RU2740872C1 - Подложка для исследования биологического образца методом сканирующей зондовой нанотомографии и способ ее получения - Google Patents
Подложка для исследования биологического образца методом сканирующей зондовой нанотомографии и способ ее получения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2740872C1 RU2740872C1 RU2020124901A RU2020124901A RU2740872C1 RU 2740872 C1 RU2740872 C1 RU 2740872C1 RU 2020124901 A RU2020124901 A RU 2020124901A RU 2020124901 A RU2020124901 A RU 2020124901A RU 2740872 C1 RU2740872 C1 RU 2740872C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- silk fibroin
- solution
- substrate
- drying
- film
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y35/00—Methods or apparatus for measurement or analysis of nanostructures
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01Q—SCANNING-PROBE TECHNIQUES OR APPARATUS; APPLICATIONS OF SCANNING-PROBE TECHNIQUES, e.g. SCANNING PROBE MICROSCOPY [SPM]
- G01Q60/00—Particular types of SPM [Scanning Probe Microscopy] or microscopes; Essential components thereof
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
Использование: для исследований биологических образцов методом сканирующей зондовой нанотомографии (СЗНТ). Сущность изобретения заключается в том, что подложка для исследования биологического образца представляет собой пленку толщиной 1-100 мкм, которая содержит 5-100% фиброина шелка тутового шелкопряда Bombyx mori по массе. Предложен также способ получения указанной подложки, в котором для получения пленки водный раствор фиброина шелка тутового шелкопряда Bombyx mori лиофильно высушивают. После этого растворяют сухой лиофилизированный фиброин шелка в муравьиной кислоте до концентрации 1-100 мг/мл раствора. Полученный раствор наносят на поверхность для высушивания, а после полного высыхания раствора отделяют от поверхности для высушивания пленку из фиброина шелка. Технический результат: обеспечение возможности получения универсальной, прозрачной, механически прочной биосовместимой подложки для исследования биологического образца методом СЗНТ. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 3 ил.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в качестве подложки для исследований биологических образцов методом сканирующей зондовой нанотомографии (СЗНТ).
Известна подложка для исследований биологических образцов, представляющая собой кремниевую пластинку, покрытую пленкой Ленгмюра-Блоджетт из пяти мономолекулярных слоев органического соединения с общей толщиной пленки 6.5 нм [RU 110082, U1]. Такая подложка является гидрофобной и имеет показатель шероховатости до 1 нм, что уменьшает ее адгезионные свойства для биологических объектов. Способ получения данной подложки включает использование материалов, которые не позволяют применять ее для культивирования клеток и их дальнейшего анализа вследствие токсичности и гидрофобности. Данная подложка не является прозрачной, что исключает ее использование для исследований методами световой микроскопии и спектроскопии, которые в некоторых случаях являются необходимыми при получении биологических образцов для анализа.
Техническая проблема заключается в необходимости создания универсальной, механически прочной, прозрачной и биосовместимой подложки для подготовки и анализа биологических образов методом СЗНТ.
Технический результат, достигаемый при осуществлении патентуемой группы изобретений, заключается в обеспечении
- биосовместимости подложки для исследований биологических образцов, что обеспечивает возможность культивирования клеток на подложке, а также иммобилизации на подложке живых организмов и их частей;
- механической прочности подложки для исследований биологических образцов, что позволяет проводить манипуляции с биологическим образцом;
- универсальности подложки для исследований биологических образцов, что позволяет использовать подложку для исследований широкого спектра биологических образцов;
- прозрачности подложки, что делает возможным проведение дополнительных исследований методами световой микроскопии и спектроскопии,
- исключения присутствия остаточных количеств токсичных для клеток веществ в составе подложки, а также ее пригодности для исследований биологических образцов за счет предлагаемого способа получения подложки.
Сущность изобретения заключается в следующем.
Патентуется подложка для исследования биологического образца методом сканирующей зондовой нанотомографии, которая представляет собой пленку толщиной 1-100 мкм, которая содержит 5-100% фиброина шелка тутового шелкопряда Bombyx mori по массе.
