RU2723745C1 - Способ моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса - Google Patents

Способ моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса Download PDF

Info

Publication number
RU2723745C1
RU2723745C1 RU2019137653A RU2019137653A RU2723745C1 RU 2723745 C1 RU2723745 C1 RU 2723745C1 RU 2019137653 A RU2019137653 A RU 2019137653A RU 2019137653 A RU2019137653 A RU 2019137653A RU 2723745 C1 RU2723745 C1 RU 2723745C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
intraperitoneal
staphylococcus aureus
infection
culture
infectious process
Prior art date
Application number
RU2019137653A
Other languages
English (en)
Inventor
Валерия Николаевна Шахова
Валерий Анатольевич Беляев
Елена Валентиновна Светлакова
Елена Сергеевна Кастарнова
Дмитрий Алексеевич Зинченко
Original Assignee
федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ставропольский государственный аграрный университет"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ставропольский государственный аграрный университет" filed Critical федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ставропольский государственный аграрный университет"
Priority to RU2019137653A priority Critical patent/RU2723745C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2723745C1 publication Critical patent/RU2723745C1/ru

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G09—EDUCATION; CRYPTOGRAPHY; DISPLAY; ADVERTISING; SEALS
    • G09B—EDUCATIONAL OR DEMONSTRATION APPLIANCES; APPLIANCES FOR TEACHING, OR COMMUNICATING WITH, THE BLIND, DEAF OR MUTE; MODELS; PLANETARIA; GLOBES; MAPS; DIAGRAMS
    • G09B23/00—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes
    • G09B23/28—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes for medicine

Landscapes

  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Computational Mathematics (AREA)
  • Mathematical Analysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Algebra (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Mathematical Optimization (AREA)
  • Mathematical Physics (AREA)
  • Pure & Applied Mathematics (AREA)
  • Business, Economics & Management (AREA)
  • Educational Administration (AREA)
  • Educational Technology (AREA)
  • Theoretical Computer Science (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к микробиологии. Вводят кроликам внутрибрюшинно суточную культуру Staphylococcus aureus, выращенную на мясо-пептонном агаре, в объеме 5 мл. При этом доводят концентрацию в 1 мл до 10микробных клеток по стандарту мутности Тарасевича в стерильной пробирке. Клинические признаки инфицирования отмечаются через 2-3 дня после введения Staphylococcus aureus. Способ позволяет получать технически простую и высоковоспроизводимую модель интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса, приводящую к перитониту. 5 ил., 3 пр.

