RU2750591C1 - Method for determining the degree of staining of endothelial cells - Google Patents
Method for determining the degree of staining of endothelial cells Download PDFInfo
- Publication number
- RU2750591C1 RU2750591C1 RU2020117107A RU2020117107A RU2750591C1 RU 2750591 C1 RU2750591 C1 RU 2750591C1 RU 2020117107 A RU2020117107 A RU 2020117107A RU 2020117107 A RU2020117107 A RU 2020117107A RU 2750591 C1 RU2750591 C1 RU 2750591C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- endothelial cells
- degree
- staining
- color
- cell
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
- G01N33/49—Blood
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Ecology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностических целей в гематологии, онкологии, гинекологии, гастроэнтерологии, проктологии, отоларингологии и других отраслях медицины, а также в ветеринарии, биологии.The invention relates to medicine and can be used for diagnostic purposes in hematology, oncology, gynecology, gastroenterology, proctology, otolaryngology and other branches of medicine, as well as in veterinary medicine, biology.
Степень окраски клеток организма человека позволяет судить об их морфофункциональном состоянии, отражающем эндотелиальную дисфункцию, которая развивается при многих патологических процессах.The degree of color of the cells of the human body makes it possible to judge their morphofunctional state, reflecting endothelial dysfunction, which develops in many pathological processes.
Степень окраски клеток фигурирует в ряде исследований, в частности оценка степени экспрессии антител при изучении процессов атеросклероза проводится полуколичественным методом анализа окраски клеток (липофагов) по шкале от 0 до 3.(Евдокименко А.Н., Гулевская Т.С., Танашян М.М, Иммуногистохимические и ультраструктурные признаки нарушения атромбогенных свойств эндотелия при атеросклерозе каротидного синуса. Анналы неврологии, Т. 10, №4. 2016. С. 32-38).The degree of cell staining appears in a number of studies, in particular, the assessment of the degree of expression of antibodies in the study of atherosclerosis processes is carried out by a semi-quantitative method for analyzing the color of cells (lipophages) on a scale from 0 to 3. (Evdokimenko A.N., Gulevskaya T.S., Tanashyan M. M, Immunohistochemical and ultrastructural signs of impaired atrombogenic properties of the endothelium in atherosclerosis of the carotid sinus. Annals of Neurology, Vol. 10, No. 4. 2016. S. 32-38).
Известен способ изучения матриксной металлопротеиназы - 9 (ММР-9) у пациентов с внутривенной опухолевой инвазией, позволяющий судить о распространении почечно-клеточного рака (Щукин Д.В., Лесовой В.Н., Яковцова И.И. и др. Активность матриксной металлопротеиназы - 9 (ММР-9) при внутривенозном распространении почечно - клеточного рака. Вiсник проблем бiологii i медицини - 2015 - Вип. 2, том 1 (118) с. 283-289). Исследованию подлежали опухолевые клетки, эндотелиоциты опухолевого тромба, эндотелий вен почек. Одним из факторов анализа экспрессии ММР-9, являлась оценка степени выраженности (интенсивности) окраски цитоплазмы клеток.There is a known method for studying matrix metalloproteinase - 9 (MMP-9) in patients with intravenous tumor invasion, which makes it possible to judge the spread of renal cell carcinoma (Shchukin D.V., Lesovoy V.N., Yakovtsova I.I., etc. Activity of matrix metalloproteinases - 9 (MMP-9) in case of intravenous spread of renal cell carcinoma.Visnik of problems of biologyii i medicine - 2015 - Vip. 2, volume 1 (118) pp. 283-289). Tumor cells, endothelial cells of tumor thrombus, and endothelium of renal veins were subject to research. One of the factors in the analysis of MMP-9 expression was the assessment of the severity (intensity) of the color of the cytoplasm of cells.
Однако данный способ не обладает высокой точностью, так как при анализе окраски используется полуколичественная шкала, по которой оценка идет в параметрах: слабая, умеренная, выраженная цитоплазматическая реакция.However, this method does not have high accuracy, since in the analysis of color, a semi-quantitative scale is used, according to which the assessment is in the following parameters: weak, moderate, pronounced cytoplasmic reaction.
