RU2785387C1 - Method for evaluating neoadjuvant chemotherapy in breast cancer patients with her2/neu overexpression - Google Patents
Method for evaluating neoadjuvant chemotherapy in breast cancer patients with her2/neu overexpression Download PDFInfo
- Publication number
- RU2785387C1 RU2785387C1 RU2022102998A RU2022102998A RU2785387C1 RU 2785387 C1 RU2785387 C1 RU 2785387C1 RU 2022102998 A RU2022102998 A RU 2022102998A RU 2022102998 A RU2022102998 A RU 2022102998A RU 2785387 C1 RU2785387 C1 RU 2785387C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- technetium
- darping3
- her2
- breast cancer
- drug
- Prior art date
Links
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 17
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 title description 7
- 101710042656 BQ2027_MB1231C Proteins 0.000 title description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 claims abstract description 18
- 230000002799 radiopharmaceutical Effects 0.000 claims abstract description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 17
- 101700025368 ERBB2 Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 102000027760 ERBB2 Human genes 0.000 claims abstract description 15
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 claims abstract description 13
- 210000000056 organs Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N technetium Chemical compound [Tc] GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 229910052713 technetium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 13
- 210000001165 Lymph Nodes Anatomy 0.000 claims abstract description 11
- 210000004293 Mammary Glands, Human Anatomy 0.000 claims abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 10
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 claims abstract description 9
- 229940056501 Technetium 99m Drugs 0.000 claims abstract description 8
- GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N technetium-99 Chemical compound [99Tc] GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims abstract description 6
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 5
- 230000001954 sterilising Effects 0.000 claims abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000009099 neoadjuvant therapy Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000002285 radioactive Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims abstract description 3
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 claims description 5
- 230000003187 abdominal Effects 0.000 claims description 4
- 238000007374 clinical diagnostic method Methods 0.000 abstract description 5
- 210000000683 Abdominal Cavity Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000036462 Unbound Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 4
- 210000000481 Breast Anatomy 0.000 description 2
- PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N L-N-acetyl-Cysteine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 210000002264 Mammary Glands, Animal Anatomy 0.000 description 2
- 206010061289 Metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 101710004918 Smlt3054 Proteins 0.000 description 2
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 230000002055 immunohistochemical Effects 0.000 description 2
- 230000003902 lesions Effects 0.000 description 2
- 238000009607 mammography Methods 0.000 description 2
- 230000001394 metastastic Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival Effects 0.000 description 2
- 238000009121 systemic therapy Methods 0.000 description 2
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 108010026410 Ado-Trastuzumab Emtansine Proteins 0.000 description 1
- 206010001897 Alzheimer's disease Diseases 0.000 description 1
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000008102 Ankyrins Human genes 0.000 description 1
- 108010049777 Ankyrins Proteins 0.000 description 1
- 102000036638 BRCA1 Human genes 0.000 description 1
- 108010042977 BRCA1 Protein Proteins 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 102000004225 Cathepsin B Human genes 0.000 description 1
- 108090000712 Cathepsin B Proteins 0.000 description 1
- JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N Cyanogen Chemical compound N#CC#N JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100016662 ERBB2 Human genes 0.000 description 1
- 239000002136 L01XE07 - Lapatinib Substances 0.000 description 1
- BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N Lapatinib Chemical compound O1C(CNCCS(=O)(=O)C)=CC=C1C1=CC=C(N=CN=C2NC=3C=C(Cl)C(OCC=4C=C(F)C=CC=4)=CC=3)C2=C1 BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004185 Liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 Lung Anatomy 0.000 description 1
- 101710006307 MVA110L Proteins 0.000 description 1
- 210000001672 Ovary Anatomy 0.000 description 1
- 210000002307 Prostate Anatomy 0.000 description 1
- 101710037934 QRSL1 Proteins 0.000 description 1
- 210000002784 Stomach Anatomy 0.000 description 1
- 210000000115 Thoracic Cavity Anatomy 0.000 description 1
- 108010010691 Trastuzumab Proteins 0.000 description 1
- 101710042748 UL80 Proteins 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000038129 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007172 antigens Proteins 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial Effects 0.000 description 1
- 102000024070 binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091007650 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 201000009030 carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229960004891 lapatinib Drugs 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 238000009206 nuclear medicine Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 229960002087 pertuzumab Drugs 0.000 description 1
- 108010042024 pertuzumab Proteins 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229960001612 trastuzumab emtansine Drugs 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cells Anatomy 0.000 description 1
- 210000004887 upper abdominal cavities Anatomy 0.000 description 1
Images
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, онкологии, конкретно к способам оценки неоадъювантной терапии рака молочной железы с гиперэкспрессией HER2/neu.The invention relates to medicine, oncology, specifically to methods for evaluating neoadjuvant therapy for breast cancer with HER2/neu overexpression.
