RU2810476C1 - Широко нейтрализующее антитело против SARS-CoV-2 - Google Patents
Широко нейтрализующее антитело против SARS-CoV-2 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2810476C1 RU2810476C1 RU2022135112A RU2022135112A RU2810476C1 RU 2810476 C1 RU2810476 C1 RU 2810476C1 RU 2022135112 A RU2022135112 A RU 2022135112A RU 2022135112 A RU2022135112 A RU 2022135112A RU 2810476 C1 RU2810476 C1 RU 2810476C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cov
- sars
- virus
- insdqualifier
- insdseq
- Prior art date
Links
- 241001678559 COVID-19 virus Species 0.000 title claims abstract description 47
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 title claims abstract description 21
- 101710139375 Corneodesmosin Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 102100031673 Corneodesmosin Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 6
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims abstract 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 15
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims description 7
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 6
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 claims description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 2
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 claims 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 claims 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 208000025721 COVID-19 Diseases 0.000 description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 10
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 4
- 238000013504 emergency use authorization Methods 0.000 description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 4
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 4
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- 229940125678 AZD7442 Drugs 0.000 description 2
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 229940125677 REGEN-COV Drugs 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 229940052143 bamlanivimab Drugs 0.000 description 2
- 229940051183 casirivimab Drugs 0.000 description 2
- 229940051181 cilgavimab Drugs 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 229940051184 imdevimab Drugs 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- 108700022172 2019-nCoV Vaccine mRNA-1273 Proteins 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 102000053723 Angiotensin-converting enzyme 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000975 Angiotensin-converting enzyme 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 241000494545 Cordyline virus 2 Species 0.000 description 1
- 208000001528 Coronaviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241000598436 Human T-cell lymphotropic virus Species 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 229940026207 Moderna COVID-19 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 241001112090 Pseudovirus Species 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 101000702488 Rattus norvegicus High affinity cationic amino acid transporter 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000035415 Reinfection Diseases 0.000 description 1
- 241000315672 SARS coronavirus Species 0.000 description 1
- 208000037847 SARS-CoV-2-infection Diseases 0.000 description 1
- 101000629318 Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 Spike glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 241000008910 Severe acute respiratory syndrome-related coronavirus Species 0.000 description 1
- 239000012505 Superdex™ Substances 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 241001098636 Trichogramma alpha Species 0.000 description 1
- 108010084455 Zeocin Proteins 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001754 anti-pyretic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000002221 antipyretic Substances 0.000 description 1
- 229940125716 antipyretic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 229940051243 etesevimab Drugs 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 230000005099 host tropism Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 238000002650 immunosuppressive therapy Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000003670 luciferase enzyme activity assay Methods 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 108700021021 mRNA Vaccine Proteins 0.000 description 1
- 229940126582 mRNA vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000000869 mutational effect Effects 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 229940124583 pain medication Drugs 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- CWCMIVBLVUHDHK-ZSNHEYEWSA-N phleomycin D1 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC[C@@H](N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCCCNC(N)=N)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C CWCMIVBLVUHDHK-ZSNHEYEWSA-N 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000002818 protein evolution Methods 0.000 description 1
- 238000000164 protein isolation Methods 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 229940051283 regdanvimab Drugs 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000002636 symptomatic treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229940126622 therapeutic monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229940051871 tixagevimab Drugs 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии. Описано рекомбинантное антитело человека T11 класса IgG против вируса SARS-CoV-2, обладающее свойством селективно связываться с RBD доменом S белка вируса SARS-CoV-2 и нейтрализовать активность вируса SARS-CoV-2 и способ его получения. Антитело содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) с последовательностью аминокислот, представленных на SEQ ID NO: 1 и вариабельный домен легкой цепи (VL) с последовательностью аминокислот, представленных на SEQ ID NO: 2. Изобретение расширяет арсенал антител, обладающих нейтрализующей активностью против вируса SARS-CoV-2. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 4 пр., 2 табл.
Description
Изобретение относится к иммунологии и биотехнологии, а именно: к получению широконейтрализующего рекомбинантного антитела человека (рчАт) против вируса SARS-CoV-2, которое может быть использовано для разработки иммунобиологических лекарственных препаратов на основе антител, что расширяет возможности терапии/диагностики вирусной инфекции SARS-CoV-2 в медицине.
Объектом изобретения является рчАт класса IgG, имеющее аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1 для вариабельного домена тяжелой цепи антитела и SEQ ID NO:2 для вариабельного домена легкой цепи антитела, специфически связывающееся с различными вариантами RBD домена белка S вируса SARS-CoV-2 (Wuhan-Hu-1, а также варианты Альфа, Гамма, Дельта и Омикрон) и обладающее широким спектром нейтрализующей активности.