Известен «Способ определения степени тяжести острого панкреатита» (патент РФ № 2712917, МПК), взятый в качестве прототипа. Согласно известному способу, в первые 1-2 дня от начала лечения и во второй раз на 7-9 день от начала лечения, определяют количество десквамированных эндотелиальных клеток, а также количество нормохромно окрашенных и гиперхромно окрашенных десквамированных эндотелиальных клеток и вычисляют коэффициент степени окраски десквамированных эндотелиальных клеток (Ko) по отношению количества нормохромно окрашенных (N) к количеству гиперхромно окрашенных десквамированных эндотелиальных клеток (G). При снижении Ko при втором измерении по сравнению с первым на 1,3 и более, судят о благоприятном прогнозе, а при повышении Ko на 0,4 и более, судят о развитии осложнений острого панкреатита.The known "Method for determining the severity of acute pancreatitis" (RF patent No. 2712917, IPC), taken as a prototype. According to the known method, in the first 1-2 days from the start of treatment and the second time on 7-9 days from the start of treatment, the number of desquamated endothelial cells is determined, as well as the number of normochromically stained and hyperchromically stained desquamated endothelial cells, and the coefficient of the degree of staining of desquamated endothelial cells is calculated. cells (Ko) in relation to the number of normochromically stained (N) to the number of hyperchromically stained desquamated endothelial cells (G). With a decrease in Ko in the second measurement compared with the first by 1.3 or more, a favorable prognosis is judged, and with an increase in Ko by 0.4 or more, the development of complications of acute pancreatitis is judged.
Однако известный способ не обладает высокой точностью определения степени окраски оцениваемых эндотелиоцитов, допускает определенную вариабельность полученных результатов.However, the known method does not have a high accuracy in determining the degree of color of the evaluated endothelial cells, it allows for a certain variability of the results obtained.
Задачей заявленного изобретения является повышение точности определения степени окраски эндотелиальных клеток.The objective of the claimed invention is to improve the accuracy of determining the degree of color of endothelial cells.
Поставленная задача осуществляется тем, что согласно способу определения степени окраски эндотелиальных клеток, включающему определение физических показателей, в качестве физических показателей определяют напряжение, выходящее с солнечной батареи при нахождении ее над областью изображения на экране вне клеточного поля и напряжение, выходящее с солнечной батареи при нахождении ее над областью изображения на экране в границах цитоплазмы клетки, а коэффициент степени окраски эндотелиальных клеток рассчитывают по формуле:The task is accomplished by the fact that according to the method for determining the degree of color of endothelial cells, including the determination of physical parameters, the voltage emerging from the solar battery when it is located above the image area on the screen outside the cell field and the voltage leaving the solar battery when it is above the area of the image on the screen within the boundaries of the cytoplasm of the cell, and the coefficient of the degree of color of endothelial cells is calculated by the formula:
Ко=(1-С/О)×100%, гдеKo = (1-C / O) × 100%, where
Ko - коэффициент степени окраски эндотелиальных клеток, %;Ko - coefficient of the degree of color of endothelial cells,%;
С - напряжение, выходящее с солнечной батареи при нахождении ее над областью изображения на экране в границах цитоплазмы клетки, вольт;C is the voltage emerging from the solar battery when it is located above the image area on the screen within the boundaries of the cell cytoplasm, volts;
О - напряжение, выходящее с солнечной батареи при нахождении ее над областью изображения на экране вне клеточного поля, вольт;O is the voltage coming out of the solar battery when it is above the image area on the screen outside the cell field, volts;
при значении 0≤Ko<20,86% судят о гипохромной окраске эндотелиоцита, при значениях 20,86%≤Ko≤38,8% судят о нормохромности окраски, а при 38,8%<Ko≤100% судят о гиперхромном окрашивании.at a value of 0≤Ko <20.86%, the hypochromic color of the endotheliocyte is judged, at values of 20.86% ≤Ko≤38.8%, the normochromic color is judged, and at 38.8% <Ko≤100%, hyperchromic staining is judged.
Заявленный способ обладает высокой точностью, позволяет исследовать помимо эндотелиоцитов и другие клетки, макрофаги, лейкоциты, позволяет создать аналитические шкалы и для других типов клеток, расширяет возможности при использовании методик для диагностики заболеваний, определении эффективности лечения. Позволяет быстро и в более полном объеме получить необходимую информацию о степени эндотелиальной дисфункции, выраженности патологического процесса, осуществлять динамическое изучение эффективности проводимого лечения.The claimed method has high accuracy, allows you to investigate in addition to endothelial cells and other cells, macrophages, leukocytes, allows you to create analytical scales for other types of cells, expands the possibilities when using methods for diagnosing diseases, determining the effectiveness of treatment. Allows you to quickly and more fully obtain the necessary information about the degree of endothelial dysfunction, the severity of the pathological process, to carry out a dynamic study of the effectiveness of the treatment.
Способ определения степени окраски эндотелиальных клеток осуществляется следующим образом.The method for determining the degree of color of endothelial cells is carried out as follows.