Существует вариант, в котором подложка дополнительно содержит, по меньшей мере, одно вещество, способствующее адгезии и пролиферации клеток млекопитающего.
Предложен также способ получения указанной подложки, в котором для получения пленки водный раствор фиброина шелка тутового шелкопряда Bombyx mori лиофильно высушивают. После этого растворяют сухой лиофилизированный фиброин шелка в муравьиной кислоте до концентрации 1-100 мг/мл раствора. Полученный раствор наносят на поверхность для высушивания, а после полного высыхания раствора отделяют от поверхности для высушивания пленку из фиброина шелка.
Существует вариант, в котором пленку из фиброина шелка обрабатывают раствором, по меньшей мере, одного вещества, способствующего адгезии и пролиферации клеток млекопитающего, путем инкубации в растворе этого вещества.
Существует вариант, в котором в состав раствора фиброина шелка перед нанесением на поверхность для высушивания вводят, по меньшей мере, одно вещество, способствующее адгезии и пролиферации клеток млекопитающего, в количестве до 95% по массе.
Существует вариант, в котором подложку из фиброина шелка перед отделением или после отделения от поверхности для высушивания инкубируют в метаноле или этаноле в течение 10-60 минут.
Существует вариант, в котором подложку из фиброина шелка получают на поверхности посуды для культивирования клеток.
Существует вариант, в котором подложку из фиброина шелка на поверхности посуды для культивирования клеток инкубируют в метаноле или этаноле в течение 10-60 минут.
Изобретения поясняются следующими фигурами.
На Фиг. 1 изображена подложка из фиброина шелка, полученная методом полива водного раствора фиброина шелка на поверхность полированного тефлона.
На Фиг. 2 изображена подложка из фиброина шелка, покрытая раствором коллагена, иммобилизованная на поверхности пластика.
На Фиг. 3 изображена подложка из фиброина шелка, полученная методом полива раствора фиброина шелка в муравьиной кислоте на поверхность полированного тефлона.
Способ получения подложки реализуется следующим образом.
В одном из вариантов подложка для анализа образцов методом сканирующей зондовой нанотомографии представляет собой пленку из фиброина шелка тутового шелкопряда Bombyx mori толщиной 1-100 мкм, содержащую 5-100% фиброина шелка по массе (фиг. 1).
Кроме этого существует вариант, в котором подложка, выполненная в виде пленки, дополнительно содержит, по меньшей мере, одно вещество, способствующее адгезии и пролиферации клеток млекопитающего. Для этого в состав раствора для получения пленки вводят это вещество (например, фибронектин, желатин, эластин), либо покрывают пленку растворами этих веществ (фиг. 2). Для этого отделенную подложку помещают в пробирку с раствором этого вещества (например, фибронектина, желатина, коллагена) и инкубируют в течение указанного времени (например, для раствора фибронектина с концентрацией 10 мкг/мл время инкубации составляет 12 часов, для раствора желатина с концентрацией 10 мг/мл время инкубации составляет 2 часа, для раствора коллагена с концентрацией 20 мг/мл время инкубации составляет 4 часа), либо наносят раствор этого вещества на поверхность подложки и инкубируют в течение указанного времени.
Кроме этого существует вариант, в котором для получения пленки водный раствор фиброина шелка лиофильно высушивают, после чего растворяют сухой лиофилизированный фиброин шелка в муравьиной кислоте до концентрации 1-100 мг/мл и полученный раствор наносят на поверхность для высушивания, и после полного высыхания раствора отделяют от поверхности для высушивания пленку из фиброина шелка (фиг. 3). Для этого используют инструмент, например, шпатель или скальпель.
Кроме этого существует вариант, в котором в состав раствора фиброина шелка перед нанесением на поверхность для высушивания вводят, по меньшей мере, одно вещество, способствующее адгезии и пролиферации клеток млекопитающего, в количестве до 95% по массе. Для этого в раствор фиброина шелка вносят это вещество в сухом виде или в виде раствора и перемешивают, например, с помощью автоматической пипетки или магнитной мешалки.