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к микробиологии, предназначено для моделирования внутрибрюшинных инфекционных процессов с целью дальнейшей выработки оптимальной схемы лечения патологий бактериального генеза.
Уровень техники
Известен способ моделирования внутрибрюшинного заражения мышей стрептококками в сублетальной (3,5×106 КОЕ/мышь) и летальной (ЛД50) для 50% лабораторных животных (3,5×107 КОЕ/мышь) дозах (см. патент RU 2387715).
Рассмотренный способ характеризуется следующими недостатками: быстрая гибель животных, в результате введения высоких доз стрептококка, отсутствие данных о проведении опытов над другими видами животных.
Известен способ достижения персистирующей бактериемии у мышей, которых заражают сублетальным инокулятом Staphylococcus aureus внутрибрюшинным путем. Бактериемия оценивается через 2 ч после заражения, а потеря веса и почечная инфекция - через 4 дня. (Methods in Molecular Biology. 2016; 1403: 409-18. doi: 10.1007/978-1-4939-3387-7_22. Murine Models of Bacteremia and Surgical Wound Infection for the Evaluation of Staphylococcus aureus Vaccine Candidates / Wang L., Lee J.C.).
Рассмотренный способ имеет ряд существенных недостатков: отсутствует доза, которую вводили животным и название штамма Staphylococcus aureus.
Известен способ заражения животных, где использовали суточные агаровые культуры аэробных грамположительных бактерий - Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes (серовар А) приготовленные на 0,9%-ном растворе хлорида натрия. Выбор этих бактерий объясняется наиболее частым именно их обнаружением в перитонеальном экссудате при разлитом гнойном перитоните. Внутрибрюшинное заражение животных проводили инъекцией предварительно оттитрованных доз микроорганизмов, содержащих в объеме 0,5 мл 1×108 микробных тел стафилококка и стрептококка. Выбор дозы каждой бактериальной культуры был определен по 0,5 LD50, что обеспечивало выживание всех лабораторных животных более 3-х суток. Через 24, 48 и 72 часа после внутрибрюшинных инъекций под эфирным наркозом путем декапитации осуществляли эвтаназию 4 животных каждой основной группы и 10 животных группы сравнения с последующим забором биоматериала. (Уровни ферритина в сыворотках крови и перитонеальном экссудате крыс при внутрибрюшинном инфицировании монокультурой бактерий / Мусагалиев А.А., Коханов А.В., Воронкова М.Ю., Серебряков А.А., Муртузалиев И.М. // Современные проблемы науки и образования. - 2017. - №5.; URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=26748 (дата обращения: 26.08.2019).
Рассмотренный способ имеет ряд существенных недостатков. В частности, заражение культурами аэробных грамположительных бактерий проводилось только на крысах, а также выявление особенностей инфекционного процесса учитывается только при изменении уровня ферритина.
Наиболее близким изобретением к описываемому способу по технической сущности является способ внутрибрюшинного стафилококкового инфицирования, в котором животным внутрибрюшинно под эфирным наркозом вводили в объеме 1 мл 1*109 микробных клеток суточной культуры Staphylococcus aureus, выращенного на желточно-солевом агаре. Через 3, 6, 12 часов и 1, 2, 3, 7, 9, 14 суток животных выводили из эксперимента путем передозировки эфира и декапитации (см. Морфофункциональная характеристика селезенки, мезентериальных лимфатических узлов и печени при внутрибрюшинном стафилококковом инфицировании / Пименова Юлия Александровна // автореферат на соиск. канд. мед. наук. - Новосибирск, 2012. - с. 18).
Рассмотренный способ имеет ряд недостатков, основными из которых является отсутствие информации о времени после инфицирования, когда регистрировались первые клинические признаки патологии, о вирулентности данного штамма, а также отсутствие данных о проведении опытов над другими видами животных.
Раскрытие изобретения
Задачей изобретения являлась разработка такого способа моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса, который прост в исполнении, позволяет быстро создать необходимую концентрацию микробных клеток в брюшной полости лабораторных животных.
Техническим результатом изобретения является создание технически простой и высокопроизводимой модели интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса, приводящая к перитониту.
Технический результат достигается с помощью способа моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса, в котором производят внутрибрюшинное введение суточной культуры Staphylococcus aureus, при этом объем вводимой культуры кроликам составляет 5 мл, причем доводят концентрацию в 1 мл до 108 микробных клеток по стандарту мутности Тарасевича в стерильной пробирке, выращенной на мясо-пептонном агаре, клинические признаки инфицирования отмечаются через 2-3 дня после введения Staphylococcus aureus.
Сущность способа моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса, включающий внутрибрюшинное введение суточной культуры Staphylococcus aureus, при этом объем вводимой культуры кроликам составляет 5 мл, причем доводят концентрацию в 1 мл до 108 микробных клеток по стандарту мутности Тарасевича в стерильной пробирке, выращенной на мясо-пептонном агаре, клинические признаки инфицирования отмечаются через 2-3 дня после введения Staphylococcus aureus.
Краткое описание чертежей и их материалов
На фиг. 1, дан способ моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса, культура Staphylococcus aureus, выделенная из перитонеальной жидкости, рисунок 1.
На фиг. 2, дан способ моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса, культура Staphylococcus aureus, выделенная из печени, рисунок 2.
На фиг. 3, дан способ моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса, культура Staphylococcus aureus, выделенная из сердца, рисунок 3.
На фиг. 4, дан способ моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса, свищ, образовавшийся в результате введения культуры Staphylococcus aureus в брюшную полость, рисунок 4.
На фиг. 5, дан способ моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса, место введения культуры Staphylococcus aureus в брюшную полость, рисунок 5.
Осуществление изобретения
Примеры конкретного выполнения способа моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса.
Штамм, используемый для моделирования инфекционного процесса: Staphylococcus aureus АТСС 6538-Р = FDA 209-Р = NCTC №7447 = ССМ 2022 = CIP 53,156 = WDCM 00033, номер штамма 201108, полученный из Американской коллекции типовых культур (АТСС), США.
Пример №1.
Культуру предварительно засевают с помощью бактериальной петли в пробирки с мясо-пептонным агаром, культивируют в термостате при температуре 37±2°С в аэробной среде в течение 24 часов. Ресуспендируют культуру Staphylococcus aureus физиологическим раствором. В стерильной зоне пастеровской пипеткой набирают культуру. Доводят концентрацию микробных клеток в 1 мл до 106 по стандарту мутности Тарасевича в стерильной пробирке. Животное держат вниз головой, чтобы внутренности брюшной полости опустились к диафрагме. Укол делают в нижней трети, слева от белой линии живота. Место инъекции дезинфицируют, берут складку кожи и вводят в нее иглу, поворачивают под прямым углом и быстрым толчком прокалывают брюшную стенку. Объем вводимой культуры кроликам составляет 8 мл. Клинические признаки инфицирования отмечаются через 4-5 дней после введения штамма.
К четвертым суткам у кроликов отмечалась легкая гиперемия ушных раковин, отказ от воды и корма отсутствовал, частота пульса и число дыхательных движений в пределах физиологической нормы. Количество колоний в перитонеальной жидкости незначительно, в печени, желчном пузыре, крови и сердце рост бактерий отсутствует.
Пример №2.
Выполняется аналогично примеру 1, но доводят концентрацию микробных клеток в 1 мл до 107 по стандарту мутности Тарасевича в стерильной пробирке, объем вводимой культуры кроликам составляет 6,5 мл. клинические признаки инфицирования отмечаются через 3-4 дней после введения штамма.
К третьим-четвертым суткам у животных отмечалось угнетение общего состояния, незначительное повышение температуры тела, частота пульса и число дыхательных движений в пределах физиологической нормы. Достоверные изменения в гематологических и биохимических показателях крови отсутствовали. Количество колоний в перитонеальной жидкости составило 362 штуки (рис. 1), в печени, желчном пузыре, крови и сердце рост бактерий отсутствует.
Пример №3.
Выполняется аналогично примеру 1, но доводят концентрацию микробных клеток в 1 мл до 108 по стандарту мутности Тарасевича в стерильной пробирке, объем вводимой культуры кроликам составляет 5 мл, клинические признаки инфицирования отмечаются через 2-3 дня после введения штамма.
Ко вторым суткам у животных отмечалось угнетение общего состояния, повышение температуры тела до 41,0°С, частота пульса была в пределах 75-80 уд/мин, число дыхательных движений, также было увеличено и составляло 55-60 в минуту, сильная болезненность брюшной стенки (рис. 4, 5). Гематологические показатели крови характеризуются высокими значениями гематокрита (выше нормы на 20,0%), лейкоцитозом (выше нормы в 2,5 раза), гранулоцитозом (выше нормы в 4,0 раза). Биохимические показатели сыворотки крови характеризуются высокими значениями общего белка в вторые-третьи сутки (достоверное увеличение на 11,3%), уровень креатинина и мочевины повышается в 1,5 и в 2,4 раза соответственно. Уровень глюкозы к третьему дню увеличивается на 20,5%, что связано с усиленным распадом гликогена в различных органах и тканях. Сплошной рост колоний отмечался в печени (рис. 2), желчном пузыре, перитонеальной жидкости, крови и сердце (рис. 3).
Задачей изобретения являлась разработка такого способа моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса, который
Таким образом, оптимальным является пример 3. Рассмотренный способ предрасполагает развитию интраперитонеального инфекционного процесса, который прост в исполнении, позволяет быстро создать необходимую концентрацию микробных клеток в брюшной полости лабораторных животных.
Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими известными техническими решениями имеет следующие преимущества: создана технически простая и высоко воспроизводимая модель интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса, приводящая к перитониту.

