RU2735869C1 - Способ определения вирусоцидного действия средств и способов борьбы с вирусом мешотчатого расплода пчел - Google Patents
Способ определения вирусоцидного действия средств и способов борьбы с вирусом мешотчатого расплода пчел Download PDFInfo
- Publication number
- RU2735869C1 RU2735869C1 RU2019141329A RU2019141329A RU2735869C1 RU 2735869 C1 RU2735869 C1 RU 2735869C1 RU 2019141329 A RU2019141329 A RU 2019141329A RU 2019141329 A RU2019141329 A RU 2019141329A RU 2735869 C1 RU2735869 C1 RU 2735869C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- mixture
- monolayer
- action
- signs
- Prior art date
Links
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title claims abstract description 47
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title abstract description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title abstract description 7
- 239000002356 single layer Substances 0.000 claims abstract description 20
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 18
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims abstract description 17
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 13
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 claims abstract description 11
- 244000309466 calf Species 0.000 claims abstract description 7
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 claims abstract description 7
- 210000003934 vacuole Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims abstract description 6
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract 2
- 244000144987 brood Species 0.000 claims description 19
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 10
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 8
- 230000003253 viricidal effect Effects 0.000 claims description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 8
- 238000009341 apiculture Methods 0.000 abstract description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 abstract 1
- 238000012631 diagnostic technique Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- 241000030942 Sacbrood virus Species 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- OSVXSBDYLRYLIG-UHFFFAOYSA-N dioxidochlorine(.) Chemical compound O=Cl=O OSVXSBDYLRYLIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004155 Chlorine dioxide Substances 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 244000179560 Prunella vulgaris Species 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 235000019398 chlorine dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K51/00—Appliances for treating beehives or parts thereof, e.g. for cleaning or disinfecting
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/70—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving virus or bacteriophage
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Virology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарии и пчеловодства, в частности к выявлению средств, обладающих вирусоцидным действием на вирус мешотчатого расплода пчел, и может использоваться в научно-исследовательских лабораториях, а также в производственных ветеринарных лабораториях. Способ определения вирусоцидного действия средств борьбы с вирусом мешотчатого расплода пчел включает добавление препарата к вируссодержащей суспензии, добавление полученной смеси в культуру клеток, культивирование вируса в термостате, микроскопию исследуемых культур клеток и контроль результатов. При этом вируссодержащий материал in vitro смешивают с испытуемым препаратом в концентрациях, определенных дозировкой исследуемого препарата и выдерживают испытуемую смесь в холодильнике при t=+4°C в течение 2 суток. Смесь доводят до t=+15-25°C и фильтруют через миллипоровый фильтр с диаметром пор 45 нанометров. После чего монослой культуры клеток почки теленка отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ + Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и проводят ее заражение в течение 2 часов при t=+34±1°C. Затем смесь удаляют с монослоя, клетки отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ + Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и в культуры вносят поддерживающую питательную среду ИГЛА МЕМ + Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1. В контрольных флаконах ростовую среду заменяли на поддерживающую, вторым контролем являлась культура клеток, зараженная вирусом. Все культуры инкубируют при t=+34±1°C до 4-7 суток, ежедневно просматривая с целью выявления цитопатогенного действия. Через 4 суток культуры клеток окрашивают азур-эозином по Романовскому-Гимза, выявляют признаки воздействия вируса мешотчатого расплода пчел на клетки почки теленка - разрушение целостности монослоя, появление вакуолей, пикноз ядер. При наличии этих признаков вирус присутствует в испытуемой смеси и препарат не подействовал на вирус мешотчатого расплода пчел, а отсутствие данных признаков подтверждает гибель вируса. Изобретение обеспечивает создание способа диагностики, основанной на признаках проявления вируса в клетках, с более точными качественными показателями изменений. 3 пр.
Description
Изобретение относится к области ветеринарии и пчеловодства, в частности, к выявлению средств, обладающих вирусоцидным действием на вирус мешотчатого расплода пчел. Данный способ может использоваться в научно-исследовательских лабораториях, а также в производственных ветеринарных лабораториях.
В настоящее время вирусные болезни (мешотчатый расплод, острый паралич пчел и др.) широко распространены на пасеках по всему миру, являются актуальной проблемой.
Уровень техники
Известно, что вирус мешотчатого расплода на культуре клеток почки теленка (ПТ) вызывает изменения в виде разрушения целостности монослоя, появления вакуолей и пикноза ядер [Калинин А.Г., Гальнбек Т.В., Сотников А.Н., Володько Д.В., Потапова И.В., Щукина А.В Цитопатологические изменения в культуре клеток при культивировании мешотчатого расплода пчел. Ж. Ветеринария и кормление. №3, 2018, с 43-46].
