RU2813724C1 - Средство, обладающее противоопухолевой активностью, и способ его получения - Google Patents
Средство, обладающее противоопухолевой активностью, и способ его получения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2813724C1 RU2813724C1 RU2023129258A RU2023129258A RU2813724C1 RU 2813724 C1 RU2813724 C1 RU 2813724C1 RU 2023129258 A RU2023129258 A RU 2023129258A RU 2023129258 A RU2023129258 A RU 2023129258A RU 2813724 C1 RU2813724 C1 RU 2813724C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- selenium
- arabinogalactan
- sulfated
- cells
- solution
- Prior art date
Links
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 title description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title description 7
- 239000011669 selenium Substances 0.000 claims abstract description 65
- SATHPVQTSSUFFW-UHFFFAOYSA-N 4-[6-[(3,5-dihydroxy-4-methoxyoxan-2-yl)oxymethyl]-3,5-dihydroxy-4-methoxyoxan-2-yl]oxy-2-(hydroxymethyl)-6-methyloxane-3,5-diol Chemical class OC1C(OC)C(O)COC1OCC1C(O)C(OC)C(O)C(OC2C(C(CO)OC(C)C2O)O)O1 SATHPVQTSSUFFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 42
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 41
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 40
- JPJALAQPGMAKDF-UHFFFAOYSA-N selenium dioxide Chemical compound O=[Se]=O JPJALAQPGMAKDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims abstract description 3
- 229920000189 Arabinogalactan Polymers 0.000 claims description 6
- 239000001904 Arabinogalactan Substances 0.000 claims description 6
- 235000019312 arabinogalactan Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 2
- 239000002114 nanocomposite Substances 0.000 abstract description 23
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 10
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 abstract description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 2
- 239000004552 water soluble powder Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 28
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 24
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 17
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 12
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 10
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 7
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 6
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 230000034994 death Effects 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 5
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000010936 titanium Substances 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 4
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 3
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 230000001857 anti-mycotic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002543 antimycotic Substances 0.000 description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 229940065287 selenium compound Drugs 0.000 description 3
- 150000003343 selenium compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 208000003468 Ehrlich Tumor Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 2
- 102000008114 Selenoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010074686 Selenoproteins Proteins 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- -1 modified ones Chemical class 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FDKWRPBBCBCIGA-REOHCLBHSA-N (2r)-2-azaniumyl-3-$l^{1}-selanylpropanoate Chemical compound [Se]C[C@H](N)C(O)=O FDKWRPBBCBCIGA-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoic acid;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- FDKWRPBBCBCIGA-UWTATZPHSA-N D-Selenocysteine Natural products [Se]C[C@@H](N)C(O)=O FDKWRPBBCBCIGA-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 101100328536 Mus musculus Cntd1 gene Proteins 0.000 description 1
- MKYBYDHXWVHEJW-UHFFFAOYSA-N N-[1-oxo-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propan-2-yl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(C(C)NC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 MKYBYDHXWVHEJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 241000978776 Senegalia senegal Species 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003917 TEM image Methods 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 208000010928 autoimmune thyroid disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 229910052729 chemical element Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine monohydrate Substances O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000000608 laser ablation Methods 0.000 description 1
- 238000000133 mechanosynthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000004452 microanalysis Methods 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 210000002747 omentum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000003244 pro-oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 229940082569 selenite Drugs 0.000 description 1
- MCAHWIHFGHIESP-UHFFFAOYSA-L selenite(2-) Chemical compound [O-][Se]([O-])=O MCAHWIHFGHIESP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 125000003748 selenium group Chemical group *[Se]* 0.000 description 1
- ZKZBPNGNEQAJSX-UHFFFAOYSA-N selenocysteine Natural products [SeH]CC(N)C(O)=O ZKZBPNGNEQAJSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940055619 selenocysteine Drugs 0.000 description 1
- 235000016491 selenocysteine Nutrition 0.000 description 1
- MCAHWIHFGHIESP-UHFFFAOYSA-N selenous acid Chemical class O[Se](O)=O MCAHWIHFGHIESP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 230000001180 sulfating effect Effects 0.000 description 1
- 230000019635 sulfation Effects 0.000 description 1
- 238000005670 sulfation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области химии и фармацевтической промышленности, а именно к средству на основе диоксида селена и сульфатированного арабиногалактана, которое характеризуется тем, что обладает противоопухолевой активностью и представляет собой сухой водорастворимый порошок с содержанием селена 5,00-17,40% и размером композитов 5-50 нм, при этом селен-содержащие структуры механохимическим образом внедрены в матрицу сульфатированного арабиногалактана. Изобретение обеспечивает селен-содержащий нанокомпозит сульфатированного арабиногалактана с противоопухолевой активностью, который не токсичен для нормальных клеток млекопитающего. 4 ил., 1 табл., 8 пр.
