RU2728324C1 - Способ выявления инфицирования почечного трансплантата - Google Patents

Способ выявления инфицирования почечного трансплантата Download PDF

Info

Publication number
RU2728324C1
RU2728324C1 RU2019130560A RU2019130560A RU2728324C1 RU 2728324 C1 RU2728324 C1 RU 2728324C1 RU 2019130560 A RU2019130560 A RU 2019130560A RU 2019130560 A RU2019130560 A RU 2019130560A RU 2728324 C1 RU2728324 C1 RU 2728324C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
infection
concentration
viral dna
urine
viral
Prior art date
Application number
RU2019130560A
Other languages
English (en)
Inventor
Болдукыз Толгонбаевна Джумабаева
Дмитрий Сергеевич Тихомиров
Татьяна Сергеевна Туполева
Людмила Семёновна Бирюкова
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр гематологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ гематологии" Минздрава России)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр гематологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ гематологии" Минздрава России) filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр гематологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ гематологии" Минздрава России)
Priority to RU2019130560A priority Critical patent/RU2728324C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2728324C1 publication Critical patent/RU2728324C1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B5/00—Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • C12Q1/6851—Quantitative amplification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • C12Q1/686—Polymerase chain reaction [PCR]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56983—Viruses
    • G01N33/56994—Herpetoviridae, e.g. cytomegalovirus, Epstein-Barr virus

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской диагностике, трансплантологии, и может быть использовано для выявления инфицирования почечного трансплантата герпесвирусами путем определения концентрации вирусной ДНК методом полимеразной цепной реакции в моче пациента. При концентрации вирусной ДНК менее 2500 коп/мл констатируют наличие латентной вирусной инфекции у реципиента почечного трансплантата. При концентрации вирусной ДНК равной и более 2500 коп/мл констатируют наличие активной вирусной инфекции, требующей специфической противовирусной терапии. Способ обеспечивает возможность выявления инфицирования почечного трансплантата герпесвирусами, более точного и безопасного для пациента, за счет выявления инфицирования почечного трансплантата герпесвирусами путем определения концентрации вирусной ДНК в моче пациента методом полимеразной цепной реакции. 2 н.п. ф-лы, 2 табл.

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к способам прогнозирования инфекционных осложнений после трансплантации почки.
Известен патент США №6605602, в котором, в частности, описан способ выявления риска поражения почки ВК (полиомавирус человека 1) вирусом методом полимеразной цепной реакции гена ВК вируса в моче пациента после трансплантации почки.
После трансплантации почки инфекционные осложнения у пациентов являются одним из серьезных осложнений. Среди инфекционных осложнений преимущественно герпесвирусная инфекция, которая является причиной инфицирования и удаления трансплантата.
Задача, на решение которой направлено заявляемое изобретение, - разработка действенного и простого способа выявления инфицирования почечного трансплантата герпесвирусами, более точного и безопасного для пациента.
Поставленная задача решается путем применения способа выявления инфицирования почечного трансплантата герпесвирусами, определением концентрации вирусной ДНК в моче пациента методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). При концентрации ДНК герпесвируса менее 2500 коп/мл в моче констатируют наличие латентного вирусного фактора, который не сопровождается клиникой вирусной инфекции и нарушением функции трансплантата. При концентрации ДНК герпесвируса более 2500 коп/мл в моче констатируют наличие активной вирусной инфекции, что требует назначение противовирусной терапии.
Представленный способ выявления инфицирования почечного трансплантата подтвержден следующими исследованиями.
Исследовано 32 пациента (мужчин - 21, женщин - 11) с хронической болезнью почек в терминальной стадии (ХБПС5). Медиана возраста составила 43 года.
Методом ПЦР в режиме реального времени определяли концентрацию ДНК цитомегаловируса (ЦМВ), вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ) и вируса герпеса человека 6 типа (ВГЧ 6) в периферической крови и моче реципиента через 1, 2, 4, 6 месяцев и через 1 год после трансплантации почки (ТАП). Наименьшей концентрацией вирусной ДНК в периферической крови и моче считалась менее 500 коп. Концентрация вирусной ДНК более 2500 коп считалась высокой.
На фоне иммуносупрессивной терапии у реципиентов почечного трансплантата преимущественно первый два месяца после ТАП выявлялись маркеры герпесвирусной инфекции, последующие 4 и 6 месяцев, через 1 год значительно реже. Однако нарушение функции трансплантата наблюдалась не во всех выявленных случаях.
При концентрация ДНК менее 500 коп/105 клеток в крови и менее 500 коп/мл в моче ЦМВ у 8 реципиентов, ВЭБ у 10 и ВГЧ у 13 не отмечалось нарушение функции трансплантата (таблица 1).
У 9 реципиентов почечного трансплантата с ЦМВ, у 6 - с ВЭБ, у 2 - с ВГЧ 6 выявлена высокая концентрация вирусной ДНК в моче более 2500 коп/мл, что сопровождалась нарушением функции трансплантата и указывала на инфицирование трансплантата (таблица 2). При этом в крови у этих пациентов вирусная ДНК либо вообще не была выявлена, либо ее концентрация находилась в пределах минимальных значений - менее 500 коп/105 клеток.
Таким образом, при инфицирование почечного трансплантата прежде всего повышается концентрация герпесвирусов в моче при этом в крови их количество может оставаться на низком уровне. Выявлена корреляция между уровнем концентрации ДНК герпесвирусов (ЦМВ, ВЭБ, ВГЧ 6) в моче и нарушением функции трансплантата. При низкой вирусной нагрузке не отмечается нарушений функции трансплантата, а при высокой вирусной нагрузке более 2500 коп/мл в моче наблюдается дисфункция трансплантата.
Figure 00000001
Figure 00000002
Figure 00000003
Таким образом, как видно из представленных выше данных, разработан способ выявления инфицирования почечного трансплантата герпесвирусами путем определения концентрации вирусной ДНК методом полимеразной цепной реакции в моче пациента, более точный по сравнению с существующим методом полимеразной цепной реакции в плазме крови пациента.
В известном патентном документе США №6605602 описан способ определения ВК вируса, который является представителем полиомавирусов и не относится к герпесвирусам. Так же в нем не раскрыта концентрация ДНК вируса, определяющая тип и стадии инфицирования трансплантата. Вышеперечисленное позволяет оценивать представленный способ, как соответствующий критерию патентоспособности «новизна».
ВК-вирус локализируется в эпителии канальцев почек. При инфицировании ВК вирусом наблюдается поражение собирательных трубочек, дистальных канальцев и петли Генле, что делает естественным выявление ДНК ВК - вируса методом ГЩР в моче реципиента почечного трансплантата. ВК - вирус практически не поражает эндотелиальные, гладкомышечные и интерстициальные клетки, что служить критерием дифференциальной диагностики с герпесвирусной инфекцией. ЦМВ поражает эндотелиальные клетки, ВЭБ преимущественно локализируется в CD21-позитивных лимфоцитах, а ВГЧ 6 преимущественно в Т-лимфоцитах. При герпесвирусной инфекции поражается интерстиций (межканальцевая ткань и клубочки почки) почки. Поэтому повышение концентрации маркеров ЦМВ, ВЭБ и ВГЧ 6 первоначально в моче у реципиента почечного трансплантата не очевидны для специалистов, что позволяет судить о соответствии заявляемого способа критерию патентоспособности «изобретательский уровень».