Коронавирусная инфекция (COVID-19) - респираторное заболевание, вызываемое вирусом SARS-CoV-2, который появился в Китае в конце 2019 года и быстро распространился по всему миру, вызвав глобальную пандемию [Coronaviridae Study Group of the International Committee on Taxonomy of Viruses. The species Severe acute respiratory syndrome-related coronavirus: classifying 2019-nCoV and naming it SARS-CoV-2. Nat Microbiol. 2020; 5:536-544. doi: 10.1038/s41564-020-0695-z; World Health Organization. Coronavirus disease 2019 (COVID-19). 2020; Situation Report-51]. Заболевание может протекать как в лёгкой, так и в тяжёлой форме, в том числе, приводя к смертельным исходам. Пациентам с легкими и умеренными симптомами COVID-19 назначается поддерживающая терапия с симптоматическим лечением, как, например, прием жаропонижающих средств от лихорадки, обезболивающие препараты, и наблюдение за признаками обострения, которое требует стационарного лечения. Риск тяжелого течения COVID-19 или смерти от заболевания угрожает любому человеку независимо от возраста. Тем не менее, тяжелая форма заболевания чаще всего развивается у людей, относящихся к группе риска: люди старше 60 лет, а также с хроническими сердечно-сосудистыми, респираторными, онкологическими заболеваниями, диабетом и др. В разгар пандемии вируснейтрализующие антитела были одобрены Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) для лечения инфицированных SARS-CoV-2, если для пациента существовал высокий риск госпитализации или для лечения пациентов с тяжелым течением COVID-19. Нейтрализующие антитела появляются после заражения вирусом SARS-CoV-2 [Suthar M.S. et al, Rapid Generation of Neutralizing Antibody Responses in COVID-19 Patients. Cell Rep Med. 2020; 1(3):100040. doi: 10.1016/j.xcrm.2020.10004]) или вакцинации [Jackson L.A. et al, mRNA-1273 Study Group. An mRNA Vaccine against SARS-CoV-2 - Preliminary Report. N Engl J Med. 2020; 383(20):1920-1931. doi: 10.1056/NEJMoa2022483] сохраняются в сыворотке крови в течение нескольких месяцев и коррелируют с уровнем защиты от инфекции [Addetia, A. et al, Neutralizing Antibodies Correlate with Protection from SARS-CoV-2 in Humans during a Fishery Vessel Outbreak with a High Attack Rate. J Clin Microbiol. 2020; 58(11):e02107-20. doi: 10.1128/JCM.02107-20]. По мере эволюции вируса SARS-CoV-2 под давлением отбора за счет естественного или индуцированного вакцинацией иммунитета, появляются его новые варианты, характеризующиеся повышенной трансмиссивностью, изменением течения заболевания или риском повторного инфицирования из-за изменения антигенного состава. Появление мутантных вариантов SARS-CoV-2 привело к снижению эффективности существующих нейтрализующих антител и ограничивает их использование на сегодняшний день. Поскольку мутации в значительной степени изменяют силу и/или кинетику связывания вируса с ACE2 рецептором, мутации, возникающие в рецептор-связывающем домене (RBD) S белка, представляют особый интерес [Amoutzias G.D. et al, The Remarkable Evolutionary Plasticity of Coronaviruses by Mutation and Recombination: Insights for the COVID-19 Pandemic and the Future Evolutionary Paths of SARS-CoV-2. Viruses. 2022; 14(1):78. doi: 10.3390/v14010078]. Альфа вариант коронавируса SARS-CoV-2 (линия B.1.1.7) был впервые обнаружен в начале декабря 2020 года во время пандемии COVID-19 в Великобритании, мутация N501Y в RBD привела к увеличению аффинности связывания вируса с клетками организма человека в 7 раз [Davies N.G. et al. Estimated Transmissibility and Impact of SARS-CoV-2 Lineage B.1.1.7 in England. Science. 2021; 372:eabg3055. doi: 10.1126/science.abg3055; Supasa P. et al. Reduced Neutralization of SARS-CoV-2 B.1.1.7 Variant by Convalescent and Vaccine Sera. Cell. 2021; 184:2201-11. doi: 10.1016/j.cell.2021.02.033]. Гамма вариант (P1) был идентифицирован в ноябре 2020 года Бразилии и вызвал резкую вспышку заболеваемости, данный вируса SARS-CoV-2 имеет 12 мутаций в S белке, включая K417T, E484K и N501Y в RBD [Wink P.L. et al. Genomic Surveillance of SARS-CoV-2 Lineages Indicates Early Circulation of P.1 (Gamma) Variant of Concern in Southern Brazil. Microbiol Spectr. 2022;10(1):e0151121. doi: 10.1128/spectrum.01511-21; Dejnirattisai W. et al. Antibody evasion by the P.1 strain of SARS-CoV-2. Cell. 2021; 184(11):2939-2954.e9. doi: 10.1016/j.cell.2021.03.055]. Дельта вариант SARS-CoV-2 (B.1.617.2) c мутациями L452R, T478K, ±E484Q в RBD был впервые идентифицирован в декабре 2020 года в Индии, его повышенная контагиозность привела к полному вытеснению исходного уханьского варианта (Wuhan-Hu-1) [Zhang L. et al. Analysis of SARS-CoV-2 variants B.1.617: host tropism, proteolytic activation, cell-cell fusion, and neutralization sensitivity. Emerg Microbes Infect. 2022; 11(1):1024-1036. doi: 10.1080/22221751]. Омикрон (B.1.1.529) впервые был идентифицирован в ноябре 2021 в Южно-Африканской Республике и Ботсване, содержал беспрецедентное количество мутаций, сконцентрированных в гене S белка (более 30 мутаций, в том числе 15 - в RBD), незамедлительно вытеснил вариант дельта и на сегодняшний день является преобладающим в России и во всем мире, продолжая мутировать.
