RU2782111C1

RU2782111C1 - Method for assessing violations of trophoblast invasion by examining matrix metalloproteinase-9 in the villous chorion in cytomegalovirus infection

Info

Publication number: RU2782111C1
Application number: RU2022107369A
Authority: RU
Inventors: Ирина Анатольевна Андриевская; Наталия Александровна Ишутина; Инна Викторовна Довжикова; Николай Николаевич Дорофиенко; Николай Геннадьевич Приходько
Filing date: 2022-03-21
Publication date: 2022-10-21

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: invention relates to medicine, namely to obstetrics, and can be used to assess violations of trophoblast invasion in women with spontaneous miscarriage associated with cytomegalovirus infection by examining the chorionic villous homogenate by enzyme immunoassay. In the homogenate of the villous chorion determine the content of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9). If the MMP-9 value is equal to or less than 19.21 ng/ml, a conclusion is made about a violation of trophoblast invasion.

EFFECT: method provides an opportunity to assess trophoblast invasion in women with spontaneous miscarriage associated with cytomegalovirus infection by determining the MMP-9 content in the chorionic villous homogenate.

1 cl, 2 ex

Description

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству, а также к научным исследованиям в области патологической физиологии и предназначено для оценки нарушения инвазии трофобласта у женщин с самопроизвольным выкидышем, ассоциированным с цитомегаловирусной инфекцией.The invention relates to medicine, in particular to obstetrics, as well as to scientific research in the field of pathological physiology, and is intended to assess the violation of trophoblast invasion in women with spontaneous miscarriage associated with cytomegalovirus infection.

В настоящее время общепризнана ведущая роль нарушения инвазии трофобласта и последующей плацентации в индукции и манифестации поздних гестационных осложнений, повышающих перинатальную и младенческую смертность: синдрома задержки роста плода, преэклампсии, поздних преждевременных родов, отслойки плаценты [2].Currently, the leading role of impaired trophoblast invasion and subsequent placentation in the induction and manifestation of late gestational complications that increase perinatal and infant mortality is generally recognized: fetal growth retardation syndrome, preeclampsia, late preterm birth, placental abruption [2].

Действительно, инвазия ворсинчатого трофобласта в ткань матки является ключевым процессом успешного эмбриогенеза и процессов плацентации. Деградация миоцитов вокруг спиральных артерий матки и замена эндотелиальных клеток эндоваскулярным трофобластом приводит в конечном итоге к расширению просвета сосудов, что необходимо для усиления межворсинчатого кровотока. Поверхностная инвазия трофобласта и неполное преобразование спиральных артерий приводит к развитию преэклампсии. При этом недостаточная степень инвазии трофобласта может привести либо к элиминации эмбриона уже в первые недели беременности, либо, в случае прогрессирования беременности, к ограничению ростовых возможностей плаценты в виде ее гипоплазии с последующим развитием акушерских осложнений [3].Indeed, the invasion of villous trophoblast into the uterine tissue is a key process for successful embryogenesis and placentation processes. The degradation of myocytes around the spiral arteries of the uterus and the replacement of endothelial cells with endovascular trophoblast ultimately leads to the expansion of the lumen of the vessels, which is necessary to enhance intervillous blood flow. Superficial trophoblast invasion and incomplete transformation of the spiral arteries leads to the development of preeclampsia. At the same time, an insufficient degree of trophoblast invasion can lead either to the elimination of the embryo already in the first weeks of pregnancy, or, in the case of pregnancy progression, to limiting the growth potential of the placenta in the form of its hypoplasia, followed by the development of obstetric complications [3].

Формирование плаценты является инвазивным процессом и неотъемлемо связано с преобразованием базальной мембраны и экстрацеллюлярного матрикса, в котором принимают участие целый ряд ферментов, в том числе система матриксных металлопротеиназ (ММР) [7].The formation of the placenta is an invasive process and is inherently associated with the transformation of the basement membrane and the extracellular matrix, which involves a number of enzymes, including the matrix metalloproteinase (MMP) system [7].