Известен способ определения вирусоцидного действия средств на вирус мешотчатого расплода пчел в культуре ткани куриных фибробластов in vitro, при котором к одному объему материала с вирусом мешотчатого расплода добавляют один объем нормальной сыворотки крупного рогатого скота и восемь объемов 0,5%-ного водного раствора испытуемого препарата, смесь выдерживают 60 мин при комнатной температуре, после чего делают десятичные разведения в культуральной питательной среде 199 и проводят заражение культуры ткани куриных фибробластов, помещая в термостат при t=37°C с соответствующими контролями, учет результатов осуществляют через 3 сут. микроскопией, сравнивая титр вируса в опыте и контроле, что указывает на присутствие вируса как в опыте, так и в контроле [Деканадзе A.M. Уничтожение возбудителя мешотчатого расплода. Пчеловодство. - 1982. - №2. - С. 19-20]. Данный способ мы берем за прототип.
Недостатком данной методики является разведение заражающего материала, что приводит к уменьшению заражающей дозы вируса и уменьшение количественных и качественных изменений.
Технической проблемой является необходимость создания способа диагностики, основанной на признаках проявления вируса в клетках с более точными качественными показателями изменений.
Сущность изобретения
Техническим результатом является выявление цитопатологических признаков проявления вируса мешотчатого расплода в культурах клеток.
Предложенный способ определения вирусоцидного действия средств борьбы с вирусом мешотчатого расплода пчел заключается в следующем:
Испытуемое средство добавляют к вируссодержащей суспензии (вирус мешотчатого расплода) in vitro в концентрациях, определенных дозировкой исследуемого препарата, выдерживают испытуемую смесь в холодильнике при t=+4-8°C в течение 2 сут., после чего смесь доводят до t=+15-25°C, фильтруют через миллипоровый фильтр с диаметром пор 45 нм., монослой культуры клеток почки теленка (ПТ) отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ+ Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и заражают, добавляя испытуемую смесь на монослой культуры клеток, через 2 ч. адсорбции вируса при t=+34±1°C испытуемую смесь удаляют с монослоя, клетки отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ+ Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1, вносят питательную среду ИГЛА MEM+ Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и культивируют вирус в течение 4-7 сут. в термостате при t=+34±1°C, ежедневно просматривая с целью выявления цитопатогенного действия, в контрольных флаконах ростовую питательную среду заменяли на поддерживающую, вторым контролем служили культуры клеток, зараженные вируссодержащей суспензией без добавления препарата.
На этапе контроля результатов в качестве эталона служат чистая культура клеток ПТ, культура клеток ПТ контактирующая с вируссодержащим материалом, далее через 4 сут. проводят микроскопию, окрашивают клетки азур-эозином по Романовскому-Гимза, выявляют признаки воздействия вируса мешотчатого расплода пчел на клетки ПТ - разрушение целостности монослоя, появление вакуолей, пикноз ядер, при наличии этих признаков вирус присутствует в испытуемой смеси и препарат не подействовал на вирус мешотчатого расплода пчел, отсутствие данных признаков подтверждает гибель вируса.
Осуществление изобретения иллюстрируется следующими примерами:
Пример 1. Вируссодержащий материал in vitro вносят в водяную баню с t=50°C на 10 мин., после охлаждения до t=+15-25°C содержимое пробирки профильтровывают через миллипоровый фильтр с диаметром пор 45 нм., монослой культуры клеток почки теленка (ПТ) отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ+ Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1, наносят вируссодержащий материал на монослой и выдерживают 2 ч. при t=+34±1°C для адсорбции вируса, после чего вируссодержащий материал удаляют, монослой отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ+ Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1, вносят поддерживающую среду ИГЛА MEM+ Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и помещают в термостат при t=+34±1°C, через 4 сут. окрашивают азур-эозином по Романовскому-Гимза; при микроскопии выявляют разрушение монослоя, образование вакуолей и пикноз ядер, аналогичное наблюдают в контроле, где применили вируссодержащую смесь; вирус в опыте не погиб и вызвал изменения, на что указывает контроль с вирусом, в контроле с чистой культурой клеток признаки воздействия вируса мешотчатого расплода пчел отсутствовали.
Пример 2. Вируссодержащий материал in vitro вносят в водяную баню с t=100°C на 5 мин, после содержимое пробирки охлаждают до t=+15-25°C, затем содержимое пробирки профильтровывают через миллипоровый фильтр с диаметром пор 45 нм., монослой отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ+ Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и проводят заражение культуры в течение 2 ч. при t=+34±1°C, после чего вируссодержащий материал удаляют, монослой отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ+ Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1, вносят поддерживающую среду ИГЛА MEM+ Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и помещают в термостат при t=+34±1°C, в качестве контроля используют вирусный материал, не подвергавшийся тепловой обработке, через 4 сут. окрашивают азур-эозином по Романовскому-Гимза; при микроскопии контроля выявляют разрушение монослоя, образование вакуолей и пикноз ядер; вирус в опыте погиб и не вызвал изменения, на что указывает контроль с вирусом, в контроле с чистой культурой клеток признаки воздействия вируса мешотчатого расплода пчел отсутствовали.