Кроме этого существует вариант, в котором подложку из фиброина шелка перед отделением или после отделения от поверхности для высушивания инкубируют в метаноле или этаноле в течение 10-60 минут. При этом молекулы фиброина шелка в составе пленки переходят в состояние β-слоев, что приводит к дополнительному увеличению механической прочности подложки и уменьшению ее скорости деградации. Для этого на подложку наносят метанол или этанол так, чтобы он покрывал подложку, или вносят отделенную подложку в пробирку с метанолом или этанолом.
Кроме этого существует вариант, в котором подложку из фиброина шелка получают на поверхности посуды для культивирования клеток. Для этого раствор фиброина шелка наносят на поверхность посуды для культивирования клеток и высушивают при комнатной температуре (фиг. 2).
Кроме этого существует вариант, в котором подложку из фиброина шелка на поверхности посуды для культивирования клеток инкубируют в метаноле или этаноле в течение 10-60 минут. При этом молекулы фиброина шелка в составе пленки переходит в состояние β-слоев, что приводит к дополнительному увеличению механической прочности подложки и уменьшению ее скорости деградации. Для этого в посуду для культивирования клеток вносят метанол или этанол так, чтобы он покрывал подложку.
Предлагаемый способ получения подложки из фиброина шелка для исследования биологического образца осуществляется следующим образом.
Пример 1.
В данном примере фиброин шелка для изготовления подложки выделяли из шелковых нитей 4-0 (Моснитки, Россия). Для этого взвешивали 1 г нитей шелка, разрезали нити на фрагменты по 0,5 см. Кипятили на водяной бане в течение 40 минут в растворе с добавлением двууглекислого натрия для очистки нитей от серицина и других примесей. Затем промывали 3600 мл дистиллированной воды. Кипятили 3 раза по 30 минут в бидистиллированной воде, промывая после каждого кипячения дистиллированной водой. После чего высушивали в сушильном шкафу. Для получения водного раствора фиброина в 9,3 М водный раствор бромида лития вносили навеску фиброина массой 150 мг/мл. Нагревали на кипящей водяной бане в течение 7 часов. После этого проводили диализ полученного раствора против бидистиллированной воды. Полученный диализный раствор замораживали при -80°С, а затем подвергали лиофилизации до полного удаления воды. Полученный лиофилизированный фиброин шелка растворяли в муравьиной кислоте из расчета 1 мг/мл при нагревании до 40°С на водяной бане в течение 10 минут. Полученный раствор центрифугировали 5 минут при 12100 g. Для изготовления подложки полученный раствор вносили в лунки 48-луночного планшета из расчета 400 мкл на лунку и высушивали в течение двух суток при комнатной температуре. Затем в лунки вносили этанол и инкубировали в течение 10 минут. Толщина полученной подложки составляла 1 мкм. В данном примере полученную подложку на планшете использовали для получения образца клеток линии 3Т3 для сканирующей зондовой нанотомографии. Для этого клетки линии 3Т3 культивировали в лунках планшета на подложках в течение 2-х суток в термостате при температуре 37°С и 5% углекислого газа, а затем производили заливку образца в полимерную среду (эпоксидную смолу) следующим образом. Из лунок планшета отбирали среду инкубации и производили две отмывки стерильным натрий-фосфатным буфером (рН=7,4), после чего вносили 2,5% раствор глутарового альдегида в натрий-фосфатном буфере (рН=7,4) и инкубировали в течение 2 часов в темноте при 4°С и двукратно отмывали натрий-фосфатным буфером (рН=7,4). Затем производили дегидратацию образца проводкой по спиртам с увеличивающейся концентрацией по схеме:
а) р-р этанола 30% - 10 мин;
б) р-р этанола 50% - 10 мин;
в) р-р этанола 70% - 10 мин;
г) р-р этанола 80% - 10 мин;
д) р-р этанола 96% - 10 мин.
