RU2809107C2 - Питательная композиция для улучшения функции барьера желудочно-кишечного тракта, содержащая в комбинации 6'sl и lnt - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к питательным композициям для младенца, ребенка младшего возраста и детей в возрасте от 3 до менее 8 лет. Питательная композиция содержит 6'-сиалиллактозу (6'SL) и лакто-N-тетраозу (LNT) и применяется для улучшения барьера желудочно-кишечного тракта у младенца, ребенка младшего возраста или детей в возрасте от 3 лет до 8 лет. Причем указанное улучшение барьера желудочно-кишечного тракта представляет собой улучшенную структуру барьера и/или улучшенную защиту барьера. 13 з.п. ф-лы, 5 ил., 1 табл., 3 пр.

Description

Область применения изобретения

Настоящее изобретение относится к питательным композициям, содержащим 6'-сиалиллактозу (6'SL) и лакто-N-тетраозу (LNT), для применения при улучшении барьера желудочно-кишечного тракта. В частности, настоящее изобретение относится к улучшению функции кишечного барьера у младенца, ребенка младшего возраста или детей в возрасте от 3 лет до 8 лет.

Предпосылки создания изобретения

Материнское молоко рекомендовано всем младенцам. Однако в некоторых случаях грудное вскармливание является недостаточным или неэффективным по медицинским причинам либо мать решает не кормить грудью. Для этих ситуаций были разработаны детские смеси. Были разработаны также обогатители для витаминизации материнского молока или детской смеси определенными ингредиентами. В таких случаях было бы еще более предпочтительно обеспечить средства для улучшения функции кишечного барьера у младенцев и детей младшего возраста посредством вмешательства в питание.

Во время постнатального развития кишечник новорожденного подвергается процессу созревания, который завершается формированием структурно интактного и функционального барьера для макромолекул и патогенных бактерий. Это явление называется закрытием кишечника и, по-видимому, зависит от рациона питания. В этом контексте различные исследования младенцев (JPGN, 1995, 21: 383-6) и животных моделей (Pediatr Res, 1990, 28: 31-7) показывают, что созревание барьера происходит у новорожденных быстрее при грудном вскармливании, чем при вскармливании детской смесью. Это может объяснить более высокую распространенность аллергии и инфекции у младенцев, вскармливаемых смесью, чем у младенцев, вскармливаемых материнским молоком.

Некоторые конкретные группы младенцев и детей младшего возраста особенно нуждаются в композициях, способных улучшить функцию кишечного барьера. Такими младенцами и детьми младшего возраста являются, например, недоношенные младенцы, младенец с низким весом при рождении и/или младенцы или дети младшего возраста с задержкой роста. Действительно, кишечный барьер более проницаем и более подвержен повреждениям, а его структура и функции у таких младенцев становятся менее зрелыми, чем у здорового доношенного младенца. Это в свою очередь может приводить к другим проблемам, таким как инфекция или аллергия. Для таких младенцев особенно предпочтительно дополнять фармакологическое лечение питательными композициями, способными улучшать функцию кишечного барьера.

Ранее было исследовано влияние пищевых ингредиентов, таких как олигосахариды грудного молока, на улучшение функции кишечного барьера.

В WO2013/032674 описано, что олигосахариды грудного молока могут быть благоприятными для функции кишечного барьера. 6'SL и LNT перечисляются среди длинных перечней примеров приемлемых ОГМ.

Благоприятное воздействие LNT и других ОГМ также описано в WO2017/46711 (лечат нарушенный барьер слизистой оболочки), WO2017/71716 (лечат нарушенный барьер слизистой оболочки), WO2016/91265 (снижают проницаемость кишечника) и WO2016/66174 (сохраняют целостность слизистой оболочки). В WO2015/091789 описано благоприятное воздействие N-ацетилированных олигосахаридов, таких как, например, LNT, в комбинации с сиалилированными олигосахаридами и галактоолигосахаридами, на снижение проницаемости кишечника. Также в WO2015/071403 LNT описана как способствующая функциональной созреванию кишечника.

Повышенная миграция энтероцитов является важным механизмом после повреждения слизистой оболочки для быстрого восстановления целостности эпителия на площади поверхности оголенных ворсинок. Tsukahara et al обнаружили, что активация GPR35 способствует репарации слизистой оболочки в толстой кишке (Pharmacological Research 123 (2017) 27–39). Такой механизм связан с улучшением функции, структуры, защиты и созревания барьера желудочно-кишечного тракта и, в частности, с улучшением функции, структуры и защиты барьера желудочно-кишечного тракта.

Было бы полезно дополнительно оптимизировать влияние питательных композиций на функцию кишечного барьера у всех младенцев и детей.

Существует очевидная потребность в разработке приемлемых способов улучшения функции кишечного барьера у младенцев и детей младшего возраста.

Также существует потребность в обеспечении таких полезных для здоровья эффектов способом, который особенно приемлем для субъектов младшего возраста (младенцев и детей младшего возраста), который не должен включать классическое фармацевтическое вмешательство, поскольку эти младенцы или дети младшего возраста особенно уязвимы.

Существует потребность в обеспечении у этих младенцев или детей младшего возраста таких полезных для здоровья эффектов способом, который не вызывает побочных эффектов и/или который можно легко предоставлять и который приемлем для родителей или медицинских работников.

Также существует потребность в обеспечении таких полезных эффектов способом, который позволит сохранять разумную и доступную для большинства стоимость такого обеспечения.

Таким образом, существует очевидная потребность в разработке альтернативных способов, отличных от классического фармацевтического вмешательства, такого как применение фармацевтических препаратов, по меньшей мере из-за связанного риска возникновения побочных эффектов.

Изложение сущности изобретения

Как указано выше, ранее, было обнаружено, что активация GPR35 способствует репарации слизистой оболочки в толстой кишке (Tsukahara et al. Pharmacological Research 123 (2017) 27–39). Настоящее изобретение основано на реализации синергетического эффекта комбинации 6'SL и LNT на активацию рецептора GPR35, причем эффект комбинации больше суммы эффектов отдельно 6'SL и LNT (см. пример 2). Таким образом, было обнаружено, что комбинация 6'SL и LNT синергетически улучшает кишечный барьер.

Таким образом, цель настоящего изобретения относится к питательным композициям для улучшения кишечного барьера, таким как улучшение репарации барьера, улучшение созревания барьера, улучшение структуры барьера и/или улучшение защиты барьера.

Таким образом, один аспект изобретения относится к питательной композиции, содержащей 6'-сиалиллактозу (6'SL) и лакто-N-тетраозу (LNT), для применения при улучшении барьера желудочно-кишечного тракта у младенца (ребенка в возрасте до 12 месяцев) или ребенка младшего возраста (от 1 года до менее 3 лет); или питательная композиция в форме молочной смеси для детей от 1 до 3 лет, содержащая 6'-сиалиллактозу (6'SL) и лакто-N-тетраозу (LNT), для применения при улучшении барьера желудочно-кишечного тракта у детей (в возрасте от 3 лет до менее 8 лет).

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения указанное улучшение барьера желудочно-кишечного тракта представляет собой улучшение репарации барьера, такое как репарация слизистой оболочки в толстой кишке, связанная с активацией GPR35. В свою очередь, улучшение репарации барьера важно для восстановления структуры и функции барьера. Таким образом, улучшение репарации связано с улучшением структуры и функции барьера, а также с защитой барьера.

Созревание, структура, функция и репарация барьера желудочно-кишечного тракта являются взаимосвязанными. Надлежащее созревание желудочно-кишечного тракта приводит к надлежащей структуре и функции желудочно-кишечного тракта, которые, в свою очередь, поддерживаются надлежащей защитой барьера и восстанавливаются надлежащей репарацией барьера. Таким образом, любой из этих аспектов, рассматриваемых вместе или по отдельности, способствует устойчивому снижению восприимчивости к заболеваниям.

Краткое описание графических материалов

Фиг. 1. Отклик GPR35 in vitro на LNT в клеточном анализе из примера 2. Значение EC50 составляет 4,5 мМ.

Фиг. 2. Отклик GPR35 in vitro на 6’SL в клеточном анализе из примера 2. Значение EC50 составляет 6,5 мМ.

Фиг. 3. Отклик GPR35 in vitro на смесь олигосахаридов грудного молока (ОГМ), состоящую из смеси 6’SL и LNT, в клеточном анализе из примера 2. Значение EC50 составляет 2,2 мМ.

Фиг. 4. Анализ 6’SL (A) и LNT (B) методом высокоэффективной анионообменной хроматографии с импульсным амперометрическим детектированием (ВЭАОХ-ИАД) до и после обработки нейраминидазой (6’SL) или β-галактозидазой (LNT), показывающий полное расщепление обоих ОГМ

Фиг. 5. Отклик GPR35 in vitro на смесь ОГМ, состоящую из смеси 6’SL и LNT, в клеточном анализе из примера 2 (столбцы, заштрихованные горизонтальными линиями) в сравнении со смесью расщепленных 6’SL и LNT (столбцы, заштрихованные вертикальными линиями). График показывает, что при расщеплении 6’SL и LNT активность рецептора теряется.

Настоящее изобретение будет более подробно описано ниже.

Подробное описание изобретения

Определения

До более подробного описания настоящего изобретения будут приведены определения указанных ниже терминов и условных обозначений.

Термин «младенец» означает ребенка в возрасте до 12 месяцев (<12 месяцев). Выражение «ребенок младшего возраста» означает ребенка в возрасте от одного до менее трех лет (≥1 года до <3 лет), его также называют ребенком, начинающим ходить. Выражение «ребенок» означает ребенка в возрасте от трех до менее восьми лет ((≥ 3 лет до <8 лет).