Description
Селен, первоначально открытый Йонсом Якобом Берцелиусом, представляет собой химический элемент, жизненно необходимый для здоровья человека [Adv. Clin. Exp.Med. 2018, 27, 245]. Двадцать первая аминокислота, селеноцистеин (Sec) [Annu. Rev. Nutr. 2015, 35, 109] участвует в синтезе селенопротеинов [Biochim. Biophys. Acta, Gen. Subj. 2015, 1850, 1642], которые, помимо прочего, отвечают за безопасный химический транспорт активного селена по организму. Известно, что как дефицит, так и избыток селена лишает клетку способности синтезировать селенопротеины [Hormones 2020, 19, 9], что коррелирует с сердечно-сосудистыми и воспалительными заболеваниями, иммунодефицитом и нарушениями нервной деятельности [Metallomics 2014, 6, 25], диабетом второго типа [Curr. Environ. Health Rep. 2018, 5, 464.], нарушениями фертильности/репродукции [Hormones 2020, 19, 9], аутоиммунными заболеваниями щитовидной железы и раком [Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 2016, 56, 36]. Считается, что опухолевые клетки, по-видимому, более восприимчивы к прооксидантным и потенциальным цитотоксическим эффектам, вызванным высокими дозами селена. Однако терапевтические соединения на основе селена имеют узкое терапевтическое окно и поэтому в основном используются против агрессивного рака на поздних стадиях [Biomed. Pharmacother. 2019, 111, 802].
Установлено, что селен-содержащие наночастицы (SeNP) обладают меньшей токсичностью и более высокой биосовместимостью, чем органические или неорганические соединения селена [Col. & Surf. В: Biointerf. 2021, 197, 111381]. Именно данный факт является причиной повышенного внимания научного сообщества к применению SeNP в качестве терапевтических и тераностических средств [Int. J. Nanomed. 2018, 13, 2107]. С другой стороны известно, что так называемые «голые» SeNP, полученные химическим синтезом, нестабильны в водных растворах, что приводит к образованию более крупных агрегатов вплоть до микрогетерогенных размеров [J. Food Biochem. 2020, 44, e13363]. Поэтому обычно при проведении синтезов SeNP, предназначенных для использования в качестве медицинских препаратов, добавляют стабилизаторы, способствующие сохранению размеров и биологической активности целевого продукта. Поскольку показано, что небольшие изменения размера SeNPs могут влиять на их токсическую активность [Int. J. Nanomed. 2017, 12,4527; Nanobiotechnol. Rep.2021, 16, 202]. Обычно для стабилизации SeNP используются такие соединения, как аминокислоты [Dalton Trans. 2014, 43, 1854], бычий сывороточный альбумин (BSA) [Int. J. Nanomed. 2020, 15, 115], полисахариды, например, хитозан [IET Nanobiotechnol. 2019, 13, 30], гуммиарабик [Int. J. Biol. Macromol. 2014, 65, 155] и арабиногалактан [Rus. J. Gen. Chem. 2015, 85, 485; IET Nanobiotechnol. 2020, 14, 519; Appl. Sci. 2021, 11, 3717], а также полимеры, такие как поли(молочно-гликолевая кислота) (PLGA) [Biol. Trace Elem. Res. 2019, 187, 80], поливиниловый спирт (PVA) [Colloids Surf., В 2015, 126, 546], полиэтиленимин (PEI) [Cancer Lett. 2018,416, 87] и др.
Отметим, что в академической и патентной литературе описано множество способов синтеза SeNP, которые могут быть объединены в три общие группы: (1) восстановление неорганических селен-содержащих соединений (например, селенит или селенат) биоорганизмами (например, бактериями, грибами, простейшими), растительными экстрактами [Sci. Rep.2016, 6, 1; Front. Microbiol. 2019, 10, 931; Int. Microbiol. 2021, 24, 103]; (2) восстановление неорганических соединений селена под действием химических восстановителей (например, аскорбиновая кислота, гидразин гидрат) в присутствие другого(их) соединений, используемых в качестве стабилизатора(ов) [Biol. Trace Elem. Res. 2019, 187, 80; Int. J. Nanomed. 2020, 15, 115; Angew. Chem., Int. Ed. Engl. 2020, 59, 4406; IET Nanobiotechnol. 2020, 14, 519]; (3) использование физических методов (например, нагревание, лазерная абляция) для индукции изменений в неорганических соединениях селена и образование SeNP в присутствии стабилизирующего(их) агента(ов) [Molecules 2019, 24, 4048; Int. J. Biol. Macromol. 2020, 156, 1584; Biol. Trace Elem. Res. 2020, 195, 323]. Каждая из перечисленных групп методов обладает как набором преимуществ, так и принципиальных недостатков.