Обширная мутационная нагрузка на основной антиген снизила активность известных терапевтических нейтрализующих антител, что привело к увеличению доз или пересмотру вариантов терапии больных с тяжелой формой течения заболевания [Hoffmann M. et al. SARS-CoV-2 Variant B. 1.617 Is Resistant to Bamlanivimab and Evades Antibodies Induced by Infection and Vaccination. Cell Rep. 2021; 36:109415. doi: 10.1016/j.celrep.2021.109415; Cao Y. et al. Omicron escapes the majority of existing SARS-CoV-2 neutralizing antibodies. Nature. 2022; 602:657-663. doi: 10.1038/s41586-021-04385-3].
Моноклональные человеческие антитела, ранее разрешенные Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) с экстренным решением для применения (EUA) - казиривимаб и имдевимаб (Ronapreve (REGN10933 и REGN10987), Regeneron, США), бамланивимаб и этесевимаб (LY-CoV555 и LY-CoV016, Eli Lilly, США), вводимые в виде коктейля, а также регданвимаб (CT-P59, Celltrion, Южная Корея) в экспериментах in vitro с использованием псевдовирусной системы и живых вирусов показали полную потерю нейтрализующей активности препаратов против варианта Омикрон и их использование было ограничено [VanBlargan L. A. et al. An infectious SARS-CoV-2 B.1.1.529 Omicron virus escapes neutralization by therapeutic monoclonal antibodies. Nat. Med. 2022; 28:490-495. doi: 10.1038/s41591-021-01678-y; Tatham, L. et al. Lack of Ronapreve (REGN-CoV; casirivimab and imdevimab) virological efficacy against the SARS-CoV-2 Omicron variant (B.1.1.529) in K18-hACE2 mice. bioRxiv. 2022; doi: org/10.1101/2022.01.23.477397]. Эффективность сотровимаба (S309, VIR-7831, GlaxoSmithKline, Великобритания) и бебтеловимаба (LY-CoV1404, Eli Lilly, США) в отношении различных вариантов Омикрона сохранялась [Zhou T. et al. Structural basis for potent antibody neutralization of SARS-CoV-2 variants including B.1.1.529. Science. 2022; 376:eabn8897. doi: 10.1126/science.abn889]. Необходимо отметить, что применение сотровимаба до недавнего времени было разрешено на территории России [https://grls.rosminzdrav.ru/PandemicPermissions.aspx?TorgName=сотровимаб], однако дальнейшее исследование эффективности препарата показало, что его использование стимулирует эволюцию вируса SARS-CoV-2 у пациентов с ослабленным иммунитетом [Rockett R. et al. Resistance mutations in SARS-CoV-2 delta variant after sotrovimab use. N Engl J Med. 2022; 386:1477-1479. doi: 10.1056/NEJMc2120219; Destras G. et al. Sotrovimab drives SARS-CoV-2 omicron variant evolution in immunocompromised patients. Lancet Microbe. 2022; 3(8):e559. doi: 10.1016/S2666-5247(22)00120-3], что привело к пересмотру решения о его использовании [WHO, Therapeutics and COVID-19: living guideline, 16/09/2022]. Бебтеловимаб также больше не разрешен FDA к применению в США из-за отсутствия активности в отношении циркулирующих вариантов [FDA, Fact sheet for healthcare providers: emergency use authorization for bebtelovimab, ID: 5072477, 30/11/2022]. Таким образом, в настоящее время в мире нет моноклональных антител, разрешенных для лечения острой инфекции.