Одной из наиболее изученных молекулярных мишеней является рецептор эпидермального роста 2 типа (HER2/neu), экспрессия которого выявляется на поверхности опухолевых клеток при раке легкого, яичников, желудка, простаты и пр. [Slamon D.J., Clark G.M., Wong S.G., et al. Human breast cancer: correlation of relapse a survival with amplification of the Her-2/neu oncogenes. Science. 1987; 235: 177-182]. При этом наиболее часто высокая его экспрессия обнаруживается у больных раком молочной железы (РМЖ), частота встречаемости при котором составляет до 20% и ассоциируется как правило с неблагоприятным прогнозом и агрессивным течением. Главным клиническим значением гиперэкспрессии рецептора HER2/neu является необходимость назначения таргетной терапии с препаратами трастузумаб, пертузумаб, трастузумаб эмтанзин, лапатиниб, применение которой существенно улучшает показатели выживаемости у данной категории пациентов. Как правило, химиотерапия у больных раком молочной железы проводится в неоадъювантном режиме (неоадъювантная химиотерапия - НАХТ).One of the most studied molecular targets is the type 2 epidermal growth receptor (HER2/neu), the expression of which is detected on the surface of tumor cells in cancers of the lung, ovaries, stomach, prostate, etc. [Slamon D.J., Clark G.M., Wong S.G., et al. Human breast cancer: correlation of relapse a survival with amplification of the Her-2/neu oncogenes. Science. 1987; 235: 177-182]. At the same time, its high expression is most often found in patients with breast cancer (BC), the incidence rate in which is up to 20% and is usually associated with an unfavorable prognosis and an aggressive course. The main clinical significance of HER2/neu receptor overexpression is the need to prescribe targeted therapy with trastuzumab, pertuzumab, trastuzumab emtansine, lapatinib, the use of which significantly improves survival rates in this category of patients. As a rule, chemotherapy in patients with breast cancer is carried out in neoadjuvant mode (neoadjuvant chemotherapy - NAC).
Основными методами лучевой диагностики рака молочной железы, применяемыми для оценки динамики НАХТ, являются рентгеновская маммография, ультразвуковое исследование и компьютерная томография. Однако информативность указанных методов в известной степени ограничена. Так, например, чувствительность маммографии значительно ограничена у пациентов, имеющих рентгенологически плотную ткань молочной железы, наличие в анамнезе хирургических вмешательств, у носителей мутаций генов BRCA1/2 [Yaghjyan L et al. 2013]. Главным недостатком ультразвукового метода исследования является субъективный фактор, проявляющийся зависимостью от оператора и характристик используемого УЗ-аппарата [Е.А. Eisenhauera et al. 2009, NCCN 2017]. Недостатком компьютерной томографии в оценке динамики НАХТ является субъективный фактор при оценке полученных результатов, а также сложность в визуализации опухолей менее 2 см.The main methods of radiation diagnostics of breast cancer used to assess the dynamics of NAC are X-ray mammography, ultrasound and computed tomography. However, the information content of these methods is limited to a certain extent. For example, the sensitivity of mammography is significantly limited in patients with radiologically dense breast tissue, a history of surgical interventions, and in carriers of BRCA1/2 mutations [Yaghjyan L et al. 2013]. The main disadvantage of the ultrasonic research method is the subjective factor, which is manifested by the dependence on the operator and the characteristics of the ultrasound machine used [E.A. Eisenhauera et al. 2009, NCCN 2017]. The disadvantage of computed tomography in assessing the dynamics of NAC is the subjective factor in assessing the results obtained, as well as the difficulty in visualizing tumors less than 2 cm.
