RU2781968C1 - Биомедицинский клеточный продукт на основе мезенхимальных стромальных клеток млекопитающих и гексапептида - Google Patents
Биомедицинский клеточный продукт на основе мезенхимальных стромальных клеток млекопитающих и гексапептида Download PDFInfo
- Publication number
- RU2781968C1 RU2781968C1 RU2022102709A RU2022102709A RU2781968C1 RU 2781968 C1 RU2781968 C1 RU 2781968C1 RU 2022102709 A RU2022102709 A RU 2022102709A RU 2022102709 A RU2022102709 A RU 2022102709A RU 2781968 C1 RU2781968 C1 RU 2781968C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bmcp
- hexapeptide
- mscs
- cells
- viability
- Prior art date
Links
- 210000004271 bone marrow stromal cells Anatomy 0.000 title claims abstract description 80
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 title claims abstract description 70
- 229940100601 Interleukin-6 Drugs 0.000 claims abstract description 34
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 claims abstract description 34
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims abstract description 34
- 208000009856 Lung Disease Diseases 0.000 claims abstract description 22
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 14
- 208000006673 Asthma Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 230000001154 acute Effects 0.000 claims abstract description 10
- 230000002757 inflammatory Effects 0.000 claims abstract description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 claims abstract description 8
- 200000000015 coronavirus disease 2019 Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 206010014561 Emphysema Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 12
- 230000035899 viability Effects 0.000 abstract description 38
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 22
- 210000001959 BMCP Anatomy 0.000 abstract description 10
- 101700070083 Bmcp Proteins 0.000 abstract description 10
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 abstract description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- MWWPXANGCUTKTQ-ZJOUEHCJSA-N (4S)-4-amino-5-[[(2R)-1-(carboxymethylamino)-3-[2-[[(2S)-2,5-diaminopentanoyl]amino]-4-methoxy-5-[(1-methylpiperidin-4-yl)carbamoyl]phenyl]sulfanyl-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical group COC1=CC(NC(=O)[C@@H](N)CCCN)=C(SC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O)C=C1C(=O)NC1CCN(C)CC1 MWWPXANGCUTKTQ-ZJOUEHCJSA-N 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 27
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 20
- 210000004072 Lung Anatomy 0.000 description 14
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000001185 Bone Marrow Anatomy 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical group [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 210000000577 Adipose Tissue Anatomy 0.000 description 6
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 6
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- 210000002901 Mesenchymal Stem Cells Anatomy 0.000 description 5
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 5
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 5
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 239000002609 media Substances 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 5
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 description 5
- VQFKFAKEUMHBLV-BYSUZVQFSA-N 1-O-(α-D-galactosyl)-N-hexacosanoylphytosphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@H]([C@H](O)[C@H](O)CCCCCCCCCCCCCC)CO[C@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQFKFAKEUMHBLV-BYSUZVQFSA-N 0.000 description 4
- 230000001464 adherent Effects 0.000 description 4
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 4
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 239000008238 pharmaceutical water Substances 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 206010006451 Bronchitis Diseases 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 208000006897 Interstitial Lung Disease Diseases 0.000 description 3
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 3
- 229940029983 VITAMINS Drugs 0.000 description 3
- 229940021016 Vitamin IV solution additives Drugs 0.000 description 3
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 3
- 239000000560 biocompatible material Substances 0.000 description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 3
- 230000001082 cryoprotectant Effects 0.000 description 3
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 3
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 229930003231 vitamins Natural products 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 2qpq Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 206010069351 Acute lung injury Diseases 0.000 description 2
- 206010006458 Bronchitis chronic Diseases 0.000 description 2
- 210000000805 Cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N D-Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 208000004852 Lung Injury Diseases 0.000 description 2
- 230000036091 Metabolic activity Effects 0.000 description 2
- 208000005333 Pulmonary Edema Diseases 0.000 description 2
- 206010037423 Pulmonary oedema Diseases 0.000 description 2
- 206010069363 Traumatic lung injury Diseases 0.000 description 2
- 210000003954 Umbilical Cord Anatomy 0.000 description 2
- 230000001058 adult Effects 0.000 description 2
- 230000000735 allogeneic Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M buffer Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000001684 chronic Effects 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 2
- 229940050411 fumarate Drugs 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N fumaric acid Chemical compound OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001965 increased Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 231100000515 lung injury Toxicity 0.000 description 2
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 2
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-L malate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C(O)CC([O-])=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 238000010197 meta-analysis Methods 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic Effects 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic Effects 0.000 description 2
- 230000001575 pathological Effects 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 2
- 230000000241 respiratory Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N β-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-L 2-oxoglutarate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC(=O)C([O-])=O KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- WHBMMWSBFZVSSR-UHFFFAOYSA-M 3-hydroxybutyrate Chemical compound CC(O)CC([O-])=O WHBMMWSBFZVSSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010000269 Abscess Diseases 0.000 description 1
- 229940022663 Acetate Drugs 0.000 description 1
- 229960001230 Asparagine Drugs 0.000 description 1
- 229960005261 Aspartic Acid Drugs 0.000 description 1
- 206010060945 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000000988 Bone and Bones Anatomy 0.000 description 1
- 206010061736 Bronchitis bacterial Diseases 0.000 description 1
- 208000007451 Chronic Bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 229940001468 Citrate Drugs 0.000 description 1
- 102000020504 Collagenase family Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase family Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N D-Mannitol Natural products OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N 0.000 description 1
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N D-serine Chemical compound OC[C@@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- 206010061428 Decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 208000002249 Diabetes Complications Diseases 0.000 description 1
- 208000000718 Duodenal Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 108010065372 Dynorphins Proteins 0.000 description 1
- 210000000744 Eyelids Anatomy 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 229960002989 Glutamic Acid Drugs 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 208000006572 Human Influenza Diseases 0.000 description 1
- 229960000310 ISOLEUCINE Drugs 0.000 description 1
