RU2756164C2 - Нанокомпозитный слой на основе коллагеновых нановолокон и способ его изготовления - Google Patents

Нанокомпозитный слой на основе коллагеновых нановолокон и способ его изготовления Download PDF

Info

Publication number
RU2756164C2
RU2756164C2 RU2017137016A RU2017137016A RU2756164C2 RU 2756164 C2 RU2756164 C2 RU 2756164C2 RU 2017137016 A RU2017137016 A RU 2017137016A RU 2017137016 A RU2017137016 A RU 2017137016A RU 2756164 C2 RU2756164 C2 RU 2756164C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
collagen
layer
nano
antibiotic
mixture
Prior art date
Application number
RU2017137016A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2017137016A3 (ru
RU2017137016A (ru
Inventor
Томаш СУХИ
Моника СУПОВА
Франтишек ДЕНК
Сарка РЫГЛОВА
Маргит ЗАЛОУДКОВА
Збынек СУХАРДА
Растислав БАЛЛАИ
Лукас ГОРНЫ
Зденек ЦЕЙКА
Марек ПОКОРНЫ
Катерина КНОТКОВА
Владимир ВЕЛЕБНЫ
Original Assignee
Устав структуры а механики горнин АВ ЧР, в.в.и.
Ческе высоке учени техницке в Празе, Факулта стройни
ПроСпон, спол. с р.о.
Контипро А.С.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=60293699&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2756164(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Устав структуры а механики горнин АВ ЧР, в.в.и., Ческе высоке учени техницке в Празе, Факулта стройни, ПроСпон, спол. с р.о., Контипро А.С. filed Critical Устав структуры а механики горнин АВ ЧР, в.в.и.
Publication of RU2017137016A publication Critical patent/RU2017137016A/ru
Publication of RU2017137016A3 publication Critical patent/RU2017137016A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2756164C2 publication Critical patent/RU2756164C2/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61C—DENTISTRY; APPARATUS OR METHODS FOR ORAL OR DENTAL HYGIENE
    • A61C13/00—Dental prostheses; Making same
    • A61C13/08—Artificial teeth; Making same
    • A61C13/09—Composite teeth, e.g. front and back section; Multilayer teeth
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/702—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/7036—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin having at least one amino group directly attached to the carbocyclic ring, e.g. streptomycin, gentamycin, amikacin, validamycin, fortimicins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/02—Inorganic materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/22—Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
    • A61L27/24—Collagen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/28—Materials for coating prostheses
    • A61L27/34—Macromolecular materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/58—Materials at least partially resorbable by the body
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82B—NANOSTRUCTURES FORMED BY MANIPULATION OF INDIVIDUAL ATOMS, MOLECULES, OR LIMITED COLLECTIONS OF ATOMS OR MOLECULES AS DISCRETE UNITS; MANUFACTURE OR TREATMENT THEREOF
    • B82B3/00—Manufacture or treatment of nanostructures by manipulation of individual atoms or molecules, or limited collections of atoms or molecules as discrete units
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08K—Use of inorganic or non-macromolecular organic substances as compounding ingredients
    • C08K3/00—Use of inorganic substances as compounding ingredients
    • C08K3/32—Phosphorus-containing compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L71/00—Compositions of polyethers obtained by reactions forming an ether link in the main chain; Compositions of derivatives of such polymers
    • C08L71/02—Polyalkylene oxides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/404—Biocides, antimicrobial agents, antiseptic agents
    • A61L2300/406—Antibiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2400/00—Materials characterised by their function or physical properties
    • A61L2400/12—Nanosized materials, e.g. nanofibres, nanoparticles, nanowires, nanotubes; Nanostructured surfaces
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2420/00—Materials or methods for coatings medical devices
    • A61L2420/02—Methods for coating medical devices
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2420/00—Materials or methods for coatings medical devices
    • A61L2420/04—Coatings containing a composite material such as inorganic/organic, i.e. material comprising different phases
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
    • A61L2430/02—Materials or treatment for tissue regeneration for reconstruction of bones; weight-bearing implants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
    • A61L2430/12—Materials or treatment for tissue regeneration for dental implants or prostheses