Образец отмывали трехкратно пропиленоксидом по 10 минут, а затем инкубировали в смеси пропиленоксида и эпоксидной смолы в соотношении 1:1 в течение 30 минут, после чего образец переносили в смесь пропиленоксида и эпоксидной смолы в соотношении 1:2 и инкубировали в течение 30 минут. Для заливки образца использовалась эпоксидная среда (Ероху Embedding Medium kit, Sigma-Aldrich, Cat. №45359-1EA-F). Образец заключали в эпоксидную среду, инкубировали в термостате при 45°С в течение 24 часов, после чего продолжали инкубацию в течение 72 часов при температуре 60°С. Затем образец отделяли от лунки планшета с помощью скальпеля.
Пример 2.
В данном примере фиброин шелка для изготовления подложки выделяли из шелковых нитей 4-0 (Моснитки, Россия). Для этого взвешивали 1 г нитей шелка, разрезали нити на фрагменты по 0,5 см. Кипятили на водяной бане в течение 40 минут в растворе с добавлением двууглекислого натрия для очистки нитей от серицина и других примесей. Затем промывали 3600 мл дистиллированной воды. Кипятили 3 раза по 30 минут в бидистиллированной воде, промывая после каждого кипячения дистиллированной водой. После чего высушивали в сушильном шкафу. Для получения водного раствора фиброина в 9,3 М водный раствор бромида лития вносили навеску фиброина массой 150 мг/мл. Нагревали на кипящей водяной бане в течение 7 часов. После этого проводили диализ полученного раствора против бидистиллированной воды. Полученный диализный раствор замораживали при -80°С, а затем подвергали лиофилизации до полного удаления воды. Полученный лиофилизированный фиброин шелка растворяли в муравьиной кислоте из расчета 100 мг/мл при нагревании до 40°С на водяной бане в течение 60 минут. Полученный раствор центрифугировали 5 минут при 12100 g. Для изготовления подложки полученный раствор наносили на поверхность полированного тефлона (в данном примере для получения подложки площадью 1 см2 наносили 600 мкл раствора) и высушивали в течение двух суток при комнатной температуре. Полученную подложку из фиброина шелка отделяли от поверхности тефлона с помощью скальпеля, предварительно инкубировав в этаноле в течение 60 минут. Толщина полученной подложки составляла 100 мкм (фиг. 3). В данном примере полученную подложку помещали в чашку Петри и использовали для получения образца клеток линии 3Т3 для сканирующей зондовой нанотомографии. Для этого клетки линии 3Т3 культивировали в чашке Петри с подложкой из фиброина шелка в течение 2-х суток в термостате при температуре 37°С и 5% углекислого газа, а затем производили заливку подложки с клетками линии 3Т3 в полимерную среду (эпоксидную смолу) следующим образом. Подложку переносили в пробирку со стерильным натрий-фосфатным буфером (рН=7,4) и производили две отмывки стерильным натрий-фосфатным буфером (рН=7,4), после чего вносили 2,5% раствор глутарового альдегида в натрий-фосфатном буфере (рН=7,4) и инкубировали в течение 2 часов в темноте при 4°С и двукратно отмывали натрий-фосфатным буфером (рН=7,4). Затем производили дегидратацию образца проводкой по спиртам с увеличивающейся концентрацией по схеме:
а) р-р этанола 30% - 10 мин;
б) р-р этанола 50% - 10 мин;
в) р-р этанола 70% - 10 мин;
г) р-р этанола 80% - 10 мин;
д) р-р этанола 96% - 10 мин.
Образец отмывали трехкратно пропиленоксидом по 10 минут, а затем инкубировали в смеси пропиленоксида и эпоксидной смолы в соотношении 1:1 в течение 30 минут, после чего образец переносили в смесь пропиленоксида и эпоксидной смолы в соотношении 1:2 и инкубировали в течение 30 минут. Для заливки образца использовалась эпоксидная среда (Epoxy Embedding Medium kit, Sigma-Aldrich, Cat. №45359-1EA-F). Образец заключали в эпоксидную среду в пластиковой ячейке для заливки, инкубировали в термостате при 45°С в течение 24 часов, после чего продолжали инкубацию в течение 72 часов при температуре 60°С.