- 210000000987 Immune System Anatomy 0.000 description 1
- 206010022000 Influenza Diseases 0.000 description 1
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 229940076144 Interleukin-10 Drugs 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 210000001503 Joints Anatomy 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 210000004185 Liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 210000001370 Mediastinum Anatomy 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 210000003205 Muscles Anatomy 0.000 description 1
- 102100002857 PDYN Human genes 0.000 description 1
- 206010033647 Pancreatitis acute Diseases 0.000 description 1
- 229960005190 Phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- 210000002826 Placenta Anatomy 0.000 description 1
- 206010035653 Pneumoconiosis Diseases 0.000 description 1
- 206010035742 Pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- 208000005069 Pulmonary Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 229940076788 Pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 208000003561 Respiratory Tract Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010038683 Respiratory disease Diseases 0.000 description 1
- 206010038687 Respiratory distress Diseases 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 210000003491 Skin Anatomy 0.000 description 1
- 208000005279 Status Asthmaticus Diseases 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 210000004490 Subcutaneous Fat, Abdominal Anatomy 0.000 description 1
- 206010051379 Systemic inflammatory response syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 210000002303 Tibia Anatomy 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N Trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010001801 Tumor Necrosis Factor-alpha Proteins 0.000 description 1
- 206010047461 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 208000001756 Virus Disease Diseases 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Vitamin C Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Chemical class CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 201000003229 acute pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000000240 adjuvant Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000271 cardiovascular Effects 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000003841 chloride salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture media Substances 0.000 description 1
- 230000002338 cryopreservative Effects 0.000 description 1
- 238000010192 crystallographic characterization Methods 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cells Anatomy 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 201000001155 extrinsic allergic alveolitis Diseases 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000003517 fume Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000000267 glycino group Chemical group [H]N([*])C([H])([H])C(=O)O[H] 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic Effects 0.000 description 1
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 200000000018 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 238000007443 liposuction Methods 0.000 description 1
- 201000009673 liver disease Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000001404 mediated Effects 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 230000037023 motor activity Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 238000002663 nebulization Methods 0.000 description 1
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 description 1
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 description 1
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000000414 obstructive Effects 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organs Anatomy 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reduced Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory Effects 0.000 description 1
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing Effects 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229940086735 succinate Drugs 0.000 description 1
- 239000008362 succinate buffer Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival Effects 0.000 description 1
- 230000002459 sustained Effects 0.000 description 1
- 201000010874 syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 230000004102 tricarboxylic acid cycle Effects 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological Effects 0.000 description 1
Abstract
Настоящее изобретение относится к клеточной биологии и медицине, в частности к биомедицинскому клеточному продукту для лечения болезни легких, связанной с повышенными уровнями интерлейкина-6, в виде водной суспензии. Продукт включает мезенхимальные стромальные клетки млекопитающих в количестве от 0,1×106 до 10,0×106 клеток/мл и гексапептид формулы H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH или его фармацевтически приемлемую соль в количестве от 0,1 до 10,0 мг/мл. Предпочтительной фармацевтически приемлемой солью изобретения является диацетат. Указанный продукт используется в лечении болезни легких, связанной с повышенными уровнями интерлейкина-6, выбранной из группы, состоящей из острого воспалительного поражения легких, острого респираторного дистресс-синдрома, пневмонии, хронической обструктивной болезни легких, эмфиземы, астмы, COVID-19. Настоящее изобретение позволяет повысить жизнеспособность МСК в составе БМКП за счёт использования гексапептида H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH и, таким образом, улучшить терапевтические характеристики этих продуктов. 3 з.п ф-лы, 12 табл., 6 пр.
Description
Область изобретения
Настоящее изобретение относится к области здравоохранения. Более конкретно, изобретение относится к биомедицинскому клеточному продукту на основе мезенхимальных стромальных клеток млекопитающих.
Сведения о предшествующем уровне техники
К биомедицинским клеточным продуктам (БМКП) относят комплексы, состоящие из клеточной линии (клеточных линий) и вспомогательных веществ либо из клеточной линии (клеточных линий) и вспомогательных веществ в сочетании с прошедшими государственную регистрацию лекарственными препаратами для медицинского применения (далее - лекарственные препараты) и (или) медицинскими изделиями.
К мезенхимальным стромальным клеткам (МСК), известным также как мезенхимальные стволовые клетки, относят клеточные линии, удовлетворяющие критериям, установленным Международным обществом клеточной терапии (ISCT). Dominici M et al. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy 8(4):315-7, 2006. Galipeau J et al., International Society for Cellular Therapy perspective on immune functional assays for mesenchymal stromal cells as potency release criterion for advanced phase clinical trials. Cytotherapy 18, 151-159, 2016. МСК могут быть выделены из различных тканей млекопитающих, включая костный мозг, жировую ткань, пуповину, кровь, студень Вартона, бронхеоальвеолярный лаваж и т.д. После выделения МСК культивируют вне организма. Терапевтически эффективные количества МСК могут быть использованы для лечения болезней печени, осложнений сахарного диабета, остеоартрита, сердечно-сосудистых и др. заболеваний при разных способах введения. Gottipamula S et al. Mesenchymal Stromal Cells: Basics, Classification, and Clinical Applications. Journal of Stem Cells, 13(1): 23-47, 2018. Однако МСК в составе БМКП нестабильны и должны быть введены пациенту в течение суток до начала потери ими своих биологических характеристик. Стандартный метод длительного хранения МСК - криоконсервация, которая сопряжена с рисками, такими как: (1) снижение метаболической активности, жизнеспособности, и терапевтической эффективности клеток после цикла замораживание-размораживание; (2) цитотоксичность криопротекторов. Таким образом, существует необходимость в повышении жизнеспособности МСК в составе БМКП, чтобы сохранять терапевтические свойства МСК при хранении более 24 часов без применения криоконсервантов и/или повышать выживаемость МСК в составе БМКП после криоконсервации (цикла заморозки-разморозки). García-Bernal D et al. The Current Status of Mesenchymal Stromal Cells: Controversies, Unresolved Issues and Some Promising Solutions to Improve Their Therapeutic Efficacy. Front Cell Dev Biol. 2021 Mar 16;9:650664.