Лекарственный препарат на основе комбинации моноклональных антител тиксагевимаб и цилгавимаб (Эвушелд (AZD8895+AZD1061), AstraZeneca, Великобритания) одобрен для доконтактной профилактики COVID-19 у лиц c ослабленным иммунитетом (иммунодефицит или иммуносупрессивная терапия) или лицам, для которых вакцинация не рекомендована по причине тяжелой побочной реакции на вакцину или ее компоненты в анамнезе [Levin MJ, et al. Intramuscular AZD7442 (Tixagevimab-Cilgavimab) for Prevention of Covid-19. N Engl J Med. 2022.; 386:2188-2200. doi:10.1056/NEJMoa2116620; FDA, Fact sheet for healthcare providers: emergency use authorization for evusheld, ID: 5098106, 5/12/2022]. На территории России препарат также включен в «Реестр решений об обращении лекарственных препаратов во время пандемии» [https://grls.rosminzdrav.ru/PandemicPermissions.aspx?TorgName=эвушелд]. AZD8895 и AZD1061 сохраняют эффективность против Омикрона, несмотря на снижение нейтрализующей активности к его различным субвариантам [Otiniano A. et al. Tixagevimab/cilgavimab for Omicron SARS-CoV-2 infection in patients with haematologic diseases. Bone Marrow Transplant. 2022; doi: 10.1038/s41409-022-01894-1].
Комбинации антител к разными эпитопам S белка обеспечивают их синергетическое действие, а также снижают вероятность появления мутаций, придающих вирусу устойчивость против антител [Zost S.J. et al. Potently neutralizing and protective human antibodies against SARS-CoV-2. Nature. 2020; 584(7821):443-449. doi: 10.1038/s41586-020-2548-6; Yang, Y., Du, L. Neutralizing antibodies and their cocktails against SARS-CoV-2 Omicron and other circulating variants. Cell. Mol. Immunol. 2022; 19:962-964. doi: 10.1038/s41423-022-00890-1]. Таким образом, в связи с продолжающимся появлением новых вариантов вируса SARS-CoV-2, кодирующих все большее количество аминокислотных замен в S белке, требуется постоянный мониторинг эффективности действия уже существующих препаратов, а также поиск и расширение панели моноклональных антител, эффективных для лечения и профилактики COVID-19.
Технической задачей изобретения является расширения арсенала антител, обладающих широким спектром нейтрализующей активности против вариантов вируса SARS-CoV-2.
Технический результат заключается в создании антитела Т11, которое эффективно связывает варианты RBD домена S белка вируса SARS-CoV-2, нейтрализуют вирус SARS-CoV-2 дикого типа (Wuhan-Hu-1), а также штаммы Дельта (B.1.617.2) и Омикрон (B.1.1.529) и может быть использовано для разработки иммунобиологических лекарственных препаратов на основе антител для терапии вирусной инфекции SARS-CoV-2.
Указанный технический результат достигается:
созданием рекомбинантных плазмидных ДНК pFuse/T11/CH и pFuse/T11/CL, кодирующих, соответственно, гены тяжелой и легкой цепи рекомбинантного антитела Т11, и состоящих из плазмиды pFuse, которая содержит высокоэффективный синтетический промотор hEF/HTLV, сигнальную последовательность интерлейкина-2 (IL-2 signal), обеспечивающую эффективную секрецию продукта экспрессии генов в культуральную среду, нуклеотидную последовательность гена вариабельного домена тяжелой цепи в единой рамке считывания с геном константного домена тяжелой цепи (CH) иммуноглобулина человека IgG1 (SEQ ID NO:3) или нуклеотидную последовательность гена вариабельного домена легкой цепи в единой рамке считывания с геном константного домена лямбда легкой цепи (CL) иммуноглобулина человека (SEQ ID NO:4), сигнальную последовательность полиаденилирования вируса SV40; нуклеотидную последовательность гена BleoR, продукт которого обеспечивает устойчивость трансформантов к антибиотику зеоцин, нуклеотидную последовательность точки начала репликации плазмидной ДНК (ori) для ее наработки в бактериальных клетках E. coli;
получением полноразмерного антитела Т11, предусматривающим котрансфекцию рекомбинантными плазмидными ДНК pFuse/T11/CH и pFuse/T11/CL клеток линии HEK293F, культивирование клеток в условиях, при которых продуцируется антитело Т11, имеющее аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1 для вариабельного домена тяжелой цепи антитела и SEQ ID NO:2 для вариабельного домена легкой цепи антитела;
выделением и хроматографической очисткой рекомбинантного антитела Т11.
Изобретение иллюстрируют следующими примерами.
ПРИМЕР 1
Создание генетических конструкций pFuse/T11/CH и pFuse/T11/CL
Антитело Т11 отобрано из библиотеки одноцепочечных антител человека, получившего полный курс вакцинации препаратом PfizerBioNTech с использованием дрожжевого дисплея. Последовательность гена, кодирующего вариабельный домен тяжелой цепи (VH), амплифицируют с помощью ПЦР с использованием олигонуклеотидов 5’-tcacgaattcgcaggtgcagctggtggagtc-3’ и 5’-ggtgcttgctgaggagacggtgacc-3’ и далее клонируют в вектор pFuse-IgG1 с использованием эндонуклеаз рестрикции EcoRI и BsmBI с получением генетической конструкции pFuse/T11/CH (Рис. 1а). Последовательность гена, кодирующего вариабельный домен легкой цепи (VL), амплифицируют с помощью ПЦР с использованием олигонуклеотидов 5’- tcacgaattcgcaggttgtgctgactcag-3’ и 5’-gctgacctaggacggtcagcttg-3’ и далее клонируют в вектор pFuse-Lambda с использованием эндонуклеаз рестрикции EcoRI и AvrII, с получением генетической конструкции pFuse/T11/CL (Рис. 1б).