Анализ данной литературы позволяет предположить, что наиболее удобным для медицинского использования и простым в изготовлении SeNP-содержащим препаратом можно считать комплексную структуру, обладающую следующими параметрами: (1) результирующая субстанция должна быть растворимой в воде или других растворителях, традиционно применяющихся в медицине, при этом целевой композит должен удерживать селен-содержащую структуру в стабильной форме после растворения; (2) метод синтеза должен быть максимально простым, с минимальным количеством стадий (в идеале с одной стадией), при этом исходными соединениями должны выступать дешевые, коммерчески доступные, стабильные препараты; (3) желательно, чтобы полученная композиция после синтеза не требовала проведения дополнительных процедур, а именно, перекристаллизации, сублимации, очистки и т.д.; (4) каждый из компонентов целевого препарата сам по себе должен обладать определенной биологической активностью, а их сочетание приводить к синергизму желаемых свойств.
Препаратами, наиболее соответствующими описанным выше параметрам, можно считать молекулярные комплексы и/или аддукты полисахаридов, в том числе и модифицированных, с некоторыми биологически значимыми элементами [RU2614363C2, Rus. J. Gen. Chem. 2015, 85, 485; Int. J. Nanomed. 2018, 13, 2107; IET Nanobiotechnol. 2020, 14, 519; RU2778928C1; RU2795219C1], синтез которых в течении ряда лет разрабатываются в ИрИХ СО РАН (г. Иркутск).
Например, известен способ получения селен-содержащего фармацевтического препарата [RU2614363C2], который включает взаимодействие арабиногалактанового сырья (специально очищенного от фенольных примесей) и диоксида селена или солей селенистой кислоты в растворителе с последующим осаждением в этиловый спирт, или ацетон, или другой смешивающийся с водой органический растворитель. Осуществление изобретения позволяет получить стабильные водорастворимые нанокомпозиты, обладающие противоопухолевой активностью и может быть использовано для торможения развития опухолей эпителиального происхождения (карцином), в частности карциномы Эрлиха. Описанный способ синтеза обладает существенным недостатком, а именно, сложностью методологии синтеза, требующей осуществления процедуры получения целевого продукта в растворе, его выделения и сушки. Кроме того, авторы в качестве стабилизирующей матрицы использовали арабиногалактан, который, безусловно, обладает выдающимися биологическими параметрами [RU2778928C1; RU2795219C1], но его модифицированные аналоги более перспективны, как противоопухолевые агенты, например, сульфатированный арабиногалактан [RU2319707C1; RU2546965C1; Хим. растит. сырья 2019, 4, 47; Russ. J. Bioorg. Chem. 2020, 46, 1323; Wood Sci. & Technol. 2021, 55, 1725; Earth & Environm. Sci. 2021, 839, 042094].
Наиболее близким к предлагаемому способу получения целевой композиции является способ получения йод-содержащих композитов арабиногалактана с антимикробными и противогрибковыми свойствами [RU2795219C1], а именно, механохимическая активация двух исходных компонентов (йода и арабиногалактана). Данная методология чрезвычайно проста и эффективна и не требует использования дополнительных стадий, как подготовки исходных компонентов, так и целевого продукта.
Сущность заявляемого решения заключается в получении в сухом порошкообразном виде стабильных водорастворимых нанокомпозитов (на основе сульфатированного арабиногалактана и диоксида селена), которые обладают противоопухолевой активностью. На основе этих композитов готовится противоопухолевое средство, представляющее собой водные растворы этих нанокомпозитов, нормированные по содержанию селена (см. Примеры).
Преимуществами данного метода создания нанокомпозитов на основе сульфатированного арабиногалактана и диоксида селена является отсутствие как дополнительных стадий получения целевых структур (например, растворение, осаждение, сушка и т.д.), так и других специально вводимых компонентов, например, растворителей или восстановителей. Более того, весь процесс механосинтеза осуществляется при комнатной температуре.