«Младенец или ребенок младшего возраста, рожденный посредством кесарева сечения» означает младенца или ребенка младшего возраста, рожденного посредством кесарева сечения. Это означает, что младенец или ребенок младшего возраста не был рожден посредством вагинальных родов.

«Младенец или ребенок младшего возраста, рожденный посредством вагинальных родов» означает младенца или ребенка младшего возраста, который был рожден посредством вагинальных родов, а не посредством кесарева сечения.

«Недоношенный» или «преждевременно родившийся» означает младенца или ребенка младшего возраста, который родился раньше срока. По существу, этот термин относится к младенцу или ребенку младшего возраста, рожденному до 37-й недели беременности.

«Младенец с низким весом при рождении» означает новорожденного, имеющего массу тела менее 2500 г (5,5 фунта) по причине либо преждевременных родов, либо ограниченного роста плода. Таким образом, этот термин включает:

- младенца или ребенка младшего возраста, который имеет/имел вес при рождении от 1500 до 2500 г (обычно называемый «низким весом при рождении» или НВР);

- младенца или ребенка младшего возраста, который имеет/имел вес при рождении от 1000 до 1500 г (обычно называемый «очень низким весом при рождении» или ОНВР);

- младенца или ребенка младшего возраста, который имеет/имел массу тела менее 1000 г при рождении (обычно называемую «крайне низкий вес при рождении» или КНВР).

«Младенец, родившийся маленьким для своего гестационного возраста (SGA)» означает ребенка с весом при рождении менее 10-го процентиля для детей того же гестационного возраста.

Выражение «питательная композиция» означает композицию, которой питается субъект. Данная питательная композиция обычно предназначена для перорального применения и обычно включает источник липидов или жира и источник белка.

В конкретном варианте осуществления композиция настоящего изобретения представляет собой гипоаллергенную питательную композицию. Выражение «гипоаллергенная питательная композиция» означает питательную композицию, которая с низкой вероятностью вызовет аллергические реакции.

В конкретном варианте осуществления композиция настоящего изобретения представляет собой «искусственную питательную композицию». Выражение «искусственная питательная композиция» означает смесь, полученную с помощью химических и/или биологических средств, которые могут быть химически идентичны смеси природного происхождения, присутствующей в молоке млекопитающих (т.е. искусственная композиция не является грудным молоком).

Выражение «детская смесь» при использовании в настоящем документе относится к продукту питания, который специально предназначен для употребления в пищу младенцами в течение первых месяцев жизни и сам по себе удовлетворяет потребности в питании этой категории лиц (статья 2(c) Директивы Европейской комиссии 91/321/EEC 2006/141/EC от 22 декабря 2006 г. о детских смесях и смесях для прикармливаемых детей). Оно также относится к питательной композиции, предназначенной для младенцев, как определено в Codex Alimentarius (Codex STAN 72-1981) и Infant Specialities (включая статью Food for Special Medical Purpose). Выражение «детская смесь» охватывает как «начальную детскую смесь», так и «смесь последующего уровня» или «смесь для прикармливаемых детей».

«Смесь последующего уровня» или «смесь для прикармливаемых детей» дают, начиная с 6-го месяца. Она составляет главный жидкий элемент в постепенно увеличивающемся разнообразии рациона питания для данной категории лиц.

Выражение «детское питание» означает продукт питания, специально предназначенный для употребления в пищу младенцами или детьми младшего возраста в течение первых лет жизни.

Выражение «детская композиция на зерновой основе» означает продукт питания, специально предназначенный для употребления в пищу младенцами или детьми младшего возраста в течение первых лет жизни.

Выражение «молочная смесь для детей от 1 до 3 лет» (или GUM) относится к напитку на основе молока, как правило, с добавлением витаминов и минеральных веществ, который предназначен для детей младшего возраста или детей.

Термин «обогатитель» относится к жидким или твердым питательным композициям, подходящим для смешивания с грудным молоком или детской смесью.

Выражение «период отлучения от груди» означает период, в течение которого в рационе младенца или ребенка младшего возраста материнское молоко заменяют другой пищей.

Выражения «в возрасте дней/недель/месяцев/лет» и «дней/недель/месяцев/лет после рождения» могут использоваться как взаимозаменяемые.

Выражение «улучшенный барьер желудочно-кишечного тракта» может включать в себя одно или более из следующего:

- Более эффективная репарация барьера, такая как (без ограничений) восстановление целостности барьера желудочно-кишечного тракта, такая как репарация разорванного барьера, снижение проницаемости после воспалительной провокации слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта и репарация слизистой оболочки.

- Улучшенное созревание барьера, такое как (без ограничений) созревание и/или развитие барьера у младенца, предпочтительно у недоношенного младенца.

- Улучшенная структура барьера, такая как (без ограничений) укрепление барьера желудочно-кишечного тракта, целостность барьера желудочно-кишечного тракта, структура с плотным соединением клеток и целостность эпителиальной выстилки кишечника.

- Улучшенная барьерная функция, такая как улучшение сопротивляемости барьера желудочно-кишечного тракта, снижение проницаемости барьера желудочно-кишечного тракта, такая как сокращение патогенов, мигрирующих из кишечника через кишечный барьер, такая как сокращение комменсальных бактерий мигрирующих из кишечника через кишечный барьер, сокращение аллергенов, мигрирующих из кишечника через кишечный барьер, сокращение токсичных соединений, мигрирующих из кишечника через кишечный барьер и снижение восприимчивости к заболеваниям.

- Улучшенная защита барьера, такая как (без ограничений) предотвращение дисфункции барьера, предотвращение проницаемости барьера, защита структуры с плотным соединением клеток, защита целостности эпителиальной выстилки кишечника.

Под «материнским молоком» следует понимать грудное молоко или молозиво матери.

«Олигосахарид» представляет собой сахаридный полимер, содержащий небольшое число (как правило, от трех до десяти) простых сахаров (моносахаридов).

Термин «ОГМ» относится к олигосахариду (-ам) грудного молока. Эти углеводы обладают высокой устойчивостью к ферментативному гидролизу, что указывает на то, что они могут проявлять существенные функции, непосредственно не относящиеся к их калорийности. В первую очередь было показано, что они играют жизненно важную роль в раннем развитии младенцев и детей младшего возраста, например в развитии иммунной системы. В грудном молоке обнаружено много различных видов ОГМ. Каждый отдельный олигосахарид основан на комбинации глюкозы, галактозы, сиаловой кислоты (N-ацетилнейраминовой кислоты), фукозы и/или N-ацетилглюкозамина с образованием многочисленных и разнообразных связей между ними, что обусловливает присутствие огромного числа различных олигосахаридов в грудном молоке — на данный момент было выявлено более 130 таких структур. Почти все они на своем восстанавливающем конце имеют лактозный фрагмент, в то время как сиаловая кислота и/или фукоза (при наличии) занимают концевые положения на невосстанавливающих концах. ОГМ могут быть кислыми (например, содержащий заряженную сиаловую кислоту олигосахарид) или нейтральными (например, фукозилированный олигосахарид).

«Фукозилированный олигосахарид» представляет собой олигосахарид, имеющий остаток фукозы. Он имеет нейтральный характер. Некоторыми примерами являются 2’FL (2’-фукозиллактоза), 3’FL (3-фукозиллактоза), дифукозиллактоза, лакто-N-фукопентаоза (например, лакто-N-фукопентаоза I, лакто-N-фукопентаоза II, лакто-N-фукопентаоза III, лакто-N-фукопентаоза V), лакто-N-фукогексаоза, лакто-N-дифукогексаоза I, фукозиллакто-N-гексаоза, фукозиллакто-N-неогексаоза, дифукозиллакто-N-гексаоза I, дифукозиллакто-N-неогексаоза II и любая их комбинация. Хотя авторы не желают ограничиваться какой-либо теорией, считается, что фукозил-эпитоп фукозилированных олигосахаридов может выступать в качестве «ловушки» на поверхности слизистой оболочки. Посредством конкурентного эффекта он может предотвращать и/или ограничивать действие патогенов, вызывающих инфекции (вирусного или бактериального происхождения), или секретируемых ими компонентов (например, токсинов), в первую очередь исключая их связывание с природными лигандами, и, безотносительно к какой-либо теории, считается, что за счет этого будет снижаться риск возникновения инфекций/воспалений, и в частности риск возникновения инфекций и/или воспалений нижних дыхательных путей (НДП)/уха. Дополнительно принято считать, что фукозилированные олигосахариды стимулируют рост и метаболическую активность специфических симбиотических микробов, снижающих воспалительную реакцию и создающих неблагоприятную среду для патогенов, тем самым обеспечивая колонизационную резистентность.

Выражения «фукозилированные олигосахариды, содержащие 2’-фукозил-эпитоп» и «2-фукозилированные олигосахариды» охватывают фукозилированные олигосахариды с определенной гомологией формы, поскольку они содержат 2’-фукозил-эпитоп; следовательно, можно ожидать определенную гомологию функции. Хотя авторы не желают ограничиваться какой-либо теорией, считается, что 2’-фукозил-эпитоп этих фукозилированных олигосахаридов особо характерен для патогенов (или секретируемых ими компонентов), вызывающих инфекции НДП и/или уха.

Выражение «N-ацетилированный (-ые) олигосахарид (-ы)» охватывает как «N-ацетиллактозамин», так и «олигосахарид (-ы), содержащий (-ие) N-ацетиллактозамин». Они являются нейтральными олигосахаридами, имеющими остаток N-ацетиллактозамина. Подходящими примерами являются LNT (лакто-N-тетраоза), пара-лакто-N-неогексаоза (пара-LNnH), LNnT (лакто-N-неотетраоза) и любые их комбинации. Другими примерами являются лакто-N-гексаоза, лакто-N-неогексаоза, пара-лакто-N-гексаоза, пара-лакто-N-неогексаоза, лакто-N-октаоза, лакто-N-неооктаоза, изо-лакто-N-октаоза, пара-лакто-N-октаоза и лакто-N-декаоза.