ММР представляют собой тип цинк-зависимых эндопротеиназ, способных расщеплять почти все компоненты внеклеточного матрикса соединительных тканей. В настоящее время в литературе описано около 28 типов матриксных металлопротеиназ. Активность ММР в физиологических условиях регулируется рядом специфических ингибиторов, прежде всего тканевыми ингибиторами металлопротеиназ (ТIMP) [7]. ММР участвуют во многих физиологических процессах, таких как рост клеток, пролиферация, дифференцировка, миграция, апоптоз, эмбриональное развитие, морфогенез, репродукция и ремоделирование ткани, а также в различных патологических процессах: артритах, циррозе, злокачественном росте и сердечнососудистых заболеваниях. Во время беременности ММР и их ингибиторы играют главную роль в инвазии трофобласта в стенку матки. В свою очередь успешная инвазия трофобласта обеспечивает нормальное развитие тканей плаценты и эмбриона. На ранних стадиях беременности ММР подготавливают среду для последующего вторжения в плацентарное ложе. Экспрессия MMP-2 в первые 6-8 недель доминирует над экспрессией других ММР, играя главную роль в имплантации. В физиологических условиях TIMP-2 подавляет активность ММP-2 [17, 18, 21]. Нарушение регуляции секреции этих ферментов может препятствовать физиологической инвазии трофобласта [6, 15, 16].MMPs are a type of zinc-dependent endoproteinases capable of degrading almost all components of the extracellular matrix of connective tissues. Currently, about 28 types of matrix metalloproteinases have been described in the literature. MMP activity under physiological conditions is regulated by a number of specific inhibitors, primarily tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs) [7]. MMPs are involved in many physiological processes, such as cell growth, proliferation, differentiation, migration, apoptosis, embryonic development, morphogenesis, tissue reproduction, and remodeling, as well as in various pathological processes: arthritis, cirrhosis, malignant growth, and cardiovascular diseases. During pregnancy, MMPs and their inhibitors play a major role in trophoblast invasion of the uterine wall. In turn, successful invasion of the trophoblast ensures the normal development of placental and embryonic tissues. In the early stages of pregnancy, MMPs prepare the environment for subsequent invasion of the placental bed. The expression of MMP-2 in the first 6-8 weeks dominates the expression of other MMPs, playing a major role in implantation. Under physiological conditions, TIMP-2 suppresses MMP-2 activity [17, 18, 21]. Dysregulation of the secretion of these enzymes can prevent the physiological invasion of the trophoblast [6, 15, 16].

В последнее время уделяется большое внимание изучению инвазивных процессов трофобласта и гестационной перестройке спиральных артерий матки при невынашивании беременности [5]. Невынашивание беременности до настоящего времени остается важнейшей проблемой общества. Ежегодно 15-20% всех желанных беременностей завершаются самопроизвольным абортом [1, 10]. При этом в структуре самопроизвольных абортов наблюдается достоверное увеличение доли неразвивающейся беременности на сроках 5-8 недель и уменьшение частоты поздних выкидышей [4]. Частота неразвивающейся беременности среди случаев самопроизвольных выкидышей на ранних сроках возросла с 10,0-20,0% до 45,0-88,6% за последние годы, в среднем составляет 18,9% [11].Recently, much attention has been paid to the study of invasive trophoblast processes and gestational restructuring of the spiral arteries of the uterus in miscarriage [5]. Miscarriage still remains the most important problem of society. Every year, 15-20% of all desired pregnancies end in spontaneous abortion [1, 10]. At the same time, in the structure of spontaneous abortions, there is a significant increase in the proportion of non-developing pregnancies at terms of 5-8 weeks and a decrease in the frequency of late miscarriages [4]. The frequency of non-developing pregnancy among cases of spontaneous miscarriages in the early stages has increased from 10.0-20.0% to 45.0-88.6% in recent years, averaging 18.9% [11].

У 78-85% пациенток с угрозой невынашивания беременности персистируют цитомегаловирусы, что объясняется высокой их тератогенностью и способностью нарушать формирование плаценты и эмбриональных тканей [8, 9].In 78-85% of patients with the threat of miscarriage, cytomegaloviruses persist, which is explained by their high teratogenicity and ability to disrupt the formation of the placenta and embryonic tissues [8, 9].

Показано, что при цитомегаловирусной инфекции на ранних сроках беременности изменяются уровни связанных с имплантацией ММР-2 и ММР-9 в ворсинках хориона, что указывает на нарушение инвазивной способности, приводящей к невынашиванию беременности [22].It has been shown that during cytomegalovirus infection in early pregnancy, the levels of MMP-2 and MMP-9 associated with implantation in the chorionic villi change, which indicates a violation of the invasive ability leading to miscarriage [22].