Поставленная задача достигается следующим образом:
рассчитанное количество сульфатированного арабиногалактана и SeO2 загружали в шаровую мельницу МЛ-1 (НПЭФ «Экон», Россия, материал рабочей камеры - титан) и подвергали обработке в течение 100 мин (см. Пример 1). Полученная таким образом порошкообразная композиция отличается оранжевой окраской, растворима в воде и ДМСО, не растворима в большинстве органических растворителей.
Содержание селена в полученных таким образом образцах, определенное элементным анализом и рентгеновским энергодисперсионным микроанализом, составляет от 5.0 до 17.4% селена, а серы - от 8.83 до 11.63%, в зависимости от исходного соотношения сульфатированный арабиногалактан / SeO2 (см. Примеры 1-4). По данным просвечивающей электронной микроскопии, размеры наблюдаемых нанокомпозитов составляют от 5 до 50 нм (Рисунок 1).
Синтез сульфатированного арабиногалактана осуществляли в соответствии с методикой, описанной в [RU2319707C1].
Заявителем не выявлены источники, содержащие информацию о технических решениях, идентичных настоящему изобретению, что позволяет сделать вывод о его соответствии критерию «новизна».
Отличительной особенностью настоящего изобретения является:
- простота (исходные вещества - это коммерчески доступные компоненты, не требующие предварительной подготовки и обработки; все манипуляции проводятся на воздухе, при комнатной температуре (20-25°С) в одном реакционном сосуде) (см. Пример 1-4);
- конечный продукт, а именно селен-содержащий нанокомпозит сульфатированного арабиногалактана - это стабильное порошкообразное вещество, сохраняющие свои физико-химические параметры в течение длительного промежутка времени;
- полученный селен-содержащий нанокомпозит сульфатированного арабиногалактана обладает противоопухолевой активностью (Примеры 5-7) и не токсичен для нормальных клеток млекопитающего (фибробластов) (Пример 8).
Заявителем не обнаружены какие-либо источники информации, содержащие сведения о влиянии заявленных отличительных признаков на достигаемый вследствие их реализации технический результат. Это, по мнению заявителя, свидетельствует о соответствии данного технического решения критерию «изобретательский уровень».
Краткое описание рисунков.
На рисунке 1 представлены ТЭМ микрофотографии образца селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана (содержание селена 9.12%). Микрофотографии сделаны на трансмиссионном электронном микроскопе Leo 906 Ec ускоряющим напряжением 80 кв.
На рисунке 2 представлены клетки карциномы Эрлиха через 24 часа инкубации с раствором ArS-Se. Гибель опухолевых клеток Эрлиха (клетки окрашены пропидия йодидом - красный цвет) (А), отсутствие окраски у большинства клеток без воздействия ArS-Se (Б).
На рисунке 3 представлены клетки Кребса через 24 часа инкубации с раствором ArS-Se. Гибель опухолевых клеток Кребса (клетки окрашены пропидия йодидом - красный цвет) (А), отсутствие окраски у большинства клеток без воздействия ArS-Se (Б). На рисунке 4 представлены фибробласты после инкубирования с ArS-Se в течение суток (А), контрольная группа (Б). Препараты окрашены пропидия йодидом для выявления погибших клеток. Отсутствие различий между контрольной группой и воздействием ArS-Se - положительно окрашены единичные клетки.
В таблице 1 Влияние селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана на развитие асцитной карциномы Эрлиха, где АКЭ - асцитная аденокарцинома Эрлиха, ArS-Se - селен-содержащий нанокомпозит сульфатированного арабиногалактана,* - р<0.001 в сравнении с контролем АКЭ.
Пример 1.
А) Получение сульфатированного арабиногалактана:
К раствору, содержащему 1.0 г арабиногалактана в 3 мл ДМСО, прилили 10 мл сульфатирующей смеси SO3 в ДМФА с концентрацией SO3 18%. Сульфатирование проводили при интенсивном перемешивании при температуре 20°С в течение 30 мин. После этого реакционную смесь нейтрализовали 26 мл 10% водным раствором КОН и высаживали в 500 мл этилового спирта. Полученный осадок отфильтровали, промывали спиртом, сушили при пониженном давлении. Получили 1.8216 г продукта. Найдено, %: С 33.87; Н 5.51; S 12.99.