Гексапептид H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH представляет собой аналог эндогенного пептида динорфина 1-6, полученный заменой Gly на D-Ala в положении 2 аминокислотной последовательности. Уксуснокислая соль гексапептида в форме инъекций является коммерчески доступным лекарственным средством в Российской Федерации для лечения заболеваний пищеварительной системы, в частности острого панкреатита, язв желудка и двенадцатиперстной кишки, с историей клинического применения более 30 лет. Гексапептид продемонстрировал широкий спектр биологических активностей в диапазоне доз от 1 до 1000 мкг/кг массы тела млекопитающего. Использование гексапептида в виде внутримышечных инъекций или внутривенных вливаний, раскрыто в патентах RU 2032422, 2241488, 2198641, 2104717, 2270025, 2351334, 2343885, 2405534, 2363455, 2515550, 2180598, 2635083, 2436588, 2473325, 2144831, 2646569, 2200026, 2146530, 2155608, 2185176, 2139725, 2266130, 2326661, 2299742, 2218896, 2416398, 2318503, 2430753, 2299438, 2258529, 2099077, 2122415, 2261713, 2006039, 2366416, 2228762, 2185849, 2496493, 2366417, 2017488, 2167671, 2181564, 2284192, 2290203, 2286793, 2366432, 2299065, 2429002, 2196603, 2142814, 2285522, 2203693, 2230549, 2180591, 2142736, 2113856, 2217139, 2266752, 2261722, 2362580, 2223741, 222814869, 2217186, 2266130, 2326661, 2299742, 2218896, 2657416, 2416398, 2318503, 2430753, 2299438, 2258529, 2099077, 2122415, 2261713, 2006039, 2366416. Кроме того, гексапептид используется в виде внутрилегочных ингаляций для лечения заболеваний легких в виде водного раствора с содержанием гексапептида от 0,1 мг/мл до 100 мг/мл, что раскрыто в патентах RU 2728821, 2728938, 2728939, 2733269, 2737799, 2739573. Однако способность гексапептида H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH повышать стабильность МСК и таким образом улучшать терапевтические характеристики БМКП на их основе неизвестна из уровня техники.
Интерлейкин-6 (ИЛ-6) представляет собой медиатор воспаления, который вырабатывается клетками иммунной ситемы при болезнях легких как нормальный ответ на инфекцию или повреждение тканей. Однако чрезмерная продукция ИЛ-6 оказывает патологическое действие, вызывая синдром системной воспалительной реакции, состояние гиперкоагуляции при острых и хронических иммуноопосредованных заболеваниях легких. Tanaka T et al. Interleukin (IL-6) Immunotherapy. Cold Spring Harb Perspect Biol. 2018, 10(8):a028456. ИЛ-6 продуцируется первичными эпителиальными клетками легких при астме и других болезнях легких, причем уровень ИЛ-6 определяет тяжесть нарушений функций легких. Rincon M, Irvin CG. Role of IL-6 in asthma and other inflammatory pulmonary diseases. Int J Biol Sci. 2012; 8(9):1281-90. Уровень IL-6 является прогностическим фактором увеличения смертности при хронической обструктивной болезни легких. Celli BR et al. Inflammatory biomarkers improve clinical prediction of mortality in chronic obstructive pulmonary disease. Am J Respir Crit Care Med. 2012, 185(10):1065-72. Устойчивое повышение уровней ИЛ-6 наблюдается при остром респираторном дистресс-синдроме взрослых (ОРДС), возникающем вследствие вирусных и бактериальных инфекций, в том числе при COVID-19. McGonagle D et al. Autoimmun Rev. 2020, 19(6):102537. Повышение уровней IL-6 является патологическим фактором при фиброзе легких. Papiris SA et al. Cytokine. 2018, 102:168-172. Повышение уровней ИЛ-6 у пациентов с пневмонией коррелирует с тяжестью заболевания и является биомаркером смертности от пневмонии. Andrijevic I et al. Ann Thorac Med. 2014, 9(3):162-7. Повышенные уровни ИЛ-6 связаны с тяжелым течением и смертностью при COVID-19. Henry BM et al., Hematologic, biochemical and immune biomarker abnormalities associated with severe illness and mortality in coronavirus disease 2019 (COVID-19): a meta-analysis. Clin. Chem. Lab. Med. 2020;58(7):1021-1028. Udomsinprasert W et al., Circulating levels of interleukin-6 and interleukin-10, but not tumor necrosis factor-alpha, as potential biomarkers of severity and mortality for COVID-19: systematic review with meta-analysis. J. Clin. Immunology. 2021;41(1):11-22. Таким образом, существует необходимость в снижении патологически повышенных уровней ИЛ-6 для снижения тяжести болезней легких и снижения риска смертности от этих заболеваний.
Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что гексапептид H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH повышает жизнеспособность МСК в составе БМКП и, таким образом, улучшает терапевтические характеристики этих продуктов, например, в лечении заболеваний легких, связанных с воспалением, в котором чрезмерная продукция интерлейкина-6 (ИЛ-6) является важным патогенетическим фактором.
Описание изобретения
Настоящее изобретение относится к биомедицинскому клеточному продукту для лечения болезни легких, связанной с повышенными уровнями интерлейкина-6, в виде водной суспензии, включающему мезенхимальные стромальные клетки млекопитающих в количестве от 0,1×106 до 10,0×106 клеток/мл и гексапептид формулы H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH (I) или его фармацевтически приемлемую соль в количестве от 0,1 до 10,0 мг/мл.
Техническим результатом настоящего изобретения является повышение жизнеспособности биомедицинского клеточного продукта (БМКП), содержащего мезенхимальные стромальные клетки (МСК) млекопитающих, за счет введения в состав продукта гексапептида (I), что снижает потерю биологических характеристик МСК в период между приготовлением БМКП и введением последнего пациенту и, таким образом, ведет к повышению терапевтической эффективности БМКП.
Еще одним техническим результатом настоящего изобретения является то, что повышение жизнеспособности БМКП и связанное с этим снижение потери биологических характеристик МСК в период между приготовлением БМКП и введением последнего пациенту повышает эффективность БМКП в лечении симптомов воспаления, в том числе в подавлении продукции интерлейкина-6 (ИЛ-6).
Термин «биомедицинский клеточный продукт», сокращенно БМКП, относится к комплексу, состоящему из клеточной линии (клеточных линий) и вспомогательных веществ либо из клеточной линии (клеточных линий) и вспомогательных веществ в сочетании с прошедшими государственную регистрацию лекарственными препаратами для медицинского применения (далее - лекарственные препараты) и (или) медицинскими изделиями.
Термин «мезенхимальные стромальные клетки», эквивалентный термин «мезенхимальные стволовые клетки», сокращенно МСК, относится к любой клеточной линии, удовлетворяющей критериям, выработанным Международным обществом клеточной терапии (ISCT) как описано в Dominici M et al. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy 8(4):315-7, 2006 и/или в Galipeau J et al., International Society for Cellular Therapy perspective on immune functional assays for mesenchymal stromal cells as potency release criterion for advanced phase clinical trials. Cytotherapy 18, 151-159, 2016.
При осуществлении настоящего изобретения, МСК могут быть выделены из любой ткани млекопитающего, содержащей эти клетки.
В предпочтительных вариантах осуществления изобретения, МСК выделяют из ткани млекопитающего, выбранной из группы состоящей из костного мозга, жировой ткани, пуповины, и плаценты. В наиболее предпочтительном варианте осуществления изобретения, МСК выделяют из костного мозга или жировой ткани.