Изображения эндотелиоцитов при помощи прибора (например, при помощи прибора «Цито-эксперт», патент РФ № 2168176.Images of endothelial cells using the device (for example, using the device "Cyto-Expert", RF patent No. 2168176.
(Оптимизирующее устройство для микроскопа) выводят на экран. Изображение увеличивают до размера, необходимого для оценки хромности клетки. Далее при помощи солнечной батареи, например, TRONY sc 1025i (прибора преобразующего солнечную энергию в постоянный электрический ток) и мультиметра S - Line DT-7000 D, определяют напряжение, выходящее с солнечной батареи при нахождении ее над областью изображения на экране вне клеточного поля и напряжение, выходящее с солнечной батареи при нахождении ее над областью изображения на экране в границах цитоплазмы клетки. Замеры производят путем непосредственного приложения фотодиода солнечной батареи к изображению десквамированного эндотелиоцита на экране и к изображению пустого поля около эндотелиоцита.(Microscope optimizer) is displayed. The image is enlarged to the size necessary to assess the chromium of the cell. Next, using a solar battery, for example, TRONY sc 1025i (a device that converts solar energy into direct current) and an S-Line DT-7000 D multimeter, determine the voltage output from the solar battery when it is located above the image area on the screen outside the cell field and voltage emerging from the solar battery when it is located above the image area on the screen within the boundaries of the cell cytoplasm. Measurements are made by directly applying the photodiode of the solar cell to the image of the desquamated endothelial cell on the screen and to the image of the empty field near the endothelial cell.
При этом необходимо соблюдать ряд правил:In this case, a number of rules must be observed:
1. Изображение должно быть четким, без искажений.1. The image should be clear, without distortion.
2. Для измерения уровня освещенности, как в клетке, так и вне ее выбираются максимально однородные зоны без резко выделяющихся включений.2. To measure the level of illumination, both in the cage and outside it, the most homogeneous zones are selected without sharply distinguishing inclusions.
3. При измерении уровня освещенности «пустого поля» вне клетки, зона обследования должна быть выбрана максимально близко к цитоплазматической мембране (ЦПМ) клетки, но не заходить на нее.3. When measuring the illumination level of the "empty field" outside the cell, the examination area should be selected as close as possible to the cytoplasmic membrane (CPM) of the cell, but not to enter it.
4. При измерении уровня освещенности над клеткой следует избегать попадания ядра клетки в зону исследования и наложения зоны на ЦПМ.4. When measuring the level of illumination above the cage, avoid getting the cell nucleus into the study area and overlapping the area with the CPM.
5. Так как по всему периметру ЦПМ освещенность разная, то для объективизации результатов необходимо сделать несколько (5-6) замеров, как вне клетки, так и внутри, с последующим расчетом средней арифметической величины.5. Since the illumination is different along the entire perimeter of the CPM, in order to objectify the results, it is necessary to make several (5-6) measurements, both outside the cell and inside, with the subsequent calculation of the arithmetic mean.
При отсутствии возможности проведения нескольких замеров необходимо выбрать две максимально близкие точки, одну внутри клетки, другую снаружи, удовлетворяющие первым 4-м пунктам.In the absence of the possibility of several measurements, it is necessary to select two points as close as possible, one inside the cell, the other outside, satisfying the first 4 points.
Коэффициент степени окраски эндотелиальных клеток рассчитывают по формуле: Ко=(1-С/О)×100%, гдеThe coefficient of the degree of color of endothelial cells is calculated by the formula: Ko = (1-C / O) × 100%, where
Ko - коэффициент степени окраски эндотелиальных клеток, %;Ko - coefficient of the degree of color of endothelial cells,%;
С - напряжение, выходящее с солнечной батареи при нахождении ее над областью изображения на экране в границах цитоплазмы клетки, вольт;C is the voltage emerging from the solar battery when it is located above the image area on the screen within the boundaries of the cell cytoplasm, volts;
О - напряжение, выходящее с солнечной батареи при нахождении ее над областью изображения на экране вне клеточного поля, вольт.O is the voltage coming out of the solar battery when it is located above the image area on the screen outside the cell field, volts.
При выполнении нескольких замеров уровня освещенности вне клеточного поля и в границах цитоплазмы клетки необходимо сначала рассчитать их среднюю арифметическую величину и только после этого вставить в формулу.When performing several measurements of the level of illumination outside the cell field and within the boundaries of the cytoplasm of the cell, it is necessary to first calculate their arithmetic mean value and only then insert it into the formula.
