RU2771898C1 - Способ получения профилактической противовирусной композиции на основе эпигаллокатехин-3-галлата (EGCG) - Google Patents
Способ получения профилактической противовирусной композиции на основе эпигаллокатехин-3-галлата (EGCG) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2771898C1 RU2771898C1 RU2021122184A RU2021122184A RU2771898C1 RU 2771898 C1 RU2771898 C1 RU 2771898C1 RU 2021122184 A RU2021122184 A RU 2021122184A RU 2021122184 A RU2021122184 A RU 2021122184A RU 2771898 C1 RU2771898 C1 RU 2771898C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- egcg
- virus
- drug
- gallate
- cov
- Prior art date
Links
- WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N (-)-Epigallocatechin-3-o-gallate Chemical compound O([C@@H]1CC2=C(O)C=C(C=C2O[C@@H]1C=1C=C(O)C(O)=C(O)C=1)O)C(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N 0.000 title claims abstract description 106
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 30
- 230000000840 anti-viral Effects 0.000 title claims description 16
- 241001678559 COVID-19 virus Species 0.000 claims abstract description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 40
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 abstract description 38
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 34
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 15
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 abstract description 10
- 235000009569 green tea Nutrition 0.000 abstract description 10
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 10
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 8
- 230000003612 virological Effects 0.000 abstract description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 5
- 102100019404 CDSN Human genes 0.000 abstract description 3
- 101700062689 CDSN Proteins 0.000 abstract description 3
- 101710005864 HI_0216 Proteins 0.000 abstract description 3
- 101710005865 MPN_201 Proteins 0.000 abstract description 3
- 101710005862 MPN_285 Proteins 0.000 abstract description 3
- 101710005861 MPN_289 Proteins 0.000 abstract description 3
- 101710005860 MPN_290 Proteins 0.000 abstract description 3
- 101710029070 MPN_343 Proteins 0.000 abstract description 3
- 101710005841 MPN_365 Proteins 0.000 abstract description 3
- 101710005863 MPN_615 Proteins 0.000 abstract description 3
- 101710005859 MPN_638 Proteins 0.000 abstract description 3
- 101700083974 prrB Proteins 0.000 abstract description 3
- 230000003405 preventing Effects 0.000 abstract description 2
- 101700079760 EFCB Proteins 0.000 abstract 1
- 101710005090 ERVFC1-1 Proteins 0.000 abstract 1
- 102100014722 ERVS71-1 Human genes 0.000 abstract 1
- 101710013371 ERVS71-1 Proteins 0.000 abstract 1
- 238000000126 in silico method Methods 0.000 abstract 1
- 230000002020 noncytotoxic Effects 0.000 abstract 1
- 231100000065 noncytotoxic Toxicity 0.000 abstract 1
- 101700016463 pls Proteins 0.000 abstract 1
- 229940030275 epigallocatechin gallate Drugs 0.000 description 94
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 32
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 16
- 229930016253 catechin Natural products 0.000 description 15
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 15
- 150000001765 catechin Chemical class 0.000 description 13
- XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N Hydroxychloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CCO)CC)=CC=NC2=C1 XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 229940072689 Plaquenil Drugs 0.000 description 10
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 9
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 9
- 239000002609 media Substances 0.000 description 9
- 208000001756 Virus Disease Diseases 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 7
- 206010047461 Viral infection Diseases 0.000 description 6
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 6
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 6
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 5
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 5
- 230000017613 viral reproduction Effects 0.000 description 5
- 230000036912 Bioavailability Effects 0.000 description 4
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 4
- 208000006572 Human Influenza Diseases 0.000 description 4
- 206010022000 Influenza Diseases 0.000 description 4
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 description 4
- 241000315672 SARS coronavirus Species 0.000 description 4
- 210000003501 Vero Cells Anatomy 0.000 description 4
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 4
- 230000035514 bioavailability Effects 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 230000001472 cytotoxic Effects 0.000 description 4
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 4
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000001768 microscale thermophoresis Methods 0.000 description 4
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- -1 Polyphenol Epigallocatechin-3 -Gallate Chemical class 0.000 description 3
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 3
- 230000000069 prophylaxis Effects 0.000 description 3
- 230000000241 respiratory Effects 0.000 description 3
- 201000003176 severe acute respiratory syndrome Diseases 0.000 description 3
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 3
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2R,3R,4S,5R,6S)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2R,3R,4S,5R,6R)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N Catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 2
- 229940100626 Catechin Drugs 0.000 description 2
- 229950001002 Cianidanol Drugs 0.000 description 2
- 206010053983 Corona virus infection Diseases 0.000 description 2
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 2
- 241000202807 Glycyrrhiza Species 0.000 description 2
- 235000001453 Glycyrrhiza echinata Nutrition 0.000 description 2
- 235000006200 Glycyrrhiza glabra Nutrition 0.000 description 2
- 235000017382 Glycyrrhiza lepidota Nutrition 0.000 description 2
- 229940094952 Green Tea Extract Drugs 0.000 description 2
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 2
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 2
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 2
- 229940010454 Licorice Drugs 0.000 description 2
- 210000004072 Lung Anatomy 0.000 description 2
- 210000000214 Mouth Anatomy 0.000 description 2
- 210000004400 Mucous Membrane Anatomy 0.000 description 2
- 210000003928 Nasal Cavity Anatomy 0.000 description 2
- RTEDIEITOBJPNI-SLRCDXKPSA-N Prodelphinidin B2 Natural products O[C@H]1[C@@H](c2cc(O)c(O)c(O)c2)Oc2c([C@@H]1c1c(O)cc(O)c3c1O[C@H]([C@H](O)C3)c1cc(O)c(O)c(O)c1)c(O)cc(O)c2 RTEDIEITOBJPNI-SLRCDXKPSA-N 0.000 description 2
- 108091005626 SARS-CoV-2 receptor-binding domain Proteins 0.000 description 2
- 241000580858 Simian-Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000001154 acute Effects 0.000 description 2
- 231100000494 adverse effect Toxicity 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000000903 blocking Effects 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000001142 circular dichroism spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 2
- 230000001120 cytoprotect Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cells Anatomy 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 235000020688 green tea extract Nutrition 0.000 description 2
- 239000001963 growth media Substances 0.000 description 2
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 235000014063 licorice root Nutrition 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organs Anatomy 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 2
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 2