ПРИМЕР 2
Получение полноразмерного рекомбинантного антитела Т11
Полученные генетические конструкциии pFuse/T11/CH и pFuse/T11/CL используют для временной трансфекций клеток линии HEK-293 с использованием среды FreeStyle 293 и полиэтиленимина (PEI) [N. Portolano et al. J. Vis. Exp. 2014]. Далее клетки культивируют на орбитальном шейкере, вращающемся со скоростью 130 об/мин, в СО2-инкубаторе, содержащем влажную атмосферу с 8% CO2 в воздухе при температуре 37°C в течение 7-10 дней для наработки белка. При показателе жизнеспособности клеток менее 70% культуральную жидкость последовательно центрифугируют при скорости 900 об/мин и в течение 10 минут, а затем при скорости 13000 об/мин и в течение 15 минут и используют для выделения белка. Рекомбинантное антитело Т11 очищают с использованием аффинной хроматографии на колонке HiTrap Protein G HP в соответствии с инструкцией производителя и гель-фильтрации на колонке Superdex 200 (GE Healthcare, USA) в фосфатно-солевом буфере. Чистоту полученного препарата рчАТ Т11 анализируют электрофоретически (Рис.2).
ПРИМЕР 3
Определение аффинности взаимодействия антитела Т11 с RBD WT и его вариантами - альфа, гамма, дельта, омикрон
Константы диссоциации комплекса антитела Т11 с RBDWT (Wuhan-Hu-1), а также с вариантами RBD Альфа (B.1.1.7), Гамма (P1), Дельта (B.1.617.2) и Омикрон (B.1.1.529) определяют c использованием метода поверхностного плазмонного резонанса. Для иммобилизации антигена RBD используют стандартные чипы BiaCore CM5. Иммобилизацию проводят по методике производителя, концентрации вариантов RBD варируют в диапазоне 1-10 мкг/мл. Для оценки связывания готовят разведения антитела Т11 в диапазоне концентраций 1 - 16 нМ. Эксперимент проводят на приборе BiaCore T200 в условиях одного цикла, где время ассоциации составляет 120 секунд, время диссоциации - 3600 секунд. Анализ кинетики проводят с использованием встроенного ПО, результаты представлены в Таблице 1.
| Таблица 1. Константы диссоциации комплекса антитела Т11 с RBDWT (Wuhan-Hu-1), а также с вариантами RBD Альфа (B.1.1.7), Гамма (P1), Дельта (B.1.617.2) и Омикрон (B.1.1.529), измеренные с помощью метода поверхностного плазмонного резонанса. | |||||
| RBD | WT | Альфа | Гамма | Дельта | Омикрон |
| K D , М | 2.4×10-10 | 3.1×10-10 | 5.3×10-10 | 9.4×10-10 | <1.4×10-14 |
ПРИМЕР 4
Определение вируснейтрализующей активности антитела Т11
Для определения вируснейтрализующей активности антитела Т11 используют псевдотипированные вирусные частицы, несущих на поверхности S-белок SARS-CoV2 дикого типа (Wuhan-Hu-1), варианта Дельта (B.1.617.2) или Омикрон (B.1.1.529). Клетки линии HEK293T-ACE2 рассевают в 96-луночный планшет и растят в течение 18-24 часов до достижения конфлюентности 50-80%. В стерильном планшете проводят разведения антитела Т11 в среде (DMEM+10%FBS) в диапазоне концентраций 0.003-100 нМ, смешивают с 50 мкл псевдовирусов и добавляют в 96-луночный планшет с клетками HEK293T-ACE2, содержащими по 50 кондиционной среды. Через 72 часа инкубации клетки лизируют и используют для оценки люминесценции по методике производителя Luciferase Assay System Bright Glo (Promega) и прибора VarioScan (Thermo). Обработку данных осуществляют с использованием ПО Origin Pro. Рассчитанные IC50 (концентрации полумаксимального ингибирования) антитела Т11 в отношении вируса SARS-CoV-2 дикого типа (Wuhan-Hu-1) и Дельта (B.1.617.2) и Омикрон (B.1.1.529) представлена в таблице 2.