В последние годы все большую популярность получают таргетные радионуклидные методы диагностики злокачественных заболеваний, обладающие высокой специфичностью к различным молекулярным мишеням и позволяющие визуализировать опухолевые очаги различных размеров (как основной опухолевый узел, визуализировать опухолевые очаги различных размеров (как основной опухолевый узел, так и метастатические очаги) [Чернов В.И., Брагина О.Д., Синилкин И.Г. и соавт. Радиоиммунотерапия: современное состояние проблемы // Вопросы онкологии. 2016. Т. 62. №1. С. 24-26]. В настоящее время для этих целей в качестве «нацеливающего» модуля изучается новый класс таргентных молекул, получивший название «альтернативные каркасные белки» или «скаффолды», обладающие оптимальными характеристиками для переноса различных радиоизотопов к целевым мишеням [Plückthun A. Designed ankyrin repeat proteins (DARPins): binding proteins for research, diagnostics, and therapy. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 2015; 55: 489-511].In recent years, targeted radionuclide methods for diagnosing malignant diseases have become increasingly popular, having high specificity for various molecular targets and allowing visualization of tumor foci of various sizes (as the main tumor node, visualization of tumor foci of various sizes (both the main tumor node and metastatic foci) [Chernov V.I., Bragina O.D., Sinilkin I.G. et al. Radioimmunotherapy: current state of the problem // Issues of Oncology. 2016. V. 62. No. 1. P. 24-26]. for these purposes, as a “targeting” module, a new class of target molecules is being studied, called “alternative scaffold proteins” or “scaffolds”, which have optimal characteristics for transferring various radioisotopes to target targets [Plückthun A. Designed ankyrin repeat proteins (DARPins): binding proteins for research, diagnostics, and therapy Annu Rev Pharmacol Toxicol 2015;55:489-511].
Одними из представителей рекомбинантных адресных молекул являются дарпины (DARPin, Design Ankyrin Repeat Protein), которые являются повторами белка анкирина, состоящего из повторяющихся доменов длиной 33 а.о. и обладающего стабильной структурой из β-поворота и двух ά-спиралей. Обычно белки представлены 4-6 модулями с суммарной молекулярной массой от 14 до 21 кДа (молекулярная масса каждого 3,5 кДа) [Hanenberg М., McAfoose J., Kulic L. Amyloid-β peptide-specific DARPins as a novel class of potential therapeutics for Alzheimer disease. J Biol Chem. 2014; 26: 27080-27089]. Основными преимуществами данных молекул являются небольшой размер, стабильная структура, высокая специфичность и аффинность к антигену, а также значительно более низкая стоимость производства, обусловленная их экспрессией в бактериальных средах [Kramer L., Renko М., Završnik J., et.al Non-invasive in vivo imaging of tumour-associated cathepsin В by a highly selective inhibitory DARPin. Theranostics. 2017; 8: 2806-2821].One of the representatives of recombinant target molecules are DARPins (DARPin, Design Ankyrin Repeat Protein), which are repeats of the ankyrin protein, which consists of repeating domains 33 a.a. long. and having a stable structure of a β-turn and two ά-helices. Typically, proteins are represented by 4-6 modules with a total molecular weight of 14 to 21 kDa (molecular weight of each 3.5 kDa) [Hanenberg M., McAfoose J., Kulic L. Amyloid-β peptide-specific DARPins as a novel class of potential therapeutics for Alzheimer's disease. J Biol Chem. 2014; 26: 27080-27089]. The main advantages of these molecules are small size, stable structure, high specificity and affinity for the antigen, as well as a significantly lower production cost due to their expression in bacterial media [Kramer L., Renko M., Završnik J., et.al Non- invasive in vivo imaging of tumor-associated cathepsin B by a highly selective inhibitory DARPin. Theranostics. 2017; 8: 2806-2821].
Наиболее часто используют способы с применением радионуклидов для проведения диагностических исследований как на территории Российской Федерации, так и в мире, остается короткоживущий (T1/2=6,02 ч) технеций-99м (99mTc), препараты которого изготавливаются в виде стандартных наборов реагентов (лиофилизатов) к генератору технеция-99м [Лыков А.В. Сублимационная сушка // В кн.: Теория сушки. - М., Энергия. - 1968. - С.334 - 362].The most commonly used methods using radionuclides for diagnostic studies both in the Russian Federation and in the world remain short-lived (T 1/2 \u003d 6.02 h) technetium-99m ( 99m Tc), the preparations of which are made in the form of standard kits reagents (lyophilisates) to the technetium-99m generator [Lykov A.V. Sublimation drying // In the book: Drying theory. - M., Energy. - 1968. - S.334 - 362].