Выше изложенные данные определяют необходимость разработки способов оценки нарушения инвазии трофобласта с целью определения факторов, приводящих к развитию первичной плацентарной недостаточности у женщин с цитомегаловирусной инфекцией в анамнезе.The above data determine the need to develop methods for assessing violations of trophoblast invasion in order to determine the factors leading to the development of primary placental insufficiency in women with a history of cytomegalovirus infection.

Изучение экспрессии MMP для понимания процессов имплантации, ремоделирования и плацентации, а также с целью диагностики осложнений беременности широко представлено в материалах исследований зарубежных авторов. При этом показано, что повышенный уровень MMP-9 в амниотической жидкости связан с преждевременным разрывом плодных оболочек [23]. В случаях гестационного диабета было установлено повышение уровня MMP -9 в сыворотке, тканях матки и плаценты [20].The study of MMP expression to understand the processes of implantation, remodeling and placentation, as well as to diagnose pregnancy complications, is widely presented in the research materials of foreign authors. At the same time, it has been shown that an increased level of MMP-9 in the amniotic fluid is associated with premature rupture of the membranes [23]. In cases of gestational diabetes, an increase in the level of MMP-9 in serum, tissues of the uterus and placenta was found [20].

Известны работы, в которых для прогноза плацентарных нарушений, используются уровни MMP-9 и цинка в амниотической жидкости [19], экспрессии рецептора эпидермального фактора роста, MMP-3 и MMP-9 при самопроизвольном аборте [12]. Оценена ассоциация полиморфизма в генах MMP-2, MMP -3, MMP-9 с риском привычного невынашивания беременности [13], а также с рецидивирующим спонтанным абортом [14].There are works in which the levels of MMP-9 and zinc in the amniotic fluid [19], the expression of the epidermal growth factor receptor, MMP-3 and MMP-9 in spontaneous abortion are used to predict placental disorders [12]. The association of polymorphisms in the MMP-2, MMP-3, and MMP-9 genes with the risk of recurrent miscarriage [13], as well as with recurrent spontaneous abortion [14], was assessed.

Вышеперечисленные факторы как изолировано, так и в сочетании друг с другом могут свидетельствовать о нарушении процессов формирования фетоплацентарного комплекса. В связи с этим, наибольшую диагностическую ценность имеют способы, позволяющие проводить оценку угрожающих состояний беременности, связанных с нарушением инвазии трофобласта, в том числе инфекционного генеза.The above factors, both in isolation and in combination with each other, may indicate a violation of the processes of formation of the fetoplacental complex. In this regard, methods that allow the assessment of threatening conditions of pregnancy associated with a violation of trophoblast invasion, including infectious genesis, have the greatest diagnostic value.

Аналогами данного изобретения являются приведенные выше способы, основными недостатками которых является трудоемкость [12] и неспецифичность [13, 14, 19].Analogues of this invention are the above methods, the main disadvantages of which are laboriousness [12] and non-specificity [13, 14, 19].

За прототип мы взяли исследования зарубежных авторов [22], которые исследовали in vitro влияние цитомегаловирусной инфекции на инвазию трофобласта на ранних сроках беременности путем определения экспрессии белка c-erbB-2, MMP-2, MMP-9.As a prototype, we took the studies of foreign authors [22], who studied in vitro the effect of cytomegalovirus infection on trophoblast invasion in early pregnancy by determining the expression of c-erbB-2, MMP-2, MMP-9 proteins.

Основными недостатками данного метода является то, что для повышения точности прогнозирования исследуются три параметра: белок c-erbB-2, MMP-2, MMP-9, тогда как наши исследования показали, что достаточно исследовать один показатель - MMP-9.The main disadvantages of this method are that three parameters are studied to improve the prediction accuracy: c-erbB-2 protein, MMP-2, MMP-9, while our studies have shown that it is enough to study one indicator - MMP-9.

Кроме того, данный способ предусматривает возможность оценки факторов риска нарушения инвазии трофобласта у женщин с самопроизвольным выкидышем, ассоциированным с цитомегаловирусной инфекцией.In addition, this method provides for the possibility of assessing risk factors for impaired trophoblast invasion in women with spontaneous miscarriage associated with cytomegalovirus infection.

Указанные факторы могут быть устранены в заявленном способе.These factors can be eliminated in the claimed method.

Техническим результатом, достигаемым при осуществлении изобретения, является оценка инвазии трофобласта у женщин с самопроизвольным выкидышем, ассоциированным с цитомегаловирусной инфекцией.The technical result achieved in the implementation of the invention is the assessment of trophoblast invasion in women with spontaneous miscarriage associated with cytomegalovirus infection.