- 230000000171 quenching Effects 0.000 description 2
- 231100000486 side effect Toxicity 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002194 synthesizing Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PUSNGFYSTWMJSK-GSZQVNRLSA-N (2R,3R,4S,5R,6R)-2,3,4-trimethoxy-6-(methoxymethyl)-5-[(2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxane;1-[[(2R,3R,4S,5R,6S)-3,4,5-tris(2-hydroxypropoxy)-6-[(2R,3R,4S,5R,6R)-4,5,6-tris(2-hydroxypropoxy)-2-(2-hydroxypropoxymethyl)oxan- Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]1COC.CC(O)CO[C@@H]1[C@@H](OCC(C)O)[C@H](OCC(C)O)[C@@H](COCC(O)C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OCC(C)O)[C@@H](OCC(C)O)[C@H](OCC(C)O)O[C@@H]1COCC(C)O PUSNGFYSTWMJSK-GSZQVNRLSA-N 0.000 description 1
- XIBOSSQRSQSBDM-UHFFFAOYSA-N 1-methyltetrazole;hydrobromide Chemical compound [Br-].C[NH+]1C=NN=N1 XIBOSSQRSQSBDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800000504 3C-like protease Proteins 0.000 description 1
- 101700066609 ACE2 Proteins 0.000 description 1
- 102100017866 ACE2 Human genes 0.000 description 1
- 102000034451 ATPases Human genes 0.000 description 1
- 108091006096 ATPases Proteins 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 241001061264 Astragalus Species 0.000 description 1
- 101710011233 BHLH74 Proteins 0.000 description 1
- 206010060945 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 1
- CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N Butylated hydroxyanisole Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1.COC1=CC=C(O)C=C1C(C)(C)C CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005069 Calcium Drugs 0.000 description 1
- 229960003563 Calcium Carbonate Drugs 0.000 description 1
- 210000001736 Capillaries Anatomy 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102000003858 Chymases Human genes 0.000 description 1
- 108090000227 Chymases Proteins 0.000 description 1
- 244000223760 Cinnamomum zeylanicum Species 0.000 description 1
- 235000004310 Cinnamomum zeylanicum Nutrition 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N D-sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 230000004543 DNA replication Effects 0.000 description 1
- 208000001490 Dengue Diseases 0.000 description 1
- 206010012310 Dengue fever Diseases 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229940059082 Douche Drugs 0.000 description 1
- 206010061822 Drug intolerance Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001263 FEMA 3042 Substances 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-MYOOOWEVSA-N Glycyrrhizic acid Natural products O=C(O)[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(=O)O)O2)[C@@H](O[C@@H]2C(C)(C)[C@H]3[C@@](C)([C@H]4C(=O)C=C5[C@](C)([C@]4(C)CC3)CC[C@]3(C)[C@H]5C[C@](C(=O)O)(C)CC3)CC2)O1 LPLVUJXQOOQHMX-MYOOOWEVSA-N 0.000 description 1
- 208000005721 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 101710006403 HSPA5 Proteins 0.000 description 1
- 102100015710 HSPA5 Human genes 0.000 description 1
- 208000002672 Hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 206010073071 Hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000003494 Hepatocytes Anatomy 0.000 description 1
- 241000714260 Human T-lymphotropic virus 1 Species 0.000 description 1
- 241000714259 Human T-lymphotropic virus 2 Species 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 241000713340 Human immunodeficiency virus 2 Species 0.000 description 1
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 1
- 229960004171 Hydroxychloroquine Drugs 0.000 description 1
- 102100016020 IFNG Human genes 0.000 description 1
- 101700086956 IFNG Proteins 0.000 description 1
- 210000000987 Immune System Anatomy 0.000 description 1
- 241000711450 Infectious bronchitis virus Species 0.000 description 1
- 210000002510 Keratinocytes Anatomy 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N Lactose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H]1CO)[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1 GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N 0.000 description 1
- 229960001375 Lactose Drugs 0.000 description 1
- 210000001132 Macrophages, Alveolar Anatomy 0.000 description 1
- 210000004379 Membranes Anatomy 0.000 description 1
- 230000036740 Metabolism Effects 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N Methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinylpyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002850 Nasal Mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 1
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 1
- 241001263478 Norovirus Species 0.000 description 1
- 102000011931 Nucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010061100 Nucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- 210000002381 Plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 229940069328 Povidone Drugs 0.000 description 1
- 239000012095 PrestoBlue reagent Substances 0.000 description 1
- 229940069949 Propolis Drugs 0.000 description 1
- 241000241413 Propolis Species 0.000 description 1
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001285 Quercetin Drugs 0.000 description 1
- 102000007312 Recombinant Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010033725 Recombinant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infection Diseases 0.000 description 1
- 108091005743 SARS-CoV-2 proteins Proteins 0.000 description 1
- 101710043164 Segment-4 Proteins 0.000 description 1
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N Sucrose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)[C@@]1(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N 0.000 description 1
- 210000001744 T-Lymphocytes Anatomy 0.000 description 1
- 229940033123 Tannic Acid Drugs 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N Tannic acid Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Tris Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101700038759 VP1 Proteins 0.000 description 1
- 229940044953 Vaginal Ring Drugs 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000016350 Viral Proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000001455 Zika Virus Infection Diseases 0.000 description 1
- FXEDRSGUZBCDMO-HEEUSZRZSA-N [(E)-3-phenylprop-2-enoyl] (Z)-3-phenylprop-2-enoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1/C=C/C(=O)OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 FXEDRSGUZBCDMO-HEEUSZRZSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid Chemical compound OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive Effects 0.000 description 1
- 230000000172 allergic Effects 0.000 description 1
- 230000003281 allosteric Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000569 anti-influenza Effects 0.000 description 1
- 102000038129 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007172 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 235000006533 astragalus Nutrition 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 230000037348 biosynthesis Effects 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004271 bone marrow stromal cells Anatomy 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M buffer Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019282 butylated hydroxyanisole Nutrition 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture media Substances 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic Effects 0.000 description 1
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 description 1
- 238000000978 circular dichroism spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 230000023298 conjugation with cellular fusion Effects 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 201000002949 dengue disease Diseases 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000007941 film coated tablet Substances 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Polymers 0.000 description 1