Наиболее близким к предлагаемому является «Способ оценки динамики неоадъювантной системной терапии рака молочной железы с гиперэкспрессией Her2/neu» Братиной О.Д. и соавт (Патент на изобретение 2737996 С1, 07.12.2020. Заявка №2020118845 от 08.06.2020.) с использованием молекул DARPin9_29, меченных технецием-99m («99mTc-DARPin9_29»). Основным недостатком данной методики является неоптимальные молекулярные характеристики протеина DARPin9_29, что приводит с низкому соотношению опухоль/фон и лимфатический узел/фон, а также характеризуется высоким накоплением в печень «99mTc-DARPin9_29». Последний факт имеет особое невозможности оценки их изменений на фоне химио/таргетного лечения у данной категории пациентов.Closest to the proposed is the "Method for assessing the dynamics of neoadjuvant systemic therapy for breast cancer with overexpression of Her2/neu" Bratina O.D. et al. (Patent for invention 2737996 C1, 12/07/2020. Application No. 2020118845 dated 06/08/2020.) using DARPin9_29 molecules labeled with technetium-99m (“ 99m Tc-DARPin9_29”). The main disadvantage of this technique is the suboptimal molecular characteristics of the DARPin9_29 protein, which leads to a low tumor/background and lymph node/background ratio, and is also characterized by a high accumulation of “ 99m Tc-DARPin9_29” in the liver. The latter fact makes it particularly impossible to assess their changes against the background of chemo/targeted treatment in this category of patients.
Новый технический результат - расширение области применения, повышение точности, информативности и доступности способа.New technical result - expanding the scope, improving the accuracy, information content and accessibility of the method.
Для достижения нового технического результата в способе оценки неоадъювантной терапии рака молочной железы с гиперэкспрессией HER2/neu, включающем внутривенное введение радиофармпрепарата (РФП) и проведение сцинтиграфического исследования, пациенткам внутривенно вводят радиофармацевтический препарат на основе меченных технецием-99m рекомбинантных адресных молекул DARPinG3, который готовят непосредственно перед введением, для этого в асептических условиях согласно разработанному авторами лабораторному регламенту: в набор «CRS Isolink» (Center for Radiopharmaceutical Science, Paul Scherrer Institute, Villigen, Швейцария) для приготовления трикарбонильного технеция [99mTc(СО)3(H2O)3]+ добавляют 1000 мкл (2-4 ГБк) элюата 99mTcO4- и инкубируют в течение 30 минут при температуре 100°С, после инкубации 400 мкл трикарбонильного технеция добавляют к 3000 мкг DARPinG3 и инкубируют при температуре 60°С в течение 60 минут, затем выполняют очистку полученного соединения от белковых примесей и несвязавшихся с технецием молекул DARPinG3 с использованием очистительных колонок Sephadex G-25 М (GE Healthcare, Швеция), полученный после очищения препарат с активностью 200-500 МБк, разбавляют в 10 мл стерильного 0,9% раствора NaCl, забирают через стерилизующий фильтр и медленно вводят пациенту в дозе 3000 мкг, через 4 часа после введения пациенту выполняют однофотонную эмиссионную компьютерную томографию органов грудной клетки и верхнего этажа органов брюшной полости на двухдетекторной гамма-камере, исследование выполняют перед началом лечения и затем после проведения 2, 4 и 6 курсов системного лечения, на каждом этапе оценивают накопление препарата в проекции молочных желез, регионарных лимфатических узлов и отдаленных органов и тканей, а также показатели опухоль/фон во всех имеющихся опухолевых очагах и при уменьшении последнего показателя определяют положительную динамику терапии.To achieve a new technical result in a method for evaluating neoadjuvant therapy for breast cancer with HER2/neu overexpression, including intravenous administration of a radiopharmaceutical (RP) and a scintigraphic study, patients are intravenously injected with a radiopharmaceutical based on technetium-99m labeled recombinant targeted DARPinG3 molecules, which is prepared directly before administration, for this, under aseptic conditions according to the laboratory regulations developed by the authors: in the CRS Isolink kit (Center for Radiopharmaceutical Science, Paul Scherrer Institute, Villigen, Switzerland) for the preparation of tricarbonyl technetium [ 99m Tc (CO) 3 (H 2 O) 3 ] + add 1000 µl (2-4 GBq) of 99m TcO 4- eluate and incubate for 30 minutes at 100°C, after incubation 400 µl tricarbonyl technetium is added to 3000 µg DARPinG3 and incubate at 60°C for 60 minutes, then the resulting compound is purified from protein admixtures. This and technetium-unbound DARPinG3 molecules using Sephadex G-25 M purification columns (GE Healthcare, Sweden), the preparation obtained after purification with an activity of 200-500 MBq, are diluted in 10 ml of a sterile 0.9% NaCl solution, taken through a sterilizing filter and slowly administered to the patient at a dose of 3000 mcg, 4 hours after administration, the patient is subjected to single-photon emission computed tomography of the chest and the upper floor of the abdominal organs on a two-detector gamma camera, the study is performed before the start of treatment and then after 2, 4 and 6 courses systemic treatment, at each stage, the accumulation of the drug in the projection of the mammary glands, regional lymph nodes and distant organs and tissues, as well as tumor / background indicators in all existing tumor foci, are assessed at each stage, and with a decrease in the latter indicator, positive dynamics of therapy is determined.