Приготовление МСК может быть выполнено согласно процедурам, известным из технического уровня, например, как описано в Mosna F et al. Human bone marrow and adipose tissue mesenchymal stem cells: a user's guide.Stem Cells Dev. 2010 Oct;19(10):1449-70. Приготовление МСК млекопитающего может включать следующие этапы: выделение клеток из ткани млекопитающего (например, костного мозга или жировой ткани), культивацию клеток в подходящей среде для увеличения количества клеток, контроль качества, включающий проверку клеток на жизнеспособность и соответствие критериям ISCT для МСК.
Гексапептид формулы (I) имеет брутто-формулу C35H51N9O8, молекулярную массу 725,84 дальтон и регистрационный номер CAS 81733-79-1 в качестве идентификатора.
Настоящее изобретение относится ко всем фармацевтически приемлемым солям и сольватам гексапептида формулы (I). Неисключительные примеры таких фармацевтически приемлемых солей включают хлорид, бромид, сульфат, ацетат, пируват, малат, фумарат и цитрат. В предпочтительном варианте осуществления изобретения, фармацевтически приемлемой солью гексапептида формулы (I) является диацетат, химическое название тирозил-D-аланил-глицил-фенилаланил-лейцил-аргинина диацетат.
Гексапептид формулы (I) может быть получен любым способом, известным в данной области, в частности твердофазным синтезом. Гексапептид формулы (I) и его соли и сольваты коммерчески доступны, например, в каталоге Bachem №4030569.0100. Гексапептид (I) диацетат представляет собой коммерчески доступный активный фармацевтический ингредиент, который выпускается несколькими производителями в Российской Федерации.
При осуществлении изобретения, БМКП в виде водной суспензии приготавливается на основе фармацевтической воды с добавлением регуляторов тоничности.
Неисключительные примеры регуляторов тоничности включают подходящий осмотически активный неорганический агент, такой как хлориды, сульфаты или фосфаты натрия, кальция или магния; подходящий осмотически активный органический агент, такой как сахара и сахарные спирты, в частности трегалоза, маннитол и сорбитол. Предпочтительным регулятором тоничности является хлорид натрия в количестве от 0,1 до 0,9% от указанной композиции.
Предпочтительно, БМКП в виде водной суспензии приготавливается на основе физиологического раствора (раствор 0,9% NaCl в фармацевтической воде).
Используемый здесь термин «фармацевтическая вода» относится к воде, которая соответствует требованиям нормативных документов Российской Федерации и/или других стран, например, требования ФС.2.2.0020.15 «Очищенная вода» и требования ФС.2.2.0019.15 «Вода для инъекций» фармакопеи Российской Федерации; и/или CPMP/QWP/158/01 «Note for Guidance on Quality of Water for Pharmaceutical Use», EMEA, 2002. Предпочтительно, фармацевтическая вода выбирается из группы, состоящей из очищенной воды и воды для инъекций.
При осуществлении изобретения БМКП может содержать другие вспомогательные вещества. Неисключительные примеры вспомогательных веществ включают метаболиты, буферные системы, криопротекторы, витамины, и белки (например, сывороточный альбумин).
Неисключительные примеры метаболитов для поддержания метаболической активности МСК в водной суспензии включают глюкозу, бета-гидроксибутират; субстраты цикла трикарбоновых кислот такие как цитрат, 2-кетоглутарат, сукцинат, фумарат, малат; аминокислоты такие как аланин, аспарагин, аспарагиновая кислота, гистидин, глицин, глутамин, глютаминовая кислота, пролин, серин, тирозин, валин, изолейцин, лейцин, лизин, метионин, треонин, триптофан, и фениалалнин.
Используемый здесь термин «буферная система» описывает комбинацию кислоты и основания в количествах, достаточных для поддержания желаемого уровня pH. Неисключительные примеры фармацевтически приемлемых буферных систем для поддержания рН в диапазоне от 3,0 до 8,5 описаны в Фармакопее Российской Федерации (OFS.1.3.0003.15 «Буферные растворы») и включают ацетатный буфер, цитратный буфер, сукцинатный буфер, фосфатный буфер, и бикарбонатный буфер.
Неисключительные примеры криопротекторов включают диметилсульфоксид и пропиленгликоль.
Неисключительные примеры витаминов включают аскорбиновую кислоту и никотинамид.
При осуществлении изобретения, БМКП в виде водной суспезии приготавливается путем смешивания МСК, гексапептида (I) и вспомогательных веществ в воде в асептических условиях. Полученное БМКП может быть использовано для лечения заболеваний, для которых эффективность МСК уже известна из уровня техники, например, для регенерации органов и тканей, таких как кожа, печень, легкие, сердечно-сосудистая система, суставы. Кроме того, БМКП настоящего изобретения могут быть использованы в лечении заболеваний, сопровождающихся воспалением, в том числе воспалительных заболеваний легких.
При осуществлении настоящего изобретения, БМКП может приготавливаться как аутологичный биомедицинский клеточный продукт, аллогенный клеточный продукт, и комбинированный биомедицинский клеточный продукт.
Термин «аутологичный», используемый в настоящем изобретении относится к биомедицинскому клеточному продукту, содержащему в своем составе клеточную линию (клеточные линии), полученную из биологического материала определенного млекопитающего (например, человека), и предназначенный для применения этому же млекопитающему (человеку).
Термин «аллогенный», используемый в настоящем изобретении относится к биомедицинскому клеточному продукту, содержащему в своем составе клеточную линию (клеточные линии), полученную из биологического материала определенного млекопитающего (например, человека), и предназначенный для применения другому млекопитающему (человеку).
Термин «комбинированный», используемый в настоящем изобретении относится к биомедицинскому клеточному продукту, содержащему в своем составе клеточные линии, полученные из биологического материала нескольких млекопитающих (людей), и предназначенный для применения одному из них.
При осуществлении изобретения, БМКП могут быть введены пациенту разными путями, включая без ограничения инъекционный (инфузионный) путь введения, наружно, ректально, а также путем внутрилегочных ингаляций.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения, БМКП вводится ингаляционно.
Термин «ингаляция», используемый в настоящем изобретении относится к вдыханию паров или дисперсии твердых или жидких частиц содержащих лекарственное средство. В конкретных примерах вдыхание может происходить через распылитель или другое устройство для доставки аэрозоля.
