RU2804841C1 - Способ получения каллусной культуры цикория (Cichorium intybus L.) - Google Patents
Способ получения каллусной культуры цикория (Cichorium intybus L.) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2804841C1 RU2804841C1 RU2023113033A RU2023113033A RU2804841C1 RU 2804841 C1 RU2804841 C1 RU 2804841C1 RU 2023113033 A RU2023113033 A RU 2023113033A RU 2023113033 A RU2023113033 A RU 2023113033A RU 2804841 C1 RU2804841 C1 RU 2804841C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- callus tissue
- chicory
- nutrient medium
- inulin
- callus
- Prior art date
Links
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 title claims abstract description 66
- 244000298479 Cichorium intybus Species 0.000 title claims abstract description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 235000007542 Cichorium intybus Nutrition 0.000 title claims abstract description 25
- 241000723343 Cichorium Species 0.000 title claims abstract 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 30
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims abstract description 15
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims abstract description 7
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 23
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 9
- 230000009772 tissue formation Effects 0.000 claims description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 claims 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 abstract description 32
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 abstract description 32
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 abstract description 31
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 32
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 239000006870 ms-medium Substances 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NWBJYWHLCVSVIJ-UHFFFAOYSA-N N-benzyladenine Chemical compound N=1C=NC=2NC=NC=2C=1NCC1=CC=CC=C1 NWBJYWHLCVSVIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 239000005631 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid Substances 0.000 description 3
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 3
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 3
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 3
- 240000008892 Helianthus tuberosus Species 0.000 description 3
- 235000003230 Helianthus tuberosus Nutrition 0.000 description 3
- 244000017020 Ipomoea batatas Species 0.000 description 3
- 235000002678 Ipomoea batatas Nutrition 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 235000019605 sweet taste sensations Nutrition 0.000 description 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 244000003416 Asparagus officinalis Species 0.000 description 2
- 235000005340 Asparagus officinalis Nutrition 0.000 description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000116484 Inula helenium Species 0.000 description 2
- 235000002598 Inula helenium Nutrition 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 240000001949 Taraxacum officinale Species 0.000 description 2
- 235000005187 Taraxacum officinale ssp. officinale Nutrition 0.000 description 2
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 2
- 244000078534 Vaccinium myrtillus Species 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- RCTYPNKXASFOBE-UHFFFAOYSA-M chloromercury Chemical compound [Hg]Cl RCTYPNKXASFOBE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000008645 cold stress Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 2
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 2
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 2
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 2
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 2
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 2
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 2
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- ZFTFOHBYVDOAMH-XNOIKFDKSA-N (2r,3s,4s,5r)-5-[[(2r,3s,4s,5r)-5-[[(2r,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxymethyl]-3,4-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxymethyl]-2-(hydroxymethyl)oxolane-2,3,4-triol Chemical class O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@](CO)(OC[C@@H]2[C@H]([C@H](O)[C@@](O)(CO)O2)O)O1 ZFTFOHBYVDOAMH-XNOIKFDKSA-N 0.000 description 1
- PRPINYUDVPFIRX-UHFFFAOYSA-N 1-naphthaleneacetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CC=CC2=C1 PRPINYUDVPFIRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000283070 Abies balsamea Species 0.000 description 1
- 235000007173 Abies balsamea Nutrition 0.000 description 1
- 241001334784 Aconitum barbatum Species 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930192334 Auxin Natural products 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000723367 Conium maculatum Species 0.000 description 1
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002670 Fructan Polymers 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004378 Glycyrrhizin Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 240000001140 Mimosa pudica Species 0.000 description 1
- 235000016462 Mimosa pudica Nutrition 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 1