Таким образом, предложенный способ позволяет получить универсальную, прозрачную, механически прочную, биосовместимую подложку для исследования биологического образца методом СЗНТ.
Claims (8)
1. Подложка для исследования биологического образца методом сканирующей зондовой нанотомографии в виде пленки толщиной 1-100 мкм, содержащая 5-100% фиброина шелка тутового шелкопряда Bombyx mori по массе.
2. Подложка по п. 1, содержащая дополнительно по меньшей мере одно вещество, способствующее адгезии и пролиферации клеток млекопитающего.
3. Способ получения подложки по п. 1, в котором водный раствор фиброина шелка тутового шелкопряда Bombyx mori лиофильно высушивают, после чего растворяют сухой лиофилизированный фиброин шелка в муравьиной кислоте до концентрации 1-100 мг/мл раствора и полученный раствор наносят на поверхность для высушивания, а после полного высыхания раствора отделяют от поверхности для высушивания пленку из фиброина шелка.
4. Способ получения подложки по п. 3, характеризующийся тем, что пленку из фиброина шелка обрабатывают раствором по меньшей мере одного вещества, способствующего адгезии и пролиферации клеток млекопитающего, путем инкубации в растворе этого вещества.
5. Способ получения подложки по п. 3, характеризующийся тем, что в состав раствора фиброина шелка перед нанесением на поверхность для высушивания вводят по меньшей мере одно вещество, способствующее адгезии и пролиферации клеток млекопитающего, в количестве до 95% по массе.
6. Способ получения подложки по п. 3, в котором подложку из фиброина шелка перед отделением или после отделения от поверхности для высушивания инкубируют в метаноле или этаноле в течение 10-60 минут.
7. Способ получения подложки по п. 3, в котором подложку из фиброина шелка получают на поверхности посуды для культивирования клеток.
8. Способ получения подложки по п. 7, в котором подложку из фиброина шелка на поверхности посуды для культивирования клеток инкубируют в метаноле или этаноле в течение 10-60 минут.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020124901A RU2740872C1 (ru) | 2020-07-27 | 2020-07-27 | Подложка для исследования биологического образца методом сканирующей зондовой нанотомографии и способ ее получения |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020124901A RU2740872C1 (ru) | 2020-07-27 | 2020-07-27 | Подложка для исследования биологического образца методом сканирующей зондовой нанотомографии и способ ее получения |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2740872C1 true RU2740872C1 (ru) | 2021-01-21 |
Family
ID=74213163
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2020124901A RU2740872C1 (ru) | 2020-07-27 | 2020-07-27 | Подложка для исследования биологического образца методом сканирующей зондовой нанотомографии и способ ее получения |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2740872C1 (ru) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6455847B1 (en) * | 2000-04-26 | 2002-09-24 | Advanced Micro Devices, Inc. | Carbon nanotube probes in atomic force microscope to detect partially open/closed contacts |
| US20070024295A1 (en) * | 2003-07-15 | 2007-02-01 | University Of Bristol | Probe for an atomic force microscope |
| RU110082U1 (ru) * | 2011-06-29 | 2011-11-10 | Учреждение Российской академии наук Институт органической и физической химии им. А.Е. Арбузова Казанского научного центра РАН (ИОФХ им. А.Е. Арбузова КазНЦ РАН) | Подложка атомно-силового микроскопа |
| US20130109591A1 (en) * | 2010-07-05 | 2013-05-02 | Universita' Degli Studi Di Genova | Planar support having an ultraflat surface and a device for detecting antigens comprising said planar support |