В одном из воплощений настоящего изобретения, для получения терапевтического эффекта млекопитающему с болезнью легких вводят эффективные количества БМКП ингаляционно в виде аэрозоля с помощью небулайзера однократно или многократно, в течение одних суток или нескольких суток.
Термин «небулайзер» обозначает устройство для ингаляций, обеспечивающее преобразование жидкого лекарственного средства для распыления в дисперсию в газовой среде для доставки действующего вещества в легкие. Примеры небулайзеров включают компрессорные, ультразвуковые, либо небулайзеры иного типа.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения, БМКП вводят в легкие в форме аэрозоля с размером частиц от 0,1 до 10,0 микрон, более предпочтительно от 1 до 5 микрон.
Используемый здесь термин «млекопитающее» относится к любому животному, классифицированному как млекопитающее, например, мыши, крысе, и человеку. Предпочтительным млекопитающим является человек.
Используемый здесь термин «лечение» означает предотвращение, уменьшение или ингибирование развития заболевания, к которому применяется этот термин, или одного или нескольких симптомов этого заболевания. Термин «лечение» относится как к терапевтическому лечению, так и к профилактическим мерам. Те, кто нуждается в лечении, включают тех, у кого уже есть расстройство, тех, кто склонен иметь расстройство, теху у кого диагностировано расстройство, или тех, у кого расстройство должно быть предотвращено.
Термин «болезнь легких» означает болезнь органов дыхания, для которой нежелательное повышение уровней интерлейкина-6, как фактора, влияющего на тяжесть заболевания известно из уровня техники. К таким болезням легких относятся болезни классифицированные под кодами J00-J99 согласно Международной Классификации Болезней 10-го пересмотра (МКБ-10). Предпочтительно, к таким болезням легких относятся астма (код J45), острая тяжелая астма (J46), хронический астматический (обструктивный) бронхит (J44.-), хроническая обструктивная астма (J44.-), эозинофильная астма (J82), болезни легкого, вызванные внешними агентами (J60-J70) астматический статус (J46), бронхит (J40), простой и слизисто-гнойный хронический бронхит (J41), хронический бронхит (J42), эмфизема (J43), хроническая обструктивная легочная болезнь (коды J44.0; J44.1; J44.8; J44.9), грипп и пневмония (J10-J18); пневмокониоз, вызванный внешним агентом (J60-J65); болезнь дыхательных путей, вызванная специфической органической пылью (J66); гиперсенситивный пневмонит, вызванный органической пылью (J67); респираторные состояния, вызванные вдыханием химических веществ, газов, дымов и паров (J68); пневмонит, вызванный твердыми веществами и жидкостями (J69); респираторные состояния, вызванные другими внешними агентами (J70); синдром респираторного расстройства [дистресса] у взрослого (J80); легочный отек (J81); альвеолярные и парието-альвеолярные нарушения (J84.0); другие интерстициальные легочные болезни с упоминанием о фиброзе (J84.1); другие уточненные интерстициальные легочные болезни (J84.8); интерстициальная легочная болезнь, неуточненная (J84.9); абсцесс легкого и средостения (J85).
В предпочтительном воплощении настоящего изобретения, болезнь легкого выбирается из группы, состоящей из острого воспалительного поражения легких, острого респираторного дистресс-синдрома, пневмонии, хронической обструктивной болезни легких, эмфиземы, астмы, COVID-19..
Следующие примеры демонстрируют изобретение. Примеры иллюстрируют изобретение и не предназначены для ограничения объема изобретения тем или иным образом.
Пример 1
Пример иллюстрирует получение МСК.
Жировая ткань человека была получена простой липосакцией из подкожных жиров брюшной полости с информированного согласия донора, после чего подвергнута последовательно действию коллагеназы (1 мг/мл) при осторожном перемешивании в течение 60 мин при 37°С, фильтрованию через фильтр 100 мкм, и центрифугированию 1500 об/мин×5 мин. Осадок ресуспендировали в среде DMEM (Gibco), содержащей 10% фетальной бычей сыворотки (FBS). Суспензию клеток повторно центрифугировали 1500 об/мин×5 мин. Супернатант отбросили, осадок клеток собрали. Фракцию клеток культивировали в течение ночи при 37°C/5% CO2 в среде DMEM, содержащей 10% FBS. Через 24 часа неприлипающие клетки удалили промыванием в фосфатно-солевом буфере (PBS). Прикрепленные клетки культивировали со сменой среды в первый раз через 48 часов после посева и затем каждые 72 часа. При достижении слияния колоний клеток на 80%, клетки собирали, ресуспендировали и повторно засевали. Процедуру повторяли несколько раз при достижении слияния колоний на 90%. Подтверждение фенотипа МСК проводили согласно критериям описанным в Dominici M et al. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy 8(4):315-7, 2006. Полученные таким образом МСК использовали в получении БМКП.
Пример 2
Пример иллюстрирует БМКП настоящего изобретения.
Таблица 1. Состав БМКП
Ингредиент | Содержание |
Мезенхимальные стромальные клетки | 0,1x106 - 10,0x106 клеток |
Гексапептид (I) | 0,1 – 10,0 мг |
Физ.раствор | 1 мл |
Для приготовления БМКП в виде водной суспензии, МСК из примера 1 ресуспендируют в 1 мл водного раствора, полученного растворением гексапептида (I) в воде физ. растворе в пропорциях, указанных в таблице 1.
Пример 3
Пример иллюстрирует жизнеспособность МСК в составе БМКП настоящего изобретения.
Для исследования эффекта гексапептида (I) на жизнеспособность МСК в составе БМКП при +4°С были получены БМКП, содержащие (№№1-3) или не содержащие (№№4-6) гексапептид (I), см. таблицу 2.
Таблица 2. Составы БМКП, использованные в исследованиях жизнеспособности МСК в течение 48 часов при +4°С.
