознавания объектов с помощью нейронных сетей |
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2303812C2 (ru) * | 2004-12-29 | 2007-07-27 | Общество с ограниченной ответственностью "НПФ РЕНАМ" | Способ распознавания и подсчета клеток в биологических средах человека и животных и устройство для его осуществления |
| RU2428468C1 (ru) * | 2010-06-03 | 2011-09-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ индивидуального подбора пробиотических препаратов, содержащих лактобактерии и/или бифидобактерии для элиминации условно-патогенных микроорганизмов, выделенных от пациента при исследовании на дисбактериоз кишечника |
| RU2697613C9 (ru) * | 2018-11-20 | 2022-04-15 | Хуавей Текнолоджис Ко., Лтд. | Способ распознавания объектов с помощью нейронных сетей |
| WO2020242341A1 (ru) * | 2019-05-27 | 2020-12-03 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Лаб Кмд" | Метод для выделения и классификации типов клеток крови с помощью глубоких сверточных нейронных сетей |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Chang et al. | Proportion of beta-D-glucuronidase-negative Escherichia coli in human fecal samples | |
| McNulty et al. | New spiral bacterium in gastric mucosa. | |
| Barrett | Intestinal spirochaetes in a Gulf Arab population | |
| Corper | The Certified Diagnosis of Tuberculosis: Practical Evaluation of a New Method for Cultivating Tubercle Bacilli for Diagnostic Purposes | |
| saadi Al-Baer et al. | Isolation and identification of Escherichia coli producing cytosine deaminase from Iraqi patients | |
| RU2814825C1 (ru) | Способ определения адгезивной активности лактобактерий и/или бифидобактерий пробиотического или аутопробиотического препарата и способ индивидуального подбора указанных препаратов | |
| Gangarosa et al. | Laboratory methods in cholera: isolation of Vibrio cholerae (el tor and classical) on TCBS medium in minimally equipped laboratories | |
| CN115960753A (zh) | 一种基于体内进化筛选定殖能力强乳酸菌的方法 | |
| Young et al. | Differentiation of gonococcal and non-gonococcal neisseriae by the superoxol test. | |
| Kukoschke et al. | Varying incidence of Blastocystis hominis in cultures from faeces of patients with diarrhoea and from healthy persons | |
| Eyre | Asylum dysentery in relation to B. dysenteriae | |
| RU2415945C2 (ru) | Способ выявления микобактерий с поверхностей | |
| Šula | A liquid ascitic medium for the isolation of Mycobacterium tuberculosis from pathological material | |
| Kurt¹ et al. | The effectiveness of the Culture for Dientamoeba fragilis from the Stool | |
| Hiss Jr | New and Simple Media for the Differentiation of the Colonies of Typhoid, Colon, and allied Bacilli | |
| Trevors et al. | The use of electron transport system activity for assessing toxicant effects on algae | |
| AL-Jumaa et al. | Laboratory Diagnosis of Mycoplasma spp. from the Upper Respiratory Tract and Conjunctival Infections in Shelter Cats | |
| Ifeanyi et al. | Prevalence of Urinary Tract Infection among Adult Females in Omu-Aran South-West Nigeria | |
| RU2743454C1 (ru) | Набор штаммов бактерий для обучения вопросам микробиологии и методам лабораторной диагностики холеры | |
| RU2812604C1 (ru) | Способ диагностики хронического уретрита, обусловленного условно-патогенными микроорганизмами | |
| RU2088938C1 (ru) | Способ выявления кишечного дисбиоза и кишечной инфекции | |
| CN110464384B (zh) | 一种肾盂尿液微生态标本采集及污染验证方法 | |
| Goldfogel et al. | Preparation of sputum smears for acid-fast microscopy | |
| Gumasta et al. | Isolation of Mycoplasma gallisepticum from the natural cases of chronic respiratory disease | |
| Hamza et al. | Comparative Studies of the Methods of Detecting Rifampicin Resistant Mycobacterium tuberculosis among Tuberculosis Patients Attending Aminu Kano Teaching Hospital, Kano |