RU2702656C1 - Средство, обладающее апоптозиндуцирующей активностью - Google Patents
Средство, обладающее апоптозиндуцирующей активностью Download PDFInfo
- Publication number
- RU2702656C1 RU2702656C1 RU2018126281A RU2018126281A RU2702656C1 RU 2702656 C1 RU2702656 C1 RU 2702656C1 RU 2018126281 A RU2018126281 A RU 2018126281A RU 2018126281 A RU2018126281 A RU 2018126281A RU 2702656 C1 RU2702656 C1 RU 2702656C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- apoptosis
- compound
- isonicotinic
- inducing activity
- adduct
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
- A61K31/341—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide not condensed with another ring, e.g. ranitidine, furosemide, bufetolol, muscarine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/4409—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof only substituted in position 4, e.g. isoniazid, iproniazid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D213/06—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring nitrogen atom
- C07D213/16—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring nitrogen atom containing only one pyridine ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D307/56—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D307/62—Three oxygen atoms, e.g. ascorbic acid
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к применению аддукта изоникотиновой и аскорбиновой кислот формулы CHNO·CHOв качестве средства, обладающего апоптозиндуцирующей активностью. Технический результат - выявлена новая активность аддукта изоникотиновой и аскорбиновой кислот, может найти свое применение в медицине в качестве индуктора апоптоза в медицинских и исследовательских целях, а также при работе с клеточными культурами. 1 табл., 1 ил., 3 пр.
Description
Изобретение относится к области фармакологии и медицинской химии, конкретно к комплексному соединению аскорбиновой и изоникотиновой кислот.
Ввиду особой биологической значимости апоптоза разработка препаратов, позволяющих направленно воздействовать на этот процесс, представляет большую важность для медицины и биологии. Индукторы апоптоза используются как в медицине в качестве лекарственных средств, обладающих апоптозиндуцирующей (противоопухолевой) активностью, так и в исследовательских целях при работе с клеточными культурами.
К настоящему времени известен ряд соединений, влияющих на апоптоз [1-4].
Недостатком данных средств является их низкая эффективность, высокая токсичность, сложный процесс получения.
Задачей заявленного изобретения является расширение арсенала высокоэффективных фармакологических апоптозиндуцирующих средств.
Поставленную задачу решают путем применения в качестве апоптозиндуцирующего средства аддукта аскорбиновой С6Н8О6 (H2Asc) и изоникотиновой C6H5NO2 (HIsonic) кислот.
Новым в предлагаемом изобретении является применение аддукта аскорбиновой C6H8O6 (H2Asc) и изоникотиновой C6H5NO2 (HIsonic) кислот в качестве апоптозиндуцирующего средства.
Производное пиридина - пиридин-4-карбоновая или изоникотиновая кислота проявляет антивитаминные свойства, ингибируют окислительно-восстановительные реакции, происходящие в дыхательной цепи.
Изоникотиновая кислота лежит в основе химиотерапевтических средств противотуберкулезного действия. Гидразид изоникотиновой кислоты, используемый для профилактики и лечения туберкулеза, обладает определенной биологической активностью, способной вызывать изменение показателей обмена веществ и структурно-функционального состояния органов и систем. Оротат гидразида изоникотиновой кислоты проявляет антимикобактериальную и иммунотропную активность [5].
Известно также, что цитотоксическое действие некоторых противоопухолевых средств усиливается in vitro и in vivo в присутствии аскорбиновой кислоты [6].
Факт применения комплексного соединения с достижением нового технического результата, заключающегося в апоптозиндуцирующем действии в отношении мононуклеарных клеток крови человека, не является очевидным для специалиста.
Новые свойства не вытекают явным образом из уровня техники в данной области.
В проанализированной патентной и научно-медицинской литературе описание апоптозиндуцирующего действия аддукта аскорбиновой С6Н8О6 (H2Asc) и изоникотиновой C6H5NO2 (HIsonic) кислот не обнаружено.
Предлагаемое изобретение может быть использовано в медицинских и исследовательских целях, а также при работе с клеточными культурами.
Исходя из вышеизложенного, следует считать заявляемое техническое решение соответствующим условиям патентоспособности: «Новизна», «Изобретательский уровень», «Промышленная применимость».
Изобретение будет понятно из следующего описания и приложенной к нему фигуре 1.