Claims (1)

  1. Способ моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса, включающий внутрибрюшинное введение суточной культуры Staphylococcus aureus, отличающийся тем, что вводят кроликам культуру, выращенную на мясо-пептонном агаре, в объеме 5 мл, причем доводят концентрацию в 1 мл до 108 микробных клеток по стандарту мутности Тарасевича в стерильной пробирке, клинические признаки инфицирования отмечаются через 2-3 дня после введения Staphylococcus aureus.
RU2019137653A 2019-11-21 2019-11-21 Способ моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса RU2723745C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019137653A RU2723745C1 (ru) 2019-11-21 2019-11-21 Способ моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019137653A RU2723745C1 (ru) 2019-11-21 2019-11-21 Способ моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2723745C1 true RU2723745C1 (ru) 2020-06-17

Family

ID=71096164

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019137653A RU2723745C1 (ru) 2019-11-21 2019-11-21 Способ моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2723745C1 (ru)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100755426B1 (ko) * 2006-03-27 2007-09-04 원광대학교산학협력단 몽골리안 저빌에 복막염을 유발시키는 방법
RU2338265C1 (ru) * 2007-05-28 2008-11-10 Юрий Юрьевич Блинков Способ моделирования острого перитонита
JP2008278830A (ja) * 2007-05-13 2008-11-20 Univ Nagoya 腹膜透析下での腹膜障害モデル動物及びその利用
RU2427925C1 (ru) * 2010-02-26 2011-08-27 Государственное образовательное учреждение Высшего профессионального образования "Омская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Росздрава" Способ моделирования острого разлитого перитонита у крыс