БМКП | ||||||
Ингредиент | №1 | №2 | №3 | №4 | №5 | №6 |
МСК, клеток/мл | 0,1×106 | 1,0×106 | 10×106 | 0,1×106 | 1,0×106 | 10,0×106 |
Гексапептид (I), мг/мл | 0,1 | 1,0 | 10,0 | нет | нет | нет |
Физ.раствор, мл | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
БМКП №№1-6 получены смешением МСК с другими компонентами в пропорциях, как указано в таблице 2, и использованы в 48-часовом тесте жизнеспособности. Жизнеспособность МСК в клеточных суспензиях настоящего изобретения (БМКП №№1-3) в сравнении с суспензиями (БМКП №№4-6), полученными без добавления гексапептида (I) после хранения в течение 48 часов при +4°С определяли путем смешивания 100 мкл клеточной суспензии со 100 мкл 0,4% раствора трипанового синего (Sigma-Aldrich) в течение 2 минут, где трипановый синий окрашивал только нежизнеспособные клетки. Клетки подсчитывали с помощью микрокамеры гемоцитометра под световым микроскопом. Strober W. Trypan blue exclusion test of cell viability. Curr Protoc Immunol 2001, 21:3B:A.3B.1-A.3B.2. https://doi.org/10.1002/0471142735.ima03bs111 Жизнеспособность оценивалась как средний процент клеток ± стандартная ошибка (SEM) с чистой цитоплазмой (жизнеспособные клетки) для четырех образцов каждого из БМКП №№1-6. Результаты представлены в таблицах 3-5 как попарное сравнение жизнеспособности МСК в образцах БМКП, содержащих то же количество клеток и вспомогательных веществ, но в присутствие или отсутствие гексапептида (I). Статистическое различие между группами оценивалось с помощью t-критерия Стьюдента.
Таблица 3. Сравнение жизнеспособности МСК в составе БМКП №1 и №4 после хранения в течение 48 часов при +4°С.
Продукт | Жизнеспособность, % (среднее ± SEM) |
БМКП №1 | 84,5±2,2* |
БМКП №4 (без гексапептида) | 60,3±3,8 |
*Достоверное отличие между группами (p<0.05)
Таблица 4. Сравнение жизнеспособности МСК в составе БМКП №2 и №5 после хранения в течение 48 часов при +4°С.
Продукт | Жизнеспособность, % (среднее ± SEM) |
БМКП №2 | 88,1±3,2* |
БМКП №5 (без гексапептида) | 62,8±3,5 |
*Достоверное отличие между группами (p<0.05)
Таблица 5. Сравнение жизнеспособности МСК в составе БМКП №3 и №6 после хранения в течение 48 часов при +4°С.
Продукт | Жизнеспособность, % (среднее ± SEM) |
БМКП №3 | 80,3±4,7* |
БМКП №6 (без гексапептида) | 60,5±6,6 |
*Достоверное отличие между группами (p<0.05)
Таблицы 3-5 показывают, что наличие гексапептида (I) в составе БМКП значимо повышает жизнеспособность МСК. Таким образом, повышение жизнеспособности МСК в составе биомедицинского клеточного продукта было достигнуто за счет введения в состав продукта гексапептида (I), что снижает потерю биологических характеристик МСК в период между приготовлением и введением БМКП пациенту и, таким образом, ведет к повышению терапевтической эффективности БМКП.
Пример 4
Пример иллюстрирует жизнеспособность МСК в составе БМКП настоящего изобретения после криоконсервации.
Для исследования эффекта гексапептида (I) на жизнеспособность МСК в составе БМКП, содержащего диметилсульфоксид (DMSO), при замораживании-размораживании были получены БМКП, содержащие (№№7-9) или не содержащие (№№10-12) гексапептид (I), см. таблицу 6.
Таблица 6. Составы БМКП, использованные в исследованиях жизнеспособности МСК после криоконсервации (замораживания-размораживания).
БМКП | ||||||
Ингредиент | №7 | №8 | №9 | №10 | №11 | №12 |
МСК, клеток/мл | 0,1×106 | 1,0×106 | 10×106 | 0,1×106 | 1,0×106 | 10,0×106 |
Гексапептид (I), мг/мл | 0,1 | 1,0 | 10,0 | нет | нет | нет |
DMSO, мг/мл | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 |
Физ.раствор, мл | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
БМКП №№7-12 были получены смешением МСК с другими компонентами в пропорциях, как указано в таблице 6, и использованы в тесте жизнеспособности МСК. БМКП охлаждали со скоростью 1°C/мин до -80°C, после чего перенесли в жидкий азот, где хранили 24 часа. По истечении указанного периода, образцы размораживали на водяной бане при 37°C. Жизнеспособность МСК в клеточных суспензиях настоящего изобретения (БМКП №№7-9) в сравнении с суспензиями (БМКП №№10-12), полученными без добавления гексапептида (I) после цикла замораживания-размораживания определяли путем смешивания 100 мкл клеточной суспензии со 100 мкл 0,4% раствора трипанового синего (Sigma-Aldrich) в течение 2 минут. Жизнеспособность оценивалась как средний процент клеток ± стандартная ошибка (SEM) с чистой цитоплазмой (жизнеспособные клетки) для четырех образцов каждого из БМКП №№7-12. Результаты представлены в таблицах 7-9 как попарное сравнение жизнеспособности МСК в образцах БМКП, содержащих то же количество клеток и вспомогательных веществ, но в присутствие или отсутствие гексапептида (I). Статистическое различие между группами оценивалось с помощью t-критерия Стьюдента.
Таблица 7. Сравнение жизнеспособности МСК в составе БМКП №7 и №10 после замораживания-размораживания.
Продукт | Жизнеспособность, % (среднее ± SEM) |
БМКП №7 | 89,8 ± 2,6* |
БМКП №10 (без гексапептида) | 74,8 ± 2,9 |
*Достоверное отличие между группами (p<0.05)
Таблица 8. Сравнение жизнеспособности МСК в составе БМКП №8 и №11 после замораживания-размораживания.
Продукт | Жизнеспособность, % (среднее ± SEM) |
БМКП №8 | 93,5 ± 1,8* |
БМКП №11 (без гексапептида) | 80,3 ± 2,8 |
*Достоверное отличие между группами (p<0.05)
Таблица 9. Сравнение жизнеспособности МСК в составе БМКП №9 и №12 после замораживания-размораживания.
Продукт | Жизнеспособность, % (среднее ± SEM) |
БМКП №9 | 88,5 ± 2,0* |
БМКП №12 (без гексапептида) | 66,3 ± 3,3 |
*Достоверное отличие между группами (p<0.05)
Таблицы 7-9 показывают, что наличие гексапептида (I) в составе БМКП значимо повышает жизнеспособность МСК после цикла заморозки-разморозки. Таким образом, повышение стабильности биомедицинского клеточного продукта была достигнуто за счет введения в состав продукта гексапептида (I), предохраняющего от потери биологических характеристик МСК в период между приготовлением, криоконсервацией, размораживанием и введением БМКП пациенту и, таким образом, ведет к повышению терапевтической эффективности БМКП.
Пример 6
Пример иллюстрирует эффективность БМКП настоящего изобретения после хранения.