- 239000001685 glycyrrhizic acid Substances 0.000 description 1
- 229960004949 glycyrrhizic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 101700005460 hemA Proteins 0.000 description 1
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 229960003943 hypromellose Drugs 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious Effects 0.000 description 1
- 200000000003 influenza A Diseases 0.000 description 1
- 200000000013 influenza A (H1N1) Diseases 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 1
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000034217 membrane fusion Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000035786 metabolism Effects 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 125000006353 oxyethylene group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological Effects 0.000 description 1
- 230000000275 pharmacokinetic Effects 0.000 description 1
- 230000036231 pharmacokinetics Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008196 pharmacological composition Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229920001888 polyacrylic acid Polymers 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive Effects 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 229940002612 prodrugs Drugs 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N propylene oxide Chemical group CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000064 prostate epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000575 proteomic Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 description 1
- 229930002344 quercetin Natural products 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 108091006270 sars-cov-2 Envelope protein Proteins 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 230000005582 sexual transmission Effects 0.000 description 1
- 239000002453 shampoo Substances 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004381 surface treatment Methods 0.000 description 1
- 230000005700 syncytium formation by plasma membrane fusion Effects 0.000 description 1
- 201000010874 syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 210000000456 talus bone Anatomy 0.000 description 1
- 229920002258 tannic acid Polymers 0.000 description 1
- 235000015523 tannic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000730 tolerability Toxicity 0.000 description 1
- 230000000699 topical Effects 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 229960005486 vaccines Drugs 0.000 description 1
- 239000006213 vaginal ring Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Images
Abstract
Изобретение относится к способу получения препаратов против SARS-CoV-2 на основе компонента зеленого чая эпигаллокатехин-3-галлата (EGCG). В серии экспериментов проведен подбор нецитотоксической концентрации EGCG, которую затем использовали в экспериментах с живым вирусом, которые показали, что EGCG является наиболее мощным профилактическим агентом, его основной мишенью является поверхностный белок SARS-CoV-2. Эти данные подтверждены подробным исследованием in vitro и in silico по связыванию EGCG с оригинальными и мутантными вирусными S белками. Полученные результаты свидетельствуют о том, что EGCG, приготовленный согласно формуле изобретения, особенно эффективен в предотвращении заражения мутантным SARS-CoV-2. 6 ил.
Description
Изобретение относится к области медицины, в частности, к способам получения композиций для профилактики вирусных инфекций.
Противовирусная активность EGCG была показана в ряде работ ранее. На сегодняшний день проводятся многочисленные исследования катехинов зеленого чая. Были получены данные по противовирусной активности катехинов зеленого чая в отношении различных вирусов. Активность катехинов была изучена по отношению к вирусу простого герпеса, аденовирусов, вирусов гриппа и иммунодефицита человека (Li S, Hattori Т, Kodama EN. (2011) Epigallocatechin gallate inhibits the HIV reverse transcription step, Antivir Chem Chemother, 21(6), 239- 243). Было показано, что in vitro катехины значительно подавляют инфекционную активность вируса простого герпеса, влияя, по большей части, на стадию прикрепления и проникновения вируса в клетку хозяина, работая уже и на более поздних стадиях инфицирования (Cheng HY, Lin CC, Lin TC (2002) Antiviral properties of prodelphinidin B-2 3,-O-gallate from green tea leaf, Antivir Chem Chemother, 13 (4), 223-229).
Исследователями из Кореи были опубликованы данные по противогриппозной активности катехинов зеленого чая в отношении вирусов гриппа типа A (H1N1 и H3N2) и типа В. Авторы показали гемагглютин-ингибирующую активность ряда катехинов, причем действие EGCG было более выраженным. В клетках МСК нарушал функционирование вируса, подавлял синтез вирусной РНК и ингибировал нейраминидазную активность (Song JM, Lee КН, Seong BL (2005) Antiviral effect of catechins in green tea on influenza virus, Antiviral Res., 68 (2), 66-74). В другой работе было показано, что галлат эпигаллокатехина блокировал инфицирование и репликацию вируса в альвеолярных макрофагах при репродуктивно-респираторном синдроме у свиней (Ge et al., 2018). Также EGCG предотвращает инфицирование вируса Зика (Carneiro et al., 2016), мешает взаимодействию вируса иммунодефицита человека 1 типа с рецепторами на поверхности таргетных клеток (Liu et al.,2005). In vitro эксперименты показали активность EGCG по отношению к вирусу лихорадки Денге, через деформацию вирусных частиц (Raekiansyah et al., 2018). Также было показано, что EGCG блокирует инфицирование HCV клеток гепатомы и первичной культуры гепатоцитов (Ciesek et al.,2011), ингибирует слияние клеток при вирусах гриппа A/H1N1, A/H3N2, B (Song et al., 2005).
По отношению к вирусу SARS-CoV-2 по данным ряда авторов EGCG свое противовирусное свойство проявляет плейотропно. EGCG, вероятно, ингибирует химотрипсин-подобную протеазу - 3CLpro (Lu et al., 2020), блокирует 6vw1-связывающий домен S белка вируса (Mf et al., 2020), подавляет АТРазную активность GRP78 (Ibrahim et al., 2019).
Большинство исследований (как доклинических, так и клинических апробаций) биологической активности EGCG проводились по отношению к пероральным формам препарата. При такой форме приема препаратов, содержащих катехины зеленого чая, максимальная концентрация EGCG в плазме испытуемых не превышала 1 мкМ, повышение дозировок приводило к появлению побочных эффектов, но не отражалось существенно на содержании EGCG в крови (Н-Н. Sherry Chow, Yan Cai, David S. Alberts, et al. (2001) Polyphenon E Single-dose Administration of Epigallocatechin Gallate and Phase I Pharmacokinetic Study of Tea Polyphenols following, Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, 10, 53-58).
Исследования фармакокинетики EGCG показали низкую биодоступность катехинов, которая, по разным данным, не превышала 1%. При такой биодоступности пероральный прием катехинов не позволяет достичь необходимого терапевтического уровня катехинов в органах - мишенях, а, следовательно, добиться устойчивого лечебного эффекта. В связи с этим, предпринимаются различные попытки улучшения этого параметра путем создания различных формуляций на основе катехинов (Imtiaz A. Siddiqui, Vaqar М. Adhami, Dhruba J. Bharali, Bilal B. Hafeez, Mohammad, Asim, Sabih I. Khwaja, Nihal Ahmad, Huadong Cui, Shaker A. Mousa, and Hasan, Mukhtar (2009) Introducing Nanochemoprevention as a Novel Approach for Cancer Control: Proof of Principle with Green Tea Polyphenol Epigallocatechin-3 -Gallate, Cancer Res., 69(5), 1712-1716; Kristin R. Landis-Piwowar, Congde Huo, Di Chen, Vesna Milacic, Guoqing Shi, Так Hang Chan and Q. Ping Dou (2007) A Novel Prodrug of the Green Tea Polyphenol Epigallocatechin-3 -Gallate as a Potential Anticancer Agent, Cancer Res, 67, 4303-4310).