Claims (2)

1. Способ выявления инфицирования почечного трансплантата герпесвирусами путем количественного определения вирусного ДНК методом полимеразной цепной реакции в моче реципиента, отличающийся тем, что при концентрации вирусной ДНК более 2500 коп/мл определяют наличие вирусной инфекции.
2. Способ выявления инфицирования почечного трансплантата герпесвирусами путем определения концентрации вирусной ДНК методом полимеразной цепной реакции в моче пациента, отличающийся тем, что при концентрации вирусной ДНК менее 2500 коп/мл констатируют наличие латентной вирусной инфекции у реципиента почечного трансплантата, а при концентрации вирусной ДНК равной и более 2500 коп/мл констатируют наличие активной вирусной инфекции, требующей специфической противовирусной терапии.
RU2019130560A 2019-09-27 2019-09-27 Способ выявления инфицирования почечного трансплантата RU2728324C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019130560A RU2728324C1 (ru) 2019-09-27 2019-09-27 Способ выявления инфицирования почечного трансплантата

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019130560A RU2728324C1 (ru) 2019-09-27 2019-09-27 Способ выявления инфицирования почечного трансплантата

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2728324C1 true RU2728324C1 (ru) 2020-07-29

Family

ID=72085330

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019130560A RU2728324C1 (ru) 2019-09-27 2019-09-27 Способ выявления инфицирования почечного трансплантата

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2728324C1 (ru)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2123188C1 (ru) * 1997-07-08 1998-12-10 Московский областной научно-исследовательский клинический институт Способ прогнозирования развития цитомегаловирусной инфекции у реципиентов почечных аллотрансплантатов

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2123188C1 (ru) * 1997-07-08 1998-12-10 Московский областной научно-исследовательский клинический институт Способ прогнозирования развития цитомегаловирусной инфекции у реципиентов почечных аллотрансплантатов