| RU2723899C1 (ru) * | 2019-11-05 | 2020-06-18 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Рязанский государственный радиотехнический университет имени В.Ф.Уткина" | Сканирующий зонд атомно-силового микроскопа с отделяемым телеуправляемым нанокомпозитным излучающим элементом, легированным квантовыми точками, апконвертирующими и магнитными наночастицами структуры ядро-оболочка |
-
2020
- 2020-07-27 RU RU2020124901A patent/RU2740872C1/ru active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6455847B1 (en) * | 2000-04-26 | 2002-09-24 | Advanced Micro Devices, Inc. | Carbon nanotube probes in atomic force microscope to detect partially open/closed contacts |
| US20070024295A1 (en) * | 2003-07-15 | 2007-02-01 | University Of Bristol | Probe for an atomic force microscope |
| US20130109591A1 (en) * | 2010-07-05 | 2013-05-02 | Universita' Degli Studi Di Genova | Planar support having an ultraflat surface and a device for detecting antigens comprising said planar support |
| RU110082U1 (ru) * | 2011-06-29 | 2011-11-10 | Учреждение Российской академии наук Институт органической и физической химии им. А.Е. Арбузова Казанского научного центра РАН (ИОФХ им. А.Е. Арбузова КазНЦ РАН) | Подложка атомно-силового микроскопа |
| RU2723899C1 (ru) * | 2019-11-05 | 2020-06-18 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Рязанский государственный радиотехнический университет имени В.Ф.Уткина" | Сканирующий зонд атомно-силового микроскопа с отделяемым телеуправляемым нанокомпозитным излучающим элементом, легированным квантовыми точками, апконвертирующими и магнитными наночастицами структуры ядро-оболочка |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Wang et al. | Human induced pluripotent stem cell-derived beating cardiac tissues on paper | |
| Shevach et al. | Nanoengineering gold particle composite fibers for cardiac tissue engineering | |
| CN108977407B (zh) | 一种促进血管化的钙粘素融合蛋白功能化改性组织工程支架的制备与应用 | |
| WO2013075392A1 (zh) | 基于透明海绵支架构建三维细胞微环境的方法及装置 | |
| CN108578771B (zh) | 具有促进细胞增殖活性的fgf1丝胶蛋白凝胶的制备方法及其产品 | |
| CN111334469A (zh) | Pbmc体外3d甲基纤维素琼脂糖水凝胶培养基及其制备方法 | |
| CN107446885B (zh) | 一种间充质干细胞体外成骨诱导分化的支架材料及其应用 | |
| Angtika et al. | Bacterial cellulose-chitosan-glycerol biocomposite as artificial dura mater candidates for head trauma | |
| US12037474B2 (en) | Unidirectional nanopore dehydration-based functional polymer membrane or hydrogel membrane, preparation method thereof and device thereof | |
| Li et al. | Magnetic liquid metal scaffold with dynamically tunable stiffness for bone tissue engineering | |
| JP2024051114A (ja) | 細胞培養用シート並びに三次元組織体及びその製造方法 | |
| RU2740872C1 (ru) | Подложка для исследования биологического образца методом сканирующей зондовой нанотомографии и способ ее получения | |
| JP5875761B2 (ja) | コラーゲン線維ゲルおよびその用途 | |
| CN109876194B (zh) | 一种可调节降解速率的poss-peg杂化水凝胶及其制备方法和其应用 | |
| RU2766727C2 (ru) | Способ получения биологического образца для исследований методом сканирующей зондовой нанотомографии | |
| RU2769836C2 (ru) | Способ получения биологического образца для исследования методом сканирующей зондовой нанотомографии | |
| US11866533B2 (en) | Anti-biofouling copolymer and method for preparing the same | |
| Sommer et al. | Sperm performance better on diamond than on polystyrene | |
| CN113201163B (zh) | 一种改性聚醚醚酮及其制备方法和应用 | |
| Kumar et al. | Native honeybee silk membrane: a potential matrix for tissue engineering and regenerative medicine | |
| US8071379B2 (en) | Methods of tissue engineering | |
| CN111334472A (zh) | Pbmc体外3d胶原蛋白水凝胶培养基及其制备方法 | |
| CN113654863A (zh) | 一种透射电镜观察用原位体外培养细胞的样品处理方法 | |
| CN101579538A (zh) | 丝素/纳米SiO2共混膜的制备方法 | |
| RU2732598C1 (ru) | Микроноситель для клеток на основе натурального шелка и способ его получения |