MELISA Institute Genomics & Proteomics Research SpA проводят набор в клиническое исследование II/III препарата Превифенон (Previfenon) NCT04446065 для апробации данного препарата, представляющего собой капсулы по 250 мг с EGCG в качестве профилактического противовирусного средства. Ранее двойное слепое, плацебо контролируемое клиническое исследование показало снижение риска респираторных инфекций до 75% медицинскими работниками во время вспышки гриппа H1N1. Одновременно усиливалась активность иммунной системы за счет увеличения пролиферации ϒδ Т-клеток (28%) и продукции IFN-γ (26% пациентов). Активность против вируса гриппа продемонстрирована в исследовании NCT01008020 (Masahiro Morikawa).
В патенте CN105030757A раскрывается применение эпигаллокатехин-галлат (EGCG) против респираторно-синцитиального вируса (РСВ). Было установлено, что EGCG может ингибировать РСВ как in vitro, так и in vivo. In vitro EGCG может предотвратить заражение клеток и ингибировать биосинтез РСВ в клетках, а in vivo может облегчить патологическое поражение легочной ткани и снизить вирусный титр в легочной ткани. При концентрации в 16 мкг/мл EGCG не оказывает явной цитотоксичности, при концентрации 5,49 мкг/мл предотвращает проникновение вируса в клетку. Концентрация, необходимая для ингибирующего действия на вирус, находится в пределах 2 – 32 мкг/мл.
В патенте WO2012130893A1 описывается применение эпигаллокатехин-галлат в качестве альтернативы для пациентов с гепатитом С, для которых не применима терапия иммуномодулирующими агентами и/или ингибиторами вирусного метаболизма. В композиции действующее вещество используется в форме эфира или соли. Композиции на основе EGCG предотвращают инфицирование клетки, а также передачу вируса от заражённой клетки к здоровой. Ингибирующее действие достигается предотвращением взаимодействия между гликопротеинами Е1 и/или Е2 на поверхности вируса и белком-мишенью на клетке хозяйна.
В другом патенте, US9901565B2, описываются фармацевтические композиции на основе различных изомеров эпигаллокатехин-галлата, которые ингибируют процесс слияния мембран, в том числе и с вирусными мембранами.
В патенте WO2006083318A2 описываются композиции на основе катехина и, в частности, эпигаллокатехин-галлат, которые инактивируют вирус SARS-CoV. Стоит отметить, что данные композиции авторы предполагают использовать исключительно для обработки поверхностей, что, в свою очередь, подразумевает, что в составе композиций могут присутствовать компоненты, улучшающие адгезивные свойства. Концентрация действующего вещества по рецептуре от 0,01 μM до 1,0 nM. Композиции могут использоваться в виде порошка, спрея, мыла или шампуня и могут быть нанесены непосредственно на поверхность и/или вместе с водой.
Эпигаллокатехин-галлат также может использоваться для приготовления инактивированных вакцин на основе ряда вирусов, что описано в патенте KR101843564B1. Среди таких вирусов перечислены вирусы гриппа типов А (H1N1, H3N2, H5N2, H9N2), Б и С, а также коронавирус (штамм М41 вируса инфекционного бронхита), ВПЧ и норовирус. Инактивация вируса происходит в результате взаимодействия эпигаллокатехин-галлата с вирусными белками (например, с нуклеопротеином или гемагглютинином).
В патенте US20110052727A1 описана пищевая добавка, состоящая по крайней мере из трех действующих агентов, в числе которых эпигаллокатехин-галлат (EGCG). Также в состав данной композиции могут быть включены вплоть до 6 агентов: лакрица (солодка), глицирризиновая кислота, кверцетин, зеленый чай, эпигаллокатехин галлата, корица, коричный ангидрид, киновальная кислота, селен и прополис. Соединение предназначено для лечения и профилактики инфекции, вызванной вирусом простуды штамма H1N1. По заявлению авторов патента, данная композиция снижает вирусную инфекционность, ингибирует рост и репликацию вируса, а также снижает титр вируса в организме. 50% эффективность ингибирования вируса достигается при концентрации EGCG равной 22-28 µM, а при 500 µM на 80% подавляется синтез вирусной РНК, что показано на клеточной модели. При концентрации 350 µM в 1.5 раза снижается ферментативная активность. Добавка может быть в форме таблеток, капсул и жидкого сиропа, а доставка веществ может осуществляться через слизистую щеки и трансэпитеально.
В патенте JP2013094119A авторы предлагают метод введения EGCG внутримышечно, внутрибрюшинно и внутривенно против малярии, а также различных вирусных и бактериальных инфекций.
В CN105687226B описывается фармакологическая композиция на основе эпигаллокатехин-галлата (EGCG) для подавления коронавирусной инфекции. В составе композиции кроме основного действующего вещества, EGCG, присутствуют дубильная кислота и полисахариды астрагала в пропорции 1:1:1,5.
В патентах US5795911A и US5968973A описано противовирусное воздействие эпигаллокатехин-галлата на вирус папилломы человека.
Описан патент EP2179722A1 на фармацевтическую композицию, предназначенную для местного применения в целях профилактики половой передачи вирусной инфекции, в котором основным действующим веществом может быть эпигаллокатехин-галлат (EGCG), полученный из экстракта зелёного чая. Фармацевтическая композиция может быть использована в виде мази, крема, геля, суппозитория, жидкости для вагинального спринцевания, вагинального кольца или концентрата. Композиция может применяться против ряда вирусных инфекций: ВИЧ (ВИЧ-1 и ВИЧ-2), Т-лимфотропного вируса человека (HTLV-1 или HTLV-2), вирусов гепатита B и C, ВПЧ, а также вирусов простого герпеса и герпеса человека 8 типа. Содержание действующего вещества может составлять около 2-20% по весу катехинов для мазей и около 50-500 мг/капсулу для суппозитория.