Выражения «по меньшей мере один фукозилированный олигосахарид» и «по меньшей мере один N-ацетилированный олигосахарид» означают «по меньшей мере один тип фукозилированного олигосахарида» и «по меньшей мере один тип N-ацетилированного олигосахарида».

«Предшественник ОГМ» представляет собой ключевое соединение, которое включается в выработку ОГМ, такое как сиаловая кислота и/или фукоза.

«Сиалилированный олигосахарид» представляет собой олигосахарид, содержащий заряженную сиаловую кислоту, т.е. олигосахарид, имеющий остаток сиаловой кислоты. Он имеет кислотный характер. Некоторыми примерами являются 3’SL (3'-сиалиллактоза) и 6’SL (6'-сиалиллактоза).

Питательная композиция настоящего изобретения может находиться в твердой форме (например, в форме порошка) или в жидком виде. Количество различных ингредиентов (например, олигосахаридов) может выражаться в г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества, если она представлена в твердой форме, например в порошке, или как концентрация в г/л композиции, если она относится к жидкой форме (последний случай также включает жидкую композицию, которую можно получать из порошка после растворения в жидкости, например в молоке, воде и т.п., например растворенную детскую смесь, или смесь для прикармливаемых детей / смесь последующего уровня, или молочную смесь для детей от 1 до 3 лет, или зерновой продукт для детского питания, или любую другую смесь, предназначенную для детского питания).

Термин «пребиотик» означает неперевариваемые углеводы, которые благоприятно влияют на организм-хозяина, избирательно стимулируя рост и/или активность полезных для здоровья бактерий, например бифидобактерий, в толстом кишечнике человека (Gibson GR, Roberfroid MB. Dietary modulation of the human colonic microbiota: introducing the concept of prebiotics. J Nutr. 1995;125:1401–12).

Термин «пробиотик» означает препараты клеток микроорганизмов или компонентов клеток микроорганизмов, которые оказывают благоприятное воздействие на здоровье или самочувствие организма-хозяина. (Salminen S, Ouwehand A. Benno Y. et al. Probiotics: how should they be defined. Trends Food Sci. Technol. 1999:10 107–10). Клетки микроорганизмов, по существу, представляют собой бактерии или дрожжи.

Под термином «КОЕ» следует понимать колониеобразующую единицу.

Если не указано иное, все процентные содержания даны по массе.

Дополнительно в контексте изобретения термины «содержащий» или «содержит» не исключают других возможных элементов. Композиция настоящего изобретения, включая многие варианты осуществления, описанные в настоящем документе, может содержать существенные элементы и ограничения изобретения, описанные в настоящем документе, а также любые дополнительные или необязательные ингредиенты, компоненты или ограничения, описанные в настоящем документе или иным образом, в зависимости от потребностей, состоять или по существу состоять из них.

Любую ссылку на документы предшествующего уровня техники в данном описании не следует рассматривать как признание того, что такой предшествующий уровень техники широко известен или составляет часть общеизвестных знаний в данной области.

Более подробное описание изобретения будет представлено ниже. Следует отметить, что различные аспекты, признаки, примеры и варианты осуществления, описанные в настоящей заявке, могут быть совместимыми и/или скомбинированными друг с другом.

Питательная композиция

Настоящее изобретение основано на выявлении синергетического эффекта комбинации 6'SL и LNT на активацию рецептора GPR35. Такой синергетический эффект 6'SL и LNT на активацию рецептора GPR35 имеет значение для улучшения кишечного барьера.

Таким образом, один аспект изобретения относится к питательной композиции, содержащей 6'-сиалиллактозу (6'SL) и лакто-N-тетраозу (LNT), для применения при улучшении барьера желудочно-кишечного тракта у младенца (ребенка в возрасте до 12 месяцев) или ребенка младшего возраста (от 1 года до менее 3 лет); или

питательной композиции в форме молочной смеси для детей от 1 до 3 лет, содержащей 6'-сиалиллактозу (6'SL) и лакто-N-тетраозу (LNT), для применения при улучшении барьера желудочно-кишечного тракта у ребенка (в возрасте от 3 лет до менее 8 лет). Как показано в примере 2, был выявлен синергетический эффект комбинации 6'SL и LNT на активацию рецептора GPR35.

Как также указано выше, улучшение репарации барьера было связано с активацией GPR35 (Tsukahara et al. Pharmacological Research 123 (2017) 27–39). Таким образом, активация рецептора GPR35 улучшает репарацию барьера, что считается важным для созревания барьера. Улучшенная репарация/созревание приводит к улучшению структуры барьера, что приводит к улучшению защиты барьера. Таким образом в одном варианте осуществления указанное улучшение барьера желудочно-кишечного тракта представляет собой улучшенную репарацию барьера, улучшенную барьерную функцию, улучшенную структуру барьера и/или улучшенную защиту барьера.

В другом варианте осуществления указанное улучшение барьера желудочно-кишечного тракта представляет собой улучшенную репарацию барьера, улучшенную структуру барьера и/или улучшенную барьерную функцию.

В предпочтительном варианте осуществления указанное улучшение барьера желудочно-кишечного тракта представляет собой улучшение репарации барьера.

В другом варианте осуществления изобретения указанным применением является улучшение восстановления целостности барьера желудочно-кишечного тракта, такое как репарация разорванного барьера, снижение проницаемости после воспалительной провокации слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта и репарация слизистой оболочки.

В еще одном варианте осуществления указанное применение представляет собой усиление желудочно-кишечного барьера, повышение сопротивляемости желудочно-кишечного барьера, снижение восприимчивости к заболеваниям, уменьшение тяжести симптомов после воспалительной провокации слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта и/или снижение проницаемости желудочно-кишечного барьера.

В еще одном варианте осуществления указанное снижение проницаемости барьера желудочно-кишечного тракта обусловливает уменьшение количества патогенов, аллергенов и/или токсичных соединений, мигрирующих из кишечника в организм через кишечный барьер.

Вышеописанные эффекты/преимущества предпочтительно достигаются в тонком кишечнике.

В одном варианте осуществления питательная композиция подобрана по составу для введения младенцу. В смежном варианте осуществления указанного младенца выбирают из группы, состоящей из преждевременно родившихся, маленьких для своего гестационного возраста и детей с низким весом при рождении, предпочтительно младенец является преждевременно родившимся. Питательные композиции в соответствии с изобретением считаются особенно полезными для этих типов младенцев, поскольку описанные полезные эффекты более важны для этих младенцев, чем для «нормальных» младенцев, поскольку барьер является менее зрелым и более проницаемым по сравнению со здоровым доношенным младенцем.

В одном варианте осуществления указанная питательная композиция представляет собой детскую смесь, начальную детскую смесь, детскую смесь для прикармливаемых детей или детскую смесь последующего уровня, молочную смесь для детей от 1 до 3 лет, детское питание, детскую композицию на зерновой основе, обогатитель или добавку и предназначена для введения младенцу или ребенку младшего возраста.

В особенно преимущественном варианте осуществления настоящего изобретения 6’SL и LNT присутствуют в питательной композиции или молочной смеси для детей от 1 до 3 лет в некоторых конкретных количествах.

В еще одном варианте осуществления 6’SL и LNT присутствуют в массовом соотношении 6’SL : LNT от 3 : 1 до 1 : 3, например от 2 : 1 до 1 : 2 или от 2 : 1 до 1 : 1. В особенно преимущественном варианте осуществления такое соотношение составляет 2 : 1 или около 2 : 1, предпочтительно такое соотношение составляет 1 : 1 или около 1 : 1.

В другом варианте осуществления 6’SL присутствует в количестве от 0,005 до 5 г/л или от 0,004 до 3,8 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества.

В дополнительном варианте осуществления LNT присутствует в количестве 0,005–3 г/л или 0,004–2,3 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества.

В еще одном дополнительном варианте осуществления питательная композиция содержит:

- 6’SL в количестве 0,24 или 0,05 г/л композиции и/или в количестве 0,18 или 0,04 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества; и/или

- LNT в количестве 0,5 г/л или 0,1 г/л композиции и/или в количестве 0,38 г/100 г композиции или 0,08 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения LNT присутствует в питательной композиции или молочной смеси для детей от 1 до 3 лет в количестве 0,005–3 г/л композиции. В некоторых вариантах осуществления LNT может присутствовать в количестве 0,01–1,5 г/л композиции, например 0,04–1,2 г/л, или 0,05–1 г/л, или 0,09–0,8 г/л композиции. В конкретном варианте осуществления LNT присутствует в количестве 0,5 г/л композиции. В другом конкретном варианте осуществления LNT присутствует в количестве 0,1 г/л композиции.

LNT может присутствовать в питательной композиции или молочной смеси для детей от 1 до 3 лет в количестве 0,004–2,3 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества, LNT может присутствовать в количестве 0,008–1,2 г/100 г композиции, например 0,03–0,9 г/100 г, или 0,04–0,8 г/100 г, или 0,07–0,6 г/100 г композиции. В конкретном варианте осуществления LNT присутствует в количестве 0,38 г/100 г композиции. В другом конкретном варианте осуществления LNT присутствует в количестве 0,08 г/100 г композиции.

LNT можно синтезировать химическим путем с помощью ферментативного переноса сахаридных звеньев с донорных фрагментов на акцепторные фрагменты с использованием гликозилтрансфераз, как описано, например, в патенте США № 5,288,637 и WO 96/10086.

В другом предпочтительном варианте осуществления изобретения питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет может включать 0,005–5 г/л 6’SL, или 0,008–2,5 г/л, или 0,01–1 г/л, или 0,03–0,7 г/л, например 0,04 или 0,5 г/л.

Питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет в соответствии с изобретением может содержать 0,004–3,8 г 6’SL на 100 г композиции в расчете на массу сухого вещества, например 0,006–1,9 г, или 0,008–0,8 г, или 0,023–0,5 г, или 0,031–0,4 г 6’SL на 100 г композиции в расчете на массу сухого вещества, например 0,18 г или 0,04 г на 100 г композиции в расчете на массу сухого вещества.

6’SL может быть выделена из природного источника, такого как молоко животных, методами хроматографии или фильтрации. В альтернативном варианте осуществления ее можно получать с помощью биотехнологических средств с использованием специфических сиалилтрансфераз или сиалидаз, нейраминидаз либо методом ферментации на основе ферментов (рекомбинантных или природных ферментов), путем химического синтеза, либо методом микробиологической ферментации. В последнем случае микроорганизмы могут экспрессировать свои природные ферменты и субстраты, или возможно создание микроорганизмов, вырабатывающих соответствующие субстраты и ферменты. Можно применять культуры из микроорганизмов одного вида или смешанные культуры. Образование 6’SL можно инициировать акцепторными субстратами, начиная с любой степени полимеризации (DP) от DP = 1 и далее. В альтернативном варианте осуществления 6’SL можно получать путем химического синтеза из лактозы и свободной N’-ацетилнейраминовой кислоты (сиаловой кислоты).

В конкретном аспекте изобретения питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет содержит 6’SL и LNT, причем:

- 6’SL присутствует в количестве 0,005–5 г/л композиции и/или в количестве 0,004–3,8 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества; и/или

- LNT присутствует в количестве 0,005–3 г/л композиции и/или в количестве 0,004–2,3 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества.

В конкретном аспекте изобретения питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет содержит 6’SL и LNT, причем:

- 6’SL присутствует в количестве 0,008–2,5 г/л композиции и/или в количестве 0,006–1,9 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества; и/или

- LNT присутствует в количестве 0,01–1,5 г/л композиции и/или в количестве 0,008–1,2 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества.

В другом конкретном варианте осуществления питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет настоящего изобретения содержит 6’SL и LNT, причем:

- 6’SL присутствует в количестве 0,01–1 г/л композиции и/или в количестве 0,008–0,8 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества; и/или

- LNT присутствует в количестве 0,04–1,2 г/л композиции и/или в количестве 0,03–0,9 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества.

В другом конкретном варианте осуществления питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет настоящего изобретения содержит 6’SL и LNT, причем:

- 6’SL присутствует в количестве 0,03–0,7 г/л композиции и/или в общем количестве 0,023–0,5 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества; и/или

- LNT присутствует в количестве 0,05–1 г/л композиции и/или в количестве 0,04–0,8 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества.

В другом конкретном варианте осуществления питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет настоящего изобретения содержит 6’SL и LNT, причем:

- 6’SL присутствует в количестве 0,04–0,5 г/л композиции и/или в количестве 0,031–0,4 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества; и/или

- LNT присутствует в количестве 0,09–0,8 г/л композиции и/или в количестве 0,07–0,6 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества.

В конкретном варианте осуществления питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет в соответствии с изобретением содержит 6’SL и LNT, причем:

- 6’SL присутствует в количестве 0,24 или 0,05 г/л композиции и/или в количестве 0,18 или 0,04 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества; и/или

- LNT присутствует в количестве 0,5 г/л или 0,1 г/л композиции и/или в количестве 0,38 г/100 г композиции или 0,08 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества.

В конкретном варианте осуществления 6’SL содержится в питательной композиции или молочной смеси для детей от 1 до 3 лет настоящего изобретения в таком количестве, что нормальное потребление питательной композиции или молочной смеси для детей от 1 до 3 лет будет обеспечено для младенца или ребенка младшего возраста, соответственно ребенка, при потреблении суммарной суточной дозы 0,003–6,5 г, предпочтительно 0,005–3,3 г, или 0,006–1,3 г, или 0,02–0,9 г, например 0,024–0,7 г, в сутки.

В конкретном варианте осуществления LNT содержится в питательной композиции или молочной смеси для детей от 1 до 3 лет настоящего изобретения в таком количестве, что нормальное потребление питательной композиции или молочной смеси для детей от 1 до 3 лет будет обеспечено для младенца или ребенка младшего возраста, соответственно ребенка, при потреблении суммарной суточной дозы 0,003–3,9 г, предпочтительно 0,006–2 г, или 0,02–1,6 г, или 0,03–1,3 г, например 0,05–1 г, в сутки.

В конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения питательная композиция, соответственно молочная смесь для детей от 1 до 3 лет, настоящего изобретения может содержать дополнительные олигосахариды грудного молока и/или их предшественники. Даже если такой олигосахарид грудного молока неэффективны для активации рецепторов GPR35, их можно добавлять для получения других полезных для здоровья эффектов.

Таким образом, в конкретном варианте осуществления питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет содержит по меньшей мере один фукозилированный олигосахарид. В ней может присутствовать один или несколько типов фукозилированного (-ых) олигосахарида (-ов). Фукозилированный (-ые) олигосахарид (-ы) можно фактически выбирать из перечня, включающего 2’-фукозиллактозу, 3’-фукозиллактозу, дифукозиллактозу, лакто-N-фукопентаозу (например, лакто-N-фукопентаозу I, лакто-N-фукопентаозу II, лакто-N-фукопентаозу III, лакто-N-фукопентаозу V), лакто-N-фукогексаозу, лакто-N-дифукогексаозу I, фукозиллакто-N-гексаозу, фукозиллакто-N-неогексаозу (например, фукозиллакто-N-неогексаозу I, фукозиллакто-N-неогексаозу II), дифукозиллакто-N-гексаозу I, дифуко-лакто-N-неогексаозу, дифукозиллакто-N-неогексаозу I, дифукозиллакто-N-неогексаозу II, фукозил-пара-лакто-N-гексаозу, три-фуко-пара-лакто-N-гексаозу I и любую их комбинацию.

В некоторых конкретных вариантах осуществления фукозилированный олигосахарид включает 2’-фукозил-эпитоп. Он, может быть, например, выбран из перечня, включающего 2’-фукозиллактозу, дифукозиллактозу, лакто-N-фукопентаозу, лакто-N-фукогексаозу, лакто-N-дифукогексаозу, фукозиллакто-N-гексаозу, фукозиллакто-N-неогексаозу, дифукозиллакто-N-гексаозу дифуко-лакто-N-неогексаозу, дифукозиллакто-N-неогексаозу, фукозил-пара-лакто-N-гексаозу и любую их комбинацию.

В конкретном варианте осуществления питательная композиция, соответственно молочная смесь для детей от 1 до 3 лет, в соответствии с изобретением содержит 2’-фукозиллактозу (или 2FL, или 2’FL, или 2-FL, или 2’-FL). В конкретном варианте осуществления не используется никакой другой тип фукозилированного олигосахарида, кроме 2’-фукозиллактозы, т.е. питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет изобретения в качестве фукозилированного олигосахарида содержит только 2’-фукозиллактозу.

Фукозилированный (-ые) олигосахарид (-ы) может (-гут) быть выделен (-ы) из природного источника, такого как молоко животных, методами хроматографии или фильтрации. В альтернативном варианте осуществления его (их) можно получать с помощью биотехнологических средств с использованием специфических фукозилтрансфераз и/или фукозидаз, либо посредством применения метода ферментации на основе ферментов (рекомбинантных или природных ферментов), либо методом микробиологической ферментации. В последнем случае или микроорганизмы могут экспрессировать свои природные ферменты и субстраты, или возможно создание микроорганизмов, вырабатывающих соответствующие субстраты и ферменты. Можно применять культуры из микроорганизмов одного вида и/или смешанные культуры. Образование фукозилированного олигосахарида может быть инициировано акцепторными субстратами, начиная с любой степени полимеризации (DP) от DP = 1 и далее. В альтернативном варианте осуществления фукозилированные олигосахариды можно получать из лактозы и свободной фукозы с помощью химического синтеза. Фукозилированные олигосахариды также доступны, например от компании Kyowa, Hakko, Kogyo, Япония.

В другом конкретном аспекте изобретения питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет может содержать по меньшей мере один N-ацетилированный олигосахарид в дополнение к LNT. В ней может присутствовать один или несколько типов N-ацетилированных олигосахаридов. В некоторых конкретных вариантах осуществления N-ацетилированный олигосахарид представляет собой лакто-N-неотетраозу (LNnT), пара-лакто-N-неогексаозу (пара-LNnH) или любую их комбинацию. В некоторых конкретных вариантах осуществления N-ацетилированный олигосахарид представляет собой LNnT. В некоторых конкретных вариантах осуществления, где присутствует LNnT, питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет содержит как LNT, так и LNnT в соотношении LNT : LNnT от 5 : 1 до 1 : 2, или от 2 : 1 до 1 : 1, или от 2 : 1,2 до 2 : 1,6.

N-ацетилированный (-ые) олигосахарид (-ы) можно синтезировать химическим путем с помощью ферментативного переноса сахаридных звеньев с донорных фрагментов на акцепторные фрагменты с использованием гликозилтрансфераз, как описано, например, в патенте США № 5,288,637 и WO 96/10086. В альтернативном варианте осуществления LNnT можно получать путем химического превращения кетогексоз (например, фруктозы), либо свободных, либо связанных с олигосахаридом (например, лактулозой), в N-ацетилгексозамин или N-ацетилгексозамин-содержащий олигосахарид, как описано в Wrodnigg, T.M.; Stutz, A.E. (1999) Angew. Chem. Int. Ed. 38:827–828. Полученный таким образом N-ацетиллактозамин можно затем переносить на лактозу в качестве акцепторного фрагмента.