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Manufacturing & Machinery (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Изобретение имеет отношение к биологически активному нанокомпозитному слою на основе коллагеновых нановолокон для нанесения на ортопедические и зубные имплантаты на основе металлов или металлических сплавов, ортопедическому или зубному имплантату на основе металла или металлических сплавов и способу изготовления указанного слоя. Биологически активный нанокомпозитный слой содержит нановолокна, имеющие средний диаметр 100-350 нм. Нановолокна содержат от 5 до 15 вес.% антибиотика, полиэтиленоксид в количестве не более 1 вес.% и коллаген типа I - остальное. Ортопедический или зубной имплантат содержит на по меньшей мере части его поверхности покрытие указанным нанокомпозитным слоем. Способ изготовления слоя включает стадии: коллаген типа I и полиэтиленоксид, имеющий средневязкостный молекулярный вес в диапазоне от 400'000 до 900'000, причем отношение полиэтиленоксида к коллагену составляет от 0,05 до 0,11, смешивают с фосфатным буфером для получения концентрации коллагена в смеси от 5 вес.% до 11 вес.%. Затем полученную смесь выдерживают в течение по меньшей мере 60 часов при температуре в диапазоне от 32°С до 42°С. Далее осуществляют гомогенизацию смеси путем перемешивания с одновременным добавлением этанола, с окончательным объемным отношением фосфатного буфера к этанолу от 1:1 до 1:2, после чего осуществляют электростатическое формование из смеси нанокомпозитного слоя, который упрочняют путем погружения в раствор спирта в воде с концентрацией спирта 95 вес.% с добавлением гидрохлорида N-(3-диметиламинопропил)-N этилкарбодиимида и N-гидроксисукцинимида. Вес гидрохлорида N-(3-диметиламинопропил)-N этилкарбодиимида на 1 г сформованного коллагена составляет по меньшей мере 0,625 г, и вес N-гидроксисукцинимида на 1 г сформованного коллагена составляет по меньшей мере 0,156 г. Количество раствора спирта в воде с содержанием спирта 95 вес.% составляет по меньшей мере 140 мл на 1 г сформованного коллагена. Затем слой промывают соляным раствором или фосфатным буфером и затем водой с последующим высушиванием. Далее слой пропитывают антибиотиком. Технический результат – получение нанокомпозитного слоя, воспроизводящего состав и структуру реальной кости, насколько это возможно, то есть так что он содержит только коллаген и фосфат кальция/гидроксиапатит, что обеспечивает улучшение остеоиндуктивных свойств поверхностного слоя имплантата. 3 н. и 5 з.п. ф-лы, 5 ил., 3 пр.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к ортопедическим и зубным имплантатам на основе металлов или металлических сплавов, покрытым слоем биологически активного коллагена типа I и гидроксиапатита, отличающимся эффективным высвобождением антибиотиков. Биологически активный слой, содержащий структуры с размерами в субмикронном и наномикронном диапазоне, представляет собой биологически разлагаемый, биологически совместимый и/или биологически рассасывающийся материал. Такой слой получают путем электростатического формования (прядения) и раздува волокон из раствора коллагена, содержащего наночастицы гидроксиапатита. Основным объектом настоящего изобретения является способ осаждения антибиотиков для достижения более эффективного их высвобождения без повышения цитотоксичности. Этот способ включает пропитку антибиотиками, используемыми в форме растворов, слоев сшитого стерилизованного коллагена с гидроксиапатитом.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Принимая во внимание серьезные опасности для здоровья и высокие затраты, связанные с переделками установленных имплантатов, в частности имплантатов крупных суставов, повышение срока их службы путем расширения функциональных возможностей их поверхности представляется очень перспективным и насущным направлением развития в области медицинских технологий. Учитывая то, что за последнее десятилетие количество хирургических операций по протезированию значительно выросло, внедрение современных типов имплантатов с биологически активной поверхностью, модифицированной с использованием нанотехнологий, благодаря их повышенной прочности и улучшенному врастанию в костные ткани (остеоинтеграции), может привести как к повышению удобства пациентов, так и к существенному снижению расходов на лечение. Металлические имплантаты на основе титана, титановых сплавов, нержавеющей стали и сплавов кобальта, которые до последнего времени использовались чаще всего, являются биологически совместимыми, но они биологически инертны. Такие имплантаты также часто подвергаются в среде организма различным формам коррозии. Остеоинтеграция биологически инертных металлических имплантатов сложна, и их поверхность должна в дальнейшем модифицироваться для обеспечения необходимой фиксации в кости. Для обеспечения фиксации должна быть произведена физическая и химическая или морфологическая модификация поверхности эндопротеза. В наши дни для химической модификации металлических имплантатов используются биологически активные фосфаты кальция, обычно гидроксиапатит или трикальцийфосфат. Эти биокерамические материалы демонстрируют великолепные свойства вместе с костью благодаря химической активности их поверхности, в результате которой формируется контактный минерализованный слой между имплантатом и костной тканью. Этот промежуточный слой обеспечивает физическое, химическое и механическое сцепление между имплантатом и костью. Однако использование этих материалов в их исходной форме ограничивается их механическими характеристиками или сцеплением с поверхностью имплантата. Высокое содержание гидроксиапатита повышает хрупкость, что, в свою очередь, может приводить к снижению механической прочности и ухудшения сцепления с опорной поверхностью. Другой подход может включать покрытие поверхности слоем полимер на основе синтетических полимеров, таких как алифатические полиэфиры и их сополимеры. Улучшение биологической активности поверхности может быть достигнуто путем покрытия природными полимерами (коллаген, желатин). Если эти природные полимеры в форме нановолокон дополнены фосфатом кальция в форме наночастиц, поверхность с наномикронными размерами составляющих ее структур идеальна для обеспечения подходящего сцепления, и достигается быстрое разрастание костных клеток. Другое достоинство этих композитных материалов заключается в возможности выбора определенных компонентов в соответствии с их составом и ориентацией, материалом, физическими и химическими характеристиками, которые могут обеспечить широкий спектр механических и биологических свойств.
В то же время слои этих биологически активных материалов могут служить в качестве местных носителей антибиотиков в связи с их постепенным высвобождением для предотвращения остеомиелита. Местное применение антибиотиков более предпочтительно, поскольку в этом случае обеспечиваются повышенные дозы, и, кроме того, достоинствами являются более короткий путь доставки и минимальные флуктуации уровней антибиотиков в кровотоке. Таким образом, антибиотики действуют также в аваскулярных зонах без повышения общей токсичности. Кроме того, антибиотик может воздействовать как на остаточные планктонные микроорганизмы, так и на сидячие формы в биопленке. Местные носители антибиотиков также заполняют "мертвую зону", возникающую после удаления отмирающих тканей инфицированной кости.
Что касается неразрушаемых биологически матриц, которые могут использоваться в качестве носителей антибиотиков, то наиболее распространенным материалом является полиметилметакрилат (часто используется в качестве костного цемента). Его недостатком является неконтролируемое, или даже слишком быстрое, высвобождение высоких концентраций антибиотиков и необходимость еще одной хирургической операции по окончании лечения (лечение проводится в два этапа: заживление, завершающая имплантация). Поэтому в настоящее время ведутся исследования биологически разлагаемых систем, для которых отпадает необходимость в дополнительной хирургической операции. Эти системы также обеспечивают возможность регулируемого высвобождения лекарственного средства за счет физической и химической конфигурации матрицы/носителей и лекарственных средств. Такие системы могли бы обеспечивать антибиотики в концентрациях, превышающих минимальные концентрации подавления роста (ингибирования) для большей части известных патогенных микроорганизмов без негативных побочных действий. Наиболее часто используются такие антибиотики, как гентамицин, ванкомицин, тобрамицин и их комбинации.