Заявляемый технический результат достигается тем, что у женщин с самопроизвольным выкидышем, ассоциированным с цитомегаловирусной инфекцией, определяют в гомогенате ворсинчатого хориона содержание MMP-9 и при значении MMP-9, равном 19,21 нг/мл и менее, делают заключение о нарушении инвазии трофобласта.The claimed technical result is achieved by the fact that in women with spontaneous miscarriage associated with cytomegalovirus infection, the content of MMP-9 is determined in the chorionic villous homogenate and, at an MMP-9 value of 19.21 ng/ml or less, a conclusion is made about a violation of trophoblast invasion .

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается проводить оценку нарушения инвазии трофобласта у женщин с самопроизвольным выкидышем, ассоциированным с цитомегаловирусной инфекцией, по уровню MMP-9 в гомогенате ворсинчатого хориона. Ранее совокупность указанных признаков в оценке нарушения инвазии трофобласта, определяющего развитие первичной плацентрной недостаточности и невынашивание беременности, ассоциированное с цитомегаловирусной инфекцией, не использовалась.The novelty of the proposed method lies in the fact that for the first time it is proposed to assess the violation of trophoblast invasion in women with spontaneous miscarriage associated with cytomegalovirus infection, according to the level of MMP-9 in the villous chorion homogenate. Previously, the combination of these signs in the assessment of violations of trophoblast invasion, which determines the development of primary placental insufficiency and miscarriage associated with cytomegalovirus infection, was not used.

Способ осуществляют следующим образом:The method is carried out as follows:

У женщин с цитомегаловирусной инфекцией, исследуют ворсинчатый хорион, полученный при выскабливании стенок полости матки после самопроизвольного аборта. Определение уровня MMP-9 проводят методом иммуноферментного анализа с использованием тест-систем «R&D Systems, Inc., Human MMP-9 (total) Immunoassay» (США). Учет реакции проводят на иммуноферментном анализаторе Stat Fax-2100 (США) согласно протоколам для постановки иммуноферментного анализа фирмы-производителя в гомогенате ворсинчатого хориона.In women with cytomegalovirus infection, the villous chorion obtained by scraping the walls of the uterine cavity after spontaneous abortion is examined. Determination of the level of MMP-9 is carried out by enzyme immunoassay using test systems "R&D Systems, Inc., Human MMP-9 (total) Immunoassay" (USA). Accounting for the reaction is carried out on an enzyme immunoassay analyzer Stat Fax-2100 (USA) according to the protocols for setting the enzyme immunoassay of the manufacturer in the villous chorion homogenate.

При значении MMP-9 19,21 нг/мл и менее делают заключение о нарушении инвазии трофобласта у женщин с самопроизвольным выкидышем, ассоциированным с цитомегаловирусной инфекцией.If the MMP-9 value is 19.21 ng/ml or less, a conclusion is made about the violation of trophoblast invasion in women with spontaneous miscarriage associated with cytomegalovirus infection.

Использование способа позволяет оценить нарушение инвазии трофобласта у женщин с самопроизвольным выкидышем и дает возможность установить причину первичной плацентарной недостаточности в патогенезе невынашивания беременности цитомегаловирусной этиологии при наименьшей трудозатратности и материальных расходах на приобретение реактивов путем исследования одного биологического образца - ворсинчатого хориона и использования одного метода исследования - иммуноферментного анализа.The use of the method allows to assess the violation of trophoblast invasion in women with spontaneous miscarriage and makes it possible to establish the cause of primary placental insufficiency in the pathogenesis of miscarriage of cytomegalovirus etiology with the lowest labor costs and material costs for the purchase of reagents by examining one biological sample - the villous chorion and using one research method - enzyme immunoassay analysis.

Отличительными признаками данного способа являются: ранние сроки беременности до 12 недель, установлены диагностические величины MMP-9, при значении 19,21 нг/мл и менее делают заключение о нарушении инвазии трофобласта.Distinctive features of this method are: early pregnancy up to 12 weeks, diagnostic values of MMP-9 are established, at a value of 19.21 ng/ml or less, a conclusion is made about a violation of trophoblast invasion.

Проведен ROC-анализ для определения диагностической значимости оценки нарушения инвазии трофобласта: AUC=0,788; 95% доверительный интервал - 0,710-0,827; чувствительность - 92,6%, специфичность - 80,3%.Conducted ROC-analysis to determine the diagnostic significance of assessing violations of trophoblast invasion: AUC=0.788; 95% confidence interval - 0.710-0.827; sensitivity - 92.6%, specificity - 80.3%.