Пример 3. В пробирку с вируссодержащим материалом вносят 0,5 мл. водного раствора препарата Dutrion (диоксид хлора 0,005%) в дозировке, указанной в инструкции, помещают на 2 сут. в холодильник при t=+4°C, после содержимое пробирки доводят до t=+15-25°C и фильтруют через миллипоровый фильтр с диаметром пор 45 нм, монослой отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ+ Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1, затем заражают культуры клеток ПТ в течение 2 ч. при t=+34±1°C, после чего вируссодержащий материал удаляют, монослой отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ+ Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1, вносят поддерживающую среду ИГЛА MEM + Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и помещают в термостат при t=+34±1°C, через 4 сут. окрашивают азур-эозином по Романовскому-Гимза; при микроскопии выявляют разрушение монослоя, образование вакуолей и пикноз ядер, аналогичное наблюдают в контроле, где применяют вирусосодержащую смесь; вирус в опыте не погиб и вызвал изменения, на что указывает контроль с вирусом, в контроле с чистой культурой клеток признаки воздействия вируса мешотчатого расплода пчел отсутствовали.
Предложенный способ определения вирусоцидного действия средств позволит провести скрининг на вирусоцидность средств, выявить эффективные лечебные и дезинфицирующие средства при мешотчатом расплоде пчел и других вирусных заболеваниях пчел.
Предложенный способ апробирован нами с положительными результатами на 15 пробах в 2019 г. в лаборатории болезни пчел ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН.
Предложенный способ определения вирусоцидного действия средств найдет широкое применение в научно-исследовательских лабораториях, а также в производственных ветеринарных лабораториях. Выявленные предложенным способом лечебные средства позволят оздоровить от вирусных заболеваний пчел все пасеки страны.
Список используемой литературы:
1. Калинин А.Г., Гальнбек Т.В., Сотников А.Н., Володько Д.В., Потапова И.В., Щукина А.В Цитопатологические изменения в культуре клеток при культивировании мешотчатого расплода пчел. Ж. «Ветеринария и кормление». №3, 2018, с 43-46
2. Деканадзе A.M. Уничтожение возбудителя мешотчатого расплода. Ж. «Пчеловодство». - №2. - 1982. - - С. 19-20 (Прототип)
Claims (1)
- Способ определения вирусоцидного действия средств борьбы с вирусом мешотчатого расплода пчел, включающий добавление препарата к вируссодержащей суспензии, добавление полученной смеси в культуру клеток, культивирование вируса в термостате, микроскопию исследуемых культур клеток и контроль результатов, отличающийся тем, что вируссодержащий материал in vitro смешивают с испытуемым препаратом в концентрациях, определенных дозировкой исследуемого препарата, выдерживают испытуемую смесь в холодильнике при t=+4°C в течение 2 суток, смесь доводят до t=+15-25°C и фильтруют через миллипоровый фильтр с диаметром пор 45 нанометров, после чего монослой культуры клеток почки теленка отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ + Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и проводят ее заражение в течение 2 часов при t=+34±1°C, затем смесь удаляют с монослоя, клетки отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ + Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и в культуры вносят поддерживающую питательную среду ИГЛА МЕМ + Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1, в контрольных флаконах ростовую среду заменяли на поддерживающую, вторым контролем являлась культура клеток, зараженная вирусом, все культуры инкубируют при t=+34±1°C до 4-7 суток, ежедневно просматривая с целью выявления цитопатогенного действия, через 4 суток культуры клеток окрашивают азур-эозином по Романовскому-Гимза, выявляют признаки воздействия вируса мешотчатого расплода пчел на клетки почки теленка - разрушение целостности монослоя, появление вакуолей, пикноз ядер, при наличии этих признаков вирус присутствует в испытуемой смеси и препарат не подействовал на вирус мешотчатого расплода пчел, отсутствие данных признаков подтверждает гибель вируса.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019141329A RU2735869C1 (ru) | 2019-12-13 | 2019-12-13 | Способ определения вирусоцидного действия средств и способов борьбы с вирусом мешотчатого расплода пчел |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019141329A RU2735869C1 (ru) | 2019-12-13 | 2019-12-13 | Способ определения вирусоцидного действия средств и способов борьбы с вирусом мешотчатого расплода пчел |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2735869C1 true RU2735869C1 (ru) | 2020-11-09 |