Известен патент CN101028382A, в котором описана композиция на основе эпигаллокатехин-галлата для подавления вируса гепатита B. Эпигаллокатехин-галлат получен из экстракта зеленого чая. При концентрации в пределах 6.25—50 μМ, данная композиция эффективно используется для подавления экспрессии белка антигена вируса гепатита В и подавления репликации вирусной ДНК.
Композиция EGCG в таблетированной или капсульной форме описана в патенте CN2009101498189A. В состав препарата, помимо активной субстанции, могут входить различные компоненты в вариациях (крахмал, глазурь, декстрин, лактоза, микрокристаллическая целлюлоза, манни кальция сульфат, кислый фосфат кальция, кальция карбонат, смачивающий агент, карбоксиметил целлюлоза или метилцеллюлоза (МЦ), этилцеллюлоза (ЕС), гипромеллоза (ГПМЦ), 10%-20% раствор желатина, 50%-70% раствор сахарозы, 3%-5% 30 повидон водный раствор или спиртовой раствор, очищенная вода, магния стеарат, микропорошок силикагеля, гидрогенизированное растительное и жидких продуктов; (4) антиоксидант, таких как ве, КНБК и т. д.; Регулятор рН - это этандиевая кислота, дигидрофосфат натрия и др.
Близким по способу применения является изобретение RU2440821C2 для ухода за полостью рта и содержащее растительные экстракты, в том числе зеленого чая. Однако состав композиции отличен от предлагаемого в заявке, поскольку включает в себя как минимум 2 вида растительных экстракта в липофильной композиции. Авторы другого изобретения WO2013066208A2 для повышения биодоступности EGCG предложили использовать композицию, содержащую блок-сополимер оксиэтилена и оксипропилена, однако это делает технологию разведения EGCG более дорогостоящей. Наиболее приближенным по механизму действия и по способу применения является изобретение, описанное в патенте RU2514103C1, которое представляет собой фармацевтическую композицию для лечения местных проявлений инфекций, вызванных вирусом простого герпеса, и для профилактики гриппа и острых респираторных вирусных инфекций, состоящий из эпигаллокатехин-3-галлата (EGCG) 70-90 мас. %, коллоидного серебра и гелеобразующей основы, которая включает пропиленгликоль, в качестве солюбилизатора - карбопол, в качестве эмульгатора - триэтаноламин и в качестве консерванта - нипагин в количестве 0,07-0,09 мас.% и нипазол в количестве 0,01-0,03 мас. %. Для профилактики ОРВИ применялся гель, содержащий 10 мас. % эпигаллокатехин-3-галлата и 1 мас. % раствора коллоидного серебра. Гель предлагают закладывать в оба носовых хода с помощью ватного аппликатора 2 раза в день в течение 21 дня. Весь период наблюдения за добровольцами включал 3-недельный курс профилактики и четыре недели наблюдения после окончания профилактики. Общий период наблюдения составил 7 недель. За весь период наблюдения (профилактический курс приема препарата и месяц после его окончания) при активном клиническом осмотре наблюдаемых лиц ответственным врачом не было выявлено каких-либо побочных реакций со стороны различных органов и систем, а также не было зафиксировано развитие реакции в местах аппликации препарата (слизистая носа), что свидетельствует в пользу абсолютной безвредности и полной безопасности комбинированного геля. Субъективных данных о непереносимости препарата, о побочных негативных, аллергических или каких-либо других нежелательных явлениях в дневниках наблюдения зафиксировано не было. Таким образом, при проведении профилактического курса против гриппа и ОРВИ среди здоровых взрослых лиц 10% гелем эпигаллокатехин-3-галлата, содержащим 1% раствора коллоидного серебра, показана его полная безвредность и хорошая переносимость. Проведенный профилактический курс применения препарата обеспечил снижение частоты возникновения гриппа и ОРВИ в основной группе. Показатель заболеваемости среди лиц, регулярно применявших комбинированный гель (2,7%), отличался от соответствующего показателя в контрольной группе (8,0%). Индекс эффективности (ИЭ) составил 2,9.
В течение 4-х недель после прекращения профилактического курса в контрольной группе заболело гриппом и ОРВИ 6 человек (6,9%), тогда как в основной группе выявлено 4 случая заболевания (3,6%). За период наблюдения (с первого дня применения - всего 7 недель) показатели заболеваемости составили 6,3% и 14,9% в опытной и контрольной группах соответственно. ИЭ равен 2,3; при этом показатель защищенности составил 57%. Это свидетельствует о стабильном, а не кратковременном профилактическом эффекте препарата, с положительным последействием.
Задачей предлагаемого изобретения является разработка нового способа получения композиции для профилактики заболеваний, вызываемых коронавирусами.
Способ получения композиции осуществляют следующим образом:
Для получения композиции EGCG, (тип катехина, содержащийся в больших количествах в зеленом чае, C22H18O11), предварительно растворяют в этиловом спирте, ввиду его малой растворимости в водных растворах. 10 мг EGCG разводят в 25 мл 70% этанола, после чего доводят до 1 л 0,9% раствором хлорида натрия (физиологический раствор). Полученную композицию асептически фильтруют в ламинарном боксе через 0,20 мкм фильтр. Концентрацию EGCG, используемую в композиции, эффективную и при этом не цитотоксическую, определяли в цитотоксических тестах на разных клеточных линиях.
Данный состав пригоден для розлива по стерильным флаконам, предназначенным для дозированного нанесения/орошения слизистых оболочек, в том числе носовой и/или ротовой полости (флакон разного объема со спреем и крышкой или диспенсером). Может быть использован в качестве средства гигиены.
Данные позволяют говорить о безопасности и потенциальной эффективности в качестве гигиенического и лечебно-профилактического средства предлагаемой нами композиции. При этом, низкая биодоступность потенциально снижает риски передозировок и проявления системных эффектов при местном применении на слизистых оболочках носовой и ротовой полостей.
Противовирусная профилактическая активность композиции EGCG в отношении новой коронавирусной инфекции SARS-CoV-2 показана в экспериментах in vitro.
Для этого использовали EGCG, 1000х раствор от предполагаемой действующей концентрации в DMSO. Условия хранения: в морозильнике при температуре -20 °С, без повторного замораживания/размораживания. Препарат сравнения – Плаквенил (Plaquenil), таблетки, покрытые пленочной оболочкой. Действующее вещество – гидроксихлорохин, 200 мг. Условия хранения: в холодильнике при температуре +2°С – +8°С.