Таким образом, предложенный нами способ является эффективным для оценки нарушения инвазии трофобласта у женщин с самопроизвольным абортом, ассоциированным с цитомегаловирусной инфекцией, обладает высокой диагностической значимостью, чувствительностью и специфичностью.Thus, our proposed method is effective for assessing violations of trophoblast invasion in women with spontaneous abortion associated with cytomegalovirus infection, has a high diagnostic value, sensitivity and specificity.

Использование данного способа подтверждается примерами:The use of this method is confirmed by examples:

Пример 1. Пациентка О., 28 л., находилась на стационарном лечении в гинекологическом отделении Городской клинической больницы (г. Благовещенск). Поступила с болями внизу живота и кровянистыми выделениями из половых путей. Гинекологический анамнез осложнен: 1 медицинский аборт без осложнений.Example 1. Patient O., aged 28, was hospitalized in the gynecological department of the City Clinical Hospital (Blagoveshchensk). Came in with pain in the lower abdomen and bloody discharge from the genital tract. Gynecological history is complicated: 1 medical abortion without complications.

Проведено исследование крови на ЦМВ, УЗИ органов малого таза.Conducted a blood test for CMV, ultrasound of the pelvic organs.

По ИФА выявлены антитела IgM к ЦМВ, титр антител IgG - 1:1600, индекс авидности - 84%.ELISA revealed IgM antibodies to CMV, IgG antibody titer - 1:1600, avidity index - 84%.

По УЗИ: в полости матки плодное яйцо с эмбрионом 6 недель 2 дня. Сердцебиение определяется. Гипертонус по задней стенки матки. Внутренний зев сомкнут. Ниже плодного яйца гематома небольших размеров (отслойка ворсинчатого хориона).According to ultrasound: in the uterine cavity there is a fetal egg with an embryo 6 weeks 2 days. The heartbeat is determined. Hypertonicity along the posterior wall of the uterus. The internal pharynx is closed. Below the fetal egg, a hematoma of small size (detachment of the villous chorion).

Диагноз: Беременность 6-7 недель. Угрожающий самопроизвольный выкидыш. Хроническая цитомегаловирусная инфекция, стадия обострения.Diagnosis: Pregnancy 6-7 weeks. Threatened spontaneous miscarriage. Chronic cytomegalovirus infection, exacerbation stage.

На третий день стационарного лечения усилились боли внизу живота и кровянистые выделения из половых путей. Выставлен диагноз самопроизвольный выкидыш в ходу при сроке 7 недель беременности. Проведено выскабливание стенок полости матки.On the third day of inpatient treatment, pain in the lower abdomen and bloody discharge from the genital tract intensified. Diagnosed with spontaneous miscarriage in the course of 7 weeks of pregnancy. Conducted curettage of the walls of the uterine cavity.

По заявленному способу в гомогенате ворсинчатого хориона определено содержание MMP-9, которое составило 17,23 нг/мл.According to the claimed method, the content of MMP-9 was determined in the homogenate of the villous chorion, which amounted to 17.23 ng/ml.

Заключение: Нарушение инвазии трофобласта.Conclusion: Violation of trophoblast invasion.

Пример 2. Пациента М., 34 л., поступила в гинекологическое отделение Городской клинической больницы (г. Благовещенск) для проведения медицинского аборта. Гинекологический анамнез осложнен: 1 медицинский аборт без осложнений.Example 2 Patient M., aged 34, was admitted to the gynecological department of the City Clinical Hospital (Blagoveshchensk) for a medical abortion. Gynecological history is complicated: 1 medical abortion without complications.

Проведено обследование крови на ЦМВ, УЗИ органов малого таза.Blood tests for CMV, ultrasound of the pelvic organs were performed.

По ИФА титр антител IgG ЦМВ - 1:800, индекс авидности - 92%.According to ELISA, the titer of CMV IgG antibodies was 1:800, the avidity index was 92%.

По УЗИ: в полости матки плодное яйцо с эмбрионом 7 недель 3 дня. Сердцебиение определяется. Внутренний зев сомкнут.According to ultrasound: in the uterine cavity there is a fetal egg with an embryo 7 weeks 3 days. The heartbeat is determined. The internal pharynx is closed.

Диагноз: Беременность 7-8 недель. Хроническая цитомегаловирусная инфекция, латентная стадия.Diagnosis: Pregnancy 7-8 weeks. Chronic cytomegalovirus infection, latent stage.