В особенно преимущественном варианте осуществления настоящего изобретения питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет содержит 2’-фукозиллактозу (2FL) и/или лакто-N-неотетраозу (LNnT).

В конкретном варианте осуществления питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет в соответствии с изобретением может содержать другой (-ие) сиалилированный (-ые) олигосахарид (-ы) в дополнение к 6’SL, такой как 3'-сиалиллактоза (3-SL).

Сиалилированный (-ые) олигосахарид (-ы) может (-гут) быть выделен (-ы) из природного источника, такого как молоко животных, методами хроматографии или фильтрации. В альтернативном варианте осуществления их можно получать с помощью биотехнологических средств с применением специфических сиалилтрансфераз или сиалидаз, нейраминидаз либо методом ферментации на основе ферментов (рекомбинантных или природных ферментов), путем химического синтеза, либо методом микробиологической ферментации. В последнем случае микроорганизмы могут экспрессировать свои природные ферменты и субстраты, или возможно создание микроорганизмов, вырабатывающих соответствующие субстраты и ферменты. Можно применять культуры из микроорганизмов одного вида или смешанные культуры. Образование сиалилолигосахаридов можно инициировать акцепторными субстратами, начиная с любой степени полимеризации (DP) от DP = 1 и далее. В альтернативном варианте осуществления сиалиллактозы можно получать путем химического синтеза из лактозы и свободной N’-ацетилнейраминовой кислоты (сиаловой кислоты). Сиалиллактозы также доступны в продаже, например производства Kyowa Hakko Kogyo, Япония.

В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит один или более ОГМ, выбранных из группы, состоящей из LNnT, 2'FL, diFL и 3'SL.

В еще одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит один или более ОГМ, выбранных из группы, состоящей из LNnT, 2'FL, diFL и 3'SL; например содержащая два или более ОГМ, выбранных из группы, состоящей из LNnT, 2'FL, diFL и 3'SL, например три или более ОГМ, выбранных из группы, состоящей из LNnT, 2'FL, diFL и 3'SL, например дополнительно содержащие все из LNnT, 2'FL, diFL и 3'SL. Как указано в примере 2, смесь LNT, 6'SL, LNnT, 2'FL, diFL и 3'SL сохраняет эффект комбинации, состоящей из 6'SL и LNT.

В конкретном варианте осуществления питательная композиция настоящего изобретения содержит смесь олигосахаридов, состоящую из 6’SL, LNT, 2’FL, DiFL, LNnT и 3’SL.

В другом конкретном варианте осуществления питательная композиция настоящего изобретения содержит смесь олигосахаридов, состоящую из 2’FL, LNnT, 3’SL и 6’SL.

В другом конкретном варианте осуществления питательная композиция настоящего изобретения содержит смесь олигосахаридов, состоящую из 2’FL, DiFL, LNT, 3’SL и 6’SL.

Также преимуществом может быть отсутствие включения в композицию дополнительных ОГМ. Таким образом, в одном варианте осуществления ОГМ или их предшественники, отличные от 6'SL и LNT, отсутствуют в питательной композиции или присутствуют в общем количестве менее 0,1% (масс./масс.), предпочтительно, например, менее 0,01% (масс./масс.) или более предпочтительно, например, менее 0,001%. Как показано в примере 2, имеет место синергетический эффект комбинации, состоящей из 6'SL и LNT, на активацию рецептора GPR35.

Питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет в соответствии с настоящим изобретением может также содержать другие типы олигосахарида (-ов) (т.е. отличающийся (-иеся) от указанных выше олигосахаридов грудного молока) и/или по меньшей мере волокно (-а), и/или по меньшей мере его (их) предшественник (-и). Другой олигосахарид, и/или волокно, и/или их предшественник могут быть выбраны из перечня, включающего галактоолигосахариды (GOS), фруктоолигосахариды (FOS), инулин, ксилоолигосахариды (XOS), полидекстрозу и любую их комбинацию. Они могут присутствовать в количестве от 0 до 10 мас.% композиции. В конкретном варианте осуществления питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет может также включать по меньшей мере один олигосахарид коровьего молока (BMO).

Подходящие доступные в продаже продукты, которые можно применять для получения питательных композиций или молочной смеси для детей от 1 до 3 лет в соответствии с изобретением, включают в себя комбинации FOS с инулином, такие как продукт, продаваемый компанией BENEO под товарным знаком Orafti, или полидекстрозу, продаваемую компанией Tate & Lyle под товарным знаком STA-LITE®.

Питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет в соответствии с настоящим изобретением может также необязательно включать по меньшей мере один предшественник олигосахарида. В нем может присутствовать один или несколько прекурсоров олигосахарида. Например, прекурсором олигосахарида грудного молока является сиаловая кислота, фукоза или их смесь. В некоторых конкретных вариантах осуществления композиция содержит сиаловую кислоту.

В конкретных примерах питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет содержит от 0 до 3 г/л предшественника (-ов) олигосахарида, или от 0 до 2 г/л, или от 0 до 1 г/л, или от 0 до 0,7 г/л, или от 0 до 0,5 г/л, или от 0 до 0,3 г/л, или от 0 до 0,2 г/л предшественника (-ов) олигосахарида. Композиция в соответствии с изобретением может включать от 0 до 2,1 г предшественника (-ов) олигосахарида на 100 г композиции в расчете на массу сухого вещества, например от 0 до 1,5 г, или от 0 до 0,8 г, или от 0 до 0,15 г предшественника (-ов) олигосахарида на 100 г композиции в расчете на массу сухого вещества.

Питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет настоящего изобретения может дополнительно включать по меньшей мере один пробиотик (или пробиотический штамм), такой как пробиотический бактериальный штамм.

Чаще всего применяют пробиотические микроорганизмы, которые главным образом представляют собой бактерии и дрожжи следующих родов: Lactobacillus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Bifidobacterium spp. и Saccharomyces spp.

В некоторых конкретных вариантах осуществления пробиотик представляет собой пробиотический бактериальный штамм. В некоторых конкретных вариантах осуществления он представляет собой, в частности, штаммы Bifidobacteria и/или Lactobacilli.

Подходящие пробиотические бактериальные штаммы включают Lactobacillus rhamnosus ATCC 53103 производства Valio Oy, Финляндия, под товарным знаком LGG; Lactobacillus rhamnosus CGMCC 1.3724, Lactobacillus paracasei CNCM I-2116, Lactobacillus johnsonii CNCM I-1225, Streptococcus salivarius DSM 13084, продаваемые BLIS Technologies Limited, Новая Зеландия, под названием KI2; Bifidobacterium lactis CNCM 1-3446, продаваемый в числе прочих Christian Hansen, Дания, под товарным знаком Bb 12; Bifidobacterium longum ATCC BAA-999, продаваемый компанией Morinaga Milk Industry Co. Ltd., Япония, под товарным знаком BB536; Bifidobacterium breve, продаваемый Danisco под товарным знаком Bb-03; Bifidobacterium breve, продаваемый Morinaga под товарным знаком M-16V; Bifidobacterium infantis, продаваемый Procter & GambIe Co. под товарным знаком Bifantis; и Bifidobacterium breve, продаваемый Institut Rosell (Lallemand) под товарным знаком R0070.

Питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет в соответствии с изобретением может включать от 10e3 до 10e12 КОЕ пробиотического штамма, более предпочтительно от 10e7 до 10e12 КОЕ, например от 10e8 до 10e10 КОЕ, пробиотического штамма на грамм композиции в расчете на массу сухого вещества.

В еще одном варианте осуществления указанная питательная композиция дополнительно содержит по меньшей мере один пробиотик в количестве от 10³ до 10¹² КОЕ/г указанной композиции (масса сухого вещества).

В одном варианте осуществления пробиотики являются жизнеспособными. В другом варианте осуществления пробиотики являются неразмножающимися или инактивированными. В некоторых других вариантах осуществления можно использовать как жизнеспособные пробиотики, так и инактивированные пробиотики. Также можно добавлять пробиотические компоненты и метаболиты.

В одном варианте осуществления питательная композиция изобретения является полной питательной композицией (удовлетворяющей все или большинство потребностей субъекта в питании). В другом варианте осуществления питательная композиция представляет собой добавку или обогатитель, предназначенные, например, для дополнения человеческого грудного молока или для дополнения детской смеси или смеси для прикармливаемых детей/смеси последующего уровня.

В некоторых конкретных вариантах осуществления композиция изобретения представляет собой детскую смесь, обогатитель или добавку, которые могут предназначаться для первых 4, 6 или 12 месяцев жизни. В предпочтительном варианте осуществления питательная композиция изобретения представляет собой детскую смесь. Действительно, считается, что вмешательство в питание в соответствии с изобретением может быть наиболее эффективным при воздействии на раннюю стадию жизни (например, в возрасте первых 1, 4, 6, 12 месяцев).

В некоторых других вариантах осуществления питательная композиция настоящего изобретения представляет собой обогатитель. Обогатитель может представлять собой обогатитель грудного молока (например, обогатитель человеческого грудного молока) или обогатитель смеси, такой как обогатитель детской смеси или обогатитель смеси для прикармливаемых детей/смеси последующего уровня.

Если питательная композиция представляет собой добавку, она может быть обеспечена в форме стандартных доз. В таких случаях особенно полезно определить количество 6’SL и LNT и необязательно других олигосахаридов в отношении суточной дозы для введения младенцу или ребенку младшего возраста, как описано выше.

Питательная композиция настоящего изобретения может находиться в твердой (например, в форме порошка), жидкой или клейстеризованной форме.