- QFVOYBUQQBFCRH-UHFFFAOYSA-N Steviol Natural products C1CC2(C3)CC(=C)C3(O)CCC2C2(C)C1C(C)(C(O)=O)CCC2 QFVOYBUQQBFCRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000006754 Taraxacum officinale Nutrition 0.000 description 1
- 235000006468 Thea sinensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000017537 Vaccinium myrtillus Nutrition 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 230000036579 abiotic stress Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 238000012271 agricultural production Methods 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 230000019552 anatomical structure morphogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- 239000002363 auxin Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 244000038559 crop plants Species 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000000295 emission spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000009313 farming Methods 0.000 description 1
- 235000013341 fat substitute Nutrition 0.000 description 1
- 239000003778 fat substitute Substances 0.000 description 1
- 229930182479 fructoside Natural products 0.000 description 1
- 150000008132 fructosides Chemical class 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N glycyrrhetinic acid glycoside Natural products C1CC(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004949 glycyrrhizic acid Drugs 0.000 description 1
- UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N glycyrrhizic acid Natural products CC1(C)C(CCC2(C)C1CCC3(C)C2C(=O)C=C4C5CC(C)(CCC5(C)CCC34C)C(=O)O)OC6OC(C(O)C(O)C6OC7OC(O)C(O)C(O)C7C(=O)O)C(=O)O UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000007407 health benefit Effects 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 230000008991 intestinal motility Effects 0.000 description 1
- 208000002551 irritable bowel syndrome Diseases 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002523 mercuric chloride Drugs 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- 229930015704 phenylpropanoid Natural products 0.000 description 1
- 125000001474 phenylpropanoid group Chemical group 0.000 description 1
- 229930000223 plant secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 description 1
- 102200076864 rs869312138 Human genes 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- QFVOYBUQQBFCRH-VQSWZGCSSA-N steviol Chemical compound C([C@@]1(O)C(=C)C[C@@]2(C1)CC1)C[C@H]2[C@@]2(C)[C@H]1[C@](C)(C(O)=O)CCC2 QFVOYBUQQBFCRH-VQSWZGCSSA-N 0.000 description 1
- 229940032084 steviol Drugs 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 235000021092 sugar substitutes Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 235000019587 texture Nutrition 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения каллусной ткани цикория (Cichorium intybus L.). Это достигается за счет использования питательной среды Мурасига и Скуга, в состав которой добавляют 7,5 мг/л НУК и 1,0 мг/л препарата Эпин и культивируют при освещении светодиодными лампами красного и синего спектра в соотношении 30% и 70% соответственно, при температуре 23-25°С и 16-часовом световом дне. Изобретение позволяет повысить содержание инулина в каллусной культуре до 15%. 4 ил., 2 табл., 3 пр.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии, к культивированию in vitro каллусных культур цикория (Cichorium intybus L.), содержащих инулин, который может быть использован в пищевой промышленности для получения сырья (инулин) вне зависимости от сезона выращивания растительного материала.
Одним из направлений научных исследований является создание новых форм, гибридов и сортов сельскохозяйственных растений, обладающих повышенной продуктивностью. Особый интерес представляют исследования, направленные на получение растений, обладающих высоким биосинтетическим потенциалом накапливать минеральные и органические соединения, витамины, вещества фенольной природы и др., которые оказывают благоприятное действие на организм как человека, так и животных [Калашникова, Е.А. Клеточная инженерия растений. Учебник, практикум. / Е.А. Калашникова. - М.: Москва, Юрайт.2020, - 324 с.]. Вторичные соединения, обладающие сладким вкусом, принадлежат к очень разным химическим классам, например, лактонам и фенольным соединениям, флавоноидам, терпеноидам и сапонинам, а также белкам. Только несколько натуральных молекул со сладким вкусом (глициризин, стевиол) в настоящее время имеют более широкое применение, что объясняется трудоемкими условиями культивирования, поскольку растениям требуются особые условия для их роста, или отсутствием простых методов для выделения соединений. Кроме того, в большинстве случаев отсутствует объяснение молекулярных механизмов, которые запускают способы биосинтеза и накопления соединений в интактных растениях [Калашникова, Е.А., Основы биотехнологии. / Е.А. Калашникова, М.Ю. Чередниченко, Р.Н. Киракосян. М.: Москва, КноРус. 2022, - 277 с.]. Таким образом, многие принципиально интересные природные вторичные растительные метаболиты со сладким вкусом в настоящее время имеют ограниченную ценность для рынка. Поскольку ожидается, что мировой рынок метаболитов сладкого вкуса значительно вырастет в течение следующих нескольких лет, необходимо расширить знания о регуляции систем биосинтеза и продукции посредством дополнительных исследований и разработать метод, гарантирующий высокий выход соответствующих продуктов - метаболитов.