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100755426B1 (ko) * 2006-03-27 2007-09-04 원광대학교산학협력단 몽골리안 저빌에 복막염을 유발시키는 방법
JP2008278830A (ja) * 2007-05-13 2008-11-20 Univ Nagoya 腹膜透析下での腹膜障害モデル動物及びその利用
RU2338265C1 (ru) * 2007-05-28 2008-11-10 Юрий Юрьевич Блинков Способ моделирования острого перитонита
RU2427925C1 (ru) * 2010-02-26 2011-08-27 Государственное образовательное учреждение Высшего профессионального образования "Омская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Росздрава" Способ моделирования острого разлитого перитонита у крыс

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ANGELIQUE G.A. WELTEN et al. In vitro and in vivo models for peritonitis demonstrate unchanged neutrophil migration after exposure to dialysis fluids, Nephrology Dialysis Transplantation, April 2004, Volume 19, Issue 4, Pages 831-839. *
ITO Y.et al. Peritonitis-induced peritoneal injury models for research in peritoneal dialysis review of infectious and non-infectious models. Ren Replace Ther, 2017, 3, 16. *
КУБАСОВ К.А. и др. Новая методика перитонита в условиях эксперимента, Международный студенческий научный вестник, 2016, 6. *
КУБАСОВ К.А. и др. Новая методика перитонита в условиях эксперимента, Международный студенческий научный вестник, 2016, 6. ITO Y.et al. Peritonitis-induced peritoneal injury models for research in peritoneal dialysis review of infectious and non-infectious models. Ren Replace Ther, 2017, 3, 16. ANGELIQUE G.A. WELTEN et al. In vitro and in vivo models for peritonitis demonstrate unchanged neutrophil migration after exposure to dialysis fluids, Nephrology Dialysis Transplantation, April 2004, Volume 19, Issue 4, Pages 831-839. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Foster A history of medical bacteriology and immunology
Snyder Further studies on Bacillus difficilis (Hall and O'Toole)
Sternberg A manual of bacteriology
RU2723745C1 (ru) Способ моделирования интраперитонеального стафилококкового инфекционного процесса
Millican et al. Gamma globulin factors protective against infections from Pseudomonas and other organisms
Wiley A new virulence test for Staphylococcus aureus and its application to encapsulated strains
Avery A Selective Medium for B. Influenzae: Oleate-hemoglobin Agar
RU2427925C1 (ru) Способ моделирования острого разлитого перитонита у крыс
Dixon et al. In vivo and in vitro studies with an atypical, rhinotropic isolate of Cryptococcus neoformans
MELENEY et al. ACTION OF ACRIFLAVINE ON THE BLOOD AND CERTAIN TISSUES OF RABBITS: WITH PARTICULAR REFERENCE TO HEMOLYTIC STREPTOCOCCUS SEPTICEMIA
RU2725136C1 (ru) Способ моделирования внутрибрюшного синегнойного инфекционного процесса
Benjamin Jr et al. Effects of in vitro growth phase on the pathogenesis of Salmonella typhimurium in mice
Eisler Coagulation of human plasma by Pasteurella pestis
Krag et al. Serious human infections due to bacilli of the Arizona group
Wyckoff Multiplication of the T3 Bacteriophage Against E. coli.
Clegg et al. The etiology of pemphigus contagiosus in the tropics
Alontseva et al. Screening of bacterial kidney disease in the North-West region of the Russian Federation
CN103690544A (zh) 头孢喹肟原料及其制剂在制备治疗禽抗菌药物中的应用
Martinez-Burnes et al. Pulmonary recruitment of neutrophils and bacterial clearance in mice inoculated with aerosols of Pasteurella haemolytica or Staphylococcus aureus.
Moberg René Dubos, a harbinger of microbial resistance to antibiotics
RU2650863C1 (ru) Сердечно-мозговая питательная среда для диагностики инфекции в кровотоке и способ ее получения
Shakhova et al. Modelling an experimental systemic pseudomonas infection process
CN216772651U (zh) 一种用于模拟静脉注射给药的体外装置
Morrey The fundamentals of bacteriology
Pulvertaft AN EXAMINATION OF THE PATHOLOGICAL EFFECTS OF STREPTOCOCCAL TOXIN AND HÆMOLYSIN ON RABBITS, WITH SPECIAL REFERENCE TO THE ÆTIOLOGY OF PURPURA FULMINANS.