На фигуре 1. изображено количество мононуклеарных клеток в культуре крови. Белые столбики обозначают количество живых клеток, серые столбики - количество клеток в апоптозе, черные столбики - количество некротических клеток. По оси абсцисс: 1 - контроль, 2 - соединение (1) в концентрации 0,05 мкг/мл, 3 - соединение (1) в концентрации 0,1 мкг/мл, 4 -соединение (1) в концентрации 0,2 мкг/мл, 5 - соединение (1) в концентрации 0,3 мкг/мл. По оси ординат количество клеток, выраженное в процентах (%).
Синтез комплексного соединения изоникотиновой кислоты и аскорбиновой (1) осуществляют в этаноле при комнатной температуре и мольном соотношении исходных компонентов 1:2 (Hisonic: H2Asc). Выделенный осадок аддукта промывают этанолом и сушат на воздухе, состав получаемого соединения соответствует формуле C6H5NO2⋅C6H8O6, выход около 65%. Полученное соединение идентифицируют методами элементного анализа, ИК-спектроскопии (отнесение полос сделано на основании совпадения экспериментальных спектров и спектров, рассчитанных методом DFT (B3LYP 6-311+G(d,p)), ЭСП (электронный спектр поглощения в УФ-области), STA (синхронный термический анализ). Контроль состава синтезированных продуктов осуществляют определением содержания аскорбиновой кислоты в аддукте перманганатометрическим методом (эмпирический титр рабочего раствора KMnO4 устанавливают по аскорбиновой кислоте в 2 N растворе H2SO4; точность определения ± 1,5%).
Токсичность соединения (1) в остром опыте определена на 24 мышах линии BALB/c при однократном введении водного раствора соединения в желудок широком спектре доз (от 5000 до 10000 мг/кг веса). Наблюдения велись в течение 14 суток. При этом не обнаружено видимых признаков интоксикации и гибели подопытных животных. Согласно ГОСТ 12.1.007-76 соединение (1) при введении в желудок является малотоксичным соединением
Апоптозиндуцирующая активность соединения (1) определялась флуоресцентным методом. Метод заключается в определении фосфатидилсерина на поверхности клетки при связывании с меченным аннексином V, который обладает высоким сродством к фосфатидилсерину [7].
В качестве референтных препаратов для оценки апоптозиндуцирующей активности использовали изоникотиновую и аскорбиновую кислоту по схеме, аналогичной соединению (1).
Пример 1. Способ получения заявляемого соединения
К сухой смеси 0,307 г изоникотиновой и 0,880 г аскорбиновой кислот добавляют 20 мл этанола. При постоянном перемешивании по мере испарения растворителя, реакционная смесь приобретает желтую окраску и загустевает, после чего ее переносят на бумажный фильтр, промывают небольшими порциями этанола, затем осадок аддукта сушат на воздухе. Выход продукта 65%, содержание аскорбиновой кислоты в его составе 59,70% против 58,86% (теор.), рассчитанных для C6H5NO2⋅С6Н8О6, tпл. 186,9°С (с разл.).
Для соединения C6H5NO2⋅C6H8O6:
найдено, %: С 47,3; Н 4,4; N 5,3.
вычислено, %: С 48,12; Н 4,34; N 4,68.
ИК спектр (эксп.), ν, см-1: 563 (δ.С(2)O-Н и С(4)-СООН); 694, 759, 773 (δ. лактонового и пиридинового колец); 862 (δ. С(4)-СООН); 1035, 1121, 1158, 1247 (γ. аскорбиновой и никотиновой кислот); 1388, 1446 (δ.С(2)O-Н и ОСО-Н); 1626, 1663, 1734 (v.C=O, C=C); 3306, 3406 (v.O-H).
ИК спектр (расчет.), ν, см-1: 569 (δ.С(2)O-Н и С(4)-СООН); 691, 759, 773 (δ. лактонового и пиридинового колец); 870 (δ. С(4)-СООН); 1041, 1139, 1155, 1237 (γ. аскорбиновой и никотиновой кислот); 1375, 1449 (δ.С(2)O-Н и ОСО-Н); 1723, 1750, 1806 (v.C=O, C=C); 3341, 3439 (v.O-H).
УФ-спектр Hisonic (тв.): λmax 236, 284, 295.
УФ-спектр H2Asc (тв.): λmax 243, 256, 265.
УФ-спектр аддукта Hisonic H2Asc (тв.): λmax 240, 242, 245, 258, 277, 308, 333.