Особый интерес, в последнее время, привлекают растения, способные образовывать в тканях инулин - природный полисахарид не имеющий синтетических аналогов. Он содержится более чем в 3000 растениях, преимущественно в их корнях и клубнях, среди которых выделяются цикорий (Cichorium intybus L.), топинамбур (Helianthus tuberosus L.), батат (Ipomoea batatas L.), девясил (Inula helenium L.), спаржа (Asparagus officinalis L.), одуванчик (Taraxacum officinale Wigg.) и другие растения.
Инулин используют в качестве пребиотика, заменителя жира, сахара, модификатора текстуры, а также для разработки функциональных пищевых продуктов с целью улучшения работы ЖКТ. По литературным данным инулин играет превентивную роль в отношении желудочно-кишечных осложнений, таких как запоры и многие заболевания желудочно-кишечного тракта, особенно заболевания раздраженного кишечника и рак толстой кишки, а также улучшает перистальтику кишечника. Кроме того, потребление инулина усиливает усвоение кальция, магния и железа и стимулирует иммунную систему [Shoaib, М. Inulin: Properties, health benefits and food applications. / Shoaib M., Shehzad A., Omar M., Rakha A., Raza H., Sharif H.R., Shakeel A., Ansari A., Niazi S. // Carbohydr. Polym. - 2016, - 147, - 444-454.]. Исследования in vitro показали, что инулин обладает активностью по удалению радикалов и способностью восстанавливать железо, хотя они слабее, чем витамин С. Кроме того, исследования кур-несушек in vivo показали, что пищевые добавки с инулином значительно улучшили антиоксидантный статус этих птиц [Shang, Н.М. In vitro and in vivo antioxidant activities of inulin / Shang, H.M., Zhou H.Z., Yang J.Y., Li R., Song H., Wu -H.X // PLoS ONE, - 2018, - 13, - 19-22.]. Поэтому природные источники инулина имеют большую ценность, обладая пользой для здоровья человека.
Анализ состояния рынка показывает, что, как правило, в производстве функциональных продуктов питания, Российские производители используют импортный инулин, полученный из цикория (производитель - Германия, Бельгия). Однако все больший удельный вес по объемам производства в мире занимает инулин, выделенный из клубней топинамбура (производитель - Китай). В настоящее время глобализация и информационная революция обострили существенные проблемы мировой экономики, что привело к импортозамещению ряда товаров и продуктов. Поэтому необходимо получать свою конкурентоспособную продукцию высокого качества. Данное направление приобретает особую актуальность и для производства продуктов питания функционального и диетического назначения.
В отличие от основных продовольственных культур, инулинсодержащие растения, в основном, дают сравнительно высокий урожай в относительно теплых климатических условиях. Среди абиотических стрессов известно, что холодовой стресс является одним из основных факторов окружающей среды, ограничивающих сельскохозяйственное производство, вызывая ущерб до и после сбора урожая, что ежегодно приводит к огромным финансовым потерям в сельском хозяйстве. Холодовой стресс также оказывает огромное влияние на выживание и географическое распространение растений. Стандартные методы селекции демонстрируют ограниченный успех в создании устойчивых к холоду сельскохозяйственных растений, поскольку для большинства чувствительных к холоду растений существует потребность в межвидовой или даже межродовой гибридизации. Поэтому выращивание инулинсодержащих растений (цикорий, батат) в условиях рискового земледелия имеет свои ограничения.
Развитие клеточных и генетических технологий in vitro, используемых для производства биологически активных веществ (БАВ) из растений, являются перспективными подходами к выполнению принципов «зеленых» технологий. Данные технологии являются экологически безвредными по сравнению с традиционными способами производства и помогают грамотно управлять ресурсами и снижать негативную нагрузку на природу.
Производство БАВ in vitro, как правило, осуществляется из микроклонов или дедифференцированных каллусных культур. Такие технологии позволяют экономить производственные площади, проводить работы в течение года и не зависеть от внешних условий выращивания. Главным преимуществом таких технологий является возможность управления биосинтетическим потенциалом растений и дедифференцированных каллусных культур в условиях in vitro, получать штаммы и линии суперпродуцентов вторичных метаболитов. Данный процесс зависит от генетических, биохимических и физиологических особенности растений, а также от условий выращивания.