При сроке 7 недель беременности проведен медицинский аборт.At a period of 7 weeks of pregnancy, a medical abortion was performed.

По заявленному способу в гомогенате хориона определено содержание MMP-9 - 22,34 нг/мл.According to the claimed method, the content of MMP-9 was determined in the chorion homogenate - 22.34 ng/ml.

Заключение: Физиологическое течение беременности. Угроза нарушения инвазии трофобласта отсутствует.Conclusion: Physiological course of pregnancy. There is no threat of disruption of trophoblast invasion.

Таким образом, достаточный уровень экспрессии MMP-9 может быть предиктором успешной инвазии трофобласта и имплантации, тогда как сниженная экспрессия данного фермента может свидетельствовать о развитии первичной плацентарной недостаточности.Thus, a sufficient level of MMP-9 expression may be a predictor of successful trophoblast invasion and implantation, while a reduced expression of this enzyme may indicate the development of primary placental insufficiency.

Предложенное изобретение позволяет эффективно выявлять причину невынашивания беременности у женщин с цитомегаловирусной инфекцией с целью профилактики репродуктивных потерь.The proposed invention makes it possible to effectively identify the cause of miscarriage in women with cytomegalovirus infection in order to prevent reproductive losses.

Список использованной литературыList of used literature

1. Акушерство: Национальное руководство / под. ред. Э.К. Айламазяна, В.И. Кулакова, В.Е. Радзинского, Г.М. Савельевой. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. 763.1. Obstetrics: National Guide / under. ed. E.K. Ailamazyan, V.I. Kulakova, V.E. Radzinsky, G.M. Savelyeva. M.: GEOTAR-Media, 2009. 763.

2. Булатова Ю.С., Тетруашвили Н.К., Высоких М.Ю. Провоспалительные факторы митохондриального происхождения в патогенезе привычных выкидышей и ранних преждевременных родов // Акушерство и гинекология. 2017. №8. С. 5-9.2. Bulatova Yu.S., Tetruashvili N.K., Vysokikh M.Yu. Pro-inflammatory factors of mitochondrial origin in the pathogenesis of recurrent miscarriages and early preterm labor. Obstetrics and Gynecology. 2017. No. 8. pp. 5-9.

3. Воднева Д.Н., Шмаков Р.Г., Щеголев А.И. Роль маркеров инвазии трофобласта в развитии преэклампсии и опухолевой прогрессии //Акушерство и гинекология. 2013. №11. С. 9-12.3. Vodneva D.N., Shmakov R.G., Shchegolev A.I. The role of markers of trophoblast invasion in the development of preeclampsia and tumor progression // Obstetrics and Gynecology. 2013. No. 11. pp. 9-12.

4. Гарина И.С., Радынова С.Б., Тюрина Н.А. Медицинская и социальная характеристика пациенток, прервавших беременность на поздних сроках путем медикаментозного аборта // Огарёв-Online. 2014. №12 (26). С. 8.4. Garina I.S., Radynova S.B., Tyurina N.A. Medical and social characteristics of patients who terminated a pregnancy in the later stages by medical abortion // Ogaryov-Online. 2014. No. 12 (26). S. 8.

5. Гриневич В.Н. Морфологические особенности гестационной перестройки спиральных артерий в первом триместре беременности при незрелости плаценты // Фундаментальные исследования. 2011. №5. С. 37-42.5. Grinevich V.N. Morphological features of gestational restructuring of the spiral arteries in the first trimester of pregnancy with placental immaturity. Fundamental research. 2011. No. 5. pp. 37-42.

6. Гриневич Т.Н., Аврукевич М.А., Бернадцкая А.А., Гринь А.А. Связь матриксных металлопротеиназ с ранними эмбриональными потерями у женщин с привычным невынашиванием беременности // Актуальные проблемы медицины: сб. материалов итоговой научно-практической конференции. Гродно, 2021. С. 209-211.6. Grinevich T.N., Avrukevich M.A., Bernadtskaya A.A., Grin' A.A. Relationship of matrix metalloproteinases with early embryonic losses in women with recurrent miscarriage // Actual problems of medicine: coll. materials of the final scientific and practical conference. Grodno, 2021, pp. 209-211.

7. Гришко Т.В., Ермола Ю.А. Морфогенез цитотрофобластической инвазии в течение осложненной преэклампсией беременности // Научно-методический электронный журнал «Концепт». 2017. Т. 42. С. 133-136.7. Grishko T.V., Ermola Yu.A. Morphogenesis of cytotrophoblastic invasion during pregnancy complicated by preeclampsia // Scientific and methodological electronic journal "Concept". 2017. V. 42. S. 133-136.