Б) Получение селен-содержащих нанокомпозитов сульфатированного арабиногалактана: Навески 1.001 г сульфатированного арабиногалактана и 0.126 г SeO2 поместили в шаровую мельницу МЛ-1 (НПЭФ «Экон», Россия) (материал рабочей камеры - титан), и подвергали обработки в течение 100 минут.Была получена порошкообразная композиция массой 1.102 г, со следующим элементным составом, %: С, 30.26; Н, 5.10; S, 10.66; Se 9.12.
Пример 2.
А) Получение сульфатированного арабиногалактана проводили по аналогии с Примером 1(A).
Б) Получение селен-содержащих нанокомпозитов сульфатированного арабиногалактана: Навески 1.001 г сульфатированного арабиногалактана и 0.063 г SeO2 поместили в шаровую мельницу МЛ-1 (НПЭФ «Экон», Россия) (материал рабочей камеры - титан), и подвергали обработки в течение 100 минут.Была получена порошкообразная композиция массой 1.002 г, со следующим элементным составом, %: С, 33.01; Н, 5.56; S, 11.63; Se 5.00.
Пример 3.
А) Получение сульфатированного арабиногалактана проводили по аналогии с Примером 1(A).
Б) Получение селен-содержащих нанокомпозитов сульфатированного арабиногалактана: Навески 1.001 г сульфатированного арабиногалактана и 0.25 г SeO2 поместили в шаровую мельницу МЛ-1 (НПЭФ «Экон», Россия) (материал рабочей камеры - титан), и подвергали обработки в течение 100 минут.Была получена порошкообразная композиция массой 1.181 г, со следующим элементным составом, %: С, 25.05; Н, 4.22; S, 8.83; Se 17.40.
Пример 4.
А) Получение сульфатированного арабиногалактана проводили по аналогии с Примером 1(А).
Б) Получение селен-содержащих нанокомпозитов сульфатированного арабиногалактана: Навески 1.001 г сульфатированного арабиногалактана и 0.098 г SeO2 поместили в шаровую мельницу МЛ-1 (НПЭФ «Экон», Россия) (материал рабочей камеры - титан), и подвергали обработки в течение 100 минут.Была получена порошкообразная композиция массой 0.9987 г, со следующим элементным составом, %: С, 31.54; Н, 5.31; S, 11.11; Se 7.20.
Пример 5.
Изучение противоопухолевой активности селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана in vivo в эксперименте.
Экспериментальные исследования выполнены на белых беспородных мышах-самцах (n=40 m=20-25 г), разводимых в виварии ФГБНУ Иркутский научный центр хирургии и травматологии. Культура перепрививаемого штамма асцитной аденокарциномы Эрлиха получена в питомнике ФГУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» (Россия, Новосибирская область, Кольцово). Все исследования выполнены в соответствии с этическими требованиями по работе с экспериментальными животными [ГОСТ 33044-2014 Принципы надлежащей лабораторной практики [Электронное издание https://docs.cntd.ru/document/1200115791; Directive 2010/63/EU of the European parliament and of the council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes // Off. J. Eur. Union. 2010. - Vol.L276. Iss. 53. P. 33-79]. На проведение исследования получено разрешение Комитета по этике ФГБНУ Иркутского научного центра хирурги и травматологии №9 от 16.12.2021 г. Всем экспериментальным животным внутрибрюшинно вводили культуру перепрививаемого штамма асцитной аденокарциномы Эрлиха (АКЭ) в дозе 3×106 клеток в 0.2 мл 0,9% растворе натрия хлорида для инъекций. Контрольной группе вводили только культуру перепрививаемого штамма АКЭ. Опытной группе через 24 часа после перепрививки вводили внутрибрюшинно раствор селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана, с содержанием ионов селена 9.12% однократно. Изучались следующие группы животных. Группа №1: была выполнена перепрививка АКЭ с последующем однократным введение через 24 часа после перепрививки селен содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана с 9.12% содержанием селена в дозе 5 мг селена на 1 кг живой массы внутрибрюшинно в объеме 1 мл предварительно разведя в 0.9% натрия хлориде. Группа №2: (контроль), выполнена только перепрививка АКЭ
Оценивали показатели: объем асцитной жидкости опухоли (мл), количество клеток (млн / мл), торможение роста опухоли в (%) [Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ: второе изд., перераб. и доп.- М.: Медицина, 2005. - 832 с.].
Десять мышей из каждой группы выведены на десятые сутки после перепрививки АКЭ и десять оставлены для оценки критерия продолжительности жизни [Инжеваткин Е.В. Практикум по экспериментальной онкологии на примере асцитной карциномы Эрлиха: Метод. разработка / Краснояр. гос.ун-т; Красноярск, 2004. -10 с.].