В конкретном варианте осуществления питательная композиция представляет собой добавку в форме порошка и предложена в пакете-саше, в форме таблеток, капсул, пастилок или жидкости, например жидкости, предназначенной для выдачи в виде капель в грудное молоко, или в питательную композицию, или непосредственно в рот младенца или ребенка младшего возраста.

В другом варианте осуществления добавка может дополнительно содержать носитель, защитные гидроколлоиды (такие как камеди, белки, модифицированные крахмалы), связующие вещества, пленкообразующие агенты, инкапсулирующие агенты/материалы, материалы стенок/оболочек, соединения матриц, покрытия, эмульгаторы, поверхностно-активные вещества, солюбилизирующие агенты (масла, жиры, воски, лецитины и т.п.), адсорбенты, носители, наполнители, вспомогательные соединения, диспергирующие агенты, увлажняющие агенты, технологические добавки (растворители), антислеживающие агенты, маскирующие вкус агенты, утяжеляющие агенты, желирующие агенты и гелеобразующие агенты. Добавка также может содержать традиционные фармацевтические добавки и вспомогательные вещества, эксципиенты и разбавители, включая, без ограничений, воду, желатин любого происхождения, растительные камеди, лигнинсульфонат, тальк, сахара, крахмал, гуммиарабик, растительные масла, полиалкиленгликоли, ароматизирующие агенты, консерванты, стабилизаторы, эмульгирующие агенты, буферы, смазывающие вещества, красители, увлажняющие агенты, наполнители и т.п. Если добавка находится в форме порошка, она может включать носитель. Однако предпочтительно, чтобы носитель в добавке отсутствовал. Если добавка находится в форме сиропа, ОГМ предпочтительно растворяют или суспендируют в воде, подкисленной цитратом.

Дополнительно добавка может содержать витамины, минеральные микроэлементы и другие микроэлементы в соответствии с рекомендациями государственных органов, такими как рекомендуемые нормы потребления (RDA) США.

Питательная композиция настоящего изобретения может находиться в твердой (например, в форме порошка), жидкой или клейстеризованной форме. В конкретном варианте осуществления питательная композиция представляет собой добавку, содержащую 6’SL и LNT в соотношении от 1 : 3 до 3 : 1, причем добавка находится в порошковой форме и предложена в пакете-саше, предпочтительно в пакете-саше с 1–10 г смеси 6’SL и LNT на пакет-саше, или в форме сиропа, предпочтительно сиропа с общей концентрацией твердых веществ от 5 до 75 г/100 мл (от 5 до 75% (масс./об.)). Если добавка находится в форме порошка, она может включать носитель. Однако предпочтительно, чтобы носитель в добавке отсутствовал. Если добавка находится в форме сиропа, ОГМ предпочтительно растворяют или суспендируют в воде, подкисленной цитратом.

Питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет в соответствии с изобретением обычно содержит источник белка. Белок может содержаться в количестве от 1,6 до 3 г на 100 ккал. В некоторых вариантах осуществления, в частности когда композиция предназначена для преждевременно родившихся младенцев, количество белка может составлять от 2,4 до 4 г / 100 ккал или более 3,6 г / 100 ккал. В некоторых других вариантах осуществления количество белка может быть ниже 2,0 г на 100 ккал, например от 1,8 до 2 г/100 ккал, или белок может содержаться в количестве ниже 1,8 г на 100 ккал.

Тип белка не считается критическим для настоящего изобретения при условии, что соблюдены минимальные требования по содержанию незаменимых аминокислот и обеспечен удовлетворительный рост. Таким образом, можно применять источники белка на основе молочной сыворотки, казеина и их смесей, а также источники белка на основе сои. Что касается сывороточных белков, источник белка может быть основан на кислой молочной сыворотке или сладкой молочной сыворотке или их смесях и может включать альфа-лактальбумин и бета-лактоглобулин в любых желаемых пропорциях.

В некоторых преимущественных вариантах осуществления в источнике белка преобладает молочная сыворотка (т.е. более 50% белков происходят из сывороточных белков, например 60% или 70%).

Белки могут быть нативными или гидролизованными, либо они могут представлять собой смесь нативных и гидролизованных белков. Под термином «нативный» подразумевают, что основная часть белков является нативной, т.е. их молекулярная структура не изменена, например не изменено по меньшей мере 80% белков, например не изменено по меньшей мере 85% белков, предпочтительно не изменено по меньшей мере 90% белков, еще более предпочтительно не изменено по меньшей мере 95% белков, например не изменено по меньшей мере 98% белков. В конкретном варианте осуществления не изменено 100% белков.

Термин «гидролизованный» в контексте настоящего изобретения означает белок, который был гидролизован или расщеплен на составляющие его аминокислоты. Белки могут быть полностью или частично гидролизованными. Может быть желательным вводить частично гидролизованные белки (степень гидролиза от 2 до 20%), например младенцам или детям младшего возраста, предположительно подверженным риску развития аллергии на коровье молоко. При необходимости использования гидролизованных белков процесс гидролиза можно проводить по желанию и способом, известным в данной области. Например, гидролизаты сывороточного белка можно получать ферментативным гидролизом фракции молочной сыворотки в одну или более стадий. Если фракция молочной сыворотки, применяемая в качестве исходного материала, по существу, не содержит лактозы, то установлено, что в процессе гидролиза блокировка лизина белка проявляется в гораздо меньшей степени. Это позволяет снизить степень блокировки лизина с около 15 мас.% общего лизина до менее около 10 мас.% лизина; например до около 7 мас.% лизина, что значительно улучшает питательное качество источника белка.

В одном варианте осуществления изобретения гидролизовано по меньшей мере 70% белков, предпочтительно гидролизовано по меньшей мере 80% белков, например гидролизовано по меньшей мере 85% белков, еще более предпочтительно гидролизовано по меньшей мере 90% белков, например гидролизовано по меньшей мере 95% белков, в частности гидролизовано по меньшей мере 98% белков. В конкретном варианте осуществления гидролизовано 100% белков.

В одном конкретном варианте осуществления белки питательной композиции гидролизованы, полностью гидролизованы или частично гидролизованы. Степень гидролиза (DH) белка может составлять от 8 до 40, или от 20 до 60, или от 20 до 80, или более 10, 20, 40, 60, 80 или 90.

В альтернативном варианте осуществления белковый компонент может быть заменен смесью или искусственной аминокислотой, например для недоношенных младенцев или младенцев с низким весом при рождении.

В конкретном варианте осуществления питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет в соответствии с изобретением представляет собой гипоаллергенную композицию. В другом конкретном варианте осуществления композиция в соответствии с изобретением представляет собой гипоаллергенную питательную композицию или молочную смесь для детей от 1 до 3 лет.

Питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет в соответствии с настоящим изобретением обычно содержит источник углеводов. Это особенно предпочтительно в том случае, когда питательная композиция изобретения представляет собой детскую смесь. В этом случае можно применять любой источник углеводов, обычно находящийся в детских смесях, такой как лактоза, сахароза, сахароза, мальтодекстрин, крахмал и их смеси, хотя одним из предпочтительных источников углеводов является лактоза.

Питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет в соответствии с настоящим изобретением обычно содержит источник липидов. Это особенно важно, если питательная композиция настоящего изобретения представляет собой детскую смесь. В этом случае источником липидов может быть любой липид или жир, который подходит для применения в детских смесях. Некоторые подходящие источники жира включают пальмовое масло, структурированное триглицеридное масло, подсолнечное масло с высоким содержанием олеиновой кислоты и сафлоровое масло с высоким содержанием олеиновой кислоты, масло триглицерида средней цепи. Можно также добавлять незаменимые жирные кислоты — линолевую кислоту и α-линоленовую кислоту, а также небольшие количества масел, содержащих большие количества арахидоновой кислоты и докозагексаеновой кислоты в готовом виде, например рыбьи жиры или микробные масла. Соотношение n-6 и n-3 жирных кислот в источнике жира может составлять от около 5 : 1 до около 15 : 1; например от около 8 : 1 до около 10 : 1.

Питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет изобретения может также содержать все витамины и минеральные вещества, считающиеся обязательными в повседневном рационе питания, в значимых с точки зрения питания количествах. Для некоторых витаминов и минеральных веществ установлены минимальные требования. Примеры минеральных веществ, витаминов и других питательных веществ, которые необязательно присутствуют в композиции изобретения, включают витамин А, витамин В1, витамин В2, витамин В6, витамин В12, витамин Е, витамин К, витамин С, витамин D, фолиевую кислоту, инозит, ниацин, биотин, пантотеновую кислоту, холин, кальций, фосфор, йод, железо, магний, медь, цинк, марганец, хлор, калий, натрий, селен, хром, молибден, таурин и L-карнитин. Минеральные вещества обычно добавляют в форме солей. Присутствие и количества конкретных минеральных веществ и других витаминов будут варьироваться в зависимости от предполагаемой популяции.

Если это необходимо, питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет изобретения может содержать эмульгаторы и стабилизаторы, такие как соя, лецитин, моно- и диглицериловые сложные эфиры лимонной кислоты и т.п.

Питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет изобретения может также содержать другие вещества, которые могут оказывать благоприятное воздействие, такие как лактоферрин, нуклеотиды, нуклеозиды и т.п.

Питательная композиция или молочная смесь для детей от 1 до 3 лет изобретения может также содержать каротиноид (-ы). В некоторых конкретных вариантах осуществления изобретения питательная композиция изобретения не содержит каротиноидов.

Питательную композицию или молочную смесь для детей от 1 до 3 лет в соответствии с изобретением можно получать любым подходящим способом. Далее композиция будет описана на конкретном примере.