8. Петров Ю.А., Блесманович А.Е., Алехина А.Г. Риски для беременной и плода при цитомегаловирусной инфекции // Главный врач Юга России. 2019. Т.36, №1. С. 91-96.8. Petrov Yu.A., Blesmanovich A.E., Alekhina A.G. Risks for the pregnant woman and the fetus in case of cytomegalovirus infection // Chief Physician of the South of Russia. 2019. V.36, No.1. pp. 91-96.

9. Петрова К.К. Клинико-функциональные и гормональные причины раннего невынашивания беременности при цитомегаловирусной инфекции //Здоровье. Медицинская экология. Наука. 2017. №4(71). С. 111-113.9. Petrova K.K. Clinical, functional and hormonal causes of early miscarriage in cytomegalovirus infection // Health. Medical ecology. The science. 2017. No. 4 (71). pp. 111-113.

Радзинский В.Е., Димитрова В.И., Майскова И.Ю. Неразвивающаяся беременность. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. С. 23.Radzinsky V.E., Dimitrova V.I., Mayskova I.Yu. Non-developing pregnancy. M.: GEOTAR-Media, 2009. S. 23.

11. Радымова С.Б., Поршина О.В., Тувина М.О., Салах А.М. Исследование патогенетических аспектов неразвивающейся беременности у жительниц республики Мордовия // Медико-фармацевтический журнал. 2020. Т. 22, №6. С. 12-15.11. Radymova S.B., Porshina O.V., Tuvina M.O., Salakh A.M. Study of the pathogenetic aspects of non-developing pregnancy in women from the Republic of Mordovia // Medico-pharmaceutical journal. 2020. Vol. 22, No. 6. pp. 12-15.

12. Balci M, Özdemir G. Differential Expression of EGFR-1, MMP-3, and MMP-9 in Spontaneous Abortions, Induced Abortions, and Tubal Pregnancies // Turk Patoloji Derg. 2019; 35(1): 1-8. English. doi: 10.5146/tjpath.2018.01432.12. Balci M, Özdemir G. Differential Expression of EGFR-1, MMP-3, and MMP-9 in Spontaneous Abortions, Induced Abortions, and Tubal Pregnancies // Turk Patoloji Derg. 2019; 35(1): 1-8. English. doi: 10.5146/tjpath.2018.01432.

13. Association of MMP-2, MMP-3, and MMP-9 Polymorphisms with Susceptibility to Recurrent Pregnancy Loss / A. Behforouz et al. // Fetal Pediatr Pathol. 2021; 40(5): 378-386. doi: 10.1080/15513815.2019.1710879.13. Association of MMP-2, MMP-3, and MMP-9 Polymorphisms with Susceptibility to Recurrent Pregnancy Loss / A. Behforouz et al. // Fetal Pediatric Pathol. 2021; 40(5): 378-386. doi: 10.1080/15513815.2019.1710879.

14. Association of MMP2 and MMP9 gene polymorphisms with the recurrent spontaneous abortion: A meta-analysis / Y. Yan et al. // Gene. 2021; 30(767): 145173. doi: 10.1016/j.gene.2020.145173.14. Association of MMP2 and MMP9 gene polymorphisms with the recurrent spontaneous abortion: A meta-analysis / Y. Yan et al. // Gene. 2021; 30(767): 145173. doi: 10.1016/j.gene.2020.145173.

15. Expression and activity of matrix metalloproteinase 2 and 9 in human trophoblasts / K. Isaka et al. // Placenta. 2003; 24: 53-64. doi: 10.1053/plac.2002.0867.15. Expression and activity of matrix metalloproteinase 2 and 9 in human trophoblasts / K. Isaka et al. // Placenta. 2003; 24:53-64. doi: 10.1053/plac.2002.0867.

16. Comparative study of the immunohistochemical expression of metalloproteinases 2, 7 and 9 between clearly invasive carcinomas and "in situ" trophoblast invasion / I. Ioannidis et al. // Neoplasma.2010; 57: 20-8. doi: 10.4149/neo_2010_01_020.16. Comparative study of the immunohistochemical expression of metalloproteinases 2, 7 and 9 between clearly invasive carcinomas and "in situ" trophoblast invasion / I. Ioannidis et al. // Neoplasma.2010; 57:20-8. doi: 10.4149/neo_2010_01_020.

