RU2732700C1 - Способ оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта - Google Patents
Способ оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта Download PDFInfo
- Publication number
- RU2732700C1 RU2732700C1 RU2019137153A RU2019137153A RU2732700C1 RU 2732700 C1 RU2732700 C1 RU 2732700C1 RU 2019137153 A RU2019137153 A RU 2019137153A RU 2019137153 A RU2019137153 A RU 2019137153A RU 2732700 C1 RU2732700 C1 RU 2732700C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lymph node
- tissue
- index
- signalling
- squamous cell
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к способам патоморфологической оценки метастатического поражения. Способ оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта включает выполнение серийно-ступенчатых срезов сигнального лимфатического узла с последующим иммуногистохимическим исследованием. Срезы толщиной 5 микрометров окрашивают с использованием гематоксилина и эозина, проводят иммуногистохимическое исследование с применением антител к белкам Ki-67 и CD49, полученные окрашенные микропрепараты сканируют в цифровое изображение высокого разрешения, проводят цифровой анализ изображений с использованием программного обеспечения с открытым исходным кодом, оценивают индекс Ki-67 как количество позитивно-окрашенных ядер на 1 квадратный миллиметр ткани лимфатического узла, индекс CD49 - количество позитивно-окрашенных мембран опухолевых клеток на 1 квадратный миллиметр ткани лимфатического узла, клеточную плотность опухолевой ткани - количество опухолевых клеток на 1 квадратный миллиметр ткани лимфатического узла и одновременное сочетание количественных показателей индекса Ki-67, индекса CD49 и клеточной плотности опухолевой ткани больше нуля оценивают как наличие метастатического поражения сигнального лимфатического узла. Изобретение обеспечивает большую воспроизводимость, что позволяет повысить точность диагностики. 1 табл., 1 ил.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно, к способам патоморфологической оценки метастатического поражения, и может быть использовано для оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта.
Оценка метастатического поражения сигнального лимфатического узла при раннем плоскоклеточном раке полости рта позволяет оценить общую и безрецидивную выживаемость пациентов и необходимость выполнения радикальной шейной лимфодиссекции.
Известен способ оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта при помощи световой микроскопии с использованием стандартной окраски гематоксилином и эозином путем визуальной оценки в процентах врачом-патологоанатомом (Denoth S, Broglie MA, Haerle SK, Huber GF, Haile SR, Soltermann A, Jochum W, Stoeckli SJ. Histopathological mapping of metastatic tumor cells in sentinel lymph nodes of oral and oropharyngeal squamous cell carcinomas. Head Neck. 2015 Oct; 37(10): 1477-82.). С целью уточнения гистогенеза опухоли, а также определения прогностических и предиктивных биомаркеров в сигнальном лимфатическом узле используется иммуногистохимический метод анализа.
Недостатком визуальной оценки иммуногистохимических маркеров в сигнальном лимфатическом узле является ее субъективность и низкая воспроизводимость количественных показателей между патологоанатомами.
Известен способ оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта, который заключается в исследовании лимфатического узла с использованием серийно-ступенчатых срезов, и применении иммуногистохимического исследования с панцитокератином (АЕ1/АЕ2) с последующей оценкой наличия метастатического поражения патологоанатомом методами световой микроскопии (Протокол исследования сигнального лимфатического узла в многоцентровом рандомизированном исследовании SENT - (Schilling С, Stoeckli SJ, Haerle SK et al. Sentinel European Node Trial (SENT): 3-year results of sentinel node biopsy in oral cancer. Eur J Cancer. 2015 Dec;51(18):2777-84. doi: 10.1016/j.ejca.2015.08.023. Epub 2015 Nov 18).). Этот способ является наиболее близким аналогом.
Недостатками данного способа является отсутствие количественной оценки иммуногистохимического исследования, а также его низкая воспроизводимость.
Техническим результатом изобретения является возможность количественной оценки биомаркеров Ki67 и CD49, повышающей диагностическую точность способа, повышение воспроизводимости способа.
Указанный технический результат достигается в способе оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта, включающем выполнение серийно-ступенчатых срезов сигнального лимфатического узла с последующим иммуногистохимическим исследованием, в котором срезы толщиной 5 микрометров окрашивают с использованием гематоксилина и эозина, проводят иммуногистохимическое исследование с применением антител к белкам Ki-67 и CD49, полученные окрашенные микропрепараты сканируют в цифровое изображение высокого разрешения, проводят цифровой анализ изображений с использованием программного обеспечения с открытым исходным кодом, оценивают индекс Ki-67 как количество позитивно-окрашенных ядер на 1 квадратный миллиметр ткани лимфатического узла, индекс CD49 - количество позитивно-окрашенных мембран опухолевых клеток на 1 квадратный миллиметр ткани лимфатического узла, клеточную плотность опухолевой ткани - количество опухолевых клеток на 1 квадратный миллиметр ткани лимфатического узла и наличие количественных показателей больше нуля оценивают как наличие метастатического поражения сигнального лимфатического узла.