Известен способ получения каллусной ткани чая (Camellia sinensis L.), включающий выращивание каллусов на питательной среде, содержащей макро- и микросоли по прописи Хеллера, витамины по Уайту, аденин в концентрации 5 мг/л, 2,4-Д - 5 мг/л, глюкозу - 25 г/л, агар - 7 г/л, при 26°С, с последующим переносом клеток в жидкую питательную среду того же состава с добавлением L-фенилаланина в концентрации 3 мМ и выращиванием при относительной влажности воздуха 70% на качалке с частотой 90 об/мин в условиях темноты 14 суток [RU 2 709 692 C1, А01Н 4/00, опубликовано 04.05.2019 г.]. Способ позволяет получать клеточные культуры с высокой способностью накапливать фенилпропаноиды. Недостатком предлагаемого способа является смена среды - твердой (агаризованной) на жидкую (суспензия), что делает данную технологию более трудоемкой.
Известен способ получения каллусной ткани из листовых пластинок асептических растений черники обыкновенной (Vaccinium myrtillus L.), включающий культивирование листовых эксплантов на агаризованной питательной среде Woody Plant Medium (WPM), содержащей a-нафтилуксусную кислоту - 0.5 мг/л и 6-бензиламинопурин - 0.5 мг/л. Каллусную ткань выращивают при освещении лампами дневного света Philips TL-D 36W, 2000-5000 люкс, или за счет освещения фитолампами Osram fluora L36W/77, 2000-5000 люкс. Пересадку каллусной ткани на свежую питательную среду проводят каждые 4-6 недель [RU 2 709 175 С1, C12N 5/04, опубликовано 16.12.2019 г.]. Способ позволяет получать клеточные культуры способные накапливать фенольные соединения, в частности, флаваноиды. Недостатком предлагаемого способа является нестабильный выход фенольных соединений в конце цикла культивирования.
Известны способы получения каллусной ткани из семян болиголова (Conium maculatum L.) [RU 2590586 C1, C12N 5/04; A01H 5/10, опубликован 10.07.2016 г.] и борца (Aconitum barbatum Patr. ex Pers.) [RU 2631927 C1, C12N 5/04, опубликован 28.09.2017 г.], включающие стерилизацию семян в спирте и сулеме, помещение их на питательную среду Мурасиге-Скуга для образования этиолированных проростков, выращивание проростков на питательной среде Мурасиге-Скуга (МС) с гормонами 2,4-Д и БАП для получения и дальнейшего культивирования каллусов. Пролиферацию каллусной ткани осуществляли на среде, содержащей НУК в сочетании БАП. Способы направлены на получение каллусной ткани, способной накапливать алкалоиды и терпеноиды. Недостатком этих способов является использование довольно токсичного агента - сулемы, а также смена гормонального состава питательной среды для культивирования каллусов, что делает технологию более трудоемкой.
Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому способу, взятом за прототип, относится способ получения каллусной ткани цикория (Cichorium intybus L.) из листовых пластинок асептических растений, культивирование на питательной среде МС, содержащей 7,5 мг/л НУК в сочетании с 2,0 мг/л БАП [Калашникова Е.А., Киракосян Р.Н., Темирбекова С.К., Мелешина О.В., Афанасьева Ю.В., Тареева М.М. Получение клеточных культур cichorium intybus 1. in vitro как источника инулина // Вестник российской сельскохозяйственной науки. - 2022. - №1. - С. 37-41]. Недостатком данного способа является получение каллусной ткани из листовых пластинок, в которых инулин содержится в небольших количества, а следовательно в клеточных культурах его содержание минимально.
В результате анализа литературных данных и патентного поиска установлено, что исследования направлены на применение разных способов определения инулина только в интактных растениях, а не в каллусной ткани. Следовательно, необходимо разработать способ, позволяющий снизить трудоемкость культивирования каллусной ткани цикория посредством использования одного варианта питательной среды и условий культивирования, позволяющих получать инулин в необходимом количестве.
Задача предлагаемого изобретения - разработать способ получение каллусной культуры Cichorium intybus L. in vitro, богатой фруктанами, в частности, инулином. Техническим результатом от использования предлагаемого изобретения является накопление инулина в каллусной ткани цикория in vitro.
Указанная проблема и заявленный технический результат достигается за счет того, что каллусную культуру получают из сегментов корней 30-суточных асептических растений цикория, путем культивирования на питательной среде, содержащей минеральные соли по прописи Мурасига и Скуга (МС) [Murashige Т., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures // Physiol. Plant. - 1962. - vol. 5, 95 - P. 473-497], а также 7,5 мг/л НУК, 1 мг/л препарат Эпин.