Получение МСК мыши: мезенхимальные стромальные клетки мыши были получены согласно процедуре, детально описанной в Gnecchi M, Melo LG. Bone marrow-derived mesenchymal stem cells: isolation, expansion, characterization, viral transduction, and production of conditioned medium. Methods Mol Biol. 2009;482:281-94. Кратко, клетки костного мозга выделяли из бедренных и большеберцовых костей мышей C57Bl/6, возраст 6-9 недель, путем промывания костей с помощью коммерчески доступной среды DMEM (состав с низким содержанием глюкозы) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS), 1% витаминов, 1% глютамина, 1% заменимых аминокислот. Далее клетки центрифугировали, ресуспендировали в свежей питательной среде и подсчитывали. Изолированные таким образом клетки высевали во флаконы с площадью поверхности 75 мм2 и выращивали в инкубаторе при 37°C / 5% CO2 / 5% O2 в течение 48 часов. Флаконы с клетками были промыты раствором PBS (phosphate buffered saline) для удаления всех неприлипающих клеток, Прикрепленные клетки культивировали со сменой среды в первый раз через 48 часов после посева и затем каждые 72 часа. При достижении слияния колоний клеток на 80%, клетки собирали, ресуспендировали и повторно засевали (пассаж 1). Процедуру повторяли несколько раз при достижении слияния колоний на 90%. Подтверждение фенотипа МСК проводили как описано в Boregowda SV et al. Isolation of Mouse Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells. Methods Mol Biol. 2016;1416:205-23 и согласно критериям описанным в Dominici M et al. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy 8(4):315-7, 2006. Полученные таким образом МСК использовали в получении БМКП.
Получение БМКП: не содержащие (№13) или содержащие (№14) гексапептид (I) БМКП были получены ресуспендированием МСК в 1 мл водного раствора, содержащего компоненты в пропорциях, указанных в таблице 10.
Таблица 10. Составы БМКП.
БМКП | ||
Ингредиент | №13 | №14 |
МСК, клеток/мл | 1,0×106 | 1,0×106 |
Гексапептид (I), мг/мл | нет | 1,0 |
Физ.раствор, мл | 1,0 | 1,0 |
Стабильность БМКП: БМКП №№ 13 и 14 были использованы в 48-часовом тесте исследования стабильности при +4°С с использованием трипанового синего, как описано в примере 3. Результаты представлены в таблице 11 как среднее ± SEM для четырех образцов каждого из БМКП. Статистическое различие между группами оценивалось с помощью t-критерия Стьюдента.
Таблица 11. Сравнение жизнеспособности МСК в составе БМКП №13 и №14 после хранения в течение 48 часов при +4°С.
Продукт | Жизнеспособность, % (среднее ± SEM) |
БМКП №13 | 57,8 ± 4,9 |
БМКП №14 | 81,0 ± 3,1* |
*Достоверное отличие между группами (p<0.05).
Таким образом, жизнеспособность МСК в составе БМКП №14, содержащем гексапептид (I) была значимо выше, чем в БМКП №13, не содержащем гексапептид (I), после 48 часов хранения +4°С.
Модель острого воспалительного повреждения легких. Эффективность БМКП №13 и №14 была протестирована на модели острого воспалительного повреждения легких, вызванного внутритрахеальным введением липополисахарида E.coli (ЛПС, Sigma-Aldrich) самцам мышей C57Bl/6 как описано в D'Alessio FR. Mouse Models of Acute Lung Injury and ARDS. Methods Mol Biol. 2018, 1809:341-350 с предварительной сенсибилизацией 1 мкг/мышь α-галактозилцерамидом (α-GalCer, KRN7000, Sigma-Aldrich) как описано в Aoyagi T et al. Int Immunol. 2011, 23(2):97-108. Через 24 часа после сенсибилизации α-галактозилцерамидом, мышам вводили интратрахеально ЛПС (E.coli; 300 мкг/мышь) с добавлением 10 мкл/мышь полного адъюванта Фрейнда. Эта модель характеризуется острым перепроизводством интерлейкина-6 в легких, причем перепроизводство IL-6 связано с острым повреждением легких, отеком легких, острым респираторным дистресс-синдромом, и пневмонией. Другими симптомами смоделированного респираторного заболевания, связанного с IL-6, были угнетение двигательной активности, нарушение координации, недостаточное широкое раскрытие век и опущение, низкий мышечный тонус, снижение аппетита, потребления воды и мочеиспускания; а также нарушение дыхания.
Введение БМКП. Через 30 мин после индукции воспаления с ЛПС, мышам вводили ингаляционно однократно 50 мкл БМКП №13 (n=5), 50 мкл БМКП №14 (n=5), или 50 мкл физ. раствора (контроль, n=5), причем БМКП №13 и №14 были использованы после приготовления и хранения в течение 48 часов при +4°С. Непосредственно перед введением животному БМКП доводили до комнатной температуры.
Измерение ИЛ-6. Уровни ИЛ-6 определяли в водном экстракте гомогенатов легких через 2 часа после введения БМКП. Для измерений использовали Bio-Plex® MAGPIX™ Multiplex Reader, коммерчески доступную панель Bio-Plex Pro™ Mouse Cytokine Th17 Panel A 6-Plex # M6000007NY, и программу анализа данных Bio-Plex Data Pro (версия 1.0.0.06) компании Bio-Rad. Результаты представлены в таблице 12 как среднее ± SEM концентраций ИЛ-6 в легких. Для сравнения, средний уровень ИЛ-6 в легких у интактных мышей составлял 0,12 нг/мл. Статистический анализ проводился с помощью one-way ANOVA), пос-тест Тьюки для множественного сравнения между группами.
Таблица 12. Уровни ИЛ-6 в легких мышей с острым воспалительным поражением легких после введения БМКП.
Продукт | ИЛ-6, нг/мл (среднее ± SEM) |
Физ. раствор | 1,86 ± 0,06 |
БМКП №13 | 1,33 ± 0,09* |
БМКП №14 | 0,92 ± 0,08*# |
*Достоверно отличается от контроля (p<0,05). #Достоверно отличается от БМКП №13.