Тест-система: культура клеток Vero (ATCC CCL-81), культура клеток Vero E6 (ECACC 85020206). Вирус SARS-CoV-2, клинический изолят на третьем пассаже в культуре клеток Vero, хранение при температуре -80°С.
Методы, используемые при изучении специфической противовирусной фармакологической активности
in vitro
на культуре клеток
Определение цитотоксичности препаратов
Цитотоксичность препарата ЕGCG и препарата сравнения Плаквенил в отношении клеточной культуры Vero был определена с помощью метода Моссмана (МТТ-теста). Для исследования использовали 96-луночные планшеты со 100% монослоем клеток Vero, посеянные в плотности 2*106 кл/планшет накануне эксперимента.
Для исследования готовили двукратные разведения концентрированного (1000Х или 10 mM) препарата ЕGCG в DMSO: 500X, 250X, 125X, 63X, 32X, 16X, 8X. Затем разведения препарата добавляли в культуральную среду 1:100, таким образом, что концентрации вещества Е в лунках с клетками составили от 10Х до 0.08Х, а концентрация DMSO во всех лунках была одинакова и составляла 1%.
Разведения препарата Плаквенил готовили в ростовой среде, конечные концентрации препарата Плаквенил в лунках с клетками составили от 40 мкг/мл до 0,625 мкг/мл.
По окончании 3 дней инкубации оценивали жизнеспособность клеток с использованием красителя МТТ (метилтетразолиум бромид), оптическую плотность измеряли на планшетном анализаторе Victor2 Wallas (Perkin Elmer) На основании полученных данных с помощью программного обеспечения GraphPad Prizm 5.0 рассчитывали ЦТД50 (концентрация препарата, вызывающая гибель 50 % клеток).
Определение противовирусной активности препаратов
Для исследования использовали 6-луночные планшеты со 100% монослоем клеток Vero E6. Для оценки противовирусной активности препаратов были использованы две схемы внесения препарата.
Схема №1 - оценка способности препарата ингибировать проникновение вируса в клетки. Препарат в соответствующих концентрациях добавляли в культуральную среду клеток за 2 ч до внесения вируса, инкубировали в течение 2 ч при 37 °C, 5% CO2. Далее препарат вносили параллельно с добавлением вирусного инокулята и инкубировали 2 ч при 37 °C, 5% CO2. Затем инокулят и препарат удаляли, после чего добавляли к клеткам твердую покровную среду с содержанием 0,9% агара и инкубировали в течение 3 суток при 37°C, 5% CO2.
Схема №2 - оценка способности препарата ингибировать репликацию вируса. Вначале на клеточную культуру наносили вирус и инкубировали в течение 2 ч при температуре 37°C и 5% CO2. Далее инокулят удаляли, после чего добавляли к клеткам твердую покровную среду с содержанием 0,9% агара, в которую был добавлен препарат в соответствующих концентрациях и инкубировали в течение 3 суток при температуре 37 °C и 5% CO2.
По окончании срока инкубации клетки фиксировали и окрашивали 0,2% раствором кристаллического фиолетового в 50%-ном этаноле с содержанием 0,05% глутарового альдегида. Далее для каждой исследованной концентрации препарата подсчитывают процент снижения количества бляшек по сравнению с контролем, после чего вычисляли 50%-ную эффективную дозу (ЭД50) – концентрацию препарата, которая снижает количество БОЕ в два раза (на 50%).
Для характеристики перспективности препарата использовали такие показатели, как ХТИ (химиотерапевтический индекс) равный отношению ЦТД50 к ЭД50. Препараты, имеющие ХТИ более 8, принято считать перспективными.
Результаты определения цитотоксичности препарата in vitro представлены на рисунке 1, на котором представлены результаты определения цитотоксичности препарата ЕGCG (А) и препарата сравнения Плаквенил (Б) с помощью МТТ-теста, m±SD, n=6. Значение ЦТД50 для препарата ЕGCG (рис.1А) составило 21,5 μM (примерно соответствует концентрации исходного препарата 2Х). Для препарата сравнения Плаквенил (Рис1Б) соответствующее значение составило 20,2 мкг/мл.
В экспериментах по определению противовирусной активности были использованы концентрации 20 и 10 μM для препарата ЕGCG (2Х и 1Х) и 5 и 2,5 мкг/мл для препарата Плаквенил (выбраны по результатам пилотного эксперимента, в котором дозы 20 и 10 мкг/мл приводили к ухудшению состояния монослоя и невозможности проводить учет количества бляшек).
Результаты исследования способности препарата Е ингибировать проникновение вируса в клетки (схема 1).
При использовании схемы 1 препарат ЕGCG контактировал с клеточной культурой как до внесения вирусного инокулята (в течение 2 ч), так и в течение 2 часов одновременно с вирусом, после чего был удален. Результаты тестирования противовирусной активности препарата представлены на рисунке 2, на котором отображено формирование бляшек в монослое клеток Vero E6 вирусом SARS-CoV-2, в присутствии и отсутствии препарата ЕGCG, а также препарата сравнения Плаквенил при использовании схемы 1.
Из данных, представленных на рисунке, видно, что количество бляшек, вызванных вирусом SARS-CoV-2, снижается при «профилактическом» внесении препарата ЕGCG, также отмечено уменьшение их размера. Ингибирование имеет дозозависимый эффект.
Результаты исследования способности препарата ЕGCG ингибировать репликацию вируса в клетках (схема 2)
При использовании схемы 2 препарат ЕGCG контактировал с клеточной культурой в течение 3 суток после заражения. Результаты тестирования противовирусной активности препарата представлены на рисунке 3 по формированию бляшек в монослое клеток Vero E6 вирусом SARS-CoV-2, в присутствии и отсутствии препарата ЕGCG, а также препарата сравнения Плаквенил при использовании схемы 2.
Из данных, представленных на рисунке, видно, что количество бляшек, вызванных вирусом SARS-CoV-2, снижается в присутствии препарата ЕGCG в дозировке 20 мкМ и близко к контрольному при использовании в дозировке 10 мкМ.
Цитотоксичность ЕGCG в культуре клеток здорового эпителия простаты RWPE и первичной культуры фибробластов кожи человека (FD).
1. Методы, используемые при изучении цитотоксичности активности
1.1 Клетки линии RWPE-1 и фибробласты FD рассевали по 3000 или 2500 клеток на лунку соответственно на лунки 96-луночного планшета.