Способ осуществляют следующим образом, радиофармацевтический препарат готовят непосредственно перед введением в асептических условиях: в набор «CRS Isolink» (Center for Radiopharmaceutical Science, Paul Scherrer Institute, Villigen, Швейцария) для приготовления трикарбонильного технеция [99mTc(СО)3(H2O)3]+ добавляют 1000 мкл (2-4 ГБк) элюата 99mTcO4- и инкубируют в течение 30 минут при температуре 100°С. После инкубации 400 мкл трикарбонильного технеция добавляют к 3000 мкг DARPinG3 и инкубируют при температуре 60°С в течение 60 минут. В дальнейшем выполняется инкубируют при температуре 60°С в течение 60 минут. В дальнейшем выполняется очистка полученного соединения от белковых примесей и несвязавшихся с технецием молекул DARPinG3 с использованием очистительных колонок Sephadex G-25 М (GE Healthcare, Швеция). Радиохимические выход и чистоту определяют с помощью тонкослойной радиохроматографии (ТСРХ). Анализ хроматограмм проводят с использованием хроматографа Hitachi Chromaster HPLC systems с радиоактивным детектором. Полученный после очищения препарат в дозе 200-500 МБК разбавляют в 10 мл стерильного 0,9% раствора NaCl, забирают через стерилизующий фильтр и медленно вводят пациенту. Через 4 часа после введения пациенту выполняют однофотонную эмиссионную компьютерную томографию органов грудной клетки и верхнего этажа органов брюшной полости на двухдетекторной гамма-камере до начала системного лечения, а также после 2, 4 и 6 курсов неоадъювантной системной терапии. На каждом этапе оценивают накопление препарата в проекции молочных желез, регионарных лимфатических узлов и отдаленных органов и тканей, а также показатели опухоль/фон во всех имеющихся опухолевых очагах. Уменьшение показателя последнего свидетельствует о положительной динамике терапии.The method is carried out as follows, the radiopharmaceutical preparation is prepared immediately before administration under aseptic conditions: in the CRS Isolink kit (Center for Radiopharmaceutical Science, Paul Scherrer Institute, Villigen, Switzerland) for the preparation of tricarbonyl technetium [ 99m Tc(CO) 3 (H 2 O ) 3 ] + add 1000 μl (2-4 GBq) of eluate 99m TcO 4- and incubate for 30 minutes at 100°C. After incubation, 400 μl tricarbonyl technetium is added to 3000 μg DARPinG3 and incubated at 60° C. for 60 minutes. Subsequently, incubation is performed at a temperature of 60°C for 60 minutes. Subsequently, the resulting compound is purified from protein impurities and DARPinG3 molecules not bound to technetium using Sephadex G-25 M purification columns (GE Healthcare, Sweden). Radiochemical yield and purity are determined by thin-layer radiochromatography (TLPC). Chromatogram analysis is carried out using a Hitachi Chromaster HPLC systems chromatograph with a radioactive detector. The drug obtained after purification in a dose of 200-500 MBC is diluted in 10 ml of a sterile 0.9% NaCl solution, taken through a sterilizing filter and slowly injected into the patient. 4 hours after administration, the patient is subjected to single-photon emission computed tomography of the chest and the upper floor of the abdominal organs on a two-detector gamma camera before the start of systemic treatment, as well as after 2, 4 and 6 courses of neoadjuvant systemic therapy. At each stage, the accumulation of the drug in the projection of the mammary glands, regional lymph nodes and distant organs and tissues is assessed, as well as tumor/background indicators in all available tumor foci. A decrease in the latter indicates a positive trend in therapy.
Способ основан на анализе результатов клинических исследований, для подтверждения эффективности которых в выявлении злокачественных опухолей молочных желез с гиперэкспрессией HER2/neu и оценки динамики неоадъювантного системного лечения было проведено изучение особенностей накопления радиофармацевтического препарата на основе меченных технецием-99m рекомбинантных адресных молекул DARPinG3. С этой целью была сформирована группа из 7 больных с верифицированным диагнозом рака молочной железы T4N0-3M0-1 с гиперэкспрессией HER2/neu. Всем пациентам внутривенно вводили радиофармацевтический препарат «99mTc-DARPinG3» в дозировке 3000 мкг (200-500 МБк) до начала лечения, после 2, 4 и 6 курсов неоадъювантного лечения.The method is based on the analysis of the results of clinical studies, in order to confirm the effectiveness of which in the detection of malignant tumors of the mammary glands with HER2/neu overexpression and the assessment of the dynamics of neoadjuvant systemic treatment, a study was made of the accumulation of a radiopharmaceutical based on technetium-99m-labeled recombinant targeted DARPinG3 molecules. For this purpose, a group of 7 patients with a verified diagnosis of breast cancer T 4 N 0-3 M 0-1 with overexpression of HER2/neu was formed. All patients were intravenously injected with the radiopharmaceutical preparation " 99m Tc-DARPinG3" at a dosage of 3000 μg (200-500 MBq) before the start of treatment, after 2, 4 and 6 courses of neoadjuvant treatment.