17. Moore C.S., Crocker S.J. An alternate perspective on the roles of TIMPs and MMPs in pathology // Am J Pathol. 2012; 180: 12-16. doi: 10.1016/j.ajpath.2011.09.008.17. Moore C.S., Crocker S.J. An alternate perspective on the roles of TIMPs and MMPs in pathology // Am J Pathol. 2012; 180:12-16. doi: 10.1016/j.ajpath.2011.09.008.

18. Circulating matrix metalloproteinase MMP-9 and MMP-2/TIMP-2 complex are associated with spontaneous early pregnancy failure / R. Nissi et al. // Reprod Biol Endocrinol. 2013; 15(11): 2. doi: 10.1186/1477-7827-11-2.18. Circulating matrix metalloproteinase MMP-9 and MMP-2/TIMP-2 complex are associated with spontaneous early pregnancy failure / R. Nissi et al. // Reprod Biol Endocrinol. 2013; 15(11): 2. doi: 10.1186/1477-7827-11-2.

19. Ozdamar O, Gün I, Müngen E, Atay V. The assessment of the relationship between amniotic fluid matrix metalloproteinase-9 and zinc levels with adverse obstetric outcomes // Arch Gynecol Obstet. 2014; 290(1): 59-64. doi: 10.1007/s00404-014-3179-7.19. Ozdamar O, Gün I, Müngen E, Atay V. The assessment of the relationship between amniotic fluid matrix metalloproteinase-9 and zinc levels with adverse obstetric outcomes // Arch Gynecol Obstet. 2014; 290(1): 59-64. doi: 10.1007/s00404-014-3179-7.

20. Metalloproteinase 2 activity and modulation in uterus from neonatal streptozotocin-induced diabetic rats during embryo implantation / C. Pustovrh et al. // Reprod Fertil Dev. 2002; 14(7-8): 479-485. doi: 10.1071/rd02001.20. Metalloproteinase 2 activity and modulation in uterus from neonatal streptozotocin-induced diabetic rats during embryo implantation / C. Pustovrh et al. // Reprod Fertil Dev. 2002; 14(7-8): 479-485. doi: 10.1071/rd02001.

21. Staun-Ram E, Goldman S, Gabarin D, Shalev E. Expression and importance of matrix metalloproteinase 2 and 9 (MMP-2 and -9) in human trophoblast invasion // Reprod Biol Endocrinol. 2004; 2: 59. doi: 10.1186/1477-7827-2-59.21. Staun-Ram E, Goldman S, Gabarin D, Shalev E. Expression and importance of matrix metalloproteinase 2 and 9 (MMP-2 and -9) in human trophoblast invasion // Reprod Biol Endocrinol. 2004; 2:59. doi: 10.1186/1477-7827-2-59.

22. In vitro study on human cytomegalovirus affecting early pregnancy villous EVT's invasion function / L. Tao et al. // Virol J. 2011; 11(8):114. doi: 10.1186/1743-422X-8-114.22. In vitro study on human cytomegalovirus affecting early pregnancy villous EVT's invasion function / L. Tao et al. // Virol J. 2011; 11(8):114. doi: 10.1186/1743-422X-8-114.

23. Vadillo-Ortega F, Hernandez A, Gonzalez-Avila G, Bermejo L, Iwata K, Strauss JF 3rd. Increased matrix metalloproteinase activity and reduced tissue inhibitor of metalloproteinases-1 levels in amniotic fluids from pregnancies complicated by premature rupture of membranes // Am. J. Obstet. Gynecol. 1996; 174(4): 1371-1376. doi: 10.1016/s0002-9378(96)70687-7.23. Vadillo-Ortega F, Hernandez A, Gonzalez-Avila G, Bermejo L, Iwata K, Strauss JF 3rd. Increased matrix metalloproteinase activity and reduced tissue inhibitor of metalloproteinases-1 levels in amniotic fluids from pregnancies complicated by premature rupture of membranes // Am. J. Obstet. Gynecol. 1996; 174(4): 1371-1376. doi: 10.1016/s0002-9378(96)70687-7.

Claims

A method for assessing violations of trophoblast invasion in women with spontaneous miscarriage associated with cytomegalovirus infection by examining the chorionic villous homogenate by the enzyme immunoassay method, characterized in that the content of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) is determined in the chorionic villous homogenate and at the value of MMP-9, equal to or less than 19.21 ng/ml, a conclusion is made about a violation of trophoblast invasion.