Регулируемая скорость высвобождения зависит от проницаемости, химической модификации матрицы/носителя, толщины слоя, степени сшивания матрицы/носителя, физических и химических свойств лекарственного средства, взаимодействия между полимерной матрицей, связанным лекарственным средством и растворяющей средой, а также от взаимного расположения компонентов. Высвобождение антибиотиков в лабораторных условиях обычно непрерывно контролируется с использованием УФ-спектрометрии или высокоэффективной жидкостной хроматографии. Биологические испытания, проводимые в лаборатории на остеобластах или на мезенхимальных стволовых клетках, не только характеризуют цитотоксичность самого материала, но также дают возможность непосредственной оценки ингибирующего потенциала концентрации высвобожденного антибиотика или влияния используемых способов получения (например, сшивания коллагена) на биологическую совместимость исследуемого материала. Испытания, проводимые для получения характеристик практической антибактериальной активности, часто выполнялись на трех видах микроорганизмов, таких как грамположительные стафилококки, грамотрицательные псевдомонады и Е. coli.
Антибиотики могут быть введены с использованием различных способов. Основной способ представляет собой простое перемешивание полимера и антибиотика в форме порошка или раствора. Недостатком этого способа является использование органических растворителей. Другим традиционным способом является выдерживание полимера в растворе, содержащем антибиотики. Нановолоконные слои, насыщенные антибиотиками, часто получают путем непосредственного формования из раствора полимера, содержащего необходимое лекарственное средство. Несмотря на то, что условия, создаваемые при электростатическом формовании, очень важны для стабильности антибиотиков, они не принимаются во внимание. Некоторые антибиотики, такие как ванкомицин, чувствительны к температуре, и было установлено, что в течение нескольких часов они преобразуются в растворе в неактивные формы уже при комнатной температуре. Эти неактивные формы не обнаруживаются обычными средствами. Традиционно используемая УФ/ВИД-спектрометрия неспособна обнаружить эти неактивные формы, и поэтому анализы должны выполняться с использованием жидкостной хроматографии. Коллагеновые нанослои должны быть сшиты после электростатического формования. При выполнении этой процедуры их промывают, и нановолоконный носитель становится менее эффективным, что, в конечном счете, снижает экономическую эффективность всего процесса.
Цель настоящего изобретения заключается, среди прочего, в получении нанокомпозитного слоя, воспроизводящего состав и структуру реальной кости, насколько это возможно, то есть, так что он содержит только коллаген и фосфат кальция/гидроксиапатит, что обеспечивает улучшение остеоиндуктивных свойств поверхностного слоя имплантата. Таким образом, присутствие любых дополнительных компонентов (кроме антибиотиков), включая полиэтиленоксид, нежелательно. Использование полиэтиленоксида предпочтительно для обеспечения эффективного процесса электростатического формования, однако благодаря достаточному, почти полному вымыванию полиэтиленоксида обеспечивается оптимальный состав вышеописанного слоя.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Недостатки известных технических решений в значительной степени устраняются предлагаемым в настоящем изобретении биологически активным нанокомпозитным слоем на основе коллагеновых нановолокон для нанесения на ортопедические и зубные имплантаты, причем слой содержит нановолокна, имеющие средний диаметр 100-350 нм и содержащие коллаген типа I в количестве от 75 вес.% до 100 вес.%, предпочтительно от 85 вес.% до 100 вес.%, и нановолокна содержат полиэтиленоксид в количестве не более 1 вес.%. Целью является нулевое содержание полиэтиленоксида, однако наверно он всегда будет присутствовать в ничтожно малых количествах. Поэтому выражение "полиэтиленоксид в количестве не более 1 вес.%" относится к содержанию полиэтиленоксида в диапазоне от 0 вес.% до 1 вес.%.
Предпочтительно нанокомпозитный слой содержит антибиотик в количестве от 5 вес.% до 15 вес.%, предпочтительно от 7 вес.% до 12 вес.%, предпочтительно от 9 вес.% до 11 вес.%, причем антибиотик выбирают из группы, состоящей из ванкомицина, гентамицина, тобрамицина и их комбинаций.
В соответствии с другим предпочтительным вариантом нанокомпозитный слой содержит также гидроксиапатит в количестве от 5 вес.% до 15 вес.% в форме наночастиц с размерами 25-250 нм.
Недостатки известных технических решений в значительной степени устраняются предлагаемым в настоящем изобретении ортопедическим или зубным имплантатом на основе металла или металлических сплавов, по меньшей мере частично покрытым вышеописанным биологически активным нанокомпозитным слоем, и такой имплантат предлагается для использования в медицине для людей или животных.
В изобретении также предлагаются ортопедические и зубные имплантаты на основе металлов или металлических сплавов, покрытые биологически активным композитным слоем на основе коллагеновых нановолокон с внедренными в них наночастицами гидроксиапатита и антибиотиком или комбинацией антибиотиков.
Нанокомпозитный слой по настоящему изобретению получают, используя следующий способ: коллаген типа I и полиэтиленоксид, имеющий средневязкостный молекулярный вес в диапазоне от 400'000 до 900'000, причем отношение полиэтиленоксида к коллагену составляет от 0,05 до 0,11, смешивают с фосфатным буфером для получения концентрации коллагена в смеси от 5 вес.% до 11 вес.%, затем полученную смесь выдерживают в течение по меньшей мере 60 часов при температуре в диапазоне от 32°С до 42°С, затем осуществляют ее гомогенизацию путем перемешивания с одновременным добавлением этанола, с окончательным объемным отношением фосфатного буфера к этанолу от 1:1 до 1:2, после чего осуществляют электростатическое формование из смеси нанокомпозитного слоя, с последующим промыванием соляным раствором или фосфатным буфером и затем водой с последующим высушиванием.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Изобретение описывается далее более подробно с использованием примеров и чертежей, причем на чертежах показано:
Фигура 1 - графики концентрации активной формы ванкомицина (медиана, вероятное отклонение), высвобожденного из материалов, содержащих 0 вес.% (фиг. 1а), 5 вес.% (фигура 1b) и 15 вес.% (фигура 1с) гидроксиапатита (ГА), приготовленных тремя различными способами.
Фигура 2 - размеры зон ингибирования для материалов, приготовленных с помощью определенных способов с использованием MSRA. * относится к статистически значительным различиям (критерий Манна-Уитни, p=0,05).
Фигура 3 - диаграммы активной формы ванкомицина из материалов, приготовленных путем пропитки в среде плазмы крови (медиана, вероятное отклонение). * относится к статистически значительным различиям (критерий Манна-Уитни, p=0,05).
Фигура 4 - диаграммы размеров зон ингибирования для материалов, приготовленных пропиткой, для разных концентраций гидроксиапатита и положительного контроля (диски EUCAST). * относится к статистически значительным различиям (среднее, среднеквадратическое отклонение, критерий Манна-Уитни, p=0,05) по сравнению с положительным контролем.
Фигура 5 - флюоресцентные изображения остеобластов, культивируемых в течение 2 и 8 дней на пропитанных слоях, и слои перед пропиткой (N0, N5 и N15).
ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫЕ ВАРИАНТЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Ниже описываются варианты осуществления изобретения, в которых нанослой получают с помощью электростатического формования волокон из коллагена типа I, дополнительно с добавлением гидроксиапатита с размерами частиц 50-250 нм и с добавлением полиэтиленоксида в количестве от 5 вес.% до 11 вес.%, предпочтительно 8 вес.% раствора в фосфатном буфере (0,01 М мононатрийфосфата, 0,0027 М хлорида калия и 0,137 М хлорида натрия, рН=7,4 при температуре 25°С), и с последующим добавлением этанола в отношении 1:1 (до 1:2) к объему фосфатного буфера. Слой и способ его изготовления разработаны для формирования слоя коллагена со средним диаметром волокон 100-350 нм и дополнительно содержащего равномерно распределенные наночастицы гидроксиапатита. Слой может быть электростатически нанесен непосредственно на поверхность металлического имплантата.
Процесс изготовления содержит следующие стадии: навеску лиофилизированного коллагена и полиэтиленоксида с молекулярным весом в диапазоне 400'000-900'000 смешивают с фосфатным буфером. Соотношение весов полиэтиленоксида и коллагена находится в диапазоне от 0,05 до 0,11, предпочтительное соотношение - 0,08. Подготовленную смесь выдерживают при температуре в диапазоне 32-42°С, предпочтительно при температуре 37°С, по меньшей мере в течение 60 часов, предпочтительно по меньшей мере в течение 72 часов. Следующая стадия представляет собой гомогенизацию с высокой скоростью вращения в диапазоне 7000-15000 об/мин с добавлением гидроксиапатита и этанола. Полученную дисперсию формуют (прядут) с помощью электростатического поля напряженностью в диапазоне 200-300 кВ/м, причем дисперсия подается с расходом 100-200 мкл/мин в условиях относительной влажности, не превышающей 30%, и температуры, не превышающей 37°С. Процесс электростатического формования предпочтительно дополняется раздувом в электростатическом поле или раздувом потоком воздуха, предпочтительного нагретым до температуры 20-25°С, с расходом, например, 15-50 л/мин. Поток воздуха направляется в зону, окружающую выпускное отверстие сопла, и улучшает процесс формирования волокон из вышеуказанного раствора. Прочность слоя после электростатического формования повышают путем его погружения в 95% раствор спирта (например, этанола) в воде с гидрохлоридом N-(3-диметиламинопропил)-М этилкарбодиимида (EDC) и N-гидроксисукцинимидом (NHS) при температуре 32-42°С, предпочтительно при температуре 37°С, на 18-30 часов, предпочтительно примерно на 24 часа, и течение этого времени происходит образование поперечных связей (сшивание). При этом по меньшей мере 0,625 г EDC и 0,156 г NHS (то есть, весовое отношение EDC к NHS составляет 4:1) смешивают по меньшей мере со 140 мл 95% спирта на 1 г коллагена. После сшивания слой промывают в соляном растворе или в фосфатном буфере по меньшей мере в течение 2×30 минут и затем промывают дистиллированной водой по меньшей мере в течение 30 минут. В процессе сшивания и промывки слоя полиэтиленоксид вымывается практически полностью. Затем осуществляют сублимационную сушку слоя. Слой, получаемый вышеописанным способом, содержит коллаген в количестве 85-100 вес.% и гидроксиапатит в количестве 0-15 вес.%. Для стерилизации слоя может использоваться стерилизация этиленоксидом или стандартная стерилизация гамма-лучами. Достоинством электростатического формования волокон из дисперсии коллагена и гидрооксиапатита является достижение однородности слоя по всему его объему за счет комбинации характеристик раствора и характеристик процесса формования.
Предпочтительно также вводят антибиотики. Антибиотики вводят в слой с использованием пропитки в дисперсии этанола или воды или соляного раствора, причем концентрация антибиотиков находится в диапазоне от 10 вес.% до 50 вес.%. Пропитка может осуществляться либо путем погружения имплантата с нанесенным слоем в дисперсию, либо нанесением дисперсии на слой с помощью кисти, либо с использованием распыления дисперсии. После нанесения дисперсии слой выдерживают при комнатной температуре до полного испарения растворителя. Подходящие антибиотики включают, например, гентамицин, ванкомицин, тобрамицин или их комбинации, такие как ванкомицин и гентамицин в различных весовых отношениях. Эффективность пропитки показана ниже на примере ванкомицина.
Пропитка слоев (EI0, EI5 и EI15) была выбрана в качестве оптимального способа введения антибиотика по сравнению с двумя другими способами изготовления слоев: лиофилизация коллагеновой дисперсии, содержащей гидроксиапатит в количестве 0 вес.%, 5 вес.% и 15 вес.% и ванкомицин в количестве 10 вес.% (L0, L5 и L15), и электростатическое прядение коллагеновой дисперсии, содержащей гидроксиапатит в количестве 0 вес.%, 5 вес.% и 10 вес.% и ванкомицин в количестве 10 вес.% (Е0, Е5 и Е15). Влияние конкретных способов изготовления слоев и их структурных свойств на кинетику высвобождения ванкомицина определялось средствами высокоэффективной жидкостной хроматографии, и полученные результаты приведены на фигуре 1.
Максимальная концентрация ванкомицина, высвобождаемого из материала, полученного с помощью лиофилизации, а именно примерно 250 мг/л, была достигнута на восьмой день. Материал, полученный с помощью электростатического прядения, показал максимальную величину, а именно примерно 60 мг/л, через 24 часа, в то время как материал, полученный с использованием пропитки, показал максимальную величину, а именно примерно 700 мг/л, через 3 часа. Концентрация высвобождаемой активной формы ванкомицина превышала минимальную концентрацию ингибирования (16 мг/л) в 17 раз для лиофилизированного материала, в 4 раза для материала, полученного с помощью электростатического прядения, и в 44 раза для материала, полученного с использованием пропитки. Все указанные материалы обеспечивают поддержание концентрации ингибирования активной формы ванкомицина выше минимальной концентрации ингибирования в течение 21 дня. Результаты испытаний аналогичного материала, приведенные в публикациях (Wachol-Drevek, 1996 и Tu и др., 2012), показывают, что 90% ванкомицина было высвобождено через 24 часа, и полное время высвобождения достигало 4 дней. Материал, полученный с использованием пропитки, показал наивысшую эффективность, которая была также подтверждена предварительными испытаниями на антимикробную чувствительность (фигура 2).
Материал, получаемый с использованием пропитки, также исследовался на высвобождение ванкомицина в плазме крови. Как это очевидно из фигуры 3, материал еще способен высвобождать даже через 30 дней примерно 62 мг/л активной формы ванкомицина, что превышает минимальную концентрацию ингибирования почти в 4 раза. Эффект концентрации гидроксиапатита не очевиден.
Этот материал также испытывался на антимикробную чувствительность в отношении четырех видов микробов. Размеры зон ингибирования конкретных видов микробов приведены на фигуре 4. Все испытуемые материалы показали антимикробную активность как в отношении штаммов Staphylococci, так и в отношении штаммов, устойчивых к гентамицину. Размеры зон ингибирования были сравнимы с положительным контролем (стандартные диски, EUCAST). Отрицательный контроль (образцы без ванкомицина) показал нулевую зону ингибирования (на диаграмме не показано).
Слои, получаемые с использованием пропитки, исследовались на цитотоксичность и цитосовместимость в лабораторных условиях с использованием костных клеток (SAOS-2, Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Germany). Клетки выращивались как в бульоне, так и непосредственно на слоях, и оценивалась их метаболическая активность (тест MTS), а их адгезия и разрастание оценивались с помощью микроскопа. Испытания показали, что высвобождаемые количества антибиотиков не токсичны, и слои цитосовместимы. На фигуре 5 приведены иллюстративные изображения флюоресцентно подкрашенных клеток через два дня и восемь дней выращивания на слоях с ванкомицином, без ванкомицина (N0, N5 и N15) и на положительном контроле (PS).
ПРИМЕР 1