Цифровое сканирование окрашенных микропрепаратов в высоком разрешении при помощи специализированного программно-аппаратного комплекса (QuPath (Bankhead, P. et al. QuPath: Open source software for digital pathology image analysis. Scientific Reports (2017). https://doi.org/10.1038/s41598-017-17204-5) позволяет произвести объективную оценку метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта, повышает воспроизводимость оценки иммуногистохимических биомаркеров Ki-67 и CD49, позволяет оценить количественно клеточную плотность опухолевой ткани.
Цифровая количественная оценка иммуногистохимических маркеров Ki67 и CD 49 в сигнальном лимфатическом узле может быть использована как прогностический и предиктивный показатель.
Изобретательский уровень способа заключается в иммуногистохимической оценке сигнального лимфатического узла при помощи маркеров ki-67 и CD49 и их количественной цифровой оценки.
Заявляемый способ применяется только для исследования сигнального лимфатического узла, который не содержит метастазов по данным ультразвукового исследования, магнитно-резонансной томографии.
При исследовании врачом-патоморфологом существует вероятность пропуска метастаза ввиду его малых размером и низкой клеточной плотности при использовании световой микроскопии.
При количественном анализе цифровой показатель выше О свидетельствует о наличии метастаза в сигнальном лимфатическом узле.
Способ иллюстрируется фигурой, где изображен микропрепарат сигнального лимфатического узла. Окраска Ki-67. Увеличение 50. Цифровое изображение с количественным анализом; 1 - клетки плоскоклеточного рака; 2 - стромальные элементы; 3 - ткань лимфоузла; 4 - различные артефакты либо отсутствие ткани на стекле, не учитывается при анализе. Опухолевая ткань - 50,64%. Иммунные клетки - 29,46%. Клетки стромы - 28,3%. Артефакты - 1,7%.
Способ осуществляют, например, следующим образом.
Сигнальный лимфатический узел фиксируют в течение 24 часов в 10% нейтральном растворе формалина с последующим приготовлением парафинового блока и выполнением серийно-ступенчатых срезов в количестве 6 штук с толщиной среза 5 микрометров и окрашиванием с использованием гематоксилина и эозина, а также панели иммуногистохимических маркеров - антител к белкам Ki-67 и CD49 по общепринятой методике (Birner Р, Ritzi М, Musahl С, KnippersR, Gerdes J, Voigtlander T, et al. Immunohistochemical detection of cell growth fraction in formalin-fixed and paraffin-embedded murine tissue. Am J Pathol 2001; 158:1991-6.) с использованием стейнера, микротома и сканера 3DHistech.
Полученные окрашенные микропрепараты сканируют в цифровое изображение высокого разрешения при помощи специализированного программно-аппаратного комплекса (QuPath (Bankhead, P. etal. QuPath: Open source software for digital pathology image analysis. Scientific Reports (2017). https://doi.org/10.1038/s41598-017-17204-5). Цифровые изображения высокого разрешения подвергают цифровому анализу изображений с использованием программного обеспечения с открытым исходным кодом (QuPath (Bankhead, P. et al. QuPath: Open source software for digital pathology image analysis. ScientificReports (2017). https://doi.org/10.1038/s41598-017-17204-5), позволяющего получить количественное содержание иммуногистохимических маркеров (Ki-67, CD49) с оценкой клеточной плотности опухолевой ткани.
Сущность способа подтверждается клиническим примером.
Пациент Г. 58 лет с клиническим диагнозом рак правой боковой поверхности языка cT2N0M0. Морфологическая верификация: высокодифференцированный ороговевающий плоскоклеточный рак. Для клинического стадирования опухоли языка использовались следующие методы исследования: ультразвуковое исследование лимфатических узлов шеи, магнитно-резонансная томография мягких тканей и лимфатических узлов, компьютерная томография органов грудной полости, брюшной полости и малого таза с внутривенным контрастированием.
С целью изучения лимфооттока от первичной опухоли языка пациенту выполнена однофотонная-эмиссионная томография, совмещенная с компьютерной томографией с целью визуализации и картирования сигнальных лимфатических узлов. По данным исследования отмечается накопление радиофармпрепарата в лимфатических узлах IIa-IIb-IIIсправа.