| Таблица 2. Вируснейтрализующая активность антитела Т11 в отношении вируса SARS-CoV-2 дикого типа (Wuhan-Hu-1) и Дельта (B.1.617.2) и Омикрон (B.1.1.529). | |||
| RBD | WT | Дельта | Омикрон |
| IC 50 , нМ | 10.3±2.1 | 17±4.5 | 0.2±0.05 |
--->
<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE ST26SequenceListing PUBLIC "-//WIPO//DTD Sequence Listing
1.3//EN" "ST26SequenceListing_V1_3.dtd">
<ST26SequenceListing dtdVersion="V1_3" fileName="Широко
нейтрализующее антитело против SARS-CoV-2 full.xml"
softwareName="WIPO Sequence" softwareVersion="2.2.0"
productionDate="2022-12-28">
<ApplicantFileReference>11</ApplicantFileReference>
<ApplicantName languageCode="ru">ИБХ РАН</ApplicantName>
<ApplicantNameLatin>IBCh RAS</ApplicantNameLatin>
<InventionTitle languageCode="ru">Широко нейтрализующее антитело
против SARS-CoV-2</InventionTitle>
<SequenceTotalQuantity>4</SequenceTotalQuantity>
<SequenceData sequenceIDNumber="1">
<INSDSeq>
<INSDSeq_length>127</INSDSeq_length>
<INSDSeq_moltype>AA</INSDSeq_moltype>
<INSDSeq_division>PAT</INSDSeq_division>
<INSDSeq_feature-table>
<INSDFeature>
<INSDFeature_key>source</INSDFeature_key>
<INSDFeature_location>1..127</INSDFeature_location>
<INSDFeature_quals>
<INSDQualifier>
<INSDQualifier_name>mol_type</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>protein</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier>
<INSDQualifier id="q2">
<INSDQualifier_name>organism</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>synthetic construct</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier>
</INSDFeature_quals>
</INSDFeature>
</INSDSeq_feature-table>
<INSDSeq_sequence>QVQLVESGAEVKKPGSSVKVSCKAPGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMG
GIIPIFGTPNYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGYCGGDCYSLELVWYFDLWGR
GTLVTVSS</INSDSeq_sequence>
</INSDSeq>
</SequenceData>
<SequenceData sequenceIDNumber="2">
<INSDSeq>
<INSDSeq_length>111</INSDSeq_length>
<INSDSeq_moltype>AA</INSDSeq_moltype>
<INSDSeq_division>PAT</INSDSeq_division>
<INSDSeq_feature-table>
<INSDFeature>
<INSDFeature_key>source</INSDFeature_key>
<INSDFeature_location>1..111</INSDFeature_location>
<INSDFeature_quals>
<INSDQualifier>
<INSDQualifier_name>mol_type</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>protein</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier>
<INSDQualifier id="q4">
<INSDQualifier_name>organism</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>synthetic construct</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier>
</INSDFeature_quals>
</INSDFeature>
</INSDSeq_feature-table>
<INSDSeq_sequence>QVVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVQWYQQLPGTAPKLL
IYGNSNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAITGLQAEDEADYYCQSYDSSLSGWVFGGGTKLTVL</INSDSe
q_sequence>
</INSDSeq>
</SequenceData>
<SequenceData sequenceIDNumber="3">
<INSDSeq>
<INSDSeq_length>1377</INSDSeq_length>
<INSDSeq_moltype>DNA</INSDSeq_moltype>
<INSDSeq_division>PAT</INSDSeq_division>
<INSDSeq_feature-table>
<INSDFeature>
<INSDFeature_key>source</INSDFeature_key>
<INSDFeature_location>1..1377</INSDFeature_location>
<INSDFeature_quals>
<INSDQualifier>
<INSDQualifier_name>mol_type</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>other DNA</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier>
<INSDQualifier id="q6">
<INSDQualifier_name>organism</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>synthetic construct</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier>
</INSDFeature_quals>
</INSDFeature>
</INSDSeq_feature-table>
<INSDSeq_sequence>caggtgcagctggtggagtctggggctgaggtgaagaagcctgggtcct
cggtgaaggtctcctgcaaggctcctggaggcaccttcagcagctatgctatcagctgggtgcgacaggc
ccctggacaagggcttgagtggatgggagggatcatccctatctttggtacaccaaactacgcacagaag
ttccagggcagagtcacgattaccgcggacgaatccacgagcacagcctacatggagctgagcagcctga
gatctgaggacacggccgtgtattactgtgcgaggggatattgtggtggtgattgctattcattagaact
cgtctggtacttcgatctctggggccgtggcaccctggtcaccgtctcctcagcaagcaccaagggccca
tcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtca
aggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacacctt
cccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgactgtgccctctagcagcttg
ggcacccagacctacatctgcaacgtgaatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagaaagttgagc
ccccgaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtc
agtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtg
gtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcata
atgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcct
gcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatc
gagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccggg
atgagctgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgt
ggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggc
tccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgct
ccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatga</
INSDSeq_sequence>
</INSDSeq>
</SequenceData>
<SequenceData sequenceIDNumber="4">
<INSDSeq>
<INSDSeq_length>654</INSDSeq_length>
<INSDSeq_moltype>DNA</INSDSeq_moltype>
<INSDSeq_division>PAT</INSDSeq_division>
<INSDSeq_feature-table>
<INSDFeature>
<INSDFeature_key>source</INSDFeature_key>
<INSDFeature_location>1..654</INSDFeature_location>
<INSDFeature_quals>
<INSDQualifier>
<INSDQualifier_name>mol_type</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>other DNA</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier>
<INSDQualifier id="q8">
<INSDQualifier_name>organism</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>synthetic construct</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier>
</INSDFeature_quals>
</INSDFeature>
</INSDSeq_feature-table>
<INSDSeq_sequence>caggttgtgctgactcagccgccctcagtgtctggggccccagggcaga
gggtcaccatctcctgcactgggagcagctccaacatcggggcaggttatgatgtacagtggtaccagca
gcttccaggaacagcccccaaactcctcatctatggtaacagcaatcggccctcaggggtccctgaccga
ttctctggctccaagtctggcacctcagcctccctggccatcactgggctccaggctgaggatgaggctg
attattactgccagtcctatgacagcagcctgagtggttgggtgttcggcggagggaccaagctgaccgt
cctaggtcagcccaaggctgccccctcggtcactctgttcccgccctcctctgaggagcttcaagccaac
aaggccacactggtgtgtctcataagtgacttctacccgggagccgtgacagtggcctggaaggcagata
gcagccccgtcaaggcgggagtggagaccaccacaccctccaaacaaagcaacaacaagtacgcggccag
cagctacctgagcctgacgcctgagcagtggaagtcccacaaaagctacagctgccaggtcacgcatgaa
gggagcaccgtggagaagacagtggcccctacagaatgttcatag</INSDSeq_sequence>
</INSDSeq>
</SequenceData>
</ST26SequenceListing>
<---
Claims (2)
1. Рекомбинантное антитело человека T11 класса IgG против вируса SARS-CoV-2, содержащее вариабельный домен тяжелой цепи с последовательностью аминокислот, представленных на SEQ ID NO: 1 и вариабельный домен легкой цепи с последовательностью аминокислот, представленных на SEQ ID NO: 2, обладающее свойством селективно связываться с RBD доменом S белка вируса SARS-CoV-2 и нейтрализовать активность вируса SARS-CoV-2.
2. Способ получения полноразмерного рекомбинантного антитела человека Т11 по п.1, предусматривающий котрансфекцию рекомбинантными плазмидными ДНК pFuse/T11/CH и pFuse/T11/CL клеток линии HEK293F, при этом плазмидная ДНК pFuse/T11/CH содержит нуклеотидную последовательность гена вариабельного домена тяжелой цепи в единой рамке считывания с геном константного домена тяжелой цепи иммуноглобулина человека IgG1, представленную на SEQ ID NO:3, плазмидная ДНК pFuse/T11/CL содержит нуклеотидную последовательность гена вариабельного домена легкой цепи в единой рамке считывания с геном константного домена лямбда легкой цепи иммуноглобулина человека, представленную на SEQ ID NO:4, наработку рекомбинантного антитела Т11 и его хроматографическую очистку из культуральной среды.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2810476C1 true RU2810476C1 (ru) | 2023-12-27 |
Family
ID=
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2720614C9 (ru) * | 2020-04-23 | 2021-02-09 | федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Министерства здравоохранения Российской Федерации | Иммунобиологическое средство и способ его использования для индукции специфического иммунитета против вируса тяжелого острого респираторного синдрома SARS-CoV-2 (варианты) |
| RU2744274C1 (ru) * | 2020-11-20 | 2021-03-04 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) | Моноклональное антитело к RBD фрагменту в составе S белка вируса SARS-CoV-2 |
| WO2021222935A2 (en) * | 2020-04-28 | 2021-11-04 | The Rockefeller University | Neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies and methods of use thereof |
| US11312760B1 (en) * | 2021-01-19 | 2022-04-26 | Newsoara Biopharma Co., Ltd. | Expression vector for anti-SARS-CoV-2 neutralizing antibodies |