Среда для фибробластов: DMEM+Glu 2mM+ FBS 10%
Среда для RWPE-1: Keratinocyte SFM (serum-free medium), supplements - rEGF and BPE.
1.2 На следующий день среду в лунках полностью меняли на свежую (такую же) с добавлением EGCG.
1.3 Сухой EGCG растворяли в 70% этаноле и доводили 0,9% NaCl до необходимого объема. Стоковая концентрация EGCG составляла 50 mM. Готовый раствор EGCG фильтровали через стерильный фильтр с диаметром пор 0,22 um.
Финальная концентрация EGCG после добавления к клеткам составляла 1, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 80, 100 uM. В лунки с нулевой концентрацией EGCG добавляли контрольный раствор (EtOH 70% и 0,9 NaCl в аналогичном соотношении) в объеме, эквивалентном 100 uM EGCG.
1.4 Клетки культивировали без дополнительной смены среды в течение 48 часов. По истечение этого времени в лунках полностью меняли среду на 90 мкл свежей среды без EGCG и добавляли 10 мкл реагента PrestoBlue. Измерение оптической плотности и флуоресценции измеряли через 1 час и 2 часа после добавления реагента на планшетном спектрофотометре.
Каждая точка представлена в трех повторах (три лунки для каждой концентрации EGCG). Для обработки данных использовали результаты измерения флуоресценции, снятые через 2 часа после добавления PrestoBlue. Результаты отображены на рисунке 4 , на котором показаны цитотоксические концентрации (IC50) EGCG в культуре клеток фибробластов в среде с содержанием сыворотки (10%) , и в культуре клеток эпителиальной природы RWPE (нижний ряд)
По результатам тестов IC50 EGCG в культурах эпителиальных клеток и фибробластов лежит в области 16-20 мкМ. При этом эпителиальные клетки линии RWPE более устойчивы к EGCG.
Для исследования механизма цитопротекторного действия препарата EGCG оценивали сродство к S2 и рецептор-связывающему домену (RBD) белка SARS-CoV-2 in vitro с помощью рекомбинантных белков.
Для теста активности EGCG в отношении штамма вируса B.1.1.7. параллельно оценивали сродство вируса к белку RBD, несущему мутацию N501Y, которая определяет повышенную контагиозность вируса по данным СOG-UK Consortium 2020.
Методы, используемые при изучении взаимодействия EGCG c оболочечными белками SARS-CoV-2
in vitro
Детекция комплексообразования методом микромасштабного термофореза
В исследованиях комплексообразования с EGCG использовали флуоресцентно-меченный белок RBD SARS-CoV-2, его аналог с мутацией N501Y – RBDm, а также S2. Флуоресцентное мечение каждого белка по остатку лизина (1 метка на белок) и последующую очистку от избытка красителя методом флеш-хроматографии осуществляли с использованием наборов NT™ Protein Labeling Kit RED-NHS (Nanotemper, Германия) по протоколу производителя. Итоговый раствор белка в рабочем фосфатно-солевом буфере (pH 7,4), содержащем 0,05% Tween-20, титровали EGCG. При этом концентрацию EGCG варьировали в диапазоне от 0 до 150 мкМ, а концентрацию белка поддерживали постоянной 50 нM. Для растворов флуоресцентно-меченого белка (50 нМ) с EGCG (0-150 мкМ) в рабочем буфере регистрировали кривые микромасштабного термофореза с детекцией по флуоресценции метки при 22°C на приборе Monolith NT.115, используя стандартные капилляры (NanoTemper, Германия). По изменению нормализованной флуоресценции в начальном участке термофоретической кривой рассчитывали долю комплекса, далее получали кривые и анализировали кривую связывания, использую программу MO.Affinity Analysis software (NanoTemper, Германия).
Детекция комплексообразования EGCG c флуоресцентно меченными белками методом анализа гашения флуоресценции и скорости выгорания метки
Интегральную флуоресценцию красителя, конъюгированного с белком, и скорость его выгорания регистрировали на приборе Monolith NT.115, оборудованном детектором для детекции флуоресценции в красном диапазоне. По изменению флуоресценции рассчитывали долю комплекса, далее получали кривые и анализировали кривую связывания, использую программу MO.Affinity Analysis software (NanoTemper, Германия). Аппроксимируя экспериментальные данные моделью Хилла, определяли KD = EC50 (эффективную концентрацию EGCG, соответствующую доле комплекса 50%).
На основании выраженной цитопротекторной активности EGCG предполагалось, что данный препарат блокирует стадию фузии, либо предшествующее ей взаимодействие RBD S-белка вируса с ACE2 рецептором на поверхности клетки. Для проверки ингибирования фузии анализировали взаимодействие EGCG c меченым S2-белком вируса методом микромасштабного термофореза. Результаты по взаимодействию EGCG с S2 белком представлены на рисунке 5: микротермофоретические кривые (а) и кривая связывания (б). Условия: фосфатно-солевой буфер, рН 7.4, концентрация белка: 50 нМ, 22℃. Как видно из данных рисунка, EGCG проявляет достаточно слабое сродство к S2: KD = 54±6 мкМ. Таким образом, блокирование стадии фузии – один из возможных, но не основной механизм действия препарата.
Для проверки возможности блокирования связывания вируса с клеточным рецептором анализировали взаимодействие EGCG с мечеными RBD (классический вариант) и RBDm (аналог, несущий мутацию N501Y) методами гашения флуоресцентной метки, оценки скорости выгорания метки, а также методом микромасштабного термофореза (Рис. 6, a-в). Взаимодействие EGCG с RBD и RBDm: кривые связывания и спектры кругового дихроизма. (a) Изменения испускаемой флуоресценции меченого белка при титровании препаратом EGCG. (б) Изменения скорости выгорания метки. (в) Изменения нормализованной флуоресценции (по начальному участку микротермофоретической кривой). Условия: фосфатно-солевой буфер, рН 7.4, концентрация белка: 50 нМ, 22℃. (г) Изменения спектров кругового дихроизма RBD при титровании EGCG. Условия: 10 мМ натрий-фосфатный буфер, pH 7,4; 0,7 мкМ RBD, 20℃. Результаты всех экспериментов подтверждают связывание в высоком наномолярном/низком микромолярном диапазоне концентраций; для обоих вариантов белка (RBD, RBDm) KD составляет 0,3 ± 0,2 мкМ. При дальнейшем увеличении концентрации EGCG появляются дополнительные перегибы на кривых. Общий вид кривой указывает на аллостерическое связывание, т.е. индуцированные EGCG конформационные изменения в белке. Последнее проверяли методом спектроскопии кругового дихроизма (Рис. 6 г). При титровании раствора белка препаратом EGCG до финальных концентраций 0-3,7 мкМ наблюдалось снижение амплитуды отрицательной полосы КД в области 210-220 нм, характерной для структурированных белков (альфа-спиральные и бета-складчатые структуры), и постепенное смещение точки экстремума в длинноволновую область. Дальнейшее увеличение концентрации EGCG (> 4 мкМ) приводило к выраженному сдвигу и снижению амплитуды КД-пика. Эти данные подтверждают, то EGCG меняет конформацию RBD, что, препятствует проникновению вируса в клетку.