Интраоперационно при помощи гамма-зонда выполнена детекция сигнальных лимфатических узлов, накапливающих радиофармпрепарат и их хирургическое удаление с последующим патоморфологическим исследованием и количественным цифровым анализом микропрепаратов по предложенной методике (фиг.). Средняя плотность опухолевых клеток составила 190 на 1 кв. мм - 190 окрашенных Ki67 позитивно.
Всего обследовано 20 пациентов с клинически негативными лимфатическими узлами. У 4 из них отмечена положительная окраска на Ki67 и CD49, данные представлены в табл.
Использование заявляемого способа патоморфологического исследования с цифровым количественным анализом изображения позволяет получить данные оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла, обладающие большей воспроизводимостью, что позволяет повысить точность диагностики как в клинической практике, так и при проведении научных исследований.
Claims (1)
- Способ оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта, включающий выполнение серийно-ступенчатых срезов сигнального лимфатического узла с последующим иммуногистохимическим исследованием, отличающийся тем, что срезы толщиной 5 микрометров окрашивают с использованием гематоксилина и эозина, проводят иммуногистохимическое исследование с применением антител к белкам Ki-67 и CD49, полученные окрашенные микропрепараты сканируют в цифровое изображение высокого разрешения, проводят цифровой анализ изображений с использованием программного обеспечения с открытым исходным кодом, оценивают индекс Ki-67 как количество позитивно-окрашенных ядер на 1 квадратный миллиметр ткани лимфатического узла, индекс CD49 - количество позитивно-окрашенных мембран опухолевых клеток на 1 квадратный миллиметр ткани лимфатического узла, клеточную плотность опухолевой ткани - количество опухолевых клеток на 1 квадратный миллиметр ткани лимфатического узла и одновременное сочетание количественных показателей индекса Ki-67, индекса CD49 и клеточной плотности опухолевой ткани больше нуля оценивают как наличие метастатического поражения сигнального лимфатического узла.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019137153A RU2732700C1 (ru) | 2019-11-19 | 2019-11-19 | Способ оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019137153A RU2732700C1 (ru) | 2019-11-19 | 2019-11-19 | Способ оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2732700C1 true RU2732700C1 (ru) | 2020-09-21 |
Family
ID=72922450
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019137153A RU2732700C1 (ru) | 2019-11-19 | 2019-11-19 | Способ оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2732700C1 (ru) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2324180C1 (ru) * | 2006-10-02 | 2008-05-10 | Государственное учреждение научно-исследовательский институт онкологии Томского Научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ГУ НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН) | Способ оценки вероятности гематогенного метастазирования при инфильтрирующем протоковом раке молочной железы |
| RU2446747C1 (ru) * | 2010-08-03 | 2012-04-10 | Федеральное государственное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи" | Способ диагностики микрометастазов злокачественных опухолей |
| RU2639448C1 (ru) * | 2017-01-10 | 2017-12-21 | государственное бюджетное учреждение Свердловской области "Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии" | Способ определения стадии грибовидного микоза |
| RU2661600C1 (ru) * | 2017-09-25 | 2018-07-17 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования развития метастазов в регионарные лимфоузлы у пациентов с аденокарциномой желудка |
| RU2695758C1 (ru) * | 2018-06-04 | 2019-07-25 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Иркутский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования течения заболевания у пациентов с метастазами в головной мозг |
-
2019
- 2019-11-19 RU RU2019137153A patent/RU2732700C1/ru active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2324180C1 (ru) * | 2006-10-02 | 2008-05-10 | Государственное учреждение научно-исследовательский институт онкологии Томского Научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ГУ НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН) | Способ оценки вероятности гематогенного метастазирования при инфильтрирующем протоковом раке молочной железы |
| RU2446747C1 (ru) * | 2010-08-03 | 2012-04-10 | Федеральное государственное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи" | Способ диагностики микрометастазов злокачественных опухолей |
| RU2639448C1 (ru) * | 2017-01-10 | 2017-12-21 | государственное бюджетное учреждение Свердловской области "Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии" | Способ определения стадии грибовидного микоза |