| RU2784655C1 (ru) * | 2021-12-31 | 2022-11-29 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) | СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ НЕЙТРАЛИЗУЮЩИХ АНТИТЕЛ К SARS-CoV-2 В СЫВОРОТКЕ ИЛИ ПЛАЗМЕ КРОВИ ЛЮДЕЙ, ПЕРЕНЕСШИХ COVID-19 ИЛИ ПРИВИТЫХ ВАКЦИНАМИ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ НОВОЙ КОРОНАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ COVID-19, С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА, СОДЕРЖАЩЕГО РЕКОМБИНАНТНЫЙ РЕЦЕПТОР-СВЯЗЫВАЮЩИЙ ДОМЕН (RBD) ПОВЕРХНОСТНОГО ГЛИКОПРОТЕИНА S КОРОНАВИРУСА SARS-COV-2 И РЕКОМБИНАНТНЫЙ ЧЕЛОВЕЧЕСКИЙ РЕЦЕПТОР АСЕ2 |
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2720614C9 (ru) * | 2020-04-23 | 2021-02-09 | федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Министерства здравоохранения Российской Федерации | Иммунобиологическое средство и способ его использования для индукции специфического иммунитета против вируса тяжелого острого респираторного синдрома SARS-CoV-2 (варианты) |
| WO2021222935A2 (en) * | 2020-04-28 | 2021-11-04 | The Rockefeller University | Neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies and methods of use thereof |
| RU2744274C1 (ru) * | 2020-11-20 | 2021-03-04 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) | Моноклональное антитело к RBD фрагменту в составе S белка вируса SARS-CoV-2 |
| US11312760B1 (en) * | 2021-01-19 | 2022-04-26 | Newsoara Biopharma Co., Ltd. | Expression vector for anti-SARS-CoV-2 neutralizing antibodies |
| RU2784655C1 (ru) * | 2021-12-31 | 2022-11-29 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) | СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ НЕЙТРАЛИЗУЮЩИХ АНТИТЕЛ К SARS-CoV-2 В СЫВОРОТКЕ ИЛИ ПЛАЗМЕ КРОВИ ЛЮДЕЙ, ПЕРЕНЕСШИХ COVID-19 ИЛИ ПРИВИТЫХ ВАКЦИНАМИ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ НОВОЙ КОРОНАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ COVID-19, С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА, СОДЕРЖАЩЕГО РЕКОМБИНАНТНЫЙ РЕЦЕПТОР-СВЯЗЫВАЮЩИЙ ДОМЕН (RBD) ПОВЕРХНОСТНОГО ГЛИКОПРОТЕИНА S КОРОНАВИРУСА SARS-COV-2 И РЕКОМБИНАНТНЫЙ ЧЕЛОВЕЧЕСКИЙ РЕЦЕПТОР АСЕ2 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113185613B (zh) | 新型冠状病毒s蛋白及其亚单位疫苗 | |
| US20220305113A1 (en) | Antigens of beta-coronaviruses, preparation methods and uses thereof | |
| Li et al. | Immunisation of ferrets and mice with recombinant SARS-CoV-2 spike protein formulated with Advax-SM adjuvant protects against COVID-19 infection | |
| Pu et al. | The safety and immunogenicity of an inactivated SARS-CoV-2 vaccine in Chinese adults aged 18–59 years: A phase I randomized, double-blinded, controlled trial | |
| Hickman et al. | The effect of malnutrition on norovirus infection | |
| CN115710311A (zh) | 冠状病毒的抗体或其抗原结合片段 | |
| Wang et al. | Current understanding of middle east respiratory syndrome coronavirus infection in human and animal models | |
| Takano et al. | TNF-alpha, produced by feline infectious peritonitis virus (FIPV)-infected macrophages, upregulates expression of type II FIPV receptor feline aminopeptidase N in feline macrophages | |
| CN111437384A (zh) | 用于预防covid-19的蝙蝠源性冠状病毒疫苗 | |
| Kaku et al. | Resistance of SARS-CoV-2 variants to neutralization by antibodies induced in convalescent patients with COVID-19 | |
| RU2613421C2 (ru) | Высокоаффинные антитела человека к белку gb цитомегаловирусу (cmv) человека | |
| CN107459562B (zh) | 重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽、腺病毒亚单位疫苗及其制备方法 | |
| WO2015167710A1 (en) | Adenoviral vector-based vaccine against enterovirus infection | |
| Bai et al. | Virus-like particles of SARS-like coronavirus formed by membrane proteins from different origins demonstrate stimulating activity in human dendritic cells | |
| US10251948B2 (en) | Anti-HIV vaccine constructed based on amino acid mutations in attenuated live EIAV vaccine | |
| Li et al. | Recent progress on the mutations of SARS-CoV-2 spike protein and suggestions for prevention and controlling of the pandemic | |
| WO2020192080A1 (zh) | 一种人7型腺病毒抗体及其应用 | |
| CN113564133B (zh) | 柯萨奇病毒a16型毒株及其免疫原性组合物和应用 | |
| CN106380510A (zh) | 鲍式不动杆菌的新靶标 | |
| EP1479761A1 (en) | New enterovirus, vaccines, medicaments and diagnostic kits | |
| Cai-Xia et al. | Biological product development strategies for prevention and treatment of coronavirus disease 2019 | |
| CN107602672B (zh) | 重组表达的腺病毒纤毛蛋白肽、腺病毒亚单位疫苗及其制备方法 | |
| RU2810476C1 (ru) | Широко нейтрализующее антитело против SARS-CoV-2 | |
| Li et al. | Longitudinal immune profiling reveals dominant epitopes mediating long-term humoral immunity in COVID-19–convalescent individuals | |
| Lassauniere et al. | Neutralisation of SARS-CoV-2 Omicron subvariants BA. 2.86 and EG. 5.1 by antibodies induced by earlier infection or vaccination |