Выращивают в условиях освещения светодиодными лампами красного и синего спектра в соотношении 30% и 70% соответственно в течение всего цикла культивирования, при температуре 23-25°С и 16 -часовом фотопериоде.
Известных в научно-технической и патентной литературе способов с использованием корневых эксплантов и аналогичным составом питательной среды и условий выращивания не обнаружено. Результат, полученный у данного решения и обусловленный применением питательной среды для получения каллусной ткани in vitro для других инулинсодержащих растений не достигался в известных решениях.
Конкретный пример осуществления предлагаемого способа.
Для получения культуры in vitro цикория (С.intybus L.) использовали семена элитной репродукции сорта Петровский (урожай 2019 г.), селекции Ростовской опытной станции. Семена стерилизуют 0.1% раствором HgCl2 (сулема) в течение 7 мин, трижды промывают стерильной дистиллированной водой и высевают в чашки Петри диаметром 90 мм на агаризованную МС-среду без добавления регуляторов роста. рН МС-среды доводят до 5,8 перед автоклавированием. Чашки Петри помещают на стеллажи под белые линейнолюминесцентные лампы (интенсивность освещения 150 мкмоль/м2 с) и проращивают при температуре 23-25°С и 16-часовом световом дне. Полученные 16-дневные проростки пересаживают в культуральные сосуды объемом 200 мл на питательную среду, содержащую минеральные соли по прописи МС, 1,0 мг/л препарат Эпин и 0,1 мг/л ИУК для формирования асептических растений с правильной морфологией.
Каллусную ткань получают из сегментов корней, изолированных с 30-дневных асептических растений цикория, на питательной среде, содержащей минеральные соли по прописи МС, дополненной препаратом Эпин в концентрации 1,0 мг/л в сочетании с НУК 7,5 мг/л, выращивают каллусную культуру в чашках Петри (диаметром 90 мм) при освещении белыми линейнолюминесцентными лампами (интенсивность освещения 150 мкмоль/м с) и 16-часовом световом дне в течение первого цикла выращивания. Каждые 4 недели каллусную ткань пересаживают на свежую питательную среду. Последующие циклы культивирования, каллусную ткань выращивают в условиях освещения светодиодами красного и синего спектра в соотношении 30% к 70% соответственно при температуре 23-25°С, и 16-часовом фотопериоде.
Изобретение проиллюстрировано на рисунках.
На фиг. 1 каллусная ткань С.intybus, полученная из корневых эксплантов на питательной среде с ИУК
На фиг. 2 каллусная ткань С.intybus, полученная из корневых эксплантов на питательной среде с НУК
На фиг. 3 каллусная ткань С.intybus, полученная из корневых эксплантов на МС-среде с добавлением препарата Эпин 1,0 мг/л в сочетании с 7,5 мг/л НУК при освещении светодиодными лампами с красным спектром 70% и синим спектром 30%
На фиг. 4 каллусная ткань С.intybus, полученная из корневых эксплантов на МС-среде с добавлением препарата Эпин 1,0 мг/л в сочетании с 7,5 мг/л НУК при освещении светодиодными лампами с красным спектром 30% и синим спектром 70%
Пример 1. Для получения культуры in vitro цикория (С.intybus L.) использовали семена элитной репродукции сорта Петровский (урожай 2019 г.), селекции Ростовской опытной станции.
Семена цикория сорта Петровский (селекции Ростовской опытной станц) стерилизовали 0,1%) раствором HgCl2 в течение 7 мин, трижды промывали стерильной дистиллированной водой и высевали в чашки Петри диаметром 90 мм на агаризованную питательную среду МС без добавления регуляторов роста. рН среды МС доводили до 5,8 перед автоклавированием. Проращивали семена в условиях световой комнаты, где поддерживалась температура 23-25°С и 16-часовой световой день. Для получения растений с правильной морфологией 16-дневные проростки пересаживали в культуральные сосуды объемом 200 мл на питательную среду МС, дополненную препаратом Эпин в концентрации 1,0 мг/л и 0,1 мг/л ИУК.