| RU2661600C1 (ru) * | 2017-09-25 | 2018-07-17 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования развития метастазов в регионарные лимфоузлы у пациентов с аденокарциномой желудка |
| RU2695758C1 (ru) * | 2018-06-04 | 2019-07-25 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Иркутский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования течения заболевания у пациентов с метастазами в головной мозг |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Denoth S, Broglie MA, Haerle SK, Huber GF, Haile SR, Soltermann A, Jochum W, Stoeckli SJ. Histopathological mapping of metastatic tumor cells in sentinel lymph nodes of oral and oropharyngeal squamous cell carcinomas. Head Neck. 2015 Oct; 37(10): 1477-82. * |
| Denoth S, Broglie MA, Haerle SK, Huber GF, Haile SR, Soltermann A, Jochum W, Stoeckli SJ. Histopathological mapping of metastatic tumor cells in sentinel lymph nodes of oral and oropharyngeal squamous cell carcinomas. Head Neck. 2015 Oct; 37(10): 1477-82. Schilling С, Stoeckli SJ, Haerle SK et al. Sentinel European Node Trial (SENT): 3-year results of sentinel node biopsy in oral cancer. Eur J Cancer. 2015 Dec; 51(18):2777-84. doi: 10.1016/j.ejca.2015.08.023. Epub 2015 Nov 18. * |
| Schilling С, Stoeckli SJ, Haerle SK et al. Sentinel European Node Trial (SENT): 3-year results of sentinel node biopsy in oral cancer. Eur J Cancer. 2015 Dec; 51(18):2777-84. doi: 10.1016/j.ejca.2015.08.023. Epub 2015 Nov 18 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TWI753448B (zh) | 分析組織標本的方法 | |
| US7517662B2 (en) | Method for solution based diagnosis | |
| KR102179848B1 (ko) | 종양 조직 중 면역 세포를 정량화하는 방법 및 이의 사용 | |
| JP5866362B2 (ja) | 画像解析による固形腫瘍進行の予後検査 | |
| Allison et al. | Ultrasonography-guided fine-needle aspiration with concurrent small core biopsy of neck masses and lymph nodes yields adequate material for HPV testing in head and neck squamous cell carcinomas | |
| Park et al. | Dataset for the reporting of carcinoma of the cervix: recommendations from the International Collaboration on Cancer Reporting (ICCR) | |
| Yoshida et al. | Diagnostic findings of ultrasound‐guided fine‐needle aspiration cytology for gastrointestinal stromal tumors: proposal of a combined cytology with newly defined features and histology diagnosis | |
| Donato et al. | Integrating X-ray phase-contrast imaging and histology for comparative evaluation of breast tissue malignancies in virtual histology analysis | |
| Sumikawa et al. | Pulmonary adenocarcinomas with ground-glass attenuation on thin-section CT: quantification by three-dimensional image analyzing method | |
| Takahashi et al. | EUS-guided fine-needle biopsy sampling of solid pancreatic tumors with 3 versus 12 to-and-fro movements: a multicenter prospective randomized controlled study | |
| Notohara et al. | Tissue processing of endoscopic ultrasound-guided fine-needle aspiration specimens from solid pancreatic lesions | |
| EP4178425A1 (en) | Cellular diagnostic and analysis methods | |
| RU2732700C1 (ru) | Способ оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта | |
| RU2740431C1 (ru) | Способ приготовления клеточных блоков на основе эксфолиативного материала шейки матки и цервикального канала | |
| Raspollini et al. | The central role of the pathologist in the management of patients with cervical cancer: ESGO/ESTRO/ESP guidelines | |
| RU2695758C1 (ru) | Способ прогнозирования течения заболевания у пациентов с метастазами в головной мозг | |
| Choi et al. | High-quality cell block preparation from scraping of conventional cytology slide: a technical report on a modified cytoscrape cell block technique | |
| Donato et al. | Unveiling tumor invasiveness: enhancing cancer diagnosis with phase-contrast microtomography for 3D virtual histology | |
| RU2321859C2 (ru) | Способ дифференциальной диагностики гиперплазии, интраэпителиальных неоплазий и рака шейки матки | |
| Jonjić et al. | Predictive value of intraoperative sentinel lymph node imprint cytology analysis for metastasis in patients with melanoma | |
| RU2450790C2 (ru) | Способ проведения исследования для диагностики злокачественного новообразования | |
| Schneider et al. | Correlation between VITOM® videocolposcopy and histopathology for pathognomonic grading criteria | |
| Weeratunga et al. | Temporo-spatial cellular atlas of the regenerating alveolar niche in idiopathic pulmonary fibrosis | |
| Ytre-Hauge | Advanced imaging biomarkers in endometrial cancer | |
| RU2553378C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики высокодифференцированного рака у больных с узловыми формами заболеваний щитовидной железы |