Non-Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
AQUINO V.H. et al. Cytomegalovirus infection in renal transplant recipients diagnosed by nested-PCR. Braz J Med Biol Res. 2001, 34(1), p.93-101. *
UNAL E. et al. Viral Infections after Kidney Transplantation: An Updated Review. Int J Virol AIDS. 2018, 5:040, doi.org/10.23937/2469-567X/1510040. *
VANICHANAN J. et al. Common viral infections in kidney transplant recipients. Kidney Res Clin Pract. 2018, 37, p.323-337. *
АМВРОСЬЕВА Т. В. и др. Этиология вирусных инфекций при трансплантации почки и алгоритм их лабораторной диагностики. Клиническая лабораторная диагностика. 2015, 60(6), стр.37-40. *
ВАТАЗИН А.В. и др. Клинические рекомендации "Диагностика, лечение и профилактика инфекционных осложнений у пациентов с трансплантированной почкой". М. 2014, стр.12-14. *
ДЖУМАБАЕВА Б.Т. и др. Факторы, предрасполагающие к возникновению вирусной инфекции у реципиента почечного трансплантата. IX Всероссийский съезд трансплантологов, материалы съезда. М. 2018, стр.109-110. *
ДЖУМАБАЕВА Б.Т. и др. Факторы, предрасполагающие к возникновению вирусной инфекции у реципиента почечного трансплантата. IX Всероссийский съезд трансплантологов, материалы съезда. М. 2018, стр.109-110. АМВРОСЬЕВА Т. В. и др. Этиология вирусных инфекций при трансплантации почки и алгоритм их лабораторной диагностики. Клиническая лабораторная диагностика. 2015, 60(6), стр.37-40. ПРОКОПЕНКО Е.И. Вирусные инфекции и трансплантация почки. Нефрология и диализ. 2003, 5(2), стр.108-116. ВАТАЗИН А.В. и др. Клинические рекомендации "Диагностика, лечение и профилактика инфекционных осложнений у пациентов с трансплантированной почкой". М. 2014, стр.12-14. VANICHANAN J. et al. Common viral infections in kidney transplant recipients. Kidney Res Clin Pract. 2018, 37, p.323-337. UNAL E. et al. Viral Infections after Kidney Transplantation: An Updated Review. Int J Virol AIDS. 2018, 5:040, doi.org/10.23937/2469-567X/1510040. *
ПРОКОПЕНКО Е.И. Вирусные инфекции и трансплантация почки. Нефрология и диализ. 2003, 5(2), стр.108-116. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Emery et al. Management of cytomegalovirus infection in haemopoietic stem cell transplantation.
Wheat et al. Possible role of human herpesvirus 8 in the lymphoproliferative disorders in common variable immunodeficiency
Leung et al. Quantification of polyoma BK viruria in hemorrhagic cystitis complicating bone marrow transplantation
Minami et al. Cytomegalovirus infection in severe ulcerative colitis patients undergoing continuous intravenous cyclosporine treatment in Japan
Koelle et al. Frequent detection of Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (human herpesvirus 8) DNA in saliva of human immunodeficiency virus-infected men: clinical and immunologic correlates
Jeon et al. Risk factors for cytomegalovirus retinitis in patients with cytomegalovirus viremia after hematopoietic stem cell transplantation
Posavad et al. T cell immunity to herpes simplex viruses in seronegative subjects: silent infection or acquired immunity?
Hrbacek et al. Thirty years of research on infection and prostate cancer: no conclusive evidence for a link. A systematic review
Santos et al. Real-time PCR in infectious uveitis as an alternative diagnosis
Oshrine et al. Kidney and bladder outcomes in children with hemorrhagic cystitis and BK virus infection after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation
Zhang et al. Early depletion of proliferating B cells of germinal center in rapidly progressive simian immunodeficiency virus infection
Luppi et al. Nonmalignant disease associated with human herpesvirus 8 reactivation in patients who have undergone autologous peripheral blood stem cell transplantation
RU2728324C1 (ru) Способ выявления инфицирования почечного трансплантата
Francisci et al. The pp65 antigenaemia test as a predictor of cytomegalovirus-induced end-organ disease in patients with AIDS
Lundqvist et al. High frequency of parvovirus B19 DNA in bone marrow samples from rheumatic patients
Lim et al. Severe mpox requiring colostomy in a patient with advanced HIV disease: A case report and literature review
Zavitsanou et al. Human herpesvirus 8 infection in hemodialysis patients
Gras et al. BK virus genotypes and humoral response in kidney transplant recipients with BKV associated nephropathy
Hrbáček et al. Urinary shedding of common DNA viruses and their possible association with bladder cancer: A qPCR-based study
EA039422B1 (ru) Способ прогнозирования нарушения функции почечного трансплантата при инфицировании герпесвирусной инфекцией
WO2007029809A1 (ja) ウイルス潜伏感染の検査方法および検査用キット
Abbas et al. Serological Study of Human Cytomegalovirus in Thalassemia Patients and Blood Donors and its Relation to IL-6 in Kirkuk City
Erkek et al. Identification of herpes simplex virus DNA and lack of human herpesvirus-8 DNA in mycosis fungoides.
Yoshikawa et al. Human herpesvirus 6 latently infects mononuclear cells but not liver tissue.
Ohashi et al. Human herpesvirus 6 fulminant hepatic failure treated by living donor liver transplantation.

Legal Events

Date Code Title Description
TC4A Change in inventorship

Effective date: 20201016