Каллусную ткань получали из сегментов корней, изолированных с 30-дневных асептических растений цикория, на питательной среде, содержащей минеральные соли по прописи МС, дополненной препаратом Эпин в концентрации 1,0 мг/л в сочетании с различными ауксинами НУК, ИУК и 2,4-Д в концентрации 5,5-9,5 мг/л. Каждые 4 недели каллусную ткань пересаживали на свежую питательную среду. При этом учитывали структуру и цвет каллусной ткани. Интенсивность роста каллусной ткани определяли по ее массе (мг). Для этого осуществляли взвешивание ткани в условиях ламинар-бокса в начале и в конце цикла выращивания. На основании полученных результатов вычисляли прирост каллусной культуры на 28 сутки культивирования (Gr) (V и VI циклы выращивания). Для расчетов использовали следующую формулу:
Gr=Xmax/Х0,
где Xmax и Х0 - максимальное и начальное значения сырой массы каллусной ткани. Полученные результаты приведены в таблице 1 и рисунках 1 и 2.
Установлено, что наилучший прирост каллусной ткани был отмечен на питательной среде, содержащей НУК. В вариантах с ИУК каллусная ткань характеризовалась низкой пролиферативной активностью, а на среде с 2,4-Д - формирование каллусной ткани не происходило. Наибольший и стабильный прирост каллусной ткани отмечен при добавлении в состав питательной среды НУК в концентрации 7,5 мг/л. В этом варианте в V и VI циклах выращивания прирост каллусной ткани составил 5,28 и 5,96 соответственно, что превышает данный показатель в варианте с ИУК (7,5 мг/л) примерно в 2.0-2.4 раза.
Пример 2. Каллусную ткань получали по методике, описанной в примере 1. Изучали влияние светокультуры на формирование каллусной ткани. Исследовали 3 варианта освещения:
1 вариант - облучатели на базе белых светодиодов (СД) цветовой температуры 3500 K и 6000 K и монохроматический красных СД с пиком 660 нм (марка «OSRAM AG», производство - Германия) с интенсивностью 150 мкмоль/ м2с (контроль).
2 вариант - многоканальный облучатель на базе белых светодиодов (СД) цветовой температуры 3500 K и 6000 K и монохроматический красных и синих светодиодов с пиками 660 нм и 460 нм соответственно. Мощность каналов монохроматических светодиодов составила: красный -70%, синий - 30%.
3 вариант - многоканальный облучатель на базе белых светодиодов (СД) цветовой температуры 3500 K и 6000К и монохроматический красных и синих светодиодов с пиками 660 нм и 460 нм соответственно. Мощность каналов монохроматических светодиодов составила: красный - 30%, синий - 70%.
Каллусную ткань получали из сегментов корней, изолированных с 30-дневных асептических растений цикория, на питательной среде, содержащей минеральные соли по прописи МС, дополненной препаратом Эпин в концентрации 1,0 мг/л в сочетании с 7,5 мг/л НУК или 7,5 мг/л ИУК. Выращивание каллусной культуры осуществляли в чашках Петри с диаметром 90 мм, при температуре 23-25°С и 16-часовом световом дне.
Спектры излучения измеряли с помощью прибора PLA-20 (Everfine, КНР). Результаты приведены на рисунках 3 и 4.
Экспериментально установлено, что световой режим выращивания оказал влияние на интенсивность роста, структуру и цвет каллусной культуры. При выращивании каллусной ткани на питательной среде, содержащей НУК в условиях освещения светодиодными лампами красного и синего спектров в различных соотношениях формировалась ткань разной интенсивности, рыхлого типа, состоящая из сильно или слабо вакуолизированных клеток. Установлено, что в варианте 2 (освещение светодиодными лампами с красным спектром 70% и синим спектром 30%) интенсивность образования каллусной ткани была минимальной, а в варианте 3 (освещение светодиодными лампами с красным спектром 30% и синим спектром 70%) - максимальной. В этом варианте освещения каллусная ткань зеленела на свету и была способна к морфогенезу. При выращивании каллусной ткани в варианте 1 (контроль) формирование каллусной ткани происходило не значительно.