День забора биоматериала определяли периодом логарифмического увеличения числа клеток (лог-фаза роста опухоли) после появления опухоли в организме, которым явился 10-й день с момента прививки. Результаты представлены в Таблице 1. Исследуемый селенсодержащий нанокомпозит сульфатированного арабиногалактана обладает противоопухолевой активностью, что объективно продемонстрировано на модели перевиваемой асцитной карциномы Эрлиха: установлено достоверное увеличение продолжительности жизни на 97% сравнении с контролем, а также снижение концентрации опухолевых клеток, их количество составило в среднем 46,88 млн /мл, а в контроле - 232.82 млн /мл. Продолжительность увеличения жизни экспериментальных животных в опытной группе с селенсодержащим нанокомпозитом сульфатированного арабиногалактана составила 65%.
Пример 6.
Клетки карциномы Эрлиха получены из перевиваемой культуры, которая поддерживается в белых лабораторных мышах. Культура перепрививаемого штамма асцитной аденокарциномы Эрлиха получена в питомнике ФГУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» (Россия, Новосибирская область, Кольцово). Забор клеточной культуры у экспериментального животного осуществляли в период логарифмического роста штамма асцитной карциномы Эрлиха - через 9 суток после перепрививания. Полученную клеточную суспензию промывали раствором фосфатного буфера (FBS) рН 7.4, осаждали клетки центрифугированием при G=300 в течение 3 минут.Отмытые клетки разводили питательной средой DMEM, дополненной 10% FBS, 1% антибиотиком/антимикотиком. Культивировали клеточную культуру 1 сутки при температуре 37°С, влажности 80%) и содержании СО2 5% в условиях CO2-инкубатора BioStation CT (Nikon) в планшете с повышенной клеточной адгезией CellATTACH (BIOFIL).
На проведение исследования получено разрешение Комитета по этике ФГБНУ Иркутского научного центра хирурги и травматологии №9 от 16.12.2021 г. Через 24 часа инкубирования чистых культур клеток был добавлен раствор селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана (ArS-Se). Тестировали образец, полученный по Примеру 3. Предварительно рН раствора ArS-Se доводили до нейтрального раствором (NH4)OH. Вещество добавляли в культуральную среду до конечной концентрации в лунках по селену 20 мг/л. В качестве контроля в соответствующие лунки был добавлен физиологический раствор. Фотофиксацию осуществляли в режиме фазового контраста - Ph Tiling 10×10 при увеличении 10х каждые 6 часов в течение 1 суток.
Для определения жизнеспособности испытуемых клеток через 24 часа выполнили окрашивание раствором пропидия иодида (PI) в конечной концентрации 5 мкг/мл. Через 5 минут после добавления PI результаты фотофиксировали в режиме фазового контраста - Ph и с фильтром флюоресценции 600±50 нм - Ch-3 (красный цвет) Tiling 10×10 при увеличении 10х однократно.
В лунках с добавлением раствора ArS-Se через 24 часа инкубации наблюдалась тотальная гибель опухолевых клеток Эрлиха, что подтверждается окраской 100% клеток PI (Рисунок 2А), в то время как клетки без воздействия ArS-Se в 95% не окрашиваются PI (Рисунок 2Б).
Пример 7.
Клетки карциномы Кребса получены из перевиваемой культуры, которая поддерживается в белых лабораторных мышах. Забор культуры клеток осуществляли через 9 суток после перевивания. Полученную суспензию клеток промывали раствором фосфатного буфера (FBS) рН 7.4, осаждали клетки центрифугированием при G=300 в течение 3 минут. После этого клетки добавляли в питательную среду DMEM с 10% FBS и 1% антибиотиком/антимикотиком. Культивировали клеточную культуру Кребса 1 сутки при температуре 37°С, влажности 80% и содержании СО2 5% в условиях СО2-инкубатора BioStation CT (Nikon).
На проведение исследования получено разрешение Комитета по этике ФГБНУ Иркутского научного центра хирурги и травматологии №9 от 16.12.2021 г. Через 24 часа инкубирования чистых культур клеток был добавлен раствор селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана (ArS-Se). Тестировали образец, полученный по Примеру 2. Предварительно рН раствора ArS-Se доводили до нейтрального раствором (NH4)OH. Вещество добавляли в культуральную среду до конечной концентрации в лунках по селену 20 мг/л. В качестве контроля в соответствующие лунки был добавлен физиологический раствор. Фотофиксацию осуществляли в режиме фазового контраста - Ph Tiling 10x10 при увеличении 10× каждые 6 часов в течение 1 суток.