При значении 0≤Ko<20,86% судят о гипохромной окраске эндотелиоцита, при значениях 20,86%≤Ko≤38,8% судят о нормохромности окраски, а при 38,8%<Ko≤100% судят о гиперхромном окрашивании.At a value of 0≤Ko <20.86%, the hypochromic color of the endotheliocyte is judged, at values of 20.86% ≤Ko≤38.8%, the normochromic color is judged, and at 38.8% <Ko≤100%, hyperchromic staining is judged.
Пример 1. Больной 32 лет поступил в хирургическое отделение ГКБ №6 Ижевска в состоянии средней тяжести с диагнозом: острый панкреатит. При использовании знакопеременного микроэлектрофореза и солнечной батареи TRONY sc1025i с мультиметром S-Line DT-700D при определении степени окраски эндотелиоцитов выяснилось, что коэффициент степени окраски эндотелиальных клеток равен 18,2, что позволяет сделать вывод о гипохромной окраске эндотелиальных клеток. На основании проведенного исследования крови диагноз острый панкреатит легкой степени тяжести подтвержден. Проведено консервативное лечение, выписан с улучшением.Example 1. A 32-year-old patient was admitted to the surgical department of the City Clinical Hospital No. 6 of Izhevsk in a state of moderate severity with a diagnosis of acute pancreatitis. When using alternating microelectrophoresis and a TRONY sc1025i solar battery with an S-Line DT-700D multimeter, when determining the degree of endothelial cell staining, it turned out that the degree of staining of endothelial cells is 18.2, which allows us to conclude about hypochromic staining of endothelial cells. Based on the blood test, the diagnosis of acute pancreatitis of mild severity was confirmed. Conducted conservative treatment, was discharged with improvement.
Пример 2. Больной 53 лет поступил в хирургическое отделение ГКБ №6, г. Ижевска, в состоянии средней тяжести с признаками острого панкреатита. При использовании знакопеременного микроэлектрофореза и солнечной батареи TRONY sc1025i с мультиметром S-Line DT-700D при определении степени окраски эндотелиоцитов выяснилось, что коэффициент степени окраски эндотелиальных клеток равен 24,6, что позволяет сделать вывод о нормохромной окраске эндотелиальных клеток. На основании проведенного комплексного исследования и исследования эндотелиоцитов крови, установлен диагноз - хронический панкреатит. Назначено консервативное лечение. Переведен в терапевтическое отделение для продолжения комплексного терапевтического лечения.Example 2. A 53-year-old patient was admitted to the surgical department of the City Clinical Hospital No. 6, Izhevsk, in a state of moderate severity with signs of acute pancreatitis. When using alternating microelectrophoresis and a TRONY sc1025i solar battery with an S-Line DT-700D multimeter, when determining the degree of color of endothelial cells, it turned out that the degree of color of endothelial cells is 24.6, which allows us to conclude about normochromic staining of endothelial cells. On the basis of a comprehensive study and a study of blood endothelial cells, the diagnosis was made - chronic pancreatitis. Conservative treatment was prescribed. Transferred to the therapeutic department to continue the complex therapeutic treatment.
Пример 3. Больной 64 лет поступил в хирургическое отделение больницы в состоянии средней тяжести с признаками острого деструктивного панкреатита. При использовании знакопеременного микроэлектрофореза и солнечной батареи TRONY sc1025i с мультиметром S-Line DT-700D при определении степени окраски эндотелиоцитов выяснилось, что коэффициент степени окраски эндотелиальных клеток равен 43,8, что позволяет сделать вывод о гиперхромной окраске эндотелиальных клеток. На основании проведенного исследования крови диагноз деструктивный панкреатит (крупноочаговый инфицированный панкреонекроз) подтвержден. Проведено хирургическое вмешательство. Зафиксирован летальный исход на 19 сутки госпитализации.Example 3. A 64-year-old patient was admitted to the surgical department of the hospital in a state of moderate severity with signs of acute destructive pancreatitis. When using alternating microelectrophoresis and a TRONY sc1025i solar battery with an S-Line DT-700D multimeter, when determining the degree of color of endothelial cells, it turned out that the degree of color of endothelial cells is 43.8, which allows us to conclude about hyperchromic color of endothelial cells. Based on the blood test, the diagnosis of destructive pancreatitis (large-focal infected pancreatic necrosis) was confirmed. Surgical intervention was performed. A lethal outcome was recorded on the 19th day of hospitalization.