Пример 3. Количественный анализ инулина в каллусных культурах определяли по стандартной методики с помощью спектрофотометра. Анализ проводили на высушенном материале. Каллусную культуру высушивали в сушильном шкафу при температуре 50°С в течение 24 ч. Для одного анализа брали сухой образец каллуса в количестве 600 мг, помещали в мерную колбу, заливали 9,5 мл 90% этанола и выдерживали в течение 30 мин на водяной бане при температуре 80°С, периодически перемешивая его содержимое. В качестве контроля к образцу каллуса добавляли такой же объем воды. После охлаждения в обе колбы (пробную и контрольную) добавляли 0,05 мл 25% раствора NaOH и объем доводили до 10,0 мл этанолом. Содержимое колб оставляли на 10-20 мин, после чего проводили центрифугирование при 4000-6000 об/мин в течение 3-5 мин. После этого брали пустые мерные колбы объемом 10 мл и переносили в них 0,05 мл центрифугата обоих экстрактов (образца и контроля), а также раствора 3,0 мг/мл фруктозы (стандарт) и воды (контроль). На следующем этапе к полученному объему добавляли 1,0 мл реагента (2,0 мг/мл резорцина+96% этанол и концентрированную соляную кислоту в равных объемах). Колбы выдерживали на водяной бане в течение 35 мин, а затем охлаждали. Объем доводили до 10 мл водой и перемешивали. Оптическую плотность анализируемых образцов и стандартного раствора измеряли на спектрофотометре при длине волны 480 нм. Содержание фруктозосодержащих сахаров в образцах рассчитывали по формуле:
где Apr и Ast - оптическая плотность опытного образца и стандартного раствора соответственно; Cst - концентрация стандартного раствора фруктозы (3 мг/мл); mpr - масса навески анализируемого образца каллуса, г. Результат, полученный для водного экстракта, отражает общее содержание водорастворимых углеводов. Результат для экстракта этанола отражает содержание низкомолекулярных фруктозидов. Разница между этими двумя показателями дает содержание инулина. Основные результаты исследований приведены в таблице 2.
Экспериментально установлено, что использование различных условий освещения (соотношение красного и синего спектров) оказывает значительное стимулирующее действие на накопление инулина в каллусе, полученном их корневых сегментов. Более того, максимальное значение инулина (15% к сухой биомассе клеток) было получено в каллусной ткани, культивируемой на питательной среде МС, содержащей 7,5 мг/л НУК в сочетании с препаратом Эпин 1,0 мг/л при режиме освещения светодиодными лампами с красным и синим спектром в соотношении 30% и 70% соответственно.
На основании полученных данных в результате проведения цикла исследований был разработан способ получение каллусной культуры Cichorium intybus L. in vitro, богатой инулином, включающий культивирование каллусной ткани, полученной из корневых эксплантов, на питательной среде МС, содержащей НУК 7,5 мг/л в сочетании с препаратом Эпин 1 мг/л при освещении светодиодными лампами с красным и синим спектром в соотношении 30% и 70% соответственно.
Предлагаемый способ получения in vitro каллусной ткани цикория сочетает ряд положительных свойств, которые позволяют использовать его в практической работе и для получения каллусной ткани других инулинсодержащих растений:
1. Технология предлагает использовать в небольших количествах легкодоступный, дешевый материал семян цикория.
2. Технология предполагает проведение работ в лабораторных условиях не зависимо от сезона и негативных факторов окружающей среды.
3. Предлагаемая технология легка в исполнении и не требует привлечения дорогостоящего оборудования и питательных сред.
4. Предлагаемый способ обеспечивает получение большого количества биомассы in vitro культуры цикория, в клетках которых накапливается инулин в концентрации 15%.
5. Предлагаемый способ является универсальным для получения in vitro каллусной ткани других инулинсодержащих растений.
Изобретение по сравнению с прототипом обеспечит накопление ценного вещества - инулин в концентрации 15% и более.