Таблица 12 показывает, что введение БМКП настоящего изобретения, хранившегося 48 часов при +4°С, значимо снижает уровни ИЛ-6 в легких мышей с острым воспалительным поражением легких, как по сравнению с контролем, так и с БМКП, содержащим МСК в той же дозе, но не содержащим гексапептид (I). Этот эффект достигнут за счет введения в состав БМКП гексапептида (I), предупреждающего потерю жизнеспособности клеток в составе БМКП (см. таблицу 11) в период между приготовлением БМКП и введением последнего субъекту. Таким образом, повышение стабильности БМКП за счет введения в состав БМКП гексапептида (I), предупреждающего потерю жизнеспособности клеток в составе БМКП в период между приготовлением БМКП и введением последнего пациенту, повышает эффективность БМКП в лечении симптомов воспаления, в том числе в подавлении продукции интерлейкина-6, важного патогенетического фактора при болезнях легких.
Claims (6)
1. Биомедицинский клеточный продукт для лечения болезни легких, связанной с повышенными уровнями интерлейкина-6, в виде водной суспензии, включающий мезенхимальные стромальные клетки млекопитающих в количестве от 0,1×106 до 10,0×106 клеток/мл и гексапептид формулы (I):
или его фармацевтически приемлемую соль в количестве от 0,1 до 10,0 мг/мл.
2. Биомедицинский клеточный продукт по п.1, где фармацевтически приемлемая соль это диацетат.
3. Биомедицинский клеточный продукт по любому из пп. 1 и 2, где млекопитающее это человек.
4. Биомедицинский клеточный продукт по любому из пп. 1-3, для использования в лечении болезни легких, связанной с повышенными уровнями интерлейкина-6, выбранной из группы, состоящей из острого воспалительного поражения легких, острого респираторного дистресс-синдрома, пневмонии, хронической обструктивной болезни легких, эмфиземы, астмы, COVID-19.
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2781968C1 true RU2781968C1 (ru) | 2022-10-21 |
Family
ID=
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2737799C1 (ru) * | 2020-07-23 | 2020-12-03 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУН НЦБМТ ФМБА России) | Ингаляционный гексапептид для лечения респираторных заболеваний, связанных с интерлейкином-6 |
RU2739573C1 (ru) * | 2020-05-29 | 2020-12-25 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУН НЦБМТ ФМБА России) | Стабильная водная фармацевтическая композиция для ингаляций, содержащая гексапептид |
WO2021224449A1 (en) * | 2020-05-07 | 2021-11-11 | Xintela Ab | Stem cells for treatment of respiratory disorders |
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2021224449A1 (en) * | 2020-05-07 | 2021-11-11 | Xintela Ab | Stem cells for treatment of respiratory disorders |
RU2739573C1 (ru) * | 2020-05-29 | 2020-12-25 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУН НЦБМТ ФМБА России) | Стабильная водная фармацевтическая композиция для ингаляций, содержащая гексапептид |
RU2737799C1 (ru) * | 2020-07-23 | 2020-12-03 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУН НЦБМТ ФМБА России) | Ингаляционный гексапептид для лечения респираторных заболеваний, связанных с интерлейкином-6 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
PENG Wenjun et al., Lyophilized powder of mesenchymal stem cell supernatant attenuates acute lung injury through the IL-6-p-STAT3-p63-JAG2 pathway, Stem Cell Research & Therapy, 29.03.2021, vol. 12, No. 216, 1-16, doi:10.1186/s13287-021-02276-y. КАРКИЩЕНКО В.Н. и др., Сочетанное применение лейтрагина и легочного сурфактанта-бл повышает выживаемость животных в модели фатального острого респираторного дистресс-синдрома, БИОМЕДИЦИНА, 26.10.2020, т. 16, No. 4, с. 52-59, doi:10.33647/2074-5982-16-4-52-59. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20220096560A1 (en) | Methods and compositions relating to mesenchymal stem cell exosomes | |
JP2023052211A (ja) | 精製済み間葉系幹細胞組成物および間葉系幹細胞組成物を精製する方法 | |
US10723997B2 (en) | Composition for treating chronic pulmonary disease, comprising exosome derived from thrombin-treated stem cell | |
ES2738658T3 (es) | Composición farmacéutica para inhibir la respuesta inmunitaria a través de la inducción de la diferenciación en células T reguladoras y la promoción de la proliferación de células T reguladoras | |
JP2010529987A5 (ru) | ||
JP2022536964A (ja) | 移植用臓器のミトコンドリア処理 | |
US20210169939A1 (en) | Extracellular vesicles and their uses | |
JP2021529736A (ja) | 炎症の軽減又は治療のための組成物及び方法 | |
CN113521101A (zh) | 干细胞来源的外泌体在制备治疗慢性阻塞性肺疾病药物中的应用 | |
WO2018025976A1 (ja) | 多能性幹細胞による虚血再灌流肺障害の軽減及び治療 | |
RU2781968C1 (ru) | Биомедицинский клеточный продукт на основе мезенхимальных стромальных клеток млекопитающих и гексапептида | |
US20220211762A1 (en) | Pharmaceutical composition for treating sepsis or systemic inflammatory response syndrome, comprising isolated mitochondria as active ingredient | |
WO2014089397A1 (en) | Compositions and methods of treating and preventing pulmonary fibrosis | |
JP6335279B2 (ja) | 式x1−gqretpegaeakpwy−x2の環状ペプチドを含んでなる医薬組成物および体外肺処置のための使用 | |
Widowati et al. | Potential of human Wharton’s jelly mesenchymal stem cells (hWJMSCs) secretome for COVID-19 adjuvant therapy candidate | |
RU2770364C1 (ru) | Способ лечения болезней легких ингаляционным введением мезенхимальных стромальных клеток и гексапептида | |
KR102217476B1 (ko) | 식 x₁-gqretpegaeakpwy-x₂의 고리 펩티드를 함유하는 동결건조물 | |
Surtaieva et al. | Effects of transplanted mesenchymal stem cells on repair of the lung tissue of rats with experimental pulmonary fibrosis | |
CN105324377A (zh) | 肺病症和其他病症的治疗 | |
RU2667466C1 (ru) | Пептидное соединение, восстанавливающее функцию органов дыхания и обладающее иммуномодулирующим действием | |
ES2384564T3 (es) | Uso de neumocitos de tipo II en el tratamiento de enfermedades pulmonares asociadas con fibrosis pulmonar | |
US20230255916A1 (en) | Amino acid compositions and uses thereof | |
D’Agostino | Nociceptin reduces the inflammatory immune microenvironment in a conventional murine model of airway hyperresponsiveness | |
Hogan | Mesenchymal Stem/Stromal Cells for sepsis-induced Acute Respiratory Distress Syndrome: The role of tissue source, preactivation strategies and measures of MSC potency on therapeutic benefit in rodent models of ARDS | |
Anderson et al. | Selected Abstracts on Animal Models for Biomedical Research-III. |