Нанослой был изготовлен путем электростатического формования волокон из коллагена типа I, содержащегося в количестве 8 вес.% в фосфатном буфере, с последующим добавлением этанола (в объемном отношении 1:1), к которому был добавлен полиэтиленоксид в весовом отношении полиэтиленоксида к колллагену, равном 0,08. Средний диаметр коллагеновых волокон был равен примерно 220 нм. Слой был электростатически нанесен непосредственно на поверхность металлического имплантата. Процесс изготовления содержал следующие стадии: навеску лиофилизированного коллагена и полиэтиленоксид с молекулярным весом 900'000 смешивали с фосфатным буфером. Приготовленную смесь выдерживали в течение 72 часов при температуре 37°С. На следующей стадии осуществляли гомогенизацию смеси на высокой скорости вращения, равной 10000 об/мин, с одновременным добавлением этанола. Из полученной дисперсии получали волокна способом электростатического формования в электростатическом поле напряженностью 250 кВ/м при расходе дисперсии 130 мкл/мин, в условиях относительной влажности воздуха 25% и температуры 30°С. Процесс формования сопровождался электростатическим раздувом или подачей потока подогретого воздуха при температуре 24°С с расходом 35 л/мин. Прочность слоя после электростатического формования повышали погружением в раствор этанола в количестве 95 вес.% с водой и EDC и NHS на 24 часа при температуре 37°С. На 1 г коллагена пришлось по меньшей мере 0,625 г EDC и 0,156 г NHS, смешанных со 140 мл 95% спирта. После сшивания слой промывали в течение 2×30 минут 0,1 М раствором Na2HPO4 и наконец в течение 30 минут промывали дистиллированной водой. В процессе сшивания и промывки слоя полиэтиленоксид вымывался практически полностью. Затем осуществляли сублимационную сушку слоя. Слой, полученный таким способом, содержал коллаген в количестве 100 вес.%. Для стерилизации слоя использовали этиленоксид. Затем в слой вводили антибиотик путем пропитки в этаноловой дисперсии, содержание антибиотика в которой составляло 20 вес.%. В качестве антибиотика использовался ванкомицин. Пропитку осуществляли путем нанесения антибиотика кистью на нанесенный слой, так чтобы получить окончательную концентрацию антибиотика в слое (после испарения растворителя) порядка 8 вес.% от общего веса слоя. После нанесения дисперсии слой выдерживали при комнатной температуре до полного испарения растворителя.
ПРИМЕР 2
Нанослой был изготовлен путем электростатического прядения волокон из коллагена типа I, содержащегося в количестве 10 вес.% в фосфатном буфере, с последующим добавлением этанола (в объемном отношении 1:1), к которому был добавлен полиэтиленоксид в весовом отношении полиэтиленоксида к колллагену, равном 0,10. Средний диаметр коллагеновых волокон составил примерно 180 нм, и они содержали распределенные в них наночастицы гидроксиапатита, которые составляли фракцию 170 нм. Слой был электростатически нанесен непосредственно на поверхность металлического имплантата. Процесс изготовления содержал следующие стадии: навеску лиофилизированного коллагена и полиэтиленоксид с молекулярным весом 800'000 смешивали с фосфатным буфером. Приготовленную смесь выдерживали в течение 88 часов при температуре 35°С. На следующей стадии осуществляли гомогенизацию смеси на высокой скорости вращения порядка 12000 об/мин с добавлением этанола и гидроксиапатита с весовым отношением гидроксиапатита к коллагену 5:95. Из полученной дисперсии получали волокна способом электростатического формования в электростатическом поле напряженностью 280 кВ/м при расходе дисперсии 140 мкл/мин, в условиях относительной влажности воздуха 25% и температуры 27°С. Процесс формования сопровождался электростатическим раздувом или подачей потока подогретого воздуха при температуре 22°С и с расходом 40 л/мин. Прочность слоя после электростатического формования улучшали погружением в раствор этанола в количестве 95 вес.% и EDC и NHS на 24 часа при температуре 37°С. На 1 г коллагена пришлось по меньшей мере 0,800 г EDC и 0,200 г NHS, смешанных с 200 мл 95% спирта. После сшивания слой промывали в течение 2×40 минут 0,1 М раствором Na2HPO4 и наконец в течение 30 минут промывали дистиллированной водой. В процессе сшивания и промывки слоя полиэтиленоксид вымывался практически полностью. Затем осуществляли сублимационную сушку слоя. Слой, получаемый вышеописанным способом, содержал коллаген в количестве 95 вес.% и гидроксиапатит в количестве 5 вес.%. Для стерилизации слоя использовали этиленоксид. Затем в слой вводили антибиотик путем пропитки в водной дисперсии, содержание антибиотика в которой составляло 30 вес.%. В качестве антибиотика использовался гентамицин. Пропитку осуществляли путем нанесения дисперсии, содержащей антибиотик, кистью на нанесенный слой, так чтобы получить окончательную концентрацию антибиотика в слое (после испарения растворителя) порядка 10 вес.% от общего веса слоя. После нанесения дисперсии слой выдерживали при комнатной температуре до полного испарения растворителя.
ПРИМЕР 3
Нанослой был изготовлен путем электростатического прядения волокон из коллагена типа I, содержащегося в количестве 8 вес.% в фосфатном буфере и этаноле (в объемном отношении 1:1), к которому был добавлен полиэтиленоксид в весовом отношении полиэтиленоксида к колллагену, равном 0,08. Средний диаметр коллагеновых волокон составил примерно 310 нм, и они содержали равномерно распределенные наночастицы гидроксиапатита, которые составляли фракцию 190 нм. Слой был электростатически нанесен непосредственно на поверхность металлического имплантата. Процесс изготовления содержал следующие стадии: навеску лиофилизированного коллагена и полиэтиленоксид с молекулярным весом 700'000 смешивали с фосфатным буфером. Приготовленную смесь выдерживали в течение 92 часов при температуре 40°С. На следующей стадии осуществляли гомогенизацию смеси на высокой скорости вращения порядка 15'000 об/мин, и в процессе гомогенизации добавляли гидроксиапатит в весовом отношении к коллагену, равном 15:85, и этанол. Из полученной дисперсии получали волокна способом электростатического формования в электростатическом поле напряженностью 270 кВ/м при расходе дисперсии 150 мкл/мин, в условиях относительной влажности воздуха 26% и температуры 25°С. Процесс формования сопровождался электростатическим раздувом или подачей потока подогретого воздуха при температуре 24°С с расходом 45 л/мин. Прочность слоя после электростатического формования повышали погружением в раствор спирта в количестве 95 вес.% с водой и EDC и NHS на 24 часа при температуре 37°С. На 1 г сформованного коллагена пришлось по меньшей мере 0,920 г EDC и 0,230 г NHS, смешанных по меньшей мере с 250 мл 95% спирта. После сшивания слой промывали в течение 2×35 минут 0,1 М раствором Na2HPO4 и наконец в течение 40 минут промывали дистиллированной водой. В процессе сшивания и промывки слоя полиэтиленоксид вымывался практически полностью. Затем осуществляли сублимационную сушку слоя. Слой, получаемый вышеописанным способом, содержал коллаген в количестве 85 вес.% и гидроксиапатит в количестве 15 вес.%. Для стерилизации слоя использовали этиленоксид. Затем в слой вводили антибиотики путем пропитки в спиртовой дисперсии, содержание антибиотика в которой составляло 30 вес.%. В качестве антибиотика использовалась смесь гентамицина с ванкомицином в весовом отношении 1:1. Пропитку осуществляли путем распыления дисперсии. После нанесения дисперсии слой выдерживали при комнатной температуре до полного испарения растворителя. Пропитку осуществляли путем нанесения кистью дисперсии, содержащей антибиотик, на нанесенный слой, так чтобы получить окончательную концентрацию антибиотика в слое (после испарения растворителя) порядка 11 вес.% от общего веса слоя.
Хотя здесь были описаны некоторые предпочтительные варианты осуществления изобретения, следует понимать, что специалист в данной области техники легко сможет предложить и другие возможные альтернативные варианты. Таким образом, объем настоящего изобретения не ограничивается этими предпочтительными вариантами, а определяется прилагаемой формулой.
Промышленная применимость
Ортопедические и зубные имплантаты на основе металлов или металлических сплавов, покрытые биологически активным слоем коллагена типа I, также дополнительно содержащим гидроксиапатит и введенный антибиотик, полученные в соответствии с настоящим изобретением, могут использоваться в медицине для людей и животных, особенно в протезировании и стоматологии.