Всем пациенткам выполнялись гистологическое и иммуногистохимическое исследование биопсийного материала первичной опухоли с определением статуса HER2/neu по стандартным методикам. При значении HER2/neu 2+ проводился FISH анализ.All patients underwent histological and immunohistochemical examination of the biopsy material of the primary tumor with the determination of the status of HER2/neu according to standard methods. FISH analysis was performed at HER2/neu 2+ value.
Радиофармацевтический препарат готовили непосредственно перед введением согласно разработанному авторами лабораторному регламенту: в набор «CRS Isolink» (Center for Radiopharmaceutical Science, Paul Scherrer Institute, Villigen, Швейцария) для приготовления трикарбонильного технеция [99mTc(СО)3(H2O)3]+ добавляли 1000 мкл (2-4 ГБк) элюата 99mTcO4- и инкубировали в течение 30 минут при температуре 100°С. После инкубации 400 мкл трикарбонильного технеция добавляли к 1000, 2000 и 3000 мкг DARPinG3 и инкубировали при температуре 60°С в течение 60 минут [Bragina О., Chernov V., Schulga A., Konovalova Е., Garbukov Е., Vorobyeva A. et al. Phase I trial of 99mTc-(HE)3-G3, a DARPin-based probe for imaging of HER2 expression in breast cancer. Journal of Nuclear Medicine. 2021 - August 12, 2021, jnumed.l21.262542;DOI: https://doi.org/10.2967/jnumed.121.262542]. В дальнейшем выполнялась очистка полученного соединения от белковых примесей и несвязавшихся с технецием молекул DARPinG3 с использованием очистительных колонок Sephadex G-25 М (GE Healthcare, Швеция). Радиохимические выход и чистоту определяли с помощью тонкослойной радиохроматографии (ТСРХ). Анализ хроматограмм проводили с использованием хроматографа Hitachi Chromaster HPLC systems с радиоактивным детектором. Полученный после очищения препарат в дозе 200-500 МБк разбавляли в 10 мл стерильного 0,9% раствора NaCl, забирали через стерилизующий фильтр и медленно вводили пациенту.The radiopharmaceutical preparation was prepared immediately before administration according to the laboratory protocol developed by the authors: in the CRS Isolink kit (Center for Radiopharmaceutical Science, Paul Scherrer Institute, Villigen, Switzerland) for the preparation of tricarbonyl technetium [ 99m Tc(СО) 3 (H 2 O) 3 ] + 1000 µl (2-4 GBq) of 99m TcO 4- eluate was added and incubated for 30 minutes at 100°C. After incubation, 400 μl of tricarbonyl technetium was added to 1000, 2000 and 3000 μg of DARPinG3 and incubated at 60°C for 60 minutes [Bragina O., Chernov V., Schulga A., Konovalova E., Garbukov E., Vorobyeva A. et al. Phase I trial of 99mTc-(HE)3-G3, a DARPin-based probe for imaging of HER2 expression in breast cancer. Journal of Nuclear Medicine. 2021 - August 12, 2021, jnumed.l21.262542; doi: https://doi.org/10.2967/jnumed.121.262542 Subsequently, the resulting compound was purified from protein impurities and DARPinG3 molecules that did not bind to technetium using Sephadex G-25 M purification columns (GE Healthcare, Sweden). Radiochemical yield and purity were determined by thin-layer radiochromatography (TLPC). Chromatograms were analyzed using a Hitachi Chromaster HPLC systems chromatograph with a radioactive detector. The drug obtained after purification at a dose of 200-500 MBq was diluted in 10 ml of a sterile 0.9% NaCl solution, taken through a sterilizing filter and slowly injected into the patient.