Например, смесь, такую как детская смесь, можно получать путем смешивания источника белка, источника углеводов и источника жира в соответствующих пропорциях. На данном этапе можно включать эмульгаторы в случае их применения. На данном этапе можно добавлять витамины и минеральные вещества, но обычно их добавляют позднее для предотвращения термического разложения. Перед смешиванием в источнике жира можно растворять любые липофильные витамины, эмульгаторы и т.п. Затем можно домешивать воду, предпочтительно очищенную обратным осмосом, с образованием жидкой смеси. Температура воды для удобства находится в диапазоне от около 50°С до около 80°С для облегчения диспергирования ингредиентов. Для образования жидкой смеси можно применять доступные в продаже разжижители.

На данном этапе можно добавлять фукозилированный (-ые) олигосахарид (-ы) и N-ацетилированный (-ые) олигосахарид (-ы), особенно если конечный продукт должен иметь жидкую форму. Если конечный продукт должен представлять собой порошок, эти компоненты при желании также можно добавлять на данной стадии.

Затем жидкую смесь гомогенизируют, например в две стадии.

Затем жидкую смесь можно термически обрабатывать для снижения бактериальной нагрузки путем быстрого нагрева жидкой смеси, например до температуры в диапазоне от около 80°C до около 150°C в течение периода времени от около 5 секунд до около 5 минут. Нагревание можно осуществлять путем нагнетания пара с помощью автоклава или теплообменника, например пластинчатого теплообменника.

Затем жидкую смесь можно охлаждать до температуры от около 60°C до около 85°C, например путем мгновенного охлаждения. Затем жидкую смесь можно снова гомогенизировать, например в две стадии: под давлением в диапазоне от около 10 МПа до около 30 МПа на первой стадии и от около 2 МПа до около 10 МПа на второй стадии. Затем гомогенизированную смесь можно дополнительно охлаждать для добавления любых термочувствительных компонентов, таких как витамины и минеральные вещества. На данном этапе для удобства регулируют рН и содержание твердых веществ в гомогенизированной смеси.

Если конечный продукт должен представлять собой порошок, гомогенизированную смесь переносят в подходящий сушильный аппарат, например в распылительную сушилку или сублимационную сушилку, и превращают в порошок. Влагосодержание порошка должно составлять менее около 5 мас.%. На данном этапе можно также или в качестве альтернативы добавлять фукозилированный (-ые) олигосахарид (-ы) и N-ацетилированный (-ые) олигосахарид (-ы) путем сухого смешивания или путем перемешивания их в форме сиропа из кристаллов вместе с пробиотическим (-ими) штаммом (-ами) (при использовании), и смесь подвергают распылительной сушке или сублимационной сушке.

Если предпочтительна жидкая композиция, гомогенизированную смесь можно стерилизовать, а затем асептически разливать в подходящие контейнеры, либо можно сначала разливать в контейнеры, а затем стерилизовать в автоклаве.

В другом варианте осуществления композиция изобретения может представлять собой добавку. Добавка может быть представлена, например, в форме таблеток, капсул, пастилок или жидкости. Добавка может дополнительно содержать защитные гидроколлоиды (такие как камеди, белки, модифицированные крахмалы), связующие вещества, пленкообразующие агенты, инкапсулирующие агенты/материалы, материалы стенок/оболочек, соединения матриц, покрытия, эмульгаторы, поверхностно-активные вещества, солюбилизирующие агенты (масла, жиры, воски, лецитины и т.п.), адсорбенты, носители, наполнители, вспомогательные соединения, диспергирующие агенты, увлажняющие агенты, технологические добавки (растворители), антислеживающие агенты, маскирующие вкус агенты, утяжеляющие агенты, желирующие агенты и гелеобразующие агенты. Добавка также может содержать традиционные фармацевтические добавки и вспомогательные вещества, эксципиенты и разбавители, включая, без ограничений, воду, желатин любого происхождения, растительные камеди, лигнинсульфонат, тальк, сахара, крахмал, гуммиарабик, растительные масла, полиалкиленгликоли, ароматизирующие агенты, консерванты, стабилизаторы, эмульгирующие агенты, буферы, смазывающие вещества, красители, увлажняющие агенты, наполнители и т.п.

Дополнительно добавка может содержать органический или неорганический материал-носитель, подходящий для перорального или парентерального введения, а также витамины, минеральные микроэлементы и другие микроэлементы в соответствии с рекомендациями государственных органов, такими как рекомендуемые нормы потребления (RDA) США.

Питательную композицию настоящего изобретения можно также применять у младенцев или детей младшего возраста, рожденных посредством кесарева сечения или посредством вагинальных родов.

В некоторых вариантах осуществления композиция в соответствии с изобретением может быть предназначена для применения до и/или во время периода отлучения от груди.

Возраст для введения (или применения) питательной композиции или вскармливания ей, а также продолжительность такого введения зависят от потребностей.

Питательную композицию можно, например, давать младенцам сразу же после рождения. Композицию изобретения также можно давать в течение первой недели жизни младенца, или в течение первых 2 недель жизни, или в течение первых 3 недель жизни, или в течение первого месяца жизни, или в течение первых 2 месяцев жизни, или в течение первых 3 месяцев жизни, или в течение первых 4 месяцев жизни, или в течение первых 6 месяцев жизни, или в течение первых 8 месяцев жизни, или в течение первых 10 месяцев жизни, или в течение первого года жизни, или в течение первых двух лет жизни, или даже дольше. В некоторых особенно преимущественных вариантах осуществления изобретения питательную композицию дают (или вводят) младенцу в течение первых 4, 6 или 12 месяцев после рождения указанного младенца. В некоторых других вариантах осуществления питательную композицию изобретения дают в течение нескольких дней (например, 1, 2, 3, 5, 10, 15, 20 и т.д.), или нескольких недель (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 и т.д.), или нескольких месяцев (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 и т.д.) после рождения. В первую очередь это может быть актуально, но не обязательно, в том случае, когда младенец родился преждевременно.

В одном варианте осуществления композицию изобретения дают младенцу или ребенку младшего возраста в качестве композиции, добавочной по отношению к материнскому молоку. В некоторых вариантах осуществления изобретения младенец или ребенок младшего возраста получает материнское молоко в течение по меньшей мере первых 2 недель, первых 1, 2, 4 или 6 месяцев. В одном варианте осуществления питательную композицию изобретения дают младенцу или ребенку младшего возраста после такого периода питания материнским молоком или дают во время такого периода питания материнским молоком. В другом варианте осуществления изобретения композицию дают младенцу или ребенку младшего возраста в качестве единственной или основной питательной композиции в течение по меньшей мере одного периода времени, например после 1-го, 2-го или 4-го месяца жизни, в течение по меньшей мере 1, 2, 4 или 6 месяцев.

В одном варианте осуществления питательная композиция изобретения является полной питательной композицией (удовлетворяющей все или большинство потребностей субъекта в питании). В другом варианте осуществления питательная композиция представляет собой добавку или обогатитель, предназначенные, например, для дополнения человеческого грудного молока или для дополнения детской смеси или смеси для прикармливаемых детей/смеси последующего уровня.

Все патентные и непатентные ссылки, цитируемые в настоящей заявке, настоящим полностью включены путем ссылки.

Настоящее изобретение будет дополнительно подробно описано в представленных ниже примерах, не имеющих ограничительного характера.

Примеры

Пример 1

Ниже в таблице 1 приведен пример состава питательной композиции (например, детской смеси) в соответствии с настоящим изобретением. Эта композиция приведена исключительно в качестве иллюстрации.

Таблица 1. Состав детской смеси согласно примеру 1

Питательные вещества		на 100 ккал	на литр
Энергетическая ценность (ккал)		100	670
Белок (г)		1,83	12,3
Жир (г)		5,3	35,7
Линолевая кислота (г)		0,79	5,3
α-Линоленовая кислота (мг)		101	675
Лактоза (г)		11,2	74,7
Минеральные вещества (г)		0,37	2,5
Na (мг)		23	150
K (мг)		89	590
Cl (мг)		64	430
Ca (мг)		62	410
P (мг)		31	210
Mg (мг)		7	50
Mn (мкг)		8	50
Se (мкг)		2	13
Витамин A (мкг РЭ)		105	700
Витамин D (мкг)		1,5	10
Витамин E (мг, ТЭ)		0,8	5,4
Витамин K1 (мкг)		8	54
Витамин С (мг)		10	67
Витамин В1 (мг)		0,07	0,47
Витамин В2 (мг)		0,15	1,0
Ниацин (мг)		1	6,7
Витамин В6 (мг)		0,075	0,50
Фолиевая кислота (мкг)		9	60
Пантотеновая кислота (мг)		0,45	3
Витамин B12 (мкг)		0,3	2
Биотин (мкг)		2,2	15
Холин (мг)		10	67
Fe (мг)		1,2	8
I (мкг)		15	100
Cu (мг)		0,06	0,4
Zn (мг)		0,75	5
Олигосахариды (ОГМ)	6’SL (г)	0,035	0,24
	LNT (г)	0,07	0,45

Пример 2

Принцип проведения анализа

Был проведен скрининг шести олигосахаридов грудного молока (LNnT, LNT, 2’FL, diFL, 6’SL и 3’SL) на их способность активировать рецептор GPR35 в анализе in vitro. Скрининг проводился на приборе DiscoverX (г. Фримонт, Калифорния, США) с использованием аналитической системы PathHunter с β-аррестином. В рамках этого анализа прослеживают активацию GPR35, экспрессируемого в культивируемых клетках, с использованием комплементации фрагментов фермента с β-галактозидазой (β-Gal) в качестве функционального репортера. Фермент разделяют на две неактивные комплементарные части, EA и PK, экспрессируемые в клетке в виде гибридных белков. EA слит с β-аррестином, а PK слит с GPR35. Если GPR35 активируется и β- аррестин рекрутируется на рецепторе, осуществляется комплементация PK и EA с восстановлением активности β- Gal, которую измеряют с помощью хемилюминесцентных детектирующих реагентов.