Family
ID=73398257
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019141329A RU2735869C1 (ru) | 2019-12-13 | 2019-12-13 | Способ определения вирусоцидного действия средств и способов борьбы с вирусом мешотчатого расплода пчел |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2735869C1 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2303059C1 (ru) * | 2005-10-10 | 2007-07-20 | Государственное научное учреждение (ГНУ) Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко | Питательная среда для культивирования и сохранения возбудителей гнильцовых болезней пчел |
| KR20160142618A (ko) * | 2015-06-03 | 2016-12-13 | 서울대학교산학협력단 | 조직내 교잡법을 이용한 낭충봉아 부패병 바이러스 진단용 조성물 및 이를 이용한 진단방법 |
| KR101996736B1 (ko) * | 2017-12-27 | 2019-07-04 | 김윤성 | 낭충봉아부패병 바이러스를 대량 증식시킬 수 있는 돼지 신장 유래 세포주 및 이의 용도 |
-
2019
- 2019-12-13 RU RU2019141329A patent/RU2735869C1/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2303059C1 (ru) * | 2005-10-10 | 2007-07-20 | Государственное научное учреждение (ГНУ) Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко | Питательная среда для культивирования и сохранения возбудителей гнильцовых болезней пчел |
| KR20160142618A (ko) * | 2015-06-03 | 2016-12-13 | 서울대학교산학협력단 | 조직내 교잡법을 이용한 낭충봉아 부패병 바이러스 진단용 조성물 및 이를 이용한 진단방법 |
| KR101996736B1 (ko) * | 2017-12-27 | 2019-07-04 | 김윤성 | 낭충봉아부패병 바이러스를 대량 증식시킬 수 있는 돼지 신장 유래 세포주 및 이의 용도 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Деканадзе A.M. Уничтожение возбудителя мешотчатого расплода. Пчеловодство. - 1982. - N2. - С. 19-20. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Walker et al. | Human papovavirus (JC): induction of brain tumors in hamsters | |
| Steinhardt et al. | Studies on the cultivation of the virus of vaccinia | |
| Loeffler et al. | Report of the commission for research on foot-and-mouth disease | |
| Gladstone et al. | Growth and toxin production of staphylococci in cellophane sacs in vivo | |
| CN112779316A (zh) | 一种灭活型病毒保存液及其制备方法 | |
| RU2735869C1 (ru) | Способ определения вирусоцидного действия средств и способов борьбы с вирусом мешотчатого расплода пчел | |
| Vaughn et al. | Susceptibility of an insect tissue culture to infection by virus preparations of the nuclear polyhedrosis of the silkworm (Bombyx mori L.) | |
| Deshmukh et al. | Avian reoviruses. II. Physicochemical characterization and classification | |
| RU2240822C2 (ru) | Способ получения противотуляремийной гипериммунной сыворотки и способ получения диагностикума эритроцитарного туляремийного иммуноглобулинового сухого | |
| Leibovitz | A transport medium for diagnostic virology | |
| Burke et al. | The isolation of a latent adenolike virus from chicken kidney cell cultures | |
| Glaser et al. | Biochemical studies on the virus and the inclusion bodies of silkworm jaundice | |
| Gibbs et al. | Differential diagnosis of virus infections of the bovine teat skin by electron microscopy | |
| CN111088313B (zh) | 一种用于快速固定嗜热四膜虫细胞计数的试剂及其计数方法 | |
| Heath et al. | Staining of reticulocytes by brilliant cresyl blue: influence of solutions of substances | |
| CN106546747B (zh) | 一种干扰素生物学活性的检测方法 | |
| RU2324187C1 (ru) | Способ подготовки проб серологических исследований из сопряженных очагов чумы и арбовирусных инфекций | |
| Golub et al. | Studies on the interference phenomenon with certain members of the psittacosis-lymphogranuloma group of viruses | |
| CN109453371A (zh) | 一种羊痘、山羊传染性胸膜肺炎二联灭活疫苗及其生产方法 | |
| RU2492452C1 (ru) | Способ контроля полноты инактивации антирабической инактивированной вакцины | |
| RU2772751C1 (ru) | Способ получения гипериммунной сыворотки к аденовирусу bovine-10 крупного рогатого скота | |
| RU2486916C2 (ru) | Способ получения бруцеллезного l-антигена | |
| RU2136747C1 (ru) | Способ ингибирования инфекционной активности вируса иммунодефицита человека | |
| RU1347448C (ru) | Штамм гетероплоидных клеток почки теленка таурус-1, используемый для культивирования вирусов | |
| SHINGU | Studies on the complement fixation test with enteroviruses. Effects of heating antigens at various temperatures on their complement fixing ability |