Через 4 часа после введения препарата пациентам выполняли однофотонную эмиссионную компьютерную томографию органов грудной клетки и верхнего этажа органов брюшной полости на двухдетекторной гамма-камере Е.САМ фирмы SIEMENS. Полученные при исследовании изображения (сцинтиграммы) подвергали постпроцессинговой обработке с использованием фирменного пакета программ E.Soft (SIEMENS, Германия). На каждом этапе оценивали накопление препарата в проекции молочных желез, регионарных лимфатических узлов и отдаленных органов и тканей, а также показатели опухоль/фон во всех имеющихся опухолевых очагах. Уменьшение последнего показателя свидетельствовало о положительной динамике терапии.4 hours after the administration of the drug, patients underwent single-photon emission computed tomography of the chest organs and the upper floor of the abdominal organs using a SIEMENS E.CAM dual-detector gamma camera. The images obtained during the study (scintigrams) were subjected to post-processing using the proprietary software package E.Soft (SIEMENS, Germany). At each stage, the accumulation of the drug in the projection of the mammary glands, regional lymph nodes and distant organs and tissues, as well as tumor/background parameters in all available tumor foci, were evaluated. The decrease in the latter indicator indicated the positive dynamics of therapy.
Клинический пример 1.Clinical example 1.
Пациентка А., 43 лет: Ds.: Рак правой молочной железы IIA стадия (T2N1M0), метастатическое поражение аксиллярных лимфатических узлов. Гистологическое и иммуногистохимическое исследование: Инвазивная карцинома неспецифического типа 2 степени злокачественности. РЭ+, РП+, HER2/neu 3+.Patient A., aged 43: Ds.: Cancer of the right breast IIA stage (T2N1M0), metastatic lesion of the axillary lymph nodes. Histological and immunohistochemical examination: Non-specific invasive carcinoma of the 2nd degree of malignancy. RE+, RP+, HER2/neu 3+.
По данным однофотонной эмиссионной компьютерной томографии органов грудной клетки с препаратом «99mTc-DARPinG3» в дозировке 3000 мкг сцинтиграфической картине отчетливо визуализировались опухолевое поражение в правой молочной железе и аксиллярных лимфатических узлах (фиг. 1).According to single-photon emission computed tomography of the chest organs with the drug " 99m Tc-DARPinG3" at a dosage of 3000 μg, the scintigraphic pattern clearly visualized a tumor lesion in the right mammary gland and axillary lymph nodes (Fig. 1).
После двух курсов неоадьювантной химио/таргетной терапии по данным повторного исследования с препаратом «99mTc-DARPinG3» опухолевые узлы в проекции молочной железы и аксиллярных лимфатических узлов выявлены не были, что было сопоставимо с результатами стандартных диагностических методик (фиг. 2).After two courses of neoadjuvant chemotherapy/targeted therapy, according to the data of a repeated study with the drug " 99m Tc-DARPinG3", no tumor nodes were detected in the projection of the mammary gland and axillary lymph nodes, which was comparable with the results of standard diagnostic methods (Fig. 2).
Таким образом, предлагаемый способ оценки динамики неоадьювантной химиотерапии рака молочной железы с гиперэкспрессией HER2/neu с применением радиофармацевтического препарата на основе меченных технецием-99m рекомбинантных адресных молекул DARPinG3 в дозе 3000 мкг и проведением ОФЭКТ ОГК и верхнего этажа брюшной полости, позволяет отчетливо оценивать динамику химио/таргетного лечения у больных раком молочной железы с гиперэкспрессией HER2/neu, что позволит повысить диагностическую эффективность, информативность и доступность радионуклидной диагностики рака молочных желез с гиперэкспрессией HER2/neu.Thus, the proposed method for evaluating the dynamics of neoadjuvant chemotherapy of breast cancer with HER2/neu overexpression using a radiopharmaceutical based on technetium-99m-labeled recombinant targeted DARPinG3 molecules at a dose of 3000 μg and performing SPECT of the chest and upper abdominal cavity allows a clear assessment of the dynamics of chemotherapy. /targeted treatment in patients with breast cancer with HER2/neu overexpression, which will improve the diagnostic efficiency, informativeness and availability of radionuclide diagnostics of breast cancer with HER2/neu overexpression.