Claims (1)
- Способ получения профилактической противовирусной композиции по отношению к SARS-CoV-2, отличающийся тем, что 10 мг эпигаллокатехин-3-галлата предварительно разводят в 25 мл 70% этанола, после чего доводят до объёма 1 л 0,9% раствором NaCl с последующей асептической фильтрацией через 0,20 мкм фильтр.
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2771898C1 true RU2771898C1 (ru) | 2022-05-13 |
Family
ID=
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2514103C1 (ru) * | 2013-02-15 | 2014-04-27 | Всеволод Иванович Киселев | Фармацевтическая композиция для лечения местных проявлений инфекций, вызванных вирусом простого герпеса и для профилактики гриппа и острых респираторных вирусных инфекций |
JP5707017B2 (ja) * | 2008-03-07 | 2015-04-22 | 太陽化学株式会社 | 茶抽出物含有口腔洗浄剤 |
EP3488849A1 (en) * | 2017-11-23 | 2019-05-29 | Assistance Publique, Hopitaux De Paris | Epigallocathechin gallate solution |
CN112546041A (zh) * | 2020-06-11 | 2021-03-26 | 广东盛普生命科技有限公司 | (-)-表没食子儿茶素没食子酸酯在制备抗冠状病毒药物方面的应用 |
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5707017B2 (ja) * | 2008-03-07 | 2015-04-22 | 太陽化学株式会社 | 茶抽出物含有口腔洗浄剤 |
RU2514103C1 (ru) * | 2013-02-15 | 2014-04-27 | Всеволод Иванович Киселев | Фармацевтическая композиция для лечения местных проявлений инфекций, вызванных вирусом простого герпеса и для профилактики гриппа и острых респираторных вирусных инфекций |
EP3488849A1 (en) * | 2017-11-23 | 2019-05-29 | Assistance Publique, Hopitaux De Paris | Epigallocathechin gallate solution |
CN112546041A (zh) * | 2020-06-11 | 2021-03-26 | 广东盛普生命科技有限公司 | (-)-表没食子儿茶素没食子酸酯在制备抗冠状病毒药物方面的应用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
In vitro Hydroxychloroquine, a less toxic derivative of chloroquine, is effective in inhibiting SARS-CoV-2 infection in vitro Jia Liu et al., Cell Discovery, 2020, 6: 16, Published online 2020 Mar 18, найдено онлайн, найдено в Интернете: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7078228/. Ruanne V. Barnabas et al., Hydroxychloroquine as Postexposure Prophylaxis to Prevent Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 Infection. A Randomized Trial, Ann Intern Med. 2020 Dec 8 : M20-6519, Published online 2020 Dec 8, найдено онлайн, найдено в Интернете: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7732017/. * |
Marta Menegazz, Protective Effect of Epigallocatechin-3-Gallate (EGCG) in Diseases with Uncontrolled Immune Activation: Could Such a Scenario Be Helpful to Counteract COVID-19? Int J Mol Sci. 2020 Jul; 21(14): 5171, найдено онлайн, найдено в Интернете: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7404268/. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US5211944A (en) | Proanthocyanidin polymers having antiviral activity and methods of obtaining same | |
US10130648B2 (en) | Therapeutic composition | |
JP2009512716A (ja) | Hiv−1キャプシド構築の低分子阻害剤 | |
Date et al. | Natural polyphenols: potential in the prevention of sexually transmitted viral infections | |
US20060019987A1 (en) | Methods and compositions for inhibiting, destroying, and/or inactivating viruses | |
JP2011529038A5 (ru) | ||
AU2017244145A1 (en) | Thiazolide compounds for treating viral infections | |
US20210196673A1 (en) | Compositions and methods for treating and preventing respiratory viral infections using green tree extract | |
ITRM20060163A1 (it) | Composizione spray ad uso topico per il tratamento e la prevenzione delle infezioni labiali da herpes simplex | |
WO2022036774A1 (zh) | 单宁酸在制备抗呼吸道病毒药物方面的应用 | |
CN112912074A (zh) | Egcg-棕榈酸酯组合物及其使用方法 | |
RU2302861C2 (ru) | Лекарственное средство для лечения вирусных кожных и опухолевых заболеваний | |
US20230321126A1 (en) | Micronutrient combination to inhibit coronavirus cell infection | |
RU2771898C1 (ru) | Способ получения профилактической противовирусной композиции на основе эпигаллокатехин-3-галлата (EGCG) | |
US20110318298A1 (en) | Viral infection therapeutic drug containing polyalkyleneimine | |
PT1567137E (pt) | Utilização de resveratrol para a preparação de um medicamento útil para o tratamento de infecções por vírus da influenza | |
WO2022115654A1 (en) | Methods for treating sars-cov-2 infection | |
US9308270B2 (en) | Pharmaceutical composition on the basis of nanomicelles containing epigallocatechin gallate and a method of administration thereof to treat atopic dermatitis, Crohn's disease, adenomyosis, and hyperplastic diseases of the prostate gland | |
JP2007522082A (ja) | 膜ウィルス生産を阻害するための薬剤、その生産のための方法、ウィルス感染症を阻害するための医薬組成物及び方法 | |
WO2021183463A1 (en) | Compositions and methods for treating coronavirus | |
AU2001294221B2 (en) | Preventives and remedies for complications of diabetes | |
US7897640B2 (en) | Method of treatment of virus infections using shikonin compounds | |
WO2011142484A1 (ja) | ポリアルキレンイミンを含むウイルス感染症治療薬 | |
CN112089841A (zh) | 用于治疗上皮组织病毒感染所致疾病的药物组合物 | |
US6323183B1 (en) | Composition for and method of treatment using triterpenoids |