Для определения жизнеспособности испытуемых клеток через 24 часа выполнили окрашивание раствором пропидия иодида (PI) в конечной концентрации 5 мкг/мл. Через 5 минут после добавления PI результаты фотофиксировали в режиме фазового контраста -Ph и с фильтром флюоресценции 600±50 нм - Ch-3 (красный цвет) Tiling 10×10 при увеличении 10× однократно.
В лунках с добавлением раствора ArS-Se через 24 часа инкубации наблюдалась тотальная гибель опухолевых клеток Кребса, что подтверждается окраской 100% клеток PI (Рисунок 3А), в то время как клетки без воздействия ArS-Se в 95% не окрашиваются PI (Рисунок 3Б).
Пример 8.
Исследование проведено на чистой культуре фибробластов, полученных в остром эксперименте из сальника крысы линии Wistar. Выделенные фибробласты культивировали в DMEM, дополненной 10% FBS, 1% антибиотик/антимикотик при температуре 37°С, влажности 80% и 5% СО2 в Biostation CT, Nikon. Все исследования проводили в стерильных условиях в клеточном боксе. Для получения чистой культуры фибробласты субкультивировали через каждые 7 суток и через 3 пассажа полученную чистую культуру фибробластов использовали для экспериментальных исследований.
На проведение исследования получено разрешение Комитета по этике ФГБНУ Иркутского научного центра хирурги и травматологии №9 от 16.12.2021 г. Через 24 часа инкубирования чистых культур клеток был добавлен раствор селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана (ArS-Se). Тестировали образец, полученный по Примеру 1. Предварительно рН раствора ArS-Se доводили до нейтрального раствором (NH4)OH. Вещество добавляли в культуральную среду до конечной концентрации в лунках по селену 20 мг/л. В качестве контроля в соответствующие лунки был добавлен физиологический раствор. Фотофиксацию осуществляли в режиме фазового контраста - Ph Tiling 10×10 при увеличении 10× каждые 6 часов в течение 1 суток.
Для определения жизнеспособности испытуемых клеток через 24 часа выполнили окрашивание раствором пропидия иодида (PI) в конечной концентрации 5 мкг/мл. Через 5 минут после добавления PI результаты фотофиксировали в режиме фазового контраста -Ph и с фильтром флюоресценции 600±50 нм - Ch-3 (красный цвет) Tiling 10×10 при увеличении 10× однократно.
Через 24 часа инкубирования фибробластов с ArS-Se уровень клеточной гибели остался без изменения. На Рисунке 4А показаны фибробласты после инкубирования с ArS-Se в течение суток. На Рисунке 4Б - контрольная группа. Препараты окрашены PI для выявления погибших клеток. В обеих группах отмечается гибель единичных клеток (красная окраска). Различий между группой с воздействием ArS-Se и контрольной группой не обнаружено.
Разумеется, изобретение никоим образом не ограничивается описанными и проиллюстрированными вариантами осуществления, которые были представлены лишь в качестве примеров.