Claims (1)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2785387C1 true RU2785387C1 (en) | 2022-12-07 |
Family
ID=
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2720801C1 (en) * | 2019-02-11 | 2020-05-13 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр" Российской академии наук ("Томский НИМЦ") | RADIONUCLIDE DIAGNOSTIC TECHNIQUE FOR BREAST CANCER WITH Her2/neu HYPEREXPRESSION |
| RU2737996C1 (en) * | 2020-06-08 | 2020-12-07 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Национальный исследовательский Томский политехнический университет» | Method for evaluating neoadjuvant systemic therapy of breast cancer with her2/neu overexpression |
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2720801C1 (en) * | 2019-02-11 | 2020-05-13 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр" Российской академии наук ("Томский НИМЦ") | RADIONUCLIDE DIAGNOSTIC TECHNIQUE FOR BREAST CANCER WITH Her2/neu HYPEREXPRESSION |
| RU2737996C1 (en) * | 2020-06-08 | 2020-12-07 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Национальный исследовательский Томский политехнический университет» | Method for evaluating neoadjuvant systemic therapy of breast cancer with her2/neu overexpression |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| БРАГИНА О.Д. и др. Разработка высокоспецифичного радиохимического соединения на основе меченных 99mТс рекомбинантных адресных молекул для визуализации клеток с гиперэкспрессией Her-2/neu. // Бюллетень сибирской медицины. 2017; 16 (3): 25-33, реферат. GOLDSTEIN R. et al. Development of the designed ankyrin repeat protein (DARPin) G3 for HER2 molecular imaging. Eur J Nucl Med Mol Imaging. 2015;42(2):288-301. doi:10.1007/s00259-014-2940-2, реферат. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Scarpa et al. | The 68 Ga/177 Lu theragnostic concept in PSMA targeting of castration-resistant prostate cancer: correlation of SUV max values and absorbed dose estimates | |
| Dijkers et al. | Biodistribution of 89Zr‐trastuzumab and PET imaging of HER2‐positive lesions in patients with metastatic breast cancer | |
| Spiegelberg et al. | Molecular imaging of EGFR and CD44v6 for prediction and response monitoring of HSP90 inhibition in an in vivo squamous cell carcinoma model | |
| RU2702294C1 (en) | Method for radionuclide diagnosing operable breast cancer with overexpression of her2/neu | |
| Vallejo-Armenta et al. | 99m Tc-CXCR4-L for imaging of the chemokine-4 receptor associated with brain tumor invasiveness: Biokinetics, radiation dosimetry, and proof of concept in humans | |
| Baum et al. | Evaluation of therapy response in breast and ovarian cancer patients by positron emission tomography (PET) | |
| Wang et al. | A prospective head-to-head comparison of [68Ga] Ga-P16-093 and [68Ga] Ga-PSMA-11 PET/CT in patients with primary prostate cancer | |
| RU2700109C1 (en) | Method for radionuclidean diagnostics of secondary edematous-infiltrative form of breast cancer with overexpression of her2/neu using recombinant address molecules darpin9_29 | |
| Thivat et al. | Phase I study of [131I] ICF01012, a targeted radionuclide therapy, in metastatic melanoma: MELRIV-1 protocol | |
| Lucignani | PET imaging with hypoxia tracers: a must in radiation therapy | |
| RU2785387C1 (en) | Method for evaluating neoadjuvant chemotherapy in breast cancer patients with her2/neu overexpression | |
| Hodolic et al. | Safety and tolerability of 68 Ga-NT-20.3, a radiopharmaceutical for targeting neurotensin receptors, in patients with pancreatic ductal adenocarcinoma: the first in-human use | |
| Epstein et al. | Radioimmunodetection of human B-cell lymphomas with a radiolabeled tumor-specific monoclonal antibody (Lym-1) | |
| RU2800818C1 (en) | Method of breast cancer diagnostics with her2/neu hyperexpression | |
| RU2780943C1 (en) | Method for detecting metastasis to regional lymph nodes in breast cancer patients with her2/neu hyperexpression | |
| McQuarrie et al. | The effects of circulating antigen on the pharmacokinetics and radioimmunoscintigraphic properties of 99m Tc labelled monoclonal antibodies in cancer patients | |
| RU2800864C1 (en) | Method of diagnostics of remote metastasis in breast cancer patients with her2/neu hyperexpression | |
| RU2739107C1 (en) | Diagnostic technique for stomach cancer with her2/neu overexpression | |
| Ren et al. | 68Ga-cyc-DX600 PET/CT in ACE2-targeted tumor imaging | |
| RU2737996C1 (en) | Method for evaluating neoadjuvant systemic therapy of breast cancer with her2/neu overexpression | |
| Mokoala et al. | Radionuclide imaging of hypoxia: where are we now? Special attention to cancer of the cervix uteri | |
| Lindholm et al. | PET imaging of blood flow and glucose metabolism in localized musculoskeletal tumors of the extremities | |
| RU2720801C1 (en) | RADIONUCLIDE DIAGNOSTIC TECHNIQUE FOR BREAST CANCER WITH Her2/neu HYPEREXPRESSION | |
| Rodot et al. | A radiolabelled iodobenzamide for malignant melanoma staging | |
| O’Brien et al. | Managing a high-specific-activity Iobenguane therapy clinic: from operations to reimbursement |