Пример 2. Изучение острой токсичности соединения (1) Острую токсичность соединения (1) исследовали на беспородных белых мышах с массой 19,0±2,0 г. Группе животных однократно в желудок через зонд вводили соединение (1) в дозах 5000, 7500 и 10000 мг/кг. Контрольные животные получали дистиллированную воду. Наблюдения за животными вели в течение двух недель. Отсутствие гибели животных свидетельствует о низкой токсичности соединения (1) в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76. Дозы, вызывающие 50% гибель мышей, для изоникотиновой кислоты и аскорбиновой кислоты больше 5000 мг/кг, малотоксичные соединения (4-й класс опасности).
Пример 3. Изучение апоптозиндуцирующей активности
Апоптозиндуцирующая активность соединения (1) определялась флуоресцентным методом [7].
Мононуклеары периферической крови здоровых доноров, выделенные на градиенте фиколла, суспендируют в среде RPMI 1640 в концентрации 4⋅104 клеток/мл. Раствор аддукта аскорбиновой и изоникотиновой кислот (точная навеска 50 мг, растворенная в 10 мл дистиллированной воды) добавляют в культуру мононуклеарных клеток крови из расчета на требуемую конечную концентрацию аддукта - 0,05 мкг/мл, 0,1 мкг/мл, 0,2 мкг/мл, 0,3 мкг/мл. Указанные дозы были определены в предварительных экспериментах в качестве наиболее эффективных. Далее культуру клеток с исследуемым соединением инкубируют в течение 24 часов при 37°С в среде 5% углекислого газа. Уровень апоптоза фиксируют на проточном цитометре по степени включения меченого красителя апоптотическими клетками.
Результаты определения сравнения уровня апоптоза представлены в табл.1 в процентах апоптотических клеток после 24 часов инкубации лимфоцитов с заявленной композицией и референтными веществами. Для сравнения выбрана минимальная доза, с которой проявлялась выраженная апоптозиндуцирующая активность соединения (1).
Источники информации:
1. Патент RU 2296578.
2. Патент RU 2441873.
3. Патент RU 2456001.
4. Патент RU 2630303.
5. Патент RU 2044728.
6. Результаты фазы клинических испытаний каталитической системы «терафтал + аскорбиновая кислота». / Л.В. Манзюк [и др.] // Российский биотерапевтический журнал. 2005. №1. Т. 4. С. 105-107.
7. Kaplan, A. Cytotoxic, anti-proliferative and apoptotic effects of silver nitrate against H-ras transformed 5RP7. / A. Kaplan, G. Akalin Ciftci, H.M. Kutlu // Cytotechnology. 2016. Volume 68(5):1727-1735.
Claims (3)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018126281A RU2702656C1 (ru) | 2018-07-16 | 2018-07-16 | Средство, обладающее апоптозиндуцирующей активностью |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018126281A RU2702656C1 (ru) | 2018-07-16 | 2018-07-16 | Средство, обладающее апоптозиндуцирующей активностью |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2702656C1 true RU2702656C1 (ru) | 2019-10-09 |
Family
ID=68170742
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018126281A RU2702656C1 (ru) | 2018-07-16 | 2018-07-16 | Средство, обладающее апоптозиндуцирующей активностью |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2702656C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2752829C1 (ru) * | 2020-11-02 | 2021-08-09 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Национальный исследовательский Томский политехнический университет» | Способ получения трилитиевой соли фосфо-аскорбиновой кислоты |
RU2763884C1 (ru) * | 2021-04-28 | 2022-01-11 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Национальный исследовательский Томский политехнический университет» | Средство, обладающее радиосенсибилизирующим действием |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2044728C1 (ru) * | 1990-08-21 | 1995-09-27 | Научно-исследовательская лаборатория иммунохимиотерапии лепры с опытно-экспериментальным производством иммуномодуляторов и клиниками ИДС | Оротат гидразида изоникотиновой кислоты, обладающий антимикобактериальной и иммунотропной активностью |
RU2533423C1 (ru) * | 2013-05-14 | 2014-11-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Башкирский государственный университет" | Препарат, обладающий антитоксической активностью и содержащий комплексное соединение производного метилурацила с органической кислотой, и способ его получения |
RU2612517C1 (ru) * | 2016-04-12 | 2017-03-09 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека" | Комплексное соединение 5-гидрокси-6-метилурацила с аскорбиновой кислотой, проявляющее антигипоксическую активность, и способ его получения |
-
2018