Claims (1)
- Средство, обладающее противоопухолевой активностью на основе диоксида селена и сульфатированного арабиногалактана в виде сухих водорастворимых порошков с содержанием селена от 5,00 до 17,40% и размером композитов от 5 до 50 нм, включающее селен-содержащие структуры, механохимическим образом внедренные в матрице сульфатированного арабиногалактана.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2813724C1 true RU2813724C1 (ru) | 2024-02-15 |
Family
ID=
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2319707C1 (ru) * | 2007-01-09 | 2008-03-20 | Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского Сибирского отделения Российской академии наук (ИрИХ СО РАН) | Способ получения сульфатированных производных арабиногалактана, обладающих антикоагулянтной и гиполипидемической активностью |
| RU2462254C2 (ru) * | 2010-09-09 | 2012-09-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского Сибирского отделения РАН | Нанокомпозит серебра на основе сульфатированного арабиногалактана, обладающий антимикробной и антитромботической активностью, и способ его получения |
| RU2614363C2 (ru) * | 2015-08-05 | 2017-03-24 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского Сибирского отделения Российской академии наук | Средство, обладающее противоопухолевой активностью на основе нанокомпозитов арабиногалактана с селеном, и способы получения таких нанобиокомпозитов |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2319707C1 (ru) * | 2007-01-09 | 2008-03-20 | Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского Сибирского отделения Российской академии наук (ИрИХ СО РАН) | Способ получения сульфатированных производных арабиногалактана, обладающих антикоагулянтной и гиполипидемической активностью |
| RU2462254C2 (ru) * | 2010-09-09 | 2012-09-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского Сибирского отделения РАН | Нанокомпозит серебра на основе сульфатированного арабиногалактана, обладающий антимикробной и антитромботической активностью, и способ его получения |
| RU2614363C2 (ru) * | 2015-08-05 | 2017-03-24 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского Сибирского отделения Российской академии наук | Средство, обладающее противоопухолевой активностью на основе нанокомпозитов арабиногалактана с селеном, и способы получения таких нанобиокомпозитов |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Rodionova L.V. et al. Nanobiocomposite Based on Selenium and Arabinogalactan: Synthesis, Structure, and Application / Russian Journal of General Chemistry, 2015, V. 85, N. 2, pp. 485-487. Ножкина О.А. и др. Влияние нанокомпозитов селена в природных полимерных матрицах на антиоксидантный статус растений картофеля in vitro / Известия Иркутского государственного университета, 2021, Т. 37, с. 16-30. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Stoica et al. | PREPARATION OF CHITOSAN-TRIPOLYPHOSPHATE NANOPARTICLES FOR THE ENCAPSULATION OF POLYPHENOLS EXTRACTED FROM ROSE HIPS. | |
| Somu et al. | A biomolecule-assisted one-pot synthesis of zinc oxide nanoparticles and its bioconjugate with curcumin for potential multifaceted therapeutic applications | |
| Lesnichaya et al. | Effect of high dose of selenium nanoparticles on antioxidant system and biochemical profile of rats in correction of carbon tetrachloride-induced toxic damage of liver | |
| WO2012145801A1 (en) | Nanoparticle | |
| Xu et al. | Development of ROS‐responsive amino acid‐based poly (ester amide) nanoparticle for anticancer drug delivery | |
| Anitha et al. | Enhanced delivery system of flutamide loaded chitosan-dextran sulphate nanoparticles for prostate cancer | |
| RU2278669C1 (ru) | Средство, обладающее антимикробной активностью | |
| Yu et al. | Rational design and fabrication of a cancer-targeted chitosan nanocarrier to enhance selective cellular uptake and anticancer efficacy of selenocystine | |
| Lv et al. | Review of lipoic acid: from a clinical therapeutic agent to various emerging biomaterials | |
| CN115252560A (zh) | 一种基于天然产物的自组装纳米粒及其制备方法和应用 | |
| Zhang et al. | Apoptosis induced by NaYF 4: Eu 3+ nanoparticles in liver cells via mitochondria damage dependent pathway | |
| RU2813724C1 (ru) | Средство, обладающее противоопухолевой активностью, и способ его получения | |
| CA2709267C (en) | Drug delivery system for administration of a water soluble, cationic and amphiphilic pharmaceutically active substance | |
| CN112656951A (zh) | 交联型酸响应天然多糖聚合物前药、制备方法及用途 | |
| CN109432051B (zh) | 一种具有抗卵巢癌活性的靶向纳米粒及制备和应用 | |
| RU2557992C1 (ru) | Антиоксидантное средство с гепатопротекторным эффектом на основе наноструктурированного селена и способы его получения и применения | |
| Baranov et al. | Long-acting bioactive composition based on chitosan and taxifolin | |
| CN110859820A (zh) | 生物相容性碱土金属过氧化物纳米制剂及制备方法和其应用 | |
| Spiridonov et al. | Synthesis and evaluation of the anticancer activity of the water-dispersible complexes of 4-acylaminoisoxazole derivative with biocompatible nanocontainers based on Ca2+ (Mg2+) cross-linked alginate | |
| CN104706636A (zh) | 一种阿苯达唑制剂及制备方法 | |
| Ren et al. | Preparation of caffeic acid grafted chitosan self-assembled micelles to enhance oral bioavailability and antibacterial activity of quercetin | |
| PL238795B1 (pl) | Ekstrakt z grzyba poliporoidalnego, kompozycja zawierająca taki ekstrakt oraz jego zastosowanie | |
| CN109276720B (zh) | 一种金属-有机物配合物纳米材料及其制备方法和应用 | |
| Lomovsky et al. | The concentration of melanin in powder materials obtained from white-rot fungi by the mechanochemical method | |
| Morozkin et al. | Cytotoxic and immunomodulating properties of silver and platinum nanocomposites |