Claims (6)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2020117107A RU2750591C1 (en) | 2020-05-12 | 2020-05-12 | Method for determining the degree of staining of endothelial cells |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2020117107A RU2750591C1 (en) | 2020-05-12 | 2020-05-12 | Method for determining the degree of staining of endothelial cells |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2750591C1 true RU2750591C1 (en) | 2021-06-29 |
Family
ID=76755822
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2020117107A RU2750591C1 (en) | 2020-05-12 | 2020-05-12 | Method for determining the degree of staining of endothelial cells |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2750591C1 (en) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SU787455A1 (en) * | 1979-02-14 | 1980-12-15 | Киевский Институт Автоматики Им. Хху Съезда Кпсс | Method of determining living cell biomass |
RU2300111C2 (en) * | 2005-06-15 | 2007-05-27 | Государственное учреждение научно-исследовательский институт онкологии Томского Научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ГУ НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН) | Method for predicting clinical mammary gland carcinoma course |
CN101681427B (en) * | 2007-05-30 | 2012-12-05 | 智能病毒成像公司 | A method for counting and segmenting viral particles in an image |
RU2660542C1 (en) * | 2017-10-04 | 2018-07-06 | государственное бюджетное учреждение Свердловской области "Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии" | Method for definition of the stage of mycosis fungoidea |
-
2020
- 2020-05-12 RU RU2020117107A patent/RU2750591C1/en active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SU787455A1 (en) * | 1979-02-14 | 1980-12-15 | Киевский Институт Автоматики Им. Хху Съезда Кпсс | Method of determining living cell biomass |
RU2300111C2 (en) * | 2005-06-15 | 2007-05-27 | Государственное учреждение научно-исследовательский институт онкологии Томского Научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ГУ НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН) | Method for predicting clinical mammary gland carcinoma course |
CN101681427B (en) * | 2007-05-30 | 2012-12-05 | 智能病毒成像公司 | A method for counting and segmenting viral particles in an image |
RU2660542C1 (en) * | 2017-10-04 | 2018-07-06 | государственное бюджетное учреждение Свердловской области "Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии" | Method for definition of the stage of mycosis fungoidea |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Redon et al. | γ-H2AX as a biomarker of DNA damage induced by ionizing radiation in human peripheral blood lymphocytes and artificial skin | |
Ud-Din et al. | Angiogenesis is induced and wound size is reduced by electrical stimulation in an acute wound healing model in human skin | |
Badamchian et al. | Identification and quantification of thymosin β4 in human saliva and tears | |
RU2010105971A (en) | METHOD FOR DETERMINING Pyruvate Dehydrogenase (PDH) ACTIVITY AND VISUALIZATION ENVIRONMENT FOR APPLICATION IN THE SPECIFIED METHOD | |
RU2750591C1 (en) | Method for determining the degree of staining of endothelial cells | |
Santonico et al. | Non-invasive monitoring of lower-limb ulcers via exudate fingerprinting using BIONOTE | |
Pollmann et al. | Visualization of lymphatic vessel development, growth, and function | |
Brochard et al. | Altered epithelial barrier functions in the colon of patients with spina bifida | |
Kucuk | The change of neutrophil lymphocyte ratio in acute appendicitis | |
JP2008107275A (en) | Allergic dermatitis diagnostic method | |
RU2797845C1 (en) | Method of predicting hematogenous metastasis of colon cancer after combined treatment | |
Listos et al. | Post-mortem estimation of time of death of dogs based on measurements of kidney temperature in comparison with rectal temperature | |
RU2624352C1 (en) | Method for prediction of direction of purelent and infected face wounds healing process development in children | |
RU2338465C2 (en) | Method of estimation of condition of kidneys microcirculation | |
RU86317U1 (en) | DEVICE FOR DETERMINING BLOOD MICROVOLUMES | |
RU2708455C1 (en) | Method for assessing the risk of developing cosmetic defects in the postoperative wound in surgical patients with connective tissue dysplasia | |
US20230383362A1 (en) | Dna damage sensitivity as a new biomarker for detection of cancer and cancer susceptibility | |
RU2756255C1 (en) | Method for early detection of bladder cancer using cytofluorimetric analysis of the urinary cellular sediment | |
RU2347592C1 (en) | Method for prediction of radiation therapy efficiency according to regimen of split course for treatment of malignant tumors in oropharyngeal area | |
RU2427838C1 (en) | Method of quantitative analysis of red blood cell deformability in differential diagnostics of obstructive jaundice | |
RU2681118C1 (en) | Method for estimating activity of regeneration of full-layer rat skin wound in experiment | |
RU2392856C1 (en) | Method of determination of organism reaction to radiation | |
RU2316003C1 (en) | Method for estimating inflammatory process activity in pemphigus cases | |
RU135899U1 (en) | LABORATORY DIAGNOSTIC DEVICE | |
RU2605310C1 (en) | Diagnostic technique for risk of antitumor immune protection deficiency |