Claims (8)

1. Биологически активный нанокомпозитный слой на основе коллагеновых нановолокон для нанесения на ортопедические и зубные имплантаты на основе металлов или металлических сплавов, причем слой содержит нановолокна, имеющие средний диаметр 100-350 нм, отличающийся тем, что нановолокна содержат от 5 до 15 вес. % антибиотика, полиэтиленоксид в количестве не более 1 вес.% и коллаген типа I - остальное.
2. Нанокомпозитный слой по п. 1, отличающийся тем, антибиотик выбран из группы, состоящей из ванкомицина, гентамицина, тобрамицина и их комбинаций.
3. Нанокомпозитный слой по п. 1 или 2, отличающийся тем, что нановолокна содержат также гидроксиапатит в количестве 5-15 вес.% в форме наночастиц размерами 50-250 нм.
4. Ортопедический или зубной имплантат на основе металла или металлических сплавов, отличающийся тем, что по меньшей мере часть его поверхности покрыта нанокомпозитным слоем по любому из предыдущих пунктов.
5. Способ изготовления слоя по п. 1, отличающийся тем, что коллаген типа I и полиэтиленоксид, имеющий средневязкостный молекулярный вес в диапазоне от 400'000 до 900'000, причем отношение полиэтиленоксида к коллагену составляет от 0,05 до 0,11, смешивают с фосфатным буфером для получения концентрации коллагена в смеси от 5 вес.% до 11 вес.%, затем полученную смесь выдерживают в течение по меньшей мере 60 часов при температуре в диапазоне от 32°С до 42°С, затем осуществляют ее гомогенизацию путем перемешивания с одновременным добавлением этанола, с окончательным объемным отношением фосфатного буфера к этанолу от 1:1 до 1:2, после чего осуществляют электростатическое формование из смеси нанокомпозитного слоя, который упрочняют путем погружения в раствор спирта в воде с концентрацией спирта 95 вес.% с добавлением гидрохлорида N-(3-диметиламинопропил)-N этилкарбодиимида и N-гидроксисукцинимида, причем вес гидрохлорида N-(3-диметиламинопропил)-N этилкарбодиимида на 1 г сформованного коллагена составляет по меньшей мере 0,625 г, и вес N-гидроксисукцинимида на 1 г сформованного коллагена составляет по меньшей мере 0,156 г, и количество раствора спирта в воде с содержанием спирта 95 вес.% составляет по меньшей мере 140 мл на 1 г сформованного коллагена, затем слой промывают соляным раствором или фосфатным буфером и затем водой с последующим высушиванием, и затем слой пропитывают антибиотиком.
6. Способ изготовления по п. 5, отличающийся тем, что в процессе гомогенизации в раствор добавляют гидроксиапатит в количестве от 5 вес.% до 15 вес.% от веса коллагена.
7. Способ изготовления по п. 5, отличающийся тем, что антибиотик выбран из группы, состоящей из ванкомицина, гентамицина, тобрамицина или их смеси.
8. Способ изготовления по любому из пп. 5-7, отличающийся тем, что пропитку выполняют путем погружения слоя в дисперсию, или осаждения дисперсии на слой или распыления дисперсии на слой, причем дисперсия представляет собой дисперсию антибиотиков в спирте, воде или в смеси спирта и воды.
RU2017137016A 2016-10-20 2017-10-20 Нанокомпозитный слой на основе коллагеновых нановолокон и способ его изготовления RU2756164C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZPV2016-656 2016-10-20
CZ2016656A CZ309165B6 (cs) 2016-10-20 2016-10-20 Příprava nanokompozitní vrstvy na bázi kolagenových nanovláken