Способы

Клеточную линию GPR35 размножали из исходных замороженных культур и культивировали в соответствии со стандартными процедурами. Клетки высевали в общем объеме 20 мкл в 384- луночные микропланшеты с белыми стенками и инкубировали при 37°C в течение необходимого времени до тестирования. Все тесты проводили в двух повторностях.

Пробы ОГМ доставляли в DiscoverX в виде концентрированных маточных растворов в фосфатно-солевом буфере (PBS). В день проведения теста готовили 5-кратный рабочий раствор промежуточного соединения в PBS. К клеткам добавляли объем 5 мкл 5-кратной пробы и инкубировали при комнатной температуре в течение 3–5 часов.

Аналитический сигнал получали посредством однократного добавления 12,5 мкл (50% об./об.) смеси детектирующих реагентов PathHunter с последующей инкубацией в течение одного часа при комнатной температуре. Показания с микропланшетов регистрировали после получения сигнала на приборе PerkinElmer EnvisionTM для обнаружения хемилюминесцентных сигналов.

В качестве положительного контроля использовали запринаст (который известен как активатор GPR35).

Активность в процентах рассчитывали по следующей формуле:

Активность в % = 100% x (среднее RLU исследуемой пробы - среднее RLU контроля несущей средой) / (среднее максимальное значение для контрольного лиганда - среднее RLU контроля несущей средой).

Графики «доза — отклик» строили с помощью итеративных 3-кратных разведений самой высокой исследуемой концентрации (10 мМ).

Выводы

LNT активировала GPR35 со значением EC50, равным 4,5 мМ (фиг. 1). 6’SL активировала GPR35 со значением EC50, равным 6,5 мМ (фиг. 2). Для 3’SL, 2’FL, diFL и LNnT активации GPR35 не получали.

Поскольку было обнаружено, что LNT и 6’SL являются активаторами, эти два ОГМ тестировали в комбинации. Эквимолярная смесь 6’SL и LNT активировала GPR35 со значением EC50, равным 2,2 мМ (фиг. 3). Эти результаты демонстрируют синергию между 6’SL и LNT.

Было также проведено тестирование смеси всех шести ОГМ в эквимолярном соотношении с получением таких же результатов, как для комбинации LNT и 6’SL. Эти результаты демонстрируют, что синергетический эффект LNT и 6’SL сохраняется даже при смешивании с другими олигосахаридами грудного молока.

Заключение

В целом представленные данные показывают синергетический эффект комбинации 6'SL и LNT на активацию рецептора GPR35. Этот синергетический эффект сохраняется даже при смешивании с другими олигосахаридами грудного молока. Как указано выше, активация рецептора GPR35 связана с улучшением кишечного барьера.

Пример 3

Следующие испытания были проведены путем расщепления LNT и 6’SL и использования расщепленного материала для проведения анализа активации GPR35, чтобы валидировать результаты испытания из примера 2.

Расщепление LNT β-галактозидазой

LNT расщепляли β-галактозидазой, очищенной из аспергилла черного (Megazyme, ref: E-AGLAN), используя следующий протокол: в пробирке емкостью 1,5 мл с внешней резьбой и навинчиваемой крышкой смешивали 84 мг LNT в 900 мкл 100 мМ ацетатного буфера (pH 4,5) и 100 мкл фермента (400 Ед.). Эту пробирку инкубировали в течение 72 ч при 55°C в шейкере ThermoMix со скоростью перемешивания 450 об/мин. Инактивацию фермента проводили путем термообработки в течение 5 минут при 100°C. Инактивированную пробирку хранили при -20°C до дальнейшего анализа.

Расщепление 6’SL нейраминидазой

6’SL расщепляли нейраминидазой, очищенной из энтеритной клостридии (Megazyme, ref: E-SIALCP), используя следующий протокол: в пробирке емкостью 1,5 мл с внешней резьбой и навинчиваемой крышкой смешивали 78 мг 6’SL в 900 мкл 50 мМ фосфатного буфера (pH 6,0) и 50 мкл фермента (50 Ед.). Эту пробирку инкубировали в течение 72 ч при 37°C в шейкере ThermoMix со скоростью перемешивания 450 об/мин. Инактивацию фермента проводили путем термообработки в течение 5 минут при 100°C. Инактивированную пробирку хранили при -20°C до дальнейшего анализа.

Контроль расщеплений

Авторы подтверждали полное расщепление LNT и 6’SL путем их количественной оценки методом высокоэффективной анионообменной хроматографии c импульсным амперометрическим детектированием (ВЭАОХ-ИАД). Результаты этого анализа представлены на фиг. 4. Пики четко подтверждают полное расщепление как LNT, так и 6’SL.

Подготовка проб, исследуемые пробы и результаты

Пробы разводили в 1-кратном PBS (pH ~ 7) в 5-кратной концентрации и отправляли в DiscoverX. Анализ активации GPR35 проводили, как описано в примере 2. Результаты представлены на фиг. 5. Реакция GPR35 на расщепленную и нерасщепленную смесь LNT и 6’SL показала отклик с нерасщепленной смесью и фоновый отклик на расщепленную смесь, продемонстрировав таким образом специфичность реакции GPR35 на LNT и 6’SL.

Claims (16)

1. Применение питательной композиции, содержащей 6'-сиалиллактозу (6'SL) и лакто-N-тетраозу (LNT), для улучшения барьера желудочно-кишечного тракта у младенца, который представляет собой ребёнка в возрасте до 12 месяцев, ребёнка младшего возраста, который представляет собой ребёнка в возрасте от 1 года до менее 3 лет, или у ребёнка в возрасте от 3 лет до менее 8 лет, причём указанное улучшение барьера желудочно-кишечного тракта представляет собой улучшенную структуру барьера и/или улучшенную защиту барьера.

2. Применение питательной композиции по п. 1, причём указанное улучшение барьера желудочно-кишечного тракта также представляет собой улучшенное восстановление целостности барьера желудочно-кишечного тракта, такое как репарация разорванного барьера, снижение проницаемости после воспалительной провокации слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта и репарация слизистой оболочки.

3. Применение питательной композиции по любому из предшествующих пунктов, причём указанное применение также представляет собой усиление барьера желудочно-кишечного тракта, повышение сопротивляемости барьера желудочно-кишечного тракта, снижение восприимчивости к заболеваниям, уменьшение тяжести симптомов после воспалительной провокации слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта и/или снижение проницаемости барьера желудочно-кишечного тракта.

4. Применение питательной композиции по п. 3, причём указанное снижение проницаемости барьера желудочно-кишечного тракта обусловливает уменьшение количества патогенов, аллергенов и/или токсичных соединений, мигрирующих из кишечника в организм через кишечный барьер.

5. Применение питательной композиции по любому из предшествующих пунктов, причём питательная композиция дополнительно содержит один или более ОГМ и/или один или более их предшественников, например, выбранных из группы, состоящей из LNnT, 2'FL, diFL и 3'SL.

6. Применение питательной композиции по любому из предшествующих пунктов, причём питательная композиция дополнительно содержит один или более ОГМ, выбранных из группы, состоящей из LNnT, 2'FL, diFL и 3'SL; например содержащая два или более ОГМ, выбранных из группы, состоящей из LNnT, 2'FL, diFL и 3'SL, например три или более ОГМ, выбранных из группы, состоящей из LNnT, 2'FL, diFL и 3'SL, например дополнительно содержащей все из LNnT, 2'FL, diFL и 3'SL.

7. Применение питательной композиции по любому из предшествующих пунктов, причём питательная композиция подобрана по составу для введения младенцу.

8. Применение питательной композиции по п. 7, причём указанный младенец выбран из группы, состоящей из преждевременно родившихся, маленьких для своего гестационного возраста и детей с низким весом при рождении, предпочтительно младенец является преждевременно родившимся.

9. Применение питательной композиции по любому из предшествующих пунктов, причём в питательной композиции 6’SL и LNT присутствуют в массовом соотношении 6’SL : LNT от 3 : 1 до 1 : 3, например от 2 : 1 до 1 : 2 или от 2 : 1 до 1 : 1.

10. Применение питательной композиции по любому из предшествующих пунктов, причём в питательной композиции 6’SL присутствует в количестве от 0,005 до 5 г/л или от 0,004 до 3,8 г/100 г композиции в расчёте на массу сухого вещества.

11. Применение питательной композиции по любому из предшествующих пунктов, причём в питательной композиции LNT присутствует в количестве 0,005–3 г/л или 0,004–2,3 г/100 г композиции в расчёте на массу сухого вещества.

12. Применение питательной композиции для применения по любому из предшествующих пунктов, причём в питательной композиции:

a. 6’SL присутствует в количестве 0,24 или 0,05 г/л композиции или в количестве 0,18 или 0,04 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества; и/или

b. LNT присутствует в количестве 0,5 г/л или 0,1 г/л композиции или в количестве 0,38 г/100 г композиции или 0,08 г/100 г композиции в расчете на массу сухого вещества.

13. Применение питательной композиции по любому из предшествующих пунктов, причём указанная питательная композиция представляет собой детскую смесь, начальную детскую смесь, детскую смесь для прикармливаемых детей или детскую смесь последующего уровня, молочную смесь для детей от 1 до 3 лет, детское питание, детскую композицию на зерновой основе, обогатитель или добавку и предназначена для введения младенцу или ребёнку младшего возраста.

14. Применение питательной композиции по пп. 1-6, 9-12, причём указанная питательная композиция представляет собой питательную композицию в форме молочной смеси для детей от 1 до 3 лет и предназначена для введения ребёнку в возрасте от 3 лет до менее 8 лет.