- 2018-07-16 RU RU2018126281A patent/RU2702656C1/ru active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2044728C1 (ru) * | 1990-08-21 | 1995-09-27 | Научно-исследовательская лаборатория иммунохимиотерапии лепры с опытно-экспериментальным производством иммуномодуляторов и клиниками ИДС | Оротат гидразида изоникотиновой кислоты, обладающий антимикобактериальной и иммунотропной активностью |
RU2533423C1 (ru) * | 2013-05-14 | 2014-11-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Башкирский государственный университет" | Препарат, обладающий антитоксической активностью и содержащий комплексное соединение производного метилурацила с органической кислотой, и способ его получения |
RU2612517C1 (ru) * | 2016-04-12 | 2017-03-09 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека" | Комплексное соединение 5-гидрокси-6-метилурацила с аскорбиновой кислотой, проявляющее антигипоксическую активность, и способ его получения |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
PARTHA PRATIM BAG ET AL, CrystEngComm, 13, 2011, pp. 5650-5652. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2752829C1 (ru) * | 2020-11-02 | 2021-08-09 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Национальный исследовательский Томский политехнический университет» | Способ получения трилитиевой соли фосфо-аскорбиновой кислоты |
RU2763884C1 (ru) * | 2021-04-28 | 2022-01-11 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Национальный исследовательский Томский политехнический университет» | Средство, обладающее радиосенсибилизирующим действием |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Fedorov et al. | The anticancer effects of actinoporin RTX-A from the sea anemone Heteractis crispa (= Radianthus macrodactylus) | |
Paschke et al. | Cholic acid–carboplatin compounds (CarboChAPt) as models for specific drug delivery: synthesis of novel carboplatin analogous derivatives and comparison of the cytotoxic properties with corresponding cisplatin compounds | |
Kaplánek et al. | Caffeine–hydrazones as anticancer agents with pronounced selectivity toward T-lymphoblastic leukaemia cells | |
Ćoćić et al. | New dinuclear palladium (II) complexes: Studies of the nucleophilic substitution reactions, DNA/BSA interactions and cytotoxic activity | |
RU2702656C1 (ru) | Средство, обладающее апоптозиндуцирующей активностью | |
Popova et al. | Properties of a flavonol-based photoCORM in aqueous buffered solutions: influence of metal ions, surfactants and proteins on visible light-induced CO release | |
Todorović et al. | (Chalcogen) semicarbazones and their cobalt complexes differentiate HL-60 myeloid leukaemia cells and are cytotoxic towards tumor cell lines | |
Denieva et al. | Synthesis of amphiphilic peptidomimetics based on the aliphatic derivatives of natural amino acids | |
Liu et al. | Triphenyltin (IV) acylhydrazone compounds: Synthesis, structure and bioactivity | |
Abakumova et al. | Anticancer activity of oxovanadium compounds | |
Lv et al. | Unlocking the potential of iridium and ruthenium arene complexes as anti-tumor and anti-metastasis chemotherapeutic agents | |
Lu et al. | Effects of Cr (VI) exposure on electrocardiogram, myocardial enzyme parameters, inflammatory factors, oxidative kinase, and ATPase of the heart in Chinese rural dogs | |
Kharbanda et al. | Novel benzothiazole based sulfonylureas/sulfonylthioureas: design, synthesis and evaluation of their antidiabetic potential | |
Gao et al. | Synthesis, crystal structure, DNA binding, and cytotoxicity of a Zn (II) complex constructed from phenylacetic acid | |
Buravlev et al. | Synthesis and membrane-protective activity of 4-aminomethyl derivatives of 2, 6-diisobornylphenol | |
WO2014023063A1 (zh) | 一种高效端粒酶抑制剂及其在抗肿瘤药物中的应用 | |
Knyazev et al. | Synthesis and antioxidant and cytotoxic activity of new dihydroquercetin derivatives | |
Dannen et al. | New in vitro highly cytotoxic platinum and palladium cyanoximates with minimal side effects in vivo | |
Sutradhar et al. | A new Cu (II)-O-Carvacrotinate complex: Synthesis, characterization and biological activity | |
Alqaraghuli et al. | Synthesis, Characterization, Theoretical Study, Antioxidant Activity and in Vitro Cytotoxicity Study of Novel Formazan Derivatives Toward MCF-7 Cells | |
RU2418580C1 (ru) | Цинксодержащий антидот отравления этанолом и способ лечения с его использованием | |
CN112679409B (zh) | 一种4-吲哚-取代硫半脲衍生物及其制备方法和应用 | |
RU2709498C1 (ru) | Апоптозиндуцирующие средства и способ их получения | |
Gupta et al. | Visible and NIR light photoactivatable o-hydroxycinnamate system for efficient drug release with fluorescence monitoring | |
RU2476424C1 (ru) | N-(3-хлор-4-пропилоксифенил)-3,5-дихлорсалициламид, обладающий антигельминтной активностью |