Claims (1)
- Способ получения каллусной ткани цикория (Cichorium intybus L.), включающий получение каллусной ткани из сегментов асептических растений цикория, выращенных из семян на безгормональной питательной среде Мурасига и Скуга, отличающийся тем, что каллусную ткань получают из сегментов корней, изолированных с 30-дневных асептических растений, и культивируют на питательной среде Мурасига и Скуга, в состав которой дополнительно добавляют индуктор образования каллусной ткани - нафтилуксусную кислоту - 7,5 мг/л и препарат Эпин - 1,0 мг/л и выращивают при освещении светодиодными лампами с красным и синим спектром в соотношении 30% и 70% соответственно.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2804841C1 true RU2804841C1 (ru) | 2023-10-06 |
Family
ID=
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2839863C1 (ru) * | 2024-04-16 | 2025-05-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Уральский государственный экономический университет" (УрГЭУ) | Способ производства каши быстрого приготовления с добавлением микрокапсул из биологически активных веществ |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2590586C1 (ru) * | 2015-03-18 | 2016-07-10 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Томский государственный университет" (ТГУ, НИ ТГУ) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КАЛЛУСНОЙ КУЛЬТУРЫ БОЛИГОЛОВА ПЯТНИСТОГО (Conium maculatum L) |
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2590586C1 (ru) * | 2015-03-18 | 2016-07-10 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Томский государственный университет" (ТГУ, НИ ТГУ) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КАЛЛУСНОЙ КУЛЬТУРЫ БОЛИГОЛОВА ПЯТНИСТОГО (Conium maculatum L) |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| MURASHIGE Т. et al., A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures, Physiol. Plant., 1962., vol. 5, 95, p. 473-497. * |
| КАЛАШНИКОВА Е.А. и др. Получение клеточных культур cichorium intybus 1. in vitro как источника инулина, Вестник российской сельскохозяйственной науки., 2022, N 1, с. 37-41. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2839863C1 (ru) * | 2024-04-16 | 2025-05-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Уральский государственный экономический университет" (УрГЭУ) | Способ производства каши быстрого приготовления с добавлением микрокапсул из биологически активных веществ |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kulus | Influence of growth regulators on the development, quality, and physiological state of in vitro-propagated Lamprocapnos spectabilis (L.) Fukuhara | |
| CN108094168A (zh) | 一种植物工厂条件下生产富硒生菜的方法 | |
| CN102511398A (zh) | 蕲山药组培育苗方法 | |
| Islam et al. | Effect of banana extract on growth and development of protocorm like bodies in Dendrobium sp. orchid | |
| CN101548646B (zh) | 一种通过体细胞胚及次生体细胞胚发生途径快繁龙牙楤木的方法 | |
| Wojtania et al. | In vitro propagation method for production of phenolic-rich planting material of culinary rhubarb ‘Malinowy’ | |
| Wu et al. | Effects of different light qualities and plant growth regulators on the growth and secondary metabolite content of Lonicera macranthoides seedlings | |
| Saravia-Castillo et al. | Auxins and Cytokinins elicit a differentiated response in the formation of shoots and roots in Cattleya maxima Lindl and Phalaenopsis amabilis (L) Blume | |
| CN108849451B (zh) | 一种提高水培生菜品质的方法 | |
| RU2804841C1 (ru) | Способ получения каллусной культуры цикория (Cichorium intybus L.) | |
| RU2709175C1 (ru) | Способ культивирования каллусной ткани vaccinium myrtillus l. | |
| CN113728886A (zh) | 一种提高生菜品质及产量的室内栽培方法 | |
| Mirniam et al. | A novel protocol for Stevia rebaudiana Bert regeneration | |
| Kumar et al. | Tissue Culture Approaches to Strawberries Improvement | |
| Wojtania et al. | Responses of Micropropagated Rhubarb (Rheum rhaponticum) Plantlets to Different Growing Media and Light Conditions in the Greenhouse | |
| Belokurova et al. | In vitro culture and some biochemical characteristics of Fittonia albivenis (Lindl. ex Veitch) Brummitt | |
| Kalashnikova et al. | Features of growth and inulin content in callus cultures Cichorium intybus L. in vitro | |
| KR101934780B1 (ko) | 모링가의 줄기마디 배양을 통한 기내 유식물체 형성방법 | |
| Zulkarnain et al. | Plantlets regeneration from crown bud slicing of pineapple (Ananas comosus) | |
| CN105660416B (zh) | 杉木试管苗诱导生根的方法 | |
| RU2788851C1 (ru) | Способ микроклонального размножения картофеля в культуре in vitro | |
| RU2731053C1 (ru) | Способ укоренения винограда ex vitro | |
| ES2914629B2 (es) | Procedimiento para la obtencion de biomasa y/o sustancias de valor utilizables como aditivos para piensos a partir de cultivos embriogenicos de encina o alcornoque y producto obtenido. | |
| KR101934781B1 (ko) | 모링가의 기내 유식물체 형성을 위한 성장배지 | |
| Domingues et al. | Influence of light on micropropagation of Pterospartum tridentatum ecotypes: Malcata, Gardunha and Orvalho. |