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2017137016A RU2017137016A (ru) 2019-04-22
RU2017137016A3 RU2017137016A3 (ru) 2021-01-15
RU2756164C2 true RU2756164C2 (ru) 2021-09-28

Family

ID=60293699

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017137016A RU2756164C2 (ru) 2016-10-20 2017-10-20 Нанокомпозитный слой на основе коллагеновых нановолокон и способ его изготовления

Country Status (3)

Country Link
EP (1) EP3311854B1 (ru)
CZ (1) CZ309165B6 (ru)
RU (1) RU2756164C2 (ru)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI701364B (zh) * 2018-03-22 2020-08-11 美商威斯頓股份有限公司 天然高分子奈米纖維及其製造方法
CN110141687B (zh) 2019-05-30 2021-10-08 四川大学 一种引导牙周硬软组织再生梯度材料及其制备方法
CZ2019777A3 (cs) 2019-12-17 2021-07-21 Všeobecná fakultní nemocnice v Praze Sendvičová kolagenní pěna pro řízené uvolňování aktivních látek a způsob její přípravy
CN114081996A (zh) * 2021-11-16 2022-02-25 清华大学 一种高矿物含量诱导骨再生纤维膜
CN117138113A (zh) * 2023-08-25 2023-12-01 重庆生物智能制造研究院 一种矿化胶原材料及其制备方法和应用

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2206341C1 (ru) * 2002-09-16 2003-06-20 Закрытое акционерное общество "Аграрно-промышленная фирма "Фито-ЭМ" Способ формирования костного имплантата
RU2261116C2 (ru) * 1999-04-20 2005-09-27 К.Х. Шмидт Имплантат для восстановления позвонков и трубчатых костей
WO2009049565A2 (en) * 2007-10-15 2009-04-23 Elmarco, S.R.O. Method for production of nanofibres
WO2009131638A2 (en) * 2008-04-25 2009-10-29 Yeshiva University Drug release coastings on calcium phosphate and uses thereof
RU2452517C2 (ru) * 2007-01-30 2012-06-10 Хемотек Аг Биоразрушаемое средство для поддержания просвета сосудов
RU2482880C1 (ru) * 2012-05-21 2013-05-27 Владимир Николаевич Горшенёв Способ получения пористого костного биокомпозита
WO2015162559A1 (en) * 2014-04-21 2015-10-29 Ineb - Instituto Nacional De Engenharia Biomédica Mesh composition for repairing or the regeneration of tissues and methods thereof
RU2591087C2 (ru) * 2010-12-22 2016-07-10 Гайстлих Фарма Аг Материал заменителя кости

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ28981U1 (cs) * 2015-10-14 2015-12-14 Ăšstav struktury a mechaniky hornin AV ÄŚR, v.v.i. Bioaktivní nanokompozitní vrstva na bázi kolagenových nanovláken s integrovanými kalcium fosfátovými částicemi pro aplikace v ortopedii

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2261116C2 (ru) * 1999-04-20 2005-09-27 К.Х. Шмидт Имплантат для восстановления позвонков и трубчатых костей
RU2206341C1 (ru) * 2002-09-16 2003-06-20 Закрытое акционерное общество "Аграрно-промышленная фирма "Фито-ЭМ" Способ формирования костного имплантата
RU2452517C2 (ru) * 2007-01-30 2012-06-10 Хемотек Аг Биоразрушаемое средство для поддержания просвета сосудов
WO2009049565A2 (en) * 2007-10-15 2009-04-23 Elmarco, S.R.O. Method for production of nanofibres
WO2009131638A2 (en) * 2008-04-25 2009-10-29 Yeshiva University Drug release coastings on calcium phosphate and uses thereof
RU2591087C2 (ru) * 2010-12-22 2016-07-10 Гайстлих Фарма Аг Материал заменителя кости
RU2482880C1 (ru) * 2012-05-21 2013-05-27 Владимир Николаевич Горшенёв Способ получения пористого костного биокомпозита
WO2015162559A1 (en) * 2014-04-21 2015-10-29 Ineb - Instituto Nacional De Engenharia Biomédica Mesh composition for repairing or the regeneration of tissues and methods thereof

Also Published As

Publication number Publication date
EP3311854A1 (en) 2018-04-25
CZ2016656A3 (cs) 2018-05-02
RU2017137016A3 (ru) 2021-01-15
CZ309165B6 (cs) 2022-04-06
RU2017137016A (ru) 2019-04-22
EP3311854B1 (en) 2020-08-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2756164C2 (ru) Нанокомпозитный слой на основе коллагеновых нановолокон и способ его изготовления
Yang et al. Anti-infective efficacy, cytocompatibility and biocompatibility of a 3D-printed osteoconductive composite scaffold functionalized with quaternized chitosan
Behzadi et al. Nanomedicine for safe healing of bone trauma: opportunities and challenges
Romanò et al. Antibacterial coating of implants in orthopaedics and trauma: a classification proposal in an evolving panorama
Cheng et al. Long‐lasting in vivo and in vitro antibacterial ability of nanostructured titania coating incorporated with silver nanoparticles
Zheng et al. The use of BMP-2 coupled–Nanosilver-PLGA composite grafts to induce bone repair in grossly infected segmental defects
Zhou et al. Enhanced bone tissue regeneration by antibacterial and osteoinductive silica-HACC-zein composite scaffolds loaded with rhBMP-2
Gao et al. Enhancing antibacterial capability and osseointegration of polyetheretherketone (PEEK) implants by dual-functional surface modification
Daugela et al. Novel cellulose/hydroxyapatite scaffolds for bone tissue regeneration: In vitro and in vivo study
Shi et al. Gentamicin‐impregnated chitosan/nanohydroxyapatite/ethyl cellulose microspheres granules for chronic osteomyelitis therapy
Wu et al. Controlled release of gentamicin from gelatin/genipin reinforced beta-tricalcium phosphate scaffold for the treatment of osteomyelitis
WO2022012339A1 (zh) 一种构建骨形态发生蛋白缓释系统的方法
AU2017376835A1 (en) A medical implant and a method of coating a medical implant
Xi et al. Biomimetic bioactive multifunctional poly (citrate-siloxane)-based nanofibrous scaffolds enable efficient multidrug-resistant bacterial treatment/non-invasive tracking in vitro/in vivo
Piarali et al. Activated polyhydroxyalkanoate meshes prevent bacterial adhesion and biofilm development in regenerative medicine applications
Belcarz et al. Covalent coating of hydroxyapatite by keratin stabilizes gentamicin release
Wei et al. Development of an antibacterial bone graft by immobilization of levofloxacin hydrochloride-loaded mesoporous silica microspheres on a porous scaffold surface
Cheng et al. 3D-printed drug-loaded composite scaffolds to promote osteogenesis and antibacterial activity
EP2953657B1 (en) Tissue substitute material with biologically active coating
Zhang et al. Biomimetic inorganic nanoparticle-loaded silk fibroin-based coating with enhanced antibacterial and osteogenic abilities
Nivedhitha Sundaram et al. Chitosan-Gelatin composite scaffolds in bone tissue engineering
e Silva et al. Nanofibers in the treatment of osteomyelitis and bone regeneration
Martin et al. Composite scaffolds for bone regeneration and infection control
Jiang et al. Current application and future perspectives of antimicrobial degradable bone substitutes for chronic osteomyelitis
Nwasike et al. Recent advances in controlled release technologies for the co-delivery of antimicrobial and osteoconductive therapeutics